一種阿福豆苷的藥物組合物及其醫(yī)藥用圖
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種阿福豆苷的藥物組合物及其醫(yī)藥用途，本發(fā)明提供的阿福豆苷的藥物組合物中含有阿福豆苷和一種結(jié)構(gòu)新穎的天然產(chǎn)物化合物(Ⅰ)，阿福豆苷、化合物(Ⅰ)單獨作用時，對急性胃潰瘍損傷具有保護作用；阿福豆苷和化合物(Ⅰ)聯(lián)合作用時，對急性胃潰瘍損傷的保護作用進一步增強，可以開發(fā)成治療急性胃潰瘍損傷的藥物，與現(xiàn)有技術(shù)相比具有突出的實質(zhì)性特點和顯著的進步。
【專利說明】
一種阿福豆苷的藥物組合物及其醫(yī)藥用途
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域，涉及阿福豆苷的新用途，具體涉及阿福豆苷的藥物組 合物及其在急性胃潰瘍損傷中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 急性胃潰瘍泛指休克、創(chuàng)傷、手術(shù)后和嚴重全身性感染時發(fā)生的急性胃炎，多伴有 出血癥狀，是一種急性胃黏膜病變。急性胃潰瘍發(fā)病率近年來有增高趨勢，主要原因是由于 重癥監(jiān)護的加強，生命器官的有效支持，以及抗感染藥物的更新，增加了急性胃潰瘍的機 會。
[0003] 臨床上本病不嚴重時無上腹痛和其他胃部癥狀，常被忽視，明顯的癥狀是嘔血和 排柏油樣便;大出血可導(dǎo)致休克;反復(fù)出血可導(dǎo)致貧血。胃十二指腸發(fā)生穿孔時即有腹部壓 痛、肌緊張等腹膜炎表現(xiàn)。
[0004] 迄今為止，尚未見阿福豆苷及其藥物組合物與急性胃潰瘍損傷的相關(guān)性報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的在于提供一種阿福豆苷的藥物組合物，該藥物組合物中含有阿福豆 苷和一種天然產(chǎn)物，阿福豆苷和該天然產(chǎn)物可以協(xié)同治療急性胃潰瘍損傷。
[0006] 本發(fā)明的上述目的是通過下面的技術(shù)方案得以實現(xiàn)的：
[0007] 一種具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物（I)，
[0008]
0.
[0009] -種阿福豆苷的藥物組合物，包括阿福豆苷、如權(quán)利要求1所述的化合物（I)和藥 學(xué)上可以接受的載體，制備成需要的劑型。
[0010] 進一步地，藥學(xué)上可以接受的載體包括稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、濕潤劑、 崩解劑、吸收促進劑、表面活性劑、吸附載體或潤滑劑。
[0011] 進一步地，所述劑型包括片劑、膠囊劑、口服液、口含劑、顆粒劑、沖劑、丸劑、散劑、 膏劑、丹劑、混懸劑、粉劑、溶液劑、注射劑、栓劑、噴霧劑、滴劑或貼劑。
[0012] 上述化合物（I)的制備方法，包含以下操作步驟：（a)將馬齒莧粉碎，用80~90%乙 醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和的正丁醇萃 取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步驟(a)中正丁醇取物用 大孔樹脂除雜，先用30 %乙醇洗脫6個柱體積，再用85 %乙醇洗脫12個柱體積，收集85 %洗 脫液，減壓濃縮得85%乙醇洗脫濃縮物；（c)步驟(b)中85%乙醇洗脫濃縮物用正相硅膠分 離，依次用體積比為100:1、50:1、25:1和12:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到4個組分；（d) 步驟(c)中組分4用正相硅膠進一步分離，依次用體積比為20:1、12:1和2:1的二氯甲烷-甲 醇梯度洗脫得到3個組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體 積百分濃度為88%的甲醇水溶液等度洗脫，收集13~16個柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮 得到化合物(I)。
[0013] 進一步地，化合物（I)的制備方法中，所述大孔樹脂為D101型大孔吸附樹脂。
[0014] 上述化合物(I)在制備治療急性胃潰瘍損傷的藥物中的應(yīng)用。
