專利名稱：酪氨酸激酶抑制劑和化學(xué)閹割聯(lián)合治療前列腺癌的制作方法
背景技術(shù)：
本發(fā)明涉及腫瘤學(xué)、內(nèi)分泌學(xué)、男科學(xué)和藥理學(xué)。
前列腺癌是男性中最常被確診的癌癥，在美國(guó)每年有近41000人因此而死亡(Parker，S.L.等人，(1996)，臨床癌癥雜志(CA Cancer J.Clin.)，655-27)。在早期，常常通過(guò)手術(shù)或放療來(lái)控制局限在臟器內(nèi)的前列腺癌，直至患者死于與此無(wú)關(guān)的原因。
癌癥如乳腺癌、結(jié)腸癌和腺癌的特征在于細(xì)胞快速分裂。通常，用可以抑制細(xì)胞快速分裂的化療藥物進(jìn)行治療從而修正這些癌變。相反，前列腺癌的特征不在于細(xì)胞快速分裂。所以，常規(guī)的化療藥物一般對(duì)前列腺癌僅具有很低的功效。
前列腺癌常常對(duì)激素處理敏感。目前被普遍接受的前列腺癌治療方法包括手術(shù)閹割、化學(xué)閹割或手術(shù)閹割與化學(xué)閹割聯(lián)用。在切除生產(chǎn)初級(jí)睪酮的器官—睪丸后，循環(huán)雄激素的水平降低至正常水平的5％以下。雄激素水平的這種降低抑制了前列腺瘤生長(zhǎng)。雖然手術(shù)閹割的抗腫瘤作用是直接的，但這種抗腫瘤作用卻是暫時(shí)性的。手術(shù)閹割常會(huì)導(dǎo)致非雄激素依賴型前列腺瘤細(xì)胞的克隆選擇。這使前列腺瘤以增生形式在無(wú)睪酮或DHT刺激的條件下再生(Isaacs等人(1981)，癌癥研究(Cancer Res.)415070-5075；Crawford等人(1989)新英格蘭醫(yī)學(xué)雜志(N.Eng.J.Med.)321419-424)。
化學(xué)閹割(也稱作藥物閹割)經(jīng)常取代初期治療時(shí)所用的手術(shù)閹割?；瘜W(xué)閹割的實(shí)施可以通過(guò)施用雌激素類藥物，如己烯雌酚(DES)；LHRH(促黃體素釋放激素)類似物，如醋酸亮丙瑞林(LUPRON)或醋酸戈舍瑞林(ZOLADEX)；甾類抗雄激素類藥物，例如醋酸環(huán)丙孕酮(CPA)；非甾類抗雄激素類藥物，例如氟他胺、尼魯米特或卡索他(CASODEX)；或聯(lián)用上述藥物來(lái)實(shí)現(xiàn)。
受體結(jié)合性酪氨酸激素是跨膜蛋白質(zhì)，它含有胞外配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域、跨膜序列和胞質(zhì)酪氨酸激酶結(jié)構(gòu)域。酪氨酸激酶的功能是傳遞細(xì)胞信號(hào)。細(xì)胞的增生、分化、遷移、代謝和編程性死亡都是酪氨酸激酶介導(dǎo)的細(xì)胞反應(yīng)的例子。
酪氨酸激酶涉及前列腺上皮細(xì)胞變形和腫瘤惡化。參與所述變形和惡化的酪氨酸激酶包括成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF)受體、上皮生長(zhǎng)因子(EGF)受體和血小板衍生的生長(zhǎng)因子(PDGF)受體。還有神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)受體、腦衍生神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)受體、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)蛋白-3(NT-3)受體和神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)蛋白-4(NT-4)受體。
美國(guó)專利5516771、5654427和5650407探討了吲哚并咔唑型酪氨酸激酶抑制劑和前列腺癌。美國(guó)專利5475110、5591855和5594009以及WO96/11933探討了稠合的吡咯并咔唑型酪氨酸激酶抑制劑和前列腺癌。發(fā)明概述迄今已意外的發(fā)現(xiàn)，酪氨酸激酶抑制劑是通過(guò)非激素依賴性機(jī)制而發(fā)揮其對(duì)哺乳動(dòng)物前列腺癌的抗腫瘤作用的。還進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)，酪氨酸激酶抑制劑療法和抗激素療法的聯(lián)用具有協(xié)同作用。
基于上述發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明提供一種治療哺乳動(dòng)物如人體中前列腺癌的方法，該方法包括給哺乳動(dòng)物施用治療有效量的酪氨酸激酶抑制劑，并且同時(shí)給哺乳動(dòng)物施用化學(xué)閹割劑。酪氨酸激酶抑制劑和化學(xué)閹割劑可以協(xié)同地抑制前列腺瘤的發(fā)展。優(yōu)選的酪氨酸激酶抑制劑包括吲哚并咔唑類化合物。優(yōu)選的吲哚并咔唑類化合物包括下列化合物
