專利名稱：作為細(xì)胞粘連抑制劑的(-)-(3r)-3-甲基-4-(4-(4-(4-吡啶基)哌嗪-1-基)苯氧基)丁酸的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的光學(xué)活性化合物(-)-(3R)-3-甲基-4-{4-[4-(4-吡啶基)哌嗪-1-基]苯氧基}丁酸，[下文中為(-)-(3R)]和其藥用鹽、酯、酰胺或其溶劑化物，本發(fā)明還涉及該光學(xué)活性化合物的制備方法、含該化合物的藥物組合物及其抑制細(xì)胞粘連如血小板凝集的用途。
有機(jī)化合物能夠以光學(xué)活性的形式存在，這樣的化合物具有既可以使偏振光平面向右旋轉(zhuǎn)[詞頭(+)]又可以使其向左旋轉(zhuǎn)[詞頭(-)]方式的性質(zhì)。典型的光學(xué)活性化合物具有不對(duì)稱或手性原子，如結(jié)合四個(gè)不同原子或基團(tuán)的四面體碳原子。這四個(gè)不同的原子或基團(tuán)可以兩種方式排列在不對(duì)稱碳原子周圍，得到兩種手性化合物，它們?cè)诮Y(jié)構(gòu)上彼此互成鏡像關(guān)系。這樣的化合物稱為立體異構(gòu)體或?qū)τ丑w，對(duì)映體除具有使偏振光平面等量而方向相反地旋轉(zhuǎn)外，具有相同的物理和化學(xué)性質(zhì)。外消旋混合物是一對(duì)對(duì)映體等量的混合物，這樣的混合物不產(chǎn)生偏振光平面的旋轉(zhuǎn)。
有機(jī)化合物的立體化學(xué)純度在藥物化學(xué)和藥理學(xué)領(lǐng)域中是重要的。許多大分子如溫血?jiǎng)游镏信c維持生命有關(guān)的酶和受體是由手性結(jié)構(gòu)單元如手性氨基酸組成的。一起構(gòu)成藥物活性化合物外消旋混合物的單獨(dú)對(duì)映體可以不同程度地與手性大分子如酶或受體相互作用。因此單獨(dú)的對(duì)映體作為酶抑制劑或受體拮抗劑具有不同的效力。此外，當(dāng)將一種對(duì)映體施用于溫血?jiǎng)游飼r(shí)所觀察到的吸收、分布、代謝和分泌的比率和程度不同于將其鏡像形式施用后所觀察到的情況，即對(duì)映體具有不同的藥物代謝動(dòng)力學(xué)性質(zhì)。
此外，有機(jī)化合物的立體化學(xué)純度對(duì)于施用藥物活性化合物所產(chǎn)生副作用的性質(zhì)和程度也是重要的。因此一種對(duì)映體可以是有用的化合物，而另一對(duì)映體則可能產(chǎn)生有害的副作用或毒性。例如，已有人提出沙利度胺的一種對(duì)映體是安全和有效的鎮(zhèn)靜劑，而另一種對(duì)映體則支配著外消旋混合物的致畸副作用。
本發(fā)明的光學(xué)活性化合物是外消旋混合物(3RS)-3-甲基-4-{4-[4-(4-吡啶基)哌嗪-1-基]-苯氧基}丁酸[下文為(3RS)-外消旋混合物]的光學(xué)異構(gòu)體作為三氟乙酸鹽的上述化合物公開于國際專利申請(qǐng)WO.94/22834實(shí)施例132中，和國際專利申請(qǐng)WO94/22835實(shí)施例203中。其中公開了化合物用于治療與細(xì)胞粘連如繼血小板凝集后的血栓形成有關(guān)的各種疾病。血栓能夠?qū)е录膊∪缪ㄐ纬?、中風(fēng)、血栓形式伴隨的不穩(wěn)定型心絞痛、心肌梗塞、動(dòng)脈粥樣硬化、血栓栓塞和溶栓治療期間或治療以后的再閉塞。
一般認(rèn)為，化合物的抗血小板凝集作用基于化合物抑制粘連分子如血纖維蛋白原和維勒布蘭德氏因子與每個(gè)血小板膜所包含的于糖蛋白IIb/IIIa(下文為GPIIb/IIIa)的結(jié)合的能力。因此，不要使載有纖維蛋白原的血小板發(fā)生必要的活化和二聚合作用，并抑制如血栓形成和血小板凝集的過程。
為了尋找改進(jìn)治療率的化合物，就要求找到比公開于國際專利申請(qǐng)WO94/22834和94/22835中的化合物有增強(qiáng)效力的化合物。
現(xiàn)已知道，有幾類粘著分子如整聯(lián)蛋白(integrins)、選擇蛋白(selectins)和Cadherins。整聯(lián)蛋白發(fā)現(xiàn)于白細(xì)胞和血小板中，選擇蛋白發(fā)現(xiàn)于白細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞中。在每種類型的粘著分子中有許多成員。整聯(lián)蛋白家族包括如與纖維蛋白原結(jié)合的GPIIb/IIIa、與玻連蛋白結(jié)合的整聯(lián)蛋白αvβ3、與纖維結(jié)合素結(jié)合的整聯(lián)蛋白α5β1。據(jù)信，更有用的治療用血小板凝集抑制劑應(yīng)該在多種粘著分子類型之間和每種類型粘著分子的家族成員之間具有抑制效果的選擇性，因此，也會(huì)有希望找到具有這種選擇性或比現(xiàn)有的血小板凝集抑制劑更具選擇性的化合物。
