專利名稱：緩釋制劑的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種固體緩釋制劑(如以微球的形式)之制備方法，該方法能夠在不長(zhǎng)時(shí)間暴露于環(huán)境的條件下很容易地回收固體緩釋制劑。
背景技術(shù)：
微囊(微球)(此后也稱作MC)首先是通過(guò)含水干燥等方法制備，隨后分離，濃縮并回收，此后加入甘露糖醇等物質(zhì)并溶解，生成MC懸浮液，進(jìn)而將其脫水且通過(guò)冷凍干燥法干燥，最終制成微囊粉末(微球粉末，在此也稱作MC粉末)。在此操作過(guò)程中，一般的做法是將MC懸浮液分配在托盤中，并且冷凍干燥該懸浮液。
然而，由于需要人工除菌，且在冷凍干燥完成后用刮料裝置回收托盤內(nèi)的MC粉末，所以常規(guī)制備方法存在下列缺陷(1)MC粉末粘著在托盤上，需要在回收時(shí)用刮料裝置到下MC粉末。(2)由于采用人工刮料，同時(shí)也由于回收MC需要較長(zhǎng)的時(shí)間，所以延長(zhǎng)了MC在環(huán)境下暴露的時(shí)間，從而常引起被微生物等污染的危險(xiǎn)性，這對(duì)于確保無(wú)菌性來(lái)說(shuō)是不利的。此外，因?yàn)橐獙?duì)MC制劑的含水量進(jìn)行控制，長(zhǎng)時(shí)間暴露在環(huán)境中從物理化學(xué)穩(wěn)定性角度而言存在風(fēng)險(xiǎn)。(3)由于在刮料過(guò)程中主要使用刮料裝置，托盤和刮料裝置之間的磨擦有可能產(chǎn)生和引入外來(lái)物質(zhì)。(4)由于MC粉末和托盤發(fā)生粘著，一些MC粉末殘留在托盤上，甚至在刮擦后也無(wú)法回收。
發(fā)明公開(kāi)針對(duì)上述背景技術(shù)，需要開(kāi)發(fā)出一種用于固體緩釋制劑的制備方法，該方法允許以高回收率在冷凍干燥后方便地回收固體緩釋制劑，在環(huán)境中的暴露時(shí)間短，并且減小產(chǎn)生和引入外源性物質(zhì)的危險(xiǎn)性。
在對(duì)解決上述問(wèn)題作出了大量研究后，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，通過(guò)預(yù)先在托盤內(nèi)表面上形成冰層或用抗水基質(zhì)材料涂布，意外地能夠在短時(shí)間內(nèi)很容易地回收凍干的MC粉末。此外，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，通過(guò)在凍干容器內(nèi)的溫度等于或低于0℃的還原條件下使凍干容器內(nèi)的凍結(jié)水完成升華，凍干餅可以不崩解和分散，因此可意外地回收得到具有良好形狀和高收率的凍干MC粉末。本發(fā)明人在上述發(fā)現(xiàn)的基礎(chǔ)上作了進(jìn)一步的研究，并且開(kāi)發(fā)出本發(fā)明。
因此，本發(fā)明提供(1)一種用于制備固體緩釋制劑的方法，該方法包括在凍于容器中冷凍干燥緩釋制劑，其中所述凍干容器的內(nèi)表面部分或全部涂布冰層或抗水基質(zhì)材料。(2)一種用于制備固體緩釋制劑的方法，該方法包括在凍干容器中冷凍干燥該緩釋制劑，其中該容器的內(nèi)表面部分或全部涂布有抗水基質(zhì)材料，并且涂布過(guò)的內(nèi)表面進(jìn)一步被部分或全部涂布冰層。(3)根據(jù)上述術(shù)語(yǔ)(1)或(2)所述的方法，其中所述內(nèi)表面只是底部表面。(4)根據(jù)上述術(shù)語(yǔ)(1)或(2)所述的方法，其中所述凍干容器為托盤。(5)根據(jù)上述術(shù)語(yǔ)(1)或(2)所述的方法，其中所述冰層的厚度是約0.01mm-約30mm。(6)根據(jù)上述術(shù)語(yǔ)(1)或(2)所述的方法，其中所述抗水基質(zhì)材料是四氟乙烯樹(shù)脂、三氟乙烯樹(shù)脂、二氟乙烯樹(shù)脂、1,1-二氟乙烯樹(shù)脂、六氟丙烯-四氟乙烯共聚樹(shù)脂、改性氟化樹(shù)脂、四氟乙烯-全氟烷氧基乙烯共聚樹(shù)脂，或四氟乙烯-乙烯共聚樹(shù)脂。(7)根據(jù)上述術(shù)語(yǔ)(1)-(6)任一項(xiàng)所述的方法，其中所述緩釋制劑是微球，和(8)根據(jù)上述術(shù)語(yǔ)(1)或(2)所述的方法，其包括在凍干容器內(nèi)的溫度等于或低于0℃時(shí)的還原條件下使凍干容器中的凍結(jié)水完成升華。
本發(fā)明還進(jìn)一步提供(9)根據(jù)上述術(shù)語(yǔ)(1)或(2)所述的制備方法，其中所述冰層的厚度是該容器深度的約1/1,000-約4/5。(10)根據(jù)上述術(shù)語(yǔ)(1)或(2)所述的制備方法，其中所述緩釋制劑懸浮液的凍結(jié)層厚度是該容器深度的約1/1,000-約4/5。(11)根據(jù)上述術(shù)語(yǔ)(1)或(2)所述的制備方法，其中所述容器的尺寸是寬度約5mm-約7,000mm，長(zhǎng)度約5mm-7000mm，并且深度約1mm-約100mm，其中所述冰層是約0.01mm-約30mm。(12)根據(jù)上述術(shù)語(yǔ)(1)-(11)任一項(xiàng)所述的制備方法，其中所述緩釋制劑是含有生物活性肽的緩釋制劑。(13)根據(jù)上述術(shù)語(yǔ)(1)-(11)任一項(xiàng)所述的制備方法，其中所述緩釋制劑是含有生物活性肽和生物可降解聚合物的緩釋制劑。(14)根據(jù)上述術(shù)語(yǔ)(12)或(13)所述的制備方法，其中所述生物活性肽是LH-RH激動(dòng)劑或LH-RH拮抗劑。(15)根據(jù)上述術(shù)語(yǔ)(12)或(13)所述的制備方法，其中所述生物活性肽是5-氧代-Pro-His-Trp-Ser-Tyr-DLeu-Leu-Arg-Pro-NH-C2H5(亮丙瑞林)或其鹽。(16)根據(jù)上述術(shù)語(yǔ)(12)或(13)所述的制備方法，其中所述生物活性肽是5-氧代-Pro-His-Trp-Ser-Tyr-DLeu-Leu-Arg-Pro-NH-C2H5(亮丙瑞林)的乙酸鹽。(17)根據(jù)上述術(shù)語(yǔ)(13)所述的制備方法，其中所述生物可降解聚合物是α-羥基羧酸聚合物。(18)根據(jù)上述術(shù)語(yǔ)(17)所述的制備方法，其中所述α-羥基羧酸聚合物是乳酸-羥基乙酸聚合物。(19)根據(jù)上述術(shù)語(yǔ)(18)所述的制備方法，其中乳酸和羥基乙酸的含量比例是約100/0-約40/60(mol％)。(20)根據(jù)術(shù)語(yǔ)(18)所述的制備方法，其中所述聚合物的重均分子量是約3,000-約100,000。(21)根據(jù)上述術(shù)語(yǔ)(13)所述的制備方法，其中所述生物可降解聚合物是聚乳酸；和(22)根據(jù)上述術(shù)語(yǔ)(21)所述的制備方法，其中所述聚乳酸的重均分子量是約10,000-約60,000。
