專利名稱：蛋白激酶c抑制劑的制作方法
蛋白激酶C(PKC)是由起絲氨酸/蘇氨酸激酶作用的一族緊密相關(guān)的酶組成的。蛋白激酶C在細(xì)胞-細(xì)胞信號(hào)發(fā)出、基因表達(dá)以及在控制細(xì)胞分化和生長中起著重要的作用。目前，一般有至少十種已知的PKC同功酶在其組織分布、酶特異性和調(diào)節(jié)方面存在差異。
Nishizuka Y.Annu.Rev.Biochem.5831-44(1989);Nishizuka Y.Science 258607-614(1992)。
蛋白激酶C同功酶是鏈長為592至737個(gè)氨基酸的單多肽鏈。此同功酶含有通過結(jié)合肽連接的調(diào)節(jié)區(qū)域和催化區(qū)域。調(diào)節(jié)和催化區(qū)域可以再分成恒定與可變區(qū)。蛋白激酶C的催化區(qū)域非常類似于在其他蛋白激酶中存在的催化區(qū)域，而調(diào)節(jié)區(qū)域是PKC同功酶所特有的。PKC同功酶表現(xiàn)出在同族中氨基酸水平下的40-80%的同源性。然而，在不同種之間的單一同功酶的同源性一般大于97%。
蛋白激酶C是可通過多種因素變構(gòu)調(diào)節(jié)的膜結(jié)合酶。所述因素包括膜磷脂、鈣和某些膜脂類，如應(yīng)答磷脂酶活性所釋放的二?；视?。Bell，R.M.和Burns.D.J.，J.Biol.Chem.2664661-4664(1991);Nishizuka.Y.Science258607-614(1992)。蛋白激酶C同功酶之α、β-1、β-2和γ型需要膜磷脂、鈣和二?；视?巴豆油酯用于其完全激活作用。δ、ε、η和θ型PKC在其激活作用方式上是與鈣無關(guān)的。ζ和λ型PKC與鈣和二?；视途鶡o關(guān)，據(jù)信它們只需要膜磷脂用于其激活作用。
在一特定病癥中可能只涉及一種或兩種蛋白激酶C同功酶。例如，見于糖尿病的升高的血糖濃度會(huì)導(dǎo)致血管組織中β-2同功酶的同功酶特異性升高。Inoguchi等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA8911059-11065(1992)。在人血小板中與糖尿病相連的β同功酶的升高已經(jīng)與其對(duì)激動(dòng)劑的改變的應(yīng)答相關(guān)聯(lián)。BastyrⅢ，E.J.和Lu，J.Diabetes42(Suppl.1)97A(1993)?，F(xiàn)已表明人的維生素D受體被β蛋白激酶C選擇性磷酸化。這種磷酸化已經(jīng)同受體功能的改變相聯(lián)系。Hsieh等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA889315-9319(1991);Hsieh等人，J.Biol.Chem.26815118-15126(1993)。此外，最近的工作已表明β-2同功酶引起紅白血病細(xì)胞增殖，而α同功酶參與在這些相同細(xì)胞中的巨核細(xì)胞分化。Murray等人，J.Biol.Chem.26815847-15853(1993)。
蛋白激酶C同功酶的普遍存在的性質(zhì)及其在生理學(xué)中的重要作用提供了制備高度選擇性的PKC抑制劑的動(dòng)機(jī)。倘若證實(shí)了某些同功酶與病癥的聯(lián)系之證據(jù)，便可合理地假定，相對(duì)于其他PKC同功酶和其他蛋白激酶，對(duì)一種或兩種蛋白激酶C同功酶具有選擇性的抑制性化合物是優(yōu)良的治療劑。這種化合物由于其特異性而應(yīng)當(dāng)表現(xiàn)出較大的功效和較低的毒性。
微生物吲哚并咔唑staurosporine是一種與酶的催化區(qū)域互相作用的蛋白激酶C的有效抑制劑。Tamaoki等人，Biochem.Biophys.Res.Commun.135397-402(1986);Gross等人，Biochem.Pharmacol.40343-350(1990)。然而，該分子和緊密相關(guān)的化合物比起對(duì)其他蛋白激酶來，它們?nèi)狈?duì)蛋白激酶C的特異性，因而使其治療用途受到限制。Ruegg，U.T.和Burgess，G.M.Trends Pharmacol.Sci.10218-220(1989)。這種選擇性的缺乏導(dǎo)致這類分子的不可接受的毒性。
與staurosporine有關(guān)的另一類化合物雙吲哚馬來酰亞胺已經(jīng)成為最近工作的焦點(diǎn)。Davis等人，F(xiàn)EBS Lett.25961-63(1989);Twoemy等人，Biochem.Biophys.Res.Commun.1711087-1092(1990);Toullec等人，J.Biol.Chem.26615771-15781(1991);Davis等人，J.Med.Chem.35994-1001(1992);Bit等人，J.Med.Chem.3621-29(1993)。比起對(duì)其他蛋白激酶來，某些這類化合物已表現(xiàn)出對(duì)蛋白激酶C的選擇性。
盡管已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了對(duì)蛋白激酶C表現(xiàn)出特異性的化合物，但關(guān)于同功酶選擇性卻知之甚少。例如，對(duì)staurosporine的同功酶選擇性的分析表明，同功酶選擇性很小，只是相對(duì)于其他同功酶對(duì)ζ同功酶有較差的抑制作用，McGlynn等人，J.Cell.Biochem.49239-250(1992);Ward，N.E.和O′Brian，C.A.，Molec.Pharmacol.41387-392(1992)。對(duì)PKC-選擇性化合物3-[1-(3-二甲氨基丙基)吲哚-3-基]-4-(1H-吲哚-3-基)-1H-吡咯-2，5-二酮的研究表明了對(duì)鈣相關(guān)同功酶的很小的選擇性。Toullec等人，J.Biol.Chem.26615771-15781(1991)。對(duì)該化合物的繼后研究未觀察到α同功酶較β-1和β-2同功酶的差異或可能很小的選擇性。Martiny Baron等人，J.Biol.Chem.2689194-9197(1993);Wilkinson等人，Biochem.J.294335-337(1993)。因此，盡管經(jīng)過多年研究并發(fā)現(xiàn)了抑制蛋白激酶C(與其他蛋白激酶相比)的幾類化合物，但仍需要治療有效的同功酶選擇性抑制劑。
本發(fā)明提供了新的有效的蛋白激酶C抑制劑。本發(fā)明化合物對(duì)蛋白激酶C比對(duì)其他激酶具有選擇性，并且特別令人驚奇的是它們具有極高的同功酶選擇性。作為選擇性抑制劑，本發(fā)明化合物可用于治療與糖尿病及其并發(fā)癥有關(guān)的疾病、局部缺血、炎癥、中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病、心血管疾病、皮膚病和癌癥。
本發(fā)明提供了式Ⅰ化合物 其中W是-O-、-S-、-SO-、-SO2-、-CO-、C2-C6亞烷基、取代的亞烷基、C2-C6亞鏈烯基、-芳基-、-芳基(CH2)mO-、-雜環(huán)-、-雜環(huán)-(CH2)mO-、-稠雙環(huán)-、-稠雙環(huán)-(CH2)mO-、-NR3-、-NOR3-、-CONH-或-NHCO-;
X和Y獨(dú)立地是C1-C4亞烷基、取代的亞烷基，或X、Y和W結(jié)合在一起形成-(CH2)n-AA-;
R1獨(dú)立地是氫、鹵素、C1-C4烷基、羥基、C1-C4烷氧基、鹵代烷基、硝基、NR4R5、或-NHCO(C1-C4烷基);
R2是氫、CH3CO-、NH2、或羥基;
R3是氫、(CH2)m芳基、C1-C4烷基、-COO(C1-C4烷基)、-CONR4R5、-(C＝NH)NH2、-SO(C1-C4烷基)、-SO2(NR4R5)、或-SO2(C1-C4烷基);
R4和R5獨(dú)立地是氫、C1-C4烷基、苯基、芐基，或同與其鍵連的氮結(jié)合形成飽和或不飽和的5或6元環(huán);
AA是氨基酸殘基;
m獨(dú)立地是0、1、2或3;
n獨(dú)立地是1、2、3、4或5。
此外還提供了上述化合物的新中間體。這些中間體是式Ⅱ化合物。
其中V是-O-或N-CH3;
W是-O-、-S-、-SO-、-SO2-、-CO-、C2-C6亞烷基、取代的亞烷基、C2-C6亞鏈烯基、-芳基-、-芳基(CH2)mO-、-雜環(huán)-、-雜環(huán)-(CH2)mO-、-稠雙環(huán)-、-稠雙環(huán)-(CH2)mO-、-NR3-、-NOR3-、-CONH-或-NHCO-;
X和Y獨(dú)立地是C1-C4亞烷基、取代的亞烷基，或X、Y和W結(jié)合在一起形成-(CH2)n-AA-;
R1獨(dú)立地是氫、鹵素、C1-C4烷基、羥基、C1-C4烷氧基、鹵代烷基、硝基、NR4R5、或-NHCO(C1-C4烷基);
R3是氫、(CH2)m芳基、C1-C4烷基、-COO(C1-C4烷基)、-CONR4R5、-(C＝NH)NH2、-SO(C1-C4烷基)、-SO2(NR4R5)、或-SO2(C1-C4烷基);
R4和R5分別是氫、C1-C4烷基、苯基、芐基，或同與其鍵連的氮結(jié)合形成飽和或不飽和的5或6元環(huán);
AA是氨基酸殘基;
m獨(dú)立地是0、1、2或3;
n獨(dú)立地是1、2、3、4或5。
本發(fā)明的另一方面是制備式Ⅱ化合物的方法，包括將濃度為約1.5摩爾至約0.001摩爾的下式化合物 其中V是O或N-CH3;
R1獨(dú)立地是氫、鹵素、C1-C4烷基、羥基、C1-C4烷氧基、鹵代烷基、硝基、NR4R5、或-NHCO(C1-C4烷基);
m獨(dú)立地是0、1、2或3;
和濃度為約1.5摩爾至約0.001摩爾的下式烷基化劑的混合物，以約0.1ml/小時(shí)至約2.0ml/小時(shí)的速度在極性非質(zhì)子傳遞溶劑中，與約0.5至約10當(dāng)量的Cs2CO3混合。
其中L是離去基團(tuán);
W是-O-、-S-、-SO-、-SO2-、-CO-、C2-C6亞烷基、取代的亞烷基、C2-C6亞鏈烯基、-芳基-、-芳基(CH2)mO-、-雜環(huán)-、-雜環(huán)-(CH2)mO-、-稠雙環(huán)-、-稠雙環(huán)-(CH2)mO-、-NR3-、-NOR3-、-CONH-或-NHCO-;
X和Y獨(dú)立地是C1-C4亞烷基或取代的亞烷基;
R3是氫、(CH2)m芳基、C1-C4烷基、-COO(C1-C4烷基)、-CONR4R5、-(C＝NH)NH2、-SO(C1-C4烷基)、-SO2(NR4R5)、或-SO2(C1-C4烷基);
R4和R5獨(dú)立地是氫、C1-C4烷基、苯基、芐基，或同與其鍵連的氮結(jié)合形成飽和或不飽和的5或6元環(huán);
m獨(dú)立地是0、1、2或3。
制備式Ⅱ化合物的另一種方法包括將濃度為約3摩爾至約0.001摩爾的下式化合物與約0.5至約10當(dāng)量的Cs2CO3，以約0.1ml/小時(shí)至約2.0ml/小時(shí)的速度在極性非質(zhì)子傳遞溶劑中混合， 其中L2獨(dú)立地是離去基團(tuán);
V是-O-或N-CH3;
W是-O-、-S-、-SO-、-SO2-、-CO-、C2-C6亞烷基、取代的亞烷基、C2-C6亞鏈烯基、-芳基-、-芳基(CH2)mO-、-雜環(huán)-、-雜環(huán)-(CH2)mO-、-稠雙環(huán)-、-稠雙環(huán)-(CH2)mO-、-NR3-、-NOR3-、-CONH-或-NHCO-;
X和Y獨(dú)立地是C1-C4亞烷基或取代的亞烷基，R1獨(dú)立地是氫、鹵素、C1-C4烷基、羥基、C1-C4烷氧基、鹵代烷基、硝基、NR4R5、或-NHCO(C1-C4烷基);
R3是氫、(CH2)m芳基、C1-C4烷基、-COO(C1-C4烷基)、-CONR4R5、-(C＝NH)NH2、-SO(C1-C4烷基)、-SO2(NR4R5)、或-SO2(C1-C4烷基);
R4和R5獨(dú)立地是氫、C1-C4烷基、苯基、芐基，或同與其鍵連的氮結(jié)合形成飽和或不飽和的5或6元環(huán);
m獨(dú)立地是0、1、2或3。
本發(fā)明的另一方面是抑制蛋白激酶C的方法，包括對(duì)需要這種治療的哺乳動(dòng)物施用藥學(xué)上有效量的式Ⅰ化合物。此外還包括選擇性抑制β-1和β-2蛋白激酶C同功酶的方法，包括對(duì)需要這種治療的哺乳動(dòng)物施用藥學(xué)上有效量的式Ⅰ化合物。
本發(fā)明還提供了治療蛋白激酶C在病理學(xué)中已顯示出作用的疾病的方法，如局部缺血、炎癥、中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病、心血管疾病、皮膚病和癌癥，該方法包括對(duì)需要這種治療的哺乳動(dòng)物施用藥學(xué)上有效量的式Ⅰ化合物。
本發(fā)明可特別用于治療糖尿病并發(fā)癥，因此，本發(fā)明進(jìn)一步提供了治療糖尿病的方法，包括對(duì)需要這種治療的哺乳動(dòng)物施用藥學(xué)上有效量的式Ⅰ化合物。
本發(fā)明的最后一方面是藥物制劑，包括式Ⅰ化合物以及一種或多種藥學(xué)上可接受的賦形劑、載體或稀釋劑。
正如上述，本發(fā)明提供了選擇性抑制蛋白激酶C的式Ⅰ化合物。本發(fā)明的優(yōu)選化合物是式Ⅰ中基團(tuán)-X-W-Y-含有4至8個(gè)原子，可被取代或未取代的式Ⅰ化合物。最優(yōu)選基團(tuán)-X-W-Y-含有6個(gè)原子。
本發(fā)明的其他優(yōu)選化合物是，式Ⅰ中R1和R2是氫;W是取代的亞烷基、-O-、-S-、-CONH-、-NHCO-或-NR3-的化合物。
特別優(yōu)選的化合物是式Ⅰa化合物
其中Z是-(CH2)p-或-(CH2)p-O-(CH2)p-;R6是羥基、-SH-、C1-C4烷基、(CH2)m芳基、-NH(芳基)、或-NR4R5;R4是氫或C1-C4烷基;R5是氫、C1-C4烷基，或芐基;p是0、1或2;m獨(dú)立地是2或3。最優(yōu)選的式Ⅰa化合物是其中Z為CH2;R5為-NH2或-N(CH3)2的化合物。
其他優(yōu)選的化合物是其中W是-O-，Y是取代的亞烷基，X是亞烷基的化合物。這些化合物用式Ⅰb表示
其中Z是-(CH2)p-;R6是NR4R5;R4和R5分別是H或C1-C4烷基;p是0、1或2;m獨(dú)立地是2或3。最優(yōu)選的式Ⅰb化合物是其中p為1;R4和R5為甲基的化合物。
術(shù)語“鹵素”代表氟、氯、溴或碘。
術(shù)語“C1-C4烷基”代表具有1至4個(gè)碳原子的環(huán)狀、直鏈或支鏈烷基，如甲基、乙基、正丙基、異丙基、環(huán)丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基，等等。鹵代烷基是被一個(gè)或多個(gè)鹵原子、優(yōu)選1至3個(gè)鹵原子取代的這類烷基。鹵代烷基的一個(gè)實(shí)例是三氟甲基。C1-C4烷氧基是由一個(gè)-O-鍵共價(jià)鍵連的C1-C4烷基。
術(shù)語“C1-C4亞烷基”代表式-(CH2)r-中r是1至4的含有1至4個(gè)碳的直鏈亞烷基。C1-C4亞烷基的實(shí)例包括亞甲基、亞乙基、1，3-亞丙基、甲基亞乙基、1，4-亞丁基，等等。類似地，“C2-C6亞烷基”代表2至6個(gè)碳的直鏈亞烷基。優(yōu)選地，C2-C6亞烷基是2至4個(gè)碳的亞烷基。
術(shù)語“C2-C6亞鏈烯基”代表含有1個(gè)或多個(gè)雙鍵、優(yōu)選1個(gè)或2個(gè)雙鍵的2至6個(gè)碳的直鏈或支鏈烴基。C2-C6亞鏈烯基的實(shí)例包括亞乙烯基、亞丙烯基、1，3-亞丁二烯基和1，3，5-亞己三烯基。
術(shù)語“芳基”代表取代或未取代的苯基或萘基。芳基可以被一個(gè)或兩個(gè)分別選自下面基團(tuán)的基團(tuán)任意取代羥基、羧基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷基、鹵代烷基、硝基、-NR4R5、-NHCO(C1-C4烷基)、-NHCO-芐基、-NHCO-苯基、SH、S(C1-C4烷基)、-OCO(C1-C4烷基)、-SO2(NR4R5)、-SO2(C1-C4烷基)、-SO2-苯基或鹵素。術(shù)語“(CH2)m芳基”優(yōu)選為芐基或苯基。
術(shù)語“取代的亞烷基”代表下列基團(tuán) 其中Z是-(CH2)p-或-(CH2)p-O-(CH2)p-;R6是C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、(CH2)m芳基、(CH2)m芳氧基、羥基、羧基、-COO(C1-C4烷基)、-COO((CH2)m芳基)、-CO(C1-C4烷基)、-NR4R5、-N(R4R5)(OR5)、-NH(CH2)m芳基、-NH(CH2)m吡啶基、-CONH((CH2)m芳基)、-CONH(C1-C4烷基)、-NHCO(C1-C4烷基)、-NHCO(CH2)m芳基、-OCONH(C1-C4烷基)、-OCONH(CH2)m芳基、-NHCOO-烷基、-NHCOO-芐基、-NHSO2(C1-C4烷基)、-NHSO2(CH2)m芳基、-CN、-SH、-S(C1-C4烷基)、-S-芳基、-SO2(NR4R5)、-SO2(C1-C4烷基)、-SO(C1-C4烷基)、糖基、或雜環(huán)基;R4和R5分別是氫、C1-C4烷基、苯基、芐基，或同與其鍵連的氮結(jié)合形成飽和或不飽和的5或6元環(huán);p獨(dú)立地是0、1或2;m獨(dú)立地是0、1、2或3。優(yōu)選Z是-CH2-;R6是C1-C4烷基、芳基或-NR4R5。
術(shù)語“雜環(huán)”代表穩(wěn)定的取代或未取代的飽和或不飽和的5或6元環(huán)，所述環(huán)具有1至4個(gè)相同或不同的選自硫、氧和氮的雜原子;當(dāng)雜環(huán)含有兩個(gè)相鄰碳原子時(shí)，此相鄰碳原子可構(gòu)成式-CH＝CH-基;條件是(1)當(dāng)雜環(huán)為5元環(huán)時(shí)，雜原子包括不多于兩個(gè)硫或兩個(gè)氧原子，但不是兩者;(2)當(dāng)雜環(huán)為6元環(huán)且是芳香環(huán)時(shí)，不存在硫和氧。只要得到穩(wěn)定結(jié)構(gòu)，雜環(huán)可以在任何碳或氮上被連接。雜環(huán)可以被一個(gè)或兩個(gè)分別選自下面基團(tuán)的基團(tuán)取代C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、羥基、乙酰基、羧基、鹵代烷基、硝基、-NR4R5、-NHCO(C1-C4烷基)、-NHCO-芐基、-NHCO-苯基、SH、S(C1-C4烷基)、-OCO(C1-C4烷基)、-SO2(NR4R5)、-SO2(C1-C4烷基)、-SO2-苯基、或鹵素。雜環(huán)的實(shí)例包括吡唑、吡唑啉、咪唑、乙酰基咪唑、異噁唑、三唑、四唑、噁唑、1，3-二氧雜環(huán)戊二烯酮、噻唑、噁二唑、噻二唑、吡啶、聯(lián)吡啶、嘧啶、piperizine、嗎啉、吡嗪、吡咯烷、哌啶、哌嗪、噁唑烷酮、咪唑烷酮和氨基吡啶。
術(shù)語“糖基”代表5或6碳糖，優(yōu)選阿洛糖基、阿卓糖基、葡萄糖基、甘露糖基、古洛糖基、艾杜糖基、半乳糖基、塔羅糖基、阿拉伯糖基、木糖基、來蘇糖基、鼠李糖基、核糖基、脫氧呋喃糖基、脫氧吡喃糖基和脫氧核糖基。葡萄糖可以是疊氮取代的，O-乙?；?，O-甲基化的，氨基、一和二烷基氨基取代的，或酰氨基取代的。
術(shù)語“稠雙環(huán)”代表下式的穩(wěn)定的稠雙環(huán)體系 其中“雜環(huán)”代表取代或未取代的飽和或不飽和5或6元環(huán)，所述環(huán)具有1至3個(gè)相同或不同的選自硫、氧和氮的雜原子;當(dāng)“雜環(huán)”含有兩個(gè)相鄰碳原子時(shí)，此相鄰碳原子可以構(gòu)成式-CH＝CH-基;條件是(1)當(dāng)“雜環(huán)”為5元環(huán)時(shí)，雜原子包括不多于兩個(gè)硫或兩個(gè)氧原子，但不是兩者;(2)當(dāng)“雜環(huán)”為6元環(huán)且是芳香環(huán)時(shí)，不存在硫和氧。只要得到穩(wěn)定結(jié)構(gòu)，稠雙環(huán)可以在任何碳或氮上被連接。稠雙環(huán)可以被一個(gè)或兩個(gè)分別選自下面基團(tuán)的基團(tuán)取代C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、羥基、羧基、鹵素烷基、硝基、-NR4R5、-NHCO(C1-C4烷基)、-NHCO-芐基、-NHCO-苯基、SH、S(C1-C4烷基)、-OCO(C1-C4烷基)、-SO2(NR4R5)、-SO2(C1-C4烷基)、-SO2-苯基、或鹵素。稠雙環(huán)的實(shí)例包括吲哚、咪唑并(1，2-a)吡啶、苯并三唑、苯并咪唑、苯并噻唑、苯并噁唑、苯并噁噻唑、喹啉、異喹啉、2，3-二氮雜萘、喹唑啉、喹唑啉酮、喹喔啉和氨基異喹啉。
術(shù)語“氨基酸殘基”是指式 基團(tuán)，其中R代表氨基酸的可變側(cè)鏈，R7是氫或羥基。氨基酸的可變側(cè)鏈代表鍵連到α-碳原子上的原子或基團(tuán)，所述α-碳原子同時(shí)具有鍵連到其上的羧基和氨基。例如，天然存在的氨基酸的可變部分是下列各式
除了天然存在的氨基酸，術(shù)語氨基酸殘基包括位置異構(gòu)體及變體。氨基酸殘基所代表的位置異構(gòu)體和變體的實(shí)例包括2-氨基己二酸(Aad)、3-氨基己二酸(bAad)、β-丙氨酸(bAla)、2-氨基丁酸(Abu)、4-氨基丁酸(4Abu)、6-氨基己酸(Acp)、2-氨基庚酸(Ahe)、2-氨基異丁酸(Aib)、3-氨基異丁酸(bAib)、2-氨基庚二酸(Apm)、2，4-二氨基丁酸(Dbu)、鎖鏈賴氨素(Des)、2，2′-二氨基庚二酸(Dpm)、2，3-二氨基丙酸(Dpr)、N-乙基甘氨酸(EtGly)、N-乙基天冬酰胺(EtAsn)、羥基賴氨酸(Hyl)、別羥基賴氨酸(aHyl)、3-羥基脯氨酸(3Hyp)、4-羥基脯氨酸(4Hyp)、異鎖鏈賴氨素(Ide)、別異亮氨酸(alle)、萘基甘氨酸、N-甲基甘氨酸(MeGly)、N-甲基異亮氨酸(MeIle)、N-甲基賴氨酸(MeLys)、正纈氨酸(Nva)、正亮氨酸(Nle)、鳥氨酸(Orn)、苯基甘氨酸、氰基丙氨酸(CA)、γ-羧基谷氨酸、O-磷酸絲氨酸、α-萘基丙氨酸(NA)、β-萘基丙氨酸(bNA)、S-半乳糖基半胱氨酸、甘氨酰胺、N-甲?；鞍彼?、酪氨酸-O-硫酸酯、等等。這些氨基酸殘基可以是D或L構(gòu)型。除非另有說明，所談及的氨基酸是指L構(gòu)型。
說明書中使用的術(shù)語“離去基團(tuán)”可被本領(lǐng)域技術(shù)人員所理解。通常，離去基團(tuán)是為了取代而增強(qiáng)與其相連原子的親電性的任何基團(tuán)或原子。優(yōu)選的離去基團(tuán)是三氟甲磺酸酯(triflate)、甲磺酸酯、甲苯磺酸酯、亞氨酸酯、氯化物、溴化物和碘化物衍生的基團(tuán)。如果烷基化劑含有氨基酸殘基(即X、W和Y結(jié)合形成-(CH2)n-AA-)，與羧基連接的離去基團(tuán)優(yōu)選為五氟苯基酯或?qū)ο趸锦ァ?br> 說明書中使用的術(shù)語“羧基保護(hù)基”是指在化合物的其他官能團(tuán)上進(jìn)行反應(yīng)時(shí)常用于封閉或保護(hù)羧酸基的羧酸基的一種酯衍生物。所用的羧基保護(hù)基的種類并非關(guān)鍵，只要衍生的羧酸對(duì)后繼反應(yīng)的條件是穩(wěn)定的，且在適當(dāng)?shù)臅r(shí)候可以被除去而不破壞分子的其余部分。T.W.Greene和P.Wuts，Protective Groups in Organic Synthesis，John Wiley & Sons，New York，N.Y.，1991，第5章中給出了一系列常用的保護(hù)基。又見E.Haslam，Protective Groups in Organic Chmistry，J.G.W.McOmie，Ed.Plenum Press，New York，N.Y.1973。相關(guān)術(shù)語是“被保護(hù)的羧基”，它是指羧基被保護(hù)的基團(tuán)。
說明書中使用的術(shù)語“羥基保護(hù)基”是指在化合物的其他官能團(tuán)上進(jìn)行反應(yīng)時(shí)常用于封閉或保護(hù)羥基的羥基的一種醚或酯衍生物。所用的羥基保護(hù)基的種類并非關(guān)鍵，只要衍生的羥基對(duì)后繼反應(yīng)的條件是穩(wěn)定的，且在適當(dāng)?shù)臅r(shí)候可以被除去而不破壞分子的其余部分。T.W.Greene和P.Wuts，Protective Groups in Organic Synthesis，John Wiley & Sons，New York，N.Y.，1991中給出了一系列常用的保護(hù)基。優(yōu)選的羥基保護(hù)基是叔丁基二苯基甲硅烷氧基(TBDPS)、叔丁基二甲基甲硅烷氧基(TBDMS)、三苯甲基(三苯甲游基)、甲氧基三苯甲基、或烷基或芳基酯。相關(guān)術(shù)語是“被保護(hù)的羥基”，它是指羥基被保護(hù)的基團(tuán)。
