本發(fā)明涉及一種植物源性降糖降脂藥物。

背景技術(shù)：

糖尿病是一種以高血糖為特征的代謝性疾病，其主要原因是胰島功能障礙導(dǎo)致的胰島素分泌不足。糖尿病病人持續(xù)的高血糖，導(dǎo)致各種組織，特別是眼、腎、心臟、血管、神經(jīng)的慢性損害、功能障礙，引起一系列的并發(fā)癥。糖尿病常常伴隨著高血脂，且本身高血脂就增加患糖尿病的風(fēng)險(xiǎn)，高脂飲食常被用來構(gòu)建糖尿病模型?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究顯示，糖尿病的形成的內(nèi)在機(jī)制與氧化應(yīng)激有關(guān)，氧化應(yīng)激產(chǎn)生過量的自由基(如活性氧、活性氮)會(huì)導(dǎo)致分泌胰島素的胰島β細(xì)胞功能損傷，從而引發(fā)糖尿病，且過量自由基還會(huì)導(dǎo)致其他組織器官損傷，誘發(fā)及加重糖尿病并發(fā)癥(selvarajuv,joshim,sureshs,sanchezja,maulikn,maulikg.diabetes,oxidativestress,molecularmechanism,andcardiovasculardisease--anoverview.toxicolmechmethods2012；22(5):330-335.；黃曉菲，張瓊.ros與細(xì)胞自噬在ⅱ型糖尿病中的生物學(xué)作用[j].中國組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志，2016,25(4)：366-370)。因此對于糖尿病的治療，降血糖是首要任務(wù)，是對病癥的直接治療，清除體內(nèi)過多自由基，修復(fù)受損胰島β細(xì)胞，是對病因的干預(yù)，同時(shí)，降低血脂則對于病因的干預(yù)起協(xié)同輔助作用。

桑葉中的生物堿業(yè)被研究證實(shí)具有顯著的降血糖作用，它可顯著抑制小腸α-糖苷酶活性，降低麥芽糖、蔗糖轉(zhuǎn)化為葡萄糖，從而降低餐后血糖水平(李有貴，儲一寧，鐘石，等.59份野生桑桑葉中的dnj含量及粗提物對α-糖苷酶的抑制活性.蠶業(yè)科學(xué),2010,36(5):0729-0737)。此外，桑葉生物堿還可以下調(diào)腸道葡萄糖吸收相關(guān)酶的表達(dá)、提高肝臟糖酵解酶的表達(dá)(you-guili,dong-fengji,shizhong,tian-baolin,zhi-qianglv,gui-yanhu&xinwang.1-deoxynojirimycininhibitsglucoseabsorptionandacceleratesglucosemetabolisminstreptozotocin-induceddiabeticmice.scientificreports,2013；3:1377)。苦瓜多糖也被報(bào)道能夠顯著降低糖尿病小鼠的血糖水平，提高胰島素分泌水平(宋金平.苦瓜多糖對糖尿病小鼠的降血糖作用和胰島素水平的影響[j].中國實(shí)用醫(yī)藥,2012,07(3):250-251.)荷葉在古代就被記載有減肥功效，現(xiàn)代研究表明荷葉中的生物堿具有降血脂作用，可以顯著降低肥胖大鼠體重增長，降低血液中甘油三酯、總膽固醇含量，此外還被報(bào)道具有清除自由基、抗氧化功能(楊菲,徐新,唐良秋,等.荷葉生物堿的研究進(jìn)展[j].現(xiàn)代醫(yī)院,2012,12(6):93-94.)。石榴皮中多酚化合物已被證實(shí)具有很強(qiáng)的抗氧化能力，能夠體外清除多種自由基，抑制脂質(zhì)過氧化，在體內(nèi)石榴皮多酚能夠抑制多種因素導(dǎo)致的氧化損傷(sunyq,taox,menxm,liym,xuzw,wt.invitroandinvivoantioxidantactivitiesofthreemajorpolyphenoliccompoundsinpomegranatepeel:ellagicacid，punicalin，andpunicalagin.journalofintegrativeagriculture，2017.；唐遠(yuǎn)謀,許麗佳,蔣衛(wèi)東,等.石榴皮多酚對糖尿病小鼠腎臟抗氧化防御功能的影響[j].食品工業(yè)科技,2015,36(16):370-372.)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種植物源性降糖降脂藥物，通過這幾種藥用活性物質(zhì)的協(xié)同作用，在降低糖尿病患者餐后血糖，改善糖耐量的同時(shí)，能夠修復(fù)受損的胰島β細(xì)胞，降低血脂，治療糖尿病綜合癥。

為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：一種植物源性降糖降脂藥物，按重量百分比包括以下組份：桑葉中提取的生物堿原料粉20-60％、苦瓜中提取的多糖原料粉20-60％、荷葉中提取的生物堿原料粉5-15％、石榴皮中提取的多酚原料粉5-25％。

優(yōu)選的，所述苦瓜中提取多糖原料粉的提取工藝流程為：依次包括以下步驟：a1、新鮮苦瓜切片，烘箱中干燥，溫度不大于50℃；將干燥的苦瓜片粉碎成粉，過30-80目篩；

a2、將苦瓜粉末按照1:30-1:50(w/v)加入水，90-100℃提取12-24小時(shí)；

a3、將得到的提取液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，得到濃縮提取液；

a4、將濃縮提取液加3倍體積乙醇沉淀，沉淀液8000-10000rpm離心，收集沉淀，沉淀烘干即為苦瓜多糖原料粉。

優(yōu)選的，所述荷葉藥用活性成分的提取工藝流程為：依次包括以下步驟：

b1、荷葉烘箱干燥或曬干，干燥溫度不大于50℃；

b2、粉碎：粉碎粒度30目至80目；

b3、加入50-70％酒精，料液的重量比為1：30-50,超聲波提取4-6小時(shí)，提取溫度30-50℃，超聲功率：1000-1300w，提取完成后過濾去除濾渣，得到提取液進(jìn)行8000-10000rpm離心，得到上清液

b4、將上清液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除酒精，8000-10000rpm離心，收集上清液，上清液冷凍或噴霧干燥，得到荷葉生物堿的原料粉。

