本發(fā)明涉及一種脂肪酶可濕性粉劑及其在蠶業(yè)養(yǎng)殖中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

脂肪酶(lipase，ec3.1.1.3)，即三酰基甘油?；饷?，是一類能催化長(zhǎng)鏈脂肪酸甘油酯水解、也可以催化該反應(yīng)的逆反應(yīng)—酯化反應(yīng)的酶。脂肪酶在生物體內(nèi)具有重要的生理功能，外源脂肪需要經(jīng)過(guò)脂肪酶消化分解后才能透過(guò)細(xì)胞膜，體內(nèi)脂肪的儲(chǔ)藏和動(dòng)用也少不了脂肪酶，脂肪酶也參與了細(xì)胞內(nèi)脂類代謝。脂肪酶分解三酰甘油所產(chǎn)生的單酰甘油、脂肪酸和甘油除了作為生物體的能源外，還是合成磷脂、鞘脂等具有重要生理功能類脂的前體。脂肪酶不但有利于外源脂肪消化吸收，還能使飼料原料中含有的脂肪釋放出來(lái)，滿足動(dòng)物對(duì)脂肪的需要。脂肪酶因具有無(wú)污染、反應(yīng)條件溫和等優(yōu)點(diǎn)，現(xiàn)已被洗滌、制革、食品、飼料等傳統(tǒng)領(lǐng)域廣泛應(yīng)用。

目前脂肪酶作為飼料添加劑已經(jīng)獲得了國(guó)家批準(zhǔn)，國(guó)內(nèi)外約十多家公司在生產(chǎn)飼料級(jí)脂肪酶。通過(guò)脂肪酶在飼料中的應(yīng)用，可以在很大程度上改善動(dòng)物內(nèi)源性消化酶匱乏的缺點(diǎn)，并且促進(jìn)脂肪的消化以及動(dòng)物的快速生長(zhǎng)，因此脂肪酶在動(dòng)物飼料中的應(yīng)用前景肯定會(huì)愈加寬廣。

蠶是一種有巨大經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益的經(jīng)濟(jì)昆蟲，在紡織、食品、醫(yī)藥等行業(yè)有重要的應(yīng)用價(jià)值。蠶的品種包括桑蠶、柞蠶、蓖麻蠶、木薯蠶、馬桑蠶、惠利蠶、天蠶、琥珀蠶、樟蠶、栗蠶、樗蠶、烏桕蠶、柳蠶等。目前應(yīng)用于蠶養(yǎng)殖中的產(chǎn)品大部分為蠶飼料，所添加物質(zhì)為氨基酸、維生素、抗菌劑等物質(zhì)，一直存在葉絲轉(zhuǎn)化率低(10％左右)的問(wèn)題，同時(shí)每年因蠶病發(fā)生導(dǎo)致的蠶繭損失量達(dá)10％以上，因此如何提高葉絲轉(zhuǎn)化率，減少蠶病的發(fā)生率是蠶業(yè)生產(chǎn)上面臨的重要課題。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

針對(duì)上述問(wèn)題，本發(fā)明提出了一種脂肪酶可濕性粉劑，并將其創(chuàng)新性的應(yīng)用于蠶業(yè)養(yǎng)殖中，明顯促進(jìn)了蠶的生長(zhǎng)發(fā)育，提高了蠶的抗病性和蠶繭產(chǎn)量。

發(fā)明人在研究過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，脂肪酶為中性或堿性脂肪酶，一般在堿性環(huán)境下酶活較高且較為穩(wěn)定，而蠶屬于昆蟲，與一般動(dòng)物消化系統(tǒng)不同，其消化液呈堿性，因此脂肪酶的性質(zhì)適合在蠶的養(yǎng)殖中應(yīng)用，脂肪酶對(duì)提高葉片在蠶體內(nèi)的轉(zhuǎn)化率、減少蠶病的發(fā)生率、提高蠶絲產(chǎn)量和品質(zhì)具有顯著的作用。

