本發(fā)明屬于醫(yī)用敷料領(lǐng)域，具體涉及一種用于創(chuàng)傷修復(fù)含有干細胞提取物的敷料及其制備方法。
背景技術(shù)：
：皮膚是是人體最大的器官，皮膚覆蓋全身，并與外界環(huán)境接觸，起著保護機體的屏障作用，它使體內(nèi)各種組織和器官免受物理性、機械性、化學(xué)性和病原微生物性的侵襲，例如防止水分、電解質(zhì)和血漿蛋白的丟失，抵御細菌侵入，防止毒物進入，抵擋機械性損傷，防止紫外線照射對人體的傷害等。此外，皮膚還具有感覺、分泌、排泄和體溫調(diào)節(jié)等生理學(xué)功能。因此，皮膚無論是潰瘍傷口還是各種燒傷、擦傷等都應(yīng)盡快得到護理，使皮膚恢復(fù)組織和功能，在這方面敷料起著重要作用。成纖維細胞作為創(chuàng)面修復(fù)的主要細胞，創(chuàng)傷后出現(xiàn)以活化、增殖、遷移、合成和分泌包括膠原在內(nèi)的細胞外基質(zhì)等為特征的生物學(xué)行為改變，并參與肉芽組織及瘢痕形成和后期創(chuàng)面重塑。2006年日本京都大學(xué)山中伸彌把oct3/4、sox2、c-myc和klf4這四種轉(zhuǎn)錄因子引入小鼠胚胎或皮膚纖維母細胞，發(fā)現(xiàn)可誘導(dǎo)其發(fā)生轉(zhuǎn)化，產(chǎn)生的誘導(dǎo)多能干細胞在形態(tài)、基因和蛋白表達、表觀遺傳修飾狀態(tài)、細胞倍增能力、類胚體和畸形瘤生成能力、分化能力等都與胚胎干細胞極為相似。因此，以成纖維細胞為母細胞制備得到的誘導(dǎo)多能干細胞在醫(yī)學(xué)上具有廣泛的應(yīng)用前景。中國專利申請(cn201510193325.0)公開了一種具有生物活性的醫(yī)用敷料及其制備方法，所述一種具有生物活性的醫(yī)用敷料是將人或動物的胚胎干細胞、臍帶血干細胞、羊水干細胞、外周血造血干細胞、骨髓間充質(zhì)干細胞的一種或幾種在體外培養(yǎng)，收集對數(shù)生長期分泌的干細胞生長因子與與i型膠原、iii型膠原、殼聚糖、透明質(zhì)酸、硫酸軟骨素、海藻酸鈉中的一種或幾種基質(zhì)按比例混合制成薄層海綿作為內(nèi)層，貼合以聚乳酸(pla)、聚羥基乙酸(pga)、乳酸-羥基乙酸共聚物(plga)、聚己內(nèi)酯(pcl)等中的一種或幾種形成的混合物制成的多孔高分子材料薄膜外層，凍干裁切后組成具有生物活性的醫(yī)用敷料，用于覆蓋燒、燙傷、手術(shù)、創(chuàng)傷、疾病引起的皮膚缺損創(chuàng)面，誘導(dǎo)創(chuàng)面修復(fù)。但是與誘導(dǎo)多能干細胞相比，上述干細胞在體外培養(yǎng)增殖速度慢、易衰老，不易大量獲得干細胞生長因子，因而要大批量生產(chǎn)所述具有生物活性的醫(yī)用敷料，對干細胞的消耗量巨大，生產(chǎn)成本高。中國專利申請(201510700273.1)提供了一種生物敷料的制備方法及生物敷料，該生物敷料的制備方法，包括：步驟1)將人成纖維細胞接種到覆蓋有膠原的尼龍網(wǎng)膜上，培養(yǎng)，獲得真皮層；步驟2)將所獲得的真皮層進行冷凍干燥，獲得含有失活的人成纖維細胞和細胞外基質(zhì)的真皮層；步驟3)在含有失活的人成纖維細胞和細胞外基質(zhì)的真皮層的上表面涂覆硅膠溶液，靜置、凝固，獲得生物敷料。成纖維細胞在上述覆蓋有膠原的尼龍膜上培養(yǎng)難道大，并且長時間培養(yǎng)極易染菌，這不僅對生產(chǎn)技術(shù)人員操作提出了嚴(yán)格的要求，而且對生產(chǎn)設(shè)備的要求也更為嚴(yán)格。而且，敷料上培養(yǎng)的成纖維細胞失活后，則其主要作用的為細胞外基質(zhì)中活性物質(zhì)。