[0015] 上述阿福豆苷的藥物組合物在制備治療急性胃潰瘍損傷的藥物中的應(yīng)用。
[0016] 本發(fā)明的優(yōu)點：
[0017] 本發(fā)明提供的阿福豆苷的藥物組合物中含有阿福豆苷和一種結(jié)構(gòu)新穎的天然產(chǎn) 物，阿福豆苷和該天然產(chǎn)物單獨作用時，對急性胃潰瘍損傷具有治療作用；二者聯(lián)合作用 時，對急性胃潰瘍損傷的治療效果進一步提高，可以開發(fā)成治療急性胃潰瘍損傷的藥物。
【具體實施方式】
[0018] 下面結(jié)合實施例進一步說明本發(fā)明的實質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明保護范 圍。
[0019] 實施例1:化合物(I)分離制備及結(jié)構(gòu)確證
[0020]分離方法：（a)將馬齒莧(2kg)粉碎，用85%乙醇熱回流提?。?5LX 3次），合并提取 液，濃縮至無醇味（3L)，依次用石油醚（3L X 3次）、乙酸乙酯（3L X 3次）和水飽和的正丁醇 (3LX3次）萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步驟(a)中 乙酸乙酯萃取物用D101型大孔樹脂除雜，先用30%乙醇洗脫6個柱體積，再用85%乙醇洗脫 12個柱體積，收集85%洗脫液，減壓濃縮得85%乙醇洗脫濃縮物；（c)步驟(b)中85%乙醇洗 脫濃縮物用正相硅膠分離，依次用體積比為100:1 (12個柱體積）、50:1 (10個柱體積）、25:1 (8個柱體積)和12:1(8個柱體積)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到4個組分；（d)步驟(c)中組 分4用正相硅膠進一步分離，依次用體積比為20:1(6個柱體積）、12:1(8個柱體積)和2:1(6 個柱體積)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅烷鍵 合的反相硅膠分離，用體積百分濃度為88 %的甲醇水溶液等度洗脫，收集13~16個柱體積 洗脫液，洗脫液減壓濃縮即得(純度大于98 % )。
[0021] 結(jié)構(gòu)確證:冊431-1^顯示[1+!1]+為111/2 221.1822，結(jié)合核磁特征可得分子式為 〇1出24〇，不飽和度為4。核磁共振氫譜數(shù)據(jù)511( ??111，〇)(：13,5〇(^泡）：!1-1€[(1.35，111)，!1-10 (1.53，m)，H-2a(1.24，m)，H-20(1.37，m)，H-3a(2.21，br，d，J=12.9Hz)，H-30(2.O4，m)，H-5 (2.21，br，d，J=9.OHz)，H-6a(1.47，m)，H-60(1.66，m)，H-8a(1.52，m)，H-80(1.62，m)，H-9a (1.76，m)，H-90(1.84，m)，H-12(1.14，s)，H-13(1.26，s)，H-14(O.64，s)，H-15a(4.47，s)，H-15b(4.89, s);核磁共振碳譜數(shù)據(jù) ^(ppm，CDCl3,125MHz ):42.6(CH2，1-C)，23.1 (CH2,2-C)， 36.4(CH2,3-C)，154.1(C，4-C)，44.1(CH，5-C)，29.4(CH2,6-C)，74.2(C，7-C)，36.4(CH2,8-C)，34.3(CH2,9-C)，35.3(C，10-C)，73.0(C，11-C)，24.1(CH 3，12-C)，25.1(CH3，13-C)，15.6 (013，14-0，107.9(01 2，15-0?；衔锏臍渥V中顯示該化合物有三個單峰甲基信號％1.14 (3!1，8)，1.26(3!1，8)和0.64(3!1，8)]，一組末端雙鍵質(zhì)子信號[61 14.47(1!1，8)和4.89(1!1， s)]。該化合物的碳譜顯示15個碳信號，其中有一組雙鍵碳信號，以及兩個連氧碳信號。末端 雙鍵位于C-4和C-l 5之間，HMBC譜中H-l 5 (δΗ4.47)與C-3 (δ[36.4)和C-5 (δ[44.1)的相關(guān)性驗 證了上述推論。綜合高分辨質(zhì)譜以及核磁數(shù)據(jù)，該化合物可能為一個倍半萜類化合物。查閱 文獻可以看出該化合物和已知化合物611(168111-4(15)-6116-7€[，11-(1；[01具有相似的結(jié)構(gòu)。