此外，已經(jīng)知道有幾種類型的GPIIb/IIIa拮抗劑，如已有對(duì)于GPIIb/IIIa的單克隆抗體拮抗劑。而且，例如從美國專利US5,039,805和5,084,446，從加拿大專利申請(qǐng)2,008,161、2,037,153和2,061,661和從Alig等人，J.Med.Chem.，1992，35，4393中也已經(jīng)知道抑制粘著分子與GPIIb/IIIa結(jié)合的小分子。通常，這些化合物的結(jié)構(gòu)是以粘著分子的結(jié)合區(qū)域?yàn)榛A(chǔ)的，例如纖維蛋白原結(jié)構(gòu)的氨基酸順序RGD(精氨酰基甘氨?；於彼?。據(jù)信，該類化合物能夠用于抑制血小板凝聚和抑制如有足夠時(shí)間的血栓形成從而醫(yī)治損害的組織而無過強(qiáng)的血小板凝集過程的有害后遺癥。理論上涉及到的各種類型GPIIb/IIIa拮抗劑，它們對(duì)血小板凝集的抑制可以導(dǎo)致血塊比率減少，從而導(dǎo)致出血現(xiàn)象和出血時(shí)間的增加。雖然出血時(shí)間的稍微增加是可取的，但某些臨床上涉及的出血現(xiàn)象如顱內(nèi)出血將是有生命危險(xiǎn)的。
因此，要求找到具有公開于國際專利申請(qǐng)WO94/22834實(shí)施例132的化合物所具有的良好效力的GPIIb/IIIa拮抗劑活性的化合物，但是它沒有或具有較小程度的增加出血時(shí)間和/或與已知GPIIb/IIIa拮抗劑有關(guān)的有害的臨床出血現(xiàn)象。
根據(jù)本發(fā)明，提供了基本無(+)-(3S)立體異構(gòu)體和光學(xué)活性化合物(-)-(3R)-3-甲基-4-{4-[4-(4-吡啶基)哌嗪-1-基]-苯氧基}丁酸，或其藥用鹽、酯、酰胺或溶劑化物。
(-)-(3R)化合物作為GPIIb/IIIa拮抗劑基本上具有比相應(yīng)的(+)-(3S)異構(gòu)體更好的效力(高10倍以上的效力)。(-)-(3R)化合物還在各類粘著分子之間和這些類別的家族成員之間具有抑制效果的選擇性。例如，化合物具有對(duì)抗GPIIb/IIIa與纖維蛋白原的結(jié)合的活性(pIC50＝7.65)，而不阻礙αvβ3對(duì)于玻連蛋白的結(jié)合(pIC50小于4)或不阻礙α5β1對(duì)于纖維結(jié)合素的結(jié)合(pIC50小于4)。
因此，(-)-(3R)化合物是新的、有效的和選擇性的纖維蛋白原受體拮抗劑，基本上減少了產(chǎn)生不利效果的傾向或可能性，所述不利效果例如是與施用其它纖維蛋白原受體拮抗劑如(3RS)-外消旋混合物有關(guān)的過度出血。(-)-(3R)化合物的使用也可消除得到與施用小于治療有效量的構(gòu)成(3RS)-外消旋體混合物的一種成分即(+)-(3S)化合物有關(guān)的不利效果的傾向或可能性。(-)-(3R)化合物的使用使結(jié)構(gòu)-活性-毒性分析更清楚，并提高了治療比率。因此使用本發(fā)明(-)-(3R)化合物而不用國際專利申請(qǐng)WO94/22834實(shí)施例132中的(3RS)-外消旋混合物是理想的。
本發(fā)明(-)(3R)化合物的具體的藥用鹽包括例如提供藥理上可接受的陰離子的酸鹽如無機(jī)酸鹽，例如鹵化氫如氯化氫或溴化氫、硫酸或磷酸，和有機(jī)酸鹽，例如三氟乙酸。其它藥用鹽包括例如無機(jī)堿鹽如堿金屬和堿土金屬鹽如鈉鹽、銨鹽，以及形成藥理上可接受的陽離子的有機(jī)胺和季胺的鹽，如與甲胺、二甲胺、三甲胺、乙二胺、哌啶、嗎啉、吡咯、哌嗪、乙醇胺、三乙醇胺、N-甲基葡糖胺、氫氧化四甲銨和氫氧化芐基三甲基銨的鹽。
本發(fā)明(-)-(3R)化合物具體的藥用酯包括例如本發(fā)明化合物中羧酸基因的酯衍生物，例如與下列醇形成的酯，如與(1-6C)醇(例如甲醇、乙醇、丙醇和叔丁醇)、二氫茚醇、金剛烷醇、(1-6C)鏈烷酰氧基-(1-4C)醇(例如新戊酰氧基甲醇)和(1-4C)烷氧羰基-(1-4C)醇(例如甲氧羰基甲醇)的酯。
本發(fā)明(-)-(3R)化合物具體的藥用酰胺包括例如本發(fā)明化合物中羧酸基團(tuán)酰胺衍生物，例如與下列胺形成的酰胺如氨、(1-4C)烷基胺(例如甲胺)、二-(1-4C)烷基胺(例如二甲基胺、N-乙基-N-甲基胺和二乙基胺)、(1-4C)烷氧基-(2-4C)烷基胺(例如2-甲氧乙基胺)、苯基-(1-4C)烷基胺(例如芐基胺)和氨基酸(例如甘氨酸或其酯)。因而，本發(fā)明(-)-(3R)化合物具體的酰胺包括N-甲基-、N，N-二甲基-、N-乙基-N-甲基和N，N-二乙基-丁酰胺類化合物。