化合物II-4-LAE是化合物II-4的賴氨?；?β-丙氨酸酯，或該酯的可藥用鹽，如二鹽酸鹽?；衔颕I-12公開(kāi)在美國(guó)專利4923986中(“化合物20”)?；衔颕I-4公開(kāi)在美國(guó)專利5461146中。化合物II-4-LAE公開(kāi)在美國(guó)專利5650407(實(shí)施例14)中。酪氨酸激酶抑制劑也可以是稠合的吡咯并咔唑類化合物。酪氨酸激酶抑制劑可以通過(guò)任何適當(dāng)?shù)耐緩嚼缈诜蚍悄c道途徑給藥。
適用于本發(fā)明的化學(xué)閹割劑包括雌激素類藥物；LHRH激動(dòng)劑，如醋酸亮丙瑞林(LUPRON)或醋酸戈舍瑞林(ZOLADEX)；LHRH拮抗劑類藥物，例如ANTIDE(Ares-Serono)和GANIRELIX(AkzoNobel)；抗雄激素類藥物，例如氟他胺和尼魯米特。
酪氨酸激酶抑制劑和化學(xué)閹割劑可以以獨(dú)立劑型給藥。另外，也可將它們配制在一起并以單一組合物給藥。
本發(fā)明還提供一種含有酪氨酸激酶抑制劑和化學(xué)閹割劑的組合物。組合物中的酪氨酸激酶抑制劑適宜是酪氨酸激酶A(trkA)抑制劑、酪氨酸激酶B(trkB)抑制劑或酪氨酸激酶C(trkC)抑制劑。組合物中優(yōu)選的酪氨酸激酶抑制劑是吲哚并咔唑。優(yōu)選的吲哚并咔唑是
另外，組合物中的酪氨酸激酶抑制劑也可以是稠合的吡咯并咔唑類化合物?？梢詫⒃摻M合物配制為口服給藥或非腸道給藥的制劑?；瘜W(xué)閹割劑可以是雌激素、LHRH類似物或抗雄激素，或是這些化合物中兩種或多種的混合物。組合物中優(yōu)選采用的LHRH類似物是醋酸亮丙瑞林。組合物中優(yōu)選采用的抗雄激素是氟他胺。組合物中的化學(xué)閹割劑可以是LHRH類似物和抗雄激素類藥物的混合物，例如醋酸亮丙瑞林和氟他胺的混合物。
在此所用的“化學(xué)閹割劑”是指(1)抑制血清雄激素生成的化合物，(2)阻斷血清雄激素與雄激素受體結(jié)合的化合物，或(3)抑制睪酮轉(zhuǎn)化為DHT的化合物，或兩種或多種此類化合物的混合物。
除非另有規(guī)定，在此所用的所有技術(shù)和科學(xué)術(shù)語(yǔ)具有本發(fā)明所屬技術(shù)領(lǐng)域普通技術(shù)人員所熟知的含意。在有矛盾的情況中，將以本申請(qǐng)(包括定義)為準(zhǔn)。在此提及的全部文獻(xiàn)、專利申請(qǐng)、專利和其它參考文獻(xiàn)均引入本文作為參考。
盡管類似于或等同于在此所述的所有方法和材料可以用于本發(fā)明的實(shí)踐或?qū)嶒?yàn)中，但優(yōu)選的方法和材料將如下所述。下列材料、方法和實(shí)施例僅作說(shuō)明，它們對(duì)本發(fā)明不構(gòu)成限定。本發(fā)明的其它特征和優(yōu)越性將由于說(shuō)明書(shū)的詳細(xì)說(shuō)明和權(quán)利要求書(shū)而顯而易見(jiàn)。附圖簡(jiǎn)述

圖1是大鼠活體內(nèi)前列腺瘤模型體系中的相對(duì)腫瘤體積(倍數(shù)變化)隨時(shí)間(天數(shù))變化的曲線圖。圓圈代表賦形劑對(duì)照組；向上的三角形代表單獨(dú)用化合物II-4治療的對(duì)照組；方形代表閹割對(duì)照組；向下的三角形代表化合物II-4/閹割聯(lián)合治療組?；衔颕I-4的劑量是10mg/kg，皮下注射。X軸上含有+號(hào)的矩形代表給藥化合物II-4的時(shí)間。
圖2是閹割大鼠中的相對(duì)腫瘤體積(Dunning H腫瘤中的倍數(shù)變化)隨時(shí)間(天)變化的曲線圖。圓圈代表賦形劑對(duì)照；方形代表化合物II-4。化合物II-4的給藥時(shí)間由X軸上的矩形表示。
圖3是已用化合物II-4預(yù)處理過(guò)的大鼠中的相對(duì)腫瘤體積(倍數(shù)變化)隨時(shí)間(天)變化的曲線圖。圓圈代表化合物II-4；方形代表化合物II-4/閹割治療?；衔颕I-4的給藥時(shí)間由X軸上的矩形表示。
圖4是大鼠活體內(nèi)前列腺瘤模型體系中的相對(duì)腫瘤體積(倍數(shù)變化)隨時(shí)間(天數(shù))變化的曲線圖。圓圈代表賦形劑對(duì)照組；向上的三角形代表單獨(dú)使用化合物II-12治療的對(duì)照組；方形代表接受醋酸亮丙瑞林(LUPRON)化學(xué)閹割的對(duì)照組；向下的三角形代表化合物II-12/醋酸亮丙瑞林的聯(lián)合治療?；衔颕I-4的劑量是10mg/kg，每天2次，口服。X軸上的矩形代表化合物II-12的給藥時(shí)間。發(fā)明詳述酪氨酸激酶抑制劑和化學(xué)閹割劑的聯(lián)合給藥可以采用將各自獨(dú)立的制劑，即酪氨酸激酶制劑和化學(xué)閹割劑制劑并行給藥。如果給藥時(shí)間能夠使酪氨酸激酶抑制劑和化學(xué)閹割劑的藥理學(xué)活性在接受治療的哺乳動(dòng)物中同時(shí)出現(xiàn)，那么這種給藥時(shí)間就是獨(dú)立制劑“并行”給藥。
在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，酪氨酸激酶抑制劑和化學(xué)閹割劑的聯(lián)合給藥是通過(guò)將它們配制在單一組合物中來(lái)實(shí)現(xiàn)的。