說明書中使用的術(shù)語“氨基保護(hù)基”是指使化合物上其他官能團(tuán)發(fā)生反應(yīng)時(shí)常用于封閉或保護(hù)氨基的氨基取代基。所用的氨基保護(hù)基的種類并非關(guān)鍵，只要衍生的氨基對(duì)后繼反應(yīng)的條件是穩(wěn)定的且在適當(dāng)?shù)臅r(shí)候可以被除去而不破壞分子的其余部分。T.W.Greene和P.Wuts，Protective Groups in Organic Synthesis，第7章中給出了一系列常用的保護(hù)基。又見J.W.Barton，Protective Groups in Organic Chemistry，第2章。優(yōu)選的氨基保護(hù)基是叔丁氧羰基、鄰苯二甲酰亞胺、環(huán)烷基和芐氧羰基。相關(guān)術(shù)語“被保護(hù)的氨基”定義為用所定義的氨基保護(hù)基取代的氨基。
說明書中使用的術(shù)語“-NH保護(hù)基”是指使化合物上的其他官能團(tuán)發(fā)生反應(yīng)時(shí)常用于封閉或保護(hù)-NH官能基的亞類氨基保護(hù)基。所用的保護(hù)基的種類并非關(guān)鍵，只要衍生的氨基對(duì)后繼反應(yīng)的條件是穩(wěn)定的，且在適當(dāng)?shù)臅r(shí)候可被除去而不破壞分子的其余部分。T.W.Greene和P.Wuts，Protective Groups in Organic Synthesis，第7章，362-385頁中給出了一系列常用的保護(hù)基。優(yōu)選的-NH保護(hù)基是氨基甲酸酯、酰胺、烷基或芳基磺酰胺。相關(guān)術(shù)語“被保護(hù)的-NH”定義為用所定義的-NH保護(hù)基取代的基團(tuán)。
本文中使用的術(shù)語“藥學(xué)上有效量”代表能夠抑制哺乳動(dòng)物PKC活性的本發(fā)明化合物的量。當(dāng)然，根據(jù)本發(fā)明施用的化合物的具體劑量視所涉及病案的具體情況而定，包括給藥化合物、給藥途徑、治療的具體疾病和類似的考慮。化合物可以通過各種途徑被給藥，包括口服、直腸、經(jīng)皮、皮下、局部、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)或經(jīng)鼻途徑。對(duì)于所有情況，一般的日劑量含有約0.01mg/kg至約20mg/kg的本發(fā)明活性化合物。優(yōu)選的日劑量為約0.05至約10mg/kg，理想的是約0.1至約5mg/kg。然而對(duì)于局部給藥，一般劑量為每cm2被感染組織約1至約500μg化合物。優(yōu)選的化合物施用量為約30至約300μg/cm2，更優(yōu)選約50至約200μg/cm2，最優(yōu)選約60至約100μg/cm2。
本文所用的術(shù)語“治療”描述了為防治疾病、病癥或失調(diào)的目的對(duì)病人的管理和護(hù)理，并包括本發(fā)明化合物的給藥以抑制癥狀或并發(fā)癥的出現(xiàn)，減輕癥狀或并發(fā)癥，或消除疾病、病癥和失調(diào)。
術(shù)語“同功酶選擇性”是指比起蛋白激酶C同功酶α、γ、δ、ε、ξ和η來，對(duì)蛋白激酶C β-1或β-2同功酶的優(yōu)先抑制作用。通常，在如PKC測試中所測得的抑制PKC β-1或β-2同功酶所需劑量和對(duì)蛋白激酶Cα同功酶的相等抑制作用所需劑量中，化合物表現(xiàn)出最小八倍的差異因子(優(yōu)選十倍差異因子)?；衔镌谝种坡实姆秶鷥?nèi)表現(xiàn)出這種差異因子，并以在IC50即50%抑制率上的差異為例。這樣，同功酶選擇性化合物由于其對(duì)其他PKC同功酶的極微的抑制作用，使其以大大降低的濃度及較低的毒性抑制蛋白激酶C的β-1和β-2同功酶。
借助于其酸性基團(tuán)，式Ⅰ化合物包括其藥學(xué)上可接受的堿加成鹽。這些鹽包括由無機(jī)堿如氫氧化銨、堿金屬和堿土金屬氫氧化物、碳酸鹽、碳酸氫鹽等等衍生的鹽，及其由堿性有機(jī)胺如脂族和芳族胺、脂族二胺、羥基烷胺等等衍生的鹽。因此用于制備本發(fā)明的鹽的這類堿包括氫氧化銨、碳酸鉀、碳酸氫鈉、氫氧化鈣、甲胺、二乙胺、乙二胺、環(huán)己胺、乙醇胺，等等。
由于堿性基團(tuán)，式Ⅰ化合物還可以作為藥學(xué)上可接受的酸加成鹽存在。常用于形成這類鹽的酸包括無機(jī)酸，如鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸和磷酸，以及有機(jī)酸，如對(duì)甲苯磺酸、甲磺酸、草酸、對(duì)溴苯磺酸、碳酸、琥珀酸、檸檬酸、苯甲酸、乙酸和相關(guān)的無機(jī)和有機(jī)酸。因此，這類藥學(xué)上可接受的鹽包括硫酸鹽、焦硫酸鹽、硫酸氫鹽、亞硫酸鹽、亞硫酸氫鹽、磷酸鹽、磷酸一氫鹽、磷酸二氫鹽、偏磷酸鹽、焦磷酸鹽、氯化物、溴化物、碘化物、乙酸鹽、丙酸鹽、癸酸鹽、辛酸鹽、丙烯酸鹽、甲酸鹽、異丁酸鹽、庚酸鹽、丙炔酸鹽、草酸鹽、丙二酸鹽、琥珀酸鹽、辛二酸鹽、癸二酸鹽、富馬酸鹽、馬來酸鹽、2-丁炔-1，4-二酸鹽、3-己炔-2，5-二酸鹽、苯甲酸鹽、氯苯甲酸鹽、羥基苯甲酸鹽、甲氧基苯甲酸鹽、苯二甲酸鹽、二甲苯磺酸鹽、苯乙酸鹽、苯丙酸鹽、苯丁酸鹽、檸檬酸鹽、乳酸鹽、馬尿酸鹽、β-羥基丁酸鹽、乙醇酸鹽、蘋果酸鹽、酒石酸鹽、甲磺酸鹽、丙磺酸鹽、萘-1-磺酸鹽、萘-2-磺酸鹽、扁桃酸鹽，等等。
除了藥學(xué)上可接受的鹽，本發(fā)明中還包括其他鹽。它們可在化合物的純化、其他鹽的制備、或在化合物或中間體的鑒定和表征中用作中間體。
式Ⅰ化合物的藥學(xué)上可接受的鹽也可以各種溶劑化物的形式存在，如與水、甲醇、乙醇、二甲基甲酰胺、乙酸乙酯等的溶劑化物。也可以制備這類溶劑化物的混合物。這類溶劑化物的來源可以來自結(jié)晶溶劑，它們是在制備或結(jié)晶溶劑中固有的或外加到這種溶劑中的。這類溶劑化物在本發(fā)明范圍之內(nèi)。
當(dāng)然可能存在式Ⅰ化合物的各種立體異構(gòu)形式;例如，W在取代的亞烷基部分中可含有手性碳原子?；衔镆话惚恢苽涑蔀橥庀w，并可以方便地就這樣使用，但是如果需要，可以通過常規(guī)技術(shù)分離或合成單一的對(duì)映體。這類外消旋體和單一對(duì)映體及其混合物構(gòu)成了本發(fā)明的一部分。
本發(fā)明還包括式Ⅰ化合物的藥學(xué)上可接受的藥物前體。藥物前體是已被化學(xué)修飾并可能在其作用部位呈生物惰性，但是可以通過一種或多種酶或其他體內(nèi)過程降解或改變?yōu)槟阁w生物活性形式的藥物。這種藥物前體應(yīng)具有與母體不同的藥物動(dòng)力學(xué)曲線，使其比母體更易于通過粘膜上皮吸收，具有更好的成鹽或溶解性，和/或改進(jìn)的系統(tǒng)穩(wěn)定性(例如，血漿半衰期的延長)。這類化學(xué)修飾一般包括下列幾種1)可以通過酯酶或脂酶斷裂的酯或酰胺衍生物;
2)可以被特異性或非特異性蛋白酶識(shí)別的肽;或3)通過對(duì)藥物前體形式或修飾的藥物前體形式的膜選擇在作用部位聚集的衍生物;或上述1至3的任意組合。例如，在H.Bundgaard，Design of Prodrugs，(1985)中描述了適宜的藥物前體衍生物的選擇和制備的常規(guī)方法。
在Davis等人的美國專利5，057，614中描述了某些雙吲哚-N-馬來酰亞胺衍生物的合成，該文獻(xiàn)引為參考。一般地，本發(fā)明化合物可以按下列方案制備
方案1 R1、m和鹵素與前面的定義相同。鹵素優(yōu)選是氯、溴或碘?；衔铫髢?yōu)選是2，3-二氯N-甲基馬來酰亞胺。
化合物Ⅲ和吲哚化合物Ⅳ之間的反應(yīng)一般稱作格利雅反應(yīng)。該反應(yīng)在惰性有機(jī)溶劑如甲苯中，在室溫至反應(yīng)混合物的回流溫度的溫度下進(jìn)行。最為重要的是，方案1中所示的反應(yīng)取決于溶劑條件。當(dāng)在甲苯∶THF∶乙醚溶劑體系中進(jìn)行時(shí)，反應(yīng)得到化合物Ⅴ，其產(chǎn)率大于80%且純度大于95%。用氯化胺(NH4Cl)使產(chǎn)物從反應(yīng)混合物中沉淀出來。通過一般技術(shù)可以分離出所得中間體化合物Ⅴ。
然后用本領(lǐng)域已知的并在Brenner等人的Tetrahedron 442887-2892(1988)中所述的方法，通過堿解將雙-3，4-(3′-吲哚基)-1N-甲基吡咯-2，5-二酮化合物Ⅴ轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的式Ⅵ的酸酐。優(yōu)選地，使化合物Ⅴ與5N KOH在乙醇中在25℃至回流的溫度下反應(yīng)。

式Ⅴ化合物一般比式Ⅵ化合物穩(wěn)定。因此，優(yōu)選按照方案2使化合物Ⅴ反應(yīng)生成式Ⅰ化合物。然而，本領(lǐng)域技術(shù)人員會(huì)認(rèn)識(shí)到也可以按照方案2使式Ⅵ化合物反應(yīng)。
方案2 X、Y和W與前面的定義相同。L是良好的離去基團(tuán)，如氯、溴、碘、甲磺?；⒓妆交酋；?，等等。L也可以是通過本領(lǐng)域已知方法容易地轉(zhuǎn)化為良好離去基團(tuán)的羥基或其他前體。例如，可以使羥基與甲磺酰氯反應(yīng)生成甲磺酸酯離去基團(tuán)而使羥基很容易地轉(zhuǎn)化為磺酸酯如甲磺酸酯。
方案2所表示的反應(yīng)是用制備N-取代吲哚的任何已知方法完成的。該反應(yīng)通常包含大約等摩爾量的兩種試劑，不過其他比例特別是烷基化試劑過量的比例是有效可行的。該反應(yīng)最好在極性非質(zhì)子傳遞溶劑中使用堿金屬鹽或其他本領(lǐng)域已知的烷基化條件來進(jìn)行。當(dāng)離去基團(tuán)是溴或氯時(shí)，可以加入催化量的碘化物鹽(如碘化鉀)以加速反應(yīng)。反應(yīng)條件包括下列在二甲基甲酰胺或四氫呋喃中的六甲基二硅氮化鉀，在二甲基甲酰胺中的氫化鈉。
優(yōu)選地，反應(yīng)是在緩慢反向加入下用碳酸銫在乙腈、二甲基甲酰胺(DMF)或四氫呋喃(THF)中進(jìn)行的。反應(yīng)溫度優(yōu)選為約室溫至約反應(yīng)混合物的回流溫度。
本領(lǐng)域技術(shù)人員會(huì)認(rèn)識(shí)到方案2中描述的反應(yīng)可用式Ⅶ a化合物來進(jìn)行L-Y′L-X′ⅦaX′和Y′是保護(hù)的羧基、保護(hù)的羥基或保護(hù)的胺。在方案2的烷基化反應(yīng)之后，可以將X′和Y′轉(zhuǎn)化成能夠偶合形成W的基團(tuán)。該方法是制備W為-S-、-O-或NR3的式Ⅰ化合物的優(yōu)選方法。X′和Y′之偶合形成各種醚、硫醚或氨基醚衍生物是本領(lǐng)域已知的，并被描述在例如下列文獻(xiàn)中Ito等人，Chem.Pharm.Bull.41(6)1066-1073(1993);Kato等人，J.Chem.Pharm.Bull.34486(1986);Goodrow等人，Synthesis 1981457;Harpp等人，J.Am.Chem.Soc，932437(1971);和Evans等人，J.Org.Chem.501830(1985)。
本領(lǐng)域技術(shù)人員還會(huì)認(rèn)識(shí)到可以按照方案3所述的兩步合成法，將式Ⅴ化合物轉(zhuǎn)化為式Ⅱ化合物。
方案3
R1、X、W、Y、V和L與前面的定義相同。L2是保護(hù)的羥基或者是可以通過本領(lǐng)域已知的方法容易地轉(zhuǎn)化為良好離去基團(tuán)的其他基團(tuán)?；衔铫趸颌雠c化合物Ⅷ的偶合是如前面所討論的烷基化反應(yīng)。將單烷基化中間體Ⅸ去保護(hù)并將L2轉(zhuǎn)化為離去基團(tuán)。例如，如果羥基用叔丁基二甲基甲硅烷基(TBDMS)保護(hù)，則用酸性甲醇選擇性除去TBDMS。然后將所得游離羥基轉(zhuǎn)化為離去基團(tuán)，如生成烷基鹵，優(yōu)選烷基碘或烷基溴(在三苯膦中的CBr4)或磺酸酯(三乙胺中的甲磺酰氯)。然后在室溫至回流的溫度下，通過向在極性非質(zhì)子傳遞溶劑如乙腈、DMF、THF中的堿(如六甲基二硅氮化鉀或氫化鈉，但優(yōu)選Cs2CO3)溶液中的緩慢反向加入進(jìn)行烷基化，形成大環(huán)內(nèi)酯。
方案2和3舉例說明了本發(fā)明的方法。最出人預(yù)料的是，當(dāng)在向極性非質(zhì)子傳遞溶劑中的Cs2CO3緩慢反向加入下進(jìn)行烷基化反應(yīng)時(shí)，可以極高的產(chǎn)率制備式Ⅱ化合物。緩慢反向加入包括將化合物和烷基化劑的混合物(方案2)或化合物(方案3)與堿以約0.1ml/小時(shí)至約2.0ml/小時(shí)的速度混合?；旌衔镏忻糠N試劑的濃度為約1.5摩爾至約0.001摩爾。當(dāng)用單烷基化化合物(方案3)進(jìn)行時(shí)，濃度為約3摩爾至約0.001摩爾。緩慢加入使反應(yīng)器中試劑濃度為約0.01微摩爾至1.5摩爾。本領(lǐng)域技術(shù)人員公認(rèn)，可以較高的添加速度在反應(yīng)中使用較低的試劑濃度。同樣，可以較低的添加速度在反應(yīng)中使用較高的試劑濃度。優(yōu)選地，在化合物和烷基化劑為0.37摩爾時(shí)以約0.14ml/小時(shí)加入化合物。優(yōu)選加入過量Cs2CO3，最優(yōu)選Cs2CO3與烷基化劑的比例為4∶1。優(yōu)選的極性非質(zhì)子傳遞溶劑是乙腈、二甲基甲酰胺(DMF)、丙酮、二甲亞砜(DMSO)、二噁烷、二甘醇二甲醚、四氫呋喃或試劑可溶于其中的其他極性非質(zhì)子傳遞溶劑。反應(yīng)在約0℃至回流的溫度下進(jìn)行。本領(lǐng)域技術(shù)人員公認(rèn)化合物和烷基化劑的混合物之比例并非關(guān)鍵。然而，優(yōu)選試劑以彼此0.5至3當(dāng)量的比例混合。最優(yōu)選試劑以1∶1混合。
當(dāng)V是N-CH3時(shí)，通過堿解將化合物Ⅱ轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的酸酐(V是O)。堿解包括在C1-C4醇(優(yōu)選乙醇)、DMSO/水、二噁烷/水或乙腈/水中，在約25℃至優(yōu)選約回流的溫度下，使化合物與堿(如氫氧化鈉或氫氧化鉀)反應(yīng)。反應(yīng)物的濃度并非關(guān)鍵。
通過氨解將酸酐(V是O)轉(zhuǎn)化為式Ⅰ的馬來酰亞胺。氨解包括在極性非質(zhì)子傳遞溶劑(如DMF)中，在室溫下使酸酐與過量的六甲基二硅氮烷或銨鹽(乙酸銨、溴化銨或氯化銨)和C1-C4醇(優(yōu)選甲醇)反應(yīng)。優(yōu)選地，六甲基二硅氮烷或銨鹽以大于約5∶1當(dāng)量酸酐的比例反應(yīng)。
制備式Ⅰ化合物的另一方法示于方案4中。該方法特別適用于W為-NH，X或Y為取代的亞烷基的情形。
方案4
Ac是乙?；1、R6、Z、n和m與前面的定義相同?；衔铫雠cⅩ的烷基化反應(yīng)在上述本領(lǐng)域已知的條件下發(fā)生。同樣，化合物Ⅸ與α-鹵代酮化合物Ⅻ的烷基化反應(yīng)在上述條件下發(fā)生。酸酐轉(zhuǎn)化為馬來酰亞胺化合物ⅩⅤ的反應(yīng)按如上所述來進(jìn)行。例如，在惰性有機(jī)溶劑(如DMF)中，在室溫下使酸酐與六甲基二硅氮烷和甲醇反應(yīng)，可將酸酐轉(zhuǎn)化為雙吲哚馬來酰亞胺。
OAc表示的保護(hù)的羥基極易水解形成醇(例如，在甲醇和THF水溶液中的K2CO3)。用本領(lǐng)域已知的方法將所得醇轉(zhuǎn)化為離去基團(tuán)，如使醇與甲磺酰氯在三乙胺中于0℃下反應(yīng)。在DMF中于50℃下離去基團(tuán)被疊氮化物(如NaN3)取代。在H2存在下使用林德拉(Lindlar)催化劑將所得疊氮化物還原形成胺。通過分子內(nèi)席夫堿使大環(huán)閉合。用標(biāo)準(zhǔn)條件(如NaCNBH3或其他還原劑)將席夫堿還原形成式Ⅰ的大環(huán)。
制備式Ⅰ化合物的另一方法示于方案5中。該方法特別適用于X、W和Y一起形成-(CH2)n-AA-的情形。
方案5 R1、Ac、V、m和n與前面的定義相同。P1代表氨基保護(hù)基。R代表氨基酸的可變側(cè)鏈。如Klausner等人在J.Chem.Soc.Perkin I 607-631(1977)和Nakagawa等人在J.Am.Chem.Soc.1053709-3710(1983)中所述，用18-冠-6和KF在THF、DMF或二甲氧基乙烷中在室溫下進(jìn)行化合物ⅩⅠⅤ與活化氨基酸(如所例舉的對(duì)硝基苯酯)的?；磻?yīng)。如方案4所述通過形成分子內(nèi)席夫堿進(jìn)行大環(huán)的閉合，生成化合物ⅩⅠⅤ。
制備式Ⅰ化合物的另一方法及當(dāng)W是-CONH-或-NHCO-時(shí)的優(yōu)選方法描述在方案6中。
方案6 R1、Ac、V、P1、m和n與前面的定義相同?；衔铫c化合物ⅩⅪ之間的反應(yīng)在乙基二異丙基胺存在下在二氯甲烷中于0℃下進(jìn)行。在上述烷基化條件下，通過游離吲哚氮與α-鹵代羰基末端的分子內(nèi)烷基化反應(yīng)形成大環(huán)。按如上所述將保護(hù)的馬來酰亞胺去保護(hù)生成化合物ⅩⅩⅢ。
制備中間體化合物Ⅺ和ⅩⅩ的另一種方法描述于方案7中。
方案7 Ac與前面的定義相同;P是吲哚保護(hù)基，如叔丁氧羰基或本領(lǐng)域已知的其他吲哚保護(hù)基。T.W.Greene和P.Wuts，Protecting Groups in Organic Synthesis，第7章，385頁。方案7所述反應(yīng)稱作佩金縮合反應(yīng)。在Hill等人J.Med.Chem.3621-29(1993)中描述了該反應(yīng)。通常，在-78℃與混合物的回流溫度之間的溫度(優(yōu)選0℃)下，向化合物XXIV在惰性有機(jī)溶劑(如鹵代脂族烴，如二氯甲烷)中的無水溶液中加入草酰氯。約1至3小時(shí)后除去揮發(fā)物。將所得固體溶于無水鹵代脂族烴溶劑(如二氯甲烷)中，并在酸結(jié)合劑、優(yōu)選叔胺(如三乙胺)存在下，在室溫下將其加入化合物XXV中。
按照方案4或5使所得酸酐化合物Ⅺ反應(yīng)，或如前所述將其轉(zhuǎn)化為馬來酰亞胺或保護(hù)的馬來酰亞胺。
通過本領(lǐng)域已知方法可將化合物Ⅺ的保護(hù)的羥基(優(yōu)選例舉的OAc)轉(zhuǎn)化為醇。例如，使化合物Ⅺ與NH4OH或氨水在DMF中于高溫(如140℃)下反應(yīng)。用本領(lǐng)域已知方法將所得醇轉(zhuǎn)化為胺，化合物ⅩⅩ。例如，使在二氯甲烷和可力丁中的醇在氮?dú)夥障屡c在二氯甲烷中的三氟甲磺酸酐反應(yīng)。約2小時(shí)后，將混合物用氨水處理。然后按照方案6使所得胺化合物ⅩⅩ反應(yīng)。
本發(fā)明的一個(gè)中間體按照方案8制備。該方案特別適用于制備其中W是-O-，Y是取代的亞烷基，X是亞烷基的化合物。
方案8 R8是N3、NH-保護(hù)基、胺保護(hù)基、或羥基保護(hù)基;m獨(dú)立地是0、1、2或3;L是良好的離去基團(tuán)，如氯、溴、碘、甲磺?；?、甲苯磺?；?，等等。L優(yōu)選是甲磺?；8優(yōu)選是保護(hù)的羥基，最優(yōu)選是-O-三苯甲基。方案8表示了大環(huán)連接部分(-X-W-Y-)的立體選擇性合成。上面說明了S-對(duì)映體;然而，本領(lǐng)域技術(shù)人員會(huì)認(rèn)識(shí)到以類似的方法能夠制備互補(bǔ)的對(duì)映體或?qū)τ丑w混合物。此外，本領(lǐng)域技術(shù)人員也會(huì)認(rèn)識(shí)到與甲基取代的環(huán)氧化物或格利雅試劑的類似的反應(yīng)可被用于制備含有甲基取代的亞烷基的各種連接體(-X-W-Y-)。
在上面的反應(yīng)中，用格利雅試劑使環(huán)氧化物化合物(ⅩⅩⅥ)開環(huán)。反應(yīng)在銅配位劑存在下進(jìn)行;然而其他烷基化條件也是有效可行的。該反應(yīng)在惰性溶劑中在-30℃與反應(yīng)混合物的回流溫度之間的溫度下進(jìn)行。反應(yīng)生成的化合物(ⅩⅩⅦ)可以不用純化而進(jìn)一步反應(yīng)。在本領(lǐng)域用于制備醚的已知的一般條件下將化合物(XXVII)烯丙基化。方案8中說明的反應(yīng)是威廉遜合成。用NaH、NaOH或KOH形成烴氧基鈉，然后用烯丙基溴進(jìn)行烯丙基化，生成二烯化合物(XXVIII)。用一般方法將化合物(XXVIII)轉(zhuǎn)化為醇，化合物(XXIX)。例如，在低溫下用臭氧處理可以將化合物(XXVIII)轉(zhuǎn)化為臭氧化物。然后用NaBH4、LiAlH4、BH3或用過量H2的催化氫化還原臭氧化物，生成醇，化合物(XXIX)。用一般方法(如在三乙胺中使醇與甲磺酰氯反應(yīng))將化合物(XXIX)的羥基轉(zhuǎn)化為離去基團(tuán)L。
在所有上述方案中，優(yōu)選采有適當(dāng)?shù)谋Ｗo(hù)基進(jìn)行反應(yīng)。具體地說，在烷基化和/或酰化反應(yīng)中，優(yōu)選將R1保護(hù)起來并隨后去保護(hù)。同樣，如果R6是-NR4R5，反應(yīng)最好采用氨基保護(hù)基進(jìn)行。然而，本領(lǐng)域技術(shù)人員已知，如果使用適當(dāng)?shù)姆磻?yīng)條件、阻滯劑(blocking reagent)等，許多這類反應(yīng)可以不用保護(hù)基團(tuán)而進(jìn)行。優(yōu)選的是，當(dāng)W含有羥基時(shí)，在吲哚的烷基化或?；^程中將此羥基保護(hù)成為叔丁基二苯基甲硅烷氧基(TBDPS)或三苯甲基(三苯甲游基)。所得到的式Ⅰ化合物可以通過一般方法分離和純化。
化合物Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅶa、Ⅷ、Ⅹ、Ⅻ、ⅩⅤⅡ、ⅩⅩⅠ、ⅩⅩⅠⅤ、ⅩⅩⅤ、ⅩⅩⅤⅠ和上述反應(yīng)所需的任何其他試劑，是本領(lǐng)域已知的可從市場上買到的，或者是可以用本領(lǐng)域已知的方法制備的。例如，用Edge等人Chem.and Ind.130(1991)中所述的方法可以制備化合物Ⅲ;按已知方法使適當(dāng)取代的吲哚與鹵化烷基鎂(如溴化乙基鎂)反應(yīng)，可優(yōu)選地就地制備化合物Ⅳ。
提供下列實(shí)施例和制備例只是為了進(jìn)一步說明本發(fā)明。本發(fā)明的范圍不可被認(rèn)作僅僅由下列實(shí)施例組成。為了幫助本領(lǐng)域技術(shù)人員，給出下面的結(jié)構(gòu)以便用具有代表性的化合物說明本文所采用的命名原則 在下列實(shí)施例和制備例中，熔點(diǎn)、核磁共振譜、質(zhì)譜、用硅膠的高壓液相色譜、N，N-二甲基甲酰胺、鈀/炭、四氫呋喃和乙酸乙酯被分別縮寫為M.Pt.、NMR、MS、HPLC、DMF、Pd/C、THF和EtOAc。術(shù)語“NMR”和“MS”表示譜與所期望的結(jié)構(gòu)一致。
制備例12，3-雙(3′-吲哚基)呋喃-1，4-二酮將乙醇鈉(3.56g，50mmol)加入含有2，3-二氯馬來酸酐(5.56g，33.3mmol)和甲胺鹽酸鹽(3.50g，55.0mmol)的乙酸(40ml)溶液中，在加CaCl2干燥管條件下于25℃下將混合物攪拌16小時(shí)，然后回流4小時(shí)。將冷卻的混合物傾入水(350ml)中并用EtOAc(3×75ml)萃取，合并的有機(jī)萃取液用100ml一份的飽和NaHCO3水溶液、水和鹽水洗滌并干燥(MgSO4)。減壓蒸發(fā)溶劑。殘余物用乙醇重結(jié)晶，得到3.82g(64%)2，3-二氯N-甲基馬來酰亞胺，為白色晶體。濃縮母液并通過徑向制層色譜(Chromatotron，Harrison Research)將殘余物進(jìn)行色譜純化，得到另外0.81g 2，3-二氯N-甲基馬來酰亞胺，使產(chǎn)率提高到77%。
在N2氣氛下，用溴化乙基鎂溶液(1.0M THF溶液，90ml，90mmol)經(jīng)1小時(shí)滴加處理吲哚(10.5g，90mmol)在175ml無水甲苯中的溶液。滴加完畢后，將淺綠色溶液在40℃下加熱30分鐘，然后冷卻到25℃，經(jīng)30分鐘加入2，3-二氯N-甲基馬來酰亞胺(3.8g，21mmol)在50ml甲苯中的溶液。將反應(yīng)混合物在100℃下加熱3小時(shí)，然后冷卻到25℃，并用100ml 20%檸檬酸水溶液使反應(yīng)終止。分層，水相用EtOAc(50ml)萃取，合并的有機(jī)層用無水MgSO4干燥。減壓蒸發(fā)溶劑。將殘余物溶于30ml丙酮并使其在5℃靜置40小時(shí)。收集固體并用冰冷的乙醚洗滌，得到5.25g(73%)3，4-雙(3′-吲哚基)-1-甲基吡咯-2，5-二酮，為紅色固體，M.Pt.276-278℃。
向3，4-雙(3′-吲哚基)-1-甲基吡咯-2，5-二酮在150ml乙醇中的溶液中加入5N KOH(50ml)。將混合物在25℃下攪拌4小時(shí)，然后用150ml水稀釋。減壓蒸出大部分乙醇。然后將混合物酸化至pH1。濾出沉淀的產(chǎn)物并用水洗滌。將粗產(chǎn)物溶于最小量的CH2Cl2中，并通過2英寸硅膠柱緩慢過濾，用50% EtOAc的己烷溶液洗脫，得到標(biāo)題化合物(3.10g，79%)，為紅色固體，M.Pt.225-228℃。
制備例2雙-2，6-二溴甲基吡啶在0℃、氮?dú)夥障?，向含?，6-吡啶二甲醇(735mg，5.28mmol)和三苯膦(3.20g，12.2mmol)和35ml無水CH2Cl2的混合物中，經(jīng)10分鐘分批加入N-溴丁二酰亞胺(2.16g，12.2mmol)。將混合物在0℃下攪拌1小時(shí)，然后使其在5℃靜置16小時(shí)，減壓除去大部分溶劑。向殘余物中加入乙醚(100ml)。潷析醚層并濃縮至20ml，然后用3∶1己烷/EtOAc(50ml)稀釋。將混濁溶液在冷凍器中放置過夜。真空蒸發(fā)溶劑后，粗產(chǎn)物用己烷重結(jié)晶，得到766mg(55%)雙-2，6-二溴甲基吡啶，為白色晶狀固體。MS.
