作用小在濃度下相同的情況下與EDTA相比，多酸組試驗(yàn)小鼠疼痛抽搐顯現(xiàn)明顯減輕，主要包括:抽搐、舔受傷部位等不適癥狀減輕。
[0018]實(shí)施例1
一、抗蛇毒出血毒效果的研宄:
1、蛇毒
以滅菌注射用水配制蛇毒母液，蛇毒凍干品按100mg/ml稀釋，搖動(dòng)易起泡沫，可聞腥味，符合蛇毒特征后小白鼠皮下注射給藥，確定不同批次和種類蛇毒的100%致死量，備用。
[0019]2、體外中和實(shí)驗(yàn)
體外中和體內(nèi)注射比較不同多酸化合物對(duì)蛇毒出血、組織壞死和致死率的抑制情況。按小鼠體重配制不同最小致死量倍數(shù)的蛇毒溶液，一般用5mM~20mM多酸化合物共同孵育30min，之后背部皮下或肌肉每組注射6只體重18~25g小鼠，3只一小時(shí)后斷頸處死解剖比較出血面積及組織壞死情況，剩余3只繼續(xù)觀察疼痛反應(yīng)、呼吸、死亡率等。
[0020]3、體內(nèi)中和實(shí)驗(yàn)
相同部位先后注射比較不同多酸化合物對(duì)蛇毒出血、組織壞死和致死率的抑制情況。按小鼠體重配制不同最小致死量倍數(shù)的蛇毒溶液，每射6只體重18~25g小鼠背部皮下或肌肉組注，之后，相同部位再注射5mM~20mM多酸化合物，3只一小時(shí)后斷頸處死解剖比較出血面積及組織壞死情況，剩余3只繼續(xù)觀察疼痛反應(yīng)、呼吸、死亡率等。
[0021]4、組織切片照片
小鼠處死后取下肌肉、皮膚組織，固定、切片并行HE染色后觀察肌肉組織細(xì)胞壞死情況。
[0022]5、總結(jié)多酸化合物各項(xiàng)中和抗蛇毒試驗(yàn)數(shù)據(jù)，分析不同理化性質(zhì)與抗蛇毒出血毒活性之間的關(guān)系、并結(jié)合量化計(jì)算，分子模擬等手段形成多酸抗出血毒的理論體系。
[0023]二、多陰金屬氧酸鹽化合物抗尖吻蝮蛇蛇毒的部分結(jié)果:
本發(fā)明使用常見的 Keggin，Dawson，Anderson 多陰離子[PW1204(l]% [PMo12O4J3' [SiW12O40]4' [CeMo12O40]4' [AsMo12O40]3' [SiW12O40]4' [BW12O40]5' [W12O40]6' [SiW11O39]8' [Pff9O34]9' [SiW9O34]10' a-[P2W18062 ]6_，-[P2W18O62]6-, [Si2W18O62]8-, [As2W18O62]6' [P2W15O56]16'[頂O6O24]5' [AlMo6H6O24]3-, [FeMo6H6O24] % [CoMo6H6O24] 3^, [NiMo6H6O24][CrMo6H6O24]3_等作為無機(jī)前軀體，使用丙氨酸Ala，精氨酸Arg，天冬氨酸Asp，半胱氨酸Cys，谷氨酰胺Gln，谷氨酸Glu，組氨酸His，異亮氨酸He，甘氨酸Gly，天冬酰胺Asn，亮氨酸Leu，賴氨酸Lys，甲硫氨酸Met，苯丙氨酸Phe，脯氨酸Pro，絲氨酸Ser，蘇氨酸D-Thr，色氨酸Trp，酪氨酸Tyr，繳氨酸Val等氨基酸單元修飾的多陰離子，結(jié)果表明精氨酸(D-ArginineC6H14N4O2)和蘇氨酸(D-Threonine，C4H9NO3)修飾的多酸鹽 Na3 [AlMo6 (OH) 6018]} (H2D-Thr) 2和Na3 [AlMo6 (OH)6O18B (H2D-Arg)2 效果最好。
[0024]背部出血面積試驗(yàn)表明(見附圖1和附圖2 )，濃度為5mM Na3 [AlMo6 (OH) 6018]}(H2D-Thr) 2，Na3 [AlMo6 (OH) 6018]} (H2D-Arg) 2可以有效的中和 2 個(gè) LD 5(|尖吻蝮蛇蛇毒(1.8mg/kg，小鼠體重20~25g)，觀察不到明顯的出血點(diǎn)，小鼠保護(hù)率達(dá)到100% ； 氨基酸與多陰離子結(jié)合后使得多陰離子的極性得到進(jìn)一步的調(diào)節(jié)，使其在生理pH值范圍內(nèi)有了更好的穩(wěn)定性、能以更快、更有效的形式抑制蛇毒。
