本發(fā)明涉及眼科制劑，尤其涉及一種連翹苷滴眼液及其制備方法。
背景技術(shù)：
：炎癥反應(yīng)是機(jī)體收到外界物、化學(xué)、生物等有害刺激造成的機(jī)體損傷反應(yīng)，葡萄膜炎是一種累及葡萄膜、視網(wǎng)膜、視網(wǎng)膜血管及玻璃體的常見眼部炎癥疾病，多發(fā)生于青壯年及少年兒童，在致盲眼病中有重要地位。葡萄膜炎的發(fā)病機(jī)制十分復(fù)雜，主要認(rèn)為g陰性細(xì)菌感染是其發(fā)病的始動(dòng)因素。內(nèi)毒素(lipopolysaccharide,lps)是g陰性細(xì)胞多糖細(xì)胞壁的主要成分，是細(xì)菌感染引起的急性炎癥反應(yīng)的主要元兇，lps通過血液循環(huán)進(jìn)入機(jī)體，與lps結(jié)合蛋白lbp結(jié)合，形成二元復(fù)合物，而后lps在cd14的幫助下與細(xì)胞膜上toll樣受體4(tolllikereceptor4,tlr4)識(shí)別并結(jié)合，通過myd88依賴途徑活化nf-κb，促進(jìn)il-6、tnf-α、mcp-1等細(xì)胞因子的釋放，從而啟動(dòng)機(jī)體的炎癥反應(yīng)。白內(nèi)障是世界上首要致盲眼病，其病因尚未明確，有研究表明，氧自由基損傷是老年性白內(nèi)障發(fā)生的首位危險(xiǎn)因素。如自由基產(chǎn)生過多或清除過少，導(dǎo)致自由基聚集而產(chǎn)生晶體細(xì)胞、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)過氧化，隨之晶體發(fā)生渾濁。連翹苷具有很強(qiáng)的抗氧化作用，可以強(qiáng)有力地清除自由基，可以抑制低密度脂蛋白的氧化作用，對(duì)高密度脂蛋白的氧化也具有非常強(qiáng)的抑制作用。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：綜上所述，本發(fā)明有必要提供一種連翹苷滴眼液，對(duì)眼部刺激性小，適用于眼部用藥的。有必要提供一種上述連翹苷滴眼液的制備方法。一種連翹苷滴眼液，按其重量份包括以下組分：所述連翹苷占滴眼液重量百分比為1-5％。優(yōu)選地，連翹苷滴眼液，按其重量份包括以下組分：所述連翹苷占滴眼液重量百分比為3％。其中，滴眼液的ph值為5.5～7.5，滲透壓摩爾濃度為250～350mosmol/kg。其中，所述滲透壓調(diào)節(jié)劑選自氯化鈉、甘露醇中的一種或兩種。其中，所述ph調(diào)節(jié)劑選自為氫氧化鈉、鹽酸、枸櫞酸鈉、枸掾酸、硼酸、硼砂中的一種或多種。其中，所述抑菌劑選自硫柳汞、季銨鹽類、杜米芬、冼必泰、三氯叔丁醇、尼泊金類、三梨酸中的一種或多種。其中，所述增稠劑選自羥丙甲纖維素、甲基纖維素、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮中的一種或多種。其中，所述助溶劑為聚山梨酯-80或氫化蓖麻油。一種制備如上所述連翹苷滴眼液的制備方法：步驟1)、用聚卡波菲溶解連翹苷；步驟2)、將增稠劑用部分注射用水使其分散放冷，另用部分注射用水溶解ph調(diào)節(jié)劑、滲透壓調(diào)節(jié)劑、抑菌劑，攪勻過濾，合并二液；步驟3)、加入步驟1)已溶解了連翹苷的聚卡波菲，加注射用水至全量，過濾，分裝，即得滴眼液；制得的滴眼液的ph值為5.5～7.5，滲透壓摩爾濃度為250～350mosmol/kg。目前，眼科常用的抗炎鎮(zhèn)痛藥通常為非甾體抗炎藥(nsaids)，包括0.1％的普拉洛芬滴眼液、0.1％的雙氯芬酸鈉滴眼液、0.5％及0.4％的酮咯酸氨丁三醇滴眼液、0.03％的氟比洛芬鈉滴眼液、1.0％的蘇洛芬鈉滴眼液、奈帕芬胺、溴芬酸鈉、吲哚美辛等滴眼液等。nsaids滴眼液常見的不良反應(yīng)有灼痛、刺痛、流淚、結(jié)膜水腫和充血等，其他不良反應(yīng)還有角膜感覺異常、角膜上皮損傷、點(diǎn)狀角膜炎和角膜基質(zhì)浸潤(rùn)等。