用于b型腺病毒的給藥方案及制劑的制作方法
【專利說明】用于B型腺病毒的給藥方案及制劑
[0001] 本公開設(shè)及例如使用有復(fù)制能力的溶瘤腺病毒治療患者的方法，所述方法采用設(shè) 計(jì)為使該病毒具有適當(dāng)?shù)闹委熥饔煤?或使體內(nèi)不良事件最小化的給藥方案。本公開還 延伸至本文所述的制劑，制備該制劑的方法，化及該制劑在治療中、特別是癌癥治療中的用 途。
[000引背景
[0003] 癌癥是世界范圍內(nèi)的死亡及嚴(yán)重疾病的主要原因。存在超過200種不同類型的癌 癥，并且治療類型取決于癌癥類型。通常，治療會設(shè)及外科手術(shù)、化學(xué)療法和/或放射療法。 運(yùn)些治療通常是不成功的，或僅是部分成功的，并且具有顯著的副作用。癌癥的5年存活率 根據(jù)癌癥類型可為低于5%至超過95%(CRUKstatistics, 2000-2001)。例如，在2005年至 2009年期間，在英國，患有結(jié)腸直腸癌的患者，其在英國男性和女性的所有癌癥中占13%， 具有約55%的5年存活率。對于患有轉(zhuǎn)移性結(jié)腸直腸癌的患者而言運(yùn)降低至僅為12%。
[0004] 轉(zhuǎn)移性癌癥的管理主要是姑息性的，并且設(shè)及姑息性外科手術(shù)、化學(xué)療法、放射和 支持性護(hù)理的組合。諸如總體存活、反應(yīng)和毒性的臨床結(jié)果是重要的，但諸如無進(jìn)展存活、 生活品質(zhì)、便利性、可接受性和患者選擇的其他結(jié)果也是重要的。顯然需要新的療法來改善 運(yùn)些結(jié)果。
[0005] 在轉(zhuǎn)化期間，癌細(xì)胞獲得某些突變，所述突變使癌細(xì)胞變得更加允許被病毒感染。 癌細(xì)胞還誘導(dǎo)宿主抗腫瘤活性的抑制。腫瘤細(xì)胞和局部微環(huán)境之內(nèi)的改變產(chǎn)生了潛在易損 性并使腫瘤暴露于病毒的感染化iu等人2007 ;Liu等人2008 ;Robeds，2006)。
[0006] 存在使用病毒來治療癌癥的悠久歷史，起始于在自然病毒感染或病毒疫苗接種之 后暫時(shí)性癌癥緩解的鐵事報(bào)道。最早的報(bào)道似乎是1912年記述的針對狂犬病而接種疫苗 的患者中宮頸癌的消退。類似的結(jié)果見于接受天花疫苗接種的癌癥患者中，或在諸如流行 性腮腺炎或麻疹的自然病毒感染之后的癌癥患者中。基于運(yùn)些報(bào)道W及動物數(shù)據(jù)，在20世 紀(jì)40年代晚期及20世紀(jì)50年代早期開始將活病毒接種入患者之中W用于癌癥治療。
[0007] 然而，慣常經(jīng)驗(yàn)是在偶然暫時(shí)性腫瘤消退之后，腫瘤再生長并且患者死亡。運(yùn) 些接種極少產(chǎn)生長效的完全緩解。在1957年，開發(fā)出口服脊髓灰質(zhì)炎活疫苗的AAed B.S油in,Μ.化評論到"最令人失望的方面是運(yùn)樣的事實(shí)，即，即使在病毒是溶瘤的且其在腫 瘤中打孔時(shí)，個(gè)體對病毒的免疫反應(yīng)出現(xiàn)得如此之快，使得效果被迅速消除且腫瘤繼續(xù)生 長"。
[0008] 此時(shí)，已經(jīng)確認(rèn)大量的溶瘤病毒，但迄今被批準(zhǔn)在世界任何地方用于臨床用途的 唯一的病毒是安科瑞的ncorine化101))，即，能夠使Ρ53-缺陷性癌細(xì)胞條件性復(fù)制的通過 E1B-55邸缺失而修飾的C亞群腺病毒化101是0NYX015的密切類似物，如Bischoff等人 1996所述）。對于頭頸癌，安科瑞通過腫瘤內(nèi)注射而給藥。