適合采用本發(fā)明所述方法來(lái)制備的緩釋制劑包括，例如，微球。在此所用的術(shù)語(yǔ)“微球”應(yīng)理解為包括微囊和微粒。具體而言，可用日本專利未審公開(kāi)號(hào)100516/1985、201816/1987、124814/1990、321622/1992、112468/1993、194200/1993、293636/1994、145046/1994、192068/1994、169818/1996、132524/1997、221417/1997和221418/1997等中所述的微球、微囊或類似制劑。
包含在上述緩釋制劑內(nèi)的藥物優(yōu)選是生物活性肽，例如分子量是約300-約40,000，優(yōu)選約400-約30,000，和更優(yōu)選約500-約20,000的生物活性肽。
優(yōu)選所述的生物活性肽具有可以和弱酸形成鹽的堿性基團(tuán)，所述弱酸的pKa值不小于4.0(例如碳酸、酸式碳酸、硼酸、具有1-3個(gè)碳原子的低級(jí)烷基一元羧酸)。所述生物活性肽除了含有堿性基團(tuán)以外還可以具有游離或鹽形式的酸性基團(tuán)。
生物活性肽的代表性活性是激素作用。所述生物活性肽可以是天然物質(zhì)，合成物質(zhì)，半合成物質(zhì)或是遺傳工程的產(chǎn)物，也可以是它們的類似物和/或衍生物。這些生物活性肽的作用機(jī)理可以是激動(dòng)性作用，或是拮抗性作用。
所述生物活性肽的實(shí)例是黃體化激素釋放激素(也稱作LH-RH或促性腺激素釋放激素，Gn-RH)、胰島素、促生長(zhǎng)素抑制素、促生長(zhǎng)素抑制素衍生物(例如Sandostatin；USP4,087,390、4,093,574、4,100,117和4,253,998)、生長(zhǎng)激素(GH)、生長(zhǎng)激素釋放激素(GH-RH)、催乳激素、紅細(xì)胞生成素(EPO)、促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)、ACTH衍生物(例如依比拉肽)、促黑素細(xì)胞激素(MSH)、甲狀腺激素釋放激素((pyr)glu-His-ProNH2；TRH)、甲狀腺激素釋放激素的鹽或衍生物(日本專利未審許公開(kāi)號(hào)121273/1975和116465、1977)、促甲狀腺素(TSH)、促黃體素(LH)、促濾泡激素(FSH)、加壓素、加壓素衍生物(例如去氨加壓素)、催產(chǎn)素、降鈣素、胰高血糖素、胃泌素、促胰液素、促胰酶素、縮膽囊肽、血管緊張肽、人胎盤生乳素、人類絨毛膜促性腺激素(HCG)、腦啡肽、腦啡肽衍生物(例如USP4,277394、EP-31567)、內(nèi)啡肽、京都酚、干擾素(例如α-、β-、γ-干擾素)、白介素類化合物(例如白細(xì)胞介素1-12)、吞噬刺激素、胸腺素、胸腺刺激素、胸腺體液因子(THF)、血胸腺因子(FTS)及其衍生物(USP4229438)、腫瘤壞死因子(TNF)、集落刺激因子(例如CSF、GCSF、GMCSF、MCSF)、胃動(dòng)素、強(qiáng)啡肽、鈴蟾肽、神經(jīng)降壓肽、雨蛙肽、緩激肽、心房尿鈉增加素(atrial natriuresisincreasing factor)、神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)、細(xì)胞生長(zhǎng)因子(例如EGF、TGF-β、PDGF、酸性FGF、堿性FGF)、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(例如NT-3、NT-4、CNTF、GDNF、BDNF)、內(nèi)皮素拮抗肽及其類似物(衍生物)(EP-436189、EP-457195、EP-496452、日本專利未審公開(kāi)號(hào)94692/1991和1300299/1991)、胰島素受體、胰島素樣生長(zhǎng)因子(IGF)-1受體、IGF-2受體、轉(zhuǎn)鐵蛋白受體、表皮生長(zhǎng)因子、低密度脂蛋白(LDL)受體、巨噬細(xì)胞清除受體、GLUT-4轉(zhuǎn)運(yùn)子、生長(zhǎng)激素受體、瘦素(leptin)受體內(nèi)化抑制性MHC-I(主要組織相容性抗原復(fù)合物)α1結(jié)構(gòu)域衍生肽(美國(guó)國(guó)家科學(xué)院院報(bào)，第91卷，9086-9090頁(yè)(1994)；該雜志，94卷，11692-11697(1997))及其類似物(衍生物)，和這些肽的片段以及片段衍生物。
當(dāng)生物活性肽是鹽時(shí)，所述鹽例如是藥學(xué)上可接受的鹽。當(dāng)所述生物活性肽在分子結(jié)構(gòu)內(nèi)具有堿性基團(tuán)如氨基時(shí)，所述鹽包括該堿性基團(tuán)與無(wú)機(jī)酸(例如鹽酸、硫酸、硝酸、硼酸)、有機(jī)酸(例如碳酸、酸式碳酸、琥珀酸、醋酸、丙酸、三氟乙酸)等形成的鹽。當(dāng)該生物活性肽在其分子結(jié)構(gòu)內(nèi)具有酸性基團(tuán)如羧基時(shí)，所述鹽包括與無(wú)機(jī)堿性物質(zhì)(例如，堿金屬如鈉和鉀，堿土金屬如鈣和鎂)、有機(jī)堿性物質(zhì)(例如有機(jī)胺如三乙胺，堿性氨基酸如精氨酸)等生成的鹽。生物活性肽還可以形成金屬絡(luò)合化合物(例如銅絡(luò)合物、鋅絡(luò)合物)。
本發(fā)明所述生物活性肽的優(yōu)選實(shí)例包括LH-RH類似物或其鹽，這些LH-RH類似物或其鹽可以有效對(duì)抗LH-RH或其衍生激素依賴性疾病，例如前列腺癌、前列腺肥大、子宮內(nèi)膜異位、子宮肌瘤、子宮纖維瘤、青春期早熟和乳腺癌，并且可有效用于避孕；以及可以有效對(duì)抗生長(zhǎng)激素或其衍生激素依賴性疾病和胃腸道疾病(如消化道潰瘍)的促生長(zhǎng)激素抑制素衍生物或其鹽。
LH-RH類似物的實(shí)例包括，例如，公開(kāi)在《采用GnRH類似物的治療法探討和遠(yuǎn)景》(The Parthenon Pulishing Group ltd.,1996年出版)、日本特許公報(bào)號(hào)503165/1991、日本特許公開(kāi)號(hào)101695/1991、97334/1995和259460/1996等中的肽類。
具有LH-RH拮抗作用的生物活性肽(LH-RH拮抗劑)包括，例如，由通式[Ⅰa]表示的生物活性肽或其鹽X-D2Nal-D4ClPhe-D3Pal-Ser-A-B-Leu-C-Pro-DAlaNH2[X表示N(4H2-呋喃甲?；?Gly或NAc；A表示選自NMeTyr、Tyr、Aph(Atz)和NMeAph(Atz)的殘基；B表示選自DLys(Nic)、DCit、Dlys(AzaglyNic)、DLys(AzaglyFur)、DhArg(Et2)、DAph(Atz)和DhCi的殘基；C表示Lys(Nisp)、Arg或hArg(Et2)]。這些肽類物質(zhì)可以根據(jù)上述參考文獻(xiàn)或?qū)＠_(kāi)文本中所述的方法或基于這些方法來(lái)制備。