比 較兩者的核磁數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)，新化合物中相較于eudesm-4(15)-ene-7a，ll-diol區(qū)別很小，僅在 C-7和C-11位附近的碳譜產(chǎn)生較小的差別，同時新化合物多了一個不飽和度。在新化合物的 HMBC譜中，H-6/C-11，H-6/C-7，H-8/C-11以及H-12/C-7的相關(guān)性說明該化合物中C-7和C-l 1 位為氧化狀態(tài)。和已知化合物進行比較發(fā)現(xiàn)，新化合物中C-7和C-11位的碳均向高場位移， 結(jié)合高分辨質(zhì)譜，新化合物C-7和C-l 1位之間存在一個三元氧環(huán)。因此，該化合物是一個C-7/C-11位三元氧環(huán)的桉烷型倍半萜。NOE差譜試驗中照射H-14可以發(fā)現(xiàn)H-12，H-13有明顯增 益，表明H-12、H_13和H-14為β構(gòu)型。此外，通過NOE差譜試驗可知H-5、H_3a和H_6a為a構(gòu)型， 上述構(gòu)型表明桉烷環(huán)為反式連接。綜合氫譜、碳譜、HMBC譜和ROESY譜，以及文獻關(guān)于相關(guān)類 型核磁數(shù)據(jù)，可基本確定該化合物如下所示，立體構(gòu)型進一步通過ECD試驗確定，理論值與 實驗值基本一致。
[0022] 該化合物化學(xué)式及碳原子編號如下：
[0023]
[0024] 實施例2:藥理作用
[0025]本實施例采用乙醇制備小鼠急性胃粘膜損傷模型，測定胃粘膜損傷指數(shù)包括小鼠 胃組織S0D活性、MAD及PEG2含量，觀察藥物對急性胃黏膜損傷的治療作用。
[0026] 1、材料與方法
[0027] 1.1動物
[0028]昆明小鼠，（25 ±4)g，雌雄各半，山東中醫(yī)藥大學(xué)動物中心提供。
[0029] 1.2試劑與樣品
[0030]阿福豆苷自制并經(jīng)過結(jié)構(gòu)確證?；衔铮↖)自制，制備方法見實施例1。三九胃泰顆 粒購自三九醫(yī)藥股份有限公司。超氧化物歧化酶(S0D)試劑盒、丙二醛(MAD)試劑盒均購自 上海藍基生物科技有限公司。
[0031] 1.3儀器
[0032] 紫外可見分光光度計(型號:UV-2450/2550)，日本島津公司生產(chǎn)。
[0033] 1.4小鼠分組及模型制備
[0034]選取健康小鼠60只（雌雄各半），隨機分為6組，分別為空白對照組、模型對照組、陽 性對照組(三九胃泰顆粒)和阿福豆苷組(80mg · kg-3、化合物（I)組(80mg · kg-3、阿福豆 苷與化合物（I)組合物組【40mg · kg<阿福豆苷+40mg · kg-1化合物（I)】。模型對照組和空白 對照組給予生理鹽水，其他給藥連續(xù)灌胃l〇d。末次給藥后禁食不進水24h，在最后一次給藥 lh后，除空白對照組外，每只均灌胃給無水乙醇，按O.lmL/lOg給藥。
[0035] 1 · 5胃組織SOD活性、MAD含量測定
[0036]胃大體標本的制備:動物處死后，將其置于冰盒上，快速取全胃，沿胃大彎剪開，用 生理鹽水沖洗胃壁內(nèi)側(cè)，展平置于體顯微鏡下觀察胃粘膜損傷程度。根據(jù)試劑盒說明測定 組織S0D活性、MAD含量測定。
[0037] 1 · 6胃組織PGE2含量測定
[0038] 取胃組織勻漿2mL，4°C3000rpm離心15min后取上清液，以放射法測定PGE2含量。 [0039] 1.7統(tǒng)計學(xué)方法
[0040]用Excel工作表進行分析，各試驗組與對照組之間采用t檢驗進行比較。
[0041 ] 2、實驗結(jié)果
[0042] 2.1對急性胃粘膜損傷模型小鼠胃組織中S0D、MAD、PGE2含量的影響
[0043] 與空白對照組比，模型對照組S0D含量降低(P〈0.05)、MAD含量升高(P〈0.05)、PGE 2 含量降低（P〈 〇. 〇 5 )，說明造模成功；與模型對照組比，陽性對照組S 0 D含量顯著升高（P〈 0.01)、MAD含量顯著降低(P〈0.01)、PGE2含量升高(P〈0.05);與模型對照組比，阿福豆苷與 化合物（I)組合物組S0D含量顯著升高(P〈0.01)、MAD含量顯著降低(P〈0.01)、PGE2含量顯著 升高(P〈0.01);與模型對照組比，阿福豆苷組、化合物（I)組S0D含量升高(P〈0.05)、MAD含量 降低(P〈0.05)、PGE2含量升高(P〈0.05)。
[0044] 試驗結(jié)果見表1。
[0045] 表1對急性胃粘膜損傷模型小鼠胃組織中S0D、MAD、PGE2含量的影響