本發(fā)明(-)-(3R)化合物具體的藥用溶劑化物包括水合物，例如半水合物、單水合物、二水合物或三水合物或其它數(shù)量的水合物。
上文所用的語句“基本無(+)-(3S)立體異構(gòu)體”是指至少有90％重量的(-)-(3R)異構(gòu)體和10％重量或更少的相應(yīng)(+)-(3S)異構(gòu)體，優(yōu)選至少有95％重量的(-)-(3R)異構(gòu)體和5％重量或更少的相應(yīng)(+)-(3S)異構(gòu)體，更優(yōu)選至少有99％重量的(-)-(3R)異構(gòu)體和1％重量或更少的相應(yīng)(+)-(3R)異構(gòu)體。
本發(fā)明(-)-(3R)化合物或其藥用鹽、酯、酰胺或溶劑化物可以通過本領(lǐng)域已知的制備該類化合物的任何方法來制備。合適的方法包括與適當(dāng)?shù)氖中灾虚g體有關(guān)的不對(duì)稱合成和(3RS)-外消旋混合物的拆分，這些方法代表本發(fā)明進(jìn)一步的特征并包括如下a)使4-[4-(4-吡啶基)哌嗪-1-基]苯酚或其活性衍生物與手性中間體(3R)-4-羥基-3-甲基丁酸或其酯或其活性衍生物反應(yīng)。
反應(yīng)在強(qiáng)堿如堿金屬氫化物，如氫化鈉存在下方便地進(jìn)行，合適的溶劑包括酰胺，如二甲基甲酰胺，反應(yīng)在0-100℃的溫度范圍下方便地進(jìn)行。
手性中間體(3R)-4-羥基-3-甲基丁酸的合適的酯包括如甲基、乙基、丙基和叔丁基酯。其合適的活性衍生物包括例如，(3R)-4-鹵代-甲基丁酸或其酯(例如甲基或乙基酯)如4-氯和4-溴衍生物、(3R)-4-鏈烷磺酰氧基-3-甲基丁酸或其酯(例如甲基或乙基酯)如4-甲磺酰氧基衍生物或(3R)-4-芳基磺酰氧基-3-甲基丁酸或其酯(例如甲基或乙基酯)如4-(對(duì)-甲苯磺酰氧基)衍生物。
b)使式I化合物
與手性中間體(3R)-3-甲基-4-[4-(哌嗪-1-基)苯氧基]丁酸或其酸加成鹽反應(yīng)，其中L是離去原子或基團(tuán)。
L的實(shí)例包括鹵素，如氯或溴和氰基。
(3R)-3-甲基-4-[4-(哌嗪-1-基)苯氧基]丁酸的酸加成鹽的實(shí)例包括例如鹽酸鹽。
反應(yīng)在-10-120℃的溫度范圍下方便地進(jìn)行，優(yōu)選10-100℃。合適的溶劑包括，例如醚如四氫呋喃和二噁烷，酰胺如二甲基甲酰胺，腈如乙腈，鹵代烷烴如二氯甲烷，醇如乙醇和水。
在某些情況下，例如當(dāng)將(3R)-3-甲基-4-[4-(哌嗪-1-基)苯氧基]丁酸的酸加成鹽作為起始原料時(shí)，反應(yīng)便于在堿存在下進(jìn)行。合適堿的例子包括叔胺如三乙胺，和堿金屬氫氧化物、碳酸鹽和碳酸氫鹽，如氫氧化鈉和氫氧化鉀、碳酸鈉或碳酸鉀或碳酸氫鈉或碳酸氫鉀。
c)式II酯的分解
其中R是羧基保護(hù)基。
R可以是任何常規(guī)的、可以被除去而不干擾分子的其它部分的羧基保護(hù)基。羧基保護(hù)基的實(shí)例包括(1-6C)烷基(如甲基、乙基、丙基和叔丁基)，苯基和芐基，在它們之中任何一個(gè)苯基部分任選具有1或2個(gè)鹵原子、(1-4C)烷基、(1-4C)烷氧基或硝基。
分解可以在使用任何一種常規(guī)試劑和本領(lǐng)域中已知的將羧酸酯轉(zhuǎn)化為羧酸的條件下進(jìn)行，例如分解可以在水存在下通過堿，例如用堿金屬氫氧化物如氫氧化鋰、氫氧化鉀或氫氧化鈉，或叔胺如三乙胺催化水解來進(jìn)行。堿催化水解可以在溶劑存在下進(jìn)行，溶劑例如醇如甲醇或乙醇，或醚如四氫呋喃或二噁烷。另外，水解可以通過酸催化水解來進(jìn)行，例如用乙酸或三氟乙酸水溶液。方便的溫度范圍在-10-100℃，例如10-50℃。當(dāng)醇?xì)埢鞘?丁基時(shí)，可以只通過加熱例如在80-150℃溫度下除去，或在合適的抑制劑如二苯基醚或二苯基砜存在下除去。芐基可以通過催化氫化除去，例如通過在溶劑如醇如甲醇或乙醇存在下，于-10-100℃的溫度范圍內(nèi)，在鈀/碳存在下的氫化。
d)(3RS)-外消旋混合物，(3RS)-3-甲基-4-{4-[4-(4-吡啶基)-哌嗪-1-基]苯氧基}丁酸的拆分。
(3RS)-外消旋混合物的丁酸衍生物的拆分可以通過常規(guī)方法進(jìn)行，例如通過與光學(xué)活性堿形成鹽，繼之，例如通過使所產(chǎn)生的兩種鹽分部結(jié)晶來分離，和通過酸化分離的鹽再生分離的(-)-(3R)和(+)-(3S)化合物。
(3RS)-外消旋混合物的丁酸衍生物的拆分可以通過常規(guī)的方法進(jìn)行與光學(xué)活性醇反應(yīng)形成非對(duì)映異構(gòu)體對(duì)的酯，分離該酯，例如通過色譜法分離和通過水解將分離的酯再生成分離(-)-(3R)和(+)-(3S)化合物，也可以用類似的包括分離酰胺非對(duì)映異構(gòu)體對(duì)的方法。
