本發(fā)明屬于人體激素新用途技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及催乳素在治療椎間盤退變過程中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

椎間盤退變（intervertebraldiscdegeneration，ivdd）是現(xiàn)代社會(huì)引起人們腰背痛（lowbackpain，lbp）的主要原因之一，并且給人的生理、心理和經(jīng)濟(jì)帶來嚴(yán)重的負(fù)擔(dān)，但是我們對(duì)于ivdd發(fā)生的具體機(jī)制仍不明確，各種非手術(shù)治療的療效也并不顯著，大多數(shù)患者需行髓核摘除手術(shù)，而且手術(shù)具有一定的創(chuàng)傷，因此如何有效地防治ivdd已成為骨科領(lǐng)域的一個(gè)重要課題。

催乳素（prolactin，prl）主要由下丘腦脊髓灰質(zhì)前角分泌，是一種含有199個(gè)氨基酸及三個(gè)二硫鍵的多肽激素，主要作用為促進(jìn)乳腺發(fā)育、刺激并維持泌乳。近年來的研究發(fā)現(xiàn)prl還參與了神經(jīng)系統(tǒng)、骨骼系統(tǒng)以及視覺障礙等的調(diào)控。但是目前尚無研究證明prl對(duì)椎間盤退變的作用，本發(fā)明由此而來。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種催乳素的新用途，特別是抑制椎間盤髓核內(nèi)的炎癥反應(yīng)和細(xì)胞凋亡的用途，為預(yù)防和治療椎間盤退變提供了一種新途徑。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供以下技術(shù)方案：

本發(fā)明技術(shù)方案首先通過在大鼠椎間盤局部注射外源性的催乳素（prolactin，prl）來研究prl是否能延緩椎間盤的退變，同時(shí)測(cè)定腫瘤壞死因子-α（tnf-α）和白介素-1β（il-1β）等炎癥因子的表達(dá)與椎間盤治療的關(guān)系，并且通過計(jì)算凋亡的髓核細(xì)胞來明確prl對(duì)髓核細(xì)胞凋亡的作用。

本發(fā)明人通過使用20g針頭對(duì)sd大鼠的第7-8尾椎（co7-8，n=80）和第8-9尾椎（co8-9，n=80）進(jìn)行針扎穿刺來建立椎間盤退變模型（hanetal.spine.2008），并將每只大鼠的co7-8作為注射外源性prl的prl治療組，co8-9作為注射等量（2μl）生理鹽水vehicle組，未做任何操作co9-10作為control組（n=80）。其中prl治療組又隨機(jī)等分為高劑量組（100μg/ml）和低劑量組（10μg/ml）。為了保證局部藥物濃度，從穿刺那天注射開始，每周進(jìn)行一次prl或pbs的注射。于術(shù)后4d，7d，14d，28d每次隨機(jī)抽取10只prl高劑量治療組和10只prl低劑量治療組的大鼠進(jìn)行x-ray和mri檢查，測(cè)量椎間盤高度并分析mri信號(hào)強(qiáng)度。隨后處死并收集標(biāo)本進(jìn)行組織學(xué)檢查，觀察椎間盤的形態(tài)學(xué)變化，以及測(cè)量髓核內(nèi)膠原含量、炎癥因子表達(dá)和凋亡細(xì)胞來分析椎間盤退變程度。采用單因素方差分析對(duì)各組數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

本發(fā)明中的prl采用本領(lǐng)域常規(guī)的方法制備成適用于胃腸道或非胃腸道給藥的藥物制劑，本發(fā)明優(yōu)選將prl通過人工提取或合成的方式制備成粉劑，使用生理鹽水溶解后進(jìn)行局部注射，這樣可以大大減少手術(shù)的創(chuàng)傷。在本發(fā)明中prl藥物組合物的藥物制劑中，根據(jù)不同的制劑形式或制劑規(guī)格，所述藥物制劑中，prl的含量可以為質(zhì)量計(jì)為1～99%，優(yōu)選為10～90%；本發(fā)明所述的藥學(xué)上可接受的載體為組合物中制劑使用的輔料，可采用本領(lǐng)域常規(guī)的輔料，以不和本發(fā)明活性成分發(fā)生反應(yīng)或不影響本發(fā)明藥物的療效為前提，所述制劑的制備方法可采用本領(lǐng)域常規(guī)的制備方法進(jìn)行制備。

