一種外用復(fù)方制劑的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及醫(yī)藥領(lǐng)域，特別是涉及一種外用復(fù)方制劑，可用于治療牙齦、鼻粘膜或 皮膚炎癥性疾病。
【背景技術(shù)】
[0002] 中國牙齦、鼻粘膜和皮膚炎癥性疾病多發(fā)，現(xiàn)多采用含有皮質(zhì)激素的藥物治療，或 皮質(zhì)激素與抗菌藥物、抗真菌復(fù)方藥物治療，常用的皮質(zhì)激素如曲安奈德。因?yàn)樵擃愃幬锆?效肯定，是治療上常用的主要藥物，但有效劑量的皮質(zhì)激素類藥物頻繁使用會(huì)導(dǎo)致全身或 局部的副作用，因此，必須避免大劑量的激素使用。因此，針對(duì)上述疾病，亟待開發(fā)出療效 佳、副作用小且療效能等同媲美皮質(zhì)激素類藥物的可靠藥物制劑。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的目的是提供一種療效佳、副作用小的外用復(fù)方制劑，可有效治療牙齦、鼻 粘膜或皮膚炎癥性疾病，從而克服現(xiàn)有的皮質(zhì)激素類藥物使用會(huì)導(dǎo)致全身或局部的副作用 的不足。
[0004] 為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：
[0005] -種外用復(fù)方制劑，包括具有抗炎活性的生物活性透明質(zhì)酸，還包括抗微生物藥 物或8~50yg/ml的皮質(zhì)激素，所述抗微生物藥物為抗真菌劑和/或抗菌藥物。
[0006] 進(jìn)一步地，所述具有抗炎活性的生物活性透明質(zhì)酸是分子量為0. 7KD~300KD的 生物活性透明質(zhì)酸片段。
[0007] 進(jìn)一步地，所述生物活性透明質(zhì)酸片段是使用CHO細(xì)胞生產(chǎn)的有糖化的重組人透 明質(zhì)酸酶PH20切割大分子透明質(zhì)酸獲得，且所述透明質(zhì)酸片段具有能識(shí)別透明質(zhì)酸正常 結(jié)構(gòu)的重組人透明質(zhì)酸酶切割的末端。
[0008] 進(jìn)一步地，所述抗真菌劑為酮康唑，所述抗菌藥物為甲硝唑。
[0009] 進(jìn)一步地，所述皮質(zhì)激素為曲安奈德。
[0010] 進(jìn)一步地，包括重量百分比計(jì)的以下組分：1. 5~3%的生物活性透明質(zhì)酸，以及 0. 05%~0. 75%的甲硝唑。
[0011] 進(jìn)一步地，包括重量百分比計(jì)的以下組分：1. 5~3%的生物活性透明質(zhì)酸，以及 0. 25~0.5%的酮康挫。
[0012] 進(jìn)一步地，包括重量百分比計(jì)的以下組分：1.5~3%的生物活性透明質(zhì)酸、 0. 05%~0. 75%的甲硝唑以及0. 25~0. 5%的酮康唑。
[0013] 進(jìn)一步地，包括重量百分比1. 5~3%的生物活性透明質(zhì)酸，以及8~50yg/ml的 曲安奈德。
[0014] 進(jìn)一步地，所述制劑為凝膠劑或液體制劑。
[0015] 由于采用上述技術(shù)方案，本發(fā)明至少具有以下優(yōu)點(diǎn)：
[0016] 本發(fā)明采用具有抗炎作用的生物活性透明質(zhì)酸，復(fù)配低劑量的皮質(zhì)激素或抗菌藥 物，獲得的外用復(fù)方制劑可有效治療牙齦、鼻粘膜或皮膚疾病，療效不亞于現(xiàn)有的皮質(zhì)激素 類藥物。同時(shí)，由于所述制劑中不含或僅含有低劑量的皮質(zhì)激素，因此，避免了大劑量皮質(zhì) 激素帶來的副作用。此外，復(fù)配抗菌藥物、抗真菌劑的復(fù)方制劑還同時(shí)具有抗細(xì)菌、抗真菌 的療效。
【具體實(shí)施方式】
[0017] 本發(fā)明提供一種外用復(fù)方制劑，包括具有抗炎活性的生物活性透明質(zhì)酸，還包括 抗菌藥物或8~50 y g/ml的皮質(zhì)激素，所述抗菌藥物為抗真菌劑和/或抗菌藥物。