(-)-(3R)-化合物和手性中間體的制備在下面僅為說明的目的而提供的非限制性實(shí)施例中描述。
上文定義的某些手性中間體是新的，因而，本發(fā)明的另一方面提供了化合物(3R)-3-甲基-4-羥基丁酸叔丁酯或其活性衍生物，基本無(3S)立體異構(gòu)體。可以提及的具體活性衍生物是(3R)-3-甲基-4-(對(duì)-甲苯磺酰氧基)丁酸叔丁酯。
上文所用的語句“基本無(3S)立體異構(gòu)體”與在有關(guān)本發(fā)明(-)-(3R)化合物中所給定的意義相同。
當(dāng)需要本發(fā)明(-)-(3R)化合物的藥用鹽時(shí)，例如可以用常規(guī)方法使所述化合物與合適的酸或堿反應(yīng)得到。當(dāng)需要本發(fā)明(-)-(3R)化合物的藥用酯或酰胺時(shí)，例如可以用常規(guī)方法使所述化合物與合適的醇或胺反應(yīng)得到。
本發(fā)明(-)-(3R)化合物抑制血小板凝集和抑制纖維蛋白原與GPIIb/IIIa的結(jié)合的能力可以用國際專利申請(qǐng)WO94/22834中描述的標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)方法(a)和(b)測(cè)定，這里引用該試驗(yàn)方法作為參考。
本發(fā)明(-)-(3R)化合物具有對(duì)抗誘導(dǎo)人類血小板凝集的二磷酸腺苷(ADP)的活性，pA2＝7.3，和對(duì)抗纖維蛋白原與GPIIb/IIIa結(jié)合的活性，pIC50＝7.65。
如前所述，本發(fā)明(-)-(3R)化合物可以用于治療或防止有關(guān)細(xì)胞粘著(尤其是血小板凝集)的疾病，這些疾病包括例如靜脈或動(dòng)脈血栓形成(如肺栓塞、中風(fēng)和血栓形成過程中伴隨的不穩(wěn)型心絞痛和暫時(shí)性局部缺血發(fā)作)、心肌梗塞、動(dòng)脈粥樣硬化、血栓栓塞和溶解血栓治療期間或治療以后的再閉塞?；衔镆部梢杂糜陬A(yù)防經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈腔內(nèi)成形術(shù)(PTCA)和冠狀動(dòng)脈分流移植術(shù)后的再度閉塞和再度狹窄，可以理解的是化合物可以用于治療由粘著分子與GPIIb/IIIa結(jié)合介導(dǎo)的其它疾病，例如癌。
本發(fā)明的另一方面，提供了基本無(+)-(3S)立體異構(gòu)體(-)-(3R)化合物或其藥用鹽、酯、酰胺或溶劑化物作為藥物的用途。
本發(fā)明的另一方面，對(duì)于需要治療的溫血?jiǎng)游?，提供了抑制血小板凝集的方法，包括施用有效量的基本無(+)-(3 S)立體異構(gòu)體(-)-(3R)化合物或其藥用鹽、酯、酰胺或溶劑化物。
本發(fā)明的另一方面，對(duì)于需要治療的溫血?jiǎng)游?，提供了抑制纖維蛋白原與GPIIb/IIIa結(jié)合的方法，包括施用有效量的基本無(+)-(3S)立體異構(gòu)體(-)-(3R)化合物或其藥用鹽、酯、酰胺或溶劑化物。
本發(fā)明的另一方面，對(duì)于需要治療的溫血?jiǎng)游铮峁┝艘种蒲ㄐ纬蛇^程中伴隨的不穩(wěn)定型心絞痛的方法，包括施用有效量的基本無(+)-(3S)立體異構(gòu)體(-)-(3R)化合物或其藥用鹽、酯、酰胺或溶劑化物。
本發(fā)明的另一方面，對(duì)于需要治療的溫血?jiǎng)游?，提供了抑制血小板凝集，同時(shí)又顯著地減少與施用(3-RS)-外消旋混合物有關(guān)的副作用的方法，包括施用有效量的基本無(+)-(3S)立體異構(gòu)體(-)-(3R)化合物或其藥用鹽、酯、酰胺或溶劑化物。
本發(fā)明的另一方面，提供了基本無(+)-(3S)立體異構(gòu)體(-)-(3R)化合物或其藥用鹽、酯、酰胺或溶劑化物用于制備預(yù)防和治療血小板凝集有關(guān)的疾病的藥物的應(yīng)用。
本發(fā)明的另一方面，提供了基本無(+)-(3S)立體異構(gòu)體(-)-(3R)化合物或其藥用鹽、酯、酰胺或溶劑化物用于制備預(yù)防和治療纖維蛋白原與GPIIb/IIIa結(jié)合有關(guān)的疾病的藥物的應(yīng)用。
本發(fā)明的另一方面，提供了基本無(+)-(3S)立體異構(gòu)體(-)-(3R)化合物或其藥用鹽、酯、酰胺或溶劑化物用于制備預(yù)防和治療血栓形成過程中伴隨不穩(wěn)定型心絞痛的藥物的應(yīng)用。