具有LH-RH激動(dòng)作用的生物活性肽(LH-RH激動(dòng)劑)包括，例如，由通式[Ⅱ]表示的生物活性肽或其鹽5-氧代-Pro-His-Trp-Ser-Tyr-Y-Leu-Arg-Pro-Z[Y表示選自DLeu、DAla、DTrp、DSer(tBu)、D2Nal和DHis(ImBzl)的殘基；Z表示NH-C2H5或Gly-NH2]。優(yōu)選其中Y是Dleu并且Z是NH-C2H5的肽。這些肽類物質(zhì)可以根據(jù)上述參考文獻(xiàn)或?qū)＠_(kāi)文本中所述的方法或基于這些方法來(lái)制備。
促生長(zhǎng)激素抑制素或其鹽的實(shí)例是公開(kāi)在，例如，美國(guó)國(guó)家科學(xué)院院報(bào)，第93卷，12513-12518頁(yè)(1996)以及在此引用的參考文獻(xiàn)中的那些。
在促生長(zhǎng)激素抑制素衍生物中，那些有對(duì)腫瘤的選擇性衍生物包括，例如，專利公開(kāi)文本公開(kāi)USP5,480,870和EP-0506800中所公開(kāi)的生物活性肽，及其鹽，例如 另外也優(yōu)選Sandostatin(USP4,087,390、4093,574、4,100,117和4,253,998)等。
在上述生物活性肽中，優(yōu)選是5-氧代-Pro-His-Trp-Ser-Tyr-DLeu-Leu-Arg-Pro-NH-C2H5(亮丙瑞林)或其鹽(特別是乙酸鹽)。
在此所用的縮寫名稱定義如下N(4H2-呋喃甲酰基)Gly:N-四氫呋喃甲?；拾彼釟埢鵑Ac:N-乙酰基D2Nal:D-3-(2-萘基)丙氨酸殘基D4ClPhe:D-3-(4-氯苯基)丙氨酸殘基D3Pal:D-3-(3-吡啶基)丙氨酸殘基NMeTyr:N-甲基酪氨酸殘基Aph(Atz):N-[5’-(3’-氨基-1’H-1’,2’,4’-三唑基)]苯基丙氨酸殘基NMeAph(Atz):N-甲基-[5’-(3’-氨基-1’H-1’,2’,4’-三唑基)]苯基丙氨酸殘基Dlys(Nic):D-(ε-N-煙?；?賴氨酸殘基Dcit:D-瓜氨酸殘基DLys(AzaglyNic):D-(氮雜甘氨?；鶡燉；?賴氨酸殘基Dlys(AzaglyFur):D-(氮雜甘氨?；秽?賴氨酸殘基DhArg(Et2):D-(N,N’-二乙基)高精氨酸殘基DAph(Atz):D-N-[5’-(3’-氨基-1’H-1’,2’,4’-三唑基)]苯基丙氨酸殘基DhCi:D-高瓜氨酸殘基Lys(Nisp):(ε-N-異丙基)賴氨酸殘基hArg(Et2):(N,N’-二甲基)高精氨酸殘基hSer(tBu):D-(O-叔丁基)絲氨酸殘基DHis(ImBzl):D-(π-芐基)組氨酸殘基上述氨基酸縮寫是基于IUPAC-IUB委員會(huì)對(duì)生物化學(xué)命名法[《歐洲生物化學(xué)雜志》第138卷，9-37頁(yè)(1984)]具體規(guī)定的縮寫或所屬技術(shù)領(lǐng)域常用的縮寫。當(dāng)氨基酸存在旋光異構(gòu)體時(shí)，除非另有說(shuō)明，其為L(zhǎng)構(gòu)型。
上述緩釋制劑中所采用的緩釋基質(zhì)材料優(yōu)選是生物可降解聚合物等物質(zhì)，例如由一種或多種類型的選自α-羥基羧酸(例如羥基乙酸、乳酸、羥基丁酸)、羥基二羧酸(例如蘋果酸)、羥基三羧酸(例如檸檬酸)等，以及含有游離羧基的物質(zhì)或它們的混合物合成得到的聚合物或共聚物；聚-α-氰基丙烯酸酯；聚氨基酸(例如聚-γ-芐基-L-谷氨酸)；和馬來(lái)酸酐共聚物(例如，苯乙烯-馬來(lái)酸共聚物)。
聚合作用的類型可以是無(wú)規(guī)、嵌段或接枝。當(dāng)上述α-羥基羧酸、α-羥基二羧酸和α-羥基三羧酸在其分子結(jié)構(gòu)內(nèi)具有旋光活性中心時(shí)，它們可以是D-、L-或DL-構(gòu)型。其中，優(yōu)選乳酸-羥基乙酸聚合物、聚-α-氰基丙烯酸酯等。更優(yōu)選乳酸-羥基乙酸聚合物。
優(yōu)選的生物可降解聚合物是生物可降解聚合物或由(A)羥基乙酸和通式Ⅱ所示羥基羧酸的共聚物與(B)聚乳酸的混合物組成的乳酸-羥基乙酸共聚物 [Ⅱ]其中R表示具有2-8個(gè)碳原子的烷基。
對(duì)于通式[Ⅱ],R所示的具有2-8個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基例如是乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、異戊基、新戊基、叔戊基、1-乙基丙基、己基、異己基、1,1-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、3,3-二甲基丁基和2-乙基丁基。優(yōu)選采用具有2-5個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基。所述烷基包括，例如，乙基、丙基、異丙基、丁基和異丁基。更優(yōu)選R是乙基。
通式[Ⅱ]所示的羥基羧酸例如是2-羥基丁酸、2-羥基戊酸、2-羥基-3-甲基丁酸、2-羥基己酸、2-羥基異己酸和2-羥基癸酸，優(yōu)選2-羥基丁酸、2-羥基戊酸、2-羥基-3-甲基丁酸和2-羥基己酸，更優(yōu)選2-羥基丁酸。盡管羥基羧酸可以是D-、L-或D,L-構(gòu)型，但優(yōu)選選用D-構(gòu)型和L-構(gòu)型的混合物，其中D-/L-構(gòu)型的比例(mol％)優(yōu)選約75/25-約25/75，更優(yōu)選約60/40-約40/60，并且特別優(yōu)選約55/45-約45/55。
對(duì)于羥基乙酸和通式[Ⅱ]所示羥基羧酸的共聚物(此后稱作羥基乙酸共聚物)，共聚的類型可以是無(wú)規(guī)、嵌段或接枝。優(yōu)選無(wú)規(guī)共聚物。
可以單獨(dú)使用通式[Ⅱ]所示的羥基羧酸，或者使用具有指定比例的一種或多種類型的混合物。
對(duì)于上述羥基乙酸共聚物(A)中羥基乙酸和通式[Ⅱ]所示羥基羧酸的含量比例，優(yōu)選羥基乙酸占約10-約75mol％，而羥基羧酸為余量。更優(yōu)選羥基乙酸是約20-約75mol％，并且特別優(yōu)選約40-約70mol％，同時(shí)羥基羧酸為余量。所示羥基乙酸共聚物的重均分子量一般為約2,000-約100,000，優(yōu)選約3,000-約80,000，并且更優(yōu)選約5,000-約50,000。羥基乙酸共聚物的分散度(重均分子量/數(shù)均分子量)優(yōu)選為約1.2-約4.0，優(yōu)選約1.5-約3.5。
上述羥基乙酸(A)可以通過(guò)已知制備方法如日本特許公開(kāi)號(hào)28521/1986所述方法制備。
雖然聚乳酸存在D-、L-構(gòu)型或它們的混合物，但優(yōu)選D-/L-構(gòu)型的比例(mol％)是約75/25-約20/80。更優(yōu)選的D-/L-構(gòu)型的比例(mol％)是約60/40-約25/75，并且特別優(yōu)選約55/45-約25/75。所述聚乳酸的重均分子量?jī)?yōu)選約1500-約100,000，更優(yōu)選約2,000-約80,000，并且特別優(yōu)選約3,000-約50,000或約10,000-約60,000(更優(yōu)選約15,000-約50,000)。另外，優(yōu)選的聚乳酸分散度是優(yōu)選為約1.2-約4.0，優(yōu)選約1.5-約3.5。