本發(fā)明中，組合物的制備方法沒有限制，prl直接做成制劑，或者分別或/和輔料混合后做成制劑，然后按照本領(lǐng)域常規(guī)的方式進(jìn)行包裝，與其它輔料混合制成制劑。本發(fā)明中的藥物組合物的給藥劑量根據(jù)給藥對(duì)象、給藥途徑或藥物的制劑形式不同可以進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兓?，但以保證該藥物組合物在哺乳動(dòng)物體內(nèi)能夠達(dá)到有效的血藥濃度為前提。

有益效果：本發(fā)明通過應(yīng)用針扎穿刺來建立大鼠尾椎間盤退變模型，觀察催乳素對(duì)椎間盤退變的治療作用，通過觀察椎間盤退變的各項(xiàng)指標(biāo)來評(píng)估prl對(duì)于椎間盤退變的治療作用。并且通過測(cè)定炎癥因子tnf-α和il-1β的表達(dá)和凋亡細(xì)胞的數(shù)量來闡明prl延緩椎間盤退變的作用機(jī)制。

本發(fā)明結(jié)果表明，vehicle組與control組相比，椎間盤高度于7d開始出現(xiàn)明顯下降（*p<0.05）。mri檢查相對(duì)于x-ray來說更加敏感，于4d就開始出現(xiàn)信號(hào)強(qiáng)度的減弱（*p<0.05），并且隨著時(shí)間差異變得更加明顯。prl治療有效的延緩了椎間盤高度的下降（#p<0.05），并且相比于vehicle組來說，mri信號(hào)強(qiáng)度更強(qiáng)（#p<0.05）。在高劑量治療組作用更明顯，與低劑量組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（$p<0.05）。組織學(xué)染色發(fā)現(xiàn)，vehicle組和control組相比，髓核容積變小，髓核細(xì)胞明顯丟失，纖維環(huán)呈現(xiàn)皺褶壓縮，組織學(xué)評(píng)分明顯升高（*p<0.05）。prl治療有效的保證了髓核細(xì)胞的含量，纖維環(huán)較vehicle組來說更加規(guī)則，組織學(xué)評(píng)分明顯下降（#p<0.05）。通過免疫組化染色發(fā)現(xiàn)prl治療組比vehicle組含有更多的ii膠原（#p<0.05），進(jìn)一步證明了prl治療對(duì)椎間盤退變過程中細(xì)胞外基質(zhì)丟失的保護(hù)作用。另外，tnf-α和il-1β的免疫組化結(jié)果證實(shí)，prl可以有效的減少椎間盤退變過程中髓核內(nèi)炎癥因子的表達(dá)（#p<0.05）。tunel染色顯示了prl治療組相比于vehicle組，凋亡細(xì)胞明顯減少（#p<0.05）。

因此，髓核內(nèi)炎癥因子表達(dá)的上調(diào)和髓核細(xì)胞凋亡的增加可能是引起椎間盤退變的重要機(jī)制，prl通過下調(diào)炎癥因子減輕炎癥反應(yīng)，減少髓核細(xì)胞的凋亡來延緩椎間盤退變，這可能是prl對(duì)椎間盤退變防治作用的重要機(jī)制之一。

該動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)催乳素對(duì)椎間盤退變有一定的防治作用，可使髓核內(nèi)炎癥因子和凋亡細(xì)胞的表達(dá)下降，可作為治療椎間盤退變的一種新手段。

附圖說明

圖1為大鼠尾椎x-ray掃描圖像（a）以及%dhi趨勢(shì)統(tǒng)計(jì)圖（b）。

圖2為大鼠尾椎mri-t2加權(quán)像掃描圖像（a），以及mri分級(jí)評(píng)分（b）。

圖3為各實(shí)驗(yàn)組大鼠尾椎間盤he染色結(jié)果圖（a），以及組織學(xué)評(píng)分（b）。

圖4為各實(shí)驗(yàn)組大鼠尾椎間盤髓核內(nèi)collagenii免疫組化染色圖（a）以及collagenii深染區(qū)域統(tǒng)計(jì)結(jié)果（b）。

