專利名稱：具有血管緊張肽原酶抑制性能的化合物，及其制備方法和使用的制作方法
EP-A370 454，EP-A373 497，EP-A 394 853和EP-A417 698指出雜環(huán)取代的氨基二醇衍生物具有血管緊張肽原酶抑制作用。EP-A365 992描述了N端固定構象烷基醇和statin衍生物。
現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)一些化合物，其分子的N端是一種優(yōu)選飽和的雜環(huán)基團。C端是一種雜環(huán)取代基。這些化合物是特別有效、高度專一的血管緊張肽原酶(腎素)抑制劑，具有切實改善的體內(nèi)活性和大大提高的吸收性能。
因此本發(fā)明涉及式(Ⅰ)的化合物
其中X為N，O或CH;
R1可能空缺，或者是氫、N-保護基、芳基、雜環(huán)或R7-Q，其中1)R7等于短鏈烷基、氨基、烷氨基、二烷氨基，(烷氧烷)(烷)氨基，(烷氧烷氧烷)(烷)氨基，芳基，芳烷基，氨烷基，N-被保護氨烷基，烷氧基，取代短鏈烷基，取代基選自烷氧基，烷硫基，鹵素，烷氨基，N-被保護(烷)氨基和二烷氨基，
m為1-5，R8為氫、羥基、烷氧基、烷硫基、烷氧烷氧基、多烷氧基、氨基、N-被保護氨基、烷氨基、N-被保護烷氨基或二烷氨基，
R9為O，S，SO2，O＝C或R10N，其中R10為氫，短鏈烷基或N-保護基。
2)Q是C＝O或CH2，這里當R1是一種N-保護基時，X等于N。
R11S(O)2，R11等于氨基，烷氨基，二烷氨基，短鏈烷基，鹵代烷基，芳基，P-聯(lián)苯基，雜環(huán)或(R12)2P(O)，其中R12等于烷氧基，烷氨基或二烷氨基，A和L是相互獨立的，或者空缺，或者是C＝O，SO2和CH2;
D為C＝O，SO2或CH2;
Y為N或CH;
R2為氫，短鏈烷基，環(huán)烷基烷基，-CH2-R13-(CH2)q-R14，其中q等于0，1或2;
如果q等于1或2，R13或者空缺或者為0，NH或S;
R14是烷基或雜環(huán);
Z為氫或-R15C(O)R16，-R15S(O)2R16或-R15-C(S)R16，這里，R15等于NH，-N(R17)-，R17為短鏈烷基或芐基，或CH2，R16是烷氧基，芐氧基，烷氨基，二烷氨基，芳基或雜環(huán)。
R3為氫，短鏈烷基，短鏈鏈烯基，環(huán)烷基烷基，環(huán)鏈烯基烷基，烷氧烷基，烷硫烷基，(烷氧烷氧)烷基，(多烷氧基)烷基，芳烷基或雜環(huán)取代烷基;
n為0或1。
R4是氫，(C1-C10)烷基，(C3-C6)環(huán)烷基，(C3-C8)環(huán)烷基-(C1-C4)烷基，(C6-C12)芳基或(C6-C12)芳基-(C1-C4)烷基。
R5是氫，(C1-C10)烷基，(C6-C12)芳基，(C6-C12)芳基-(C1-C4)烷基，羥基或氨基;
R6是式(Ⅱ)的基團(CH2)S-CHR16-Het (Ⅱ)這里，R18為氫，(C1-C7)烷基，(C1-C4)烷氧基，(C1-C4)烷硫基，(C1-C4)烷氨基，羥基，疊氮基或鹵素，Het是一種5到7圓雜環(huán)，這種雜環(huán)可是苯稠合的，芳香的，部分或完全氫化，它包含一或兩個相同或不同的基作為其雜原子，這些基選自N、O、S、NO，SO，SO2，能為一或兩個相同的或不同的基所取代，取代基選自(C1-C4)烷基，烯丙基，(C1-C4)烷氧基，羥基，鹵素，氨基，一或二-(C1-C4)烷氨基和CF3;并且S為0，1，2，3或4，及其藥用鹽。
優(yōu)選的式(Ⅰ)雜環(huán)化合物或其鹽中符號具有下列含義R4異丁基、芐基或環(huán)己基甲基;
R5氫，(C1-C5)烷基，(C6-C10)芳基，(C6-C10)芳基-(C1-C4)烷基或羥基;
R6式(Ⅱ)的基團，其中R18為氫，(C1-C4)烷基，(C1-C4)烷氧基，(C1-C4)烷硫基，(C1-C4)烷氨基，羥基，疊氮基或鹵素。
S 0，1或2。
同樣優(yōu)選的是，各符號具有以下含義X N或CH，R1空缺、氫、芐基、2-吡啶基，1-哌嗪基、(4-OMe)苯基，叔丁氧羰基，異丁基，芐氧羰基，Me2NC(O)-，4-甲基-1-哌嗪基羰基，1-嗎啉基羰基，P-甲苯磺?；?-甲基-1-哌嗪基磺酰;