[0009]Talimogene1 址e巧arepvec(Tvec)是基于攜帶ICP：M. 5&ICP47 缺失的 1 型單純瘤 疹病毒的溶瘤病毒，其表達(dá)作為立早基因的US11并編碼GM-CSF。OPTiM試驗(yàn)是多國家、非 盲、隨機(jī)研究，其被設(shè)計(jì)為評價(jià)在患有不可切除的III期化-C)和IV期（Mla-c)疾病的患 者中使用talimogene1址e巧ar巧vec的治療（作為腫瘤內(nèi)治療）與皮下給予的GM-CSF相 比的功效和安全性。根據(jù)期中分析，talimogene1址e巧ar巧vec引發(fā)16%的患者的持久反 應(yīng)率，與之相比，在接受GM-CSF的患者中為2 %。
[0010] 目前正在開發(fā)的用于腫瘤內(nèi)給藥的其他溶瘤病毒包括（Sheridan2013):
[0011] ·Reolysin，3血清型溶瘤呼腸孤病毒值earing病毒種）
[0012] ·PV701，溶瘤新城病病毒
[001引 ·CG0070,編碼GM-CSF的條件性復(fù)制腺病毒
[0014].Pexastimogenedevacir巧vec任exa-Vec,JX-594)，編碼GM-CSF的刪除胸巧激酶 的牛痘病毒
[0015] ?化vatak，未修飾的柯薩基病毒A21
[0016]·S巧rehviHHSV1716)，攜帶ICP34. 5缺失的條件性復(fù)制1型單純瘤疹病毒
[0017] ·DNX-2401，編碼結(jié)合整合素的膚的條件性復(fù)制腺病毒
[0018] ·CGTG-102,編碼GM-CSF的條件性復(fù)制腺病毒
[0019]ColoAdl是嵌合（Adll/Ad3)B血清群腺病毒，其使用定向進(jìn)化的方法而開發(fā)，并被 認(rèn)為適于治療上皮來源的癌癥及其轉(zhuǎn)移形式，包括結(jié)腸直腸癌（K址η,I等人.2008)。
[0020] 迄今為止，溶瘤病毒的臨床研究已主要研究病毒的腫瘤內(nèi)注射。在 A曲i&Martuza(2005)的臨床研究的綜述中，36次研究中25次研究采用腫瘤內(nèi)注射來給予 病毒。然而，該方法僅對治療易及的腫瘤實(shí)用，并且僅在其中腫瘤的結(jié)構(gòu)如組織基質(zhì)及其中 的壞死區(qū)域不限制病毒在腫瘤內(nèi)傳播巧ies&Korn2002)的患者中實(shí)用。
[0021] 源于癌癥的死亡通常歸因于不可及的腫瘤或轉(zhuǎn)移瘤。腫瘤內(nèi)給予的溶瘤病毒依賴 于從腫瘤的全身散播，從而達(dá)到運(yùn)些繼發(fā)性腫瘤。然而，散播已證實(shí)是短暫的，并且常常是 無效的（Ferguson等人2012)。
[0022] 因此，腫瘤內(nèi)注射僅適用于有限數(shù)量的腫瘤，并且不適于治療例如諸多轉(zhuǎn)移性腫 瘤。
[0023] 在已經(jīng)普遍采用溶瘤病毒的靜脈內(nèi)給藥的情況下，其已經(jīng)與急性毒性和迅速清除 相關(guān)。例如，對于C群腺病毒Ad5,其攝取由普遍存在的柯薩奇-腺病毒受體（CAR)介導(dǎo)，已 經(jīng)常報(bào)道包括急性肝毒性、流感樣疾病和血液學(xué)變化在內(nèi)的副作用，同時(shí)還充分描述了迅 速肝清除和免疫學(xué)中和。
[0024]目前確立的觀點(diǎn)是需要重復(fù)給藥W產(chǎn)生并維持功效。在正在研究的所有溶瘤癌癥 治療中，通常假設(shè)該治療會是長期的，并且歷時(shí)數(shù)周、數(shù)月或數(shù)年來重復(fù)給藥。例如，對于 PV701，至少一個(gè)患者中的治療在約10個(gè)月內(nèi)持續(xù)數(shù)個(gè)周期，并且在完成前一治療周期與 開始下一治療周期之間有6天。