圖5為各實(shí)驗(yàn)組大鼠尾椎間盤髓核內(nèi)tnf-α和il-1β免疫組化染色圖（a）以及陽性細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果（b）。

圖6為各實(shí)驗(yàn)組大鼠尾椎間盤髓核內(nèi)tunel凋亡染色結(jié)果圖（a），以及凋亡指數(shù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果（b）。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合實(shí)施例及附圖對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的描述。

1、實(shí)驗(yàn)材料

1.1試劑及實(shí)驗(yàn)設(shè)備

1.1.1主要藥品及試劑

催乳素（prolactin,prl），購自sigma，美國；多聚甲醛、pbs、dab顯色劑、蘇木素、伊紅、無水乙醇、蒸餾水、10%水合氯醛購自上海優(yōu)寧維生物技術(shù)有限公司；tunel染色試劑盒購自roche，瑞士；collagenii、tnf-α、il-1β抗體，購自abcam，英國。

1.1.2主要儀器

x-ray和mri檢查機(jī)器（ge，美國）、石蠟切片機(jī)（leica2135，德國）、烤片機(jī)（leica1120，德國）、石蠟包埋機(jī)（bmj-ⅱ，中國，常州）、axiovert40c光學(xué)顯微鏡（zeiss，德國）、手術(shù)器械一套等。

1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

健康sd大鼠80只，雄性，體重450±50g，3個(gè)月齡，清潔級(jí)，由蘇州大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。喂養(yǎng)條件如下：五只一籠，室溫18～20℃，濕度50～60%，通風(fēng)良好，自由攝食進(jìn)水。

2、實(shí)驗(yàn)方法

2.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組

sd大鼠80只，使用20g針頭對(duì)sd大鼠的第7-8尾椎（co7-8，n=80）和第8-9尾椎（co8-9，n=80）進(jìn)行針扎穿刺來建立椎間盤退變模型。將每只大鼠的co7-8作為注射外源性prl的prl治療組，劑量為2μl，注射針頭為33g，co8-9作為注射等量生理鹽水的vehicle組，既往研究證實(shí)本研究所用的注射prl或pbs的針頭及劑量不會(huì)引起椎間盤退變（mao,etal.spine.2011；elliott,etal.spine.2008.）。未做任何操作co9-10（n=80）作為control組。其中prl治療組又隨機(jī)平分為高劑量組（100μg/ml，n=40）和低劑量組（10μg/ml，n=40）。

2.2大鼠椎間盤退變模型的制備

本發(fā)明采用20g針頭對(duì)80只sd大鼠的第7-8尾椎（co7-8）和第8-9尾椎（co8-9）進(jìn)行針扎穿刺來建立椎間盤退變模型（hanetal.spine.2008）。實(shí)驗(yàn)大鼠用10%水合氯醛3.5ml/kg腹腔內(nèi)注射麻醉，固定大鼠尾部，使用安爾碘消毒3遍后，通過椎體間的活動(dòng)間隙來確定椎間盤位置，使用20g針頭從椎間盤中心位置刺入并穿過，旋轉(zhuǎn)5s再停留30s后拔出。所有操作均保證無菌原則，手術(shù)過后禁食禁水10小時(shí)。

2.3標(biāo)本采集

于術(shù)后4d、7d、14d、28d分別每次隨機(jī)抽取10只prl高劑量治療組和10只prl低劑量治療組的大鼠先行x-ray和mri檢查，然后腹腔注射過量10%水合氯醛。待大鼠死亡，將大鼠尾部從第6-7椎間隙切下，保留中間第7-8、8-9、9-10椎間盤，切除余下尾部，置于4%多聚甲醛固定24h后，再以10%edta脫鈣4周，石蠟包埋，進(jìn)行組織學(xué)檢測(cè)。