酪氨酸激酶抑制劑的優(yōu)選劑量是1μg/kg-1g/kg體重/天。更優(yōu)選的酪氨酸激酶抑制劑的劑量是0.01mg/kg-100mg/kg體重/天。酪氨酸激酶抑制劑的最佳劑量將取決于多種因素，例如前列腺癌的類型和惡化程度，患者的全身健康狀態(tài)，酪氨酸激酶抑制劑的效能和給藥途徑。對(duì)酪氨酸激酶抑制劑劑量進(jìn)行最佳選擇是所屬領(lǐng)域普通技術(shù)人員的常識(shí)。
適用于本發(fā)明的酪氨酸激酶抑制劑有多種，它們是本領(lǐng)域中已知的。本發(fā)明優(yōu)選的酪氨酸激酶抑制劑是酪氨酸激酶A抑制劑、酪氨酸激酶B抑制劑或酪氨酸激酶C抑制劑。適當(dāng)?shù)倪胚岵⑦沁蝾惱野彼峒っ敢种苿┛梢愿鶕?jù)文獻(xiàn)所公開(kāi)的信息獲得，所述文獻(xiàn)例如是Dionne等人的美國(guó)專利5516771、Dionne等人的美國(guó)專利5654427、Lewis等人的美國(guó)專利5461146以及Mallamo等人的美國(guó)專利5650407。
在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，按照下列方法配制化合物II-4-LAE并對(duì)病人給藥。將化合物II-4-LAE(二鹽酸鹽)和適當(dāng)量的等滲甘露糖醇溶解在蒸餾水中，將pH調(diào)至約3.5。將該溶液冷凍干燥成粉末。為了儲(chǔ)存且便于使用，制成含有27.5mg化合物II-4-LAE和55mg甘露糖醇的等份凍干粉。在使用時(shí)，將等份凍干粉重新溶解在注射用滅菌水(USP)中，得到1.1ml含有50mg/ml甘露醇和25mg/ml化合物II-4-LAE(二鹽酸鹽)的溶液。隨后用適當(dāng)體積的5％葡萄糖注射液(USP)稀釋該溶液，以便使預(yù)定劑量的化合物II-4-LAE通過(guò)靜脈內(nèi)輸注在約1小時(shí)內(nèi)給藥。此過(guò)程中化合物II-4-LAE的劑量一般以1mg/m2/天開(kāi)始并且逐漸增加至例如64mg/m2/天或501mg/m2/天，同時(shí)監(jiān)測(cè)患者的病情狀況。
已知有多種化學(xué)閹割劑。適用于本發(fā)明的已知化學(xué)閹割劑有時(shí)被分成如下幾類雌激素，促黃體素釋放激素(LHRH)激動(dòng)劑、LHRH拮抗劑和抗雄激素?？剐奂に剡€可以進(jìn)一步分為甾類和非甾類化合物。
雌激素如己烯雌酚(DES)能夠使性激素-結(jié)合球蛋白的含量和血漿催乳激素的含量升高。由此通過(guò)負(fù)反饋反應(yīng)而減少LH分泌和睪丸睪酮合成。DES的劑量通常為1mg/天-5mg/天。應(yīng)當(dāng)避免使用較高劑量的DES，因?yàn)橛锌赡馨l(fā)生危及心血管的并發(fā)癥。
適用于本發(fā)明的LHRH激動(dòng)劑是醋酸亮丙瑞林，市售產(chǎn)品為L(zhǎng)UPRON(Takeda Abbott Pharmaceuticals，Inc.)。醋酸亮丙瑞林的化學(xué)名稱為5-氧代-L-脯氨?；?L-組氨?；?L-色氨酰基-L-絲氨?；?L-酪氨酰基-D-亮氨?；?L-亮氨酰基-L-精氨?；?N-乙基-脯氨酰胺醋酸(鹽)。作為L(zhǎng)HRH激動(dòng)劑，當(dāng)連續(xù)且以治療劑量給藥時(shí)，醋酸亮丙瑞林是一種有效的抑制促性腺素分泌的抑制劑。這種作用會(huì)因中止給藥醋酸亮丙瑞林而得以逆轉(zhuǎn)。
醋酸亮丙瑞林，例如LUPRON DEPOT一定是通過(guò)負(fù)反饋機(jī)制起作用的。在人體中，每天皮下給藥單劑量醋酸亮丙瑞林可引起血清促黃體素(LH)水平開(kāi)始增高。在男性中，在開(kāi)始給藥醋酸亮丙瑞林后的2-4周內(nèi)，血清睪酮下降至閹割水平。
當(dāng)在本發(fā)明中使用時(shí)，醋酸亮丙瑞林是經(jīng)皮下、肌肉內(nèi)或靜脈內(nèi)給藥。例如，可以每天皮下注射醋酸亮丙瑞林1mg。在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，醋酸亮丙瑞林是以延效型制劑給藥的。延效型制劑一般在較長(zhǎng)的時(shí)間如1-4個(gè)月內(nèi)提供緩釋的藥物。延效型制劑的實(shí)例包括含有醋酸亮丙瑞林、純化明膠、DL-乳酸和乙醇酸共聚物以及D-甘露糖醇的微球混懸劑。所述微球可以懸浮在含有羧甲基纖維素鈉、D-甘露糖醇和水的載體中。市售的這種延效型制劑稱作LUPRONDEPOTTM(Takeda Abbott Pharmaceuticals)并且適合肌肉內(nèi)注射。
另一種適用于本發(fā)明的LHRH激動(dòng)劑是醋酸戈舍瑞林，市售產(chǎn)品稱作ZOLADEX(Zeneca)。醋酸戈舍瑞林的化學(xué)結(jié)構(gòu)是焦-Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Ser-(But)-Leu-Arg-Pro-Azgly-NH2醋酸鹽。ZOLADEX是一種可在28天內(nèi)連續(xù)釋放的皮下注射用制劑。