然而，蠶對(duì)脂肪酶的取食量是保障脂肪酶應(yīng)用效果的一個(gè)關(guān)鍵問(wèn)題。由于蠶主要是取食桑葉、柞樹葉等來(lái)完成生長(zhǎng)發(fā)育的，因此如何提高脂肪酶在葉片上殘留量，提高抗雨水沖刷和陽(yáng)光照射能力是提高脂肪酶應(yīng)用效果的一個(gè)關(guān)鍵技術(shù)，同時(shí)如何簡(jiǎn)便快捷的施用脂肪酶也顯得尤其重要。眾所周知，脂肪酶原粉不易溶于水，在使用過(guò)程中溶解性不好造成噴施時(shí)不均勻，噴施后大部分酶液順著葉片滴到地上，延展性和滲透性不好，不能粘附到葉片上，抗雨水沖刷能力弱，原酶主要成分是蛋白質(zhì)，陽(yáng)光照射后酶活性易損失。

針對(duì)上述的問(wèn)題，本發(fā)明借鑒農(nóng)藥制劑的加工方式，提出了一種脂肪酶可濕性粉劑。

本發(fā)明所述的一種脂肪酶可濕性粉劑，以質(zhì)量百分比計(jì)，其原料組成為：脂肪酶原粉75-85％，潤(rùn)濕劑5-12％，分散劑5-12％，穩(wěn)定劑1-3％，保護(hù)劑1-3％。

本發(fā)明所述的潤(rùn)濕劑選自烷基多糖苷或司盤或吐溫或其混合物。

所述分散劑為木質(zhì)素磺酸鈣或木質(zhì)素磺酸鈉或白炭黑或其混合物。

所述穩(wěn)定劑為na2co3或k2hpo4或羧甲基淀粉或黃原膠或檸檬酸鈉或其混合物；所述保護(hù)劑為抗壞血酸或羧甲基纖維素或糊精或其混合物。

所述的脂肪酶原粉來(lái)源于動(dòng)物或植物或微生物中的脂肪酶，優(yōu)選來(lái)源于野生型微生物或基因工程微生物產(chǎn)生的堿性脂肪酶。脂肪酶原粉可通過(guò)各種商業(yè)途徑購(gòu)買得到，本領(lǐng)域所屬技術(shù)人員也可按照文獻(xiàn)中所公開的方法制備得到脂肪酶原粉。

所述的脂肪酶原粉是經(jīng)噴霧干燥、冷凍干燥獲得的粉狀脂肪酶。

所述的脂肪酶可濕性粉劑中，起主要作用的是潤(rùn)濕劑，潤(rùn)濕劑是一類能降低液固界面張力，增加液體對(duì)固體表面的接觸或增加對(duì)固體表面的潤(rùn)濕和擴(kuò)展的物質(zhì)。潤(rùn)濕劑的作用主要是提高藥劑在水中的潤(rùn)濕分散性、改善藥液的滲透性以及在處理對(duì)象上的延展性?？龟?yáng)光照射能力主要是通過(guò)添加穩(wěn)定劑和保護(hù)劑來(lái)實(shí)現(xiàn)。本發(fā)明所述的各個(gè)成分綜合作用，提高了脂肪酶在葉片上的殘留量，提高了抗雨水沖刷和陽(yáng)光照射的能力。

將脂肪酶原粉制成可濕性粉劑的形式可以使其應(yīng)用簡(jiǎn)便快捷，比起單純的粉劑，可濕性粉劑中添加了潤(rùn)濕劑和分散劑，加到水中后能被水濕潤(rùn)、分散、形成懸浮液，噴灑施用過(guò)程中保證噴施的更均勻，同時(shí)噴施后附著性強(qiáng)，飄移少，能夠更好的發(fā)揮作用。

本發(fā)明所述的脂肪酶可濕性粉劑通過(guò)以下方法加工而成：將脂肪酶原粉、潤(rùn)濕劑、分散劑、穩(wěn)定劑和保護(hù)劑按比例混合均勻后，過(guò)篩，去除大顆粒，用氣流粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎，混合均勻后即得脂肪酶制劑。

脂肪酶作為一種生物催化劑能夠作用于柞樹葉等的葉表面，水解葉片表面不易被蠶分解的結(jié)構(gòu)，水解葉片中的脂肪，提高葉片中營(yíng)養(yǎng)成分的利用率，進(jìn)而提高蠶繭產(chǎn)量，同時(shí)提高蠶的抗病能力，提高健蛹率。