2.4實(shí)驗(yàn)動(dòng)物一般情況

各組動(dòng)物均在術(shù)后30～60min內(nèi)蘇醒，可在籠內(nèi)自由活動(dòng)，正常進(jìn)食，精神狀態(tài)無明顯變化。無穿刺點(diǎn)無紅腫、滲液等炎性反應(yīng)。實(shí)驗(yàn)過程中無動(dòng)物死亡。

實(shí)施例1影像學(xué)檢測(cè)

所有大鼠在處死前先行x-ray和mri檢查。x-ray檢查：瞄準(zhǔn)儀距大鼠距離：66cm，曝光電流時(shí)間積：63mas，穿透電壓：35kv。mri使用1.5t磁場(chǎng)強(qiáng)度機(jī)器（ge，usa）進(jìn)行檢查獲取t2加權(quán)像圖像：飽和時(shí)間：3000ms，回聲時(shí)間：80ms，視野范圍：200mm×200mm，層面厚度：1.4mm。將所得x-ray圖像使用東軟圖像分析系統(tǒng)來測(cè)量椎間盤高度并計(jì)算椎間盤高度指數(shù)（dhi%）。mri圖像根據(jù)改良型湯普森評(píng)分來評(píng)價(jià)椎間盤退變程度（masuda,etal.spine.2005），共分4級(jí)：①1級(jí)為正常；②2級(jí)為信號(hào)輕度減弱，伴有高信號(hào)區(qū)范圍的縮?。虎?級(jí)為信號(hào)中度減弱；④4級(jí)為信號(hào)重度減弱。

x-ray圖像分析：大鼠尾椎穿刺造模后，相較于未做手術(shù)的第9-10椎間盤（control組），注入生理鹽水的第8-9椎間盤（vehicle組）的高度明顯下降，椎間盤高度指數(shù)（%dhi）差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（*p<0.05）；而注入prl的第7-8椎間盤（prl治療組）較vehicle組椎間盤高度下降明顯延緩（#p<0.05）；而且高劑量prl治療組相比于低劑量prl治療組效果更明顯（$p<0.05）。見圖1。

mri分析：vehicle組與control組相比，t2加權(quán)像信號(hào)強(qiáng)度明顯降低，湯普森評(píng)分差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（*p<0.05）；而用prl治療后，prl治療組的椎體t2加權(quán)像信號(hào)強(qiáng)度較vehicle組明顯增強(qiáng)，湯普森評(píng)分降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（#p<0.05），提示prl能減輕穿刺引起的椎間盤退變。見圖2。

組織學(xué)染色

大鼠尾椎經(jīng)10%edta脫鈣后，常規(guī)石蠟包埋。取冠狀位，連續(xù)切片，片厚5μm。分別行he、免疫組化和tunel染色。

實(shí)施例2he染色

he染色的步驟為：

（1）石蠟切片經(jīng)二甲苯（15min×2次）脫蠟后，依次經(jīng)過100%、100%、95%、90%，85%的乙醇至水，每道10min；

（2）蒸餾水沖洗3min，蘇木素溶液染色5min，自來水沖洗2min；

（3）1％鹽酸酒精溶液分化30s，自來水沖洗1min；

（4）10％氨水溶液中反藍(lán)30s，自來水沖洗1min；

（5）l％伊紅溶液復(fù)染5min，自來水沖洗1min；

（6）常規(guī)脫水、透明、封片。

光鏡下，control組的髓核呈橢圓而飽滿，里面含有豐富的脊索細(xì)胞和類軟骨細(xì)胞通過細(xì)胞外基質(zhì)的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)規(guī)則的排列，纖維環(huán)呈現(xiàn)規(guī)則而完整的圓環(huán)狀包裹著髓核。vehicle組和control組相比，髓核容積變小，髓核細(xì)胞明顯丟失，纖維環(huán)呈現(xiàn)皺褶壓縮，組織學(xué)評(píng)分明顯升高（*p<0.05）。prl治療有效的保證了髓核細(xì)胞的含量，纖維環(huán)較vehicle組來說更加規(guī)則，組織學(xué)評(píng)分明顯下降（#p<0.05）。見圖3。

