， 文火煎煮2小時(shí)，過(guò)濾得第二次提取液和第二次藥渣;最后，往第二次藥渣中加入4倍量的蒸 饋水，武火煮沸，文火煎煮1小時(shí)，過(guò)濾得第Ξ次提取液和第Ξ次藥渣，將第Ξ次藥渣丟棄； 合并Ξ次提取液，過(guò)濾得濾液，將所得濾液濃縮成60°C下相對(duì)密度為1.16的稠膏，即為蒲公 英有效成分，備用；
[0033] (2)將白巧洗凈，浸入4倍量的體積濃度為80 %的乙醇溶液浸泡1小時(shí)，加熱提取3 小時(shí)，回收乙醇，過(guò)濾得濾液，將所得濾液濃縮為65°C下相對(duì)密度為1.14的稠膏，即為白巧 有效成分，備用；
[0034] (3)將香祿洗凈，浸入6倍量的體積濃度為75%的乙醇溶液中，浸泡1小時(shí)后，粉碎 提取3次，lOmin/次，提取后的藥渣再用8倍量的熱水粉碎提取3次，lOmin/次，兩次提取物合 并得到香祿提取液；
[0035] (4)將步驟(1)制得的蒲公英有效成分、步驟(2)制得的白巧有效成分W及步驟(3) 制得的香祿提取液混合，然后在真空度0.06化下減壓濃縮至50°C時(shí)相對(duì)密度為1.10的膏 體，經(jīng)進(jìn)風(fēng)溫度為165°C、出風(fēng)溫度為82°C的噴霧干燥劑噴霧干燥成粉狀，最后按照常規(guī)制 劑工藝制成顆粒劑，即得所述的治療黑色素瘤的中藥制劑。
[0036] 實(shí)施例3
[0037] 本發(fā)明實(shí)施例中，一種治療黑色素瘤的中藥制劑，由W下質(zhì)量份的原料制成:蒲公 英14份、白巧12份、香祿5份。
[0038] 所述的治療黑色素瘤的中藥制劑的制備方法，包括W下步驟：
[0039] (1)將蒲公英洗凈，加入10倍量的蒸饋水，浸泡2小時(shí)后，武火煮沸，文火煎煮4小 時(shí)，過(guò)濾得第一次提取液和第一次藥渣;往第一次藥渣中再次加入8倍量的蒸饋水，武火煮 沸，文火煎煮3小時(shí)，過(guò)濾得第二次提取液和第二次藥渣;最后，往第二次藥渣中加入6倍量 的蒸饋水，武火煮沸，文火煎煮2小時(shí)，過(guò)濾得第Ξ次提取液和第Ξ次藥渣，將第Ξ次藥渣丟 棄;合并Ξ次提取液，過(guò)濾得濾液，將所得濾液濃縮成60°C下相對(duì)密度為1.15的稠膏，即為 蒲公英有效成分，備用；
[0040] (2)將白巧洗凈，浸入5倍量的體積濃度為75%的乙醇溶液浸泡2小時(shí)，加熱提取3 小時(shí)，回收乙醇，過(guò)濾得濾液，將所得濾液濃縮為65°C下相對(duì)密度為1.12的稠膏，即為白巧 有效成分，備用；
[0041] (3)將香祿洗凈，浸入8倍量的體積濃度為65%的乙醇溶液中，浸泡2小時(shí)后，粉碎 提取3次，lOmin/次，提取后的藥渣再用10倍量的熱水粉碎提取3次，lOmin/次，兩次提取物 合并得到香祿提取液；
[0042] (4)將步驟(1)制得的蒲公英有效成分、步驟(2)制得的白巧有效成分W及步驟(3) 制得的香祿提取液混合，然后在真空度0.08M化下減壓濃縮至50°C時(shí)相對(duì)密度為1.08的膏 體，經(jīng)進(jìn)風(fēng)溫度為172°C、出風(fēng)溫度為83°C的噴霧干燥劑噴霧干燥成粉狀，最后按照常規(guī)制 劑工藝制成顆粒劑，即得所述的治療黑色素瘤的中藥制劑。
[0043] 實(shí)施例4
[0044] 本發(fā)明實(shí)施例中，一種治療黑色素瘤的中藥制劑，由W下質(zhì)量份的原料制成:蒲公 英17份、白巧9份、香祿7份。
[004引所述的治療黑色素瘤的中藥制劑的制備方法，包括W下步驟：
[0046] (1)將蒲公英洗凈，加入10倍量的蒸饋水，浸泡2小時(shí)后，武火煮沸，文火煎煮4小 時(shí)，過(guò)濾得第一次提取液和第一次藥渣;往第一次藥渣中再次加入8倍量的蒸饋水，武火煮 沸，文火煎煮3小時(shí)，過(guò)濾得第二次提取液和第二次藥渣;最后，往第二次藥渣中加入6倍量 的蒸饋水，武火煮沸，文火煎煮2小時(shí)，過(guò)濾得第Ξ次提取液和第Ξ次藥渣，將第Ξ次藥渣丟 棄;合并Ξ次提取液，過(guò)濾得濾液，將所得濾液濃縮成60°C下相對(duì)密度為1.15的稠膏，即為 蒲公英有效成分，備用；
[0047] (2)將白巧洗凈，浸入5倍量的體積濃度為75%的乙醇溶液浸泡2小時(shí)，加熱提取3 小時(shí)，回收乙醇，過(guò)濾得濾液，將所得濾液濃縮為65°C下相對(duì)密度為1.12的稠膏，即為白巧 有效成分，備用；