[0025] 化umanatis等人（2001)報(bào)道向癌癥患者給予0NYX-015靜脈內(nèi)輸注的至多24次 每周周期。在正在進(jìn)行的ΠΙ期臨床研究（Clinicaltrials.govidentifierNCT01708993) 中，民eolysin? (溶瘤病毒呼腸孤病毒）在第1至3天歷時(shí)1小時(shí)來輸注，然后每3周歷時(shí)1 小時(shí)來輸注，直至進(jìn)展為止。在最近報(bào)道的I期臨床試驗(yàn)（Clinicaltrials.govidentifier NCT01380600)中，在四個(gè)時(shí)機(jī)每2周靜脈內(nèi)給予JX-594,并且在第二次正在進(jìn)行的I/II期 臨床試驗(yàn)（Clinicaltrials.govidentifierNCT01394939)中，每周靜脈內(nèi)給予JX-594,持 續(xù)5周，然后向患有轉(zhuǎn)移性結(jié)腸直腸癌的患者的肝轉(zhuǎn)移瘤進(jìn)行至多3次腫瘤內(nèi)加強(qiáng)。在正 在進(jìn)行的0PTIM臨床試驗(yàn)中，每兩周腫瘤內(nèi)給予talimogene1址e巧ar巧vec，至多18個(gè)月 化linicaltrials.govidentifierNCT00769704)。
[002引發(fā)明概述
[0027] 本公開的第一方面，提供了治療人類患者的方法，所述方法包括步驟：
[0028] 在單次治療周期中全身給予多劑量的有復(fù)制能力的B亞群溶瘤腺病毒的胃腸外 制劑，
[0029] 其中在每次給藥中給予的總劑量為1X1〇1°至1X10Μ個(gè)病毒顆粒/劑量，W及
[0030] 其中給予每一劑量的病毒，W使病毒顆粒遞送速率為2Χ1〇1°個(gè)顆粒/分鐘至 2Χ1〇ι2個(gè)顆粒/分鐘。
[0031] 在獨(dú)立的方面，本公開設(shè)及用于治療卵巢癌的ColoAdl，例如采用本文所述的給藥 方案例如向患有卵巢癌的患者給予治療有效量的ColoAdl。
[0032] 其他獨(dú)立的方面，本公開設(shè)及包括B型溶瘤腺病毒例如ColoAdl和不干擾該腺病 毒活性例如病毒體內(nèi)復(fù)制的化學(xué)治療劑的聯(lián)合療法。
[0033] 在一實(shí)施方案中，所述聯(lián)合療法用于治療癌癥，尤其是本文所述的癌癥，尤其是結(jié) 腸直腸癌或卵巢癌，包括其轉(zhuǎn)移形式在內(nèi)。
[0034] 在一實(shí)施方案中，聯(lián)合療法中的ColoAdl根據(jù)本文所述的方案給藥。
[0035] 還提供了用于在本文所述的治療中的有復(fù)制能力的B亞群溶瘤腺病毒的胃腸外 制劑。
[0036] 本公開還延伸至有復(fù)制能力的B亞群溶瘤腺病毒的胃腸外制劑在制造本文所述 的藥物中的用途W(wǎng)及在本文所述的治療中的用途。
[0037] -方面，還提供了有復(fù)制能力的B亞群溶瘤腺病毒的IX1〇1°至IX10Μ個(gè)，例如 6Χ1〇12個(gè)病毒顆粒的單位劑量。
[003引還提供了用于給予病毒顆粒的2Χ109至2X10I2個(gè)病毒顆粒（VP)/分鐘，例如 1. 5Χ1011個(gè)VP/分鐘的輸注速率或注射速率。
[0039] 附圖簡要說明
[0040] 圖1示出在新鮮的全人血的存在下對ColoAdl的Α549細(xì)胞的細(xì)胞毒性譜。
[0041] 圖2注射后24小時(shí)在正常Ba化C小鼠中ColoAdl的lei1(1X10")個(gè)顆粒的生物 分布。
[0042] 圖3注射后1小時(shí)和72小時(shí)在CD46轉(zhuǎn)基因小鼠中ColoAdl和ColoAdlCJ132的 生物分布。
[0043] 圖4在隨后的65天，ColoAdl從表達(dá)CD46的小鼠中的主要器官肝臟、脾臟和肺的 清除動力學(xué)。
[0044] 圖5在使用或不使用中和血清的共給予的情況下ColoAdl在小鼠中的動力學(xué)。
