β-酪蛋白A2和減輕或預防乳糖不耐受癥狀的制作方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明設及乳蛋白β-酪蛋白Α2用于減輕或預防乳糖不耐受癥狀的用途。具體 地，本發(fā)明設及乳或乳衍生的食品。申請人已經發(fā)現(xiàn)，消耗包含高水平的蛋白質β-酪蛋白 Α2的乳和乳制品和避免包含β-酪蛋白Α1的乳和乳制品有益于減輕或預防乳糖不耐受癥 狀。值得注意地，有益作用是即時的（急性的）且還誘導進行性的（暴露于β-酪蛋白Α1 之后）對將來暴露于乳糖的乳糖不耐受癥狀的預防或減輕的傾向性。 陽00引發(fā)明背景
[0003] 乳糖不耐受一般是指消化乳糖的能力受損。乳糖是包含半乳糖和葡萄糖單糖類的 二糖碳水化合物。在乳和乳衍生的乳制品中發(fā)現(xiàn)乳糖。人乳包含約9%乳糖，而未加工的牛 乳包含約4. 7%乳糖。來自山羊、水牛和綿羊的乳也包含4. 5-5.0%的乳糖。乳糖的消化是 通過乳糖酶將乳糖水解（或分解）成半乳糖和葡萄糖。
[0004] 為乳糖不耐受的個體在其消化系統(tǒng)中缺乏足夠水平的乳糖酶。乳糖不能通過小腸 壁被吸收入血流且由此如果未被乳糖酶分解，則完整地進入結腸。乳糖在結腸中的細菌發(fā) 酵產生大量氣體。此外，未吸收的碳水化合物和發(fā)酵產物升高了結腸的滲透壓，導致流入腸 的水增加。乳糖不耐受由此可W導致腹部氣脹和疫李、腸胃氣脹、腹瀉、惡屯、、胃隆隆聲乃至 嘔吐。運些癥狀通常在消耗乳糖后約30分鐘一2小時發(fā)生。 陽〇化]嬰兒早期的哺乳動物產生乳糖酶，但運種產生通常在斷奶后停止。然而，一些人群 發(fā)生乳糖酶持久保留，其中乳糖酶產生持續(xù)至成年期。認為不同人群中乳糖酶持久保留程 度是天然選擇的結果，有利于那些其中乳制品作為食品來源可得到的培養(yǎng)物。
[0006] 乳糖不耐受并非絕對的，因為可W耐受的乳糖的量因人而異。通常，根據(jù)試驗和誤 差，乳糖不耐受個體必須檢查他們可W耐受多少乳糖。運通常通過控制膳食乳糖水平或通 過共同避免膳食乳糖來進行。在一些情況中，可W使用酶乳糖酶補充劑?？蒞使用基于植 物的乳或乳衍生物，因為它們本身不含乳糖，例如大豆乳、稻米乳、杏仁乳、挪子乳、燕麥乳、 大麻乳化empmilk)和花生乳。還存在許多不含乳糖或乳糖減少的可得到的食品。盡管運 類食品可W得到，但是避免膳食中的乳或乳制品通常比較困難。
[0007] 乳（和其它乳制品）消耗與乳糖不耐受癥狀之間的關聯(lián)性是眾所周知的。然而， 在無特別地針對乳糖不耐受的醫(yī)學診斷的存在下，許多個體錯誤地認為其自身是乳糖不耐 受的，因為他們將他們所患有的癥狀與消耗乳或其它乳制品聯(lián)系起來。實際上，運些癥狀可 能歸因于其它加劇另外可忽略不計或并不顯著的效應的乳成分。蛋白質是可W導致或加劇 運類癥狀的成分的實例。
[0008] 世界范圍內人群消耗的乳、主要是牛乳是人膳食中蛋白質的主要來源。牛乳典型 地包含約30克/升蛋白質。酪蛋白構成該蛋白質的最大成分（80%)，且β-酪蛋白構成 酪蛋白的約37 %。在過去二十年中，已經有不斷增加的證據(jù)表示酪蛋白、尤其是β-酪蛋白 牽設眾多健康障礙。