A和L是相互獨立的，或者空缺，或為CH2，D C＝O或CH2;
Y 等于NR2氫或芐基;
Z氫、BOC-NH，CbZ-NH，P-甲苯磺酰氨基，4-甲基-1-哌嗪磺酰氨基，4-甲基-1-哌嗪基，N-甲基-N-(4-甲基-1-哌嗪基磺酰)氨基;
R3氫、甲基、正丁基、4-咪唑基甲基，4-噻唑基甲基或N-BOC-4-(咪唑基甲基);并且n 零。
本發(fā)明特別涉及的式(Ⅰ)雜環(huán)化合物中，符號具有下列含義R4異丁基，芐基或環(huán)己基甲基;
R5氫或羥基，R6式(Ⅱ)的基團，其中，R18為氫或氟，Het為2-，3-或4-吡啶基，2-，4-或5-咪唑基或2-噁唑基，這里所說的雜環(huán)每一種都能為一或兩個相同或不同的基所取代，取代基選自甲基、乙基、丙基、烷基，氟、氯、溴、CF3和甲氧基。并且s 0，1或2;
其它基團和變量如以上定義，及其藥用鹽。
式(Ⅰ)化合物的手性中心可為R或S。
“N-保護基團”是指這樣的基團，它適合于在合成過程中保護氮原子不產(chǎn)生不需要的反應，以防止肽鏈端解酶對最終產(chǎn)品的侵蝕或提高其可溶性。這個詞指這樣的基團，如?；阴；挛祯?，叔丁基乙?；?，三氯乙氧羰基，叔丁氧羰基-(BOC)，芐氧羰基(CbZ)或苯甲?；騆-或D-氨基酰基，這本身同樣是N-被保護基。
“短鏈烷基”指具有1至7個碳原子的直鏈或支鏈烷基，例如甲基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、正戊基、1-甲基丁基、2，2-二甲基丁基、2-甲基戊基、2，2-二甲基丙基或正己基。
“短鏈鏈烯基”指短鏈烷基中至少包含一個C-C雙鍵。
“烷氨基”指和短鏈烷基相聯(lián)的-NH，“氨烷基”指和短鏈烷基相聯(lián)的-NH2，“環(huán)烷基”指3-7個碳原子的脂族環(huán)。
“芳基”指一或二環(huán)碳環(huán)系統(tǒng)，具有一個或多個的芳香環(huán)，如苯基、萘基、四氫化萘基、2，3-二氫化茚基等等?！胺蓟蓖瑯又鸽s環(huán)的或芳香環(huán)系統(tǒng)，芳基未取代或被1，2或3個取代基所取代，取代基是相互獨立的短鏈烷基，鹵代烷基，烷氧基，硫代烷氧基，氨基，烷氨基，羥基，鹵素，巰基，硝基，甲酰，羧基和氨基甲?；?。
“多烷氧基”指-OR19，R19等于直鏈或支鏈烷基鏈，帶有1-5個Cw-O-CX鍵，其中w和x相互獨立，為1-3。
“雜環(huán)烷基”指由短鏈烷基所取代的雜環(huán)，如咪唑基甲基或噻唑基甲基。
鹵素為氟、氯、溴或碘。
優(yōu)選的(C1-C10)烷基指烷基或相應的具有1-10個碳原子的不飽和基團，可以是直鏈的，也可以是支鏈的。相應的說明也用于衍生基團，如烷氧基、硫代烷基、烷氨基、烷酰基和芳烷基。
優(yōu)選的(C3-C8)-環(huán)烷基指環(huán)丙基，環(huán)丁基，環(huán)戊基，環(huán)己基，環(huán)庚基和環(huán)辛基，如果這些環(huán)基團包含多于一個的取代基，則相互間既可是順式也可是反式。
雜芳族基團特別指這樣一種基團，它包含從苯衍生的6圓芳香環(huán)，其中一個或更多的CH基團為N所取代，或者包含從苯衍生的5圓芳香環(huán)，其中一個或兩個CH基團為O，S，NH或N所取代并且其中其它的CH基團必要時由N取代。這種雜芳基團優(yōu)選的是一環(huán)或二環(huán)，在后一種情況下，它與苯或以上定義的5-或6-環(huán)稠合。相應的說明也用于衍生基團，如雜芳-脂族基團的雜芳烷基，雜芳?；螂s芳氧基。
按照上面定義的意思，Het是例如雜芳基團如吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、吡唑基、噁唑基、噻唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、吲哚基、喹啉基、異喹啉基、喹喔啉基、β-咔啉基或這些基團的苯并稠合，環(huán)戊，環(huán)己或環(huán)庚稠合衍生物。這種雜環(huán)可在氮原子處為氧、(C1-C6)-烷基，例如甲基或乙基、苯基或苯基-(C1-C4)烷基，例如芐基所取代和/或在一或更多的碳原子處由(C1-C6)-烷基，如甲基，苯基，苯基-(C1-C4)烷基，例如芐基，鹵素，例如氯，羥基，(C1-C4)烷氧基，例如甲氧基，苯基-(C1-C4)烷氧基，例如芐氧基，或氧，最多3取代并部分飽和。