制備例3(±)-3-(芐氧基)甲基-1，6-二溴己烷在25℃、氮?dú)夥障拢瑢⑹宥〈尖浫芤?1.0M THF溶液，8.27ml，8.27mmol)滴加到(±)-3-環(huán)己烯-1-甲醇(853mg，7.60mmol)的THF(35ml)溶液中。將所得混合物在25℃下攪拌30分鐘，滴加芐基溴(1.0ml，8.37mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌16小時(shí)，然后用飽和NH4Cl水溶液(5ml)處理并濃縮。將殘余物溶于乙醚(50ml)，用水(20ml)和鹽水(20ml)洗滌，用MgSO4干燥。減壓蒸發(fā)溶劑。使殘余物經(jīng)過硅膠徑向色譜法純化，用5%EtOAc的己烷溶液洗脫，得到(±)-3-(芐氧基)甲基-1-環(huán)己烯(1.42g，92%)，為無色油狀物。NMR.
在-78℃下使臭氧鼓泡通過(±)-3-芐氧基甲基-1-環(huán)己烯(1.35g，6.70mmol)的CH2Cl2(65ml)溶液，直到未反應(yīng)臭氧的藍(lán)色不再褪去。使反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝兀瑫r(shí)將干燥氮?dú)夤呐萃ㄟ^反應(yīng)物。通過注射器經(jīng)數(shù)分鐘加入硼烷·甲硫醚配合物(10.0M THF溶液，2.7ml，27.8mmol)，使反應(yīng)混合物在室溫靜置24小時(shí)。用5% HCl水溶液(1ml)處理反應(yīng)混合物并劇烈攪拌1小時(shí)。加入固體NaHCO3直到用石芯試紙?jiān)嚨没旌衔锍蕢A性?；旌衔镉脽o水MgSO4干燥。將反應(yīng)混合物過濾并濃縮，得到(±)-3-(芐氧基)甲基-1，6-己二醇粗品(1.49g，約100%)，為油狀物。該物質(zhì)在TLC分析中顯示出基本上單一的點(diǎn)，Rf＝0.25(25% EtOAc的己烷溶液)，它不經(jīng)進(jìn)一步純化而直接用于下一步驟。
在0℃、氮?dú)夥障?，?±)-3-(芐氧基)甲基-1，6-己二醇(1.45g，6.10mmol)和三苯膦(3.67g，14.0mmol)在無水CH2Cl2(50ml)中的攪拌的混合物中加入N-溴丁二酰亞胺(2.49g，14.0mmol)。12小時(shí)后，將反應(yīng)物濃縮并向殘余物中加入乙醚(100ml)。將混合物攪拌15分鐘;從固體中潷析出乙醚層。用50ml乙醚重復(fù)此操作。將合并的乙醚萃取液濃縮至50ml，然后用己烷(100ml)稀釋。在5℃下靜置過夜后，從沉淀的固體中潷析出溶液并濃縮得到二溴化物，(±)-3-(芐氧基)甲基-1，6-二溴己烷(1.09g，49%)，為淺黃色油狀物。經(jīng)TLC檢驗(yàn)它基本上是純一的，Rf＝0.75(10% EtOAc己烷溶液)。NMR.
制備例41-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-4-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)丁-3-醇向3-丁烯-1-醇(15g，0.21mol)的無水CH2Cl2(110ml)溶液中加入咪唑(28.6g，0.42mol，2當(dāng)量)，然后加入叔丁基二甲基甲硅烷基氯(32g，0.22mol)。90分鐘后，TLC(10% EtOAc/己烷)顯示反應(yīng)已完成。將CH2Cl2溶液轉(zhuǎn)移到分液漏斗中，用CH2Cl2(110ml)稀釋，用水(200ml)和鹽水(200ml)洗滌。收集有機(jī)層，用MgSO4干燥，過濾，除去溶劑，得到油狀物(1-(O-TBDMS-3-丁烯)，使其進(jìn)行下面的反應(yīng)。MS.
將上述油狀物溶于丙酮(400ml)和水(50ml)的混合物中。然后加入N-甲基嗎啉-N-氧化物(85.2g，0.63mol，3當(dāng)量)。將所得漿液冷卻到0℃。10分鐘后加入催化量的OsO4(0.3g)。使所得漿液攪拌過夜，逐漸溫?zé)嶂潦覝?。TLC(25% EtOAc/己烷)顯示反應(yīng)已完成。用亞硫酸氫鈉處理反應(yīng)混合物，用乙醚(1l)稀釋，用水(400ml)和鹽水(400ml)洗滌。收集有機(jī)層。水層用乙醚(2×500ml)萃取。將合并的有機(jī)層干燥，過濾并濃縮，得到4-(O-TBDMS)-1，2-丁二醇，為油狀物，將其用于下面的反應(yīng)。
將上述油狀物溶于無水CH2Cl2(250ml)中。攪拌下向溶液中加入咪唑(30g，0.44mol，2.5當(dāng)量)固體。使所得溶液冷卻到0℃。冷卻15分鐘后，滴加叔丁基二苯基甲硅烷基氯(50g，0.18mol，1當(dāng)量)的CH2Cl2(50ml)溶液，歷時(shí)45分鐘。滴加完畢后，在0℃繼續(xù)攪拌2.5小時(shí)。將溶液轉(zhuǎn)移到分液漏斗中，用CH2Cl2(250ml)稀釋，用水和鹽水洗滌，用MgSO4干燥并過濾。減壓除去溶劑，得到粗產(chǎn)物，為油狀物。將此粗產(chǎn)物通過短硅膠柱洗脫(10%EtOAc/己烷)純化。真空除去洗脫溶劑，得到標(biāo)題中間體的粘稠油狀物(78.1g，93%總產(chǎn)率)。MS.
制備例51-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-3-(3-碘丙氧基)-4-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)丁烷在氮?dú)夥障拢蛑苽淅?的醇的CH2Cl2(20ml)/環(huán)己烷(100ml)溶液中加入三氯乙酰亞氨酸烯丙酯(17.82g，88mmol，2.2當(dāng)量)，然后加入三氟甲磺酸(每克原料50μl，0.92ml)。20小時(shí)后，將溶液過濾，濾液用飽和NaHCO3水溶液、水和鹽水洗滌。收集有機(jī)層并用MgSO4干燥。除去溶劑得到油狀物，將其通過硅膠快速色譜純化，用己烷洗脫并在幾升流出體積內(nèi)提高流動(dòng)相的極性至5%乙酸乙酯的己烷溶液，得到19.27g烯丙基醚，1-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-3-(丙烯氧基)-4-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)丁烷，為淺棕色油狀物(產(chǎn)率97%)。MS.
在氮?dú)夥障?，向上述烯丙基?14.16g，28.38mmol，1當(dāng)量)的THF(60ml)溶液中滴加9-BBN(9-硼二環(huán)[3.3.1]壬烷，0.5M THF溶液，60ml，30mmol，1.1當(dāng)量)。3小時(shí)后，反應(yīng)混合物的TLC(10% EtOAc己烷溶液)顯示原料已被消耗。向此溶液中加入3M NaOH水溶液(10.41ml，31.22mmol，1.1當(dāng)量)，然后緩慢滴加(1.5小時(shí))30%過氧化氫溶液(10.3ml，90.82mmol，3.2當(dāng)量)。過氧化物處理過程中的反應(yīng)溫度保持在低于50℃(冰浴)。
30分鐘后，加入氯化鈉直至溶液飽和。分出有機(jī)層;水層用乙醚萃取;將合并的有機(jī)層干燥并過濾;濃縮濾液得到油狀物。此油狀物粗品通過硅膠快速色譜純化，用10% EtOAc/己烷洗脫，并在使用約1.5升溶劑后提高極性至20% EtOAc/己烷，得到9.53g淺黃色油狀物(產(chǎn)率65%)。MS.
向0℃的上述醇的無水乙醚(150ml)溶液中加入三乙胺(2.93g，28.91mmol，1.5當(dāng)量)，然后在劇烈攪拌下滴加甲磺酰氯(3.31g，28.91mmol，1.5當(dāng)量)。在0℃下3小時(shí)后，TLC(10% EtOAc的己烷溶液)顯示原料已耗盡。反應(yīng)物用乙醚稀釋，用水、鹽水洗滌，用MgSO4干燥，除去溶劑。使所得油狀物通過硅膠墊，用25% EtOAc/己烷洗脫，濃縮洗脫液。向所得油狀物的丙酮(200ml)溶液中加入NaHCO3(0.17g，1.93mmol，0.1當(dāng)量)和NaI(28.88g，192.7mmol，10當(dāng)量)。在室溫、氮?dú)夥障聰嚢?0分鐘后，用水浴將反應(yīng)物加熱到50℃。2.5小時(shí)后，TLC(10% EtOAc的己烷溶液)顯示甲磺酸酯已耗盡。反應(yīng)混合物用乙醚(500ml)稀釋，用冷的飽和Na2SO3水溶液、水和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，除去溶劑。使所得油狀物通過硅膠墊，用5% EtOAc/己烷溶液洗脫，得到純化的標(biāo)題化合物10.3g，為無色油狀物(產(chǎn)率85%)。
制備例6乙酸3-溴丙酯在0℃、氮?dú)夥障?，用乙酰?0.5mol，40.2ml)處理在CH2Cl2(500ml)中的3-溴丙-1-醇(0.54mol，75g)。通過注射器向此溶液中分批(5ml)緩慢加入三乙胺(0.54mol，75ml)。使反應(yīng)混合物逐漸(12小時(shí))恢復(fù)至室溫。濾掉沉淀，過濾器用CH2Cl2洗滌。濾液用水(2×)和鹽水(2×)洗滌，用Na2SO4干燥并過濾。將濾液濃縮得到標(biāo)題的乙酸酯91g(產(chǎn)率93%)，為油狀物。MS.
制備例7N-(3-乙酰氧基丙基)吲哚在裝有回流冷凝器和加料漏斗的三頸燒瓶中，向攪拌下的0℃的NaH(60%礦物油分散液，0.705mol，28.2g，1.5當(dāng)量)的DMF(400ml)懸浮液中滴加吲哚(55g，0.47mol)的DMF(150ml)溶液。30-60分鐘后，加入烷基鹵乙酸3-溴丙酯(170g，0.94mol)的DMF(50ml)溶液。將反應(yīng)物在50℃下加熱6小時(shí)，然后在室溫下攪拌5-15小時(shí)。
真空除去溶劑。使殘余物在CH2Cl2和水之間分配。有機(jī)層用1N HCl(3×)、水和鹽水洗滌，用Na2SO4干燥并過濾。濃縮濾液得到標(biāo)題的烷基吲哚102g，為油狀物，該化合物緩慢結(jié)晶。MS.
制備例8N-(叔丁氧羰基)吲哚-3-基乙酸向攪拌著的吲哚-3-乙酸(26.25g，0.15mol)的丙酮(800ml)溶液中加入碳酸銫(48.9g，0.15mol)，然后加入烯丙基溴(15ml，0.17mol，1.16當(dāng)量)。12小時(shí)后除去溶劑。使殘余物在水和CHCl3之間分配。有機(jī)層用鹽水洗滌，用Na2SO4干燥并過濾。濃縮濾液，得到27.9g烯丙基酯(產(chǎn)率74%)，為油狀物。
向烯丙基酯(27.9g)的乙腈(500ml)溶液中加入連二碳酸二叔丁酯(29.1g，0.133mol，1.2當(dāng)量)和4-二甲氨基吡啶(1.36g，0.011mol，0.1當(dāng)量)。15分鐘后，將反應(yīng)混合物用EtOAc(1.2l)稀釋并用0.1N HCl、水(2×)和鹽水(2×)洗滌。有機(jī)層用Na2SO4干燥，過濾并濃縮，得到BOC保護(hù)的酯(32.9g，94%)，為緩慢結(jié)晶的油狀物。
向BOC保護(hù)的酯的CH2Cl2/EtOAc 10∶3(325ml)溶液中加入2-乙基己酸鈉(17.3g，0.104mol)、三苯膦(4.93g，18.8mmol，0.18當(dāng)量)和Pd(PPh3)4(4.56g，3.95mmol，0.04當(dāng)量)。1小時(shí)后除去溶劑。使殘余物在EtOAc和水之間分配。堿性水層用EtOAc、然后用乙醚反萃取，之后用0.10N HCl小心地酸化。然后用EtOAc萃取酸性水溶液層。有機(jī)層用水、鹽水洗滌，用Na2SO4干燥并過濾。濃縮濾液，得到BOC保護(hù)的酸(21.8g，產(chǎn)率77%)，為緩慢結(jié)晶的油狀物，經(jīng)三個(gè)步驟標(biāo)題化合物的產(chǎn)率為53%。MS.
制備例9(±)-3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-3-叔丁基二苯基甲硅烷氧基亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(甲基)吡咯-2，5-二酮將含有二溴化物3-叔丁基二苯基甲硅烷氧基亞甲基-1，6-二溴己烷(5.64g，11mmol，按類似于制備例2中苯甲?；苌锏姆椒ㄖ苽?的雙(3，3′-吲哚基)-1-(甲基)吡咯-2，5-二酮(3.41g，10.0mmol)的DMF(50ml)溶液用注射泵經(jīng)15小時(shí)加入60℃下的Cs2CO3(11.2g，34.3mmol)的DMF(350ml)漿液中。自加入完畢4小時(shí)后，將反應(yīng)物冷卻到室溫，傾入水(1.5l)中，并用CH2Cl2(3×300ml)萃取。有機(jī)相用水洗滌，干燥，過濾并濃縮。濃縮物通過快速色譜純化，用10%至25%乙酸乙酯/己烷洗脫，得到大環(huán)化合物3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-3-叔丁基二苯基甲硅烷氧基亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(甲基)吡咯-2，5-二酮2.95g(產(chǎn)率43%)，為紅色油狀物。MS.
制備例10(S)-4-叔丁基二苯基甲硅烷氧基-3-(烯丙氧基)丁酸甲酯在氮?dú)夥?、攪拌下，?S)-4-叔丁基二苯基甲硅烷氧基-3-(羥基)丁酸甲酯(20.0g，53.7mmol)的環(huán)己烷(400ml)溶液中加入三氯乙酰亞氨酸烯丙基酯(21.74g，107.4mmol)，然后經(jīng)30分鐘分五批加入三氟甲磺酸(1ml，50ml/g醇)。70小時(shí)后，過濾形成的固體，將濾餅用環(huán)己烷洗滌，真空除去揮發(fā)物。將所得油狀物置于二氧化硅柱塞上，并用己烷洗滌，用10%乙酸乙酯/己烷洗脫產(chǎn)物。NMR表明存在殘留的亞氨酸酯(約10%);然而該物質(zhì)不經(jīng)進(jìn)一步純化而繼續(xù)使用。由殘余物得到24.76g物質(zhì)，其中約22.2g是所需產(chǎn)物(100%)。MS.
制備例11(S)-4-叔丁基二苯基甲硅烷氧基-3-(2-碘乙氧基)-1-碘丁烷在-75℃、氮?dú)夥障?，將DIBAL-H(231ml，1.0M甲苯溶液，231mmol)經(jīng)40分鐘滴加到(S)-4-叔丁基二苯基甲硅烷氧基-3-(烯丙氧基)丁酸甲酯(23.8g，57mmol)的無水THF(1.0l)溶液中。攪拌1.5小時(shí)后，將混合物溫?zé)嶂?10℃，并用5%含水甲醇和大量硅藻土處理。將處理的反應(yīng)混合物通過硅藻土墊過濾;濃縮濾液并使其在乙醚和20%檸檬酸之間分配。將乙醚層干燥并真空濃縮。使殘余油狀物通過硅膠墊，用氯仿洗脫，得到20.6g(93%)(S)-4-叔丁基二苯基甲硅烷氧基-3-烯丙氧基-丁-1-醇。
在-78℃下經(jīng)約12分鐘將臭氧加入(S)-4-叔丁基二苯基甲硅烷氧基-3-烯丙氧基丁-1-醇(20.6g，53.6mmol)的甲醇(50ml)溶液中。反應(yīng)混合物變成淡藍(lán)色，向反應(yīng)器中加入NaBH4(12.2g，321mmol，6當(dāng)量)。使反應(yīng)混合物恢復(fù)到室溫。真空除去揮發(fā)物。將殘余物通過硅膠塞，用乙酸乙酯洗脫，得到16.4g(79%)(S)-4-叔丁基二苯基甲硅烷氧基-3-(2-羥基乙氧基)丁-1-醇，為無色油狀物。
在0℃、氮?dú)夥障?，?S)-4-叔丁基二苯基甲硅烷氧基-3-(2-羥基乙氧基)丁-1-醇(15.7g，40.4mmol)的乙醚(600ml)溶液中加入三乙胺(16.8ml，121mmol)，然后加入甲磺酰氯(9.38ml，121mmol)。3小時(shí)后，將溶液過濾;濾液用水(2×)、鹽水(2×)洗滌，用Na2SO4干燥并真空濃縮。由殘余物得到21.9g(＞99%)雙甲磺酸酯，為黃色油狀物，直接將其用于后繼反應(yīng)。將雙甲磺酸酯溶于已用碳酸鉀蒸餾過的丙酮(1.4l)中，向此溶液中加入NaI(90.4g，603mmol)和0.05當(dāng)量NaHCO3(170mg，2mmol)。將反應(yīng)混合物在56℃保持24小時(shí)，然后過濾并真空濃縮濾液。使殘余物在乙醚和10% Na2SO3之間分配，醚層用鹽水洗滌，用Na2SO4干燥并濃縮，得到17.9g(73.2%)(S)-4-叔丁基二苯基甲硅烷氧基-3-(2-碘乙氧基)-1-碘丁烷，為無色油狀物?？偖a(chǎn)率為54%。MSMW＝608.39;觀測值559(M-叔丁基;FD，CHCl3)。
制備例12(S)-3，4-[(N，N′-1，1′)-((2″-乙氧基)-3′″-(O)-4″-(甲磺酰氧基)丁烷)-雙(3-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮將3，4-雙(3-吲哚基)-1H-吡咯-2，5-二酮(10.04g，29.4mmol)和(S)-4-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)-3-(2-碘乙氧基)-1-碘丁烷(17.9g，29.4mmol)混合并溶于無水DMF(80ml)中。在50℃、氮?dú)夥障?，通過注射泵加入法經(jīng)72小時(shí)將上述溶液加到碳酸銫(38.3g，118mmol)的無水DMF(1.7l)懸浮液中。真空除去DMF。使殘余物在CHCl3/1N HCl之間分配。酸層用氯仿和乙酸乙酯反萃取。合并的有機(jī)層用1N HCl(2×)、水(2×)和鹽水(2×)洗滌，用Na2SO4干燥，并濃縮得到洋紅色固體。該反應(yīng)混合物粗品不經(jīng)進(jìn)一步純化即使用。
將反應(yīng)混合物粗品懸浮于乙醇(700ml)中并用5N NaOH(800ml)處理。將反應(yīng)溫度升至80℃。72小時(shí)后，真空除去乙醇;將水懸浮液冷卻到0℃并用5N HCl酸化。收集紫色沉淀并使其通過硅膠塞，用乙酸乙酯洗脫。濃縮洗脫液，得到8.7g部分甲硅烷基化的馬來酰亞胺，為洋紅色固體，它不經(jīng)進(jìn)一步純化即繼續(xù)進(jìn)行下面的反應(yīng)。
在室溫、氮?dú)夥障?，向上述?8.7g，19.7mmol)的DMF(1l)溶液中加入1，1，1，3，3，3-六甲基二硅氮烷(41.6ml，197mmol)和甲醇(4ml，98.5mmol)。40小時(shí)后，將反應(yīng)物真空濃縮，加入2∶1(v/v)MeCN/1N HCl溶液(100ml)。將殘余物攪拌1小時(shí)。除去有機(jī)溶劑;將水懸浮液用乙酸乙酯萃取。除去溶劑，得到8.9g馬來酰亞胺，它不經(jīng)進(jìn)一步純化即使用。
在室溫、氮?dú)夥障?，向上述馬來酰亞胺(8.9g，20mmol)的CH2Cl2(800ml)懸浮液中加入吡啶(4.85ml，60mmol)和稍微過量的甲磺酸酐(4.21g，24mmol)。16小時(shí)后，將反應(yīng)混合物用0.1N HCl、鹽水洗滌，并濃縮有機(jī)層。使殘余物通過硅膠塞，用緩慢梯度的0-10% MeCN/CH2Cl2洗脫。將含有所需甲磺酸酯的洗脫液級(jí)分濃縮，得到2.8g標(biāo)題化合物，為洋紅色固體。自二碘化物的總產(chǎn)率為18%。MSMW＝520;觀測值520(FD，CHCl3)。
制備例133-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基亞甲基)-1-環(huán)己烯在25℃、氮?dú)夥障?，?-環(huán)己烯-1-甲醇(Aldrich，13.0ml，0.11mol)、N，N-二異丙基乙胺(43ml，0.244mol)和4-二甲氨基吡啶(2.70g，0.022mol)在375ml無水CH2Cl2中的混合物中加入叔丁基二苯基氯甲硅烷(32ml，0.123mol)。將混合物在25℃下攪拌48小時(shí)。反應(yīng)混合物依次用每份150ml的1N HCl、水和鹽水洗滌，用無水MgSO4干燥。蒸發(fā)溶劑。將殘余物加在4″×4″硅膠柱上，用己烷作洗脫劑緩慢洗脫。得到3-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基亞甲基)-1-環(huán)己烯33.6g(86%)，為無色油狀物，TLC檢測其為純一的(Rf＝0.4，己烷)。
元素分析C23H30OSi(0.3H2O)計(jì)算值C，77.6;H，8.67。
實(shí)測值C，77.38;H，8.72。
制備例143-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基亞甲基)-1，6-己二醇在-78℃下，使臭氧鼓泡通過充分?jǐn)嚢璧?-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基亞甲基)-1-環(huán)己烯(18.0g，51.3mmol)的CH2Cl2(550ml)溶液，直至未反應(yīng)的臭氧的藍(lán)色不再褪去。將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂?5℃。使干燥N2鼓泡通過溶液30分鐘。經(jīng)10分鐘滴加硼烷-甲硫醚配合物(10.0M，23ml，0.23mol)。將混合物在氮?dú)夥铡?5℃下緩慢攪拌24小時(shí)。加入5% HCl(15ml)，將反應(yīng)混合物攪拌1小時(shí)。加入固體NaHCO3直至試得混合物對(duì)pH試紙(外部打濕)呈堿性。過濾后，濾液用200ml一份的5% NaHCO3和水洗滌，用無水MgSO4干燥。減壓蒸除溶劑后，粗產(chǎn)物通過4″×4″硅膠柱，用EtOAc洗脫進(jìn)行色譜純化。得到17.8g(90%)3-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基亞甲基)-1，6-己二醇，為無色粘稠油狀物，經(jīng)TLC檢測為純一的(Rf＝0.5，乙醚)。
元素分析C23H34O3Si(0.2H2O)計(jì)算值C，70.80;H，8.88。
實(shí)測值C，70.72;H，8.86。
制備例153-叔丁基二苯基甲硅烷氧基亞甲基-1，6-二溴己烷在0℃、氮?dú)夥障?，將N-溴丁二酰亞胺(19.3g，109mmol)經(jīng)5分鐘分批加入攪拌著的含有3-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基亞甲基)-1，6-己二醇(17.5g，45.2mmol)和三苯膦(28.6g，109mmol)的無水CH2Cl2(550ml)溶液中。將反應(yīng)混合物在0℃攪拌5小時(shí)，然后在5℃的冷藏箱中放置16小時(shí)。除去大部分溶劑后，將無水乙醚(300ml)緩慢加入殘余物中。醚層由沉淀的固體中潷析出來。將固體用另外200ml新鮮乙醚洗滌。將合并的乙醚層濃縮(100ml)，用300ml己烷研制，并由沉淀的固體中潷析出來。固體用25%乙醚的己烷溶液洗滌，合并的有機(jī)層用無水MgSO4干燥并濃縮。將粗產(chǎn)物置于4″×4″硅膠柱上并用25%乙醚的己烷溶液洗脫，得到20.1g(86%)3-叔丁基二苯基甲硅烷氧基亞甲基-1，6-二溴己烷，為無色油狀物，經(jīng)TLC(Rf＝0.75，10% EtOAc的己烷溶液)分析為純一的。
1H NMR(300MHz，CDCl3)1.06(s，9H)，1.35-2.10(m，7H)，3.55(m，4H)，3.56(app d，2H，J＝4Hz)，7.40和7.64(m，10H).
13C NMR(75MHz，CDCl3)19.2，26.9，29.3，30.0，31.9，33.8，34.7，38.5，65.0，127.7，129.7，133.4，135.5.
制備例16(S)-(-)-3-環(huán)己烯-1-甲醇將LiAlH4溶液(1.0M THF溶液，75.8ml，75.8mmol)在15分鐘內(nèi)滴加到已知酯(Irelaud等人，J.Org.Chem.1992，57(19)，5071-5073和其中的參考文獻(xiàn))(S)-(-)-3-環(huán)己烯-1-亞甲氧基-(S)-N-甲基-2-羥基琥珀酰亞胺(8.20g，34.5mmol)的THF(90ml)冷卻溶液中。使反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝夭⒃?5℃下攪拌2小時(shí)，冷卻并用水和1N NaOH處理?；旌衔锿ㄟ^硅藻土過濾。用THF(100ml)洗滌固體。將濾液減壓蒸發(fā)后，將殘余物溶于150ml乙醚中，用水(2×50ml)和鹽水(50ml)洗滌，用無水MgSO4干燥。蒸發(fā)溶劑，得到(S)-(-)-3-環(huán)己烯-1-甲醇3.24g(83%)，為透明油狀物，[α]D＝-90.3(C＝1，CH3OH)。該產(chǎn)物的TLC的性質(zhì)及1H NMR譜在各個(gè)方面均與外消旋物(Aldrich)相同。
1H NMR(300MHZ，CDCl3)，1.21-1.42(m，2H)，1.68-1.88(m，3H)，2.04-2.21(m，3H)，3.54(brs，2H)，5.69(s，2H).