同時(shí)，角膜毒性以及眼部副作用可能與局部使用的防腐劑密切相關(guān)。另外，nsaids滴眼液慎用于如糖尿病、自身免疫性疾病、眼表疾病或眼部手術(shù)后早期角膜病變等。因此，臨床上非常需要安全、療效好、眼內(nèi)穿透力強(qiáng)、性質(zhì)穩(wěn)定的新品種眼科外用抗炎鎮(zhèn)痛藥。連翹苷為中藥提取物，有類非甾體抗炎藥(nsaids)的作用，有與對(duì)乙酰氨基酚類似的結(jié)構(gòu)，口服后在體內(nèi)代謝成trans-oh型藥物，與環(huán)氧化酶結(jié)合掩蓋了環(huán)氧化酶的活性中心，從而阻斷了該酶催化的花生四烯酸轉(zhuǎn)化為前列腺素的代謝過程，而發(fā)揮鎮(zhèn)痛、消炎作用，動(dòng)物試驗(yàn)證明其對(duì)冰醋酸誘發(fā)的小鼠疼痛模型具有明顯的抑制作用，能明顯延長(zhǎng)小鼠的疼痛潛伏期和減少小鼠的扭體反應(yīng)次數(shù)；對(duì)甲醛誘發(fā)的小鼠疼痛模型具有明顯的抑制作用，其鎮(zhèn)痛作用是通過外周發(fā)揮的，而非中樞性鎮(zhèn)痛。其鎮(zhèn)痛效果均衡，口服未見非甾體類抗炎鎮(zhèn)痛藥物的不良反應(yīng)，使用更安全，可長(zhǎng)期服用，副作用小。目前連翹苷為一類新藥，已獲得臨床批件，國(guó)內(nèi)外尚未上市，在臨床上擬用于解熱、消炎、鎮(zhèn)痛、抗病毒等病癥。由于血-眼屏障的原因，連翹苷的全身性用藥對(duì)于眼的局部炎癥沒有什么效果，但副作用較低。迄今為止，還沒有將連翹苷制備成眼用制劑的報(bào)道。本發(fā)明使用聚卡波菲作為粘膜粘附性聚合物釋藥系統(tǒng)，可以將水和活性分子連翹苷包埋在其中，形成穩(wěn)定的水性凝膠狀滴眼液，解決連翹苷在單純水溶液中溶解性和穩(wěn)定性差的問題。按本發(fā)明方法制備的連翹苷眼用制劑局部外用具有良好的眼內(nèi)穿透性，眼內(nèi)生物利用度較高，不良反應(yīng)發(fā)生率低，提高了臨床用藥安全性，而且原料易得，制備工藝簡(jiǎn)單可行，產(chǎn)率高、成本低，可以實(shí)現(xiàn)工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)，具有顯著的經(jīng)濟(jì)效益。具體實(shí)施方式下面結(jié)合一些具體實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明所述的連翹苷滴眼液及其制備方法。具體實(shí)施例為進(jìn)一步詳細(xì)說明本發(fā)明，非限定本發(fā)明的保護(hù)范圍。本發(fā)明所用的特征均來自市售。對(duì)比例所用普拉洛芬滴眼液：藥品準(zhǔn)字號(hào)：h20030026實(shí)施例1-3首先將按表格1所示配方備料；步驟1)、用聚卡波菲溶解連翹苷；步驟2)、將增稠劑用部分注射用水使其分散放冷，另用部分注射用水溶解ph調(diào)節(jié)劑、滲透壓調(diào)節(jié)劑、抑菌劑，攪勻過濾，合并二液；步驟3)、加入步驟1)已溶解了連翹苷的聚卡波菲，加注射用水至全量，過濾，分裝，即得滴眼液；制得的滴眼液的ph值為5.5～7.5，滲透壓摩爾濃度為250～350mosmol/kg。表1實(shí)施例1-3滴眼液配方表實(shí)驗(yàn)例1穩(wěn)定性測(cè)試加速試驗(yàn)：采用按本發(fā)明實(shí)施例2方法制備的3％連翹苷滴眼液在市售包裝條件下，放入恒溫恒濕箱，在溫度40℃±2℃、相對(duì)濕度25％±5％的條件下放置，分別于第1、2、3、6個(gè)月按時(shí)取樣，照質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果見表1：長(zhǎng)期試驗(yàn)：采用按本發(fā)明實(shí)施例2方法制備的0.005％連翹苷滴眼液在市售包裝條件下，放入恒溫恒濕箱，在溫度25℃±2℃、相對(duì)濕度40％±5％的條件下放置，分別于第3、6、9、12、18個(gè)月按時(shí)取樣，照質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案進(jìn)行測(cè)定。