對(duì)于聚乳酸的制備，已知有兩種制備方法丙交酯(乳酸的二聚體)的開(kāi)環(huán)聚合反應(yīng)；和乳酸的脫水聚合縮合。
本發(fā)明制劑基質(zhì)材料中采用的羥基乙酸共聚物(A)和聚乳酸(B)是其中(A)/(B)比例(重量％)范圍在約10/90-約90/10的混合物。優(yōu)選的混合比例(重量％)是約20/80-約80/20，并且更優(yōu)選約30/70-約70/30。
如果組分(A)或(B)過(guò)量，所得制劑表現(xiàn)出的藥物釋放模式至多是單獨(dú)使用組分(A)或(B)時(shí)表現(xiàn)出的釋藥模式；在藥物釋放的最后階段，混合基質(zhì)材料表現(xiàn)出非線性的藥物釋放模式。盡管羥基乙酸和聚乳酸的分解/消除速率變化極大，依賴分子量或組成，通過(guò)提高所用聚乳酸的分子量或減小(A)/(B)的混合比例，可以延長(zhǎng)藥物釋放時(shí)間，這是由于羥基乙酸共聚物的分解/消除速率一般高于聚乳酸的分解/消除速率。相反地，通過(guò)減小所加聚乳酸的分子量或提高(A)/(B)的混合比例，可以縮短藥物釋放時(shí)間。也可以通過(guò)改變通式[Ⅱ]所示羥基羧酸的種類和含量比例來(lái)調(diào)節(jié)藥物釋放時(shí)間。
當(dāng)所用生物可降解聚合物是聚乳酸或乳酸-羥基乙酸共聚物(此后簡(jiǎn)稱為乳酸-羥基乙酸聚合物)時(shí)，乳酸/羥基乙酸的含量比例(mol％)優(yōu)選100/0-40/60，更優(yōu)選100/0-45/55，并且特別優(yōu)選100/0-50/50。
所示乳酸-羥基乙酸聚合物的重均分子量?jī)?yōu)選3,000-100,000，更優(yōu)選5,000-80,000。分散度(重均分子量/數(shù)均分子量)優(yōu)選約1.3-約4.0，更優(yōu)選約1.5-約3.5。
乳酸-羥基乙酸聚合物的分解/消除速率變化很大，這取決于組分或分子量。然而，通過(guò)降低羥基乙酸的比例或提高分子量可以延長(zhǎng)藥物釋放時(shí)間，這是因?yàn)槠浞纸?消除速率一般隨羥基乙酸比例的降低而推遲。相反地，通過(guò)提高羥基乙酸的比例或降低分子量可以縮短藥物釋放時(shí)間。為了獲得長(zhǎng)效型(例如1-6個(gè)月，優(yōu)選1-4個(gè)月)緩釋制劑(固體)，優(yōu)選采用那些含量比例和重均分子量處于上述范圍內(nèi)的乳酸-羥基乙酸聚合物。如果選擇了與含量比例和重均分子量介于上述范圍之中的那些相比分解速率更快的乳酸-羥基乙酸聚合物，則難以抑制藥物在初始時(shí)急劇釋放；如果選擇了與含量比例和重均分子量介于上述范圍之中的那些相比分解速率較慢的乳酸-羥基乙酸聚合物，似乎在某些階段內(nèi)無(wú)法釋放出有效量的藥物。
在此定義的重均分子量、數(shù)均分子量和分散度是基于聚苯乙烯的分子量和分散度通過(guò)凝膠滲透色譜法(GPC)測(cè)定的，其中采用重均分子量分別為120,000、52,000、22,000、9,200、5,050、2,950、1,050,580和162的9種聚苯乙烯作為參照物。測(cè)量時(shí)采用GPC柱KF80 4Lx2(Showa Denko制造)和RI監(jiān)測(cè)儀L-3300(Hitachi,Ltd.制造)，并且用氯仿作為流動(dòng)相。另外，通過(guò)將生物可降解聚合物溶解在丙酮-甲醇混合溶劑中，且用氫氧化鉀的醇溶液滴定該溶液，用酚酞作為指示劑以測(cè)出末端羧基的含量，由此計(jì)算出數(shù)均分子量。該分子量此后稱作基于端基定量法的數(shù)均分子量。
當(dāng)基于端基定量法的數(shù)均分子量是絕對(duì)分子量時(shí)，基于GPC的測(cè)量是一個(gè)相對(duì)值，它的變化取決于多種分析條件(例如流動(dòng)相的種類、柱的類型、參照物、片寬、基線)；因此，難以獲得這兩種數(shù)值的絕對(duì)示數(shù)。在聚合物的一個(gè)末端具有游離羧基的情況中，基于GPC測(cè)量法和基于端基定量法所得的數(shù)均分子量幾乎相互吻合，該情況中的聚合物是由乳酸和羥基乙酸通過(guò)無(wú)催化劑脫水聚合縮合反應(yīng)法制成。該事實(shí)意味著，基于端基定量法的數(shù)均分子量是基于GPC測(cè)量法結(jié)果的約0.5-約2倍，適宜為約0.7-約1.5倍。
所述“乳酸-羥基乙酸聚合物”可以通過(guò)，例如，無(wú)催化劑脫水聚合縮合法由乳酸和羥基乙酸制備，或通過(guò)開(kāi)環(huán)聚合反應(yīng)由丙交酯和環(huán)狀化合物如乙交酯開(kāi)始利用催化劑方式來(lái)制備(《生物材料學(xué)和生物工程學(xué)全書》A部材料學(xué)，第2卷，Marcel Dekker,Inc.,1995)。
雖然通過(guò)開(kāi)環(huán)聚合法制得的聚合物是不具有羧基的聚合物，但也可以使用通過(guò)化學(xué)處理該聚合物獲得末端游離羧基來(lái)制備聚合物[《控釋雜志》41卷，249-257(1996)]。
利用已知的制備方法(例如無(wú)催化劑脫水聚合縮合法，參見(jiàn)日本特許公開(kāi)號(hào)28521/1986)可以毫無(wú)問(wèn)題地制備在一個(gè)末端具有游離羧基的上述乳酸-羥基乙酸聚合物；也可以通過(guò)已知制備方法(例如參見(jiàn)專利公開(kāi)文本W(wǎng)O94/15587)制備具有其它游離羧基(不限于末端)的聚合物。
此外，開(kāi)環(huán)聚合后通過(guò)化學(xué)處理使其末端具有游離羧基的乳酸-羥基乙酸聚合物可以是例如Boehringer Ingelheim KG.的市售產(chǎn)品。
適用于本發(fā)明制備方法的緩釋制劑懸浮液是通過(guò)加入下列阻凝劑制備的懸浮液。在MC的情況中，緩釋制劑懸浮液一般是約1mg-約300mg/ml，優(yōu)選約5mg-約1000mg/ml的MC。
用于本發(fā)明制備方法的緩釋制劑懸浮液是通過(guò)加入阻凝劑制備的懸浮液，所述阻凝劑例如是水溶性多糖[例如甘露糖醇、乳糖、葡萄糖、淀粉(如玉米淀粉)]、氨基糖(例如甘氨酸、丙氨酸)、蛋白質(zhì)(例如明膠、纖維蛋白、膠原)、無(wú)機(jī)鹽(例如氯化鈉、溴化鈉、碳酸鉀)或類似物質(zhì)。在這些阻凝劑中，優(yōu)選甘露糖醇類化合物，如D-甘露糖醇。
懸浮液所用的溶劑包括，例如，注射用水(例如通過(guò)蒸餾、超濾等制備的水)、UF水、RO水、離子交換水、揮發(fā)性溶劑(例如乙醇、丙酮)、聚乙二醇、植物油、礦物油或它們的混合物，其中優(yōu)選注射用水等。
此外，可以加入表面活性劑、增稠劑、pH調(diào)節(jié)劑等作為懸浮穩(wěn)定劑。適用的表面活性劑包括，例如聚山梨酸酯類化合物(如聚山梨酯80、聚山梨酯20)、Pluronic類(例如Pluronic F68(非專有權(quán)名稱聚氧乙烯[160]，聚氧丙烯[30]二醇等)，和聚氧乙烯硬化蓖麻油(例如聚氧乙烯硬化蓖麻油50，聚氧乙烯硬化蓖麻油60)。適用的增稠劑包括，例如羧甲基纖維素(例如CMC-K,CMC-Na)和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)。適用的pH調(diào)節(jié)劑包括，例如鹽酸、氫氧化鈉、乙酸、乳酸、氫氧化銨、碳酸鈉和碳酸氫鈉。