[0009] 可W將β-酪蛋白分類為β-酪蛋白Α1和β-酪蛋白Α2。運兩種蛋白質是大部分 人群中消耗的乳中的主要β-酪蛋白。β-酪蛋白Α1不同于β-酪蛋白Α2在于單一氨基 酸。組氨酸氨基酸位于β-酪蛋白A1的209個氨基酸序列的67位上，而脯氨酸位于β-酪 蛋白Α2的同一位置上。然而，運種單一氨基酸差異對于腸中β-酪蛋白的酶消化是關鍵重 要的。67位上存在組氨酸使得包含稱作β-酪啡膚（casomo巧hine)-7度CM-7)的7個氨 基酸的蛋白質片段在酶消化時產生。因此，BCM-7是β-酪蛋白A1的消化產物。在β-酪 蛋白Α2的情況中，67位被脯氨酸占據(jù)，其阻礙該位置上的氨基酸鍵裂解。因此，BCM-7并非 0-酪蛋白Α2的消化產物。
[0010] 其它β-酪蛋白變體例如β-酪蛋白Β和β-酪蛋白C也在67位上具有組氨酸， 且其它變體例如A3、D和Ε在67位上具有脯氨酸。但運些變體僅在來自歐洲來源的母牛的 乳中W極低水平上被發(fā)現(xiàn)或完全未被發(fā)現(xiàn)。因此，在本發(fā)明的上下文中，術語β-酪蛋白A1 是指具有在67位上的組氨酸的任意β-酪蛋白，而術語β-酪蛋白Α2是指在67位上具有 脯氨酸的任意β-酪蛋白。 W11] BCM-7是一種阿片樣膚，且可W有效地活化遍在于體內的阿片樣受體。BCM-7具有 通過胃腸道壁和進入循環(huán)的能力，從而能夠使其通過阿片樣受體影響全身和細胞活動。申 請人等之前已經確定了消耗乳和乳制品中β-酪蛋白Α1的消耗與一些健康問題發(fā)生率之 間的關聯(lián)性，所述健康問題包括I型糖尿病（W0 1996/014577)、冠屯、?。╓0 1996/036239) 和神經性障礙（W0 2002/019832)。
[0012] 已經存在BCM-7也可W影響消化功能的推定。已經報道阿片樣受體在控制胃 腸道功能方面起作用，包括調節(jié)胃腸活動、黏液產生和激素產生（例如Mihatsch，W.A等 人，Biol.化onate, 2005, 87 (3) : 160-3)。認為在乳中發(fā)現(xiàn)的酪蛋白與可能導致便秘的 抑制腸能動性相關（GunnT.R.和StunzerD.，NZMed.J.，1986, 99(813) :843-6),且有 關酪啡膚和合成酪啡膚衍生物的研究表明BCM-7促成阿片樣受體介導的效應（化arlin V.等人，Rev.Med.化il.，1992, 120化）：666-9)。然而，盡管存在一些針對酪啡膚與腸中 通過時間之間相關性的證據(jù)，但是顯而易見，運種作用不一定可推斷為在人體內的體內 效應。例如，至少一種研究未能證實β-酪蛋白A1或β-酪蛋白A2消耗與便秘之間的 相關性（Crowley,Ε.Τ. ,Nutrients, 2013, 5, 253-266)。另外，已經證實BCM-7 通過U-阿 片樣受體介導的途經刺激黏液產生狂〇曲bi,S. ,Am.J.Physiol.Gastrointest.Liver I%ysiol.，2006,290(6):G1105-13)并且調節(jié)固有層淋己細胞增殖（Elitsur，Y.和Luk，G. D.，Clin.Exp.Immunol.，1991,85(3) :493-7),它們是與免疫系統(tǒng)相關的細胞。更近來，已 經報道β-酪蛋白A1導致胃腸道中組織炎癥扣1化q，M.R.等人，Eur.J.Nutr. ,2013; Barnett,Μ.P.G.等人，Int.J.FoodSci.Nutr.，2014)。經證實，β-酪蛋白A1 衍生的BCM-7 誘發(fā)的炎癥對表觀遺傳（epigenetic)DM修飾和隨后的受侵害組織的基因表達具有下游 作用燈rivedi,M.S.等人，J.Nut.Bio.，2014)。