例子是2-或3-吡咯基，苯基吡咯基，例如4-或5-苯基-2-吡咯基，2-呋喃基，2-噻吩基，4-咪唑基，甲基咪唑基，例如1-甲基-2-，-4-或-5-咪唑基，1，3-噻唑-2-基，2-，3-或4-吡啶基，2-，3-或4-吡啶1-氧化物，2-吡嗪基，2-，4-或5-嘧啶基，2-，3-或5-吲哚基，取代2-吲哚基，例如1-甲基-，5-甲基-，5-甲氧基-，5-芐氧基-，5-氯-或4，5-二甲基-2-吲哚基，1-芐基-2-或-3-吲哚基，4，5，6，7-四氫-2-吲哚基，環(huán)庚〔b〕-5-吡咯基，2-，3-或4-喹啉基，4-羥基-2-喹啉基，1-，3-或4-異喹啉基，1，2-二氫化-3-異喹啉基1-氧化物，2-喹喔啉基，2-苯并呋喃基，2-苯并噁唑基，2-苯并噻唑基，苯并〔c〕吲哚-2-基?；颚?咔啉-3-基。
部分氫化或完全氫化的雜環(huán)是，例如，二氫吡啶基，吡咯烷基，例如2-，3-或4-N-甲基吡咯烷基，哌啶基，哌嗪基，嗎啉代，硫代嗎啉代，四氫噻吩基。
“必要時取代”意指相關的基團為一、二或三個，優(yōu)選的是一種或二個相同的或不同的基團所取代，取代基選自(C1-C6)烷基，(C1-C6)烷氧基，羥基，鹵素，(C1-C6)烷?；珻F3，氨基，(C1-C6)烷氨基，二-(C1-C6)烷氨基，氨基甲?；?，(C1-C6)烷氧羰基和氨磺酰。
式(Ⅰ)化合物的鹽特別意指有藥物效力的無毒鹽。這種類型的鹽為包含如羧基這樣的酸根的式(Ⅰ)的化合物，與如Na，K，Mg和Ca這樣的堿金屬或堿土金屬，和如三乙胺這樣的生理上容許的有機氨形成的。
包含堿性基，如氨基或胍基的式(Ⅰ)化合物與無機酸，如鹽酸、硫酸或磷酸，和有機羧酸或磺酸如乙酸、檸檬酸、苯甲酸、馬來酸、富馬酸、酒石酸或β-甲苯磺酸形成鹽。
本發(fā)明進一步關系到制備式(Ⅰ)化合物的方法，這種方法包括把帶有末端羧基或其活性衍生物的成分同相應的帶有自由氨基的成分聯(lián)結(jié)起來，必要時去掉先前暫時引入以保護其它官能團的保護基，并且必要時把以這種方式得到的化合物轉(zhuǎn)換成其藥用鹽。
帶有末端羧基的式(Ⅰ)化合物的成分，如下式(Ⅲ)
帶有末端氨基的式(Ⅰ)化合物的成分，如下式(Ⅳ)
適合于產(chǎn)生酰氨鍵的方法已在Houben-Weyl的Methoden der Organischen Chemie，(Volume 15/2，Bodanszky et al.，Peptide Synthesis，2nd ed.，Wiley & Sons;New York 1976)中描述過，或見Gross Meienhofer的The Peptides，Analysis，Synthesis，Biology(Academic Press，New York 1979)。下列方法是優(yōu)選的活性酯法，以N-羥基琥珀酰胺或1-羥基苯并三唑作為酯成分，與如二環(huán)己基碳二亞銨這樣的碳二亞銨?；蚺c丙烷膦酸酐或甲基乙基次膦酸酐結(jié)合。還有用新戊酰氯的混合酐法(M.Zaoral，Coll.Chem Commun.，1962，27，1273)。優(yōu)選的反應是在一種惰性溶劑或溶劑混合物中進行，溫度在-20℃和反應混合物的沸點之間。
式(Ⅲ)的羧酸由例如EP-A365 992上的方法制備。式(Ⅳ)的活性胺，其中的R4，R5和R6如以上定義，可作為初始化合物，其制備可開始于旋光α-氨基酸，并保留其非對稱性中心。為了這個目的，就要以已知的方法制備N-被保護氨基并以3-羥基丁醛添加的方法把它同相應的雜芳烷鏈節(jié)連接起來，并且在消除了N-保護基后，產(chǎn)生式(Ⅳ)的氨基醇。當R5＝OH時，N-被保護氨基醛同樣用來作為起始材料，并且由例如不飽和化合物的3-羥基丁醛添加法引入合適的保護基，隨后環(huán)氧化作用轉(zhuǎn)化成所要求的中間產(chǎn)品。得到相對于OH-載體中心的非對映混合物，并且能夠為已知的方式，例如分級結(jié)晶或色譜法所分離。非對映體純度由HPLC檢查;對映體的純度可根據(jù)已知的方法轉(zhuǎn)換為Mosher衍生物來檢查(H.S.Mosher et al.，J.Org.Chem，34(1969)2543)。