[0018] 其中，所述具有抗炎活性的生物活性透明質(zhì)酸是分子量為0. 7KD~300KD的生物 活性透明質(zhì)酸片段。所述生物活性透明質(zhì)酸片段是使用CHO細(xì)胞生產(chǎn)的有糖化的重組人透 明質(zhì)酸酶PH20切割大分子透明質(zhì)酸獲得，且所述透明質(zhì)酸片段是使用能識(shí)別透明質(zhì)酸正 常結(jié)構(gòu)的重組人透明質(zhì)酸酶切割的末端。
[0019] 細(xì)胞外基質(zhì)大分子透明質(zhì)酸被透明質(zhì)酸酶活化成生物活性透明質(zhì)酸，生物活性透 明質(zhì)酸與細(xì)胞外CD44和TLR4受體結(jié)合，可以促進(jìn)皮膚粘膜分泌防衛(wèi)素2、抑制炎癥。
[0020] 本發(fā)明利用具有抗炎活性的生物活性透明質(zhì)酸，針對(duì)我國多發(fā)的牙齦、鼻粘膜和 皮膚炎癥性疾病，成功制造了有對(duì)牙齦、鼻粘膜和皮膚抗炎作用的復(fù)方制劑。所述制劑中有 抗炎作用的生物活性透明質(zhì)酸取代了全部或絕大部分皮質(zhì)激素，不含或僅含有低劑量的皮 質(zhì)激素，因此，不存在或者大大降低了由皮質(zhì)激素帶來的副作用。此外，具有抗炎作用的生 物活性透明質(zhì)酸可復(fù)配抗菌藥物（如甲硝唑、螺旋霉素、頭孢菌素、慶大霉素等）和/或抗 真菌劑（如酮康唑、灰黃霉素、克霉唑、制霉菌素等），用于同時(shí)實(shí)現(xiàn)抗細(xì)菌和/或抗真菌的 療效。并且，隨著生物活性透明質(zhì)酸片段生產(chǎn)方法的改進(jìn)，可望進(jìn)一步增加其抗炎活性與使 用效果。
[0021] 以下通過具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的外用復(fù)方制劑進(jìn)行具體說明。
[0022] 實(shí)施例1
[0023]目的：生物活性透明質(zhì)酸片段的生產(chǎn)方法。
[0024] 方法：原料為純度90. 0%~99. 9%的800~1500KD的大分子透明質(zhì)酸，使用CHO 細(xì)胞生產(chǎn)的重組人透明質(zhì)酸酶PH20切割，每克透明質(zhì)酸使用透明質(zhì)酸酶2000~4000單 位，37 度消化 4 ~6 小時(shí)，pH5. 0 ~5. 5,130 ~160mM NaCl，0? 5 ~1.0 mMMgSO4,1. 5 ~2. 5mM CaCl2，最終制成的分子量為0. 7KD~300KD透明質(zhì)酸片段；所述的分子量為0. 7KD~300KD 透明質(zhì)酸片段具有使用CHO細(xì)胞生產(chǎn)的不引起人類過敏反應(yīng)的有糖化的能識(shí)別透明質(zhì)酸 正常結(jié)構(gòu)的重組人透明質(zhì)酸酶PH20切割的末端，具有促進(jìn)細(xì)胞分泌防衛(wèi)素2、殺滅微生物 和和抑制皮膚粘膜炎癥的生物活性，所述的生物活性既取決于透明質(zhì)酸酶切割的透明質(zhì)酸 片段末端，也取決于透明質(zhì)酸片段的分子量大小，透明質(zhì)酸片段的分子量越小，所含重組 人透明質(zhì)酸酶PH20切割的末端越多，生物活性越好。
[0025] 實(shí)施例2
[0026]目的：比較生物活性透明質(zhì)酸卡波姆凝膠和合成皮質(zhì)激素曲安奈德卡波姆凝膠的 皮膚創(chuàng)口抗炎效果。
[0027] 方法：制造3%生物活性透明質(zhì)酸的3. 0%卡波姆凝膠15克/支（制劑1);制造 3%生物活性透明質(zhì)酸并含0.2mg曲安奈德的3.0%卡波姆凝膠15克/支（制劑2);制造 含Img曲安奈德的3. 0%卡波姆凝膠15克/支（制劑3);制造I. 5%生物活性透明質(zhì)酸 并含0. 2mg曲安奈德的3. 0%卡波姆凝膠15克/支（制劑4);制造含0. 2mg曲安奈德的 3. 0%卡波姆凝膠15克/支（制劑5)。比較以上五種制劑對(duì)皮膚創(chuàng)口的抗炎效果，每日涂 抹3次，每次涂抹2ml，觀察各制劑組皮膚激光治療形成的創(chuàng)口第1天的紅腫痛情況。