制備例17(S)-(-)-3-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基亞甲基)-1-環(huán)己烯在CH2Cl2(100ml)中，將(S)-(-)-3-環(huán)己烯-1-甲醇(3.17g，28.3mmol)用叔丁基二苯基氯甲硅烷(8.15ml，31.1mmol)、N，N-二異丙基乙胺(10.9ml，62.3mmol)和二甲氨基吡啶(1.03g，8.5mmol)處理，經(jīng)過處理及色譜純化后，得到甲硅烷基醚(S)-(-)-3-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基亞甲基)-1-環(huán)己烯8.73g(88%)，為透明油狀物。該產(chǎn)物的TLC性質(zhì)和1H NMR譜在各個(gè)方面均與外消旋甲硅烷基醚3-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基亞甲基)-1-環(huán)己烯相同。
1H NMR(300MHz，CDCl3)1.05(s，9H)，1.29(m，1H)，1.71-2.18(m，4H)，3.54(d，2H，J＝6Hz)，5.66(brs，2H)，7.38和7.66(m，10H).
制備例18(S)-(-)-3-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基亞甲基)-1，6-己二醇按照與制備外消旋二醇3-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基亞甲基)-1，6-己二醇相同的方法，將甲硅烷基醚(S)-(-)-3-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基亞甲基)-1-環(huán)己烯(8.35g，23.9mmol)臭氧化，然后還原處理(BH3-Me2S)，得到(S)-(-)-3-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基亞甲基)-1，6-己二醇～5.01g(55%)，為無色粘稠油狀物，經(jīng)TLC(Rf＝0.4，EtOAc)檢驗(yàn)為純一物。
1H NMR(300MHz，CDCl3)1.05(s，9H)，1.21-1.81(m，7H)，2.32(brs，2H)，3.50-3.75(m，6H)，7.32和7.70(m，10H).
制備例19(S)-3-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基亞甲基)-1，6-二溴己烷按照與制備外消旋二溴化物3-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基甲基)-1，6-二溴己烷相同的方法，在0℃、二氯甲烷(150ml)中，使(S)-(-)-3-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基亞甲基)-1，6-己二醇(4.85g，12.53mmol)與N-溴丁二酰亞胺(5.35g，30.1mmol)和三苯膦(7.87g，30.1mmol)反應(yīng)，得到化合物(S)-(-)-3-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基甲基)-1，6-二溴己烷4.81g(75%)，為無色透明油狀物，經(jīng)TLC(Rf＝0.8，10%EtOAc的己烷溶液)檢驗(yàn)為純一物。該化合物的TLC性質(zhì)和1H譜在各個(gè)方面均與外消旋異構(gòu)體相同。MS.
1H NMR(300 MHz，CDCl3)1.06(s，9H)，1.35-2.10(m，7H)，3.55(m，4H)，3.56(app d，2H，J＝4Hz)，7.40和7.64(m，10H).
制備例20(R)-3-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基亞甲基)-1，6-二溴己烷按照與制備(S)-(-)-3-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基亞甲基)-1，6-二溴己烷相同的方法，在0℃、CH2Cl2(160ml)中，使(S)-(-)-3-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基亞甲基)-1，6-己二醇(5.05g，13.04mmol)與N-溴丁二酰亞胺(5.57g，31.32mmol)和三苯膦(8.21g，31.32mmol)反應(yīng)，得到手性二溴化物(R)-3-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基亞甲基)-1，6-二溴己烷5.85g(87%)，為無色透明油狀物，經(jīng)TLC(Rf＝0.8，10% EtOAc的己烷溶液)檢驗(yàn)為純一物。MS.
1H NMR(300 MHz，CDCl3)1.06(s，9H)，1.35-2.10(m，7H)，3.55(m，4H)，3.56(app d，2H，J＝4Hz)，7.40和7.64(m，10H).
制備例212-烯丙基-4-戊烯酸在氮?dú)夥铡?℃下，向攪拌著的甲醇鈉(59.4g，1.1mol)的無水甲醇(1l)懸浮液中滴加丙二酸二甲酯(57ml，0.5mol)。30分鐘后，一次加入烯丙基溴(95ml，1.1mol)。14小時(shí)后，在室溫下將反應(yīng)混合物真空濃縮。將殘余物溶于甲醇(0.5l)中并用5N NaOH(500ml)處理。攪拌24小時(shí)后，真空除去甲醇，堿性水層用乙酸乙酯(2×)處理。水層用5N HCl(0.5l)酸化并用乙酸乙酯萃取。有機(jī)萃取液用水(2×)和鹽水洗滌，用Na2SO4干燥并真空濃縮，得到白色固體。所得固體用戊烷研制并在空氣中干燥，得到51.4g(產(chǎn)率57%)二酸。將二酸(50g，274mmol)加熱(150℃)直到停止產(chǎn)生CO2(約2小時(shí))。使殘余的棕色油狀物通過小硅膠塞用乙酸乙酯洗脫，得到標(biāo)題化合物32.8g(85%)，為金色油狀物。三個(gè)步驟的總產(chǎn)率為48%。
1H NMR(CD3CN)δ 2.4(m，4H);2.5(m，1H)，5.05(dd，2H);5.15(dd，2H);5.9(m，2H);12.8(br，1H).MS.
制備例223-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基亞甲基)戊-1，5-二醇在氮?dú)夥障?，?℃的攪拌下的LAH(4.33g，114mmol)的無水乙醚(125ml)懸浮液中滴加2-烯丙基-4-戊烯酸(16.0g，114mmol)。使反應(yīng)混合物恢復(fù)到室溫。16小時(shí)后，反應(yīng)物用乙醇(25ml)、然后用4N HCl(40ml)處理，用乙醚(2×)萃取，干燥并真空濃縮，得到醇2-烯丙基-4-戊烯-1-醇11.7g(82%)，為無色油狀物，該產(chǎn)物不經(jīng)進(jìn)一步純化即使用。
向2-烯丙基-4-戊烯-1-醇(11.7g，93mmol)的無水CH2Cl2(0.5ml)溶液中加入咪唑(12.6g，185mmol)，然后加入氯·叔丁基二苯基甲硅烷(25.48g，93mmol)，攪拌16小時(shí)。將反應(yīng)物過濾，濾液用水、鹽水洗滌，干燥并真空濃縮，得到甲硅烷基醚4-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基亞甲基)-庚-1，6-二烯32.5g(96%)，為油狀物，該物不經(jīng)進(jìn)一步純化即使用。
使臭氧鼓泡通過-78℃的4-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基亞甲基)-庚-1，6-二烯(17g，47mmol)的無水甲醇(500ml)溶液，直到藍(lán)色不再褪去(30分鐘)。用氮?dú)獯迪捶磻?yīng)混合物(20分鐘)，加入NaBH4(17.6g，47mmol)。移去冷卻浴并使反應(yīng)物回到室溫，真空濃縮反應(yīng)物，使殘余物在乙醚和鹽水之間分配。將乙醚層濃縮，殘余物通過硅膠塞用0-50%乙酸乙酯/己烷洗脫，收集較少組分并濃縮，得到二醇3-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基亞甲基)戊-1，5-二醇3.8g(22%)，即所需的二醇，為無色油狀物。三個(gè)步驟的總產(chǎn)率為17%。MS.
1H NMRδ1.17(s，9H);1.6(dt，4H);1.83(m，1H);2.14(s，2H);3.6(m，6H);7.41(t，4H);7.45(t，2H);7.66(d，4H).
制備例231，5-二碘-3-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基亞甲基)戊烷向0℃的3-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基亞甲基)戊烷-1，5-二醇(6.9g，19mmol)的乙醚(300ml)溶液中加入甲磺酰氯(4.3ml，56mmol)，然后加入Et3N(7.7ml，56mmol)。3-16小時(shí)后逐漸溫?zé)嶂潦覝?，反?yīng)物用水和鹽水洗滌，用MgSO4干燥并濃縮，得到1，5-雙(甲磺酰氧基)-3-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基亞甲基)戊烷8.5g(90%)，為無色油狀物，它不經(jīng)進(jìn)一步純化即使用。
向雙甲磺酸酯1，5-雙(甲磺酰氧基)-3-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基亞甲基)戊烷(8.5g，16mmol)的新蒸丙酮(500ml)溶液中加入過量NaI(36.1g，241mmol)和NaHCO3(67mg，0.8mmol)。將反應(yīng)物回流(57℃)72小時(shí)，冷卻到室溫并過濾。將濾液真空濃縮。殘余物用乙醚稀釋，用10% Na2SO3洗滌，干燥并濃縮，得到7.4g標(biāo)題化合物(產(chǎn)率78%)，為無色油狀物。兩個(gè)步驟的總產(chǎn)率是70%。MS.
1H NMR(DMSO-d6)δ1.06(s，9H);1.78(m，1H);1.8-2.06(m，4H);3.13(m，4H);3.57(d，2H);7.38-7.46(m，3H)，7.64(d，2H).
制備例242-(2′-溴乙氧基)芐基溴使臭氧鼓泡通過-78℃的2-(烯丙氧基)芐醇(LaChapelle等人，Tetrahedron，44(16)，5033-5044(1988))。(7.0g，43mmol)的無水甲醇溶液13分鐘。每2分鐘檢測反應(yīng)物的TLC以確定起始烯烴是否完全消失(Rf＝0.8，75% EtOAc/己烷)。反應(yīng)混合物用氮?dú)獯迪?，加入NaBH4(9.7g，0.25mol)，使反應(yīng)溫度達(dá)到0℃。30分鐘后，將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝?，濃縮，用乙醚稀釋，用水和鹽水洗滌，干燥并濃縮得到殘余物。使殘余物通過硅膠墊用EtOAc/己烷洗脫(梯度洗脫，25%-75% EtOAc)。蒸發(fā)洗脫溶劑，得到二醇2-(2′-羥基乙氧基)芐醇(4.8g，67%)，為油狀物。MS∶MW＝168;觀測值168(FD，CHCl3)。
向0℃的二醇2-(2′-羥基乙氧基)芐醇(4.38g，26mmol)的無水CH2Cl2(250ml)溶液中加入三苯膦(15.8g，60mmol)和N-溴丁二酰亞胺(10.7g，60mmol)。在0℃下2小時(shí)后，TLC(20% EtOAc/CH2Cl2)分析表明反應(yīng)完全，真空濃縮反應(yīng)混合物。濃縮物通過硅膠墊洗脫(己烷-15% EtOAc/己烷梯度洗脫)。濃縮洗脫的級(jí)分，得到二溴化物2-(2′-溴乙氧基)芐基溴(6.91g，產(chǎn)率90%)，為無色固體。MS.
13C-NMR(CHCl3，75.4MHz)δ28.7，29.1，68.2，112.3，121.6，126.8，130.2，131.1，156.0.
1H-NMR(CHCl3，200 MHz)δ3.72(2H，t，J＝5Hz)，4.34(2H，t，J＝5Hz)，4.59(2H，s)，6.84(H，d，J＝7Hz)，6.95(H，t，J＝7Hz)，7.25-7.38(2H).
制備例251-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-3-(2-碘乙氧基)-4-(叔丁基二苯基)丁烷在氮?dú)夥障?，將烯丙基?-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-3-(烯丙氧基)-4-(叔丁基二苯基)丁烷(21.6g，43.4mmol)溶于甲醇(500ml)中，并冷卻至-78℃。將臭氧鼓泡通入反應(yīng)混合物中，11分鐘后，用TLC(9己烷/1 EtOAc)判斷反應(yīng)已完成。加入硼氫化鈉(9.9g，6eq)，5分鐘后，將反應(yīng)混合物升至室溫。真空除去甲醇。將殘余物懸浮于乙醚(800ml)中。用水洗滌乙醚液，并用乙醚回洗水溶液。合并的有機(jī)液用鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)、過濾并真空濃縮得到油狀物。將該物通過硅膠墊用5% EtOAc/己烷洗脫，接著用25% EtOAc/己烷洗脫產(chǎn)物，得到11.0g(50%產(chǎn)率)醇，1-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-3-(2-(羥基)乙氧基)-4-(叔丁基二苯基)丁烷，為淺黃色油狀物，MS.NMR.
在氮?dú)夥铡?℃下，向醇1-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-3-(2-(羥基)乙氧基)-4-(叔丁基二苯基)丁烷(11.0g，21.9mmol)的無水乙醚(200ml)溶液中加入三乙胺(4.6ml，1.5eq)和甲磺酰氯(2.5ml，1.5eq)。1.5小時(shí)后，通過TLC分析(5% EtOAc/二氯甲烷)表明反應(yīng)已完成。用乙醚(250ml)稀釋反應(yīng)混合物，用水(2×)、鹽水(2X)洗滌，干燥(Na2SO4)、過濾并真空濃縮得到油狀物。將該物通過硅膠墊用5% EtOAc/己烷、接著用25% EtOAc/己烷洗脫，得到11.6g(91%產(chǎn)率)甲磺酸酯，1-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-3-(2-(甲磺酰氧基)乙氧基)-4-(叔丁基二苯基)丁烷，為油狀物。MS、NMR.
在氮?dú)夥障?，向甲磺酸?-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-3-(2-(甲磺酰氧基)乙氧基)-4-(叔丁基二苯基)丁烷(11.6g，20mmol)的丙酮(300ml)溶液中加入碘化鈉(44g，15eq)和碳酸氫鈉(170mg，0.1eq)。將混合物回流18小時(shí)，然后真空除去丙酮。將所得殘余物懸浮于乙醚中，用水(2×)洗滌，并用乙醚回洗水溶液。合并的乙醚部分用10%亞硫酸鈉溶液、鹽水(2×)洗滌，干燥(MgSO4)、過濾并真空濃縮，得到10.7g(87%產(chǎn)率)油狀的標(biāo)題碘化物，不經(jīng)進(jìn)一步純化即使用。MS.NMR.
制備例261-(2-(甲磺酰氧基)乙氧基)-2-((甲磺酰氧基)乙基)-3-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)丙烷向攪拌著的烯丙基丙二酸二甲酯(34g，0.2mol)的叔丁醇(0.5l)溶液中加入固體硼氫化鈉(19g，0.5mol)。加熱反應(yīng)混合物(70℃)，在1小時(shí)內(nèi)滴加甲醇(162ml)。將混合物在室溫下攪拌過夜。加入水(20ml)除去過量的硼氫化物。用硅藻土過濾所得的混合物。濃縮濾液(100ml)，用EtOAc(20ml×4)萃取。合并的萃取液用MgSO4干燥并減壓濃縮，得到較純的二醇，2-烯丙基丙-1，3-二醇(19g，83%產(chǎn)率)，不經(jīng)進(jìn)一步純化即進(jìn)行下面反應(yīng)。
向攪拌著的二醇2-(2-丙烯-1-基)丙-1，3-二醇(23.2g，0.19mol)的甲苯(1l)溶液中加入茴香醛(27.3g，0.20mol)和PPTS酸(4g，10mol%)。在燒瓶上安裝迪安-斯達(dá)克榻分水器，并使反應(yīng)混合物回流。5小時(shí)后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用乙醚(1l)稀釋，用飽和NaHCO3水溶液(50ml×3)、水(50ml×3)和鹽水(50ml)洗滌。用MgSO4干燥有機(jī)層，并減壓濃縮得到殘余物。殘余物通過短硅膠柱用10% EtOAc的己烷溶液洗脫，蒸發(fā)洗脫溶劑得到亞茴香基化合物，1，3-O-亞茴香基-2-(2-丙烯-1-基)丙烷(40g，89%)。Rf＝0.62(25% EtOAc的己烷溶液)。
在0℃下，向攪拌著的亞茴香基化合物1，3-O-亞茴香基-2-(2-丙烯-1-基)丙烷(20.0g，85.3mmol)在CH2Cl2(500ml)和pH7.0緩沖液(25ml)中的混合物中加入DDQ(38.7g，170.7mmol)。將反應(yīng)混合物劇烈攪拌并使之升至室溫。12小時(shí)后，用乙醚(1l)稀釋反應(yīng)混合物，用飽和NaHCO3水溶液(200ml×2)和10% Na2SO3水溶液(200ml×3)洗滌，干燥并減壓濃縮得到殘余物。殘余物通過硅膠柱用EtOAc/己烷(10%-25% EtOAc梯度洗脫)洗脫，蒸發(fā)洗脫溶劑，得到含茴香酸酯的醇，3-O-(4-甲氧基苯甲酸酯)-2-(2-丙烯-1-基)丙-1-醇(12.7g，61%)。Rf＝0.14(25% EtOAc的己烷溶液。NMR.
向攪拌著的醇3-O-(4-甲氧基苯甲酸酯)-2-(2-丙烯-1-基)丙-1-醇(16.58g，66.32mmol)的CH2Cl2(250ml)溶液中加入亞氨酸三氯烯丙酯(24.80g，132.64mmol)的環(huán)己烷(500ml)溶液。在氮?dú)夥障?，向此混合物中加入三氟乙?1ml)。12小時(shí)后，生成白色沉淀。過濾反應(yīng)混合物，用乙醚(500ml)稀釋濾液，用水(100ml×3)和鹽水(100ml)洗滌，干燥并減壓濃縮得到殘余物。殘余物通過硅膠柱用EtOAc/己烷(0%-25% EtOAc梯度洗脫)洗脫。得到含有一些乙酰胺的二烯，1-(2-丙烯-1-氧基)-2-(2-丙烯-1-基)-3-O-(4-甲氧基苯甲酸酯)丙烷(24g)，不經(jīng)進(jìn)一步純化即用于下面步驟。Rf＝0.38(25% EtOAc的己烷溶液)。
將酯1-(2-丙烯-1-氧基)-2-(2-丙烯-1-基)-3-O-(4-甲氧基苯甲酸酯)丙烷(24g)溶于THF(60ml)和甲醇(100ml)中，加入1N NaOH水溶液(40ml)。將所得混合物攪拌過夜，然后減壓除去甲醇和THF。用乙醚(250ml)稀釋濃縮的反應(yīng)混合物，用乙醚(100ml×3)萃取，干燥并減壓濃縮得到殘余物。殘余物通過硅膠柱用10% EtOAc/己烷洗脫，蒸發(fā)洗脫溶劑得到醇，1-(2-丙烯-1-氧基)-2-(2-丙烯-1-基)丙-3-醇(4.10g，兩步產(chǎn)率為30%)。NMR.Rf＝0.23(25% EtOAc的己烷溶液)。
在氮?dú)夥障?，向攪拌著的?-(2-丙烯-1-氧基)-2-(2-丙烯-1-基)丙-3-醇(4.10g，26.2mmol)的CH2Cl2(150ml)溶液中加入咪唑(2.70g，39.7mmol)。咪唑溶解后，在10分鐘內(nèi)加入叔丁基氯二苯基甲硅烷(8.24g，29.97mmol)的CH2Cl2(50ml)溶液。攪拌12小時(shí)后，用乙醚(100ml)稀釋反應(yīng)混合物，用水(100ml)處理，用乙醚(100ml×3)萃取。合并的有機(jī)相用鹽水(100ml)洗滌，干燥并減壓濃縮得到殘余物。殘余物通過短硅膠柱用EtOAc/己烷(0%-25% EtOAc梯度洗脫)洗脫，蒸發(fā)洗脫溶劑得到甲硅烷基醚，1-(2-丙烯-1-氧基)-2-(2-丙烯-1-基)-3-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)丙烷(7.41g，72%產(chǎn)率)。Rf＝0.76(25% EtOAc的己烷溶液)。
使臭氧鼓泡通過-78℃的二烯1-(2-丙烯-1-氧基)-2-(2-丙烯-1-基)-3-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)丙烷(7.41g，18.80mmol)的甲醇(500ml)溶液。原料消失后(TLC，25% EtOAc/己烷)，用氮?dú)獯迪捶磻?yīng)混合物并加入硼氫化鈉(2.13g，56.30mmol)。將反應(yīng)混合物加熱至室溫。12小時(shí)后，濃縮反應(yīng)混合物。用水處理白色殘余物，并用EtOAc(100ml×3)萃取。合并的有機(jī)相用鹽水洗滌，干燥并減壓濃縮得到殘余物。殘余物通過短硅膠柱用EtOAc/己烷(10%-50% EtOAc梯度洗脫)洗脫，蒸發(fā)洗脫溶劑得到1，7-二醇，1-(2-羥基乙氧基)-2-(2-羥基乙基)-3-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)丙烷(5.48g，72%產(chǎn)率)。Rf＝0.21(50% EtOAc的己烷溶液)。NMR.
在氮?dú)夥障?，向攪拌著的二?-(2-羥基乙氧基)-2-(2-羥基乙基)-3-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)丙烷(5.48g，13.6mmol)的CH2Cl2(400ml)溶液中加入TEA(11.2ml，78mmol)，接著在30分鐘內(nèi)滴加甲磺酰氯(3ml，39.00mmol)的CH2Cl2(100ml)溶液。12小時(shí)后，用乙醚(500ml)稀釋反應(yīng)混合物，用水(100ml×3)、鹽水(100ml)洗滌，干燥并減壓濃縮得到殘余物。殘余物通過短硅膠柱用EtOAc/己烷(10%-50% EtOAc梯度洗脫)洗脫，蒸發(fā)洗脫溶劑，得到雙甲磺酸酯，1-(2-(甲磺酰氧基)乙氧基)-2-((甲磺酰氧基)乙基)-3-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)丙烷(7.40g，97%)。Rf＝0.55(50% EtOAc的己烷溶液)。NMR.

實(shí)施例13，4-[(N，N′-1，1′-乙氧基乙基)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮在氮?dú)夥障?，將氫化鈉(60%礦物油分散液，113mg，2.82mmol)于15分鐘內(nèi)分批加到3，4-雙(3′-吲哚基)呋喃-2，5-二酮(337mg，1.02mmol)的無水DMF(5ml)溶液中。將混合物攪拌1.5小時(shí)，然后用5ml DMF稀釋。向所得的綠色溶液中滴加雙-2，2′-二溴乙醚(0.14ml，1.13mmol)。將反應(yīng)混合物在25℃下攪拌30分鐘，然后在50℃下加熱過夜。將冷卻的混合物傾入稀檸檬酸水溶液(75ml)中，用EtOAc(2×40ml)萃取。合并的有機(jī)萃取液用水(3×20ml)和鹽水(20ml)洗滌，用無水MgSO4干燥。減壓除去溶劑。將殘余物通過短硅膠柱(50% EtOAc/己烷)，然后進(jìn)行徑向制層色譜純化(Chromatotron)，用50% EtOAc-己烷洗脫，得到82mg(20%)2，3-[(N，N′-1，1′-乙氧基乙基)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-呋喃-2，5-二酮，為深紅色(burgundy)固體，M.Pt.＞320℃。
在氮?dú)夥障掠?，1，1，3，3，3-六甲基二硅氮烷(0.33ml，1.45mmol)和CH3OH(23mg，0.73mmol)的混合物(預(yù)先混合10分鐘)處理2，3-[(N，N′-1，1′-乙氧基乙基)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-呋喃-2，5-二酮(58mg，0.15mmol)的DMF(1.5ml)溶液。在室溫下攪拌16小時(shí)后，將混合物傾入水(20ml)中，并用EtOAc(3×5ml)萃取。合并的有機(jī)萃取液用水洗滌數(shù)次，干燥(MgSO4)并濃縮。殘余物通過徑向色譜純化，用3% CH3OH的CHCl3溶液洗脫，得到3，4-[(N，N′-1，1′-乙氧基乙基)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮(41.5mg，72%)，為紫色固體，M.Pt.＞320℃。MS(C24H19N3O3)計(jì)算值397.1426;實(shí)測值397.1438。
實(shí)施例23，4-[(N，N′-1，1′)-((3″-丙氧基)-3′″(O)-4′″-羥基丁烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮在氮?dú)夥障?，向攪拌下的含有碳酸銫(8.31g，25.5mmol)的雙(3，3′-吲哚基)-1-甲基吡咯-2，5-二酮(4.35g，12.8mmol)的DMF(125ml)溶液中于15分鐘內(nèi)滴加1-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-3-(3-碘丙氧基)-4-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)丁烷(4.0g，6.4mmol)的DMF(20ml)溶液。3小時(shí)后，TLC(1∶1EtOAc/己烷)分析表明原料碘化物已消耗完。用EtOAc(200ml)稀釋反應(yīng)混合物并用水洗滌。用EtOAc(200ml)萃取水層;將合并的有機(jī)層干燥并濃縮。濃縮物通過快速色譜純化，用10%-25% EtOAc/己烷洗脫，得到所需要的一烷基化產(chǎn)物3-[(N-1-(3-丙氧基-3(O)-4-叔丁基二苯基甲硅烷氧基-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧基)丁烷]-4-(3′-吲哚基)-1-甲基吡咯-2，5-二酮3.94g(69%產(chǎn)率)，為紅色油狀物。MS.
向上面的烷基化產(chǎn)物(3.14g，3.74mmol)的甲醇(100ml)溶液中加入甲苯磺酸(60mg，2%)。2小時(shí)后，TLC(50%-EtOAc/己烷)分析表明原料已消耗完。將反應(yīng)混合物濃縮至一半體積，用EtOAc(300ml)稀釋，用1N NaOH、鹽水洗滌，干燥并濃縮，通過用50% EtOAc/己烷使?jié)饪s物通過硅膠墊洗脫純化，得到所需的醇3-[(N-1-(3-丙氧基-3(O)-4-叔丁基二苯基甲硅烷氧基-丁-1-醇]-4-(3′-吲哚基)-1-甲基吡咯-2，5-二酮1.76g(65%產(chǎn)率)，為紅色泡沫狀物。MS.
向0℃的上述醇3-[(N-1-(3-丙氧基-3(O)-4-叔丁基二苯基甲硅烷氧基-丁-1-醇]-4-(3′-吲哚基)-1-甲基吡咯-2，5-二酮(1.76g，2.4mmol)的乙醚溶液(200ml)中加入三乙胺(0.5ml，1.5當(dāng)量(eq))，接著加入甲磺酰氯(0.28ml，1.5eq)。使反應(yīng)升至室溫并在1小時(shí)后完成。用乙醚(200ml)稀釋反應(yīng)混合物，用水、鹽水洗滌，干燥并濃縮。濃縮物通過硅膠墊純化，用50% EtOAc/己烷洗脫，得到甲磺酸酯產(chǎn)物，立即使用。
向上述甲磺酸酯的丙酮(250ml)溶液中加入碘化鈉(3.6g，10eq)和NaHCO3(20mg)。攪拌4小時(shí)后，原料還存在(TLC，50% EtOAc/己烷)，補(bǔ)加碘化鈉(10eq)，并將反應(yīng)混合物在60℃下加熱。4小時(shí)后，原料已被消耗完(TLC，50% EtOAc/己烷)。將反應(yīng)混合物濃縮，用EtOAc(250ml)稀釋，用水、10%亞硫酸鈉洗滌，干燥并濃縮。濃縮物通過硅膠墊純化，用50% EtOAc/己烷洗脫，得到所需碘化物3-[(N-1-(3-丙氧基-3(O)-4-叔丁基二苯基甲硅烷氧基-1-碘丁烷]-4-(3′-吲哚基)-1-甲基吡咯-2，5-二酮1.71g(85%產(chǎn)率)，為油狀物物。MS.
將上述碘化物3-[(N-1-(3-丙氧基-3(O)-4-叔丁基二苯基甲硅烷氧基-1-碘丁烷]-4-(3′-吲哚基)-1-甲基吡咯-2，5-二酮(2.0g，2.4mmol)的DMF(10ml)溶液通過注射泵于80小時(shí)內(nèi)緩慢加到碳酸銫(3.12g，9.6mmol)的DMF(400ml)漿液中。加完3小時(shí)后，TLC(50% EtOAc/己烷)分析表明原料已消耗完。用EtOAc(1l)稀釋反應(yīng)混合物，并用水和鹽水洗滌。用EtOAc(500ml)萃取水部分。濃縮合并的有機(jī)層，濃縮物通過硅膠墊純化，用50% EtOAc/己烷洗脫。濃縮洗脫液得到所需的大環(huán)化合物3，4-[(N，N′-1，1′)-((3″-丙氧基)-3′″(O)-4′″-羥基丁烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1-甲基吡咯-2，5-二酮1.65g(97%產(chǎn)率)。MS.