本發(fā)明制備方法所使用的凍干容器可以是任何容器，條件是它們適于冷凍干燥緩釋制劑如MC類制劑；如使用凍干托盤等。所述容器是由金屬(優(yōu)選不銹鋼(SUS316、304等)、玻璃或瓷器。此外，本發(fā)明所述制備方法所用的凍干容器可以是平板形狀。
所述凍干容器的大小可根據(jù)凍干規(guī)模作出適當(dāng)選擇。具體而言，凍干容器(1)寬約5mm-約10,000mm，長(zhǎng)約5mm-約10,000mm，并且深度是約0.1mm-約500mm；優(yōu)選(2)寬約5mm-約7,000mm，長(zhǎng)約5mm-約7,000mm，并且深度是約1mm-約100mm；更優(yōu)選(3)寬約5mm-約500mm，長(zhǎng)約5mm-約300mm，并且深度是約5mm-約100mm。雖然寬度/長(zhǎng)度/深度的比例沒(méi)有限制，通常相對(duì)于1個(gè)深度來(lái)說(shuō)，寬度約1-約20且長(zhǎng)度約1-約10，優(yōu)選寬度約1-約10且長(zhǎng)度約1-約6。
容器容量是例如約10ml-約100,00ml，優(yōu)選約100ml-約5,000ml，并且更優(yōu)選約3,000ml。
所述凍干容器是部分中空的，其作用是在凍干過(guò)程中用于抽吸，并且一般沒(méi)有頂板。
用于涂布在凍干容器上的抗水基質(zhì)材料例如是氟化乙烯樹(shù)脂(例如四氟乙烯樹(shù)脂、三氟乙烯樹(shù)脂、二氟乙烯樹(shù)脂)、1,1-二氟乙烯樹(shù)脂、六氟丙烯-四氟乙烯共聚樹(shù)脂、改性氟化樹(shù)脂、四氟乙烯樹(shù)脂-全氟烷氧基乙烯共聚樹(shù)脂，和四氟乙烯樹(shù)脂-乙烯共聚樹(shù)脂；優(yōu)選氟化乙烯樹(shù)脂(例如四氟乙烯樹(shù)脂、三氟乙烯樹(shù)脂、二氟乙烯樹(shù)脂)，特別是特氟隆(商品名)。
采用或基于已知方法可以將抗水基質(zhì)材料涂層在所述凍干容器上，所述方法具體如噴鍍法(plating)、蒸氣沉積法等。
本發(fā)明所述方法制備的固體緩釋制劑包括任何由本發(fā)明所述方法(即冷凍干燥法)制備的緩釋制劑。由本發(fā)明方法制備的固體緩釋制劑包括緩釋制劑粉末(例如，MC粉末)，另外也包括通過(guò)已知方法獲得的不同形式的緩釋制劑(例如顆粒形式、針狀形式等)。
本發(fā)明的制備方法在下文中詳細(xì)描述(1)用于制備固體緩釋制劑的制備方法，其特征在于在內(nèi)表面部分或全部用冰層涂層的凍干容器中冷凍干燥緩釋制劑(緩釋制劑懸浮液)。
適用于制備冰層的水例如是注射用水(如蒸餾水)和離子交換水。
用冰層涂層的部分是凍干容器內(nèi)表面的一部分或全部；例如，可以只是底部表面，整個(gè)底部和側(cè)面，只是一部分底部表面，或一部分的底部和側(cè)面。容器的外表面也可以用抗水基質(zhì)材料涂層。
凍干容器中的冰層厚度可以根據(jù)容器的尺寸、緩釋制劑(緩釋制劑懸浮液)的體積、凍干溫度和其它因素來(lái)作適當(dāng)選擇；例如，冰層厚度一般是容器深度的約1/1,000-約4/5，優(yōu)選約1/500-約1/5，更優(yōu)選約1/100-約1/10，并且特別優(yōu)選約1/10，冰層的厚度適宜不小于約0.01mm。更具體地說(shuō)，冰層厚度一般是約0.01mm-約400mm，優(yōu)選約0.01mm-約200mm，更優(yōu)選約0.01mm-約30mm，特別優(yōu)選約0.1mm-約30mm，極其優(yōu)選約0.1mm-約10mm，并且首選約1mm。
通過(guò)將水分配在托盤內(nèi)，并且通常是在約-80℃-約0℃下，優(yōu)選約-50℃-約0℃下冷凍來(lái)制成冰層。
冰層在凍干容器內(nèi)形成后，將緩釋制劑(緩釋制劑懸浮液)分配在容器內(nèi)，并且冷凍形成緩釋制劑(緩釋制劑懸浮液)的凍結(jié)層。
在微囊的情況中，緩釋制劑(緩釋制劑懸浮液)一般是約1mg-約300mg/ml，優(yōu)選約5mg-約1,000mg/ml微囊。
凍干容器內(nèi)的緩釋制劑(緩釋制劑懸浮液)的體積可以按照所用容器的尺寸、凍干溫度或其它因素作出適當(dāng)選擇；例如，緩釋制劑(緩釋制劑懸浮液)的凍結(jié)層的厚度一般是容器深度的1/1,000-約4/5，優(yōu)選約1/500-約1/5，更優(yōu)選約1/100-約1/10，并且特別優(yōu)選約1/10。緩釋制劑(緩釋制劑懸浮液)的體積也可以是每100ml容器容量中約0.1ml-約99.9ml，優(yōu)選約1ml-約90ml，并且更優(yōu)選約1ml-約40ml。當(dāng)自容器底部測(cè)量的冰層厚度約是1mm時(shí)，緩釋制劑(緩釋制劑懸浮液)的凍結(jié)層可以是該冰層厚度的約1-10倍，優(yōu)選約1-5倍。
例如，當(dāng)所用容器是寬約5mm-約7,000mm，長(zhǎng)約5mm-約7,000mm，并且深度是約1mm-約100mm時(shí)，冰層厚度一般是約0.01-約30mm，優(yōu)選約0.1mm-約30mm，更優(yōu)選約0.1mm-10mm，并且更優(yōu)選約1mm。另一方面，自冰層底面起始的緩釋制劑(緩釋制劑懸浮液)的凍結(jié)層的厚度是，例如約1mm-約20mm，優(yōu)選約2mm-約10mm，并且更優(yōu)選約4mm。
緩釋制劑(緩釋制劑懸浮液)的凍結(jié)層通過(guò)分配緩釋制劑(緩釋制劑懸浮液)來(lái)制備，所述緩釋制劑(緩釋制劑懸浮液)預(yù)先在冰層上冷卻至-10℃-約20℃，優(yōu)選約0℃-5℃，所述冰層一般被冷凍至約-80℃-約0℃，優(yōu)選約-50℃-約0℃。
由此在凍干容器內(nèi)制成兩層，即冰層和緩釋制劑(緩釋制劑懸浮液)的凍結(jié)層。
可利用常規(guī)已知方法獲得冷凍干燥；例如，可依公開(kāi)了微囊或微球的上述專利公開(kāi)文本指導(dǎo)。
優(yōu)選通過(guò)，例如在凍干容器中溫度等于或低于0℃(優(yōu)選-40℃-0℃，更優(yōu)選-20℃-0℃，更優(yōu)選-10℃-0℃)的還原條件下使凍干容器內(nèi)的凍結(jié)水完成升華，從而實(shí)現(xiàn)冷凍干燥。更準(zhǔn)確地說(shuō)，通過(guò)在凍干容器內(nèi)的溫度(盤架溫度)維持在等于或低于0℃(優(yōu)選-40℃-0℃，更優(yōu)選-20℃-0℃，更優(yōu)選-10℃-0℃)的還原條件下使凍干容器內(nèi)的凍結(jié)水完成升華，來(lái)實(shí)現(xiàn)冷凍干燥。
上述凍干容器的溫度(盤架溫度)是指裝有凍干樣本的容器溫度或與容器接觸的盤架的溫度。