[0013] 上述報道表明酪蛋白與酪啡膚（包括BCM-7)與胃腸道功能之間的關聯(lián)性。運些 報道基于使用乳蛋白或通常是酪蛋白的研究或使用BCM-7自身的研究。然而，迄今為止，尚 未報道β-酪蛋白A1消耗與胃腸道功能且特別是乳糖不耐受癥狀的直接相關性。此外，已 經存在來自具有未知或未證實的病癥、設及飲用高β-酪蛋白Α2(和相反是低β-酪蛋白 Α1)的乳品后胃腸道功能改善的消費者的無對照報道（在線和媒體），但運些報道是非科學 性的報道，且它們在關于任何功能改善的原因方面是非特異性的。此外，還存在許多有關消 耗運類乳無改善作用的無對照報道。運些報道存在不一致的方面，因為它們包括涵蓋能動 性和從便秘直到腹瀉的糞便稠度的消化作用連續(xù)性的報道。結論不能從無對照報道而可靠 地得出，特別是在食品和生理功能的情況中，其中可能潛在地影響結果的變量數(shù)量非常大。
[0014] 申請人目前已經發(fā)現(xiàn)了針對消耗β-酪蛋白A1與乳糖不耐受癥狀之間的直接相 關性的結論性的科學證據(jù)。由于可能影響腸健康的人體膳食中的眾多因素且乳和乳品包含 大量蛋白質成分和其它成分，所W申請人在β-酪蛋白Α1消耗與乳糖不耐受癥狀之間的明 顯的直接相關性的發(fā)現(xiàn)是令人驚奇的。重要地，申請人已經發(fā)現(xiàn)，不僅是對消耗β-酪蛋白 Α1的緊急和不期望的響應、而且是進行性的（暴露于β-酪蛋白Α1或BCM-7之后）響應的 證據(jù)，其中消耗β-酪蛋白Α1和由此產生BCM-7可W誘導動物的遺傳改變，導致乳糖酶水 平較低和由此將來暴露于乳糖時導致乳糖不耐受癥狀的可能性增加。
[0015] 因此，本發(fā)明的一個目的在于提供用于減輕或預防乳糖不耐受癥狀的方法或至少 提供有用的針對現(xiàn)存方法的可替代選擇的方法。
[0016] 發(fā)明概述
[0017] 在本發(fā)明的第一個方面，提供組合物用于預防或減輕動物的乳糖不耐受癥狀的用 途，其中該組合物包含β-酪蛋白，且其中β-酪蛋白包含至少75%重量的β-酪蛋白Α2。
[0018] 在本發(fā)明的第二個方面，提供用于預防或減輕動物的乳糖不耐受癥狀的組合物， 該組合物包含β-酪蛋白，且其中β-酪蛋白包含至少75%重量的β-酪蛋白Α2。
[0019] 在本發(fā)明的另一個方面，提供乳在制備用于預防或減輕動物的乳糖不耐受癥狀 的組合物中的用途，其中所述乳包含β-酪蛋白，且其中β-酪蛋白包含至少75%重量的 β-酪蛋白Α2。
[0020] 在另一個方面，提供β-酪蛋白Α2在制備用于預防或減輕動物的乳糖不耐受癥狀 的組合物中的用途，其中該組合物包含至少75%重量的β-酪蛋白Α2。β-酪蛋白Α2優(yōu)選 是乳的成分，所述乳優(yōu)選是牛乳。
[0021] 在本發(fā)明的另一個方面，提供預防或減輕動物的乳糖不耐受癥狀的方法，包括由 動物消耗包含β-酪蛋白的組合物，或給動物提供所述組合物用于消耗，其中β-酪蛋白包 含至少75%重量的β-酪蛋白Α2。
[0022] β-酪蛋白Α2的量可W是β-酪蛋白重量的75% - 100%范圍的任意量，例如至 少90 %或甚至100%。
[0023] 在本發(fā)明的一些實施方案中，所述組合物是乳或乳制品。所述乳是乳粉或液體乳。 所述乳制品可W是奶油、酸牛奶（yo曲urt)、夸克食品（quark)、干酪、黃油、冰洪淋或任意 其它的乳制品。 W24] 乳糖不耐受癥狀可W是腹部氣脹和疫李、腸胃氣脹、腹瀉、惡屯、、胃隆隆聲(rumblingstomach)和嘔吐，但不限于此。
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