N-被保護氨基醛由B.Castro的方法制備(Synthesis 1983，676)。
對N-被保護氨基醛的3-羥基丁醛添加法(優(yōu)選的是N-叔丁氧基羰基和芐氧基羰基保護基)在這樣的溶劑中進行，它對于堿是惰性的。例如乙醚、THF、甲苯、DMF、DMSO或二甲氧基乙烷。
用于雜芳烷基成分去質(zhì)子化的堿是堿金屬醇鹽，如叔丁醇鉀、甲醇鈉、堿金屬氫化物如氫化鈉或氫化鉀，有機金屬堿如正丁基鋰、仲丁基鋰、甲基鋰或苯基鋰、氨基鈉、有機含氮堿的堿金屬鹽如二異丙基氨基鋰。
為制備式(Ⅰ)化合物所必需前后操作，如保護基的引入和消除可從文獻中得知，例如在D.W。Greene的“Protective Groups in Organic Synthesis”中已作了描述。帶有成鹽基團的式(Ⅰ)化合物鹽可由已知的方法制備，例如，可由帶有堿性基的式(Ⅰ)的化合物同化學計量的合適的酸的反應而得。
使用外消旋的羧酸衍生物的立體異構體的混合物，特別是非對映體的混合物能夠按照已知的方法由分級結(jié)晶或色譜法所分離。
按照本發(fā)明，式(Ⅰ)化合物具有抑制酶的性質(zhì)，特別是，它們能夠抑制自然酶腎素的活動。腎素是一種來自天冬氨酰蛋白酶的分解蛋白的酶，作為各種刺激的結(jié)果(體縮、缺鈉、β-受體刺激)它能借助于腎中近腎小球細胞分泌進入血流中，在那里，它能消除來自肝分泌血管緊張肽原酶的十肽血管緊張素Ⅰ。血管緊張素Ⅰ由血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)轉(zhuǎn)換成血管緊張素Ⅱ。血管緊張素Ⅱ在血壓的調(diào)節(jié)中起實質(zhì)性的作用，因為它能靠血管收縮增加血壓。另外，它刺激從腎上腺分泌醛甾酮，并且以這種方式借助于對鈉排泄的抑制，增加胞外液體積，進而增加了血壓。腎素的酶活性抑制劑減少血管緊張素Ⅰ的生成，進而減少血管緊張素Ⅱ生成。這種活性肽激素的濃度的減少正是腎素抑制劑起到降低血壓作用的直接原因。
腎素抑制劑的活性可由體外試驗來檢查。其中可看到血管緊張素生成量減少可在多種系統(tǒng)中測定(人血漿，純化的人體腎素)。
1.試驗原則例如，包含腎素和血管緊張肽原的人血漿同被檢測的化合物保溫在37℃。在這個期間，由于腎素的作用，血管緊張素Ⅰ從血管緊張肽原中釋放出來，接著可由商業(yè)上可行的放射免疫測定法測量。這種血管緊張素的釋放由腎素抑制劑來加以抑制。
2.取得血漿血液可從自愿者那里得到(每人大約0.5l;Bluko取樣器由ASID Bonz und Sohn提供，Unterschlei βheim)并收集進冰中冷卻的部分抽空瓶中，可加入EDTA(最后濃度10mM)以防止凝聚。在離心過濾后(轉(zhuǎn)子HS4(Sorvall)，3500rpm，0-4℃，15min;如必要可重復)，血漿可由吸移管小心移出并-30℃凍結(jié)入合適部分中。只有那些帶有很高腎素活性的血漿可用于檢測。帶有低腎素活性的血漿可由冷處理(-4℃，3天)活化(腎素前體→腎素)。
3.測試程序利用腎素Maia工具箱來確定血管緊張素Ⅰ(Sereno Diagnostics S.A.，Coinsins，Switzerland)。血漿按照其中給定的指示來培養(yǎng)。
培養(yǎng)混合物1，000μl的血漿(在0-4℃解凍)100μl的磷酸鹽緩沖劑(pH7.4)(加上10-4M的ramiprilat)10μl的PMSF溶液10μl的0.1%Genapol PFIC12μl的二甲基亞砜或試驗產(chǎn)物一般說來，在100%的二甲基亞砜(DMSO)中制備10-2M的試驗產(chǎn)物溶液，可適當利用二甲基亞砜稀釋;培養(yǎng)混合物中最多含1%的二甲基甲砜。