[0048] (3)將香祿洗凈，浸入8倍量的體積濃度為65%的乙醇溶液中，浸泡2小時(shí)后，粉碎 提取3次，lOmin/次，提取后的藥渣再用10倍量的熱水粉碎提取3次，lOmin/次，兩次提取物 合并得到香祿提取液；
[0049] (4)將步驟(1)制得的蒲公英有效成分、步驟(2)制得的白巧有效成分W及步驟(3) 制得的香祿提取液混合，然后在真空度0.08M化下減壓濃縮至50°C時(shí)相對(duì)密度為1.08的膏 體，經(jīng)進(jìn)風(fēng)溫度為172°C、出風(fēng)溫度為83°C的噴霧干燥劑噴霧干燥成粉狀，最后按照常規(guī)制 劑工藝制成顆粒劑，即得所述的治療黑色素瘤的中藥制劑。
[0050] 實(shí)施例5
[0051] 本發(fā)明實(shí)施例中，一種治療黑色素瘤的中藥制劑，由W下質(zhì)量份的原料制成:蒲公 英16份、白巧10份、香祿6份。
[0052] 所述的治療黑色素瘤的中藥制劑的制備方法，包括W下步驟：
[0053] (1)將蒲公英洗凈，加入10倍量的蒸饋水，浸泡3小時(shí)后，武火煮沸，文火煎煮4小 時(shí)，過(guò)濾得第一次提取液和第一次藥渣;往第一次藥渣中再次加入8倍量的蒸饋水，武火煮 沸，文火煎煮3小時(shí)，過(guò)濾得第二次提取液和第二次藥渣;最后，往第二次藥渣中加入6倍量 的蒸饋水，武火煮沸，文火煎煮2小時(shí)，過(guò)濾得第Ξ次提取液和第Ξ次藥渣，將第Ξ次藥渣丟 棄;合并Ξ次提取液，過(guò)濾得濾液，將所得濾液濃縮成60°C下相對(duì)密度為1.16的稠膏，即為 蒲公英有效成分，備用；
[0054] (2)將白巧洗凈，浸入5倍量的體積濃度為75%的乙醇溶液浸泡2小時(shí)，加熱提取3 小時(shí)，回收乙醇，過(guò)濾得濾液，將所得濾液濃縮為65°C下相對(duì)密度為1.14的稠膏，即為白巧 有效成分，備用；
[0055] (3)將香祿洗凈，浸入8倍量的體積濃度為65%的乙醇溶液中，浸泡2小時(shí)后，粉碎 提取3次，lOmin/次，提取后的藥渣再用10倍量的熱水粉碎提取3次，lOmin/次，兩次提取物 合并得到香祿提取液；
[0056] (4)將步驟(1)制得的蒲公英有效成分、步驟(2)制得的白巧有效成分W及步驟(3) 制得的香祿提取液混合，然后在真空度0.06M化下減壓濃縮至50°C時(shí)相對(duì)密度為1.10的膏 體，經(jīng)進(jìn)風(fēng)溫度為172°C、出風(fēng)溫度為82°C的噴霧干燥劑噴霧干燥成粉狀，最后按照常規(guī)制 劑工藝制成顆粒劑，即得所述的治療黑色素瘤的中藥制劑。
[0057] 對(duì)比例1
[0058] -種治療黑色素瘤的中藥制劑，僅含有蒲公英和白巧，其余與實(shí)施例5完全相同。
[0059] 對(duì)比例2
[0060] -種治療黑色素瘤的中藥制劑，僅含有香祿，其余與實(shí)施例5完全相同。
[0061 ]本發(fā)明中藥制劑的動(dòng)物急性毒性試驗(yàn)
[0062] 對(duì)本發(fā)明中藥制劑進(jìn)行動(dòng)物急性毒性試驗(yàn)，取小鼠和大鼠各140只，分為屯組，分 另Ij 口服給予相當(dāng)于20g生藥量的實(shí)施例1~5、對(duì)比例1~2制備的中藥制劑/kg(該劑量為人 服用劑量的20倍W上），每天一次，持續(xù)服用一周。給藥后觀察兩周，沒(méi)有小鼠和大鼠死亡， 說(shuō)明本發(fā)明中藥制劑的毒性甚微。
[0063] W下為本發(fā)明中藥制劑治療黑色素瘤的臨床研究資料
[0064] 本發(fā)明中藥制劑對(duì)黑色素瘤細(xì)胞株的抑制作用 [006引1、細(xì)胞株的選?。?br>[0066] 小鼠黑色素瘤細(xì)胞株(B16)，購(gòu)自中國(guó)科學(xué)院上海細(xì)胞庫(kù)。
[0067] 人黑色素瘤細(xì)胞株(A375、A875和SK-MEk2)購(gòu)自ATCC。
[006引上述細(xì)胞株用含有10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基在37°C、0)2體積分?jǐn)?shù)為5%、完全 飽和濕度條件下常規(guī)培養(yǎng)，每48小時(shí)更換一次培養(yǎng)基，細(xì)胞生長(zhǎng)達(dá)飽合狀態(tài)時(shí)，用0.25 %膜 蛋白酶+0.02%邸TA消化傳代，2~3天傳代1次，實(shí)驗(yàn)選用