[0045] 圖6在CD-1小鼠的臨床前毒理學(xué)研究中于第一劑量及隨后的相等治療劑量之后 的細(xì)胞因子水平。
[0046] 圖7A-C在ColoAdl的靜脈內(nèi)給藥之后于患有轉(zhuǎn)移性實(shí)體上皮腫瘤的人類癌癥患 者中隨時(shí)間的細(xì)胞因子水平（ng/L) (TNF(A)、γ干擾素度）和IL6(C))。
[0047] 圖8A在患有轉(zhuǎn)移性實(shí)體上皮腫瘤的人類癌癥患者中ColoAdl(基因組拷貝/mL血 液）的全身藥代動力學(xué)。
[0048] 圖8B在患有轉(zhuǎn)移性實(shí)體上皮腫瘤的人類癌癥患者中ColoAdl(基因組拷貝血 液）的全身藥代動力學(xué)。
[0049] 圖9A歷時(shí)5分鐘的給予lelO(lXl〇i°)個(gè)ColoAdl病毒顆粒的人類癌癥患者中 ColoAdl(基因組拷貝血液）的全身藥代動力學(xué)。
[0050] 圖9B歷時(shí)5分鐘的給予lell(IX1〇11)個(gè)ColoAdl病毒顆粒的人類癌癥患者中 ColoAdl(基因組拷貝血液）的全身藥代動力學(xué)。
[0051] 圖9C歷時(shí)5分鐘的給予lel2(lXl〇i2)個(gè)ColoAdl病毒顆粒的人類癌癥患者中 ColoAdl(基因組拷貝血液）的全身藥代動力學(xué)。
[0052] 圖9D歷時(shí)5分鐘的給予lel3(IX10")個(gè)ColoAdl病毒顆粒的人類癌癥患者中 ColoAdl(基因組拷貝血液）的全身藥代動力學(xué)。
[0053] 圖犯歷時(shí)5分鐘的給予3el2 (3Xl〇i2)個(gè)ColoAdl病毒顆粒的人類癌癥患者中 ColoAdl(基因組拷貝血液）的全身藥代動力學(xué)。
[0054] 圖9F歷時(shí)20分鐘的給予3el2 (3X1〇12)個(gè)ColoAdl病毒顆粒的人類癌癥患者中 ColoAdl(基因組拷貝血液）的全身藥代動力學(xué)。
[0055] 圖9G歷時(shí)40分鐘的給予6el2化X1〇12)個(gè)ColoAdl病毒顆粒的人類癌癥患者中 ColoAdl(基因組拷貝血液）的全身藥代動力學(xué)。
[005引圖10相同劑量的輸注越慢，在輸注結(jié)束時(shí)cMax水平越低（群組5相較于群組6)。[0057]圖11在ColoAdl的靜脈內(nèi)給藥之后于患有轉(zhuǎn)移性實(shí)體上皮腫瘤的人類癌癥患者 中隨時(shí)間的MCP1水平（ng/L)。
[005引圖12示出細(xì)胞中ColoAdl復(fù)制周期的示意圖。
[0059] 圖13癌細(xì)胞的ColoAdl感染被顯示為在用病毒體外感染之后于結(jié)腸直腸細(xì)胞系 中的細(xì)胞核染色。
[0060] 圖14A在由口給予ColoAdl之后來自患有結(jié)腸直腸癌的患者的結(jié)腸直腸組織中 的ColoAdl的細(xì)胞核染色（六聯(lián)體染色）。
[006U 圖14B圖14A的同種型對照染色。
[0062]圖14C結(jié)腸直腸組織（六聯(lián)體染色）顯示在基質(zhì)細(xì)胞（在向結(jié)腸直腸癌患者靜脈 內(nèi)給予ColoAdl之后）中沒有細(xì)胞核染色。
[006引 圖14D圖14C的同種型對照。
[0064]圖15 320種化合物（臨床批準(zhǔn)的或正在開發(fā)的化合物），其被分析對病毒復(fù)制的 影響。
[0065] 圖16A-D體內(nèi)鼠科模型顯示紫杉醇和ColoAdl聯(lián)合療法（及對照）的作用。
[0066] 圖17-18鼠科模型中ColoAdl和化學(xué)療法的體內(nèi)數(shù)據(jù)。
[0067] 發(fā)明詳述