技術(shù)實現(xiàn)要素：為解決上述問題，本發(fā)明提供了一種用于創(chuàng)傷修復(fù)含有干細胞提取物的敷料，其含有干細胞提取物，抗菌肽和生物活性玻璃等主要成分。本發(fā)明敷料不僅能有效促進創(chuàng)傷修復(fù)，而且殺菌消毒顯著；此外本發(fā)明敷料為液體敷料，方便用于皮膚各處創(chuàng)傷。此外，本發(fā)明還提供了用于創(chuàng)傷修復(fù)含有干細胞提取物的敷料的制備方法。本發(fā)明通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)：一種用于創(chuàng)傷修復(fù)含有干細胞提取物的敷料，每100g所述敷料包括：干細胞提取物1-10g，殼聚糖季銨鹽1-5g，生物活性玻璃粉體5-10g，荷荷巴油0.3-0.5g，甘油5.5-6.5g和蒸餾水65-82.2g。優(yōu)選地，每100g所述敷料由以下成分及其重量組成：干細胞提取物8g，殼聚糖季銨鹽3g，生物活性玻璃粉體10g，荷荷巴油0.3g，甘油6.2g和蒸餾水68g。優(yōu)選地，所述干細胞提取物為誘導(dǎo)多能干細胞提取物。所述ips細胞提取物的制備方法為：s1.誘導(dǎo)多能干細胞的培養(yǎng)：matrigel基質(zhì)膠4℃過夜溶解后，用dmem/f12按體積比1∶100的比例稀釋matrigel基質(zhì)膠，混勻后加入培養(yǎng)皿中包被30min后棄去培養(yǎng)液，接種誘導(dǎo)多能干細胞，并于37℃的co2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；s2.細胞提取物提?。何鰏3培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液，用pbs清洗2～3次，在4℃以下，勻漿3-5次；將勻漿液置于冰箱凍存至完全凍結(jié)，然后在不高于隔水42℃的條件下徹底融化，然后收集到離心管中，離心取上清；取上清液置于透析袋中，以4℃pbs溶液透析8小時；將透析袋內(nèi)溶液冷凍干燥，保存在-80℃冰箱。優(yōu)選地，所述殼聚糖季銨鹽由殼聚糖和2,3-環(huán)氧丙基三甲基氯化銨合成的，取代度為4％～6％。優(yōu)選地，所述生物活性玻璃粉體由58s生物活性玻璃粉體與45s生物活性玻璃粉體按質(zhì)量比2∶3混合而成；其中58s生物活性玻璃粉體粒徑＜20μm，45s生物活性玻璃粉體粒徑＜40μm。本發(fā)明所用誘導(dǎo)多能干細胞是對人成纖維細胞進行重編程而制備得到的，具有與胚胎細胞功能相似的無限增殖能力和蛋白表達能力，因此，與普通干細胞相比，能分泌更多的生物活性因子，如富含表皮生長因子(egf)、纖維細胞生長因子(fgf)、神經(jīng)生長因子(ngf)、肝細胞生長因子(hgf)、腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(bdnf)、血小板源性生長因子(pdgf)、血管內(nèi)皮生長因子(vegf)、轉(zhuǎn)化生長因子(tgf)等。與現(xiàn)有技術(shù)中收集到的細胞分泌相比，本發(fā)明細胞提取物包含更多的生物活性因子、膠原蛋白，而且還含多種功能蛋白、氨基多糖及維生素等有利于皮膚修復(fù)的成分。誘導(dǎo)多能干細胞具有無限增殖的能力，從而保證了所述細胞提取得大量獲得。生物活性玻璃是一類能對機體組織進行修復(fù)、替代與再生、具有能使組織合材料之間形成鍵合作用的材料。生物活性玻璃的降解產(chǎn)物能夠促進生長因子的生成、促進細胞的繁衍、增強成骨細胞的基因表達和骨組織的生長。