[0046]
[0047] 急性胃粘膜損傷是臨床常見的急癥，近幾年發(fā)現(xiàn)病理機制主要是內(nèi)源及外源性攻 擊因子和胃粘膜保護機制的平衡關(guān)系失衡，目前已證實，〇Η·自由基和0·自由基與多種類 型的胃粘膜損傷有關(guān)，研究認為〇 ·自由基既參與組織細胞的損傷過程，也是細胞正常代謝 的中間產(chǎn)物。由于氧自由基與胃粘膜損傷有關(guān)，即參與組織細胞的損傷也是細胞正常代謝 產(chǎn)物。MAD含量的高低間接反映了機體受氧自由基攻擊的程度，S0D能消除自由基，其活性高 低間接反映了機體清除氧自由基的能力。PGE2有抑制胃酸分泌的作用，并且能促進胃粘液 分泌并增加胃粘膜血流量而發(fā)揮保護作用，所以其含量高低反映了對胃粘膜的保護能力。
[0048] 上述結(jié)果表明，阿福豆苷、化合物（I)單獨作用時，對急性胃潰瘍損傷具有保護作 用；阿福豆苷和化合物（I)聯(lián)合作用時，對急性胃潰瘍損傷的保護作用進一步增強，可以開 發(fā)成治療急性胃潰瘍損傷的藥物。
[0049]上述實施例的作用在于說明本發(fā)明的實質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明的保護 范圍。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對本發(fā)明的技術(shù)方案進行修改或者等同替換， 而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實質(zhì)和保護范圍。
【主權(quán)項】
1. 一種具有下述結(jié)構(gòu)忒的仆,合物α) _^ O2. -種阿福豆苷的藥物組合物，其特征在于:包括阿福豆苷、如權(quán)利要求1所述的化合 物(I)和藥學(xué)上可以接受的載體，制備成需要的劑型。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的阿福豆苷的藥物組合物，其特征在于:藥學(xué)上可以接受的載體 包括稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、濕潤劑、崩解劑、吸收促進劑、表面活性劑、吸附載體 或潤滑劑。4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的阿福豆苷的藥物組合物，其特征在于:所述劑型包括片劑、膠 囊劑、口服液、口含劑、顆粒劑、沖劑、丸劑、散劑、膏劑、丹劑、混懸劑、粉劑、溶液劑、注射劑、 栓劑、噴霧劑、滴劑或貼劑。5. 權(quán)利要求1所述的化合物（I)的制備方法，其特征在于，包含以下操作步驟：（a)將馬 齒莧粉碎，用80~90%乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油醚、乙酸乙 酯和水飽和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b) 步驟(a)中正丁醇取物用大孔樹脂除雜，先用30%乙醇洗脫6個柱體積，再用85%乙醇洗脫 12個柱體積，收集85%洗脫液，減壓濃縮得85%乙醇洗脫濃縮物；（c)步驟(b)中85%乙醇洗 脫濃縮物用正相硅膠分離，依次用體積比為100:1、50:1、25:1和12:1的二氯甲烷-甲醇梯度 洗脫得到4個組分；（d)步驟(c)中組分4用正相硅膠進一步分離，依次用體積比為20:1、12:1 和2:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅烷鍵合的 反相硅膠分離，用體積百分濃度為88 %的甲醇水溶液等度洗脫，收集13~16個柱體積洗脫 液，洗脫液減壓濃縮得到化合物(I)。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的化合物（I)的制備方法，其特征在于:所述大孔樹脂為DlOl型 大孔吸附樹脂。7. 權(quán)利要求1所述的化合物（I)在制備治療急性胃潰瘍損傷的藥物中的應(yīng)用。8. 權(quán)利要求2~4任一所述的阿福豆苷的藥物組合物在制備治療急性胃潰瘍損傷的藥 物中的應(yīng)用。
【文檔編號】A61K31/336GK106008405SQ201610368157
【公開日】2016年10月12日
【申請日】2016年5月27日
【發(fā)明人】高忠青
【申請人】淄博夸克醫(yī)藥技術(shù)有限公司