[0068] 在一實(shí)施方案中，所給予的劑量為1X1〇1°至1X10 "個(gè)，例如1X10 "至1X10I2個(gè) 病毒顆粒。
[0069] 在一實(shí)施方案中，在一個(gè)治療周期中所給予的總劑量為1X1〇i2、2X1〇i2、3X1〇i2、 4X1〇i2、5X1〇i2、6X1〇i2、7X1〇i2、8X1〇12或 9X10 12個(gè)病毒顆粒。
[0070] 在一實(shí)施方案中，在一個(gè)治療周期中所給予的總劑量為6X1〇i2個(gè)病毒顆粒。
[0071] 本發(fā)明人假設(shè)，功效的最關(guān)鍵之處是在早期例如在出現(xiàn)抗病毒免疫反應(yīng)之前于腫 瘤內(nèi)建立生產(chǎn)性感染。
[0072] 因此給藥方案必須權(quán)衡遞送足量病毒，W例如在長至足W在癌細(xì)胞中接種病毒感 染的時(shí)段內(nèi)產(chǎn)生充足的病毒血漿水平，同時(shí)在患者中不引發(fā)毒性和嚴(yán)重的不良事件（或使 其最小化）。
[0073] 本發(fā)明人已經(jīng)首次表明可W通過靜脈內(nèi)給予病毒顆粒劑量來建立B型腺病毒對 腫瘤的感染。本文提供了對該結(jié)論的支持，其中在染色細(xì)胞的六聯(lián)體時(shí)W及還在由PCR進(jìn) 行獨(dú)立分析時(shí)，靜脈內(nèi)接受使用ColoAdl治療的患有結(jié)腸直腸癌的患者表現(xiàn)出在癌細(xì)胞的 細(xì)胞核中具有病毒感染。細(xì)胞核中的病毒表明病毒的病毒壽命周期正在進(jìn)展中，并且患者 中的病毒載量的增加表明病毒能夠復(fù)制。
[0074] 當(dāng)向患者全身給予溶瘤腺病毒時(shí)，需要考慮許多的給藥變量。運(yùn)些給藥變量 包括但不限于：病毒給予途徑；所給予的病毒的劑量；每一劑量的病毒給藥速率；在給 定周期中個(gè)別病毒給予之間的間隔；每一治療周期的病毒給予的數(shù)量；治療周期之間 的間隔；治療周期的數(shù)量；W及最后，用于增強(qiáng)功效或使副作用最小化的任何聯(lián)合藥物 (co-medicaments)或其他支持性護(hù)理的使用。每次給藥參數(shù)轉(zhuǎn)而取決于正在研究的溶瘤病 毒的類型的具體特性。
[0075] 關(guān)鍵參數(shù)將包括，但不限于：相對于非腫瘤細(xì)胞，病毒與腫瘤細(xì)胞的任何結(jié)合的相 對程度和親合力；相對于非腫瘤細(xì)胞，病毒在腫瘤細(xì)胞中的相對選擇性和效能；網(wǎng)狀內(nèi)皮 組織細(xì)胞（例如肝庫普弗細(xì)胞）對病毒的主動攝取和清除的速率，W及血液成分對病毒的 任何特異性或非特異性結(jié)合。
[0076] 運(yùn)些關(guān)鍵參數(shù)轉(zhuǎn)而被具體病毒類型的重要物理和表型特性驅(qū)動，所述重要物理和 表型特性包括但不限于：病毒的受體特異性；在病毒外殼上攜帶的電荷；包膜的存在或不 存在；病毒顆粒的尺寸；病毒顆粒的免疫原性；病毒顆粒的炎癥性可能性；病毒的腫瘤特異 性；病毒的復(fù)制速率；W及病毒的殺滅效能。
[0077] 因此，任何給定的給藥方案的適用性將隨著病毒的不同類型而變化，并且最適宜 的方案可W針對于所給予的病毒的類型。例如，Zhang等人（2012)描述了運(yùn)樣的Ad5-Ad48 嵌合病毒，建立該嵌合病毒W(wǎng)降低與凝血因子X的六聯(lián)體結(jié)合，從而消除肝臟扣留、增強(qiáng)循 環(huán)并降低毒性，同時(shí)維持抗腫瘤活性。同樣地，Shashkova等人（2009)描述了當(dāng)作為潛在 抗癌劑研究時(shí)，野生型人類腺病毒血清型5、6、11和35之間的顯著差異。因此，預(yù)期不同的 病毒類型當(dāng)向人類全身給予時(shí)會表現(xiàn)出顯著差異，并因此在沒有體內(nèi)數(shù)據(jù)和優(yōu)選的支持性 臨床數(shù)據(jù)的情況下不能預(yù)先預(yù)測最佳的給藥策略。
