裸蒴酚甲在制備抗霉菌性陰道炎藥物中的應用
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及裸蒴酚甲在婦科治療方面的應用，特別涉及裸蒴酚甲治療抗霉菌性陰 道炎的應用。
【背景技術】：
[0002] 霉菌性陰道炎或念珠菌性陰道炎即外陰陰道假絲念珠菌?。╒VC)，是由念珠菌引 起的一種常見多發(fā)的外陰陰道炎癥性疾病。白色念珠菌為條件致病菌，10%~20%的非孕 婦女及30%的孕婦陰道中有此菌寄生，但菌量少，不引起癥狀。只有當全身及陰道局部免疫 能力下降，尤其是局部細胞免疫力下降，白色念珠菌大量繁殖，才會引發(fā)陰道炎癥狀。
[0003] 三百草科裸蒴屬Gymnotheca Decne.植物為我國特有，該屬僅有裸蒴G. chinensis Decne.和白荀裸蒴G. involucrate Pei 2個種。裸蒴為多年生匍草本植物，主要分布于 云南、四川、貴州、廣西和湖北。全草可用于治療肺虛久咳、勞傷咳嗽、小便淋痛、水腫和帶下 病，也可外用治療跌打損傷。在對裸蒴全草的化學成分分離中，得到了裸蒴酚甲，化學名稱 為
[0004] (7R)-7-[(p-hydroxyl)-phenyl]-ethyleneglycol-8-monoethyl benzoic acid ester〇
[0006] 裸蒴酚甲。

【發(fā)明內容】

[0007] 本發(fā)明首次發(fā)現裸蒴酚甲具有和抗霉菌性陰道炎活性。
[0008] 技術方案
[0009] 有益效果
[0010] 本發(fā)明首次發(fā)現其具有顯著的抗霉菌性陰道炎活性，其為進一步開放成婦科藥 物，提供基礎，具有很好的市場推廣價值和經濟價值。
【具體實施方式】
[0011] 實施例1
[0012] 裸蒴全草（14kg)粉碎（5~10目），用95%乙醇室溫浸提3次（3L/次），每次7d， 合并后減壓濃縮回收溶劑得浸膏。將其分散于水中，依次用石油醚（60~90°C)和醋酸乙酯 萃取。醋酸乙酯萃取物經MCI柱色譜（70%甲醇-水）脫去葉綠素后得到混合物80g。該混 合物經硅膠柱色譜（氯仿-甲醇35 : 1 - 1 : I)，得到A~G共7個流分。流分D (150mg) 經制備HPLC，流動相為甲醇（A)-水⑶，梯度洗脫2~15min，40%~95% A，15~18min， 100% A，體積流量為16mL/min，收集保留時間為9. 7min的色譜峰，經減壓濃縮后得到裸蒴 酸甲（50mg)。單體化合物裸蒴酸甲（150mg)。
[0013] 裸蒴酚甲：白色粉末；[a ]20D-12。（c 0? 02，Me0H)。UVAmax MeOH(nm) :247， 說明分子中存在共輒體系。IRvmax KBr(cm-1) :3343,1645,1614,1511，1239,1069;紅外 光譜3343cm-l歸屬為OH伸縮振動，1645cm-l為與苯環(huán)共輒酯羰基的伸縮振動，而1614， 151 Icm-I 則歸屬為苯環(huán)骨架（C = C)伸縮振動。HR-ESI-MS m/z :281. 0791 [M+Na] +(計算 值281. 0789, C15H1404Na)。推測該化合物的分子式為C15H1404,不飽和度為9。
[0014] 表1裸蒴酸甲核磁共振數據全歸屬（5，ppm，0 = TMS，CDCl3)
[0017] 實施例2