是迄今為止唯一既能夠與骨組織成鍵結(jié)合，同時又能與軟組織相連接的人工生物材料。此種修復(fù)性材料的用途不但極為廣泛，而且在眾多領(lǐng)域的專業(yè)性產(chǎn)品上有著無法替代的神奇功效，如肌膚護理、美白去皺、燒傷燙傷、口腔潰瘍、腸胃潰瘍、皮膚潰爛、殺滅真菌、骨骼修復(fù)、軟組織和骨組織的鍵合等。本發(fā)明采用的生物活性玻璃由58s生物活性玻璃粉體與45s生物活性玻璃粉體按質(zhì)量比2∶3混合而成；其中58s生物活性玻璃粉體粒徑＜20μm，45s生物活性玻璃粉體粒徑＜40μm，其與干細胞提取物混合具有協(xié)同作用，能更好的促進傷口的愈合。荷荷巴油(jojobaoil)，是墨西哥原生植物荷荷巴(霍霍巴)的萃取物，具有滋潤、收緊皮膚、軟化脂肪、消炎的功效。荷荷巴油是滲透性最強的基礎(chǔ)油，極易被皮膚吸收，清爽滋潤、不油膩，能恢復(fù)皮膚ph平衡，同時還含有豐富的維生素a、b、e和鈣、鎂等礦物質(zhì)。純天然荷荷芭油已經(jīng)應(yīng)用于保濕劑、防曬霜、香皂、沐浴液、按摩劑、香波、護發(fā)素、發(fā)膠、摩絲、洗液、眼影劑、醫(yī)藥霜劑等。本發(fā)明中采用荷荷巴油的主要作用是其能促進敷料中干細胞細胞提取物、生物活性玻璃及殼聚糖季銨鹽與傷口處皮膚的接觸，能夠使傷口處皮膚快速吸收，從而促進傷口的愈合和恢復(fù)。本發(fā)明還提供了一種用于創(chuàng)傷修復(fù)含有干細胞提取物的敷料的制備方法，其包括以下步驟：(1)干細胞提取物凍干粉的制備；(2)準(zhǔn)確稱取相應(yīng)重量的荷荷巴油和甘油，二者混合后攪拌10-15min后，加入生物活性玻璃粉體，繼續(xù)攪拌至均勻，制備得到a液；(3)將殼聚糖季銨鹽溶于蒸餾水中，加入到a液中，混勻后加熱至85℃，持續(xù)加熱5min后，攪拌均勻，得b液；(4)待b液冷卻至35-40℃時，加入干細胞提取物凍干粉，攪拌均勻，即得。本發(fā)明提供的用于創(chuàng)傷修復(fù)含有干細胞提取物的敷料，其各成分間相互作用，相互促進。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明敷料促進皮膚創(chuàng)傷修復(fù)作用效果極為明顯，治愈時間短；并且本發(fā)明敷料殺菌消毒作用明顯，產(chǎn)品保質(zhì)期時間長。除此之外，本發(fā)明敷料為液體敷料，方便用于皮膚各處創(chuàng)傷。本發(fā)明敷料的制備方法簡單，易于大批量生產(chǎn)。具體實施方式下面將進一步的詳細說明本發(fā)明。需要指出的是，以下說明僅僅是對本發(fā)明要求保護的技術(shù)方案的舉例說明，并非對這些技術(shù)方案的任何限制。本發(fā)明的保護范圍以所附權(quán)利要求書記載的內(nèi)容為準(zhǔn)。生物活性玻璃購于昆山華僑科技新材料有限公司，58s生物活性玻璃型號為hq-bg58-d1，45s生物活性玻璃型號為hq-bg45s-d2；本發(fā)明ips細胞購于上海斯丹塞(干細胞)生物技術(shù)有限公司，cas號0210-003；人類胚胎干細胞完全培養(yǎng)基，貨號hesm-01-500；ⅳ型膠原酶，貨號m-001?？咕馁徲诤幽细袢R美生物科技有限公司，型號2017glm108。實施例1一種用于創(chuàng)傷修復(fù)含有干細胞提取物的敷料所述用于創(chuàng)傷修復(fù)含有干細胞提取物的敷料，每100g所述敷料由以下成分及其重量組成：誘導(dǎo)多能干細胞提取物8g，殼聚糖季銨鹽3g，生物活性玻璃粉體10g，荷荷巴油0.3g，甘油6.2g和蒸餾水68g。所述ips細胞提取物的制備方法為：s1.