本發(fā)明涉及破損的肌肉和皮膚修復(fù)技術(shù)領(lǐng)域，更具體地說(shuō)，本發(fā)明涉及一種活性水凝膠，本發(fā)明還涉及一種活性水凝膠的制備方法，本發(fā)明還涉及一種活性水凝膠在手術(shù)創(chuàng)傷修復(fù)中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

手術(shù)創(chuàng)傷是經(jīng)過(guò)手術(shù)后引起人體組織或器官的破壞。手術(shù)創(chuàng)傷可能會(huì)導(dǎo)致骨骼肌的大量損失和天然組織結(jié)構(gòu)破壞。對(duì)于肌肉的損失，目前的療法，主要包括手術(shù)肌瓣移植，物理治療和康復(fù)，但無(wú)法有效恢復(fù)功能。并且供體組織的限制和排異反應(yīng)影響了肌瓣手術(shù)的成功率和預(yù)后。感染、壞死、難愈合性傷口也是手術(shù)創(chuàng)傷易引起的并發(fā)癥。難愈合性傷口的常規(guī)療法包括敷料，壓力卸載，局部和全身抗生素，高壓氧和局部應(yīng)用生長(zhǎng)因子。超過(guò)一年的無(wú)愈合傷口的患者中，有50％的患者對(duì)目前的治療方法并沒(méi)有反應(yīng)。對(duì)于深入真皮的傷口，可以應(yīng)用其他策略，如皮膚自動(dòng)移植和皮膚替代品。然而，由于供體組織的可用性有限，皮膚自動(dòng)移植可能是具有挑戰(zhàn)性的。皮膚替代品受到高成本，功效不足以及無(wú)法重建皮膚附屬物的限制。對(duì)治療非愈合性傷口的新策略的需求不斷增長(zhǎng)。因此，急需一種優(yōu)化的治療方法來(lái)降低手術(shù)創(chuàng)傷帶來(lái)的肌肉和皮膚損傷。

最近，干細(xì)胞的治療為促進(jìn)皮膚和骨骼肌再生提供了一種有前景的治療方法。脂肪干細(xì)胞(ascs)已被廣泛應(yīng)用于再生醫(yī)學(xué)。人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(hascs)在與肌原性分化培養(yǎng)基或與成肌細(xì)胞共培養(yǎng)時(shí)表現(xiàn)出肌原性轉(zhuǎn)換，表明hascs在體外具有肌原性潛能(h.mizuno,p.a.zuk,m.zhu,h.p.lorenz,p.benhaimandm.h.hedrick,"myogenicdifferentiationbyhumanprocessedlipoaspiratecells,"plastreconstrsurg,vol.109,no.1,pp.199-209；discussion210-191,2002.s.v.forcales,"potentialofadipose-derivedstemcellsinmuscularregenerativetherapies,"frontagingneurosci,vol.7,pp.123,2015.)。此外，將asc局部注射到杜氏肌營(yíng)養(yǎng)不良小鼠體內(nèi)，改善了小鼠肌肉再生，同時(shí)通過(guò)細(xì)胞融合和下調(diào)tgf-β降低了纖維化(y.zhang,y.zhu,y.li,j.cao,h.zhang,m.chen,l.wangandc.zhang,"long-termengraftmentofmyogenicprogenitorsfromadipose-derivedstemcellsandmuscleregenerationindystrophicmice,"hummolgenet,vol.24,no.21,pp.6029-6040,2015.c.h.pinheiro,j.c.dequeiroz,l.guimaraes-ferreira,k.f.vitzel,r.t.nachbar,l.g.desousa,a.l.desouza-jr,m.t.nunesandr.curi,"localinjectionsofadipose-derivedmesenchymalstemcellsmodulateinflammationandincreaseangiogenesisamelioratingthedystrophicphenotypeindystrophin-deficientskeletalmuscle,"stemcellrev,vol.8,no.2,pp.363-374,2012.)。也有研究發(fā)現(xiàn)移植臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞有助于修復(fù)皮膚損傷(zhangy,haoh,liuj,etal.repairandregenerationofskininjurybytransplantingmicroparticlesmixedwithwharton'sjellyandmscsfromthehumanumbilicalcord.[j].internationaljournaloflowerextremitywounds,2012,11(4):264-270.)。然而，單純的干細(xì)胞注射不足以在大量肌肉損失創(chuàng)傷中促進(jìn)肌肉皮膚再生和功能恢復(fù)。