適用于本發(fā)明的LHRH拮抗劑的例子是ANTIDE(Ares-Serono)，其化學(xué)名稱是D-丙氨酰胺N-乙?；?3-(2-萘基)-D-丙氨酰基-4-氯-D-苯基丙氨?；?3-(3-吡啶基)-D-丙氨酰基-L-絲氨?；?N6-(3-吡啶基羰基)-L-賴氨酰基-N6-(3-吡啶基羰基)-D-賴氨?；?L-亮氨酰基-N6-(1-甲基乙基)-L-賴氨?；?L-脯氨酰。另一個(gè)適當(dāng)?shù)腖HRH拮抗劑的例子是GANIRELIX(Roche/Akzo Nobel)，其化學(xué)名稱為N-Ac-D-Nal，D-pCl-Phe，D-Pal，D-hArg(Et)2，hArg(Et)2，D-Ala。
甾類抗雄激素的例子是醋酸環(huán)丙孕酮(CPA)和醋酸甲地孕酮，市售產(chǎn)品稱作MEGACE(Bristol-Myers Oncology)。甾類抗雄激素可以封閉前列腺雄激素受體。它們也能夠抑制LH的釋放。對(duì)病人給藥CPA的適當(dāng)給藥劑量是100mg/天-250mg/天。
非甾類抗雄激素可封閉雄激素受體。它們還能夠引起血清LH水平和血清睪酮水平升高。優(yōu)選的非甾類抗雄激素藥物是氟他胺(2-甲基-N-[4-硝基-3-(三氟甲基)苯基]丙酰胺)，市售產(chǎn)品稱作EULEXIN(Schering Corp.)。氟他胺通過(guò)抑制雄激素?cái)z取，通過(guò)抑制靶組織中核結(jié)合雄激素，或通過(guò)這兩種方式來(lái)發(fā)揮其抗雄激素的作用。氟他胺通常以例如膠囊劑型經(jīng)口服給藥。氟他胺的劑量例如是250mg，每天3次，即每天共750mg。
另一種非甾類抗雄激素是尼魯米特，其化學(xué)名稱為5，5-二甲基-3-[4-硝基-3-(三氟甲基-4’-硝基苯基)-4，4-二甲基咪唑啉二酮。當(dāng)本發(fā)明使用尼魯米特時(shí)，尼魯米特的劑量可例如是每天300mg，隨后減少到150mg/天的劑量。
在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，化學(xué)閹割劑是LHRH激動(dòng)劑如醋酸亮丙瑞林和抗雄激素如氟他胺或尼魯米特的混合物。例如，醋酸亮丙瑞林可以經(jīng)皮下、肌肉內(nèi)或靜脈內(nèi)注射給藥，而同時(shí)經(jīng)口服給藥氟他胺。酪氨酸激酶抑制劑可以作為第三制劑單獨(dú)給藥，或者將酪氨酸激酶抑制劑與LHRH激動(dòng)劑或抗雄激素配制在一起。
另一種適用于本發(fā)明的非甾類抗雄激素是CASODEX。CASODEX的給藥劑量例如是5mg-500mg/天，優(yōu)選約50mg/天。
本發(fā)明所述的組合制劑的例子是在一個(gè)用于口服給藥的膠囊中含有1-20mg化合物II-12和100-1000mg氟他胺，每天給患者服用1次、2次或3次。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，為了提高化合物II-12的生物利用度，該制劑包括含有配比為1∶1(v/v)的吐溫80和聚乙二醇的賦形劑。在一些實(shí)施方案中，通過(guò)肌肉內(nèi)注射醋酸亮丙瑞林延效注射劑如LUPRON DEPOT來(lái)對(duì)上述化合物II-12/氟他胺的口服制劑進(jìn)行補(bǔ)充。另一種酪氨酸激酶抑制劑例如化合物II-4或化合物II-4-LAE可以用于取代該制劑中的化合物II-12。本發(fā)明所述組合制劑的其它例子是在適合靜脈內(nèi)輸注的單劑量溶液中含有化合物II-12、化合物II-4或化合物II-4-LAE以及化學(xué)閹割劑。
可以將酪氨酸激酶抑制劑和化學(xué)閹割劑各自或一起與可藥用無(wú)毒賦形劑和載體混合而制成藥物組合物。如此制得的組合物適用于非腸道給藥，優(yōu)選以液體溶液或混懸劑形式；口服給藥，優(yōu)選以液體、片劑或膠囊形式；或經(jīng)鼻給藥，優(yōu)選以粉末、滴鼻劑或氣溶膠形式。
上述組合物通常以單位劑型給藥并且可以通過(guò)任何本領(lǐng)域已知方法制備。這些方法公開(kāi)在例如《Remington氏藥物科學(xué)》(Mack Pub.Co.，Easton，Pa.，1980)中。
口服給藥的液體劑型包括可藥用乳液、微乳液、溶液、混懸劑、糖漿劑和酏劑。除了含有活性化合物以外，液體劑型可以含有所屬領(lǐng)域常用的惰性稀釋劑，例如水或其它溶劑，增溶劑和乳化劑如乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、醋酸乙酯、芐醇、苯甲酸芐酯、丙二醇、1，3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油(具體如棉籽油、花生油、玉米油、胚油、橄欖油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氫呋喃、聚乙二醇和脫水山梨糖醇脂肪酸酯及其混合物。除了惰性稀釋劑以外，口服組合物還可以含有輔料如濕潤(rùn)劑、乳化劑或懸浮劑、增甜劑、矯味劑和芳香劑。
通過(guò)在生物可降解聚合物如聚丙交酯-聚乙交酯中形成藥物微囊基質(zhì)可以制得可注射延效劑型。根據(jù)藥物與聚合物的比例和所用具體聚合物的性質(zhì)，可以調(diào)控藥物的釋放速率。其它生物可降解聚合物的例子包括聚原酸酯類化合物和聚酐類化合物。也可以通過(guò)將藥物包入與機(jī)體組織相容的脂質(zhì)體或微乳液中來(lái)制得延效型可注射制劑。