實(shí)施例3免疫組化染色

免疫組化染色的步驟為：

（1）石蠟切片脫蠟和水化后，用pbs(0.01m，ph7.5±0.1)沖洗三次，每次3分鐘。

（2）ph6.0檸檬酸緩沖液高溫高壓修復(fù)。

（3）每張切片加1滴或50ul過氧化酶阻斷溶液，室溫下孵育10min，以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶的活性。pbs沖洗三次，每次3min。

（4）除去pbs液，每張切片加1滴或50ul正常非免疫動(dòng)物血清，室溫下孵育10min。

（5）除去血清，所有切片平均分成3組分別加1滴1∶200稀釋的collagenii、tnf-α、il-1β抗體，室溫下孵育60min。

（6）pbs沖洗三次，每次3～5分鐘。除去pbs液，每張切片加1滴或50ul生物素標(biāo)記的第二抗體，室溫下孵育10min。pbs沖洗三次，每次3min。

（7）除去pbs液，每張切片加1滴或50ul鏈霉素抗生物素-過氧化物酶溶液，室溫下孵育10min。pbs沖洗三次，每次3min。

（8）除去pbs液，每張切片加2滴或100ul新鮮配制的dab溶液，顯微鏡下觀察3～10min。

（9）自來水沖洗，蘇木素復(fù)染，pbs沖洗返藍(lán)。

陰性對(duì)照片：用0.01mol/lpbs液代替一抗，其余步驟同上。

結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)：陽性染色為棕色或棕黃色。高倍鏡(10×40)下觀察髓核內(nèi)的染色情況，以無染色為陰性(-)，輕度或局部染色為(+)，全層重度或強(qiáng)烈染色為(+++)，介于兩者之間為(++)。

collagenii染色：control組的ii型膠原染色呈現(xiàn)棕色深染成網(wǎng)狀交織排列在細(xì)胞之間的陽性區(qū)域，而vehicle組的陽性區(qū)域顏色明顯降低，排列較為稀疏散亂，陽性區(qū)域僅為control組的51%（*p<0.05）。prl治療組較vehicle組相比具有更豐富的陽性區(qū)域染色，顏色也較深（#p<0.05）。其中高劑量治療組比低劑量治療組呈現(xiàn)更明顯的治療效果（$p<0.05）。見圖4。

tnf-α和il-1β染色：大鼠尾椎穿刺造模使vehicle組的椎間盤髓核內(nèi)陽性炎癥細(xì)胞明顯增高（*p<0.05），而control組幾乎找不到明顯的陽性細(xì)胞。prl注射有效的減少了炎癥細(xì)胞的表達(dá)（#p<0.05），而高劑量治療組比低劑量治療組更有效果（$p<0.05）。見圖5。

實(shí)施例4tunel凋亡染色

tunel凋亡染色的步驟為：

（1）石蠟切片脫蠟和水化后，用pbs(0.01m，ph7.5±0.1)沖洗三次，每次3分鐘。

（2）使用蛋白酶k（15μg/ml）修復(fù)15min。pbs沖洗三次，每次3min。

（3）每張切片加1滴或50ul過氧化酶阻斷溶液，室溫下孵育10min，以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶的活性。pbs沖洗三次，每次3min。

（4）除去pbs液，每張切片加1滴或50ul的tunel反應(yīng)混合液，室溫下孵育60min。

（5）pbs沖洗三次，每次3～5分鐘。除去pbs液，每張切片加1滴或50ulpod覆蓋液，室溫下孵育30min。pbs沖洗三次，每次3min。

（6）除去pbs液，每張切片加2滴或100ul新鮮配制的dab溶液，顯微鏡下觀察3～10min。

（7）自來水沖洗，蘇木素復(fù)染，pbs沖洗返藍(lán)。

陰性對(duì)照片：用0.01mol/lpbs液代替一抗，其余步驟同上。

結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)：陽性染色為棕色或棕黃色。高倍鏡(10×40)下觀察髓核內(nèi)的染色情況，以無染色為陰性(-)，輕度或局部染色為(+)，全層重度或強(qiáng)烈染色為(+++)，介于兩者之間為(++)。