測(cè)定結(jié)果與0月測(cè)定結(jié)果比較，結(jié)果見下表。結(jié)果表明：性狀無變化，可見異物符合規(guī)定；有關(guān)物質(zhì)檢查中，有關(guān)物質(zhì)含量無明顯增長(zhǎng)的趨勢(shì)，未出現(xiàn)其他雜質(zhì)，含量測(cè)定、ph值檢查結(jié)果均無明顯變化，無菌進(jìn)行考察，均無菌生長(zhǎng)，說明本發(fā)明提供的連翹苷滴眼液穩(wěn)定性好。本發(fā)明其他實(shí)例產(chǎn)品也進(jìn)行了相同的試驗(yàn)，并得到相同趨勢(shì)的試驗(yàn)結(jié)果。實(shí)驗(yàn)例2連翹苷滴眼液的藥代動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)采用按本發(fā)明實(shí)施例2方法制備的連翹苷滴眼液與普拉洛芬滴眼液對(duì)比例做眼部應(yīng)用的藥代動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)。以健康新西蘭兔(雌雄各半)為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，分別在單次給藥后和多次給藥后進(jìn)行房水檢測(cè)。單次給藥：分別于給藥后20、40、60、80、100、120、150、210、270、360、480min抽取房水30μl檢測(cè)；多次給藥為連續(xù)給藥7天，每天給藥4次，每6小時(shí)一次。分別在第6天最后1次給藥前、第7天第1次和第2次給藥前取房水30μl檢測(cè)；分別于第7天第3次給藥后20、40、60、80、100、120、150、210、270、360、480min抽取房水30μl檢測(cè)，房水樣品經(jīng)lc-ms測(cè)定。單次給藥后房水中連翹苷的cmax為35.80±9.52μg/ml；tmax為45.11±11.45min；t1/2為80.42±14.50min；auc0-t為5074.11±957.11μg·min·ml-1，auc0-∞為5470.11±1159.88μg·min·ml-1；ke為0.01±0.001min-1。普拉洛芬滴眼液?jiǎn)未谓o藥后防水中普拉洛芬的cmax為27.45±4.86μg/ml；tmax為37.52±14.76min；t1/2為168.48±206.88min；auc0-t為660.45±36.08μg·min·ml-1，auc0-∞為667.72±36.79μg·min·ml-1；ke為0.01±0.001min-1。多劑量滴眼給藥后，房水中連翹苷的tmax為56.00±14.20min；t1/2為79.46±13.02min，ke為0.01±0.001min-1，auc0-t為6010.50±1428.11μg·min·ml-1，auc0-∞為6086.50±1124.50μg·min·ml-1，cssmax為45.44±11.25μg·ml-1，cssmin為2.7±0.65μg·ml-1，cavg為10.74±2.54μg·ml-1，fi(％)為95.8％±8.7％。比較多劑量與單劑量給藥的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)，ke、t1/2無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義上的差異，表明兩個(gè)劑量的連翹苷眼部給藥的消除速度基本恒定，不隨連續(xù)給藥變化。