水凝膠是在水中膨脹并保持大量水分而又不溶解的聚合物，高分子水凝膠是由高分子骨架、水、交聯(lián)劑組成的三維體系，具有復(fù)雜的空間網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)。智能水凝膠對(duì)外界條件的刺激能產(chǎn)生相應(yīng)體積變化，在藥物釋放系統(tǒng)，仿生材料、化學(xué)閥、生物醫(yī)學(xué)、人造肌肉及酶改性等方面有著廣闊的應(yīng)用前景。殼聚糖來(lái)源廣泛、容易制備，是自然界中唯一的親水性楊離子聚合物，具有很好的成膜性和吸濕性，還具有生物相容性好、抗菌性和可生物降解等特點(diǎn)，用其制備的水凝膠具有許多獨(dú)特性，但是殼聚糖凝膠脆性較大、黏彈性較弱、力學(xué)性能不足并且持水性能較弱。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的一個(gè)目的是解決至少上述問(wèn)題，并提供至少后面將說(shuō)明的優(yōu)點(diǎn)。

本發(fā)明還有一個(gè)目的是提供了一種活性水凝膠，其通過(guò)在脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基加入殼聚糖和透明質(zhì)酸交聯(lián)形成的復(fù)合凝膠，并混合均勻后加入i型膠原以制成活性水凝膠，這種活性水凝膠可用于對(duì)手術(shù)創(chuàng)傷造成的皮膚和肌肉破損的修復(fù)，大大提高了皮膚和肌肉再生的效果。

本發(fā)明還有一個(gè)目的是提供了一種活性水凝膠的制備方法，具有方法簡(jiǎn)單，易于質(zhì)量控制和易于產(chǎn)業(yè)化的優(yōu)點(diǎn)。

本發(fā)明還有一個(gè)目的是使用活性水凝膠修復(fù)手術(shù)創(chuàng)傷造成的肌肉和皮膚的破損，具有使用過(guò)程簡(jiǎn)單和安全性高的優(yōu)點(diǎn)。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了一種活性水凝膠，包括以下組分：

脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基、以殼聚糖和透明質(zhì)酸為原料并通過(guò)交聯(lián)反應(yīng)制備的殼聚糖-透明質(zhì)酸復(fù)合凝膠以及i型膠原。

本發(fā)明還提供了一種活性水凝膠的制備方法，包括以下步驟：

步驟一、以剔除微血管和肌肉組織的大鼠腹股溝部脂肪組織為原料，培養(yǎng)脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞，進(jìn)而制備脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基；

步驟二、以殼聚糖和透明質(zhì)酸為原料，在交聯(lián)劑戊二醛的作用下，殼聚糖和透明質(zhì)酸發(fā)生交聯(lián)反應(yīng)，制備殼聚糖-透明質(zhì)酸復(fù)合凝膠；

步驟三、將所述脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基和所述殼聚糖-透明質(zhì)酸復(fù)合凝膠充分混勻，使所述脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基的活性因子粘附在所述殼聚糖-透明質(zhì)酸復(fù)合凝膠上，再加入i型膠原并混勻，得到活性水凝膠。

優(yōu)選的是，其中，所述步驟二中，所述殼聚糖-透明質(zhì)酸復(fù)合凝膠的制備過(guò)程為：

將殼聚糖和透明質(zhì)酸溶于去離子水中，攪拌均勻后緩慢加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2％的乙酸，使所述殼聚糖充分溶解在水中，得到混合液；