將所述的脂肪酶可濕性粉劑應(yīng)用于蠶業(yè)養(yǎng)殖中的，具體步驟為：將脂肪酶可濕性粉劑按照實(shí)際使用量?jī)端♂?0倍-200倍，攪拌至全部溶解后噴霧于田間桑葉或柞樹葉上，晾干后采摘喂食蠶；或?qū)⑷芙夂蟮闹久缚蓾裥苑蹌﹪婌F于適量葉上，攤開晾干葉片后飼喂蠶。

其中，所述晾干為自然干燥。待葉片自然晾干后添食飼喂蠶，可避免蠶食入過(guò)多水分，影響葉片的消化和吸收，喂食量視蠶取食量決定。

本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)：

(1)本發(fā)明創(chuàng)新性的提出脂肪酶作為添加劑應(yīng)用于蠶業(yè)養(yǎng)殖上，對(duì)于提高蠶是生長(zhǎng)發(fā)育，提高蠶繭量、健蛹率等因素具有顯著效果，并且適用于所有養(yǎng)殖的蠶的品種和所有齡期，具有通用性。

(2)本發(fā)明公開的脂肪酶可濕性粉劑特別適用于葉片噴霧使用，能夠增加脂肪酶在葉片上的附著性，并且能延長(zhǎng)在田間自然條件下的持效性。

(3)本發(fā)明的脂肪酶可濕性粉劑的制備方法具有工藝簡(jiǎn)單、成本低廉和易于工業(yè)化生產(chǎn)等特點(diǎn)，脂肪酶制劑對(duì)環(huán)境、人畜安全無(wú)毒、無(wú)殘留；使用方法簡(jiǎn)便、施用劑量小、增產(chǎn)效果明顯、易于推廣應(yīng)用等優(yōu)點(diǎn)。

具體實(shí)施方式

為了進(jìn)一步闡述本發(fā)明，下面給出一系列實(shí)施例。這些實(shí)施例完全是例證性的，它們僅用來(lái)對(duì)本發(fā)明進(jìn)行具體描述，不應(yīng)當(dāng)理解為對(duì)本發(fā)明的限制。

實(shí)施例1

一種脂肪酶可濕性粉劑，每100g所述脂肪酶可濕性粉劑中含有脂肪酶原粉75.0g，司盤-805.0g、吐溫-805.0g、白炭黑5.36g、木質(zhì)素磺酸鈉5.6g、磷酸氫二鉀1.04g、檸檬酸鈉1.0g、糊精2.0g。

上述脂肪酶可濕性粉劑通過(guò)以下方法加工而成：將脂肪酶原粉、司盤-80、吐溫-80、白炭黑、木質(zhì)素磺酸鈉、磷酸氫二鉀、檸檬酸鈉、糊精等原料按比例配制好后倒入攪拌機(jī)中攪拌均勻，然后過(guò)80目篩，去除大顆粒后經(jīng)300目氣流粉碎機(jī)粉碎，混合均勻。

實(shí)施例2

一種脂肪酶可濕性粉劑，每100g所述脂肪酶可濕性粉劑中含有脂肪酶原粉78.5g，烷基多糖苷(apg-1214)6.9g、木質(zhì)素磺酸鈉5g、白炭黑4g、碳酸鈉1.6g、檸檬酸鈉1g、羧甲基纖維素3g。

上述脂肪酶可濕性粉劑通過(guò)以下方法加工而成：將脂肪酶原粉、烷基多糖苷(apg-1214)、白炭黑、木質(zhì)素磺酸鈉、碳酸鈉、檸檬酸鈉、羧甲基纖維素等原料按比例配制好后倒入攪拌機(jī)中攪拌均勻，然后過(guò)80目篩，去除大顆粒后經(jīng)300目氣流粉碎機(jī)粉碎，混合均勻。

實(shí)施例3

一種脂肪酶可濕性粉劑，每100g所述脂肪酶制劑中含有脂肪酶原粉80.0g，烷基多糖苷(apg-1214)5.04g、白炭黑3.36g、木質(zhì)素磺酸鈣5.6g、羧甲基淀粉2.0g、黃原膠1.0g、抗壞血酸3.0g。

上述脂肪酶可濕性粉劑通過(guò)以下方法加工而成：將脂肪酶原粉、烷基多糖苷(apg-1214)、白炭黑、木質(zhì)素磺酸鈣、黃原膠、羧甲基淀粉、抗壞血酸等原料按比例倒入攪拌機(jī)中攪拌均勻，然后過(guò)80目篩去除大顆粒，用300目氣流粉碎機(jī)粉碎后混合均勻。