一般來說，為達(dá)到發(fā)明的目的，本發(fā)明(-)-(3R)化合物可以通過口服、直腸、局部、靜脈內(nèi)、皮下、肌內(nèi)或吸入途徑給藥，根據(jù)給藥的途徑、患者的年齡和性別，和所治療疾病的嚴(yán)重程度，施用的劑量在0.01-50mg/kg體重的范圍內(nèi)。
本發(fā)明(-)-(3R)化合物通常以含有基本無(+)-(3S)立體異構(gòu)體的(-)-(3R)化合物或其藥用鹽、酯、酰胺或溶劑化物，并與藥用稀釋劑或載體混合的藥物組合物的形式使用。本發(fā)明的另一方面是提供了該組合物，該組合物可以是各種劑型，例如它可以是口服片劑、膠囊、溶液或懸浮液形式；可以是局部的乳劑或軟膏或經(jīng)皮貼劑形式；可以是直腸用栓劑形式；可以是通過靜脈或肌內(nèi)注射用滅菌溶液或懸浮液形式；可以是吸入用氣霧劑或噴霧溶液或懸浮液形式；和可以是通過吹入用的與藥用惰性固體稀釋劑如乳糖一起的粉末形式。
根據(jù)給藥途徑，組合物可以含有例如重量比為0.1-99.9％的本發(fā)明(-)-(3R)化合物。
藥物組合物可以用本領(lǐng)域已知藥用稀釋劑和載體通過常規(guī)方法得到。口服片劑和膠囊可以方便地用腸溶衣包復(fù)得到，例如含有乙酸鄰苯二甲酸纖維素以使本發(fā)明(-)-(3R)化合物與胃酸的接觸最少。
本發(fā)明(-)-(3R)化合物可以與能治療所述疾病或疾病癥的-種或一種以上的已知藥劑聯(lián)合用藥或聯(lián)合制劑，例如已知的血小板凝集抑制劑(如阿司匹林、血栓烷拮抗劑或血栓烷合成酶抑制劑)，低血脂劑，抗高血壓劑，溶栓劑(如鏈球菌激酶、尿激酶、尿激酶原、組織纖維蛋白酶原活化劑及其衍生物)，β-腎上腺素能阻滯劑，或也可以存在于本發(fā)明用于治療心臟或心血管疾病或疾病癥狀的藥物組合物中的血管舒張藥。
本發(fā)明(-)-(3R)化合物除用作治療的藥物外，作為新治療劑研究的一部分在試驗(yàn)系統(tǒng)研究和標(biāo)準(zhǔn)化試驗(yàn)中，用作評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物如貓、狗、兔、猴子、大鼠和大鼠分子粘連效果的藥理學(xué)工具。因其血小板凝集抑制的性質(zhì)，本發(fā)明(-)-(3R)化合物也可以用于在人工體外循環(huán)如肢體和器官移植過程中幫助溫血?jiǎng)游锘蚱湟徊糠值难簝?chǔ)存和維持血液和血管存活。當(dāng)用于此目的時(shí)，通常施用本發(fā)明(-)-(3R)化合物使得在血液的穩(wěn)定狀態(tài)時(shí)的濃度范圍達(dá)到如0.1-10mg/升。
通過下列非限制性實(shí)施例說明本發(fā)明，除非另有說明i)在真空中通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)進(jìn)行濃縮和蒸發(fā)；ii)在室溫下即18-26℃范圍內(nèi)進(jìn)行操作；iii)進(jìn)行硅膠(Merck 7736，購自于E.Merck和Co.Darmstadt，Germany)柱色譜層析；iv)僅為說明給出了產(chǎn)率，并且不一定是通過努力研究的最高所得；v)通常用四甲基硅烷(TMS)作為內(nèi)標(biāo)，在200MHz或250MHz下測(cè)定質(zhì)子NMR譜，并可以表示為相對(duì)于TMS百萬分之一的化學(xué)位移(δ值)，用常規(guī)的縮寫表示主要的峰；s，單峰；m，多峰；t，三峰；br，寬峰；d，雙峰；和vi)下列縮寫用于特定的有機(jī)試劑四氫呋喃為THF；N，N-二甲基甲酰胺為DMF和二甲亞砜為DMSO。實(shí)施例1(-)-(3R)-3-甲基-4-{4-[4-(4-吡啶基)-哌嗪-1-基]苯氧基}丁酸鹽酸鹽將氫化鈉(礦物油中，60％分散液，2.44g)加到攪拌的4-[4-(4-吡啶基)-哌嗪-1-基]苯酚(15.5g)的無水DMF(120ml)懸浮液中，并將混合物攪拌45分鐘。加入(3R)-3-甲基-4-(對(duì)-甲苯磺酰氧)丁酸叔丁酯(20g)并將混合物攪拌20小時(shí)。蒸發(fā)混合物，殘余物在二氯甲烷和水中分配。用水洗滌有機(jī)相，通過相分離紙(Whatman IPS)過濾并蒸發(fā)。在二乙醚中研制殘余物，所得到的固體在乙酸乙酯中重結(jié)晶，得到(-)-(3R)-3-甲基-4-{4-[4-(4-吡啶基)-哌嗪-1-基]苯氧基}丁酸叔丁酯(10.6g)。
m.p.112-113℃；[alpha]D＝-5.5°(conc.＝1g/100ml of methanol；20℃)；NMR(CDCl3)δ8.3(2H，d)，6.89(4H，m)，6.7(2H，m)，3.79(2H，d)，3.46(4H，m).3.28(4H，m)，2.31-2.53(2H，m)，2.08-2.21(1H，m)，1.44(9H，s)，1.07(3H，d).