誘導(dǎo)多能干細胞的培養(yǎng)：matrigel基質(zhì)膠4℃過夜溶解后，用dmem/f12按體積比1∶100的比例稀釋matrigel基質(zhì)膠，混勻后加入培養(yǎng)皿中包被30min后棄去培養(yǎng)液，接種誘導(dǎo)多能干細胞，并于37℃的co2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；s2.細胞提取物提?。何鰏3培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液，用pbs清洗2～3次，在4℃以下，勻漿3-5次；將勻漿液置于冰箱凍存至完全凍結(jié)，然后在不高于隔水42℃的條件下徹底融化，然后收集到離心管中，離心取上清；取上清液置于透析袋中，以4℃pbs溶液透析8小時；將透析袋內(nèi)溶液冷凍干燥，保存在-80℃冰箱。所述殼聚糖季銨鹽由殼聚糖和2,3-環(huán)氧丙基三甲基氯化銨合成的，取代度為5％。所述生物活性玻璃粉體由58s生物活性玻璃粉體與45s生物活性玻璃粉體按質(zhì)量比2∶3混合而成；其中58s生物活性玻璃粉體粒徑＜20μm，45s生物活性玻璃粉體粒徑＜40μm。其制備方法分為以下步驟：(1)干細胞提取物凍干粉的制備；s1.誘導(dǎo)多能干細胞的培養(yǎng)：matrigel基質(zhì)膠4℃過夜溶解后，用dmem/f12按體積比1∶100的比例稀釋matrigel基質(zhì)膠，混勻后加入培養(yǎng)皿中包被30min后棄去培養(yǎng)液，接種誘導(dǎo)多能干細胞，并于37℃的co2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；s2.細胞提取物提取：吸出s3培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液，用pbs清洗2～3次，在4℃以下，勻漿3-5次；將勻漿液置于冰箱凍存至完全凍結(jié)，然后在不高于隔水42℃的條件下徹底融化，然后收集到離心管中，離心取上清；取上清液置于透析袋中，以4℃pbs溶液透析8小時；將透析袋內(nèi)溶液冷凍干燥，保存在-80℃冰箱。(2)準(zhǔn)確稱取相應(yīng)重量的荷荷巴油和甘油，二者混合后攪拌10-15min后，加入生物活性玻璃粉體，繼續(xù)攪拌至均勻，制備得到a液；(3)將殼聚糖季銨鹽溶于蒸餾水中，加入到a液中，混勻后加熱至85℃，持續(xù)加熱5min后，攪拌均勻，得b液；(4)待b液冷卻至35-40℃時，加入干細胞提取物凍干粉，攪拌均勻，即得。實施例2一種用于創(chuàng)傷修復(fù)含有干細胞提取物的敷料所述用于創(chuàng)傷修復(fù)含有干細胞提取物的敷料，每100g所述敷料由以下成分及其重量組成：誘導(dǎo)多能干細胞提取物1g，殼聚糖季銨鹽5g，生物活性玻璃粉體5g，荷荷巴油0.3g，甘油5.5g和蒸餾水82.2g。所述ips細胞提取物的制備方法為：s1.誘導(dǎo)多能干細胞的培養(yǎng)：matrigel基質(zhì)膠4℃過夜溶解后，用dmem/f12按體積比1∶100的比例稀釋matrigel基質(zhì)膠，混勻后加入培養(yǎng)皿中包被30min后棄去培養(yǎng)液，接種誘導(dǎo)多能干細胞，并于37℃的co2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；s2.細胞提取物提?。何鰏3培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液，用pbs清洗2～3次，在4℃以下，勻漿3-5次；將勻漿液置于冰箱凍存至完全凍結(jié)，然后在不高于隔水42℃的條件下徹底融化，然后收集到離心管中，離心取上清；取上清液置于透析袋中，以4℃pbs溶液透析8小時；將透析袋內(nèi)溶液冷凍干燥，保存在-80℃冰箱。