tunel凋亡染色結(jié)果顯示，control組幾乎找不到被凋亡反應(yīng)物標(biāo)記深染的陽性細(xì)胞，凋亡指數(shù)為5.8±0.7%，而vehicle組可見大量被標(biāo)記深染的陽性細(xì)胞，凋亡指數(shù)高達(dá)43.8±2.9%，與control組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（*p<0.05）。而prl治療有效的減少了髓核內(nèi)凋亡細(xì)胞的表達(dá)，其中高劑量治療組凋亡指數(shù)為9.4±1.0%，而低劑量治療組凋亡指數(shù)為17.2±1.1%，與vehicle組相比均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（#p<0.05）。而高劑量治療組比低劑量治療組對(duì)于減少凋亡細(xì)胞更有效（$p<0.05）。見圖6。

統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

結(jié)果數(shù)據(jù)采用spss11.0統(tǒng)計(jì)軟件分析，數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，多組比較選用單因素方差分析（one-wayanova檢驗(yàn)），兩兩比較在總體方差齊的條件下，選用lsd及dunnett-t法進(jìn)行分析。p<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

本實(shí)驗(yàn)通過椎間盤髓核內(nèi)注入外源性的prl干預(yù)大鼠尾椎間盤退變的模型，結(jié)果表明prl治療可有效的減緩椎間盤高度下降及mri信號(hào)強(qiáng)度的減弱，對(duì)于保持椎間盤組織結(jié)構(gòu)的完整性也發(fā)揮著重要的作用，同時(shí)減少髓核內(nèi)ii型膠原的丟失，并且有效的減少髓核內(nèi)炎癥因子和凋亡細(xì)胞表達(dá)。證明prl對(duì)椎間盤退變有一定的治療作用，且高劑量的作用較為明顯。

從以上結(jié)果得出：prl對(duì)椎間盤退變的作用機(jī)制與其抑制炎癥因子誘導(dǎo)的髓核細(xì)胞凋亡有關(guān)。tnf-α和il-1β被認(rèn)為在椎間盤退變過程中起著至關(guān)重要的作用。它們不僅可以誘導(dǎo)基質(zhì)金屬酶的表達(dá)從而引起細(xì)胞外基質(zhì)的丟失，還可以進(jìn)一步增強(qiáng)其他炎癥因子的表達(dá)共同作用于椎間盤退變。tnf-α和il-1β也可以誘導(dǎo)髓核細(xì)胞的凋亡，從而使髓核內(nèi)細(xì)胞數(shù)量減少，失去儲(chǔ)水能力而進(jìn)一步加重椎間盤退變。在本實(shí)驗(yàn)中，prl治療后，大鼠椎間盤髓核內(nèi)的tnf-α和il-1β的表達(dá)明顯下降，而且通過tunel凋亡染色發(fā)現(xiàn)髓核細(xì)胞的凋亡也明顯減少。說明prl對(duì)椎間盤退變的治療作用與降低tnf-α和il-1β的表達(dá)、減少髓核細(xì)胞凋亡有關(guān)。

實(shí)施例5治療椎間盤退變的藥物制劑

pro凍干劑的制備：

取prl、凍干保護(hù)劑（甘露醇和蔗糖的混合物）和氧化還原穩(wěn)定劑（牛血清蛋白、甲硫氨酸、l-精氨酸、組氨酸和環(huán)糊精），按重量比1：25：10的比例，按照常規(guī)方法制成凍干劑。

prl片劑的制備：

取prl、蔗糖和糊精按重量比1：3：1的比例，按常規(guī)方法制成片劑。

prl顆粒劑的制備：

取prl、蔗糖和糊精按重量比1：3：1的比例，按常規(guī)方法制成顆粒。

prl膠囊劑的制備：

取prl、蔗糖和糊精按重量比1：3：1的比例，按常規(guī)方法制成顆粒，按常規(guī)方法灌制膠囊。