將(-)-(3R)-3-甲基-4-{4-[4-(4-吡啶基)-哌嗪-1-基]苯氧基}丁酸叔丁酯(10.53g)和1N鹽酸水溶液(250ml)的混合物攪拌44小時(shí)。加入1N氫氧化鈉水溶液(250ml)并將混合物冷卻至5℃。過濾混合物并蒸發(fā)濾液。加入水(150ml)，分離沉淀物并用水、丙酮和二乙醚依次洗滌。將所得到的物質(zhì)與1N鹽酸水溶液(25ml)-起攪拌16小時(shí)。將混合物冷卻至5℃并過濾。用水、丙酮和二乙醚依次洗滌所得到的固體并干燥，得到(-)-(3R)-3-甲基-4-{4-[4-(4-吡啶基)-哌嗪-1-基]苯氧基}丁酸鹽酸鹽(7.9g)。
m.p.203-205℃；[alpha]D＝-6.2°(conc.＝1g/100ml of methanol；20℃)；NMR(d6DMSO)δ13.8(1H，br)，12.1(1H，br)，8.27(2H，d)，7.2g(2H，d)，6.9(4H，m)，3.8(6H，m)，3.18(4H，t)，2.45(1H，m)，2.23(1H，m)，2.12(1H，m)，1.0(3H，d)；m/e 356(M+H)+；計(jì)算值C20H25N3O3·HCl·H2OC，58.5；H，6.8；N，10.2；實(shí)測(cè)值C，58.3；H，6.9；N，10.2％；按下述方法制備必要的手性起始原料將雙(三甲基甲硅烷基)氨化鈉(在THF中為1M，170ml)滴加到已冷卻至-70℃的(4S)-4-異丙基-3-丙?；鶉f唑烷-2-酮(J.Am.Chem.Soc.，1981，103，2127；28.4g)的無水THF(500ml)溶液中并置于氬氣中，調(diào)節(jié)加料速度在使反應(yīng)溫度不高于-67℃。將得到的溶液在-70℃攪拌30分鐘，滴加溴代乙酸叔丁酯(42.3g)并在-70℃下攪拌溶液3小時(shí)。然后使溶液達(dá)到室溫。蒸發(fā)溶劑，殘余物在二乙醚和水中分配。分離有機(jī)相，通過相分離紙(Whatman IPS)過濾并蒸發(fā)。在-40℃下于己烷中研制殘余物，得到固體(21.6g)，通過蒸發(fā)己烷溶液和通過開始用己烷，進(jìn)一步到1/10乙酸乙酯/己烷的硅膠過濾柱層析色譜純化殘余物再次得到固體(4.4g)。合并兩批固體并在己烷中重結(jié)晶，得到(4S)-3-[(2R)-3-叔-丁氧羰基-2-甲基丙?；鵠-4-異丙基噁唑烷-2-酮(22.5g)。
m.p.64-65℃；NMR(CDCl3)δ4.41(1H，m)，4.21(2H，m)，4.12(1H，m)，2.79(1H，m)，2.28-2.4(2H，m)，1.41(9H，s)，1.16(3H，d)，0.9(6H，m).
將過氧化氫(30％，44ml)和一水合氫氧化鋰(6.38g)依次加到攪拌著的、已冷卻至5℃的(4S)-3-[(2R)-3-叔-丁氧羰基-2-甲基丙?；鵠-4-異丙基噁唑烷-2-酮(22.5g)、水(280ml)和THF(800ml)的混合物中，于5℃下攪拌得到的混合物3小時(shí)，加入偏亞硫酸氫鈉(metabisulphite)飽和水溶液破壞過剩的過氧化氫，并蒸發(fā)溶劑。用二氯甲烷萃取殘余物，通過加入檸檬酸水溶液酸化水相，并用二氯甲烷萃取。合并萃取液，用水洗滌，通過相分離紙(Whatman IPS)過濾，蒸發(fā)濾液得到(3R)-3-甲基琥珀酸1-叔丁酯油(12.9g)。NMR(CDCl3)δ2.9(1H，m)，2.64(1H，m)，2.37(1H，m)，1.4(9H，s)，1.23(3H，d).