[0078] 當(dāng)與例如更加有規(guī)律地間隔且長期重復(fù)的給藥的當(dāng)前實(shí)踐相比，本文所述的給藥 方案可W尤其適于對B群腺病毒實(shí)現(xiàn)運(yùn)樣的情況。
[0079] 對給定的溶瘤腺病毒的優(yōu)化給藥方案的目的因此是使病毒向腫瘤細(xì)胞的遞送最 大化，同時(shí)使副作用（不良事件）的誘導(dǎo)和抗病毒免疫力最小化，從而產(chǎn)生適當(dāng)?shù)娘L(fēng)險(xiǎn)效益 治療譜，同時(shí)還根據(jù)治療酌情允許重復(fù)病毒給予。優(yōu)化給藥方案因此將在病毒類型之間存 在差異，并且具體地由于病毒外殼的差異而在腺病毒亞型之間存在差異。
[0080] 現(xiàn)有技術(shù)已基于Ad5進(jìn)行許多工作，所述Ad5是C亞群腺病毒，其傳染性由柯薩 奇-腺病毒受體介導(dǎo)。當(dāng)全身遞送時(shí)，超過90%的所遞送的劑量由肝臟占據(jù)。針對肝臟的 迅速且大量的損失降低了被腫瘤攝取的病毒并減小治療功效。該劑量的絕大部分被產(chǎn)生細(xì) 胞因子的固有免疫細(xì)胞，例如庫普弗細(xì)胞，其是寄存于肝臟中的特有巨隧細(xì)胞，所占據(jù)。Ad5 也表現(xiàn)出肝毒性并且導(dǎo)致壞死及隨后的庫普弗細(xì)胞消耗。
[0081]Shoshkova等人2009表明通過隨后遞送Ad5載體，Ad5對庫普弗細(xì)胞的消耗增加 了肝細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)的水平，并且還建議關(guān)于Ad5所闡明的機(jī)制不必相關(guān)聯(lián)于來自B亞群的腺病 毒，例如Adll和Ad35。其中的數(shù)據(jù)建議C亞群腺病毒與庫普弗細(xì)胞W類似方式相互作用， 而B亞群腺病毒未被庫普弗細(xì)胞完全識別或者不能導(dǎo)致運(yùn)些細(xì)胞死亡。特別地，Shoshkova 建議使用基于Adi1的病毒的預(yù)先給藥（pre-dosing)對庫普弗細(xì)胞不具有與Ad5相同的有 益作用。該論文推斷盡管可能存在著對B亞群腺病毒（包括Adi1)的一些結(jié)合，其影響實(shí) 際上是極小的。
[0082] 盡管不希望受理論限制，但本發(fā)明人確信與現(xiàn)有技術(shù)的建議相反，產(chǎn)生細(xì)胞因子 的固有免疫細(xì)胞如庫普弗細(xì)胞可W在B亞群腺病毒清除方面發(fā)揮作用。
[0083] 此外，凝血因子X與Ad5六聯(lián)體的結(jié)合是肝細(xì)胞感染的機(jī)制，并且該機(jī)制還關(guān)聯(lián)于 體內(nèi)其他腺病毒（參見例如MolecularTherapyvol. 17no. 10, 1683-1691，2009 年 10 月）， 但通常不是來自B亞群的腺病毒的肝攝取的機(jī)制。
[0084]Ad5的高總體血清陽性率（在人類群體中的高Ad5中和抗體滴定度）W及某些其 他腺病毒血清型代表了對全身施用基于高血清陽性率腺病毒的療法的著重關(guān)注，因此此類 血源性病毒能夠被預(yù)先存在的抗體中和，Vogels等人JournalofVirology,Aug2003V〇1 77,No. 15 第 8263-8271 頁。