混合物在冰中混合并且在水浴中(37℃)培養(yǎng)1個小時。整個六個樣品(每一個樣品為100μl)來自另外的混合物，這種混合物中沒有抑制劑，并且不進一步培養(yǎng)而確定所用血漿中最初血管緊張素Ⅰ含量。
選擇的試驗產(chǎn)物濃度選為大約包括酶抑制為10-90%的范圍(至少5次提濃)。培養(yǎng)時間結(jié)束時，每一混合物的100μl樣品在放置于干冰上的Eppndorf預冷管中冷凍，在大約-25℃中保持，以備血管緊張素的測定(三個單一樣品的均值)。
血管緊張素Ⅰ的放射免疫測定(RIA)確切使用放射免疫測定工具箱(腎素Maia工具箱，Serono Diagnostics S.A.，Coinsins，Switzerland)的指示如下。
標準圖線覆蓋的范圍為每毫升有的血管緊張素Ⅰ從0.2至25.0毫微克。所有測得值減去血漿的基線血管緊張素Ⅰ含量。血漿腎素活性(PRA)計為ang I/ml×小時的ng。在測試物存在時的PRA與沒有抑制劑的混合物(＝100%)相關，而且計為%保存活性。依照測試產(chǎn)物濃度(M)(對數(shù)標示)讀出IC50，計為%保持活性。
本發(fā)明描述的式(Ⅰ)化合物在大約10-5至10-10mol/l濃度的體外測試中表現(xiàn)出抑制作用。
在動物缺乏鹽的情況下，腎素抑制劑可以降低血壓。由于人類的腎素不同于其他物種的腎素，所以用靈長類(狨猴、羅猴)來進行體外腎素抑制劑試驗。靈長類腎素和人類腎素在其序列上本質(zhì)相同。內(nèi)生腎素分泌受呋喃苯胺酸i.v.注射刺激。然后服用測試化合物，并測定它們對血壓和心率的作用。在這樣的測試當中，本發(fā)明的化合物的活性i.v.劑量范圍是大約0.1-5mg/Kg，通過胃鏡的十二指腸內(nèi)服用時劑量范圍為大約1-50mg/Kg。本發(fā)明描述的式(Ⅰ)化合物可以用作抗高血壓藥，并可用以治療心衰。
HIV蛋白酶從GAG-POL多肽自動催化切出，進而將前體肽P55分裂成核心抗原P17、P24和P14。正是這樣的基本酶的抑制作用阻斷了這種病毒的生命周期并抑制其生長。
通過生物學試驗已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，符合本發(fā)明的這種化合物具有抑制作用，而且還可以抑制諸如HIV蛋白酶這類的病毒酶。抑制HIV蛋白酶的作用尤其重要，而且使符合本發(fā)明的這種化合物特別適宜治療和預防通過HIV傳染引起的疾病。符合本發(fā)明式(Ⅰ)的化合物在體外使用中濃度大約為10-4至10-8mol/l即表現(xiàn)出抑制作用。
而且本發(fā)明涉及利用式(Ⅰ)化合物生產(chǎn)用作高血壓的治療、充血性心衰的治療、以及病毒病、特別是由HIV引起的病毒病的治療與預防的藥品。
藥物包括足夠量的式(Ⅰ)活性物質(zhì)和制藥使用的無機或有機賦形劑。鼻滴、靜脈注射、皮下注射或口服都可以?；钚晕镔|(zhì)的劑量依賴于溫血動物種、體重、年齡，并依賴于服用的方法。
本發(fā)明的藥物按照已知的過程進行溶解、混合，成粒或包衣而制成。
對于口服形式，活性化合物與諸如賦形劑、穩(wěn)定劑或惰性稀釋劑，并利用常規(guī)方法轉(zhuǎn)變成適當?shù)乃巹┬问?，如片劑、包衣藥片、硬膠囊、水、酒醇或油懸浮液、或者水、醇或油溶液。可以使用的中性載體例子有阿拉伯樹膠、氧化鎂、碳酸鎂、磷酸鉀、乳糖、葡萄糖、硬脂酰富馬酸鎂或者淀粉?？芍瞥筛珊蜐竦念w粒。適當?shù)挠蜖钯x形劑或溶劑的例子是植物或動物油，如葵花子油和魚肝油。
對于皮下注射或靜脈注射，用活性化合物或其藥用鹽制成注射液，必要時還用常規(guī)物質(zhì)包括穩(wěn)定劑、乳化劑或其他助劑，制成溶液、懸浮液或乳液。適當?shù)娜軇┯兴?、生理鹽水或醇，例如乙醇，丙二醇或丙三醇，以及糖溶液，如葡萄糖或甘露糖醇溶液，或者提到的各種溶液的混合物。
使用的縮寫名單BOC 叔丁氧基羰基BuLi 正丁基鋰DCC 二環(huán)己基碳二亞胺DCI 脫附化學離子化DNP 2，4-二硝基苯基PME 二甲氧基乙烷DMF 二甲基甲酰胺EA 乙酸乙酯FAB 快速原子撞擊h 小時HOBt 1-羥基苯并三唑