將甲硼烷二甲基硫化物復(fù)合物(10M，10.3ml)于15分鐘內(nèi)加到攪拌著的、已冷卻至-10℃的(3R)-3-甲基琥珀酸1-叔-丁酯(12.9g)和THF(200ml)的混合物中，并置于氬氣氛中。在-10℃下攪拌混合物30分鐘。使混合物溫度達(dá)到室溫并攪拌1小時(shí)。將混合物重新冷卻至5℃，分批加入甲醇(50ml)，使混合物溫度達(dá)到室溫并攪拌30分鐘。蒸發(fā)混合物，殘余物在二氯甲烷(100ml)和水(100ml)之間分配。過濾有機(jī)相，通過相分離紙(Whatman IPS)過濾并蒸發(fā)，得到(3R)-4-羥基-3-甲基丁酸叔丁酯油(11g)。NMR(CDCl3)δ3.55(2H，m)，2.1-2.4(3H，m)，1.46(9H，s)，0.98(3H，d).
將對(duì)-甲苯磺酰氯(13.2g)分批加到攪拌著的(3R)-4-羥基-3-甲基丁酸叔-丁酯(11g)、三乙胺(21ml)和二氯甲烷(120ml)的混合物中，攪拌混合物20小時(shí)。依次用水和稀碳酸鈉水溶液洗滌。通過相分離紙(Whatman IPS)過濾有機(jī)溶液并蒸發(fā)，得到(3R)-3-甲基-4-(對(duì)甲苯磺酰氧)丁酸叔丁酯油(20g)。
NMR(CDCl3)δ7.6(2H，d)，7.33(2H，d)，3.92(2H，d)，2.45(3H，s)，2.18-2.47(2H，m)，2.0-2.15(1H，m)，1.42(9H，s)，0.95(3H，d).實(shí)施例2用本領(lǐng)域熟知的常規(guī)方法得到下述用于說明的，含有本發(fā)明化合物的，用于治療或預(yù)防的劑量形式a) 片劑Img/片活性成分 1.0乳糖ph.Eur. 93.25Croscarmellose鈉 4.0玉米淀粉糊(5％w/v水糊)0.75硬脂酸鎂 1.0b) 片劑IImg/片活性成分 50乳糖ph.Eur. 223.75Croscarmellose鈉 6.0玉米淀粉 15.0聚乙烯吡咯烷酮(5％w/v水糊) 2.25硬脂酸鎂 3.0c) 片劑III mg/片活性成分 100乳糖ph.Eur. 182.75Croscarmellose鈉 12.0玉米淀粉糊(5％w/v水糊) 2.25硬脂酸鎂3.0d) 膠囊 mg/?；钚猿煞?10乳糖ph.Eur. 488.5硬脂酸鎂 1.5e) 注射液 mg/ml活性成分(酸加成鹽) 1.0
氯化鈉9.0純凈水至1ml實(shí)施例3下面是本發(fā)明(-)-(3R)化合物和相應(yīng)的(3RS)-外消旋化合物對(duì)大鼠作用研究的描述。將日劑量0、25、100或500mg/kg的(3RS)-外消旋化合物口服給四組Alderley Park Wistar大鼠，每組10只(每組包括5只雄鼠和5只雌鼠)。總共連續(xù)給藥7天，殺死動(dòng)物并測(cè)定。記錄當(dāng)劑量為500mg/kg/天時(shí)對(duì)10只大鼠組中6只鼠肝的副作用。
將日劑量0、50、250或1000mg/kg的(-)-(3R)化合物口服給四組Alderley Park Wistar大鼠，每組10只(每組包括5只雄鼠和5只雌鼠)。最高劑量是無法耐受的。4或5天以后，殺死該組中的4只大鼠，以500mg/kg/天的劑量施藥給剩下的6只大鼠供繼續(xù)研究?？偣策B續(xù)施用14天。殺死動(dòng)物并測(cè)定。觀察到劑量為250mg/kg/天的組對(duì)大鼠的肝無副作用。6只小鼠以1000mg/kg/天的劑量給藥3或4天，然后以500mg/kg/天的劑量給藥10或11天，也證明對(duì)肝無副作用。
根據(jù)上述結(jié)果，證明本發(fā)明(-)-(3R)化合物以500mg/kg/天的劑量對(duì)鼠肝不產(chǎn)生明顯副作用。
這意味著(-)-(3R)化合物比(3RS)-外消旋化合物毒性小。
權(quán)利要求
1.基本無(+)-(3S)立體異構(gòu)體的光學(xué)活性化合物(-)-(3R)-3-甲基-4-{4-[4-(4-吡啶基)哌嗪-1-基]苯氧基}丁酸，或其藥用鹽、酯、酰胺或溶劑化物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的光學(xué)活性化合物，其中至少有90％重量的(-)-(3R)異構(gòu)體和10％重量的或更少的相應(yīng)(+)-(3S)異構(gòu)體。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的光學(xué)活性化合物，其中至少有95％重量的(-)-(3R)異構(gòu)體和5％重量的或更少的相應(yīng)(+)-(3S)異構(gòu)體。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的光學(xué)活性化合物，其中至少有99％重量的(-)-(3R)異構(gòu)體和1％重量的或更少的相應(yīng)(+)-(3S)異構(gòu)體。