向上述N-甲基馬來酰亞胺3，4-[(N，N′-1，1′)-((3″-丙氧基)-3′″(O)-4′″-羥基丁烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1-甲基吡咯-2，5-二酮(1.7g，2.4mmol)的乙醇(100ml)溶液中加入5N KOH(50ml)。12小時(shí)后，將反應(yīng)混合物在50℃下加熱2小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，濃縮，用EtOAc稀釋并用水洗滌。將有機(jī)相干燥并濃縮，得到所需的酐2，3-[(N，N′-1，1′)-(3″-丙氧基-3′″(O)-4′″-羥基丁烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-呋喃-1，4-二酮1.37g(83%產(chǎn)率)，為紅色固體。MS.
向上述酐2，3-[(N，N′-1，1′)-((3″-丙氧基)-3′″(O)-4′″-羥基丁烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-呋喃-1，4-二酮(1.37g，3mmol)的DMF(100ml)溶液中加入1，1，1，3，3，3-六甲基二硅氮烷(12.6ml，20eq)和甲醇(1.21ml，10eq)。24小時(shí)后，原料已消耗完(TLC，50% EtOAc/己烷)。將反應(yīng)混合物用EtOAc稀釋，用1N HCl、水洗滌，干燥并濃縮，將濃縮物在1N HCl中或與氟化銫攪拌除去殘余的TMS基團(tuán)。反應(yīng)混合物用EtOAc稀釋，用水洗滌，干燥并濃縮，得到所需的馬來酰亞胺3，4-[(N，N′-1，1′)-((3″-丙氧基)-3′″(O)-4′″-羥基丁烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮1.02g(75%產(chǎn)率)，為紅色固體。MS.
1H-NMR(300 MHz，d6-DMSO)2.1(m，4H)，2.4(m，2H)，3.28(br，m)，3.4(m，1H)，4.25(m，4H)，4.5(t，J＝6Hz，1H)，7.0-7.9(m，10H)，11.0(s，1H)13C-NMR(75MHz，d6-DMSO)20.9，28.9，30.3，30.9，34.3，40.2，41.6，42.4，62.4，65.9，78.1，104.0，104.1，110.0，110.1，119.6，119.7，121.4，121.8，24.8，126.5，126.6，127.9，131.5，131.6，131.7，135.8，135.9，139.1，151.4，172.2 實(shí)施例33，4-[(N，N′-1，1′)-((2″-乙氧基)-3′″(O)-4′″-羥基丁烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮在氮?dú)夥障?，向雙(3，3′-吲哚基)-1-甲基吡咯-2，5-二酮(17.9g，52.5mmol，3eq)的二甲基甲酰胺(250ml)溶液中加入碳酸銫(68.4g，4eq)。向所得的懸浮液中加入碘化物，-1-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-3-(2-碘乙氧基)-4-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)丁烷(10.7g，17.5mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌18小時(shí)。TLC(5%乙酸乙酯/己烷)分析表明碘化物已消失。將反應(yīng)混合物傾入乙酸乙酯(1200ml)中，用1N HCl(400ml)洗滌。接著用乙酸乙酯(2×)回洗。合并的乙酸乙酯部分用飽和的碳酸氫鈉溶液、鹽水(2×)洗滌，干燥(MgSO4)，過濾并真空濃縮。通過與二甲苯共沸除去二甲基甲酰胺。所得的紅色膠體在二氯甲烷和乙腈中漿化得到固體懸浮物。將其濃縮，再加入二氯甲烷，冷卻并過濾，得到紅色固體。通過在二氯甲烷然后在乙酸乙酯中研制從該固體提取一些所需的產(chǎn)物。真空濃縮濾液，將所得殘余物吸收在硅膠上并加到大快速柱中。通過用5己烷/1乙酸乙酯洗脫，接著用3己烷/1乙酸乙酯洗脫產(chǎn)物除去二烷基化副產(chǎn)物，得到8.2g(57%)-烷基化產(chǎn)物;3-[(N-1-(2-乙氧基-(3′″-(O)-4′″-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)-1′″-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)丁烷))吲哚-3-基]-4-[吲哚-3-基]-1N-甲基吡咯-2，5-二酮。MS.NMR.
在氮?dú)夥铡?℃下，向叔丁基二甲基甲硅烷氧基醚3-[(N-1-(2-乙氧基-(3′″-(0)-4′″-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-1′″-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)丁烷))吲哚-3-基]-4-[吲哚-3-基]-1N-甲基吡咯-2，5-二酮(8.2g，9.9mmol)的甲醇(450ml)溶液中加入對(duì)甲苯磺酸-水合物(0.16g，0.085eq)。2小時(shí)后，TLC(50%乙酸乙酯/己烷)表明反應(yīng)接近完成。用固體碳酸氫鈉(0.14g)終止反應(yīng)。真空除去甲醇。將所得殘余物溶于乙酸乙酯中，用0.1N氫氧化鈉、鹽水(2×)洗滌、干燥(MgSO4)，過濾并真空濃縮得到紅色泡沫狀物。將該物吸附在硅膠上，然后加在硅膠墊上。用2己烷/1乙酸乙酯洗脫除去殘余的原料，接著用1己烷/1乙酸乙酯和1己烷/2乙酸乙酯洗脫，得到6.4g(91%)醇3-[(N-1-(2-乙氧基-(3′″-(O)-4′″-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)-1′″-羥基丁烷))吲哚-3-基]-4-[吲哚-3-基]-1N-甲基吡咯-2，5-二酮。MS.NMR.
在氮?dú)夥铡?℃下，向上述醇3-[(N-1-(2-乙氧基-(3′″-(O)-4′″-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)-1′″-羥基丁烷))吲哚-3-基]-4-[吲哚-3-基]-1N-甲基吡咯-2，5-二酮(6.36g，8.9mmol)的無水乙醚(500ml)溶液中加入三乙胺(1.9ml，1.5eq)和甲磺酰氯(1.0ml，1.5eq)。3小時(shí)后，補(bǔ)加三乙胺(1.25ml，1.0eq)和甲磺酰氯(0.7ml，1.0eq)。1小時(shí)后，TLC(50%乙酸乙酯/己烷)分析表明反應(yīng)已完成。用乙醚(250ml)稀釋反應(yīng)混合物，用水、0.1N HCl和鹽水(2×)洗滌。將乙醚液干燥(MgSO4)、過濾并真空濃縮，得到7.0g甲磺酸酯3-[(N-1-(2-乙氧基-(3′″-(O)-4′″-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)-1′″-(甲磺酰氧基)丁烷))吲哚-3-基]-4-[吲哚-3-基]-1N-甲基吡咯-2，5-二酮。MS.
在氮?dú)夥障?，向上述的甲磺酸?-[(N-1-(2-乙氧基-(3′″-(O)-4′″-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)-1′″-(甲磺酰氧基)丁烷))吲哚-3-基]-4-[吲哚-3-基]-1N-甲基吡咯-2，5-二酮(7.0g，8.9mmol)的丙酮(200ml)溶液中加入碘化鈉(13.3g，10eq)和碳酸氫鈉(75mg，0.1eq)。將混合物在50℃下攪拌13小時(shí)，然后真空濃縮反應(yīng)混合物。將殘余物溶于乙醚中，用10%亞硫酸鈉溶液洗滌。分離各層，乙醚部分用10%亞硫酸鈉溶液、水、鹽水(2×)洗滌，干燥并真空濃縮。殘余物通過硅膠墊純化，用1己烷/1乙酸乙酯和1己烷/2乙酸乙酯洗脫，得到7.6g碘化物3-[(N-1-(2-乙氧基-(3′′′-(0)-4′′′-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)-1′′′-(碘)丁烷))吲哚-3-基]-4-[吲哚-3-基]-1N(甲基)吡咯-2，5-二酮，為紅色固體(兩步加起來為定量產(chǎn)率)。MS.NMR.
在氮?dú)夥障拢ㄟ^注射泵于65小時(shí)內(nèi)向碳酸銫(12.0g，4eq)的二甲基甲酰胺(1l)懸浮液中加入溶于二甲基甲酰胺(25ml)中的碘化物3-[(N-1-(2-乙氧基-(3′″-(0)-4′″-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)-1′″-(碘)丁烷))吲哚-3-基]-4-[吲哚-3-基]-1N(甲基)吡咯-2，5-二酮(7.6g，9.2mmol)。加完后三小時(shí)，真空濃縮反應(yīng)混合物。將殘余物溶于乙酸乙酯(700ml)中，用水(2×300ml)洗滌，用乙酸乙酯(2×200ml)回洗水層。合并的乙酸乙酯部分用鹽水(2×200ml)洗滌、干燥(MgSO4)、過濾并真空濃縮得到紅紫色殘余物。將該物吸附在硅膠上并加入快速柱中，用3己烷/1乙酸乙酯然后用1己烷/1乙酸乙酯洗脫，得到5.2g(82%)大環(huán)化合物3，4-[(N，N′-1，1′)-((2″-乙氧基)-3′″(0)-4′″-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)丁烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮。MS.NMR.
將N-甲基馬來酰亞胺3，4-[(N，N′-1，1′)-((2″-乙氧基)-3′″(0)-4′′′-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)丁烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮在5NKOH(150ml)和乙醇(300ml)中的懸浮液在室溫下攪拌65小時(shí)，然后在60℃下攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)混合物真空濃縮(150ml)，將殘余物懸浮于水中，冷卻至5℃，用濃鹽酸酸化(pH3)。將紅色水懸浮液用乙酸乙酯(4×200ml)萃取，干燥并真空濃縮，得到3.3g酐醇粗品2，3-[(N，N′-1，1′)-((2″-乙氧基)-3′′′(O)-4′′′-(羥基)丁烷)-雙(3，3′-吲哚基)]呋喃-1，4-二酮，為紅紫色固體。MS.
在氮?dú)夥障?，向上述的?，3-[(N，N′-1，1′)-((2″-乙氧基)-3′′′(O)-4′′′-(羥基)丁烷)-雙(3，3′-吲哚基)]呋喃-1，4-二酮(3.3g，7.5mmol)的二甲基甲酰胺(250ml)溶液中加入1，1，1，3，3，3-六甲基二硅氮烷(32ml，2eq)和甲醇(3ml，10eq)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌16小時(shí)。然后在60℃下加熱2小時(shí)。真空除去二甲基甲酰胺，將所得殘余物溶于乙腈(250ml)中，加入1N HCl(50ml)。將反應(yīng)混合物攪拌15分鐘。濃縮反應(yīng)混合物，在乙酸乙酯(1l)和水(250ml)間分配，沉淀得到固體產(chǎn)物醇馬來酰亞胺，3，4-[(N，N′-1，1′)-((2″-乙氧基)-3′′′(O)-4′′′-(羥基)丁烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮，0.92g(28%)產(chǎn)物。將少量(50mg)產(chǎn)物吸附在硅膠上，然后加入快速柱中，用二氯甲烷、5%乙腈/二氯甲烷然后用10%乙腈/二氯甲烷洗脫，得到38mg分析純產(chǎn)物。濃縮乙酸乙酯液并進(jìn)行色譜純化，得到另外8%粗產(chǎn)物。MS.
1H NMR(d6-DMSO)δ1.96(1H，m);2.09(1H，m);3.31(1H，m);3.40(1H，m);3.51(1H，m);3.62(1H，m);3.89(1H，m);4.18(3H，m);4.35(1H，m)，4.68(1H，t，J＝2Hz);7.11(2H，m);7.19(2H，m);7.44(1H，s)7.46(1H，d，J＝9Hz);7.51(1H，s)7.53(1H，d，J＝9Hz);7.79(1H，d，J＝8Hz);7.83(1H，d，J＝8Hz);10.91(1H，s).
實(shí)施例43，4-[(N，N′-1，1′)-((2″-乙氧基)-3′′′(O)-4′′′-(氨基)丁烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮三氟乙酸鹽在氮?dú)夥障?，向?，4-[(N，N′-1，1′)-((2″-乙氧基)-3′′′(O)-4′′′-(羥基)丁烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮(155mg，0.35mmol)的無水四氫呋喃(15ml)溶液中加入2，4，6-三甲基吡啶(280μl，3eq)。將溶液冷卻至-78℃，用三氟甲磺酸酐(118μl，2eq)處理。在-78℃下1.5小時(shí)后，加入大過量的濃氫氧化銨(2ml)。10分鐘后，將反應(yīng)混合物在干冰/乙腈浴中加熱至-42℃，然后攪拌18小時(shí)，同時(shí)使之升至室溫。真空濃縮反應(yīng)混合物。將所得的殘余物溶于乙酸乙酯(400ml)中，用水、鹽水洗滌，干燥并真空濃縮得到伯胺粗品。將胺吸收在硅膠上，加入快速柱中，依次用1乙酸乙酯/1己烷、乙酸乙酯、乙酸乙酯/5%甲醇最后用50乙酸乙酯/45乙腈/4甲醇/2異丙胺洗脫，洗出得到胺3，4-[(N，N′-1，1′)-((2″-乙氧基)-3′′′(O)-4′′′-(氨基)丁烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮(38mg)。還回收到起始醇(104mg，67%)。用反相體積排阻色譜法進(jìn)一步純化產(chǎn)物，用85乙腈/15(0.01% TFA/水)洗脫。收集的級(jí)分與乙酸乙酯共沸得到23mg(12%)粉狀的TFA鹽。MS.
1H NMR(d6-DMSO)δ1.99(1H，m);2.08(1H，m);2.82(1H，m);3.18(1H，m);3.57(2H，m);3.75(1H，m);4.13(2H，m);4.29(1H，m);4.44(1H，m);7.09(2H，t，J＝7Hz);7.18(2H，t，J＝7Hz);7.47(4H，m);7.70(3H，bs);7.78(2H，m)按類似的方法，制備S-對(duì)映體、4s HCl鹽及R-對(duì)映體、4rHCl鹽。
實(shí)施例53，4-[(N，N′-1，1′)-((2″-乙氧基)-3′′′(O)-4′′′-(N，N-二甲基氨基)丁烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮HCl鹽在氮?dú)夥障?，向?，4-[(N，N′-1，1′)-((2″-乙氧基)-3′′′(O)-4′′′-(羥基)丁烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮(472mg，1.07mmol)的無水二氯甲烷(140ml)懸浮液中加入吡啶(260μl，3eq)和甲磺酸酐(242mg，1.3eq)。4小時(shí)后，用二氯甲烷稀釋反應(yīng)混合物，用0.1N HCl(2×)洗滌并過濾除去原料(54mg)。將二氯甲烷部分用鹽水(2×)洗滌，干燥并濃縮，得到甲磺酸酯粗品，為紅紫色固體。將該物吸收在硅膠上，加入快速柱中，依次用二氯甲烷、5%乙腈/二氯甲烷和10%乙腈/二氯甲烷洗脫，得到288mg(52%產(chǎn)率)甲磺酸酯3，4-[(N，N′-1，1′)-((2″-乙氧基)-3′′′(O)-4-′′′-(甲磺酰氧基)丁烷)雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮。MS.NMR.
向甲磺酸酯3，4-[(N，N′-1，1′)-((2″-乙氧基)-3′′′(O)-4′′′-(甲磺酰氧基)丁烷)雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮(304mg，0.59mmol)的四氫呋喃(20ml)溶液中加入8.9M二甲胺的四氫呋喃溶液(7ml，100eq)，在封管中加熱(65℃)24小時(shí)后，將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(200ml)稀釋，用鹽水(2×)洗滌，干燥并濃縮，得到二甲胺衍生物固體粗品。將該物吸收在硅膠上，然后加入快速柱中，依次用3乙酸乙酯/1己烷、乙酸乙酯和2%異丙胺/乙酸乙酯洗脫，得到二甲胺衍生物193mg(70%產(chǎn)率)，HPLC分析為90%純度。用反相體積排阻HPLC法并用85乙腈/15(0.01% TFA/水)洗脫純化二甲胺衍生物，3，4-[(N，N′-1，1′)-((2″-乙氧基)-3′′′(O)-4′′′-(N，N-二甲基氨基)丁烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮，得到大于95%純度的三氟乙酸鹽。
按下述方法使3，4-[(N，N′-1，1′)-((2″-乙氧基)-3′′′(O)-4′′′-(N，N-二甲基氨基)丁烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮的三氟乙酸鹽轉(zhuǎn)化為HCl鹽將鹽懸浮在乙酸乙酯中，并用0.1N NaOH(5×50ml)輕輕洗滌。乙酸乙酯部分用鹽水(2×)洗滌，干燥并濃縮，得到游離堿，3，4-[(N，N′-1，1′)-((2″-乙氧基)-3′′′(O)-4′′′-(N，N-二甲基氨基)丁烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮。向游離堿，3，4-[(N，N′-1，1′)-((2″-乙氧基)-3′′′(O)-4′′′-(N，N-二甲基氨基)丁烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮的無水甲醇(50ml)懸浮液中加入1N HCl的無水乙醚溶液(13ml，50eq)。蒸發(fā)乙醚，真空干燥殘余物，得到143mg(52%產(chǎn)率)3，4-[(N，N′-1，1′)-((2″-乙氧基)-3′′′(O)-4′′′-(N，N-二甲基氨基)丁烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮鹽酸鹽，為紅色固體。MS.
1H NMR(d6-DMSO)δ2.03(1H，m);2.26(1H，m);2.68(6H，t，J＝5Hz);3.24(1H，m);3.28，(1H，m，用D2O振蕩后);3.64(1H，m);3.77(2H，m);4.07-4.38(4H，m);7.08(2H，m);7.17(2H，m);7.43(3H，m);7.52(1H，d，J＝8Hz);7.79(2H，m);10.33(1H，bs);10.92(1H，s)
實(shí)施例5s(S)-3，4-[(N，N′-1，1′)-((2″-乙氧基)-3′′′(O)-4′′′-(N，N-二甲基氨基)丁烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮鹽酸鹽在封閉容器中，向甲磺酸酯(S)-3，4-[(N，N′-1，1′)-((2″-乙氧基)-3′′′(O)-4′′′-(甲磺酰氧基)丁烷)-雙(3-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮(2.8g，5.39mmol)的THF(300ml)溶液中加入二甲胺(100ml，40%水溶液)。加熱(50℃)24小時(shí)后，濃縮反應(yīng)混合物。殘余物通過硅膠墊純化，用乙酸乙酯、然后用10%三乙胺/乙酸乙酯洗脫，得到所需的(S)-二甲胺衍生物。濃縮洗脫液得到1.7g(67%產(chǎn)率)游離堿(S)-3，4-[(N，N′-1，1′)-((2″-乙氧基)-3′′′(O)-4′′′-(N，N-二甲基氨基)丁烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮，為紫色固體。按下述方法將游離堿轉(zhuǎn)化為鹽酸鹽將3，4-[(N，N′-1，1′)-(4″-N，N-二甲基氨基-3″-(S)-乙氧基丁烷)]-(雙)-(3-吲哚基)-1H-吡咯-2，5-二酮(1.7g，3.6mmol)懸浮于甲醇(300ml)中并加入1.0N無水HCl的乙醚溶液(10ml，10mmol)。在室溫下0.5小時(shí)后，收集亮橙色沉淀，用乙醚洗滌，真空干燥，得到1.4g(77%產(chǎn)率)3，4-[(N，N′-1，1′)-(4″-N，N-二甲基氨基-3″-(S)-乙氧基丁烷)]-(雙)-(3-吲哚基)-1H-吡咯-2，5-二酮鹽酸鹽。MS.
1H NMR(d6-DMSO)δ2.1(m，1H);2.35(m，1H);2.68(s，6H);3.2(m，1H);3.33(m，1H);3.66(br.t，1H);3.8(br.t，1H);3.85(m，1H);4.17(m，1H);4.2-4.4(m，3H);7.1(d，1H);7.13(d，1H);7.2(m，2H);7.44(s，1H);7.48(s，1H);7.5(d，1H);7.56(d，1H);7.82(br.t，2H);10.59(br.，1H);10.96(s，1H).
實(shí)施例5r(R)-3，4-[(N，N′-1，1′)-((2″-乙氧基)-3′′′(O)-4′′′-(N，N-二甲基氨基)丁烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮鹽酸鹽按照與制備(S)對(duì)映體相同的方法，但是使用(R)-4-叔丁基二苯基甲硅烷氧基-3-(2-碘乙氧基)-1-碘丁烷作為原料，制備R對(duì)映體。MS.NMR.
實(shí)施例63，4-[(N，N′-1，1′-(2″-乙氧基)-(3′′′-((O)-亞甲基)-4′′′-(羥基)丁烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮將(雙)甲磺酸酯1-(2-(甲磺酰氧基)乙氧基)-2-((甲磺酰氧基)乙基)-3-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)丙烷(7.40g，13.30mmol)和[雙(3，3′-吲哚基)]-1(甲基)吡咯-2，5-二酮(4.43g，13.30mmol)的無水DMF(100ml)溶液于16小時(shí)內(nèi)加到50℃的攪拌下的Cs2CO3(25.4g，78mmol)的DMF(400ml)懸浮液中。8小時(shí)后，在80℃下減壓濃縮反應(yīng)混合物得到殘余物。殘余物用乙酸乙酯(200ml)稀釋，用水(50ml)洗滌。分離出有機(jī)層，用乙酸乙酯(50ml×3)萃取水層。干燥合并的有機(jī)部分并濃縮得到殘余物。殘余物通過硅膠柱純化，用25%乙酸乙酯的己烷溶液、接著用5%甲醇的CH2Cl2溶液洗脫，得到三種主要產(chǎn)物甲硅烷基醚大環(huán)產(chǎn)物，2，3-[(N，N′-1，1′-(4′′′-乙氧基-1′-基-(3′′′-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)亞甲基)丁-1-基)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(甲基)吡咯-1，4-二酮(2.35g)，MS(C44H45N3O4Si)計(jì)算值分子量707.31，實(shí)測值708。Rf＝0.84(50%乙酸乙酯的己烷溶液)，脫甲硅烷基的醇大環(huán)產(chǎn)物(600mg)。MS.
向攪拌下的N-甲基大環(huán)化合物2，3-[(N，N′-1，1′-(4′′′-乙氧基-1′-基-(3′′′-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)亞甲基)丁-1-基)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(甲基)吡咯-1，4-二酮(1.65g，2.33mmol)的EtOH(500ml)溶液中加入5N KOH(100ml)。在50℃下12小時(shí)后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，并減壓濃縮得到殘余物。殘余物用濃HCl酸化至pH1，用乙酸乙酯(200ml×5)萃取。將合并的有機(jī)相干燥、減壓濃縮，通過短硅膠柱用5%甲醇的二氯甲烷溶液洗脫。蒸發(fā)洗脫溶劑，得到含有酐2，3-[(N，N′-1，1′-(4′′′-乙氧基-1′-基-(3′′′-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)亞甲基)丁-1-基)-雙(3，3′-吲哚基)]呋喃-1，4-二酮的殘余物，將其用于下面的反應(yīng)。
向酐2，3-[(N，N′-1，1′-(4′′′-乙氧基-1′-基-(3′′′-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)亞甲基)丁-1-基)-雙(3，3′-吲哚基)]呋喃-1，4-二酮(600mg，1.3mmol)的無水DMF(250ml)溶液中加入HMDS(2.1g，13mmol)，接著加入甲醇(209mg，6.5mmol)。48小時(shí)后，濃縮反應(yīng)混合物，將殘余物溶于乙酸乙酯(100ml)中，分別用1N HCl水溶液(25ml)、水(25ml)和鹽水(25ml)洗滌。然后將所得的有機(jī)相干燥并濃縮，得到殘余物。殘余物通過硅膠柱用甲醇/CH2Cl2(0%-5%甲醇)洗脫。蒸發(fā)洗脫溶劑，得到酰亞胺，3，4-[(N，N′-1，1′-(2″-乙氧基)-(3′′′((O)-亞甲基)-4′′′-(羥基)丁烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮，為固體(300mg，50%產(chǎn)率)。MS.
1H NMR(CDCl3)δ9.65(s，1H)，7.79(t，J＝7.65Hz)，7.61(s，1H)，7.54(s，1H)，7.46-7.40(m，2H)，7.24-7.08(m，2H)，7.07-7.02(m，2H).4.43-4.33(m，2H)，4.30-4.21(m，1H)，4.14-4.06(m，1H)，3.64(t，J＝4.64Hz)，3.58-3.38(m，5H)，3.71(t，J＝8.64Hz，1H)，1.89-1.85(m，1H) 實(shí)施例73，4-[(N，N′-1，1′-(2″-乙氧基)-(3′′′((0)-亞甲基)-4′′′-(N-吡咯烷子基)丁烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮鹽酸鹽在氮?dú)夥障?，向含有吡?120mg，1.5mmol)的酰亞胺醇3，4-[(N，N′-1，1′-(2″-乙氧基)-(3′′′((O)-亞甲基)-4′′′-(羥基)丁烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮(140mg，0.30mmol)的無水CH2Cl2(50ml)溶液中加入甲磺酸酐(106mg，0.61mmol)。12小時(shí)后，用水(25ml)終止反應(yīng)。用CH2Cl2(50ml)稀釋。用0.2N HCl(20ml×2)、碳酸氫鈉水溶液(20ml)、水(20ml)、鹽水(20ml)洗滌，干燥，濃縮得到殘余物，殘余物通過短硅膠柱用5%甲醇的二氯甲烷溶液洗脫，蒸發(fā)洗脫溶劑，得到甲磺酸酯，3，4-[(N，N′-1，1′-(2″-乙氧基)-(3′′′((O)-亞甲基)-4′′′-(甲磺酰氧基)丁烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮，將其用于下面反應(yīng)。
向封管中的甲磺酸酯3，4-[(N，N′-1，1′-(2″-乙氧基)-(3′′′((O)-亞甲基)-4′′′-(甲磺酰氧基)丁烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮(157mg，0.29mmol)的THF(20ml)溶液中加入吡咯烷(203mg，2.90mmol)。加熱(50℃)12小時(shí)后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，減壓下濃縮，溶于CH2Cl2(50ml)中，用水(20ml×2)、鹽水(20ml)洗滌，干燥，減壓濃縮得到殘余物。殘余物通過短硅膠柱用5%甲醇的二氯甲烷溶液洗脫，蒸發(fā)洗脫溶劑，得到吡咯烷，3，4-[(N，N′-1，1′-(2″-乙氧基)-(3′′′((O)-亞甲基)-4′′′-(N-吡咯烷子基)丁烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮。MS.(C31H32N4O3)計(jì)算值分子量508.62，實(shí)測值508，Rf＝0.14(5%甲醇的二氯甲烷溶液，少量三乙胺)。通過反相凝膠滲透色譜法進(jìn)一步純化吡咯烷，得到吡咯大環(huán)化合物的三氟乙酸鹽(55mg，37%產(chǎn)率)。按下述方法使吡咯的三氟乙酸鹽轉(zhuǎn)化為標(biāo)題的鹽酸鹽化合物用乙酸乙酯(25ml)/甲醇(2ml)萃取三氟乙酸鹽(55mg)的1N NaOH(5ml)漿液，干燥萃取液，濃縮得到殘余物。將殘余物在乙醚/甲醇(10∶1)中漿化，加入乙醚的HCl溶液。30分鐘后，濃縮漿液并真空干燥，得到標(biāo)題化合物(48mg，88%產(chǎn)率)。MS.
1H NMRδ10.98(s，1H)，7.90(s，1H)，7.82(s，1H)，7.70-7.62(m，3H)，7.56-7.50(m，1H)，7.24-7.02(m，4H)，4.50-4.20(m，4H)，3.76-3.42(m，4H)，2.82-2.44(m，4H)，2.26-2.24(m，1H)，1.82-1.60(m，6H)，1.26-1.02(m，2H).
實(shí)施例83，4-[(N，N′-1，1′-(2″-乙氧基)-(3′′′((O)-亞甲基)-4′′′-(N，N-二甲基氨基)丁烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮鹽酸鹽用二甲胺置換甲磺酸酯制得標(biāo)題叔胺(58mg，75%產(chǎn)率)。MS.