[0018] 主料裸蒴酸甲化合物80mg，輔料38型脂肪酸甘油酯（購自sigma公司）2300mg混 合，制成栓劑。
[0019] 制備步驟：按處方量稱取主、輔料，先將輔料加入膠體磨中，于50_55°C水浴中加 熱融熔，緩慢加入裸蒴酚甲化合物并不斷攪拌使混合均勻，注入栓劑灌注機中，灌注成型， 溢料重新融熔、注模，成品。
[0020] 實施例3
[0021] 材料與方法
[0022] 1、達克寧栓，由西安楊森制藥有限公司生產；白色念珠菌：由中國醫(yī)學科學院皮 膚病防治研究所提供，為臨床分離菌株。
[0023] 樣品組來自實施例2的栓劑。
[0024] 動物：日本大耳白家兔，雌性，健康，體重2_5kg，由南京青龍山實驗動物中心 提供。
[0025] 2、方法：首先建立家兔霉菌性陰道炎模型，再分組給藥。取日本大耳家兔，先用接 種針，再用接種環(huán)分別在陰道口內2-4cm處用"連續(xù)劃線法"接種白色念珠菌，連續(xù)兩天。于 第二次接種后第三天作陰道涂片檢查，結果白色念珠菌鏡檢陽性，證實造模成功。將上述家 兔隨機分為分組，每組6只，即樣品組，達克寧（陽性對照）組、模型組，另取6只家兔為空 白（正常對照組），樣品組給藥劑量為30mg/只/天，達克寧組給予達克寧栓30mg/只/天， 模型組和空白對照組給溫生理鹽水沖洗，連續(xù)七天給藥。于給藥14d檢查記錄陰道局部病 變并取陰道、分泌物作涂片檢查，于給藥后第14天處死動物，取陰道組織作病理組織檢查。
[0026] 結果：
[0027] 1、陰道局部病變肉眼觀察：家兔于接種白色念珠菌后，陰道充血、水腫、分泌物增 加。給藥后，各給藥組家兔陰道局部充血、水等病變逐漸好轉，尤樣品組明顯。于治療后第 七日各給藥組陰道局部病變明顯減輕，至14日時多數恢復正常，與空白對照比較無明顯差 異。見表2。結果顯示，樣品組優(yōu)于陽性對照組。
[0028] 表2對陰道局部病變的影響
[0029]
[0030] 其中：A :無變化；B輕度充血，少量分泌物；C、中度充血、水腫、分泌物較多；D、重 度充血、水腫、分泌物極多
[0031] 2、分泌物檢測：造模后涂片除空白組均查見白色念珠菌，于治療后14d除了模型 組都未檢到白色念珠菌，且組間無差異，見表3。
[0032] 表3治療后陰道涂片檢查結果
[0033]
[0034] 3、病理組織學檢查：模型組家兔陰道上皮增厚，層次增多，上皮表面可見部分上 皮細胞壞死，并可見部分上皮細胞脫落，上皮間及上皮下固有膜中可見較多的炎細胞浸潤 或灶狀炎細胞浸潤。樣品組家兔僅見陰道上皮表面少數上皮細胞變性，個別壞死，固有膜未 見炎癥反應；達克寧栓組家兔陰道病變程度界于模型組與給藥組之間樣品組家兔見陰道上 皮表面少數上皮細胞變性，個別壞死，固有膜有小量炎癥反應。
【主權項】
1.裸蒴酚甲在制備抗霉菌性陰道炎藥物中的應用。
【專利摘要】本發(fā)明涉及裸蒴酚甲在婦科治療方面的應用，特別涉及裸蒴酚甲治療抗霉菌性陰道炎的應用。本發(fā)明首次發(fā)現其具有顯著的抗霉菌性陰道炎活性，其為進一步開放成婦科藥物提供基礎，具有很好的市場推廣價值和經濟價值。
【IPC分類】A61P31/10, A61K31/216, A61P15/02
【公開號】CN105193780
【申請?zhí)枴緾N201510672027
【發(fā)明人】羅瑞雪
【申請人】蘇州普羅達生物科技有限公司
【公開日】2015年12月30日
【申請日】2015年10月18日