向所述混合液中加入交聯(lián)劑戊二醛，攪拌均勻后在室溫下靜置24小時(shí)，即得到殼聚糖-透明質(zhì)酸復(fù)合凝膠。

優(yōu)選的是，其中，所述殼聚糖-透明質(zhì)酸復(fù)合凝膠的制備過(guò)程為：

將15g/l的殼聚糖和1g/l的透明質(zhì)酸溶于去離子水中，攪拌均勻后緩慢加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2％的乙酸，使所述殼聚糖充分溶解在水中，得到混合液；

向所述混合液中加入4.8g/l的交聯(lián)劑戊二醛，攪拌均勻后在室溫下靜置24小時(shí)，即得到殼聚糖-透明質(zhì)酸復(fù)合凝膠

優(yōu)選的是，其中，所述步驟三中，將所述脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基和所述殼聚糖-透明質(zhì)酸復(fù)合凝膠充分混勻，使所述間充質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基的活性因子粘附在所述殼聚糖-透明質(zhì)酸復(fù)合凝膠上，再加入2mg/ml的i型膠原并混勻，得到活性水凝膠。

優(yōu)選的是，其中，所述步驟一中，所述脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基的制備過(guò)程為：

制備脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞：對(duì)剔除微血管和肌肉組織的大鼠腹股溝部脂肪組織進(jìn)行無(wú)菌洗滌、剪碎以及使用無(wú)菌消化液消化大鼠腹股溝部脂肪組織中的組織塊，并收集濾液；

將所述濾液與含有胎牛血清的低糖dmem培養(yǎng)基等量中和，離心后棄掉上清液，得到沉淀物，并使用無(wú)血清培養(yǎng)基對(duì)其進(jìn)行重懸后置于培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，當(dāng)間充質(zhì)干細(xì)胞生長(zhǎng)至一定密度時(shí)，使用0.25％胰蛋白酶溶液消化間質(zhì)干細(xì)胞，以1：3的接種比例接種到新的培養(yǎng)瓶中進(jìn)行傳代培養(yǎng)；

選擇第三代培養(yǎng)的間充質(zhì)干細(xì)胞，在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，且細(xì)胞融合程度不超過(guò)80％時(shí)按照傳代的要求消化、中和、洗滌、收集細(xì)胞，得到脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞；

制備脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基：將脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)到50-60％融合，收集條件培養(yǎng)基，將條件培養(yǎng)基在3000rpm下離心10min，移除細(xì)胞碎片，使用袋式過(guò)濾器并在一定條件下透析，將透析后的條件培養(yǎng)基濃縮20倍，制得脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基。

優(yōu)選的是，其中，所述透析為使用7-kda分子量截止袋式過(guò)濾器在peg20000和4℃下對(duì)條件培養(yǎng)基進(jìn)行透析。

本發(fā)明還提供了活性水凝膠的應(yīng)用，其用于修復(fù)手術(shù)創(chuàng)傷引起的肌肉和皮膚缺損。

本發(fā)明至少包括以下有益效果：

1、本發(fā)明所述的活性水凝膠能夠修復(fù)手術(shù)創(chuàng)傷造成的皮膚和肌肉破損，大大提高了皮膚和肌肉的再生效果。

2、本發(fā)明所述的活性水凝膠的制備過(guò)程簡(jiǎn)單、易于質(zhì)量控制，易于產(chǎn)業(yè)化。

3、本發(fā)明所述的活性水凝膠的使用過(guò)程方便、并且使用的安全性高。

4、本發(fā)明所述的活性水凝膠中的殼聚糖-透明質(zhì)酸復(fù)合凝膠具有較好的機(jī)械強(qiáng)度、彈性和持水性能從而為活性水凝膠在手術(shù)創(chuàng)傷中的應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。

本發(fā)明的其它優(yōu)點(diǎn)、目標(biāo)和特征將部分通過(guò)下面的說(shuō)明體現(xiàn)，部分還將通過(guò)對(duì)本發(fā)明的研究和實(shí)踐而為本領(lǐng)域的技術(shù)人員所理解。