M 分子峰MS 質(zhì)譜min 分鐘NEM N-乙基嗎啉RT 室溫THF 四氫呋喃Trt 三苯甲基下列例子描述了本發(fā)明例1N-〔2S-(3R-芐基-4-(1-嗎啉羰基)-1-哌嗪基)己酰〕-(2S，3R，4S)-1-環(huán)己基-3，4-二羥基-6-(2-吡啶基)-2-己基胺a)(2S，3R，4S)-2-叔丁氧羰基氨基-1-環(huán)己基-3，4-二羥基-6-(2-吡啶)己烷2.8ml的正丁基鋰在-78℃加入到20mlTHF中的186mg2-甲基吡啶溶液中。混合物加熱到室溫，攪拌30分鐘，然后冷卻至-40℃。加入2mmol的(2RS，3R，4S)-3-叔丁基-二甲基甲硅烷氧基-4-叔丁氧基羰氨基-5-環(huán)己基-1，2-環(huán)氧戊烷(在10ml的THF中溶解)(在EP-A 189 203，例6中揭示過)。在室溫下攪拌十小時，然后加水稀釋，并用甲基叔丁基醚提取。濃縮后的粗產(chǎn)品在THF中溶解并與10ml的1M的THF四丁基鉛氟化合物的THF溶液在0℃下一起攪拌1小時。加水稀釋，用EA提取并濃縮，產(chǎn)生300mg的(2S，3R，4S)異構體MS(FAB)393(M+H)，經(jīng)過在硅凝膠色譜法分離后，產(chǎn)生240mg的(2S，3R，4S)異構體MS(FAB)393(M+H)。
b)N-〔2S-(3R-芐基-4-(1-嗎啉羰基)-1-哌嗪基)己?！?(2S，3R，4S)-1-環(huán)己基-3，4-二羥基-6-(2-吡啶基)-2-己基胺。
200mg的(2S，3R，4S)-2-叔丁氧基羰基氨基-1-環(huán)己基-3，4-二羥基-6-(2-吡啶基)己烷(例1a的化合物)與3ml三氟乙酸在3ml的無水二氯甲烷中室溫攪拌2小時。經(jīng)濃縮后產(chǎn)生的剩余物用1MNaHCO3溶液中被提取，其混合物用EA提取三次，EA相在Na2SO4上干燥，經(jīng)濃縮后的剩余物在2ml的無水DMF中溶解，加入205。8mg的2-〔3R-芐基-4-(1-嗎啉基羰基)-1-哌嗪基〕己酸(在EP-A365 995，例38中之揭示)，104.2mg的N，N′-二環(huán)己基碳二亞胺)和103.4mg的1-羥基苯并三唑，溶液的PH值用N-乙基嗎啉調(diào)整至9，混合物在室溫下攪拌48小時。過濾后再用EA稀釋，并用飽和NaHCO3溶液，水和飽和氯化鈉溶液各洗一次，在Na2SO4上干燥，并濃縮。用硅凝膠色譜法(用CH2Cl2/MeOH混合物作為流動相)得到93.7mg題示產(chǎn)物。
MS(FAB)678(M+H)
例2N-〔2S-(3R-芐基-4-叔丁氧基羰基-2-酮-1-哌嗪基)己?！?(2S，3R，4S)-1-環(huán)己基-3，4-二羥基-6-(2-吡啶)-2-己基胺題示化合物按例1中描述的方法用2-(3R-芐基-4-叔-丁氧基羰基-2-酮-1-哌嗪基)己酸(在EP-A365 992，例43中之揭示)和例1a的化合物來制備。
MS(FAB)679(M+H)例3N-〔3-(4-咪唑基)-2S-(3R-芐基-4-叔丁氧羰基-2-酮-1-哌嗪基)丙?！?(2S，3R，4S)-1-環(huán)己基-3，4-二羥基-6-(2-吡啶基)-2-己基胺題示化合物用3-(4-咪唑基)-2S-(3R-芐基-4-叔丁氧基羰基-2-酮-1-哌嗪基)丙酸(象EP-A365 992，例45中描述的那樣制備)以及例1a制成的化合物按例1b中描述的方法制成。
MS(FAB)703(M+H)例4N-〔2S-(3-芐氧基羰基氨基-3-苯基甲基-2-氧代-1-吡咯烷基)-3-(4-咪唑基)丙?！?(2S，3R，4S)-1-環(huán)己基-3，4-二羥基-6-(2-吡啶基)-2-己基胺題示化合物按例1b描述的方法由(2S)-((3R，S)-芐氧基羰基氨基-3-苯基甲基-2-氧代-1-吡咯烷基)-3-(4-咪唑基)丙酸制備(EP-A365 992，例62中揭示)以及例1a的化合物制備。
MS(FAB)737(M+H)例5N-〔2S-(3S-芐氧羰基氨基-3-苯基甲基-2-氧代-哌啶基)-3-(4-咪唑基)丙?！?2S，3R，4S)-1-環(huán)己基-3，4-二羥基-6-(2-吡啶基)-2-己基胺這種化合物的制備是通過(2S)-2-(1-叔丁氧羰基-4-咪唑基甲基)-3-((3S)-芐氧羰基氨基-3-苯基甲基)-2-氧代-1-哌啶基)乙酸鋰(EP-A365 992，例84中揭示)和例1a的化合物按例1b制成后在四氫呋喃(1ml)、乙酸(3ml)和水(1ml)中去除保護基團。