所述殼聚糖季銨鹽由殼聚糖和2,3-環(huán)氧丙基三甲基氯化銨合成的，取代度為4％。所述生物活性玻璃粉體由58s生物活性玻璃粉體與45s生物活性玻璃粉體按質(zhì)量比2:3混合而成；其中58s生物活性玻璃粉體粒徑＜20μm，45s生物活性玻璃粉體粒徑＜40μm。其制備方法與實施例1類似。實施例3一種用于創(chuàng)傷修復(fù)含有干細胞提取物的敷料所述用于創(chuàng)傷修復(fù)含有干細胞提取物的敷料，每100g所述敷料由以下成分及其重量組成：誘導(dǎo)多能干細胞提取物10g，殼聚糖季銨鹽1g，生物活性玻璃粉體10g，荷荷巴油0.5g，甘油6.5g和蒸餾水65g。所述ips細胞提取物的制備方法為：s2.誘導(dǎo)多能干細胞的培養(yǎng)：matrigel基質(zhì)膠4℃過夜溶解后，用dmem/f12按體積比1∶100的比例稀釋matrigel基質(zhì)膠，混勻后加入培養(yǎng)皿中包被30min后棄去培養(yǎng)液，接種誘導(dǎo)多能干細胞，并于37℃的co2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；s2.細胞提取物提?。何鰏3培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液，用pbs清洗2～3次，在4℃以下，勻漿3-5次；將勻漿液置于冰箱凍存至完全凍結(jié)，然后在不高于隔水42℃的條件下徹底融化，然后收集到離心管中，離心取上清；取上清液置于透析袋中，以4℃pbs溶液透析8小時；將透析袋內(nèi)溶液冷凍干燥，保存在-80℃冰箱。所述殼聚糖季銨鹽由殼聚糖和2,3-環(huán)氧丙基三甲基氯化銨合成的，取代度為6％。所述生物活性玻璃粉體由58s生物活性玻璃粉體與45s生物活性玻璃粉體按質(zhì)量比2∶3混合而成；其中58s生物活性玻璃粉體粒徑＜20μm，45s生物活性玻璃粉體粒徑＜40μm。其制備方法與實施例1類似。對比例1一種用于創(chuàng)傷修復(fù)含有干細胞提取物的敷料所述用于創(chuàng)傷修復(fù)含有干細胞提取物的敷料，每100g所述敷料由以下成分及其重量組成：干細胞生長因子8g，殼聚糖季銨鹽7.5g，生物活性玻璃58s粉體4g，生物活性玻璃45s粉體6g荷荷巴油0.3g，甘油6.2g和蒸餾水68g。所述生物活性玻璃粉體由58s生物活性玻璃粉體與45s生物活性玻璃粉體按質(zhì)量比2∶3混合而成；其中58s生物活性玻璃粉體粒徑＜20μm，45s生物活性玻璃粉體粒徑＜40μm。所述敷料的制備方法，其中，干細胞生長因子的制備為：使用含10％胎牛血清的dmem培養(yǎng)基，于37℃、5％co2的條件下對干細胞進行常規(guī)培養(yǎng)，待細胞融合度達到90％左右、細胞濃度達到1-10×106時，吸取含有干細胞生長因子的培養(yǎng)液，進行離心，棄沉淀取上清液冷凍干燥后備用。其它步驟均與實施例1制備方法相似。與實施例1的區(qū)別在于，將誘導(dǎo)多能干細胞提取物替換為干細胞生長因子。試驗例1體表創(chuàng)傷止血護創(chuàng)促愈試驗1、試驗方法如下：新西蘭兔，30只，按性別、體重隨機分為a、b、c、d以及對照組共五組，每組6只，雌雄各半，先以脫毛劑對家兔背部脫毛，24h后以1％戊巴比妥鈉30mg/kg耳緣靜脈注射麻醉。