[0085] B亞群腺病毒在此方面具有某些固有的優(yōu)勢，因?yàn)樗鼈兣c更低的血清陽性率相關(guān) (Stone等人JournalofVirology2005Vol79No.8page5090-5104)并具有更低的炎癥性 可能性。起始給藥因此可W比例如Ad5更加有效。然而，在全身遞送之后回避免疫系統(tǒng)的 能力可能仍變成與重復(fù)給藥相關(guān)的問題。因此，甚至在癌癥局部抑制免疫系統(tǒng)的情況下，對 免疫系統(tǒng)的回避仍可能是基于B亞群腺病毒的溶瘤病毒療法的長期成功的最大障礙。
[0086] 本發(fā)明人生成的數(shù)據(jù)支持了運(yùn)樣的觀點(diǎn)，即，B亞群的溶瘤腺病毒的治療作用因此 可W得到改善和/或可W通過采用適宜的給藥方案來使免疫系統(tǒng)對腺病毒的中和的消除 最小化。
[0087] 在一實(shí)施方案中，本文的給藥方案還可W使副作用例如流感樣癥狀和炎癥性反應(yīng) 最小化。
[0088] 在一實(shí)施方案中，在已經(jīng)出現(xiàn)特異性抗病毒免疫反應(yīng)之前，在早期"給藥窗口 "期 間重復(fù)給予具有復(fù)制能力的腺病毒，并且當(dāng)特異性抗病毒免疫反應(yīng)再次衰落時(shí)，可W再次 利用稍后的給藥窗口。目P，在短時(shí)間段內(nèi)的多次治療，隨后是一時(shí)間段，然后開始后續(xù)的治 療周期。
[0089] 有利地，通過W運(yùn)樣的方式給予具有復(fù)制能力的腺病毒，病毒血液水平足W在腫 瘤（已知是免疫抑制的環(huán)境）內(nèi)建立自我擴(kuò)增的感染，由此潛在地避免對使用溶瘤病毒的 長期重復(fù)給藥的需求。為了在腫瘤內(nèi)建立自我擴(kuò)增的感染，有益地將患者血流內(nèi)的病毒水 平盡可能長久地但在不產(chǎn)生不良事件的情況下維持在高于有效感染濃度的水平。該構(gòu)思類 似于確定病毒的治療窗口，即，在優(yōu)化治療作用且使副作用最小的情況下的劑量范圍或給 藥方案。
[0090] 運(yùn)可W通過優(yōu)化所給予的劑量和病毒輸注速率而實(shí)現(xiàn)。在一實(shí)施方案中，病毒的 輸注速率等于或大于人體對病毒的清除速率。
[0091] 一旦在腫瘤內(nèi)建立感染，則病毒被相對保護(hù)W免于中和抗體，并且被提供了潛在 許可的環(huán)境W進(jìn)行復(fù)制并在沒有劑量限制性毒性的情況下產(chǎn)生治療作用。
[0092]此外，發(fā)明人假設(shè)病毒濃度的峰值（CmJ造成副作用，并且更平坦的藥理學(xué)曲線是 期望的。
[0093] 在一實(shí)施方案中，CmJ皮保持低于特定值，例如3X10S個(gè)DNA拷貝/ml。似乎高于 相關(guān)閥值的Cm。、水平在某些患者中更可能誘導(dǎo)嚴(yán)重的不良事件或毒性。
[0094] 在一實(shí)施方案中，輸注速率與所給予的病毒的絕對量相比更加有影響。
[0095] 基于在臨床中生成的數(shù)據(jù)，本發(fā)明人還確信可W在延長的時(shí)段，例如高至72小時(shí) 或更久（其中所遞送的病毒的總劑量高于6Xl〇i2個(gè)病毒顆粒）內(nèi)，W高于清除速率且高至 1. 5至2X1〇11個(gè)病毒顆粒/分鐘的速率遞送病毒，而在患者中不引發(fā)嚴(yán)重的不良事件。
[0096] 在一實(shí)施方案中，在血液中的病毒基因組的Cm。、被維持在小于3X10 8個(gè)基因組/ ml血液的水平。
[0097] 本發(fā)明人已經(jīng)評估在許多情境中的病毒的初始清除速率，并確信估算的α-半衰 期為18分鐘。
[0098] 在溶瘤病毒療法中使用預(yù)防性抗炎劑是有爭議的。一方面，已經(jīng)提議它們的使用 可W使不良事件最小化，并由此增加溶瘤新城病病毒的耐受性化orence等人2007)。另一 方面，已經(jīng)報(bào)道發(fā)熱的出現(xiàn)可