5.根據(jù)權(quán)利要求1到4中任一權(quán)項(xiàng)的光學(xué)活性化合物，其中藥用鹽是鹽酸鹽形式。
6.根據(jù)權(quán)利要求1到4中任一權(quán)項(xiàng)的光學(xué)活性化合物，其中藥用酯是甲基、乙基、丙基或叔丁基酯的形式。
7.根據(jù)權(quán)利要求1到4中任一權(quán)項(xiàng)的光學(xué)活性化合物，其中藥用酰胺是N-甲基-、N，N-二甲基-、N-乙基-N-甲基-或N，N-二乙基-丁酰胺的形式。
8.根據(jù)權(quán)利要求1到4中任一權(quán)項(xiàng)的光學(xué)活性化合物，其中藥用溶劑化物是水合物的形式。
9.制備前述權(quán)利要求中任一權(quán)項(xiàng)的光學(xué)活性化合物或其藥用鹽、酯、酰胺或溶劑化物的方法，包括a)使4-[4-(4-吡啶基)哌嗪-1-基]苯酚或其活性衍生物與手性中間體(3R)-4-羥基-3-甲基丁酸或其酯或其活性衍生物反應(yīng)b)使式I化合物
與手性中間體(3R)-3-甲基-4-[4-(哌嗪-1-基)苯氧基]丁酸或其酸加成鹽反應(yīng)，其中L是離去原子或基團(tuán)；c)分解式II酸
其中R是羧基保護(hù)基；d)拆分(3RS)-外消旋混合物，(3RS)-3-甲基-4-{4-[4-(4-吡啶基)-哌嗪-1-基]苯氧基}丁酸，和當(dāng)需要(-)-(3R)化合物的藥用鹽時(shí)，使得到的化合物與合適的酸或堿反應(yīng)；當(dāng)需要(-)-(3R)化合物的藥用酯或酰胺時(shí)，使得到的化合物與合適的醇或酰胺反應(yīng)。
10.基本無(3S)立體異構(gòu)體的光學(xué)活性化合物(3R)-3-甲基-4-羥基丁酸叔丁酯或其活性衍生物。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的化合物，其中活性衍生物是(3R)-3-甲基-4-(對(duì)甲苯磺酰氧)丁酸叔丁酯。
12.藥物組合物，其中含有與藥用稀釋劑或載體混合的權(quán)利要求1-8中任一權(quán)項(xiàng)的光學(xué)活性化合物或其藥用鹽、酯、酰胺或溶劑化物。
13.抑制需要治療的溫血?jiǎng)游锏难“迥姆椒?，其包括施用有效量的?quán)利要求1-8中任一權(quán)項(xiàng)的光學(xué)活性化合物或其藥用鹽、酯、酰胺或溶劑化物。
14.抑制需要治療的溫血?jiǎng)游锏难“迥?，同時(shí)顯著減少與施用(3-RS)-外消旋混合物有關(guān)的副作用的方法，其包括施用有效量的權(quán)利要求1-8中任一權(quán)項(xiàng)的光學(xué)活性化合物或其藥用鹽、酯、酰胺或溶劑化物。
15.抑制需要治療的溫血?jiǎng)游锏睦w維蛋白原與GPIIb/IIIa結(jié)合的方法，其包括施用有效量的權(quán)利要求1-8中任一權(quán)項(xiàng)的光學(xué)活性化合物或其藥用鹽、酯、酰胺或溶劑化物。
16.抑制需要治療的溫血?jiǎng)游镅ㄐ纬蛇^程中伴隨的不穩(wěn)定型心絞痛的方法，其包括施用有效量的權(quán)利要求1-8中任一權(quán)項(xiàng)的光學(xué)活性化合物或其藥用鹽、酯、酰胺或溶劑化物。
17.權(quán)利要求1-8中任一權(quán)項(xiàng)的光學(xué)活性化合物或其藥用鹽、酯、酰胺或溶劑化物用于制備預(yù)防或治療與血小板凝集有關(guān)的疾病的藥物的應(yīng)用。
18.權(quán)利要求1-8中任一權(quán)項(xiàng)的光學(xué)活性化合物或其藥用鹽、酯、酰胺或溶劑化物用于制備預(yù)防或治療與纖維蛋白原與GPIIb/IIIa結(jié)合有關(guān)疾病的藥物的應(yīng)用。
19.權(quán)利要求1-8中任一權(quán)項(xiàng)的光學(xué)活性化合物或其藥用鹽、酯、酰胺或溶劑化物用于制備預(yù)防或治療血栓形成過程中伴隨的不穩(wěn)定型心絞痛的藥物的應(yīng)用。
全文摘要
新的光學(xué)活性化合物(-)-(3R)-3-甲基-4-{4-[4-(4-吡啶基)哌嗪-1-基]苯氧基}丁酸，及其藥用鹽、酯、酰胺或溶劑化物。該化合物的制備方法，含有該化合物的藥物組合物和將其用于抑制細(xì)胞粘連如血小板凝集的應(yīng)用。
文檔編號(hào)A61K31/44GK1155884SQ9619059
公開日1997年7月30日 申請(qǐng)日期1996年5月28日 優(yōu)先權(quán)日1996年5月28日
發(fā)明者S·D·米爾斯 申請(qǐng)人:曾尼卡有限公司