附圖說(shuō)明

圖1為使用h&e染色顯示本發(fā)明所述的活性水凝膠和未處理水凝膠對(duì)缺損區(qū)域的肌肉樣品的修復(fù)能力的照片；

圖2為分別使用massontrichrome染色和siriusred染色顯示本發(fā)明所述的活性水凝膠和未處理水凝膠對(duì)缺損區(qū)域的肌肉樣品的修復(fù)能力的照片；

圖3為使用qrt-pcr檢測(cè)本發(fā)明所述的活性水凝膠和未處理水凝膠對(duì)缺損區(qū)域的肌肉樣品修復(fù)5天后的炎癥、血管發(fā)生及肌肉再生的mrna表達(dá)圖譜；

圖4為使用qrt-pcr檢測(cè)本發(fā)明所述的活性水凝膠和未處理水凝膠對(duì)缺損區(qū)域的肌肉樣品修復(fù)2周后的炎癥、血管發(fā)生及肌肉再生的mrna表達(dá)圖譜；

圖5為以α-sma為標(biāo)記物使用if染色顯示本發(fā)明所述的活性水凝膠和未處理水凝膠對(duì)缺損區(qū)域的肌肉樣品處的血管生成的照片；

圖6為使用westernblot檢測(cè)本發(fā)明所述的活性水凝膠和未處理水凝膠對(duì)破損區(qū)域的肌肉樣品修復(fù)過(guò)程中的各種因子的表達(dá)量的圖譜；

圖7為使用he染色切片顯示本發(fā)明所述的活性水凝膠和未處理水凝膠對(duì)破損區(qū)域的肌肉樣品的修復(fù)能力的照片。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合附圖以及實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明，以令本領(lǐng)域技術(shù)人員參照說(shuō)明書(shū)文字能夠據(jù)以實(shí)施。

應(yīng)當(dāng)理解，本文所使用的諸如“具有”、“包含”以及“包括”術(shù)語(yǔ)并不排除一個(gè)或多個(gè)其它元件或其組合的存在或添加。

本發(fā)明提供了一種活性水凝膠，其通過(guò)將脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基加入殼聚糖-透明質(zhì)酸復(fù)合凝膠，混合均勻后加入i型膠原而制得的，這種活性水凝膠用來(lái)修復(fù)手術(shù)創(chuàng)傷引起的肌肉和皮膚缺損。

以下將詳細(xì)介紹活性水凝膠的制備過(guò)程：

一、脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基的制備：通過(guò)制備脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞制備脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基；

1、脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的制備：

按照常規(guī)方法分離重60g-80g大鼠腹股溝部脂肪組織，剔除可見(jiàn)微血管及肌肉組織，無(wú)菌pbs洗滌三遍，然后用無(wú)菌剪刀將脂肪組織剪碎至1立方毫米以下的糊狀，添加無(wú)菌消化液(含有0.1％膠原酶ⅰ型和0.05％胰蛋白酶的無(wú)血清dmem培養(yǎng)基)，37℃水浴中勻速攪拌45-50min，至組織塊消化干凈；200目篩網(wǎng)過(guò)濾收集濾液，然后使用含有10％胎牛血清(fbs)的低糖dmem培養(yǎng)基等量中和，1500rpm離心10min，棄去上清液；以1×10⁶個(gè)/ml的細(xì)胞密度，用無(wú)血清培養(yǎng)基重懸脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞，并接種于培養(yǎng)瓶中，37℃、體積分?jǐn)?shù)為5％二氧化碳、飽和濕度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，當(dāng)脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞生長(zhǎng)至接近80％融合時(shí)，使用0.25％胰蛋白酶溶液消化脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞，以1：3的接種比例接種到新的培養(yǎng)瓶中進(jìn)行傳代培養(yǎng)。脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞融合至不超過(guò)80％，1000rpm離心5min，棄去上清液，重新加入無(wú)血清完全培養(yǎng)基重懸脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞，計(jì)數(shù)，按照1傳1-1.5接種10cm培養(yǎng)皿。脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)融合70％左右時(shí)如上述方法傳代培養(yǎng)。