MS(FAB)753(M+H)例6N-〔3-(4-噻唑基)-2-(3R-芐基-4-N-1-嗎啉基羰基)2-酮-1-哌嗪基)丙?！?(2S，3R，4S)-1-環(huán)己基-3，4-二羥基-6-(2-吡啶基)-2-己基胺題示化合物通過3-(4-噻唑基)-2-(3R-芐基-4-(1-嗎啉基羰基)-2-酮-1-哌嗪基)丙酸(EP-A365 992，例129中揭示)以及例1a化合物按例1a的方法制成。
MS(FAB)733(M+H)例7N-〔3-(4-噻唑基)-2-(3R-芐基-4-對甲苯磺酰-2-酮-1-哌嗪基)丙?！?(2S，3R，4S)-1-環(huán)己基-3，4-二羥基-6-(2-吡啶基)-2-己基胺題示化合物通過3-(4-噻唑基)-2-(3R-芐基)-4-對甲苯磺酰-2-酮-1-哌嗪基)丙酸(EP-A365 992，例130中揭示)和例1a化合物按例1b的方法制成。
MS(FAB)774(M+H)例8N-〔3-(4-噻唑基)-2-(3R-芐基-4-(N-甲基哌嗪磺酰)-2-酮-1-哌嗪基)丙?！?(2S，3R，4S)-1-環(huán)己基-3，4-二羥基-6-(2-吡啶基)-2-己基胺題示化合物通過3-(4-噻唑基)-2-(3R-芐基-4-(N-甲基哌嗪磺酰)-2-酮-1-哌嗪基)丙酸(EP-A365 992，例141揭示)和例1a化合物按例1b的方法制成。
MS(FAB)782(M+H)
例9N-〔3-(4-咪唑基)-2-(3R-芐基-4-(N-甲基哌嗪磺酰)-2-酮-1-哌嗪基)丙?！?(2S，3R，4S)-1-環(huán)己基-3，4-二羥基-6-(2-吡啶基)-2-己基胺題示化合物通過3-(1N-叔丁氧羰基-4-咪唑基)-2-(3R-芐基-4-(N-甲基哌嗪磺酰)-2-酮-1-哌嗪基)丙酸(EP-A 365 992，例1和例2中揭示)和例1a化合物按例1b制成后在CH2Cl2中消去帶有CF3COOH的保護基團，而且提取處理。
MS(FAB)765(M+H)例10N-〔(2S)-((3S)-N-甲基哌嗪磺酰氨基-3-芐基甲基-2-氧代-1-哌啶基)-3-(4-噻唑基)丙酰〕-(2S，3R，4S)-1-環(huán)己基-3，4-二羥基-6-(2-吡啶基)-2-己基胺題示化合物通過(2S)-((3S)-N-甲基哌嗪磺酰氨基-3-苯基甲基-2-氧代-1-哌嗪基)-3-(4-噻唑基)丙酸(EP-A 365 992，例151中揭示)和例1a化合物按例1b的方法制成。
MS(FAB)796(M+H)例11N-〔(2S)-3-(4-咪唑基)-3-((3S)-4-甲苯磺酰氨基-3-芐基甲基-2-氧代-1-哌嗪基)丙?！?(2S，3R，4S)-1-環(huán)己基-3，4-二羥基-6-(2-吡啶基)-2-己基胺題示化合物通過(2S)-2-(1-叔丁氧羰基-4-咪唑基甲基)-3-((3S)-4-甲苯磺酰氨基-3-苯基甲基-2-氧代-1-哌嗪基)乙酸(EP-A 365 992，例155中揭示)和例1a化合物，按例1b的方法制成后在四氫呋喃乙酸/水消去保護基團。
MS(FAB)771(M+H)
權利要求
1.制備式(Ⅰ)化合物及其藥用鹽的方法
其中X為N，O或CH；R1可能空缺，或者是氫、N-保護基、芳基、雜環(huán)或R7-Q，其中1)R7等于短鏈烷基、氨基、烷氨基、二烷氨基、(烷氧烷)(烷)氨基，(烷氧烷氧烷)(烷)氨基芳基、芳烷基、氨烷基、N-被保護氨烷基、烷氧基、取代短鏈烷基，取代基選自烷氧基，烷硫基、鹵素，烷氧基、N-被保護(烷)氨基和二烷氨基，
m為1-5，R8為氫、羥基，烷氧基、烷硫基，烷氧烷氧基、多烷氧基，氨基，N-被保護氨基，烷氨基，N-被保護烷氨基或二烷氨基，