當(dāng)凍干容器溫度(盤架溫度)維持在等于或低于0℃(優(yōu)選-40℃-0℃，更優(yōu)選-20℃-0℃，更優(yōu)選-10℃-0℃)時(shí)，該溫度應(yīng)保持約0.1小時(shí)以上，優(yōu)選約1小時(shí)-約500小時(shí)，更優(yōu)選約5小時(shí)-約100小時(shí)，目的在于使凍干容器中的凍結(jié)水完成升華。
在上述冷凍干燥方法下，凍結(jié)的水是在等于或低于0℃的溫度下升華，也就是低于共晶點(diǎn)或熔點(diǎn)的溫度，冰在該溫度下不發(fā)生融化，由此冷凍干燥法能夠防止凍干餅崩散，防止在凍干容器外側(cè)周圍的MC粉末分散，從而獲得高收率的MC粉末和高質(zhì)量的MC粉末。
(2)用于制備固體緩釋制劑的制備方法，其特征在于在內(nèi)表面部分或全部涂層有抗水基質(zhì)材料的凍干容器中冷凍干燥緩釋制劑(緩釋制劑懸浮液)。
用抗水基質(zhì)材料涂層的部分是凍干容器內(nèi)表面的一部分或全部；例如，可以只是底部表面，整個(gè)底部和側(cè)面，只是一部分的底部表面，或只是一部分的底部和側(cè)面。容器的外表面也可以用抗水基質(zhì)材料涂層。
緩釋制劑(緩釋制劑懸浮液)被分配在容器內(nèi)并且冷凍形成緩釋制劑(緩釋制劑懸浮液)的凍結(jié)層。
在微囊的情況中，所述緩釋制劑(緩釋制劑懸浮液)一般是約1mg-約300mg/ml，優(yōu)選約1mg-約300mg/ml微囊。
凍干容器內(nèi)的緩釋制劑(緩釋制劑懸浮液)的體積可以按照所用容器的尺寸、凍干溫度或其它因素作出適當(dāng)選擇；例如，緩釋制劑(緩釋制劑懸浮液)的凍結(jié)層的厚度一般是容器深度的1/1,000-約4/5，優(yōu)選約1/500-約1/5，更優(yōu)選約1/100-約1/10，并且特別優(yōu)選約1/10。緩釋制劑(緩釋制劑懸浮液)的體積也可以是每100ml容器容量的約0.1ml-約99.9ml，優(yōu)選約1ml-約90ml，并且更優(yōu)選約1ml-約40ml。當(dāng)自容器底部測(cè)量的冰層厚度約為1mm時(shí)，緩釋制劑(緩釋制劑懸浮液)的凍結(jié)層可以是該冰層厚度的約1-10倍，優(yōu)選約1-5倍。
例如，當(dāng)所用容器是寬約5mm-約7,000mm，長(zhǎng)約5mm-約7,000mm，并且深度是約1mm-約100mm時(shí)，冰層厚度一般是約0.01-約30mm，優(yōu)選約0.1mm-約30mm，更優(yōu)選約0.1mm-10mm，并且更優(yōu)選約1mm。另一方面，自冰層底面起始的緩釋制劑(緩釋制劑懸浮液)的凍結(jié)層的厚度是，例如約1mm-約20mm，優(yōu)選約2mm-約10mm，并且更優(yōu)選約4mm。
緩釋制劑(緩釋制劑懸浮液)的凍結(jié)層是通過(guò)分配緩釋制劑(緩釋制劑懸浮液)來(lái)制備，所述緩釋制劑(緩釋制劑懸浮液)預(yù)先在冰層上冷卻至-10℃-約20℃，優(yōu)選約0℃-5℃，所述冰層一般被冷凍至約-80℃-約0℃，優(yōu)選約-50℃-約0℃。
由此在凍干容器內(nèi)制成緩釋制劑(緩釋制劑懸浮液)的凍結(jié)層。
按照與制備方法(1)相同的方式實(shí)施冷凍干燥。
(3)用于制備固體緩釋制劑的制備方法，其特征在于在內(nèi)表面部分或全部涂層有抗水基質(zhì)材料和部分或全部用冰層涂層的凍干容器中冷凍干燥緩釋制劑(緩釋制劑懸浮液)。
此方法采用與制備方法(1)相同的方式進(jìn)行，但是除了用內(nèi)表面涂層有抗水基質(zhì)材料的凍干容器代替制備方法(1)中的凍干容器。
在此方法中，優(yōu)選至少是凍干容器的與緩釋制劑(緩釋制劑懸浮液)接觸的全部?jī)?nèi)表面部分用抗水基質(zhì)材料涂層。
本發(fā)明所述制備方法具有如下優(yōu)點(diǎn)(1)由于MC粉末不附著在托盤上，所以不需要在回收MC粉末時(shí)使用刮料裝置。
(2)由于避免了使用刮料裝置取出MC粉末的必要操作，由此縮短了回收MC粉末時(shí)在環(huán)境中暴露的時(shí)間，減小了微生物等侵入的危險(xiǎn)性。另外，由于縮短了在環(huán)境中的暴露時(shí)間，減小了就物理化學(xué)穩(wěn)定性而言的風(fēng)險(xiǎn)，因?yàn)樾杩刂芃C類物質(zhì)的含水量。
(3)由于避免了使用到料裝置取出MC粉末的必要操作，由此不會(huì)出現(xiàn)因托盤和刮料裝置之間的摩擦產(chǎn)生和引入外來(lái)物質(zhì)的危險(xiǎn)。
(4)由于減小了MC粉末和托盤之間的粘著，提高了MC的回收率。
(5)此外，通過(guò)上述冷凍干燥法，MC粉末更易于回收且收率更高。
如果需要，緩釋制劑(緩釋制劑懸浮液)通過(guò)本發(fā)明制備方法的冷凍干燥后，可以進(jìn)一步在不引起緩釋顆粒間相互粘連的還原條件下加熱，以除去緩釋制劑中的水分和有機(jī)溶劑。在這種情況中，優(yōu)選的懸浮液加熱溫度是略高于生物可降解聚合物的中間玻璃化點(diǎn)，這可以利用差示掃描量熱計(jì)在10-20℃/分鐘的升溫速率下測(cè)定。更優(yōu)選將懸浮液在生物可降解聚合物的中間玻璃化點(diǎn)至高于玻璃化溫度約30℃的溫度范圍內(nèi)加熱。當(dāng)具體采用乳酸至羥基乙酸聚合物作為生物可降解聚合物時(shí)，優(yōu)選在中間玻璃化點(diǎn)至高于玻璃化點(diǎn)20℃的溫度范圍內(nèi)加熱該懸浮液，更優(yōu)選中間玻璃化點(diǎn)至高于玻璃化點(diǎn)10℃的溫度范圍。
當(dāng)緩釋制劑達(dá)到指定溫度后，盡管加熱時(shí)間依賴于緩釋制劑的量以及其它因素而變化，但優(yōu)選加熱時(shí)間為約12小時(shí)-約168小時(shí)，更優(yōu)選約48小時(shí)-約120小時(shí)，并且特別優(yōu)選約48小時(shí)-約96小時(shí)。
可以采用任何能夠均勻加熱緩釋制劑聚集體的加熱方法。
適用的熱干燥法包括，例如其中在恒溫室、流化床室、移動(dòng)室或烘干爐中進(jìn)行的熱干燥方法，和采用微波的熱干燥方法。在這些方法中，優(yōu)選在恒溫室內(nèi)進(jìn)行的熱干燥法。
由此獲得的凍干緩釋制劑(固體)物質(zhì)本身可以用于口服或非口服給藥，或用其作為起始原料制成多種劑型。具體如肌肉內(nèi)、皮下、內(nèi)臟和其它的可注射制劑或植入劑，經(jīng)鼻、直腸、子宮給藥的制劑和其它透皮制劑，口服制劑[例如固體制劑，例如膠囊(如硬膠囊、軟膠囊)，顆粒劑和粉劑；液體，例如糖漿劑，乳劑和混懸液]等。
例如，本發(fā)明的緩釋制劑(固體)可以通過(guò)懸浮在水中生成含水懸浮液來(lái)制成可注射制劑，所述的水中含有分散劑(例如表面活性劑如吐溫80和HCO-60，多糖如透明質(zhì)酸鈉、羧甲基纖維素和藻酸鈉)、防腐劑(例如對(duì)羥基苯甲酸甲酯、對(duì)羥基苯甲酸丙酯)、等滲劑(例如氯化鈉、甘露糖醇、山梨糖醇、葡萄糖、脯氨酸)等以產(chǎn)生水性懸浮液；或通過(guò)分散在植物油(如蓖麻油或玉米油)中生成油懸浮液，由此得到適用的緩釋可注射制劑(固體)。