實(shí)施例4

一種脂肪酶可濕性粉劑，每100g所述脂肪酶可濕性粉劑中含有脂肪酶原粉81.5g，烷基多糖苷(apg-1214)5.8g、白炭黑3.4g、木質(zhì)素磺酸鈣4.8g、羧甲基纖維素鈉1.5g、碳酸鈉1.0g、羧甲基淀粉2.0g。

上述脂肪酶可濕性粉劑通過(guò)以下方法加工而成：將脂肪酶原粉、烷基多糖苷(apg-1214)、白炭黑、木質(zhì)素磺酸鈣、羧甲基纖維素鈉、碳酸鈉、羧甲基淀粉等原料按比例配制好后倒入攪拌機(jī)中攪拌均勻，然后過(guò)80目篩，去除大顆粒后經(jīng)300目氣流粉碎機(jī)粉碎，混合均勻。

實(shí)施例5

一種脂肪酶可濕性粉劑，每100g所述脂肪酶可濕性粉劑中含有脂肪酶原粉85g，司盤-805.5g、木質(zhì)素磺酸鈣6.3g、羧甲基淀粉1.5g、羧甲基纖維素鈉1.7g。

上述脂肪酶可濕性粉劑通過(guò)以下方法加工而成：將脂肪酶原粉、司盤-80、木質(zhì)素磺酸鈣、羧甲基淀粉、羧甲基纖維素鈉等原料按比例配制好后倒入攪拌機(jī)中攪拌均勻，然后過(guò)80目篩，去除大顆粒后經(jīng)300目氣流粉碎機(jī)粉碎，混合均勻。

實(shí)驗(yàn)例1脂肪酶制劑在3齡起桑蠶養(yǎng)殖上的應(yīng)用

實(shí)驗(yàn)樣品為實(shí)施例1制備的脂肪酶制劑100g，分別兌水5kg、10kg和20kg稀釋50倍、100倍和200倍成3個(gè)系列濃度。從桑樹上采集健康的桑葉，浸漬于以上述不同濃度的脂肪酶液中保持5-10s，取出后晾干。分別對(duì)3齡起家蠶飼喂處理后的桑葉，直至結(jié)繭；以用清水浸漬處理后晾干的桑葉飼喂家蠶為空白對(duì)照(ck)。家蠶結(jié)繭后5-7d后進(jìn)行收集，分別稱量并計(jì)算單粒全繭重、單粒繭層重和健蛹率等指標(biāo)。

從表1中的實(shí)驗(yàn)結(jié)果來(lái)看，從3齡起飼喂脂肪酶制劑對(duì)家蠶的生長(zhǎng)發(fā)育具有顯著影響，與對(duì)照相比，單粒全繭重、單粒繭層重和健蛹率等指標(biāo)均有較大的提高，說(shuō)明脂肪酶制劑對(duì)全繭量增產(chǎn)效果明顯，增產(chǎn)率達(dá)8％左右。

實(shí)驗(yàn)例2脂肪酶制劑在4齡起桑蠶養(yǎng)殖上的應(yīng)用

實(shí)驗(yàn)樣品為實(shí)施例2制備的脂肪酶制劑100g，分別兌水5kg、10kg和20kg稀釋成3個(gè)系列濃度。從桑樹上采集健康的桑葉，浸漬于以上述不同濃度的脂肪酶液中保持5-10s，取出后晾干。分別對(duì)4齡起家蠶飼喂處理后的桑葉，直至結(jié)繭；以用清水浸漬處理后晾干的桑葉飼喂家蠶為空白對(duì)照(ck)。家蠶結(jié)繭后5-7d后進(jìn)行收集，分別稱量并計(jì)算全繭量、繭層量、蛹體重量和健蛹率等指標(biāo)。

從表2中的實(shí)驗(yàn)結(jié)果來(lái)看，從4齡起飼喂脂肪酶制劑對(duì)家蠶的生長(zhǎng)發(fā)育具有明顯影響，與對(duì)照相比，單粒全繭重、單粒繭層重和健蛹率等指標(biāo)均有較大的提高，說(shuō)明脂肪酶制劑對(duì)全繭量增產(chǎn)效果明顯，增產(chǎn)率達(dá)7％左右。