藥物的波動(dòng)百分?jǐn)?shù)較大、cssmin很低，證明連翹苷在房水中基本不蓄積。單劑量與多劑量給藥主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)的比較見表2。表2單劑量與多劑量給藥主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)組織樣本的制備：?jiǎn)蝿┝拷o藥后用氣體栓塞方法處死動(dòng)物，然后用刀片刮除角膜上皮，生理鹽水沖洗結(jié)膜囊，抽取房水，用棉簽吸干結(jié)膜囊的水分，用顯微剪取部分球結(jié)膜、角膜、虹膜、視網(wǎng)膜、玻璃體和鞏膜，然后用生理鹽水沖洗，濾紙吸干水分后放在1.5ml試管中，蓋上蓋子，盡快放在電子天平稱重，然后轉(zhuǎn)移到8ml玻璃試管中，加二氯甲烷5ml，用顯微剪充分粉碎組織。用離心機(jī)離心10分鐘后，取底層二氯甲烷4.5ml于另一試管中，用氮?dú)獯蹈?。封閉試管口，于4℃保存。對(duì)照眼用同樣的方法處理。實(shí)驗(yàn)表明，連翹苷廣泛分布于眼內(nèi)各主要組織，以結(jié)膜、角膜及虹膜中濃度最高。連翹苷滴眼液?jiǎn)蝿┝拷o藥后眼部主要組織的分布濃度見表3。表3連翹苷滴眼液?jiǎn)蝿┝拷o藥后眼部主要組織的分布濃度組織60min120min240min結(jié)膜(μg/g)654.20±246.11413.52±89.46319.11±189.27角膜(μg/g)613.55±210.44506.20±187.60287.44±50.44虹膜(μg/g)287.50±116.61110.22±34.50107.11±87.54視網(wǎng)膜(μg/g)150.25±57.1489.11±34.2018.44±9.11玻璃體(μg/g)4.04±2.203.60±2.112.11±1.40鞏膜(μg/g)65.44±28.7747.44±18.4420.10±17.44上表表明，應(yīng)用按本發(fā)明方法制備的滴眼液?jiǎn)蝿┝亢投鄤┝康窝?，眼?nèi)各主要組織內(nèi)的連翹苷濃度都比較高，尤其以結(jié)膜、角膜及虹膜中濃度最高，說明本發(fā)明的滴眼液眼內(nèi)穿透性好，濃度高，用于治療眼內(nèi)非感染性疾病完全可以達(dá)到有效的治療濃度。將實(shí)施例1-3制得的滴眼液按2000年藥典ⅱ附錄xij微生物限量檢查法檢查細(xì)菌、霉菌、酵母菌，結(jié)果未檢出。實(shí)驗(yàn)例3眼部刺激性測(cè)試眼刺激性試驗(yàn)取健康家兔12只，隨機(jī)分為兩組空白組，受試組，實(shí)驗(yàn)前24h檢查動(dòng)物雙眼，選取眼部正常，無炎癥、無缺陷、無陳舊性的角膜損傷家兔。兩組家兔右眼分別給予生理鹽水、實(shí)施例滴眼液0.1ml，左眼不作處理，作為對(duì)照。每天3次，給藥3d，于末次給藥后1，24，48，72h分別于裂隙燈下觀察，按皮膚反應(yīng)分值標(biāo)準(zhǔn)表評(píng)分并記錄評(píng)分結(jié)果，見表4。按下列公式計(jì)算每天每只動(dòng)物平均積分(刺激指數(shù))。每天每只動(dòng)物平均積分＝∑(每只動(dòng)物14d的紅斑和水腫總積分)/(受試動(dòng)物數(shù)×14)。表4家兔皮膚刺激性評(píng)分組別刺激指數(shù)實(shí)施例10實(shí)施例20實(shí)施例30對(duì)比例5以上所述僅為本發(fā)明的實(shí)施例，并非因此限制本發(fā)明的專利范圍，凡是利用本發(fā)明說明書內(nèi)容所作的等效結(jié)構(gòu)或等效流程變換，或直接或間接運(yùn)用在其他相關(guān)的
技術(shù)領(lǐng)域：
，均同理包括在本發(fā)明的專利保護(hù)范圍內(nèi)。當(dāng)前第1頁12