疼痛 療效評(píng)價(jià)：顯效：疼痛癥狀顯著改善或消失，患者滿意；有效：疼痛癥狀有改善或減輕，患 者仍有不適，要求繼續(xù)治療；無效：疼痛癥狀無明顯減輕，患者不滿意。紅腫體征療效評(píng)價(jià)： 顯效：創(chuàng)口無明顯腫脹，創(chuàng)口周邊有寬度小于1. 5毫米的輕度紅腫圍繞；有效：創(chuàng)口輕微腫 脹，創(chuàng)口周邊有寬度大于1. 5毫米和小于3. 0毫米的輕度紅腫圍繞；無效：創(chuàng)口明顯腫脹， 創(chuàng)口周邊有寬度大于3. 0毫米的紅腫圍繞。統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：采用SPSS12. 0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng) 計(jì)學(xué)處理，計(jì)量和計(jì)數(shù)資料組間比較采用t檢驗(yàn)和X2檢驗(yàn)，以p〈0. 05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義差異。
[0028]結(jié)果：
[0029] 表1各組患者治療后第1天疼痛癥狀和紅腫體征改善情況比較
[0030]
[0031] 結(jié)論：結(jié)果表明制劑1和制劑5皮膚創(chuàng)口的抗炎效果類似，制劑2、3和4皮膚創(chuàng) 口的抗炎效果類似，生物活性透明質(zhì)酸可以取代合成皮質(zhì)激素曲安奈德的皮膚創(chuàng)口抗炎效 果。
[0032] 實(shí)施例3
[0033]目的：比較生物活性透明質(zhì)酸+低劑量曲安奈德噴劑和高劑量曲安奈德噴劑的鼻 粘膜抗炎效果。
[0034] 方法：制造3%生物活性透明質(zhì)酸鼻噴劑（制劑1)，每鼻孔5噴；制造3%生物活 性透明質(zhì)酸含曲安奈德〇. lmg/12ml的鼻噴劑（制劑2)，每鼻孔5噴；制造1. 5%生物活性 透明質(zhì)酸含曲安奈德〇. lmg/12ml的鼻噴劑（制劑3)制造含曲安奈德I. lmg/12ml的鼻噴 劑（制劑4)，每鼻孔5噴；比較以上四種制劑對(duì)季節(jié)性過敏性鼻炎，感冒流感的治療效果， 評(píng)價(jià)癥狀主要有鼻癢、鼻阻、流鼻涕、打噴嚏。體征療效評(píng)價(jià)：顯效：鼻癢、鼻阻、流鼻涕和打 噴嚏體征基本消失；有效：鼻癢、鼻阻、流鼻涕和打噴嚏體征明顯改善；無效：鼻癢、鼻阻、流 鼻涕和打噴嚏體征無改善。統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：采用SPSS12. 0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)量 和計(jì)數(shù)資料組間比較采用t檢驗(yàn)和X2檢驗(yàn)，以p〈0. 05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義差異。
[0035]結(jié)果：
[0036] 表2各組患者治療后第一天鼻癢、鼻阻、流鼻涕、打噴嚏的改善情況比較
[0037]
[0038] 結(jié)論：結(jié)果表明制劑2、3和制劑4的抗炎效果類似，生物活性透明質(zhì)酸+低劑量合 成皮質(zhì)激素曲安奈德與無生物活性透明質(zhì)酸的高劑量合成皮質(zhì)激素曲安奈德鼻粘膜抗炎 效果相同。
[0039] 實(shí)施例4
[0040]目的：比較使用生物活性透明質(zhì)酸+甲硝唑卡波姆凝膠和合成皮質(zhì)激素曲安奈德 +甲硝唑卡波姆凝膠的牙齦炎治療效果。
[0041] 方法：制造3%生物活性透明質(zhì)酸+0. 05%甲硝唑的3. 0%卡波姆凝膠（制劑1); 制造3%生物活性透明質(zhì)酸+0. 75%甲硝唑的3. 0%卡波姆凝膠（制劑2);制造1. 5%生 物活性透明質(zhì)酸+〇. 75%甲硝唑的3. 0%卡波姆凝膠（制劑3);制造合成皮質(zhì)激素曲安奈 德0. lmg/12ml+0. 05%甲硝唑的3. 0%卡波姆凝膠（制劑4);制造合成皮質(zhì)激素曲安奈德 0. lmg/12ml+0. 75%甲硝唑的3.0%卡波姆凝