R9為O，S，SO2，O=C或R10N，其中R10為氫，短鏈烷基或N-保護基。Z)Q是C=O或CH2，這里當R1是一種N-保護基時，X等于N。R11S(O)2，R11等于氨基，烷氨基，二烷氨基，短鏈烷基，鹵代烷基，芳基，P-聯(lián)苯基，雜環(huán)或(R12)2P(O)，其中R12等于烷氧基，烷氨-基或二烷氨基，A和L是相互獨立的、或者空缺，或者是C=O，SO2和CH2；D為C=O，SO2或CH2；Y為N或CH；R2為氫，短鏈烷基，環(huán)烷基烷基，-CH2-R13-(CH2)q-R14，其中q等于0，1或2；如果q等于1或2，R13或者空缺或者為O，NH或S；R14是烷基或雜環(huán)；Z為氫或-R15C(O)R16，-R15-C(S)R16，這里，R15等于NH，-N(R17)-，R17為短鏈烷基或芐基，或CH2，R16是烷氧基，芐氧基，烷氨基，二烷氨基，芳基或雜環(huán)。R3為氫，短鏈烷基，短鏈鏈烯基，環(huán)烷基烷基，環(huán)鏈烯基烷基，烷氧烷基，烷硫烷基，(烷氧烷氧)烷基，(多烷氧基)烷基，芳烷基或雜環(huán)取代烷基；n為0或1。R4是氫，(C1-C10)烷基，(C3-C6)環(huán)烷基，(C3-C8)環(huán)烷基-(C1-C4)烷基，(C6-C12)芳基或(C6-C12)芳基-(C1-C12)芳基-(C1-C4)烷基。R5是氫，(C1-C10)烷基，(C6-C12)芳基，(C5-C12)芳基-(C1-C4)烷基，羥基或氨基；R6是式(Ⅱ)的基團這里，R18為氫，(C1-C7)烷基，(C1-C4)烷氧基，(C1-C4)烷硫基，(C1-C4)烷氨基，羥基，疊氮基或鹵素，Het是一種5到7圓雜環(huán)，這種雜環(huán)可是苯稠合的，芳香的，部分或完全氫化，它包含一或兩個相同或不同的基作為其雜原子。這些基選自含N、O、S、NO，SO，SO2，能為一或兩個相同的或不同的基所取代，取代基選自(C1-C4)烷基，烯丙基，(C1-C4)烷氧基，羥基，鹵素，氨基，一或二-(C1-C4)烷氨基和CF3；并且S為0，1，2，3或4，及其藥用鹽，這里帶有未端羧基或它的活性衍生物的式(Ⅲ)的成分同帶有自由氨基的式(Ⅳ)的成分聯(lián)接起來。
這里暫時引入以保護其它官能團的合適的一或多個保護基被消除，以這種方式得到的化合物必要時，可轉(zhuǎn)換成藥用鹽。
2.如權利要求1的方法，其中各符號具有如下含義R4異丁基，芐基或環(huán)己基甲基;R5氫，(C1-C5)烷基，(C6-C10)芳基，(C6-C10)芳基-(C1-C4)烷基或羥基;R6式(Ⅱ)的基團，其中R18為氫，(C1-C4)烷基，(C1-C4)烷氧基，(C1-C4)烷硫基(C1-C4)烷氨基，羥基，疊氮基或鹵素。S 0，1或2。X N或CH，R1空缺、氫、芐基、2-吡啶基，1-哌嗪基、(4-oMe)苯基，叔丁氧羰基，異丁基，芐氧羰基，MezNC(O)-，4-甲基-1-哌嗪基羰基，1-嗎啉基羰基，P-甲苯磺?；?-甲基-1-哌嗪基磺酰;A和L是相互獨立的，或者空缺，或為CH2，D C＝O或CH2;Y 等于NR2氫或芐基;Z 氫、BOC-NH，CbZ-NH，P-甲苯磺酰氨基，4-甲基-1-哌嗪磺酰氨基，4-甲基-1-哌嗪基，N-甲基-N-(4-甲基-1-哌嗪基磺酰)氨基;R3氫、甲基、正丁基，4-咪唑基甲基，4-噻唑基甲基或N-BOC-4-(咪唑基甲基);并且n 零。其它符號如權利要求1定義，還包括其藥用鹽。
3.權利要求1的方法，其中各符號具有如下含義R4為異丁基、芐基或環(huán)己基甲基;R5為氫或羥基R6是式(Ⅱ)的基團，其中R18為氫或氟，Het為2-，3-或4-吡啶基，2-，4-或5-咪唑基或2-噁唑基，這里所說的雜環(huán)都能由一或兩個相同或不同的基所取代，取代基選自甲基，乙基，丙基，烷基，氟，氯，溴，CF3和甲氧基，并且S 為0，1或2;其它基團和變量如權利要求1中所定義，還包括其藥用鹽。
4.制造包含權利要求1中所制備的化合物的藥物組合物的方法，這種方法包括用這種化合物同藥用載體一起及必要時的其它添加劑制成合適的劑量形式。
全文摘要
式(Ⅰ)的化合物
文檔編號A61K31/495GK1068112SQ9210488
公開日1993年1月20日 申請日期1992年6月20日 優(yōu)先權日1991年6月21日
發(fā)明者H·海特茨, R·海寧, H·烏爾巴赫, D·魯伯特, W·林茨 申請人:赫徹斯特股份公司