選擇第三代培養(yǎng)的脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞，在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，且細(xì)胞融合程度不超過(guò)80％時(shí)按照傳代的要求消化、中和、洗滌、收集細(xì)胞，采用細(xì)胞凍存液(90％胎牛血清和10％二甲亞砜(dmso))重懸脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞，充分混勻，每管1ml分裝于凍存管密封。將凍存管置于裝有異丙醇的凍存盒中，于-80℃冰箱過(guò)夜，次日移入液氮罐保存。

脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞復(fù)蘇的步驟為：取出脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞凍存管，立即浸入37℃溫水中溶解；取適量無(wú)血清培養(yǎng)基混懸細(xì)胞并離心，棄去上清液；細(xì)胞重懸于無(wú)血清培養(yǎng)基中，并接種于培養(yǎng)皿中，于37℃、體積分?jǐn)?shù)為5％的二氧化碳、飽和濕度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

2、脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基的制備：

第3代脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞按照上述方法在t75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)到50-60％融合，收集條件培養(yǎng)基，將條件培養(yǎng)基在3000rpm下離心10min，移除細(xì)胞碎片，用一個(gè)7-kda分子量截止袋式過(guò)濾器在peg20000，4℃下透析，把條件培養(yǎng)基濃縮20倍，制得脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基。

二、活性水凝膠的制備：

將15g/l的殼聚糖和1g/l的透明質(zhì)酸溶于去離子水中(ph值為7-7.8)，攪拌均勻后緩慢加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2％的乙酸，使殼聚糖充分溶解，之后加入4.8g/l交聯(lián)劑戊二醛，攪拌均勻后在室溫條件(25℃)下靜置24h，得到殼聚糖-透明質(zhì)酸復(fù)合凝膠。加入2mg/ml之前制得的脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基，充分混均，使得脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基的活性因子粘附在殼聚糖-透明質(zhì)酸復(fù)合凝膠上。再加入2mg/mli型膠原混均，即得到活性水凝膠(hyd-cm)。

上述制備方法制備的活性水凝膠用于修復(fù)損傷的肌肉和皮膚，實(shí)驗(yàn)過(guò)程為：

sd大鼠處理：在無(wú)菌條件下，對(duì)sd大鼠皮膚進(jìn)行縱向切口，用解剖刀在sd大鼠右側(cè)小腿上肌肉的三分之一處產(chǎn)生約10×5×3mm(長(zhǎng)×寬×深)的手術(shù)缺損。用簡(jiǎn)單的vicryl縫合線縫合傷口，將活性水凝膠(hyd-cm)和膠原水凝膠移植到創(chuàng)面。切除的缺損肌肉重量近似于總肌肉的20％。當(dāng)活性水凝膠(hyd-cm)和膠原水凝膠在ph7下成形時(shí)，將它們小心地移植到缺損的脛骨前肌，接著縫合皮膚。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

(a)、活性水凝膠(hyd-cm)能夠促進(jìn)血管生成和肌原纖維促進(jìn)肌肉再生，同時(shí)減弱膠原和脂肪沉積：

將66只具有vml損傷的雄性sd大鼠隨機(jī)分為2組，分別未處理水凝膠組(hydrogel)和活性水凝膠組。獲取缺損區(qū)域的肌肉樣品，在5天，1周，2周，4周和8周對(duì)sd大鼠的損傷處進(jìn)行h&e，massontrichrome和siriusred染色。圖1所示的h&e染色顯示炎癥仍然存在1周，在4周和8周時(shí)觀察到持續(xù)的肌肉再生，而未處理水凝膠組顯示有積累的脂肪形成，這將阻礙肌肉修復(fù)。如圖2所示，第5天的siriusred染色顯示活性水凝膠組膠原蛋白沉積總量顯著下降。如圖2所示，8周的massontrichrome染色顯示未處理水凝膠組比活性水凝膠組有更強(qiáng)烈的藍(lán)色染色的膠原蛋白沉積。如圖2所示，2周的激光多普勒測(cè)試表明，活性水凝膠組中，血流恢復(fù)明顯升高，而損傷后2周的未處理水凝膠組無(wú)明顯改善。