1H(CDCl3)d10.93(s，1H)，7.84(s，1H)，7.77(s，1H)，7.69-7.64(m，3H)，7.47(d，J＝7.97Hz，1H)，7.13-7.02(m，4H)，4.40-4.11(m，4H)，3.73-3.20(m，4H)，2.50(s，3H)，2.33(s，1H)，2.13-1.96(m，2H)，1.86-1.70(m，1H)，1.21-1.10(m，2H)按照類似于本文所述實(shí)施例的方法制備下列化合物并進(jìn)一步說明本發(fā)明的化合物。在下列實(shí)施例中，化合物的結(jié)構(gòu)通過NMR、MS和/或元素分析來確證。在這些合成中，R是保護(hù)的羥基，優(yōu)選甲硅烷基醚，如叔丁基二苯基甲硅烷氧基(TBDPS)。甲硅烷基醚可被轉(zhuǎn)化成離去基團(tuán)并被取代制備下列實(shí)施例化合物
實(shí)施例263，4-[N，N′-1，1′-(2-亞甲基-6-亞甲基吡啶)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮按照實(shí)施例1所述的同樣方法，用氫化鈉(60%油分散液，88mg，2.19mmol)處理2，3-雙吲哚馬來酸酐(287mg，0.88mmol)的DMF(5ml)溶液1.5小時(shí)，然后用DMF稀釋至11ml，用雙-2，6-二溴甲基吡啶(245mg，0.93mmol)處理。在50℃下攪拌過夜后，將反應(yīng)混合物進(jìn)行處理(EtOAc)，通過短硅膠塞過濾(50% EtOAc的己烷溶液)，得到N，N′-(2，6-吡啶橋基)雙吲哚馬來酸酐(142mg，37%)，為紅黑色固體。TLC分析表明基本上為一點(diǎn)，不經(jīng)進(jìn)一步純化即直接用于下一步驟。
用1，1，1，3，3，3-六甲基二硅氮烷(0.72ml，3.2mmol)和CH3OH(0.063ml，1.6mmol)的混合物處理3，4-[N，N′-1，1′-(2-亞甲基-6-亞甲基吡啶)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-呋喃-2，5-二酮(140mg，0.32mmol)的DMF(2ml)溶液，經(jīng)處理并通過徑向硅膠色譜純化，得到42mg標(biāo)題的N，N′-(2，6-吡啶橋基)雙吲哚馬來酰亞胺，為暗紅色固體。TLC(Rf＝0.35，3% CH3OH的CHCl3溶液)表明該物是純一的。
實(shí)施例273，4-[(N，N′-1，1′-(2″-乙氧基)芐基)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮鹽酸鹽在55℃、氮?dú)夥蘸蛣×覕嚢柘?，將二溴化?-(2′-溴乙氧基)芐基溴(2.0g，6.8mmol)和雙(3，3′-吲哚基)]-1(甲基)吡咯-2，5-二酮(2.3g，6.8mmol)的無水DMF(45ml)溶液通過注射泵于20小時(shí)內(nèi)加到Cs2CO3(8.9g，27mmol)的無水DMF(550ml)懸浮液中。再過2小時(shí)后，真空濃縮反應(yīng)混合物，將殘余物溶于CH2Cl2中，用1N HCl、鹽水洗滌，干燥并真空濃縮得到紫色油狀物。油狀物通過硅膠塞用1∶1己烷/乙酸乙酯洗脫。濃縮洗脫液得到大環(huán)化合物，3，4-[(N，N′-1，1′-(2″-乙氧基)芐基)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(甲基)吡咯-2，5-二酮2.76g(71%產(chǎn)率)，為洋紅色固體。用異丙醇/CH2Cl2重結(jié)晶，得到分析純產(chǎn)物。MSMW＝473;實(shí)測值473(FD，CHCl3)，EA計(jì)算值(實(shí)測值)C，76.09(75.86);H，4.90(4.93);N，8.87(8.79)。
向含有THF(20ml)的大環(huán)化合物3，4-[(N，N′-1，1′-(2″-乙氧基)芐基)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(甲基)吡咯-2，5-二酮(710mg，15mmol)的乙醇(100ml)懸浮液中加入5N KOH(80ml)。攪拌下將反應(yīng)混合物加熱(55℃)70小時(shí)，冷卻至室溫，真空除去乙醇。用5N HCl(325ml)酸化濃縮物至pH1，用乙酸乙酯萃取，用鹽水(2×)洗滌，干燥并濃縮，得到殘余物酐，3，4-[(N，N′-1，1′-(2″-乙氧基)芐基)-雙(3，3′-吲哚基)]呋喃-2，5-二酮700mg(定量轉(zhuǎn)化)。
向酐3，4-[(N，N′-1，1′-(2″-乙氧基)芐基)-雙(3，3′-吲哚基)]呋喃-2，5-二酮(760g，17mmol)的無水DMF(500ml)溶液中加入甲醇(0.34ml，8.3mmol)和1，1，1，3，3，3-六甲基二硅氮烷(3.5ml，17mmol)的溶液。加熱(55℃)22小時(shí)后，真空濃縮反應(yīng)混合物，用乙酸乙酯稀釋，用0.1N HCl洗滌。將合并的有機(jī)層干燥并濃縮，得到紫色殘余物。殘余物加在短硅膠柱上，用CH2Cl2/己烷(梯度0-100% CH2Cl2)洗脫。蒸發(fā)洗脫溶劑，得到NH馬來酰亞胺，3，4-[(N，N′-1，1′-(2″-乙氧基)芐基)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮483mg，(70%產(chǎn)率)，為紅紫色固體。用CH2Cl2/己烷結(jié)晶得到標(biāo)題化合物。MS.
1H NMR(DMSO-d6)δ4.29(2H，bs);4.59(2H，bs);5.23(2H，bs);6.90-6.99(2H)，7.01-7.18(3H)，7.20-7.27(2H)，7.59-7.68(2H)，7.71-7.80(5H);
10.92(H，s).
實(shí)施例283，4-[(N，N′-1，1′-己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮在氮?dú)夥障?，?0分鐘內(nèi)向3，4-雙(3-吲哚基)-1-甲基吡咯-2，5-二酮(499mg，1.46mmol)的DMF(10ml)溶液中分批加入氫化鈉(60%油分散液，146mg，3.65mmol)。將所得綠色溶液攪拌1小時(shí)。用10ml DMF稀釋混合物，然后滴加1，6-二溴己烷(0.24ml，1.57mmol)處理。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌30分鐘，然后在45℃下加熱16小時(shí)。將冷卻的混合物傾入稀NH4Cl水溶液(125ml)中，用EtOAc(3×40ml)萃取。合并的有機(jī)萃取液用水洗滌并干燥(MgSO4)。真空除去溶劑后，殘余物通過快速硅膠色譜純化，用CH2Cl2-己烷，1∶1-3∶1(梯度洗脫)洗脫，得到化合物3，4-[(N，N′-1，1′-己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1-甲基吡咯-2，5-二酮(137mg，22%)，為紅紫色固體，M.Pt.＞320℃。
將含有3，4-[(N，N′-1，1′-己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1-甲基吡咯-2，5-二酮(137mg，322mmol)、乙醇(15ml)、5N KOH(5ml)和THF(2ml)的混合物在室溫下攪拌4小時(shí)。此時(shí)TLC分析表明原料已被消耗完。用水(15ml)稀釋混合物并在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上濃縮。冷卻混合物，用3N HCl酸化至pH1，用CH2Cl2(3×10ml)萃取。合并的有機(jī)萃取液用水充分洗滌，用無水MgSO4干燥并濃縮，得到紅紫色固體(116mg)，經(jīng)NMR分析，產(chǎn)物為4∶1所需酐和原料的混合物。該物不經(jīng)進(jìn)一步純化即直接用于下一步驟。
按照實(shí)施例1所述的同樣方法，在氮?dú)夥障?，?，1，1，3，3，3-六甲基二硅氮烷(0.59ml，2.62mmol)和CH3OH(0.05ml，1.31mmol)的混合物處理3，4-[(N，N′-1，1′-己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]呋喃-2，5-二酮(108mg，0.263mmol)的DMF(1.5ml)的溶液過夜。處理(EtOAc)后，粗產(chǎn)物進(jìn)行快速硅膠色譜純化(CH2Cl2-EtOAc，10∶1-5∶1，梯度洗脫)，得到兩種有色級(jí)分。洗脫出的第一種有色級(jí)分含有由上面反應(yīng)帶來的雜質(zhì)3，4-[(N，N′-1，1′-己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1-甲基吡咯-2，5-二酮，第二種有色級(jí)分含有所需產(chǎn)物，3，4-[(N，N′-1，1′-己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮，(56mg)。M.Pt.＞320℃。MS.
元素分析C26H23N3O2(0.3H2O)計(jì)算值C，76.26;H，5.66;N，10.26.
實(shí)測值C，75.21;H，5.65;N，10.05.
實(shí)施例293，4-[(N，N′-1，1′-(3″-(碳酸芐基酯)亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮向0℃的3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-(羥基)亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮(24mg，0.054mmol)的二氯甲烷溶液中加入二異丙基乙胺(10.6mg，0.081mmol)，接著加入氯甲酸芐酯(13.8mg，0.081mmol)。72小時(shí)后，用2.5N碳酸氫鈉終止反應(yīng)。除去有機(jī)層，用二氯甲烷萃取水層。合并有機(jī)層，用鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮得到油狀物，將其進(jìn)行反相HPLC純化(含有0.1% TFA的5%乙腈水溶液至100%乙腈，在C18柱上梯度洗脫)得到6mg標(biāo)題化合物。MS.
實(shí)施例30(±)-3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-(芐氧基亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮按照上面實(shí)施例所述的同樣方法，用氫化鈉(60%油分散液，117mg，2.93mmol)處理3，4-雙-(3′-吲哚基)-1-甲基吡咯-2，5-二酮(400mg，1.17mmol)的DMF(8ml)溶液，接著用(±)-3-芐氧基亞甲基1，6-二溴己烷的DMF(7ml)溶液處理。在50℃下加熱過夜后，經(jīng)處理的粗產(chǎn)物通過快速硅膠色譜純化，用CH2Cl2-己烷，1∶1-2∶1(梯度洗脫)洗脫，得到純的(±)-3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-(芐氧基亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1-甲基吡咯-2，5-二酮(149mg，23%)，為紫色固體。
將含有(±)-3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-芐氧基亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1-甲基吡咯-2，5-二酮(141mg，0.259mmol)、乙醇(15ml)和5N KOH(5ml)的混合物在室溫下攪拌3小時(shí)，此時(shí)TLC分析表明原料已消耗完。酸化并用CH2Cl2萃取后，粗產(chǎn)物(101mg)的TLC分析(CH2Cl2)表明有兩個(gè)點(diǎn)，分別對(duì)應(yīng)于原料和所需的酐(±)-3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-(芐氧基亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-呋喃-2，5-二酮。NMR分析粗略表明4∶1酐和原料的混合物。該產(chǎn)物不經(jīng)進(jìn)一步純化即直接用于下一步驟。
在25℃下，用1，1，1，3，3，3-六甲基二硅氮烷(0.41ml，1.80mmol)和CH3OH(0.036ml，0.90mmol)的混合物處理(±)-3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-芐氧基亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-呋喃-2，5-二酮(98mg，0.180mmol)的DMF(1ml)溶液過夜。將混合物處理(EtOAc)后，通過快速硅膠色譜純化，用CH2Cl2、CH2Cl2-EtOAc 10∶1(梯度洗脫)洗脫，得到30mg純的(±)-3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-(芐氧基)亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮。M.Pt.171-173℃。MS.
實(shí)施例313，4-[(N，N′-1，1′-(3″-(羥基)亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮在55℃氮?dú)夥障?，將含有雙(3，3′-吲哚基)]-1-(甲基)吡咯-2，5-二酮(3.41g，10.0mmol)和3-叔丁基二苯基甲硅烷氧基亞甲基-1，6-二溴己烷(5.64g，11.0mmol)和50ml DMF的混合物通過注射泵于30小時(shí)內(nèi)加到充分?jǐn)嚢璧奶妓徜C(11.2g，34.3mmol)的DMF(350ml)溶液中。加完后，在此溫度下將反應(yīng)混合物再加熱16小時(shí)。將冷卻的混合物傾入含有20ml 3N HCl的1.2l水中，用CH2Cl2(3×300ml)萃取。合并的有機(jī)萃取液用水和鹽水洗滌，然后干燥(MgSO4)并濃縮。殘余物通過3″×3″硅膠柱，用CHCl3洗脫。所得的粗產(chǎn)物通過快速硅膠色譜純化(CHCl3)，得到2.87g(41%)3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-叔丁基二苯基甲硅烷氧基亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(甲基)吡咯-2，5-二酮，為紅紫色固體，M.Pt.220-224℃。HRMS(C44H45N3SiO)計(jì)算值[M+1]692.3307;實(shí)測值692.3299。
將含有3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-叔丁基二苯基甲硅烷氧基亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(甲基)吡咯-2，5-二酮(1.55g，2.22mmol)、4N KOH(100ml)、THF(10ml)和95% EtOH(200ml)的混合物在90℃下加熱16小時(shí)。用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器除去大部分EtOH后，用6N HCl酸化混合物至pH1，用CH2Cl2(3×75ml)萃取。合并的有機(jī)萃取液用水和鹽水洗滌，用無水Na2SO4干燥。真空除去溶劑后，將殘余物溶于最少量的5%甲醇的CHCl3溶液中，然后加到3″×3″硅膠柱上，用CHCl3、接著用10%甲醇的CHCl3溶液洗脫，得到兩種級(jí)分;蒸發(fā)第二級(jí)分，得到676mg(69%)酐-醇，為紅紫色固體，TLC(Rf＝0.5，10%甲醇的CHCl3溶液)分析表明產(chǎn)物為純一物。該物不經(jīng)進(jìn)一步純化即直接用于下一步驟。
向上面酐(510mg，1.15mmol)的DMF(11ml)溶液中加入預(yù)先混合的含有1，1，1，3，3，3-六甲基二硅氮烷(5.14ml，23mmol)和CH3OH(0.45ml，11.5mmol)的溶液。將所得混合物在50℃、氮?dú)夥障录訜?4小時(shí)，將冷卻的反應(yīng)混合物傾入100ml水中。沉淀出的產(chǎn)物用水洗滌并干燥過夜，得到409mg 3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-羥基亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮，為紅紫色固體。HPLC(反相)分析表明產(chǎn)物的純度為93%，產(chǎn)物中混雜有具有類似Rf的未確定化合物。HRMS(C27H25N3O3)計(jì)算值439.1896，實(shí)測值439.1911。
實(shí)施例31r(R)-3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-(羥基亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮按照與上述實(shí)施例31相同的制備方法，由二溴化物(R)-3-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基亞甲基)-1，6-二溴己烷，通過將雙-(3，3′-吲哚基)]-1-(甲基)吡咯-2，5-二酮二烷基化、水解以及生成1H-吡咯-2，5-二酮，制備(R)-3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-羥基亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮，總產(chǎn)率為25%。M.Pt.＞300℃。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)1.05-2.25(m，7H)，4.04-4.45(m，6H)(m，8H)，7.08-7.88(m，10H).
實(shí)施例31s(S)-3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-羥基亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮按照與上述實(shí)施例31相同的制備方法，由二溴化物(S)-3-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基亞甲基)-1，6-二溴己烷，通過將雙-(3，3′-吲哚基)]-1-(甲基)吡咯-2，5-二酮二烷基化、水解以及生成1H-吡咯-2，5-二酮，制得(S)-3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-羥基亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮(4.5g)，總產(chǎn)率為39%。MS.
1H NMR(d6，DMSO)δ1.05-1.15(2H)，1.23-1.24(1H)，1.50-1.52(1H)，1.71(1H)，1.94(1H)，2.07-2.12(1H)，4.05-4.4(m，6H)，7.09-7.21(m，4H)，7.35(d，J＝15Hz，2H)，7.49(d，J＝9Hz，2H)，7.8(d，J＝9Hz，2H)，10.93(s，1H).
實(shí)施例32和333，4-[(N，N′-1，1′-(3″-氨基亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮，實(shí)施例32為TFA鹽，實(shí)施例33為HCl鹽在氮?dú)夥障?，向攪拌下的酐?，3-[(N，N′-1，1′-(3″-(羥基亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-呋喃-1，4-二酮(0.18g，0.41mmol)的無水二氯甲烷(10ml)溶液中加入三乙胺(0.10g，1.06mmol)和甲磺酰氯(0.11g，0.98mmol)。將所得溶液在室溫下攪拌30分鐘。真空除去溶劑。將殘余物溶于10ml無水二甲基甲酰胺中，然后加入疊氮化鈉(0.26g，4.1mmol)。將反應(yīng)混合物在50℃、氮?dú)夥障录訜?.5小時(shí)。冷卻的反應(yīng)混合物在0.2N HCl和乙酸乙酯間分配。合并的有機(jī)萃取液用硫酸鎂干燥，過濾并蒸發(fā)得到185mg疊氮化物，將其直接用于下面反應(yīng)。在氮?dú)夥障?，將疊氮化物粗品溶于二甲基甲酰胺(3ml)中，加入1，1，1，3，3，3-六甲基二硅氮烷(1.25g，7.75mmol)和甲醇(0.12g，3.87mmol)。將反應(yīng)混合物在50℃下加熱。12小時(shí)后，冷卻反應(yīng)混合物，用乙酸乙酯稀釋，用水、2N鹽酸洗滌。用乙酸乙酯(3×50ml)反萃取含水洗滌液。合并的有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并蒸發(fā)得到疊氮-酰亞胺，3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-疊氮基亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮(175mg)，為紅紫色固體。產(chǎn)物在Rainin DynamaxR-60 C18柱(21.4×250mm)上進(jìn)行色譜純化，用80%A(0.1% TFA和5%乙腈的水溶液)至100%B(純乙腈)的線性梯度于60分鐘內(nèi)以15ml/min洗脫，得到純凈的3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-疊氮基亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮，總產(chǎn)率為57%。MS.NMR.
向疊氮化物3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-疊氮基亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮(0.1g，0.21mmol)在乙酸乙酯(15ml)和乙醇(5ml)中的溶液中加入Lindlar催化劑(0.1g)。將反應(yīng)混合物在氫氣氛下(1ATM)、室溫下攪拌。12小時(shí)后，過濾除去催化劑，真空濃縮濾液。在Rainin DynamaxR-60 C18柱(21.4×250mm)上進(jìn)行反相制備HPLC純化，用80%A(0.1% TFA和5%乙腈的水溶液)至100% B(純乙腈)的線性梯度于60分鐘內(nèi)以15ml/min洗脫，得到伯胺的TFA鹽，3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-氨基亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮三氟乙酸鹽，為固體(80mg)，產(chǎn)率為63%。MS.
1H NMR(d6丙酮)δ0.77-0.78(m，1H)，1.0-1.1(m，1H)，1.27-1.34(m，1H)，1.43(m，1H)，1.52-1.56(m，4H)，1.60-1.1.68(m，1H)，1.90-1.94(m，1H)，3.17-3.21(m，1H)，3.35，3.38(m，1H)，3.64-3.67(m，1H)，3.75-3.82(m，2H)，6.61-6.72(m，4H)，6.824(d，J＝16Hz，2H)，6.936(t，J＝8.31Hz，2H)，7.397(t，J＝7.83Hz，2H)，9.3(s，1H).
13C NMR(d6丙酮)δ26.0，28.0，32.1，35.4，40.8，41.0，41.1，45.1，45.8，50.9，105.1，105.2，110.8，111.0，121.24，121.29，122.7，122.9，123.0，128.4，128.6，131.5，132.0，134.0，134.1，136.8，137.1，172.6，172.7，192.5 實(shí)施例343，4-[(N，N′-1，1′-(3″-(N-芐基氨基)亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮三氟乙酸鹽在氮?dú)夥障?，向攪拌下的伯?，4-[(N，N′-1，1′-(3″-氨基亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮(40mg，0.05mmol)的無水THF(2ml)溶液中加入苯甲醛(9.39mg，0.08mmol)。30分鐘后，加入三乙酰氧基硼氫化鈉(18.75mg，0.08mmol)。攪拌1小時(shí)后，用水稀釋反應(yīng)混合物，然后用乙酸乙酯(3×25ml)萃取。合并的有機(jī)萃取液用硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。在Rainin DynamaxR-60 C18柱(21.4×250mm)上進(jìn)行反相HPLC純化，用80%A(0.1% TFA和5%乙腈的水溶液)至100% B(純乙腈)的線性梯度于60分鐘內(nèi)以15ml/min洗脫，得到兩種不同的級(jí)分，一芐基化合物3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-(N-芐基氨基)亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮(16mg)，66%產(chǎn)率;二芐基氨基化合物，3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-(N，N-二芐基氨基)亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮(7mg)，20%產(chǎn)率。MS.
1H NMR(d6丙酮)δ1.1-1.3(m，1H)，1.5-1.6(m，1H)，1.71-1.77(m，1H)，1.93-2.10(m，3H)，2.5(m，1H)，3.1-3.2(m，1H)，3.37-3.41(m，1H)，4.13(t，J＝5.1Hz，2H)，4.28(t，J＝5.1Hz，2H)，4.36(d，J＝3.6Hz，2H)，7.13-7.24(m，4H)，7.33(d，J＝25Hz，2H)，7.39-7.51(m，7H)，7.89-7.96(m，2H)，9.76(s，1H).
13C NMR(d6丙酮)δ25.6，27.3，32.1，32.9，44.7，45.4，50.1，52.2，105.0，105.2，110.8，111.1，121.2，121.3，122.8，122.9，123.1，128.5，129.8，130.3，131.2，131.3，132.0，132.4，133.7，134.0，136.8，137.0，172.5，172.6
實(shí)施例353，4-[(N，N′-1，1′-(3″-(N，N-二芐基氨基)亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮三氟乙酸鹽按照類似于實(shí)施例34的方法，制得3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-(N，N-二芐基氨基)亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮。MS.
1H NMR(d6丙酮)δ0.2-0.3(m，1H)，0.6-0.9(m，4H)，1.2-1.3(m，1H)，1.50(d，J＝5.4Hz，2H)，2.27(m，1H)，3.3-3.8(m，8H)，6.6-6.9(m，18H)，7.35(dd，J＝7.5Hz，J＝24.9Hz，2H)，9.1(s，1H).
實(shí)施例36r(R)-3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-(N-吡咯烷子基)亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮鹽酸鹽將攪拌著的甲磺酸酯(R)-3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-(甲磺酰氧基)亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮(202mg)和吡咯烷(1.5ml)在THF(15ml)中的混合物在50℃下加熱，直至TLC表明原料已用完(16小時(shí))。加入EtOAc(30ml)。用每份10ml的5% NaHCO3、水和鹽水洗滌有機(jī)相。經(jīng)濃縮得到深紅色殘余物，將其進(jìn)行制備HPLC純化(Waters反相，0.1% TFA和5% CH3CN的水溶液-100% CH3CN梯度洗脫)，得到純的(R)-3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-N-吡咯烷子基亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮的TFA鹽。按同樣的方法將其轉(zhuǎn)化為HCl鹽，得到(R)-3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-N-吡咯烷子基亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮鹽酸鹽(42mg)，為淺紅色固體。M.Pt，220℃(分解)。HRMS(C31H33N4O2)計(jì)算值[M+1]493.2604，實(shí)測值493.2605。
實(shí)施例373，4-[(N，N′-1，1′-(3″-甲氧基亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮用氟化四正丁基銨的THF溶液(1M，2.0ml，2.0mmol)處理3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-叔丁基二苯基甲硅烷氧基亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(甲基)吡咯-2，5-二酮(1.25g，1.81mmol)的THF(20ml)溶液。將混合物在25℃下攪拌1小時(shí)。用1N HCl(5ml)處理反應(yīng)混合物，并用EtOAc(75ml)稀釋。用水和鹽水洗滌后，將有機(jī)層干燥(MgSO4)并濃縮。殘余物通過快速硅膠色譜純化，用3-5%甲醇的THF/己烷(1∶1)溶液洗脫，得到醇，3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-羥基亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(甲基)吡咯-2，5-二酮509mg(62%)，為紅紫色固體。將該產(chǎn)物直接用于下一步驟。在0℃下，于5分鐘內(nèi)攪拌著的含有上面醇(285mg，0.63mmol)和47%含水四氟硼酸(170mg，0.95mmol)的CH2Cl2(6ml)溶液中滴加三甲基甲硅烷基重氮甲烷(Aldrich，2.0M己烷，0.47ml，0.95mmol)。將所得混合物在0℃下攪拌2小時(shí)，然后在25℃下攪拌4小時(shí)。反應(yīng)混合物的TLC分析表明有大量未反應(yīng)的原料。冷卻混合物，再加入等量的四氟硼酸和三甲基甲硅烷基重氮甲烷。將混合物在0℃下攪拌2小時(shí)，然后在25℃下攪拌6小時(shí)，用CH2Cl2(20ml)稀釋，用2N HCl(10ml)和水(10ml)洗滌。將有機(jī)層干燥(MgSO4)并濃縮。將殘余物加在3″×3″硅膠柱上，用CH2Cl2洗脫，得到甲基醚，3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-甲氧基亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(甲基)吡咯-2，5-二酮，114mg(39%)，為紅紫色固體，M.Pt.234-236℃。NMR.
HRMS(C29H29N3O3)計(jì)算值467.2208，實(shí)測值467.2210。
將3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-甲氧基亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(甲基)吡咯-2，5-二酮(110mg，0.243mmol)和5N KOH(8ml)在含有1ml THF的15ml EtOH中的混合物在90℃下加熱24小時(shí)。減壓下除去大部分乙醇后，用6N HCl酸化混合物至pH1，并用CH2Cl2(3×15ml)萃取。合并的有機(jī)萃取液用稀NaHCO3水溶液和水洗滌，然后用無水MgSO4干燥。真空除去溶劑后，將粗產(chǎn)物加在2″×2″硅膠柱上，用CH2Cl2洗脫，得到酐。將其直接用于下面反應(yīng)。
向上面酐(76mg，0.17mmol)的DMF(1.5ml)溶液中加入1，1，1，3，3，3-六甲基二硅氮烷(0.75ml，3.34mmol)和CH3OH(0.07ml，1.67mmol)的溶液(已預(yù)先混合5分鐘)。將反應(yīng)混合物在25℃下攪拌1小時(shí)，然后在50℃下加熱20小時(shí)，這時(shí)TLC分析表明反應(yīng)已完成。按前面所述的方法處理(EtOAc)冷卻的反應(yīng)混合物。粗產(chǎn)物通過快速硅膠色譜純化(CH2Cl2-4% EtOAc的CH2Cl2溶液，梯度洗脫)，得到42mg(55%)3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-甲氧基亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮，為暗紅色固體。用丙酮-水重結(jié)晶，得到28mg分析純的3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-甲氧基亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮，為紅紫色固體。M.Pt.272-274℃。
元素分析C28H27N3O3(0.1H2O)計(jì)算值C，73.86;H，6.02;N，9.23.
實(shí)測值C，73.51;H，5.92;N，8.99.