實(shí)驗(yàn)例3脂肪酶制劑在5齡起桑蠶養(yǎng)殖上的應(yīng)用

實(shí)驗(yàn)樣品為實(shí)施例3制備的脂肪酶制劑100g，分別兌水5kg、10kg和20kg稀釋成3個(gè)系列濃度。從桑樹上采集健康的桑葉，浸漬于以上述不同濃度的脂肪酶液中保持5-10s，取出后晾干。分別對(duì)5齡起家蠶飼喂處理后的桑葉，直至結(jié)繭；以用清水浸漬處理后晾干的桑葉飼喂家蠶為空白對(duì)照(ck)。家蠶結(jié)繭后5-7d后進(jìn)行收集，分別稱量并計(jì)算全繭量、繭層量、蛹體重量和健蛹率等指標(biāo)。

從表3中的實(shí)驗(yàn)結(jié)果來(lái)看，從5齡起飼喂脂肪酶制劑對(duì)家蠶的生長(zhǎng)發(fā)育具有明顯影響，與對(duì)照相比，單粒全繭重、單粒繭層重和健蛹率等指標(biāo)均有較大的提高，說(shuō)明脂肪酶制劑對(duì)全繭量增產(chǎn)效果明顯，增產(chǎn)率達(dá)5％左右。

實(shí)驗(yàn)例4脂肪酶制劑在4齡起柞蠶養(yǎng)殖上的應(yīng)用

實(shí)驗(yàn)樣品為實(shí)施例4制備的脂肪酶制劑100g兌水10kg，攪拌均勻后配制成懸濁液。噴霧于柞樹上，4齡起柞蠶取食處理后的柞樹葉片，直至結(jié)繭；以用噴霧清水處理后的柞樹飼喂柞蠶為空白對(duì)照(ck)。柞蠶結(jié)繭5-7d后進(jìn)行收集，分別稱量并計(jì)算單粒全繭重、單粒繭層重和健蛹率等指標(biāo)。

從表4中的實(shí)驗(yàn)結(jié)果來(lái)看，從4齡起飼喂脂肪酶制劑對(duì)柞蠶的生長(zhǎng)發(fā)育具有顯著影響，與對(duì)照相比單粒全繭重、單粒繭層重和健蛹率等指標(biāo)均有較大的提高，說(shuō)明脂肪酶制劑對(duì)全繭量增產(chǎn)效果明顯，增產(chǎn)率達(dá)14％左右。

實(shí)驗(yàn)例5脂肪酶制劑在5齡起柞蠶養(yǎng)殖上的應(yīng)用

實(shí)驗(yàn)樣品為實(shí)施例5制備的脂肪酶制劑100g兌水10kg，攪拌均勻后配制成懸濁液。噴霧于柞樹上，5齡起柞蠶取食處理后的柞樹葉片，直至結(jié)繭；以用噴霧清水處理后的柞樹飼喂柞蠶為空白對(duì)照(ck)。柞蠶結(jié)繭5-7d后進(jìn)行收集，分別稱量并計(jì)算單粒全繭重、單粒繭層重和健蛹率等指標(biāo)。

從表5中的實(shí)驗(yàn)結(jié)果來(lái)看，從5齡起飼喂脂肪酶制劑對(duì)柞蠶的生長(zhǎng)發(fā)育具有顯著影響，與對(duì)照相比單粒全繭重、單粒繭層重和健蛹率等指標(biāo)均有較大的提高，說(shuō)明脂肪酶制劑對(duì)全繭量增產(chǎn)效果明顯，增產(chǎn)率達(dá)11％左右。

表1脂肪酶制劑對(duì)3齡起家蠶全繭量、繭層量和健蛹率的影響

表2脂肪酶制劑對(duì)4齡起家蠶全繭量、繭層量和健蛹率的影響

表3脂肪酶制劑對(duì)5齡起家蠶全繭量、繭層量和健蛹率的影響

表4脂肪酶制劑對(duì)4齡起柞蠶全繭量、繭層量和健蛹率的影響

表5脂肪酶制劑對(duì)5齡起柞蠶全繭量、繭層量和健蛹率的影響