當(dāng)使用本發(fā)明緩釋制劑(固體)的可注射懸浮液形式時(shí)，其粒徑應(yīng)選擇在須滿足分散度和通過(guò)針頭的必要條件的范圍內(nèi)。例如，平均粒徑一般為約0.1-300μm，優(yōu)選約1-150μm，并且更優(yōu)選2-100μm。
本發(fā)明的緩釋制劑(固體)可以制成為無(wú)菌制劑，所用方法是整個(gè)制造過(guò)程為無(wú)菌操作的制備方法，該方法采用γ射線滅菌；或利用加入防腐劑的制備方法；但不局限于這些方法。
由于毒性低，本發(fā)明的緩釋制劑(固體)可以在人或非人哺乳動(dòng)物(例如猴、牛、豬、狗、貓、小鼠、大鼠、兔子)中安全地使用。
盡管活性組分生物活性肽的種類、含量和劑型、生物活性肽的釋放時(shí)間、靶向疾病、被治療動(dòng)物的種屬、施用方法以及其它因素可能有很大變化，但可以將緩釋制劑(固體)的劑量設(shè)定在任何水平，條件是使生物活性物質(zhì)有效。在一個(gè)月緩釋制劑給藥的情況中，每次施用活性組分-生物活性肽的給藥劑量可優(yōu)選自約0.001mg-100mg/kg體重，更優(yōu)選約0.005mg-50mg/kg體重，特別優(yōu)選約0.01mg-10mg/kg體重/成人(推定為50kg體重)的范圍內(nèi)。
具體而言，當(dāng)用通式[Ⅰa]所示的LH-RH拮抗劑或通式[Ⅰb]所示的LH-RH激動(dòng)劑作為生物活性肽時(shí)，本發(fā)明的緩釋制劑(固體)可作為用于治療或預(yù)防激素依賴性疾病的藥物，所述激素依賴性疾病包括前列腺癌、前列腺肥大、子宮內(nèi)膜異位、子宮肌瘤、子宮纖維瘤、青春期早熟、乳腺癌、膽囊癌、子宮頸癌、慢性淋巴性白血病、慢性粒細(xì)胞白血病、結(jié)腸直腸癌、胃炎、何杰金氏病、惡性黑素瘤、轉(zhuǎn)移性/多發(fā)性骨髓瘤、非何杰金氏淋巴組織瘤、非小細(xì)胞肺癌、卵巢癌、消化道潰瘍、全身性真菌感染、小細(xì)胞肺癌、心瓣性疾病、乳腺病、多囊卵巢、不育癥、慢性排卵停止、婦女適當(dāng)排卵的誘導(dǎo)、痤瘡、閉經(jīng)(例如繼發(fā)性閉經(jīng))、卵巢和乳腺的囊性疾病(包括多囊卵巢)、婦科癌、卵巢過(guò)度雄性發(fā)育和多毛癥、經(jīng)胸腺芽生介導(dǎo)的T細(xì)胞產(chǎn)生所致的AIDS，和用于治療男性性犯罪罪犯的受精不能(infertilization)；用于避孕和緩解絕經(jīng)綜合征(PMS)癥狀的藥物；作為用于體外受精(IVF)的藥物，等等；特別是作為用于治療/預(yù)防前列腺癌、前列腺肥大、子宮內(nèi)膜異位、子宮肌瘤、子宮纖維瘤、青春期早熟等的藥物和避孕藥。
盡管活性組分生物活性肽的劑型、生物活性肽的預(yù)定釋放時(shí)間、靶向疾病、被治療動(dòng)物的種屬以及其它因素可能有很大變化，但可以將緩釋制劑(固體)的劑量設(shè)定在任何水平，條件是使生物活性物質(zhì)有效。在一個(gè)月緩釋制劑(固體)給藥的情況中，藥物每次給藥的劑量適宜地選自約0.001mg-10mg/kg體重/個(gè)成年人，更優(yōu)選約0.005mg-5mg/kg體重/個(gè)成人的范圍內(nèi)。
緩釋制劑(固體)每次的給藥劑量適宜選自約0.005mg-50mg/kg體重/個(gè)成年人，更優(yōu)選約0.01mg-30mg/kg體重/個(gè)成人的范圍內(nèi)。給藥的次數(shù)應(yīng)根據(jù)活性組分生物活性肽的種類、含量和劑型、生物活性肽的釋放時(shí)間、靶向疾病、被治療動(dòng)物的種屬以及其它因素等作適當(dāng)選擇，例如若干周1次，每月1次或若干月1次。
單獨(dú)地，將80ml所述MC懸浮液加入到無(wú)冰層的冷凍干燥托盤上，并且在約-30℃下完全凍結(jié)，隨后通過(guò)常規(guī)方法冷凍干燥。
凍干后，反轉(zhuǎn)各托盤，并且觀察所得凍干物質(zhì)的分離/回收情況。
當(dāng)使用具有冰層的凍干托盤時(shí)，可以很容易地由托盤取下凍干物質(zhì)，并且在托盤表面上未粘著有MC粉末。另一方面，當(dāng)采用無(wú)冰層的凍干托盤時(shí)，凍干物質(zhì)無(wú)法由托盤分離下來(lái)，并且MC粉末甚至在用刮料裝置回收后也粘著在托盤上。實(shí)施例2將80ml如參照實(shí)施例1制得的預(yù)冷卻至約5℃的MC懸浮液加入到預(yù)涂層有特氟隆(商品名)(一種抗水基質(zhì)材料)的冷凍干燥托盤(寬200mm，長(zhǎng)100mm，深20mm)中，并且在約-30℃下完全凍結(jié)，隨后通過(guò)常規(guī)方法冷凍干燥。
單獨(dú)地，將80ml所述MC懸浮液加入到未經(jīng)表面抗水處理的冷凍干燥托盤上，并且在約-30℃下完全凍結(jié)，隨后通過(guò)常規(guī)方法冷凍干燥。
凍干后，反轉(zhuǎn)各托盤，并且觀察所得凍干物質(zhì)的分離/回收情況。
當(dāng)使用具有表面抗水處理的凍干托盤時(shí)，可以很容易地由托盤取下凍干物質(zhì)，并且MC粉末不粘著在凍干托盤上。另一方面，當(dāng)采用未經(jīng)表面抗水處理的凍干托盤時(shí)，凍干物質(zhì)無(wú)法由托盤分離下來(lái)，并且MC粉末甚至在用刮料裝置回收后也粘著在托盤上。實(shí)施例3使用與實(shí)施例2中相同的特氟隆涂層的凍干托盤(寬200mm，長(zhǎng)100mm，深20mm)，用注射用水在-30℃下形成厚度約1mm的冰層。在托盤內(nèi)壁也形成冰層(冰襯層)。將80ml如參照實(shí)施例1制得的預(yù)冷卻至約5℃的MC懸浮液加入到托盤上，并且在約-30℃下完全凍結(jié)，隨后通過(guò)常規(guī)方法冷凍干燥。
單獨(dú)地，將80ml所述MC懸浮液加入到無(wú)冰層且無(wú)表面抗水處理的冷凍干燥托盤上，并且在約-30℃下完全凍結(jié)，隨后通過(guò)常規(guī)方法冷凍干燥。
凍干后，反轉(zhuǎn)各托盤，并且觀察所得凍干物質(zhì)的分離/回收情況。
當(dāng)使用具有表面抗水處理和冰層的凍干托盤時(shí)，可以很容易地由托盤取下凍干物質(zhì)，并且MC粉末不粘著在凍干托盤上。另一方面，當(dāng)采用未經(jīng)表面抗水處理且無(wú)冰層涂層的凍干托盤時(shí)，凍干物質(zhì)無(wú)法由托盤分離下來(lái)，并且MC粉末甚至在用刮料裝置回收后也粘著在托盤上。實(shí)施例4當(dāng)如表1所示地組合凍干托盤的大小和冰層厚度時(shí)，可以獲得與實(shí)施例1-3相類似的結(jié)果。
表1

實(shí)施例5加熱下，將15.1g亮丙瑞林乙酸鹽溶解在15.0g蒸餾水中。向該溶液內(nèi)加入單獨(dú)制備的323.6g乳酸-羥基乙酸共聚物(此后稱作PLGA)[乳酸/羥基乙酸=75/25(mol％)，重均分子量10,500](含有121g PLGA)的二氯甲烷溶液，隨后用微型混合器攪拌乳化2分鐘(轉(zhuǎn)速10,000rpm，混合物的溫度40℃或更低)。將該乳液冷卻至18℃-19℃，并且加入到25L預(yù)先制備的0.1％聚乙烯醇(PVA)的水溶液(18℃-19℃)中，進(jìn)而再次乳化。在輕輕攪動(dòng)該W/O/W乳液的條件下，經(jīng)約3小時(shí)除去溶劑。所得MC經(jīng)過(guò)75μm篩以除去粗顆粒，此后在少量蒸餾水的存在下經(jīng)90μm孔徑的篩子濕法篩分。向產(chǎn)物懸浮液中加入18.4g D-甘露糖醇并溶解，生成MC懸液。