無菌條件下使用7號注射器針頭在脫毛區(qū)皮膚“#”型劃傷(以滲血而無明顯出血為度)，a、b、c、d四組分別采用上述實施例1-3及對比例1分別制備得到的敷料置于創(chuàng)傷部位，對照組采用傳統(tǒng)棉紗敷料，前30s每隔5s觀察傷口的流血情況，30s后每隔30秒觀察傷口的流血情況，用濾紙條輕輕蘸吸直至血液不再滲出，即濾紙條上不再沾有血液為止，記錄所需時間即出血時間。超過15min仍未止血的，按壓止血，出血時間以15min計。使用紗布繃帶腹部纏繞固定。12小時后去掉外敷物，記錄創(chuàng)面情況，用生理鹽水清洗，更換外敷物，每日1次，連續(xù)3天。3天后去掉外敷受試物，使創(chuàng)面自然恢復(fù)，每日觀察記錄創(chuàng)面情況，連續(xù)12天，每天觀察動物整理情況及受損區(qū)的紅腫、結(jié)痂、脫痂等情況。2、試驗結(jié)果各組敷料使用效果見表1。表1生物創(chuàng)傷敷料效果觀察組別止血時間炎癥反應(yīng)3d傷口愈合情況觀察對照組200s中度傷口紅腫，有積液實施例15s無傷口愈合良好，無紅腫實施例28s無傷口愈合良好，無紅腫實施例310s無傷口愈合良好，無紅腫對比例180s輕度傷口紅腫，輕微炎癥反應(yīng)從表1中可以看出：實施例1-3組敷料止血、消炎、促愈的效果均顯著優(yōu)于傳統(tǒng)創(chuàng)傷敷料；實施例1組止血時間短，無炎癥反應(yīng)，傷口愈合快，為最佳實施例。對比例1組止血時間用80s，有輕度炎癥反應(yīng)，3天后傷口依然紅腫并有輕微炎癥反應(yīng)；因此實施例1與對比例1敷料、傳統(tǒng)創(chuàng)傷敷料相比，對于創(chuàng)傷修復(fù)效果明顯。試驗例2抗菌率測試將實施例1-3及對比例1制備得到的敷料用于抑菌圈試驗：①將糞腸球菌atcc29212在lb固體平板上劃線，37℃培養(yǎng)過夜。②挑取單菌落，接種于3～5ml的lb液體培養(yǎng)基中，37℃、220r/min振蕩培養(yǎng)過夜。③按1～2％的體積比率將培養(yǎng)過夜的菌液接種于適量的lb液體培養(yǎng)基中，37℃、250r/min振蕩培養(yǎng)3h左右，當(dāng)od600≈0.6～0.8時，進行抑菌試驗。④將lb固體培養(yǎng)基加熱融化，當(dāng)培養(yǎng)基溫度降至45℃左右時，將對數(shù)期的糞腸球菌atcc29212按2％的接種量與lb培養(yǎng)基混勻，傾倒平板，待平板凝固后放入4℃冰箱中冷卻保存。用2.7mm直徑打孔器打孔，每孔注入10ul實施例1-3及對比例1制備得到的敷料，對照孔加入無菌水。每處理重復(fù)3次，倒置培養(yǎng)皿，37℃培養(yǎng)過夜。根據(jù)抑菌圈大小計算抗菌率，具體結(jié)果如表2所示。表2不同敷料對糞腸球菌atcc29212的抗菌效果組別抗菌率實施例199.4％±2.47實施例298.2％±1.56實施例397.9％±3.84對比例182.5％±4.72由表2可知，本發(fā)明敷料對傷口感染最常見的糞腸球菌atcc29212的抗菌率均在90％以上，其中實施例1制備得到的敷料抗菌率高達99.4％，高于對比例1。由此可知，本發(fā)明敷料還具有顯著的抗菌效果。綜上可知，本發(fā)明提供的用于創(chuàng)傷修復(fù)含有干細胞提取物的敷料，不僅能有效促進創(chuàng)傷修復(fù)，而且殺菌消毒顯著；此外，本發(fā)明敷料的制備方法簡單，成本低廉，制備得到的為液體敷料，方便用于皮膚各處創(chuàng)傷。以上所述僅為本發(fā)明的實施方式，并非因此限制本發(fā)明的專利范圍，凡是利用本發(fā)明說明書內(nèi)容所作的等效結(jié)構(gòu)或等效流程變換，或直接或間接運用在其他相關(guān)的
技術(shù)領(lǐng)域：
，均同理包括在本發(fā)明的專利保護范圍內(nèi)。當(dāng)前第1頁12