口服給藥用固體制劑包括膠囊、片劑、丸劑、粉劑和顆粒劑。在這些固體劑型中，活性化合物與至少一種惰性可藥用賦形劑或載體如檸檬酸鈉或磷酸二鈣和/或a)填充劑或增量劑如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖醇和硅酸，b)粘合劑如羧甲基纖維素、藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯膠，c)濕潤(rùn)劑如甘油，d)崩解劑如瓊脂、碳酸鈣、土豆或木薯淀粉、藻酸、某些硅酸鹽和碳酸鈉，e)溶液阻滯劑如石蠟，f)吸收促進(jìn)劑如季銨化合物，g)保濕劑如鯨蠟醇和甘油單硬脂酸酯，h)吸收劑如高嶺土和膨潤(rùn)土，和i)潤(rùn)滑劑如滑石、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、固體聚乙二醇、十二烷基硫酸鈉及其混合物，混合在一起。在膠囊、片劑和丸劑的劑型中還可包含緩沖劑。相似類型的固體組合物還可以作為填充劑與上述賦形劑如乳糖或奶糖以及高分子量聚乙二醇等一起填充在軟膠囊和硬膠囊中。
固體劑型片劑、錠劑、膠囊、丸劑和顆粒劑還可以帶有包衣和殼層，例如腸溶包衣和制藥領(lǐng)域中已知的其它涂層。它們可以任選地含有不透明劑，并且也可以是僅在或優(yōu)先在腸道某部分任選地以延遲方式釋放活性組分的組合物。適用的包埋用組合物的例子中含有高分子物質(zhì)和蠟。
相似類型的固體組合物還可以作為填充劑與上述賦形劑如乳糖或奶糖以及高分子量聚乙二醇等一起填充在軟明膠和硬明膠膠囊中。
活性化合物還可以與上述一種或多種賦形劑一起形成微囊劑型。在固體劑型中，活性化合物可與至少一種惰性稀釋劑如蔗糖、乳糖或淀粉混合在一起。在常規(guī)生產(chǎn)中，這種劑型除了含有惰性稀釋劑以外也可含有附加物質(zhì)，例如壓片潤(rùn)滑劑和其它壓片助劑如硬脂酸鎂和微晶纖維素。在膠囊、片劑和丸劑的情況中，這些劑型中還可以含有緩沖劑。它們?nèi)芜x地含有不透明劑，并且也可以是僅在或優(yōu)先在腸道某部分任選地以延遲方式釋放活性組分的組合物。適用的包埋用組合物的例子中含有高分子物質(zhì)和蠟。
本發(fā)明將通過(guò)下列實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明。這些實(shí)施例只起說(shuō)明目的，它們不以任何方式對(duì)本發(fā)明的范圍和內(nèi)容構(gòu)成限定。實(shí)施例實(shí)施例1化合物II-4結(jié)合手術(shù)閹割從聯(lián)合采用酪氨酸激酶抑制劑給藥與手術(shù)閹割的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)獲得的數(shù)據(jù)被認(rèn)為與酪氨酸激酶抑制劑給藥與化學(xué)閹割的聯(lián)合治療有關(guān)。
在這些實(shí)驗(yàn)中，選用Dunning R-3327H腫瘤(衍生自成年哥本哈根大鼠的特發(fā)型前列腺瘤)，因?yàn)樗鼈儗?duì)雄激素具有敏感性且生長(zhǎng)速率緩慢(Isaacs，1989，癌癥研究(Cancer Res.)496290-6294)。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中認(rèn)為，對(duì)大鼠的Dunning H腫瘤進(jìn)行手術(shù)閹割幾乎可以立刻使腫瘤生長(zhǎng)停止，隨后在閹割后約5-6周時(shí)對(duì)雄激素不敏感的腫瘤發(fā)生消退(Isaacs等人，(1981)，癌癥研究，415070-5075)。
化合物II-4所誘發(fā)的Dunning H腫瘤的消退并不歸因于該化合物對(duì)雄激素水平的作用，因?yàn)樵搶?shí)驗(yàn)是在體內(nèi)植入了睪酮釋放硅橡膠膠囊的大鼠上進(jìn)行的。設(shè)計(jì)植入該膠囊的目的是為了使循環(huán)睪酮維持在生理水平。在實(shí)驗(yàn)?zāi)┢跍y(cè)得的血清睪酮水平證實(shí)睪酮≥1-2ng/ml。
下列實(shí)驗(yàn)有三個(gè)目的1)為了測(cè)定化合物II-4給藥與手術(shù)閹割的聯(lián)合是否能夠產(chǎn)生比單獨(dú)采用化合物II-4或手術(shù)閹割更高的抗腫瘤效能；2)為了確定化合物II-4是否能夠引起經(jīng)過(guò)預(yù)先閹割宿主動(dòng)物而已有選擇地對(duì)激素不敏感的Dunning H腫瘤發(fā)生消退；和3)測(cè)試腫瘤在用化合物II-4處理若干個(gè)給藥周期后是否仍然對(duì)手術(shù)閹割敏感。
化合物II-4由Cephalon，Inc.合成且將其配制(10mg/ml)于賦形劑中，所述賦形劑是在水(48％)中含有40％聚乙二醇(PEG 1000，Spectrum，Los Angeles，CA)、10％聚乙烯吡咯烷酮(C30，ISP Boundbrook，NJ)、2％芐醇(Spectrum，Los Angeles，CA)。