[0025]發(fā)明人做了 Anderson 多酸前體 Na3 [CrMo6H6O24]，Na3 [AlMo6 (OH)6O18B (H2D-Thr)2^PNa3[AlMo6 (OH)6O18B (H2D-Arg) 2的電導(dǎo)率測(cè)試(見附圖3)，結(jié)果表明，相對(duì)于Anderson多酸前體 Na3 [CrMo6H6O24]，Na3 [AlMo6 (OH) 6018]} (H2D-Thr) 2和 Na 3 [AlMo6 (OH) 6018]} (H2D-Arg) 2在生理PH值范圍內(nèi)有更好的穩(wěn)定性。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種有機(jī)無機(jī)雜化多陰金屬氧酸鹽化合物Na 3 [AlMo6 (OH) 6018]} (H2D-Thr) 2和Na3[AlMo6 (OH)6O18B (H2D-Arg) 2的新用途，其特征在于所述的有機(jī)無機(jī)雜化多陰金屬氧酸鹽化合物 Na3 [AlMo6 (OH) 6018]} (H2D-Thr) 2和 Na 3 [AlMo6 (OH) 6018]} (H2D-Arg) 2在制備抗蛇毒藥物中的應(yīng)用。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的有機(jī)無機(jī)雜化多陰金屬氧酸鹽化合物Na3 [AlMo6 (OH) 6018]}(H2D-Thr) 2和Na 3 [AlMo6 (OH) 6018]} (H2D-Arg) 2的新用途，其特征在于所述的有機(jī)無機(jī)雜化多陰金屬氧酸鹽化合物 Na3 [AlMo6 (OH) 6018]} (H2D-Thr) 2和 Na 3 [AlMo6 (OH) 6018]} (H2D-Arg) 2在制備抑制蛇毒出血毒和緩解毒蛇咬傷導(dǎo)致疼痛藥物中的應(yīng)用。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的有機(jī)無機(jī)雜化多陰金屬氧酸鹽化合物Na3 [AlMo6 (OH) 6018]}(H2D-Thr) 2和Na 3 [AlMo6 (OH) 6018]} (H2D-Arg) 2的新用途，其特征在于所述的有機(jī)無機(jī)雜化多陰金屬氧酸鹽化合物 Na3 [AlMo6 (OH) 6018]} (H2D-Thr) 2和 Na 3 [AlMo6 (OH) 6018]} (H2D-Arg) 2在制備抗尖吻蝮蛇蛇毒藥物中的應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明公開了有機(jī)無機(jī)雜化多陰金屬氧酸鹽化合物Na3[AlMo6(OH)6O18]}(H2D-Thr)2和Na3[AlMo6(OH)6O18]}(H2D-Arg)2的新用途，是所述的有機(jī)無機(jī)雜化多陰金屬氧酸鹽化合物Na3[AlMo6(OH)6O18]}(H2D-Thr)2和Na3[AlMo6(OH)6O18]}(H2D-Arg)2在制備抗蛇毒藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明所述的有機(jī)無機(jī)雜化多陰金屬氧酸鹽化合物Na3[AlMo6(OH)6O18]}(H2D-Arg)2，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明氨基酸修飾的Anderson型多陰離子不僅可以中和蛇毒而且可以進(jìn)一步降低小鼠蛇毒咬傷的疼痛感(抽搐、舔受傷部位等不適癥狀減輕)，為抗蛇毒制劑的研發(fā)提供了新的思路，具有重要的科學(xué)意義和廣泛的應(yīng)用前景。
【IPC分類】A61P39/02, A61K33/24, A61K47/48
【公開號(hào)】CN104971359
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510343172
【發(fā)明人】吳瓊, 王海, 句紅萍, 王寶玲, 鄒濤隅, 羅利, 蘇瑩珍
【申請(qǐng)人】昆明學(xué)院
【公開日】2015年10月14日
【申請(qǐng)日】2015年6月19日