(b)、活性水凝膠(hyd-cm)改善肌肉再生過(guò)程中的炎癥和血管再生

如圖3和圖4所示，qrt-pcr檢測(cè)5天和2周時(shí)的炎癥，血管發(fā)生以及肌肉再生相關(guān)的mrna表達(dá)。結(jié)果顯示，在活性水凝膠組，促炎白細(xì)胞介素如il1β，tnf-α和壞死因子如sirt和pgc-1α顯著降低，而抗炎白細(xì)胞介素(如il4和il10)升高。受傷部位的巨噬細(xì)胞在肌肉修復(fù)和再生中至關(guān)重要?；钚运z組的cd68和mcp-1表達(dá)高于水凝膠組，且argi，cd206和cd163升高，inos降低。該結(jié)果表明，活性水凝膠組中m2型巨噬細(xì)胞在傷口部位表達(dá)更高。qrt-pcr結(jié)果表明，emhc和ccr7的表達(dá)量比未處理水凝膠組高得多；肌原纖維分化因子，如myod，dystrophin和ctgf均在5天和2周升高；和其他修復(fù)相關(guān)因素，如纖維調(diào)節(jié)素(fmod)，肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(hgf)，血小板衍生生長(zhǎng)因子(pdgf)在5天和2周時(shí)升高。

如圖5所示，損傷后2周血管標(biāo)志物α-sma的if染色顯示，與未處理水凝膠組相比，活性水凝膠組血管生成明顯升高。如圖6所示，用westernblot檢測(cè)各種因子的表達(dá)量，通過(guò)gapdh的倍數(shù)來(lái)分析相對(duì)蛋白的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)在活性水凝膠組中，α-sma表達(dá)高于未處理水凝膠組；活性水凝膠組的desmin(肌腱線蛋白)，hgf(肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子)，coli(i型膠原纖維)和fmod(纖調(diào)蛋白)表達(dá)增加；肌源性相關(guān)蛋白myogenin，myod在hyd-cm組上調(diào)；同時(shí)，在肌肉修復(fù)和再生過(guò)程中，pakt/akt比值升高。上述結(jié)果表明，rascs-水凝膠移植到受損肌肉處可以通過(guò)調(diào)節(jié)一系列細(xì)胞因子和生長(zhǎng)因子表達(dá)而增強(qiáng)巨噬細(xì)胞m2型轉(zhuǎn)換，改善肌肉修復(fù)和重塑并促進(jìn)血管生成。

(c)、活性水凝膠(hyd-cm)促進(jìn)皮膚愈合

如圖7的he染色切片所示，在受傷1周、4周和8周后，活性水凝膠治療組sd大鼠傷口愈合率分別為25.9％，51.6.3％和91.5％。在未處理水凝膠組中，傷口愈合律為20.1％，38.7％和76.3％。與未處理水凝膠組相比，活性水凝膠組愈合率更高，治療效果明顯增強(qiáng)。

盡管本發(fā)明的實(shí)施方案已公開(kāi)如上，但其并不僅僅限于說(shuō)明書(shū)和實(shí)施方式中所列運(yùn)用，它完全可以被適用于各種適合本發(fā)明的領(lǐng)域，對(duì)于熟悉本領(lǐng)域的人員而言，可容易地實(shí)現(xiàn)另外的修改，因此在不背離權(quán)利要求及等同范圍所限定的一般概念下，本發(fā)明并不限于特定的細(xì)節(jié)與這里示出與描述的圖例。