成年雄性近交哥本哈根大鼠(200-240g)得于Harlan SpragueDawley(Indianapolis，IN)且以每籠3只進(jìn)行飼養(yǎng)，讓這些大鼠可以隨意地獲得市售飼料(Purina Formulab 5001)和水。室內(nèi)的動(dòng)物處于受控濕度和溫度的條件下，并且接受12小時(shí)交替的光照/黑暗周期。在實(shí)驗(yàn)操作前1周對(duì)大鼠進(jìn)行檢疫。用套管針將大鼠前列腺癌Dunning R-3327 H瘤植入。處死長(zhǎng)有Dunning H腫瘤的成年雄性哥本哈根大鼠并分離出腫瘤。將腫瘤切片并將小片的腫瘤皮下接種在成年雄性哥本哈根大鼠體內(nèi)。
實(shí)驗(yàn)是按照J(rèn)ohns Hopkins大學(xué)動(dòng)物保護(hù)和使用協(xié)會(huì)協(xié)議No.RA91M517和Cephalon學(xué)院動(dòng)物保護(hù)和使用協(xié)會(huì)協(xié)議No.03-008的指導(dǎo)進(jìn)行的。
為了進(jìn)行手術(shù)閹割，給大鼠肌肉內(nèi)注射氯胺酮(KETAMINETM)(4.1mg/100g體重)和塞拉嗪(XYLAZINETM)(0.85mg/100g體重)將帶有移植Dunning H腫瘤的大鼠麻醉。將各大鼠背部向下放置。在陰囊后端的皮膚上劃出一個(gè)小切口(0.5-1cm)。另一個(gè)切口是將睪丸周圍的連接膜割開(kāi)。拉出附睪、睪丸、輸精管、精囊血管以及脂肪并把它們割下來(lái)。將其它組織放回囊內(nèi)，用自動(dòng)縫合夾封閉切口。術(shù)后5-7天除去自動(dòng)縫合夾。
將36只帶有Dunning H瘤(0.9-18cm3)的大鼠分成4組，每組9個(gè)動(dòng)物。第1組作為賦形劑對(duì)照組。第2組在第1天閹割。第3組按下列方法接受化合物II-4(10mg/kg，皮下)的注射。第4組在第1天閹割且按下列方法接受化合物II-4注射。給第1組和第3組在第1天時(shí)(在脅腹中)植入2厘米長(zhǎng)的填充有睪酮的密封硅橡膠管。這種尺寸的硅橡膠植入物適合在6個(gè)月的時(shí)間內(nèi)將血清睪酮長(zhǎng)期維持在1-3ng/ml的生理范圍內(nèi)。用化合物II-4經(jīng)皮下周期性對(duì)第3和第4組給藥(10mg/kg/天)，給藥周期為5天并且兩周期之間間隔約10天。即，在第1-5、14-18、29-33和42-46天給藥。以與化合物II-4治療組相同的給藥方案給第1組和第2組施用藥物賦形劑。
在第60天，從第2組中取8只動(dòng)物分為兩組，每組4只動(dòng)物。一組用化合物II-4以10mg/kg處理(皮下)5天，隨后停藥9天，再接受第二次為期5天的給藥(10mg/kg/天(皮下))。第2組以相同的給藥方案接受賦形劑。
在第60天從上述試驗(yàn)的第3組中取7只大鼠分為2組。一組(N＝3)大鼠接受閹割。兩組動(dòng)物均用化合物II-4以10mg/kg處理(皮下)5天，隨后停藥9天，再接受第二次為期5天的給藥。
用游標(biāo)卡尺在指定時(shí)間間隔測(cè)定麻醉(用異氟烷氣體麻醉約1-2分鐘)動(dòng)物的腫瘤的大小。用下列公式計(jì)算腫瘤體積V(cm3)＝0.5236×長(zhǎng)度(cm)×寬度(cm)[(長(zhǎng)度(cm)+寬度(cm))/2]。
利用Sigmastat程序，根據(jù)Dunnett氏試驗(yàn)、Mann-Witney秩和檢驗(yàn)法、配對(duì)t試驗(yàn)或有正負(fù)號(hào)的排列試驗(yàn)對(duì)顯著性進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
觀察到Dunning H腫瘤在未接受手術(shù)而只用賦形劑處理的大鼠中的生長(zhǎng)呈線性，并且在60天內(nèi)腫瘤體積增加了約3.5倍(圖1)。手術(shù)閹割引起腫瘤快速消退，即5天消退了25％。到第12天時(shí)在閹割大鼠中觀察到腫瘤再生，并且在第38天時(shí)曾消退的腫瘤體積已經(jīng)完全恢復(fù)了。
化合物II-4單獨(dú)給藥(10mg/kg，皮下，4個(gè)獨(dú)立的化合物II-4治療周期用藥物治療5天，隨后停藥約10天)引起腫瘤生長(zhǎng)完全被抑制或誘發(fā)腫瘤消退。在化合物II-4的各給藥周期(第5、19、34和47天；未給出數(shù)據(jù))后，接受藥物處理的動(dòng)物的平均腫瘤體積比接受賦形劑處理的對(duì)照動(dòng)物的明顯減小(p＜0.01)。此外，與各給藥周期開(kāi)始時(shí)相比，化合物II-4的各給藥周期均使腫瘤體積減小(未給出數(shù)據(jù))。
化合物II-4給藥和手術(shù)閹割的結(jié)合徹底抑制了腫瘤的生長(zhǎng)或誘發(fā)腫瘤消退(圖1)?？傊?，化合物II-4給藥和手術(shù)閹割的結(jié)合比單獨(dú)手術(shù)閹割更加有效。在活體內(nèi)觀察到在受閹割和未閹割動(dòng)物中停用化合物II-4后腫瘤均發(fā)生再生，然而，在受閹割動(dòng)物中的腫瘤再生得到了最大程度的減小(p＜0.01，圖1)。
上述結(jié)果證明，化合物II-4給藥可以與手術(shù)閹割聯(lián)合采用，從而最大程度和/最長(zhǎng)期地使活體內(nèi)接受的前列腺癌模型中的腫瘤發(fā)生消退。