實(shí)施例383，4-[(N，N′-1，1′-(3″-(乙酰氧基)亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮將乙酐(0.064ml，0.68mmol)加到攪拌著的酐2，3-[(N，N′-1，1′-(3″-(羥基亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-呋喃-1，4-二酮(1.49mg，0.34mmol)、4-二甲氨基吡啶(27mg，0.22mmol)、吡啶(0.75ml)和THF(1.5ml)的混合物中。將反應(yīng)混合物在25℃、氮?dú)夥障聰嚢?6小時(shí)。混合物用EtOAc(20ml)稀釋，用2N HCl(2×10ml)和水(2×10ml)洗滌，用無水MgSO4干燥。減壓下蒸發(fā)溶劑后，粗產(chǎn)物通過短硅膠柱進(jìn)行色譜純化，用CH2Cl2洗脫，得到O-乙酸酯酐，2，3-[(N，N′-1，1′-(3″-(乙酰氧基亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-呋喃-1，4-二酮111mg(68%)，為紅紫色固體，M.Pt.252-254℃。
向攪拌著的O-乙酸酯酐2，3-[(N，N′-1，1′-(3″-(乙酰氧基亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-呋喃-1，4-二酮(103mg，0.22mmol)的DMF(2ml)溶液中加入含有1，1，1，3，3，3-六甲基二硅氮烷(0.48ml，2.2mmol)和CH3OH(0.043ml，1.1mmol)的溶液(已預(yù)先混合5分鐘)。按前面所述的方法處理(EtOAc)反應(yīng)混合物，粗產(chǎn)物通過快速硅膠色譜純化(梯度洗脫CH2Cl2-5% EtOAc的CH2Cl2溶液)，得到O-乙?；R來酰亞胺，3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-(乙酰氧基)亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮74mg，(72%)，為深紅色固體，TLC分析(CH2Cl2)表明為純一物。用丙酮-水重結(jié)晶，得到標(biāo)題化合物，為紅色固體，M.Pt.250-252℃。
元素分析C29H27N3O4(0.1H2O)計(jì)算值C，72.06;H，5.67;N，8.69.
實(shí)測值C，71.72;H，5.67;N，8.29.
按照類似于本文所述實(shí)施例的方法制備下列化合物并進(jìn)一步說明本發(fā)明的化合物。下列實(shí)施例中，化合物的結(jié)構(gòu)通過NMR、MS和/或元素分析來確證。

實(shí)施例40r(R)-3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-(N，N-二甲基氨基)亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮鹽酸鹽在0℃下，將甲磺酸酐(94mg，0.54mmol)于10分鐘內(nèi)加到攪拌著的手性醇(R)-3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-(羥基)亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮(200mg，0.45mmol)和吡啶(0.11ml，1.35mmol)的CH2Cl2(5ml)溶液中。將反應(yīng)混合物在25℃下攪拌4小時(shí)。加入CH2Cl2(20ml)，混合物用每份10ml 3% HCl、水和鹽水分批洗滌，用無水MgSO4干燥。真空除去溶劑，得到甲磺酸酯粗品(205mg)，TLC分析(1%甲醇的CHCl3溶液)表明產(chǎn)物為純一的。該產(chǎn)物直接用于下一步驟。
向上面甲磺酸酯(205mg)的THF(10ml)溶液中加入40%二甲胺(2ml)水溶液，將反應(yīng)混合物在50℃下加熱36小時(shí)。減壓下除去THF后，向殘余物中加入CH2Cl2(20ml)。用5%NaHCO3水溶液、水和鹽水洗滌混合物，并用無水MgSO4干燥。經(jīng)濃縮得到(R)-3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-(N，N-二甲基胺)亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮粗品(158mg)，為紅色固體。將其通過制備HPLC純化(Waters反相，0.1%TFA和5%CH3CN的水溶液-100% CH3CN，梯度洗脫)，得到胺TFA鹽，將其溶于CH2Cl2中，用稀KOH水溶液使其轉(zhuǎn)化為游離堿。用MgSO4干燥有機(jī)相(15分鐘)后，蒸發(fā)溶劑，在氮?dú)夥障聦⒂坞x的胺(60mg)溶于1∶1甲醇/THF(5ml)中，冷卻至0℃，用1N無水HCl的乙醚溶液緩慢酸化至pH4-5(外濕pH試紙)，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下過濾沉淀的鹽并用無水乙醚洗滌，然后用CaSO4真空干燥過夜。得到二甲胺-HCl鹽，(R)-3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-(N，N-二甲基胺)亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮鹽酸鹽(43mg)，為淺紅色固體，M.Pt.230℃(分解)。MS.
1H NMR(300 MHz，丙酮-d6)0.9-3.5(m，7H)，3.20-3.42(m，8H)，4.05-4.18(m，4H)，7.02-7.80(m，10H)，10.94(s，1H).
實(shí)施例40s(S)-3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-(N，N-二甲基胺)亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮鹽酸鹽按照與上述實(shí)施例40r相同的制備方法，由醇(S)-3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-羥基亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮通過生成甲磺酸酯并用二甲胺置換，制得(S)-3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-(N，N-二甲基胺)亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮鹽酸鹽(90mg)，總產(chǎn)率為27%。MS.
1NMR(d6DMSO)δ0.92(s 寬，1H)，1.35(s 寬，1H)，1.60(s 寬，2H)，1.85(s 寬，1H)，2.37-2.42(m，2H)，2.91-3.05(m，2H)，4.13(s 寬，2H)，4.23(s 寬，2H)，7.11-7.23(m，4H)，7.34(d，J＝20Hz，2H)，7.50(dd，J＝8.1Hz，J＝12.6Hz，2H)，7.79(d，J＝8Hz，2H)，9.92(s 寬，1H)，10.98(s，1H)
實(shí)施例413，4-[(N，N′-1，1′-(3″-(N-咪唑)亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮在25℃、氮?dú)夥障?，將甲磺酰?0.025ml，0.32mmol)滴加到攪拌著的含有3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-(羥基)亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮(100mg，0.23mmol)和三乙胺(0.05ml，0.36mmol)的無水CHCl3溶液中。攪拌20分鐘后，反應(yīng)混合物用CHCl3(15ml)稀釋，用水、鹽水洗滌，干燥過濾并濃縮。紅色殘余物通過短硅膠柱進(jìn)行色譜純化，用CHCl3、接著用10% EtOAc的CHCl3溶液洗脫，得到3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-(甲磺酰氧基)亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮53mg，為紅色固體，TLC(5% EtOAc的CH2Cl2溶液)分析表明產(chǎn)物為純一的。在氮?dú)夥障拢驍嚢柚?，4-[(N，N′-1，1′-(3″-(甲磺酰氧基)亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮(49mg，0.095mmol)的DMF(0.75ml)溶液中滴加咪唑鈉鹽的DMF溶液(通過將60%NaH(8.7mg，0.22mmol)加到咪唑(16mg，0.24mmol)的DMF(0.5ml)溶液中來制備)。將反應(yīng)混合物在25℃下攪拌15分鐘，然后在50℃下加熱30分鐘。用含有3%甲醇的25ml CH2Cl2稀釋反應(yīng)混合物。用每份10ml水和鹽水洗滌混合物，用無水Na2SO4干燥。減壓下蒸發(fā)溶劑后，將粗產(chǎn)物加在3″×3″硅膠柱上，用CH2Cl2、接著用含有1%三乙胺的5%甲醇的CH2Cl2溶液洗脫，得到3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-(N-咪唑)亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮21.5mg(46%)，為紅色固體。將產(chǎn)物進(jìn)行反相HPLC純化(梯度洗脫，含有0.1% TFA的5%CH3CN的水溶液-CH3CN)，得到分析純的3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-(N-咪唑)亞甲基)己烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮(12.4mg)，為紅色固體，M.Pt.216-266℃。NMR.HRMS(C30H27N5O2)計(jì)算值[M+1]490.2244;
實(shí)測值490.2242.
按照類似于本文所述實(shí)施例的方法制備下列化合物并進(jìn)一步說明本發(fā)明的化合物。在下列實(shí)施例中，化合物的結(jié)構(gòu)通過NMR、MS和/或元素分析來確證。

實(shí)施例n nl O R42 3 3 CH H43 2 2 CH H44 3 4 CH H45 3 3 CH NH246 3 3 CH NHCOCH347 3 3 CH NHCH2C6H548 3 3 C (-OCH2CH2O-)49 3 3 C =0 實(shí)施例503，4-[(N，N′-1，1′-(丙硫基丙基))-雙(3，3′-吲哚基)]-1H-吡咯-2，5-二酮向0℃攪拌著的N-(3-乙酰氧基丙基)吲哚(102g，0.47mol)的無水CH2Cl2(1.0l)溶液中滴加草酰氯(43.04ml，0.494mol，1.05eg)。15分鐘后，撤去冰浴。使反應(yīng)混合物升至室溫并攪拌3小時(shí)。真空除去揮發(fā)物，得到洋紅色固體，將其在氮?dú)夥障略偃苡跓o水CH2Cl2(1.0l)中。在劇烈攪拌下，加入N-叔丁氧羰基吲哚-3-乙酸(129.25g，0.47mmol)，接著迅速加入三乙胺(130.6ml，0.94mol，2eg)。16小時(shí)后，濃縮反應(yīng)混合物，通過快速柱色譜純化，用3∶1己烷/乙酸乙酯洗脫。濃縮主要的有色級(jí)分，得到酐(101g，40%產(chǎn)率)2-[1-(3-乙酰氧基丙基)-3-吲哚基]-3-[1-叔丁氧羰基-3-吲哚基]呋喃-1，4-二酮，為紅色晶狀固體。MS.
在攪拌下，向BOC保護(hù)的酐(7.4g，14mmol)中加入含有乙硫醇(1ml，14mmol)的三氟乙酸(27ml，350mmol)。1小時(shí)后，將反應(yīng)混合物在CH2Cl2和飽和NaHCO3間分配。有機(jī)層用鹽水洗滌，用Na2SO4干燥并過濾。濃縮濾液，得到脫保護(hù)的酐粗品，為紅色半固體。將殘余物加入短硅膠柱中，用己烷、然后用CH2Cl2洗脫。用乙酸乙酯從硅膠上洗脫出有色帶并真空干燥，得到純的脫保護(hù)的酐，2-[1-(乙酰氧基丙基)-3-吲哚基]-3-(3-吲哚基)呋喃-1，4-二酮(5.7g，95%)產(chǎn)率)，為紅色固體。MS.
在室溫下，向攪拌著的脫保護(hù)的酐(3.0g，7mmol)的無水DMF(125ml)溶液中加入NaH(420mg，10.5mmol，60%礦物油分散液)。馬上觀察到顏色從嫩橙色變?yōu)樽仙?0分鐘后，迅速加入3當(dāng)量的乙酸3-溴丙酯。將反應(yīng)混合物加熱至75℃，逐漸恢復(fù)至橙色。6小時(shí)后，真空除去DMF。將殘余物加在快速硅膠色譜柱上，用3∶2己烷/乙酸乙酯洗脫。收集主要的紅色帶，除去溶劑，得到烷基化的酐，2，3-雙[1-(3-乙酰氧基丙基)-3-吲哚基]呋喃-1，4-二酮(1.32g，36%)，為紅色固體。MS.
在攪拌下，將2，3-雙[1-(3-乙酰氧基丙基)-3-吲哚基]呋喃-1，4-二酮(1.32g，2.52mmol)懸浮于無水乙醇(125ml)中，用5N KOH(125ml)處理。攪拌16小時(shí)后，將反應(yīng)混合物濃縮至126ml。緩慢地酸化殘余物(5N HCl)，直至紅色固體沉淀。過濾沉淀并在60℃下真空干燥，得到醇酐1.1g(99%)，為紅色粉狀物。
在氮?dú)夥?、攪拌下，將醇?1.1g，2.47mmol)溶于無水DMF(30ml)中。加入預(yù)先混合的1，1，1，3，3，3-六甲基二硅氮烷(5.22ml，24.7mmol，10eg)和甲醇(0.50ml，12.4mmol，5eg)的溶液。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌16小時(shí)。真空除去DMF。向該殘余物中加入丙酮(100ml)和過量的CsF(大約500mg)。攪拌4小時(shí)后，濃縮反應(yīng)混合物。將殘余物在乙酸乙酯和水間分配。有機(jī)層用1N HCl(5×)、鹽水(2×)洗滌，用Na2SO4干燥并過濾。濃縮濾液，得到雙吲哚基馬來酰亞胺，3，4-雙[1-(3-羥基丙基)-3-吲哚基]-1H-吡咯-2，5-二酮1.0g(91%產(chǎn)率)，為紅色粉末，兩步的總產(chǎn)率為90%。MS.
在室溫、氮?dú)夥障?，?，4-雙[1-(3-羥基丙基)-3-吲哚基]-1H-吡咯-2，5-二酮(1.0g，2.25mmol)溶于無水CH2Cl2(250ml)中。然后將CBr4(2.09g，6.3mmol，2.8eg)和三苯膦(2.83g，10.8mmol，4.8eq)一起加到反應(yīng)容器中。將混合物攪拌16小時(shí)。濃縮反應(yīng)混合物粗品，通過快速硅膠柱色譜純化，用7∶3己烷/乙酸乙酯洗脫。洗出的所需產(chǎn)物主要為紅色級(jí)分，除去該級(jí)分中的溶劑，得到二溴化合物，3，4-雙[1-(3-溴丙基)-3-吲哚基]-1H-吡咯-2，5-二酮876mg(68%產(chǎn)率)，為紅色粉末。
在室溫、攪拌下將二溴化合物(47.8mg，0.084mmol)溶于丙酮中，加入過量的硫化鈉九水合物(229mg，0.95mmol，11.3eg)。將多相混合物攪拌過夜。然后真空除去丙酮。將殘余物在水和CH2Cl2間分配。有機(jī)層用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥并濃縮，得到35.5mg(94%產(chǎn)率)標(biāo)題產(chǎn)物，為紅橙色固體。MS.
實(shí)施例513，4-[(N，N′-1，1′-(3″-(羥基)亞甲基)戊烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮在55℃、氮?dú)夥詹⑶覄×覕嚢柘?，?，5-二碘-3-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基亞甲基)戊烷(7.3g，12mmol)和雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮(4.21g，12mmol)的無水DMF(35ml)溶液通過注射泵于48小時(shí)內(nèi)加到Cs2CO3(16.06g，49.3mmol)的無水DMF(1l)懸浮液中。再過2小時(shí)后，真空濃縮反應(yīng)混合物，將殘余物溶于CH2Cl2中，用1N HCl、鹽水洗滌，干燥并真空濃縮，得到紫色油狀物。油狀物通過硅膠塞用4∶1己烷/乙酸乙酯洗脫。濃縮洗脫液得到大環(huán)化合物，3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-叔丁基二苯基甲硅烷氧基亞甲基)戊基)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(甲基)吡咯-2，5-二酮4.5g(55%產(chǎn)率)，為洋紅色固體。
向3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-叔丁基二苯基甲硅烷氧基亞甲基)戊基)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(甲基)吡咯-2，5-二酮(4.2g，6.2mmol)的乙醇(300ml)懸浮液中加入5N KOH(300ml)。攪拌下將反應(yīng)混合物回流(86℃)48小時(shí)，冷卻至室溫，真空除去乙醇。用5N HCl(325ml)酸化濃縮物至pH1，用乙酸乙酯萃取，用鹽水(2×)洗滌，干燥并濃縮，得到殘余物酐，3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-羥基亞甲基)戊烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-呋喃-2，5-二酮2.6g(100%產(chǎn)率)。
向酐3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-羥基亞甲基)戊基)-雙(3，3′-吲哚基)]-呋喃-2，5-二酮(2.6g，6.2mmol)的無水DMF(500ml)溶液中加入甲醇(1.25ml，31mmol)和1，1，1，3，3，3-六甲基二硅氮烷(13.1ml，62mmol)的溶液。加熱(55℃)36小時(shí)后，真空濃縮反應(yīng)混合物，用乙酸乙酯稀釋，用1N HCl洗滌。酸性洗滌液含有一些固體，用氯仿反萃取。將合并的有機(jī)層干燥并濃縮，得到紫色殘余物。將殘余物加在短硅膠柱上，用2-10% MeCN/CH2Cl2洗脫。真空濃縮含有主要產(chǎn)物的級(jí)分，得到標(biāo)題的醇，3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-羥基亞甲基)戊基)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮(650mg，25%)，為洋紅色固體。MS.
1H NMR(DMSO-d6)δ0.7(m，1H);1.48(m，2H);1.82(m，2H);3.19(dd，2H);4.16(m，4H);4.4(t，1H);7.05(t，2H);7.16(t，2H);7.17(s，2H);7.46(d，2H);7.65(d，2H);10.96(s，1H).

實(shí)施例523，4-[(N，N′-1，1′-(3″-(甲磺酰氧基)亞甲基)戊-1″，5″-基)雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮向3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-羥基亞甲基)戊-1″，5″-基)雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮(334120)(650mg，1.5mmol)的無水CH2Cl2(80ml)溶液中加入甲磺酸酐(400mg，2.29mmol)，接著加入過量的吡啶(370ml，4.58mmol)。在室溫下16小時(shí)后，將反應(yīng)混合物直接加到短硅膠柱上，用0-7%MeCN/CH2Cl2洗脫。真空濃縮有色級(jí)分，得到甲磺酸酯，3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-(甲磺酰氧基)亞甲基)戊-1″，5″-基)雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮501mg(67%產(chǎn)率)，為紫色固體。MS.
1H NMR(DMSO-d6)δ0.89(m，1H);1.61(m，2H);1.82(m，2H);2.99(s，3H);4.02(d，2H);4.22(m，4H);7.06(t，2H);7.17(t，2H);7.17(s，2H);7.54(d，2H);7.63(d，2H);10.98(s，1H).
實(shí)施例533，4-[(N，N′-1，1′-(3″-(氨基亞甲基)戊-1″，5″-基)雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮鹽酸鹽向含有甲磺酸酯3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-甲磺酰氧基)亞甲基)戊-1″，5″-基)雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮(250mg，0.5mmol)的THF(20ml)溶液的封管反應(yīng)器中加入NH4OH(33%水溶液，10ml)，封閉反應(yīng)管并加熱(60℃)。48小時(shí)后，冷卻反應(yīng)混合物，通過硅膠塞用乙酸乙酯、接著用丙酮洗脫，真空濃縮丙酮級(jí)分，得到紅色固體。將一部分殘余物用反相硅膠過濾HPLC純化(85% MeCN/水，0.01% TFA)。收集純級(jí)分并濃縮得到紅色固體。然后將固體在乙酸乙酯/0.1N NaOH間分配。濃縮有機(jī)層，得到游離堿殘余物。將殘余物溶于甲醇(2ml)中，用HCl(2ml，1.0M的乙醚溶液)處理1小時(shí)。真空濃縮反應(yīng)混合物，得到標(biāo)題化合物28.5mg(13%)，為洋紅色固體，HPLC分析其純度＞95%。MS.
1H NMR(DMSO-d6)δ1.17(m，1H);1.5-1.63(m，2H);1.8-1.95(m，2H);2.73(m，2H);4.18(m，4H);7.12(t，2H);7.15(s，2H);7.23(t，2H);7.56(d，2H);7.75(d，2H);7.8(br，3H);11.01(s，1H).
實(shí)施例543，4-[(N，N′-1，1′-(3″-(N，N-(二甲基氨基)亞甲基)戊基)雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮鹽酸鹽通過用二甲胺(40%水溶液，5ml)置換甲磺酸酯3，4-[(N，N′-1，1′-(3″-(甲磺酰氧基)亞甲基)戊基)雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮(110mg，0.2mmol)，接著轉(zhuǎn)化為鹽酸鹽，制得標(biāo)題的鹽酸鹽化合物(28mg，26%產(chǎn)率)。MS.
1H NMR(DMSO-d6)δ1.17(m，1H);1.5-1.63(m，2H);1.8-1.95(m，2H);2.73(m，2H);4.18(m，4H);7.12(t，2H);7.15(s，2H);7.23(t，2H);7.56(d，2H);7.75(d，2H);7.8(br，3H);11.01(s，1H).
按照類似的方法制備下列化合物并進(jìn)一步說明本發(fā)明的化合物
實(shí)施例nn1WR55 3 2 O =CHCH2NHCH2C6H556 3 2 O =CHCH2OCONH(C6H5)57 3 2 O =CHCH2NHCOCH358 3 2 O =CHCH2NHSO2C6H559 3 2 O =CHCH2CH2OH60 3 2 O =CHCH2CH2NH261 2 2 O =CHCH2OCONH(C6H5)62 2 2 O =CHCH2CH2OH63 2 2 O =CHCH2CH2NH264 2 2 CH =CHCH2NHCH365 2 2 CH =CHCH2NHSO2C6H566 2 2 CH =CHCH2CH2OH67 2 2 CH =CHCH2CH2NHCH2C6H568 2 2 CH =CHCH2CH2NH269 2 2 CH =CHCH2CH2OCONH(C6H5)70 2 2 CH =CHCH2CH2NHSO2CH371 2 2 CH =CHCH2CH2N(CH3)272 2 2 CH =CHCH2CH2NHCH373 2 2 CH =CHCH2OCH2CH2NH274 2 2 -OCH2- =CHCH2NH275 2 2 -OCH2- =CHCH2NHCH376 2 2 -OCH2- =CHCH2NHCH2C6H577 2 2 -OCH2- =CHCH2OCONH(C6H5)

實(shí)施例 R1R1aR1bR1c88 H CH3H H89 OCH3H H H90 H CH3Cl H91 H NO2H H92 CF3H H H93 OH H CH3H94 N(CH3)2H H H 實(shí)施例nn1QR9533S=O96 3 3 S (=O)29733O---9833CH-OH99 3 3 CH OCONHC6H510033NH
正如前面所說明的，本發(fā)明的化合物是有效的蛋白激酶C抑制劑。這些化合物對(duì)蛋白激酶C的選擇性高于其他激酶。
用鈣調(diào)節(jié)蛋白鈣(Calcium Calmodulin)依賴性蛋白激酶試驗(yàn)、酪蛋白激酶Ⅱ試驗(yàn)、cAMP依賴性蛋白激酶催化亞單元試驗(yàn)和蛋白酪氨酸激酶試驗(yàn)測定本發(fā)明化合物選擇性抑制蛋白激酶C的能力。
鈣調(diào)節(jié)蛋白鈣依賴性蛋白激酶試驗(yàn)(CaM)鈣調(diào)節(jié)蛋白鈣依賴性蛋白激酶試驗(yàn)被描述在Journal of Neuroscience，3818-831(1983)中，試驗(yàn)成分總體積為250μl55mM HEPES(4-(2-羥基乙基)-1-(哌嗪乙磺酸)，pH7.5，2.75mM二硫蘇糖醇，2.2mM EGTA(亞乙基雙(氧亞乙基次氮基)四乙酸，用于空白緩沖液)，1.1mM 氯化鈣(Sigma，St.Louis，Missouri)(用于對(duì)照緩沖液)，10mM氯化鎂(Sigma，St.Louis，Missouri)，200μg/ml組蛋白型HL(Worthington)，10μlDMSO或DMSO/抑制劑和30μM(γ-32P)ATP(DuPont)。通過加入鈣調(diào)節(jié)蛋白鈣依賴性蛋白激酶(從大鼠腦勻漿中分離出來)開始反應(yīng)，在室溫下保溫10分鐘，通過加入0.5ml冰冷卻的三氯乙酸(Amresco)、接著加入100μl 1mg/ml牛血清白蛋白(Sigma，St.Louis，Missouri)停止反應(yīng)。用玻璃纖維過濾器真空過濾收集沉淀，并用β閃爍計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)定量。
緩沖液成分對(duì)照緩沖液空白緩沖液200mM HEPES,pH7.53125μl625μl50mM DTT625μl125μl組蛋白1250μl250μl100mM鈣125μl----100mM EGTA----50μlDI水2375μl450μl試驗(yàn)成分165μl緩沖液25μl鈣調(diào)節(jié)蛋白(250μg/ml)10μlDMSO或DMSO/抑制劑25μl激酶25μlAT 32P酪蛋白激酶Ⅱ試驗(yàn)(CK-Ⅱ)酪蛋白激酶Ⅱ試驗(yàn)被描述在Neurochem.Res.，13829-836(1988)中。試驗(yàn)成分總體積為250μl20mM Tris-HCl，pH7.5，5mM氟化鈉，50mg/ml酪蛋白(Sigma，St.Louis，Missouri)，10mM氯化鎂(Sigma，St.Louis，Missouri)，10μlDMSO或DMSO/抑制劑和30μM(γ-32P)ATP(DuPont)。通過加入酪蛋白激酶Ⅱ(從大鼠腦勻漿中分離出來)開始反應(yīng)，在室溫下保溫10分鐘，通過加入0.5ml冰冷卻的三氯乙酸(Amresco)、接著加入100μl1mg/ml牛血清白蛋白(Sigma，St.Louis，Missouri)停止反應(yīng)。用玻璃纖維過濾器真空過濾收集沉淀，并用β閃爍計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)定量。依次加入的試驗(yàn)成分175μl緩沖液，10μl DMSO或DMSO/抑制劑25μl AT32P在300μM氯化鎂中40μl 酶(未稀釋)緩沖液制備如下(最終體積＝3.5ml20次試驗(yàn)的量)各為500μl200mM Tris-HCl，pH7.550mM 氟化鈉50mg/ml酪蛋白總體積 (+2ml DI 水)/(3.5ml)cAMP依賴性蛋白激酶催化亞單元試驗(yàn)(PKA)試驗(yàn)成分總體積為250μl20mM HEPES(Sigma，St.Louis，Missouri)緩沖液，pH7.5，200μg/ml組蛋白型HL(Worthington)，10mM氯化鎂(Sigma，St.Louis，Missouri)，10μl DMSO或DMSO/抑制劑和30μM(γ-32P)ATP(DuPont)。通過加入牛心cAMP依賴性激酶催化亞單元(Sigma，St.Louis，Missouri)開始反應(yīng)，在30℃下保溫10分鐘，通過加入0.5ml冰冷卻的三氯乙酸(Amresco)、接著加入100μl 1mg/ml牛血清白蛋白(Sigma)停止反應(yīng)。用TOMTECTM玻璃纖維過濾器真空過濾收集沉淀，并用β閃爍計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)定量。該試驗(yàn)方法與蛋白激酶C(PKC)酶試驗(yàn)相同，只是在該試驗(yàn)中不使用磷脂或二?；视停医M蛋白底物對(duì)于cAMP依賴性催化亞單元酶是特異性的。