在冷凍干燥托盤(寬170mm，長(zhǎng)260mm，深40mm)中，用注射用水在-30℃下形成厚度約2mm的冰層。將400ml上述制備的MC懸浮液加入到涂層有冰層的凍干托盤上，并且在約-30℃下完全凍結(jié)，隨后通過(guò)常規(guī)方法或按照下列實(shí)施例7所述的方法冷凍干燥。
由此方法獲得的凍干物質(zhì)易于由托盤上取下，同時(shí)在托盤表面上無(wú)MC粉末粘著。實(shí)施例6加熱下，將15.1g亮丙瑞林乙酸鹽溶解在13.0g蒸餾水中。向該溶液內(nèi)加入單獨(dú)制備的323.6g乳酸-羥基乙酸共聚物(此后稱作PLGA)[乳酸/羥基乙酸=75/25(mol％)，重均分子量10,500](含有121g PLGA)的二氯甲烷溶液，隨后用微型混合器攪拌乳化2分鐘(轉(zhuǎn)速10,000rpm，混合物的溫度40℃或更低)。將該乳液冷卻至18℃-19℃，并且加入到25L預(yù)先制備的0.1％聚乙烯醇(PVA)的水溶液(18℃-19℃)中，進(jìn)而再次乳化。在輕輕攪動(dòng)該W/O/W乳液的條件下，經(jīng)約3小時(shí)除去溶劑。所得MC經(jīng)過(guò)75μm篩以除去粗顆粒，此后在少量蒸餾水的存在下經(jīng)90μm孔徑的篩子濕法篩分。向產(chǎn)物懸浮液中加入18.4g D-甘露糖醇并溶解，生成MC懸液。
在冷凍干燥托盤(寬170mm，長(zhǎng)260mm，深40mm)中，用注射用水在-30℃下形成厚度約2mm的冰層。將400ml上述制備的MC懸浮液加入到帶有冰層的凍干托盤上，并且在約-30℃下完全凍結(jié)，隨后通過(guò)常規(guī)方法或按照下列實(shí)施例7所述的方法冷凍干燥。
由此方法獲得的凍干物質(zhì)易于由托盤上取下，同時(shí)在托盤表面上無(wú)MC粉末粘著。實(shí)施例7緩釋MC(1個(gè)月的制劑)懸浮液的應(yīng)用在凍干托盤(寬170mm，長(zhǎng)260mm，深40mm)中，用注射用水在-30℃下形成厚度約2mm的冰層。在托盤內(nèi)壁也形成冰層(冰襯里)。將200ml如參照實(shí)施例1制得的預(yù)冷卻至約5℃的MC懸浮液加入到托盤上，并且在約-30℃下完全凍結(jié)，隨后通過(guò)常規(guī)方法冷凍干燥。
當(dāng)MC懸浮液凍結(jié)后，將凍干裝置中的盤架溫度以20℃/小時(shí)的速率升高至-5℃，隨后令溫度保持在-5℃左右約20小時(shí)。當(dāng)冰層升華后，令盤架的溫度以20℃/小時(shí)的速率升高至51℃，隨后將溫度保持在51℃左右約48小時(shí)。
冷凍干燥后，觀察凍干餅的外觀和MC凍干冰的分離/回收情況。
未觀察到凍干MC餅崩碎，并且MC也未分配和分散在托盤外。凍干MC的餅易于由托盤上取下，同時(shí)在托盤表面上無(wú)MC粉末粘著。實(shí)施例8緩釋MC(3個(gè)月的制劑)懸浮液的應(yīng)用在凍干托盤(寬170mm，長(zhǎng)260mm，深40mm)中，用注射用水在-30℃下形成厚度約2mm的冰層。在托盤內(nèi)壁也形成冰層(冰襯里)。將200ml如參照實(shí)施例2制得的預(yù)冷卻至約5℃的MC懸浮液加入到托盤上，并且在約-30℃下完全凍結(jié)，隨后通過(guò)常規(guī)方法冷凍干燥。
當(dāng)MC懸浮液凍結(jié)后，將凍干裝置中的盤架溫度以20℃/小時(shí)的速率升高至-5℃，隨后令溫度保持在-5℃左右約20小時(shí)。當(dāng)冰層升華后，令盤架的溫度以20℃/小時(shí)的速率升高至51℃，隨后將溫度保持在51℃左右48小時(shí)。
未觀察到凍干MC餅崩碎，并且MC也未分配和分散在托盤外。凍干MC的餅易于由托盤上取下，同時(shí)在托盤表面上無(wú)MC粉末粘著。
工業(yè)實(shí)用性根據(jù)本發(fā)明的制備方法，顯著提高了固體緩釋制劑的回收率，因?yàn)閮龈扇萜骱凸腆w緩釋制劑之間不發(fā)生粘著，從而在回收固體緩釋制劑時(shí)無(wú)需刮擦。此外，由于縮短了在環(huán)境中的暴露時(shí)間，也改進(jìn)了固體緩釋制劑的無(wú)菌維持性。而且，通過(guò)應(yīng)用本發(fā)明的制備方法，該方法中包括在凍干容器內(nèi)溫度等于或低于0℃的還原條件下，使凍干容器內(nèi)的凍結(jié)水完成升華，可以防止凍干餅破碎，防止MC粉末分散，并且可以意外地回收得到具有良好形狀和高收率的凍干MC粉末。
權(quán)利要求
1．一種用于制備固體緩釋制劑的方法，其包括在內(nèi)表面部分或全部涂布有冰層或抗水基質(zhì)材料的凍干容器內(nèi)冷凍干燥緩釋制劑。
2．一種用于制備固體緩釋制劑的方法，該方法包括在凍干容器內(nèi)冷凍干燥緩釋制劑，其中該容器內(nèi)表面部分或全部用抗水基質(zhì)材料涂布，且被涂布的內(nèi)表面進(jìn)一步被部分或全部用冰層涂布。
3．根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其中所述內(nèi)表面只是底部表面。
4．根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其中所述凍干容器是托盤。
5．根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其中所述冰層的厚度是約0.01-約30mm。
6．根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其中所述抗水基質(zhì)材料是四氟乙烯樹(shù)脂、三氟乙烯樹(shù)脂、二氟乙烯樹(shù)脂、1,1-二氟乙烯樹(shù)脂、六氟丙烯-四氟乙烯共聚樹(shù)脂、改性氟化樹(shù)脂、四氟乙烯-全氟烷氧基乙烯共聚樹(shù)脂，或四氟乙烯-乙烯共聚樹(shù)脂。
7．根據(jù)權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)所述的方法，其中所述緩釋制劑是微球。
8．根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其包括在凍干容器內(nèi)的溫度等于或低于0℃的還原條件下使凍干容器內(nèi)的凍結(jié)水完成升華。
全文摘要
本發(fā)明提供一種用于制備固體緩釋制劑的方法,其特征在于在內(nèi)表面部分或全部用冰層或抗水基質(zhì)材料涂層的凍干容器內(nèi)冷凍干燥緩釋制劑(緩釋制劑懸浮液)。
文檔編號(hào)A61K9/19GK1288374SQ99802319
公開(kāi)日2001年3月21日 申請(qǐng)日期1999年1月20日 優(yōu)先權(quán)日1998年1月21日
發(fā)明者清水久義, 野野村宗夫, 布藤智康, 向井圭 申請(qǐng)人:武田藥品工業(yè)株式會(huì)社