進(jìn)行其它實(shí)驗(yàn)的目的是為了測(cè)定化合物II-4是否可以使因事先的雄激素去除而選擇出的對(duì)激素不敏感的腫瘤發(fā)生消退。在第60天時(shí)從上述實(shí)驗(yàn)(預(yù)先未用化合物II-4處理)的閹割組中取8只大鼠分為2組，每組4只。第1組用化合物II-4以10mg/kg處理(皮下)5天，隨后停藥9天，然后再接受第二次為期5天的皮下給藥10mg/kg/天。第2組以相同的給藥方案接受賦形劑。
用化合物II-4處理3天后閹割大鼠中的雄激素不敏感性DunningH腫瘤的生長(zhǎng)明顯降低(P＜0.05；圖2)。在第6天觀察到消退達(dá)到最大值(p＜0.05)。停藥使腫瘤再生。然而，即使在化合物II-4的第1個(gè)給藥周期結(jié)束后的10天內(nèi)，用化合物II-4處理的大鼠中的腫瘤體積也明顯小于用賦形劑處理的動(dòng)物中的腫瘤體積。經(jīng)事先的雄激素去除而選擇出的對(duì)激素不敏感的Dunning H腫瘤仍然對(duì)化合物II-4的抗腫瘤作用敏感。
實(shí)驗(yàn)還測(cè)定了對(duì)帶有Dunning H腫瘤的大鼠用化合物II-4進(jìn)行預(yù)處理是否能夠引起對(duì)隨后經(jīng)手術(shù)閹割的雄激素去除不敏感型腫瘤的選擇。在第60天從上述實(shí)驗(yàn)中的化合物II-4處理組中取7只大鼠，分成兩組。1組(N＝3)按照上述方式閹割。兩組均接受化合物II-4的處理，按10mg/kg，皮下處理5天，隨后停藥9天，再接受第二次為期5天的相同給藥方案。在接受了四個(gè)化合物II-4的預(yù)給藥周期和兩個(gè)并行處理周期后，手術(shù)閹割引起不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的腫瘤消退(圖3)。總之，數(shù)據(jù)表明，反復(fù)暴露在化合物II-4下并不能選擇出Dunning H腫瘤的雄激素不敏感種群。
閹割、化合物II-4處理以及化合物II-4處理和手術(shù)閹割的結(jié)合均可被很好的耐受。在用賦形劑或化合物II-4處理的對(duì)照和閹割組中均觀察到有限的死亡率。在各組中，在測(cè)定腫瘤時(shí)均有死亡出現(xiàn)，這被假設(shè)為麻醉過(guò)度。實(shí)施例2化合物-12與化學(xué)閹割的結(jié)合化合物II-12是由Cephalon，Inc.合成的，化合物II-12二鹽酸鹽被配制在含有3∶2(v/v)Gelucire(Gattefosse，Saint-Priest，F(xiàn)rance)和丙二醇(Spectrum，Gardena，CA)的賦形劑中。
本試驗(yàn)采用得自Harlan Sprague Dawley(Indianapolis，IN)的成年雄性近交哥本哈根大鼠(200-240g)。按照上述實(shí)施例1所述的方法進(jìn)行大鼠飼養(yǎng)和操作以及Dunning R-3327 H腫瘤的移植。
將46只帶有Dunning H瘤(腫瘤大小為1/6-33.2cm3)的大鼠(體重380±8g)分成4組。第1組(N＝12)作為賦形劑對(duì)照組(1ml/kg，口服，每天2次，第0-20天和31-45天)。第2組(N＝10)用醋酸亮丙瑞林(LUPRONDEPOT)處理(5.2mg/kg，第0天和第21天，皮下給藥)。第3組(N＝12)接受化合物II-12(10mg/kg，口服，每天2次，第0-20和31-45天)。第4組(N＝12)接受醋酸亮丙瑞林(5.2mg/kg，第0天和第21天，皮下給藥)和化合物II-12(10mg/kg，口服，每天2次，第0-20和31-45天)的聯(lián)合給藥。給第1組和第3組的大鼠在第1天時(shí)皮下植入2厘米長(zhǎng)的填充有睪酮的密封硅橡膠管。
按照實(shí)施例1所述的方法測(cè)量腫瘤并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
在用賦形劑處理的動(dòng)物中Dunning H腫瘤在體內(nèi)持續(xù)生長(zhǎng)。經(jīng)過(guò)53天后觀察到腫瘤體積增加了約2.5倍?；衔颕I-12的各處理周期(10mg/kg，每天2次，口服21天，且停藥期為10天)均使Dunning H腫瘤的生長(zhǎng)得到抑制且引起腫瘤明顯消退。與賦形劑對(duì)照組相比，由化合物II-12處理組觀察到的對(duì)腫瘤生長(zhǎng)的抑制作用具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。從對(duì)腫瘤的初次測(cè)量(即第4天的測(cè)量)直至試驗(yàn)結(jié)束的測(cè)量均存在上述顯著性差異。單獨(dú)用醋酸亮丙瑞林處理也可以使腫瘤消退。在亮丙瑞林處理開(kāi)始后約32天時(shí)觀察到腫瘤的緩慢再生(圖4)。