蛋白酪氨酸激酶試驗(yàn)(src)試驗(yàn)成分如下10μl Raytide10μl激酶4μlDMSO或DMSO/抑制劑6μl200mM HEPES，pH7.510μl AT 32P該試驗(yàn)被描述在Onogene Science，Inc.Cat.＃PK02和PK03(1990)中。
令人驚奇的是，本發(fā)明化合物也是同功酶選擇性抑制劑，即這些化合物選擇性抑制蛋白激酶Cβ-1和β-2同功酶。用PKC酶試驗(yàn)測定該同功酶選擇性。
PKC酶試驗(yàn)PKC酶＝α、βⅠ、βⅡ、γ、δ、ε、η、ξ。
試驗(yàn)成分總體積為250μl，如下所述由下列成分組成的泡120μg/ml磷脂酰絲氨酸(Avanti Polar Lipids)和活化酶使其在20mM HEPES緩沖液(Sigma，St.Louis，Missouri)(pH7.5)中達(dá)到最大活性的足量的二?；视?Avanti Polar Lipids)，940μM氯化鈣(Sigma，St.Louis，Missouri)僅用于測定α、β-1、β-2和γ酶，1mM EGTA用于測定所有酶，10mM氯化鎂(Sigma，St.Louis，Missouri)和30μM(γ-32P)ATP(DuPont)。對(duì)于所有的酶，均可使用組蛋白型HL(Worthington)或髓磷脂基蛋白作為底物。通過加入蛋白激酶C酶開始試驗(yàn)，在30℃下保溫10分鐘，通過加入0.5ml冷卻的三氯乙酸(Amresco)、接著加入100μl 1mg/ml牛血清白蛋白(Sigma，St.Louis，Missouri)停止反應(yīng)。用TOMTECTM過濾系統(tǒng)在玻璃纖維過濾器上真空過濾收集沉淀，并用β閃爍計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)定量。
表1說明了在上面試驗(yàn)中代表性化合物的PKC選擇性。
表1IC50(μM)實(shí)施例PKC-αPKC-β1PKC-β2PKACaMCK-IIsrc110.050.04NANA>100NA240.40.2>100>100>100>10030.30.030.02>1003>100>10040.30.020.008NA3>100374s1.30.0480.033>1002.5>100634r0.300.0050.021>1000.69>1003350.280.0120.005>1004.0>100215s0.360.00470.0059>1008>100>1005r0.40.010.01>1005>1006364.20.0430.035NANANANA7>5.00.150.18NANANANA82.50.0370.032NANANANA93.00.350.16>10026>100581150.30.1>10020>100>10012190.60.5>10093>100NA13>5.01.90.94NANANANA15>5.02.90.83NANANANA16>5.03.22.3NANANANA
17s0.24<0.005<0.0050.162.2>100NA18s6.40.380.30>1004.4>100>10018r3.40.0830.087>1008.8>100NA19r0.480.0320.030>1002.2>100>10020r0.890.040.03>1007.3>1007420s30.10.05>1006.7>1001621r680.180.05>10056>100>10021s>5.00.170.044NANANANA23s1.80.300.24NANANANA24s3.50.490.38NANANANA25r940.0430.12>10022>100NA272.20.0490.026NANANANA2810.070.08NA2>100>10029>1000.70.8NANANANA30>10012>100>10>10>100310.30.020.03>1000.47>100>10031r0.240.0190.008NANANANA320.10.010.008>1000.9>10072330.40.050.04NA0.6>100613410.10.1NA4>100>10035932NA82>100>10036r0.450.0050.014>1007.1>10061370.70.050.04>1005>100>1003840.20.1>1009>100>10039310.40.3>100>100>100>100400.60.050.03>1005>1004.440s0.40.030.02>10041>100NA40r0.300.010.01>1008.0>10071410.30.030.03NA3>1009142>1000.50.6>100>100>100>100430.40.040.03NA0.6>100>100
44>10022NANANANA4530.10.1>10039>100>1254630.040.04>10063>100>1004720.070.06>10070>100>12548>1000.50.3>100>100>100>10049100.60.4>100>100>100>10051490.50.5NANANANA540.160.0050.004NANANANA55>5.00.410.38NANANANANA-沒有得到數(shù)據(jù)本發(fā)明化合物抑制蛋白激酶C的IC50值低于100μM。另外，本發(fā)明化合物能選擇性地抑制蛋白激酶C β-1和β-2同功酶，且對(duì)于這些同功酶的IC50值低于10μM。
作為蛋白激酶C抑制劑，本發(fā)明化合物可用于治療在病理學(xué)上蛋白激酶C起作用的疾病。在本領(lǐng)域已知的疾病包括糖尿病及其并發(fā)癥、局部缺血、炎癥、中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病、心血管疾病、阿爾茨海默病、皮膚病和癌癥。
已表明蛋白激酶C抑制劑能阻斷炎癥應(yīng)答，例如中性白細(xì)胞氧化爆裂，在T細(xì)胞中CD3下調(diào)和佛波醇誘發(fā)的爪水腫。Twoemy，B.等人，Biochem.Biophys，Res.Commun.1711087-1092(1990);Mulqueen，M.J.等人，Agents Actions 3785-89(1992)。因此，作為PKC抑制劑，本發(fā)明化合物可用于治療炎癥。
蛋白激酶C活性在中樞神經(jīng)系統(tǒng)行使機(jī)能中起著重要的作用。Huang，K.P.Trends Neurosci.12425-432(1989)。另外，已表明蛋白激酶C抑制劑可防止在病灶和中樞的局部缺血腦損傷及腦水腫中可見的損傷。Hara，H.等人，J.Cereb.Blood Flow Metab.10646-653(1990);Shibata，S.等人，Brain Res.594290-294(1992)。最近，經(jīng)測定表明，蛋白激酶C與阿爾茨海默病有關(guān)。Shimohama，S.等人，Neurology431407-1413(1993)。因此，本發(fā)明化合物可用于治療阿爾茨海默病和局部缺血性腦損傷。
蛋白激酶C活性一直與細(xì)胞生長、腫瘤增生和癌癥有關(guān)。Rotenberg，S.A.和Weinstein，I.B.Biochem.Mol.Aspects Sel.Cancer 125-73(1991)。Ahmad等人，Molecular Pharmacology43858-862(1993)。已知蛋白激酶抑制劑能有效地防止哺乳動(dòng)物的腫瘤生長。Meyer，T.等人，Int.J.Cancer 43851-856(1989);Akinagaka，S.等人，Cancer Res.514888-4892(1991)。當(dāng)與其他化學(xué)治療劑一起給藥時(shí)，本發(fā)明化合物也可作為使其成為有效化合物的多重藥物(multidrug)逆轉(zhuǎn)(MDR)劑。
蛋白激酶C活性在心血管疾病中也起著重要的作用。已表明脈管系統(tǒng)中增大蛋白激酶C活性引起血管收縮增大和高血壓。已知的蛋白激酶C抑制劑可防止這種增大。Bilder，G.E.等人，J.Pharmacol.Exp.Ther.252526-530(1990)。因?yàn)榈鞍准っ窩抑制劑能抑制中性白細(xì)胞氧化爆裂，因此蛋白激酶C抑制劑也可用于治療心血管局部缺血以及改善在局部缺血之后的心功能。Muid，R.E.等人。FEBS Lett.293169-172(1990);Sonoki，H.等人，Kokyu-To Junkan37669-674(1989)。也已經(jīng)研究了蛋白激酶C在血小板功能中的作用，并且表明升高的蛋白激酶C水平與對(duì)激動(dòng)劑應(yīng)答的增大有關(guān)。Bastyr Ⅲ，E.J.和Lu，J.Diabetes 42(Suppl.1)97A(1993)。PKC與在微血管滲透性的血小板活性因子調(diào)節(jié)中的生化路徑有關(guān)。Kobayashi等人，Amer.Phys.Soc.H1214-H1220(1994)。有效的蛋白激酶C抑制劑已被確證能作用于激動(dòng)劑誘導(dǎo)的血小板聚積。Toullec，D.等人，J.Biol.Chem.26615771-15781(1991)。蛋白激酶C抑制劑也能阻斷激動(dòng)劑誘導(dǎo)的平滑肌細(xì)胞增生。Matsumoto H.和Sasaki，Y.Biochem.Biophys.Res.Commun.158105-109(1989)。因此，本發(fā)明化合物可用于治療心血管疾病、動(dòng)脈粥樣硬化和再狹窄。
蛋白激酶C的異常活性還與皮膚病(如牛皮癬)有關(guān)。Horn，F(xiàn).等人，J.Invest.Dermatol.88220-222(1987);Raynaud，F(xiàn).和Evain-Brion，D.Br.J.Dermatol.124542-546(1991)。牛皮癬的特征在于角化細(xì)胞的異常增生。已表明已知的蛋白激酶C抑制劑抑制角化細(xì)胞增生，其方式與其作為PKC抑制劑的功效相對(duì)應(yīng)。Hegemann，L.等人，Arch.Dermatol.Res.283456-460(1991);Bollag，W.B.等人，J.Invest.Dermatol.100240-246(1993)。因此，本發(fā)明化合物作為PKC抑制劑可用于治療牛皮癬。
蛋白激酶C與數(shù)種不同類型的糖尿病有關(guān)。蛋白激酶C的過度活性與胰島素信號(hào)傳遞缺陷有關(guān)，因此與Ⅱ型糖尿病中所見的胰島素抗性有關(guān)。Karasik，A.等人，J.Biol.Chem.26510226-10231(1990);Chen，K.S.等人，Trans.Assoc.Am.Physicians 104206-212(1991);Chin，J.E.等人，J.Biol.Chem.2686338-6347(1993)。此外，研究表明當(dāng)患高血糖病時(shí)，已知對(duì)糖尿病并發(fā)癥敏感的組織中蛋白激酶C活性顯著增大。Lee，T.-S.等人，J.Clin.Invest.8390-94(1989);Lee，T.-S.等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 865141-5145(1989);Craven，P.A.和DeRubertis，F(xiàn).R.J.Clin.Invest.831667-1675(1989);Wolf.B.A.等人，J.Clin.Invest.8731-38(1991);Tesfamariam，B.等人，J.Clin.Invest.871643-1648(1991)。
本發(fā)明化合物還具有同功酶選擇性。與其他蛋白激酶C同功酶，即α、γ、δ、ε、ζ和η相比，這些化合物優(yōu)先抑制蛋白激酶Cβ-1和β-2同功酶。通常，如PKC試驗(yàn)中所測定的，在抑制PKCβ-1或β-2同功酶所需的劑量和對(duì)蛋白激酶Cα同功酶產(chǎn)生相同抑制作用所需的劑量中，本發(fā)明化合物表現(xiàn)出最小十倍的差異因子。因此，本發(fā)明化合物在大大減低的濃度下抑制蛋白激酶C的β-1和β-2同功酶，而對(duì)其他PKC同功酶產(chǎn)生極微的抑制作用。在表2中示出了代表性化合物的同功酶選擇性。
表2同功酶ED50(μM)化合物(實(shí)施例) α β2β2γ δ ε ζ η50.280.0190.0050.230.311.0380.035由于這種選擇性，本發(fā)明化合物特別適用于治療與蛋白激酶C同功酶β-1或β-2有關(guān)的病癥。例如，在糖尿病中存在的升高的血糖水平會(huì)導(dǎo)致血管組織中β-2同功酶的同功酶特異性升高。Inoguchi等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 8911059-11065(1992)。與糖尿病有關(guān)的人血小板中β同功酶的升高已經(jīng)與其對(duì)激動(dòng)劑的改變的應(yīng)答相關(guān)聯(lián)。BastyrⅢ，E.J.和Lu，J.Diabetes 42(Suppl.1)97A(1993)。已表明人維生素D受體被蛋白激酶Cβ選擇性地磷酸化。這種磷酸化作用與受體行使機(jī)能的改變有關(guān)。Hsieh等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA889315-9319(1991);Hsieh等人，J.Biol.Chem.26815118-15126(1993)。另外，最近的研究工作表明β-2同功酶導(dǎo)致紅白血病細(xì)胞增殖，而α同功酶參與在這些相同細(xì)胞中的巨核細(xì)胞分化。Murray等人，J.Biol.Chem.26815847-15853(1993)。
在給藥之前，式Ⅰ化合物優(yōu)選進(jìn)行配制。因此，本發(fā)明的另一實(shí)施方案是藥物制劑，它包括式Ⅰ化合物和一種或多種藥學(xué)上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。
使用公知的方法和易得的原料制備本發(fā)明的藥物制劑。在制備本發(fā)明的組合物時(shí)，活性成分通常與載體混合，或用載體稀釋，或包含在載體中，可采用膠囊、小藥囊、紙或其他容器。當(dāng)載體用作稀釋劑時(shí)，它可以是固體、半固體或液體物質(zhì)，這些物質(zhì)用作活性成分的載體、賦形劑或介質(zhì)。因此，本發(fā)明組合物可采用片劑、丸劑、粉劑、錠劑、藥囊劑、扁囊劑、酏劑、懸浮液、乳液、溶液、糖漿劑、氣霧劑(以固體形式或在液體介質(zhì)中)、軟和硬明膠膠囊、栓劑、無菌注射液和無菌包裝的粉劑。
合適的載體、賦形劑和稀釋劑的一些實(shí)例包括乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露糖醇、淀粉、阿拉伯樹膠、磷酸鈣、藻酸鹽、黃蓍膠、明膠、硅酸鈣、微晶纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、纖維素、水糖漿、甲基纖維素、羥基苯甲酸甲酯和丙酯、滑石粉、硬脂酸鎂和礦物油。制劑還可含有潤滑劑、濕潤劑、乳化劑、懸浮劑、防腐劑、甜味劑或調(diào)味劑。本發(fā)明組合物可被如此配制以便給病人用藥后提供活性成分的快速、持續(xù)或延遲的釋放。組合物優(yōu)選配制成單位劑型，每一劑含有約1至約500mg，通常約5至約300mg活性成分。但是應(yīng)理解，給藥的治療劑量由醫(yī)師根據(jù)有關(guān)情況包括所治療的疾病、所選擇的給藥化合物和所選擇的給藥途徑來確定，因此，上述劑量范圍并不意味著對(duì)本發(fā)明范圍的任何限制。術(shù)語“單位劑型”是指適用于受治的人和其他哺乳動(dòng)物的單一劑量的物理分散單位，每一單位含有經(jīng)計(jì)算的產(chǎn)生所需治療功效的預(yù)定量的活性物質(zhì)與合適的藥物載體。
除了上述制劑外，本發(fā)明化合物可局部給藥。局部制劑有軟膏劑、乳膏和凝膠劑。
通常用下列成分制備軟膏劑(1)油脂性基質(zhì)，即由不揮發(fā)性油或烴(如白礦脂或礦物油)組成的基質(zhì)，或(2)吸收性基質(zhì)，即由能吸水的無水物質(zhì)(如無水羊毛脂)組成的基質(zhì)。通常，在油脂性基質(zhì)或吸收性基質(zhì)制成后，加入活性成分(化合物)，其量應(yīng)達(dá)到所需濃度。
乳膏為油/水乳劑。它們由油相(內(nèi)相)和水相(連續(xù)相)組成，油相一般包含不揮發(fā)性油、烴等，如蠟、礦脂、礦物油等;水相包含水和任何可溶于水的物質(zhì)，如附加的鹽。通過使用乳化劑來穩(wěn)定兩相，例如表面活性劑，如十二烷基硫酸鈉;親水膠體、如阿拉伯膠、粘土、鋁硅酸鎂鹽等。通常在乳化劑制成后加入活性成分(化合物)其量應(yīng)達(dá)到所需濃度。
凝膠劑包含選自油脂性基質(zhì)、水或乳液-懸浮液基質(zhì)的基質(zhì)。向基質(zhì)中加入膠凝劑，它在基質(zhì)中形成基體，增加其粘度。膠凝劑的實(shí)例是羥丙基纖維素、丙烯酸聚合物等。通常，在加入膠凝劑之前，將活性成分(化合物)以所需濃度加到制劑中。
加入到局部制劑中的化合物的量并非關(guān)鍵，濃度僅是一個(gè)范圍，它應(yīng)足以使制劑容易施用于感染的組織區(qū)域，其量應(yīng)足以送達(dá)所需量的化合物。
施用于感染的組織的局部制劑的一般量取決于感染的組織大小和制劑中的化合物濃度。一般地，施用于感染的組織的制劑量應(yīng)達(dá)到約1至約500μg化合物/cm2感染的組織?；衔锏氖┯昧績?yōu)選為約30至約300μg/cm2，更優(yōu)選為約50至約200μg/cm2，最優(yōu)選為約60至約100μg/cm2。
下列制劑實(shí)施例僅用于說明，并不意味著對(duì)本發(fā)明范圍的任何限制。
制劑1用下列成分制備硬明膠膠囊量(mg/膠囊)活性劑250干燥的淀粉200硬脂酸鎂10總計(jì)460mg將上述成分混合并裝入硬明膠膠囊中，其量為460mg。
制劑2用下列成分制備片劑量(mg/片)活性劑250微晶纖維素400煅制二氧化硅10硬脂酸5總計(jì)665mg
將各成分混合并壓制成片，每片重665mg。
制劑3制備含有下列成分的氣霧劑溶液量(mg/罐)活性劑0.25乙醇29.75推進(jìn)劑22(氯二氟甲烷)70.00總計(jì)100.00將活性化合物與乙醇混合。然后將混合物加到一部分推進(jìn)劑22中，冷卻至-30℃，并轉(zhuǎn)移到裝料裝置中。然后將所需的量加到不銹鋼容器中，用剩余的推進(jìn)劑稀釋。然后將閥門安裝在容器上。
制劑4每片含有60mg活性成分的片劑制備如下量(mg/片)活性劑60mg淀粉45mg微晶纖維素35mg聚乙烯吡咯烷酮(10%水溶液)4mg羧甲基淀粉鈉4.5mg硬脂酸鎂 0.5mg滑石粉 1mg總計(jì)150mg
將活性成分、淀粉和纖維素通過No.45目美國篩并充分混合。將聚乙烯吡咯烷酮溶液與所得粉末混合，然后通過No.14目美國篩。將制得的顆粒在50℃下干燥，并通過No.18目美國篩，將羧甲基淀粉鈉、硬脂酸鎂和滑石粉先通過No.60目美國篩，然后加到顆粒中，混合后，在壓片機(jī)上壓制得到片劑，每片重150mg。
制劑5每個(gè)含有80mg藥物活性成分的膠囊劑制備如下量(mg/膠囊)活性劑80mg淀粉59mg微晶纖維素 59mg硬脂酸鎂 2mg總計(jì)200mg將活性成分、纖維素、淀粉和硬脂酸鎂混合，通過No.45目美國篩，然后裝入硬明膠膠囊中，其量為200mg。
制劑6每個(gè)含有225mg活性成分的栓劑可制備如下量(mg/栓)活性劑225mg飽和脂肪酸甘油酯2，000mg總計(jì)2，225mg將活性成分通過No.60目美國篩，并懸浮于用必需的最小熱量預(yù)先熔化的飽和脂肪酸甘油酯中。然后將混合物傾入標(biāo)稱容量為2g的栓劑模中，并使之冷卻。
制劑7每5ml劑含有50mg藥物活性成分的懸浮液制備如下量(mg/5ml劑)活性劑50mg羧甲基纖維素鈉50mg糖漿1.25ml苯甲酸溶液0.10ml調(diào)味劑適量著色劑適量加純水至總體積5ml將藥物活性成分通過No.45目美國篩，并與羧甲基纖維素鈉和糖漿混合揉制成均勻的糊狀物。用一些水稀釋苯甲酸溶液、調(diào)味劑和著色劑，并在攪拌下加入到糊狀物中。然后加入足夠的水得到所需的體積。
制劑8靜脈內(nèi)注射制劑可制備如下量(mg/劑)活性劑250mg等滲鹽水1000mg將上述成分的溶液以分鐘1ml的速度對(duì)需要治療的受治療者進(jìn)行靜脈內(nèi)給藥。
權(quán)利要求
1.下式化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物 其中W是-O-、-S-、-SO-、-SO2-、-CO-、C2-C6亞烷基、取代的亞烷基、C2-C6亞鏈烯基、-芳基-、-芳基(CH2)mO-、-雜環(huán)-、-雜環(huán)-(CH2)mO-、-稠雙環(huán)-、-稠雙環(huán)-(CH2)mO-、-NR3-、-NOR3-、-CONH-或-NHCO-；X和Y獨(dú)立地是C1-C4亞烷基、取代的亞烷基，或X、Y和W結(jié)合在一起形成-(CH2)n-AA-；R1獨(dú)立地是氫、鹵素、C1-C4烷基、羥基、C1-C4烷氧基、鹵代烷基、硝基、NR4R5或-NHCO(C1-C4烷基)；R2是氫、-CH3CO-、NH2或羥基；R3是氫、(CH2)m芳基、C1-C4烷基、-COO(C1-C4烷基)、-CONR4R5、-(C=NH)NH2、-SO(C1-C4烷基)、-SO2(NR4R5)或-SO2(C1-C4烷基)；R4和R5獨(dú)立地是氫、C1-C4烷基、苯基、芐基，或同與其鍵連的氮結(jié)合形成飽和或不飽和的5或6元環(huán)；AA是氨基酸殘基；m獨(dú)立地是0、1、2或3；n獨(dú)立地是1、2、3、4或5。
2.一種權(quán)利要求1的化合物，其中W是-O-、-S-、-SO-、-SO2-、-CO-、C2-C5亞烷基、取代的亞烷基、C2-C5亞鏈烯基、芳基、-雜環(huán)-、稠雙環(huán)、-NR3-、-NOR3-、-CONH-或-NHCO-;X和Y獨(dú)立地是C1-C4亞烷基、取代的亞烷基，或X、Y和W結(jié)合在一起形成-(CH2)n-AA-;R1獨(dú)立地是氫、鹵素、C1-C4烷基、羥基、C1-C4烷氧基、鹵代烷基、硝基、-NH(C1-C4烷基)、-N(C1-C4烷基)2或-NHCO(C1-C4烷基);R2是氫、-CH3CO-、NH2或羥基;R3是氫、(CH2)m芳基、C1-C4烷基、-COO(C1-C4烷基)、-CONR4R5、-(C＝NH)NH2、-SO(C1-C4烷基)、-SO2(NR4R5)或-SO2(C1-C4烷基);R4和R5獨(dú)立地是氫、C1-C4烷基、芐基，或同與其鍵連的氮結(jié)合形成飽和或不飽和的5或6元環(huán);AA是氨基酸殘基;m獨(dú)立地是0、1、2或3;n獨(dú)立地是1、2、3、4或5。
3.一種權(quán)利要求2的化合物，它是下式化合物 其中Z是-(CH2)p-或-(CH2)p-O-(CH2)p-;R6是羥基、-SH、C1-C4烷基、(CH2)m芳基、-NH(芳基)、-NHSO2(C1-C4烷基)、-NHSO2(CH2)m芳基或-NR4R5;R4是氫或C1-C4烷基;R5是氫、C1-C4烷基、芐基，或同R4及與它們鍵連的氮結(jié)合形成飽和或不飽和的5或6元環(huán);p獨(dú)立地是0、1或2;m獨(dú)立地是0、1、2或3。
4.一種選自下列化合物的化合物、或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物(R)-3，4-[(N，N′-1，1′-((2″-乙氧基)-3′″(O)-4′″-(N，N-二甲基氨基)丁烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮，(S)-3，4-[(N，N′-1，1′-((2″-乙氧基)-3′″(O)-4′″-(N，N-二甲基氨基)丁烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮，它們的混合物。
5.一種選自下列化合物的化合物、或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物(S)-3，4-[(N，N′-1，1′-((2″-乙氧基)-3′″-(O)-4′″-(N-吡咯烷)丁烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮，(R)-3，4-[(N，N′-1，1′-((2″-乙氧基)-3′″-(O)-4′″-(N-吡咯烷)丁烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮，它們的混合物。
6.一種選自下列化合物的化合物、或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物(S)-3，4-[(N，N′-1，1′-((2″-乙氧基)-3′″-(O)-4′″-(N-苯磺酰氨基)丁烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮，(R)-3，4-[(N，N′-1，1′-((2″-乙氧基)-3′″-(O)-4′″-(N-苯磺酰氨基)丁烷)-雙(3，3′-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2，5-二酮，它們的混合物。
7.一種下式化合物 其中V是-O-或N-CH3;W是-O-、-S-、-SO-、-SO2-、-CO-、C2-C6亞烷基、取代的亞烷基、C2-C6亞鏈烯基、-芳基-、-芳基(CH2)mO-、-雜環(huán)-、-雜環(huán)-(CH2)mO-、-稠雙環(huán)-、-稠雙環(huán)-(CH2)mO-、-NR3-、-NOR3-、-CONH-或-NHCO-;X和Y獨(dú)立地是C1-C4亞烷基、取代的亞烷基，或X、Y和W結(jié)合在一起形成-(CH2)n-AA-;R1獨(dú)立地是氫、鹵素、C1-C4烷基、羥基、C1-C4烷氧基、鹵代烷基、硝基、NR4R5或-NHCO(C1-C4烷基);R3是氫、(CH2)m芳基、C1-C4烷基、-COO(C1-C4烷基)、-CONR4R5、-(C＝NH)NH2、-SO(C1-C4烷基)、-SO2(NR4R5)或-SO2(C1-C4烷基);R4和R5獨(dú)立地是氫、C1-C4烷基、苯基、芐基，或同與其鍵連的氮結(jié)合形成飽和或不飽和的5或6元環(huán);AA是氨基酸殘基;m獨(dú)立地是0、1、2或3;n獨(dú)立地是1、2、3、4或5。
8.藥物制劑，包括權(quán)利要求1至6中任一項(xiàng)所要求的化合物作為活性成分以及一種或多種藥學(xué)上可接受的用于藥物制劑的賦形劑、載體或稀釋劑。
9.一種制備權(quán)利要求7的化合物的方法，包括將濃度為約1.5摩爾至約0.001摩爾的下式化合物 其中V是O或N-CH3;R1獨(dú)立地是氫、鹵素、C1-C4烷基、羥基、C1-C4烷氧基、鹵代烷基、硝基、NR4R5或-NHCO(C1-C4烷基);m獨(dú)立地是0、1、2或3;和濃度為約1.5摩爾至約0.001摩爾的下式的烷基化劑的混合物，與約0.5至約10當(dāng)量的Cs2CO3以約0.1ml/小時(shí)至約2.0ml/小時(shí)的速度在極性非質(zhì)子傳遞溶劑中混合， 其中L是離去基團(tuán);W是-O-、-S-、-SO-、-SO2-、-CO-、C2-C6亞烷基、取代的亞烷基、C2-C6亞鏈烯基、-芳基-、-芳基(CH2)mO-、-雜環(huán)-、-雜環(huán)-(CH2)mO-、-稠雙環(huán)-、-稠雙環(huán)-(CH2)mO-、-NR3-、-NOR3-、-CONH-或-NHCO-;X和Y獨(dú)立地是C1-C4亞烷基或取代的亞烷基;R3是氫、(CH2)m芳基、C1-C4烷基、-COO(C1-C4烷基)、-CONR4R5、-(C＝NH)NH2、-SO(C1-C4烷基)、-SO2(NR4R5)或-SO2(C1-C4烷基);R4和R5獨(dú)立地是氫、C1-C4烷基、苯基、芐基，或同與其鍵連的氮結(jié)合形成飽和或不飽和的5或6元環(huán);m獨(dú)立地是0、1、2或3。
10.一種制備權(quán)利要求7的化合物的方法，包括將濃度為約3摩爾至約0.001摩爾的下式化合物與約0.5至約10當(dāng)量的Cs2CO3以約0.1ml/小時(shí)至約2.0ml/小時(shí)的速度在極性非質(zhì)子傳遞溶劑中混合， 其中L2獨(dú)立地是離去基團(tuán);V是-O-或N-CH3;W是-O-、-S-、-SO-、-SO2-、-CO-、C2-C5亞烷基、取代的亞烷基、C2-C6亞鏈烯基、-芳基-、-芳基(CH2)mO-、-雜環(huán)-、-雜環(huán)-(CH2)mO-、-稠雙環(huán)-、-稠雙環(huán)-(CH2)mO-、-NR3-、-NOR3-、-CONH-或-NHCO-;X和Y獨(dú)立地是C1-C4亞烷基或取代的亞烷基;R1獨(dú)立地是氫、鹵素、C1-C4烷基、羥基、C1-C4烷氧基、鹵代烷基、硝基、NR4R5或-NHCO(C1-C4烷基);R3是氫、(CH2)m芳基、C1-C4烷基、-COO(C1-C4烷基)、-CONR4R5、-(C＝NH)NH2、-SO(C1-C4烷基)、-SO2(NR4R5)或-SO2(C1-C4烷基);R4和R5獨(dú)立地是氫、C1-C4烷基、苯基、芐基，或同與其鍵連的氮結(jié)合形成飽和或不飽和的5或6元環(huán);m獨(dú)立地是0、1、2或3。
11.一種制備權(quán)利要求3至6中任一項(xiàng)所要求的化合物的方法，包括(a)使下式化合物去保護(hù) 其中Z是-(CH2)p-;R6′是保護(hù)的羥基或保護(hù)的胺;p獨(dú)立地是0、1或2;(b)任意地取代羥基或胺以制備權(quán)利要求3至6中任一項(xiàng)所要求的化合物，其中R6是羥基、-SH、C1-C4烷基、-(CH2)m芳基、-NH(芳基)、-NHSO2(C1-C4烷基)、-NHSO2(CH2)m芳基或-NR4R5;R4是氫或C1-C4烷基;R5是氫、C1-C4烷基、芐基或與R4及與它們鍵連的氮結(jié)合形成飽和或不飽和的5或6元環(huán)。
全文摘要
本發(fā)明提供了上式的新的雙吲哚馬來酰亞胺大環(huán)衍生物。本發(fā)明還提供了其制備方法、藥物制劑及其用于抑制哺乳動(dòng)物蛋白激酶C的方法。其中各基團(tuán)如說明書中所定義。
文檔編號(hào)A61K31/395GK1111247SQ9411936
公開日1995年11月8日 申請(qǐng)日期1994年12月2日 優(yōu)先權(quán)日1993年12月7日
發(fā)明者小·W·F·希思, M·R·吉盧塞克, J·H·麥克唐納德, C·J·里托 申請(qǐng)人:伊萊利利公司