與單獨(dú)使用亮丙瑞林或單獨(dú)使用化合物II-12相比，化合物II-12/亮丙瑞林的組合在維持腫瘤低速生長(zhǎng)方面比單獨(dú)使用上述兩種藥物中的任何一種具有更明顯的效果(p＜0.05)(圖4)。在化合物II-12處理組和亮丙瑞林處理組中觀察到在處理開(kāi)始后約30天時(shí)腫瘤開(kāi)始再生。相反，聯(lián)合給藥處理組在較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)表現(xiàn)出腫瘤生長(zhǎng)減弱，并且分別從第35和39天開(kāi)始直至該試驗(yàn)在第54天結(jié)束時(shí)，對(duì)腫瘤生長(zhǎng)的抑制作用，聯(lián)合給藥組與化合物II-12處理組和亮丙瑞林處理組具有顯著性差異，(p＜0.05；圖4)。
這些試驗(yàn)結(jié)果證實(shí)，化合物II-12給藥和化學(xué)閹割的組合具有協(xié)同的抗腫瘤功效(圖1和4)。
其它實(shí)施方案包括在權(quán)利要求之內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種抑制哺乳動(dòng)物中前列腺瘤惡化的方法，該方法包括給哺乳動(dòng)物施用治療有效量的酪氨酸激酶抑制劑，并且給哺乳動(dòng)物同時(shí)施用治療有效量的化學(xué)閹割劑，由此抑制前列腺瘤惡化。
2.權(quán)利要求1所述的方法，其中所述哺乳動(dòng)物是人。
3.權(quán)利要求1所述的方法，其中所述治療有效量的酪氨酸激酶抑制劑和治療有效量的化學(xué)閹割劑協(xié)同地抑制腫瘤惡化。
4.權(quán)利要求1所述的方法，其中所述酪氨酸激酶抑制劑是酪氨酸激酶A抑制劑、酪氨酸激酶B抑制劑或酪氨酸激酶C抑制劑。
5.權(quán)利要求1所述的方法，其中所述酪氨酸激酶抑制劑是吲哚并咔唑類化合物。
6.權(quán)利要求5所述的方法，其中所述吲哚并咔唑類化合物具有如下結(jié)構(gòu)
7.權(quán)利要求5所述的方法，其中所述吲哚并咔唑類化合物具有如下結(jié)構(gòu)
8.權(quán)利要求5所述的方法，其中所述吲哚并咔唑類化合物具有如下結(jié)構(gòu)
9.權(quán)利要求1所述的方法，其中所述酪氨酸激酶抑制劑是稠合的吡咯并咔唑類化合物。
10.權(quán)利要求1所述的方法，其中所述酪氨酸激酶抑制劑是經(jīng)口服給藥。
11.權(quán)利要求1所述的方法，其中所述酪氨酸激酶抑制劑是經(jīng)非腸道給藥。
12.權(quán)利要求1所述的方法，其中所述化學(xué)閹割劑選自雌激素、LHRH激動(dòng)劑、LHRH拮抗劑和抗雄激素。
13.權(quán)利要求12所述的方法，其中所述LHRH激動(dòng)劑是醋酸亮丙瑞林。
14.權(quán)利要求12所述的方法，其中所述抗雄激素是氟他胺。
15.權(quán)利要求1所述的方法，其中所述化學(xué)閹割劑是LHRH激動(dòng)劑和抗雄激素的混合物。
16.權(quán)利要求15所述的方法，其中所述LHRH激動(dòng)劑是醋酸亮丙瑞林，所述的抗雄激素是氟他胺。
17.權(quán)利要求1所述的方法，其中所述酪氨酸激酶抑制劑和化學(xué)閹割劑是各自作為獨(dú)立制劑給藥的。
18.權(quán)利要求1所述的方法，其中所述酪氨酸激酶抑制劑和化學(xué)閹割劑被配制在單一組合物中。
19.一種含有酪氨酸激酶抑制劑和化學(xué)閹割劑的組合物。
20.權(quán)利要求19所述的組合物，其中所述酪氨酸激酶抑制劑是酪氨酸激酶A抑制劑、酪氨酸激酶B抑制劑或酪氨酸激酶C抑制劑。
21.權(quán)利要求19所述的組合物，其中所述酪氨酸激酶抑制劑是吲哚并咔唑類化合物。
22.權(quán)利要求21所述的組合物，其中所述吲哚并咔唑類化合物選自結(jié)構(gòu)如下的吲哚并咔唑
結(jié)構(gòu)如下的吲哚并咔唑
結(jié)構(gòu)如下的吲哚并咔唑
23.權(quán)利要求19所述的組合物，其中所述酪氨酸激酶抑制劑是稠合的吡咯并咔唑類化合物。
24.權(quán)利要求19所述的組合物，其中該組合物被配制成經(jīng)口服給藥的制劑。
25.權(quán)利要求19所述的組合物，其中該組合物被配制成經(jīng)非腸道給藥的制劑。
26.權(quán)利要求19所述的組合物，其中所述化學(xué)閹割劑選自雌激素、LHRH激動(dòng)劑、LHRH拮抗劑和抗雄激素。
27.權(quán)利要求26所述的組合物，其中所述LHRH激動(dòng)劑是醋酸亮丙瑞林。
28.權(quán)利要求26所述的組合物，其中所述抗雄激素是氟他胺。
29.權(quán)利要求19所述的組合物，其中所述化學(xué)閹割劑是LHRH激動(dòng)劑和抗雄激素的混合物。
30.權(quán)利要求29所述的組合物，其中所述LHRH激動(dòng)劑是醋酸亮丙瑞林，所述抗雄激素是氟他胺。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種通過(guò)將酪氨酸激酶抑制劑如吲哚并咔唑類化合物和化學(xué)閹割劑同時(shí)給藥來(lái)治療前列腺癌的方法。本發(fā)明還公開(kāi)了一種含有酪氨酸激酶抑制劑和化學(xué)閹割劑的組合物。
文檔編號(hào)A61K38/04GK1268061SQ98808174
公開(kāi)日2000年9月27日 申請(qǐng)日期1998年8月13日 優(yōu)先權(quán)日1997年8月15日
發(fā)明者克雷格·A·迪奧納, 約翰·伊薩克斯, 杰弗里·L·沃特 申請(qǐng)人:賽福倫公司