優(yōu)選的，所述石榴皮藥用活性成分的提取工藝流程為：依次包括以下步驟：

c1、成熟石榴果實(shí)，將果皮剝下，干燥，干燥溫度不大于50℃；

c2、將干燥石榴皮粉碎，過30目至80目篩；

c3、提取：石榴皮粉按1:30-1:50(w/v)加入40％-80％乙醇，超聲功率：1000-1300w，60℃提取2-4小時(shí)，提取完成后細(xì)篩過濾去除濾渣，得到提取液進(jìn)8000-10000rpm離心，得到上清液；

c4、將上述步驟中的上清液旋蒸去除酒精，離心收集上清液，上清液用弱極性大孔樹脂吸附過液，蒸餾水沖洗去除糖類等雜質(zhì)，樹脂用80-95％乙醇洗脫，收集洗脫液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去掉酒精，濃縮至小體積后烘箱烘干，干燥固體粉碎后得到石榴皮多酚的原料粉。

優(yōu)選的，桑葉生物堿原料粉的提取工藝為：

d1、采摘：采摘桑葉，每年5月至10月；

d2、干燥：將采摘的桑葉干燥，干燥溫度不大于50℃；

d3、粉碎：粉碎粒度30目至80目；

d4、加入酒精，然后超聲波提取：酒精濃度50-70％，料液的重量比為1：30-50，提取時(shí)間4-6小時(shí)，提取溫度30-50℃，超聲功率：1000-1300w，提取完成后細(xì)篩過濾去除濾渣，得到提取液進(jìn)行8000-10000rpm離心，得到上清液；

d5、將d4步驟產(chǎn)生的上清液旋蒸去除酒精，離心收集上清液，上清液用酸型陽離子交換樹脂吸附12-24小時(shí)，自來水沖洗去雜后，樹脂用0.25-0.5mol/l的氨水洗脫，收集洗脫液旋蒸去除氨水，濃縮至小體積后離心得上清夜；

d6、重復(fù)步驟d5，將上清液用強(qiáng)酸型陽離子交換樹脂吸附2-4小時(shí)，自來水沖洗去雜后，樹脂用0.25-0.5mol/l的氨水洗脫，收集洗脫液旋蒸去除氨水，濃縮至小體積后冷凍或噴霧干燥，得到桑葉生物堿的原料粉。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是：以桑葉、苦瓜、荷葉、石榴皮等廉價(jià)中藥材為原料，以降糖、降脂、清除自由基為原理，將幾種植物藥材中的活性物質(zhì)提取并合理配比后，使其協(xié)同發(fā)揮作用，降低糖尿病患者空腹血糖、餐后血糖以及血脂，并減小自由基對胰島β細(xì)胞的氧化損傷，改善糖尿病的并發(fā)癥狀。本發(fā)明所用植物材料資源豐富、價(jià)格低廉，提取制作工藝簡單，提取溶劑為乙醇和水，安全環(huán)保，適宜于工業(yè)化生產(chǎn)。

附圖說明

下面結(jié)合附圖對本發(fā)明作進(jìn)一步說明：

圖1為采用本工藝生產(chǎn)的藥劑對小鼠糖耐量的影響對比圖；

圖2為采用本工藝生產(chǎn)的藥劑對小鼠血清總膽固醇的影響對比圖；

圖3為采用本工藝生產(chǎn)的藥劑對小鼠血清甘油三酯的影響對比圖；

圖4為采用本工藝生產(chǎn)的藥劑對stz誘導(dǎo)損傷的胰島β細(xì)胞保護(hù)作用對比圖；

圖5本工藝生產(chǎn)的藥劑對stz誘導(dǎo)損傷的胰島β細(xì)胞保護(hù)作用顯微鏡圖；

圖6為工藝生產(chǎn)的藥劑對超氧陰離子自由基的清除作用。

具體實(shí)施方式

一種植物源性降糖降脂藥物，按重量百分比包括以下組份：桑葉中提取的生物堿原料粉40％、苦瓜中提取的多糖原料粉40％、荷葉中提取的生物堿原料粉10％、石榴皮中提取的多酚原料粉10％。

所述苦瓜中提取多糖原料粉的提取工藝流程為：依次包括以下步驟：

a1、新鮮苦瓜切片，烘箱中干燥，溫度不大于50℃；將干燥的苦瓜片粉碎成粉，過30-80目篩；

a2、將苦瓜粉末按照1:30-1:50(w/v)加入水，90-100℃提取12-24小時(shí)；

a3、將得到的提取液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，得到濃縮提取液；

a4、將濃縮提取液加3倍體積乙醇沉淀，沉淀液8000-10000rpm離心，收集沉淀，沉淀烘干即為苦瓜多糖原料粉。

所述荷葉藥用活性成分的提取工藝流程為：依次包括以下步驟：

b1、荷葉烘箱干燥或曬干，干燥溫度不大于50℃；

b2、粉碎：粉碎粒度30目至80目；

b3、加入50-70％酒精，料液的重量比為1：30-50,超聲波提取4-6小時(shí)，提取溫度30-50℃，超聲功率：1000-1300w，提取完成后過濾去除濾渣，得到提取液進(jìn)行8000-10000rpm離心，得到上清液

b4、將上清液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除酒精，8000-10000rpm離心，收集上清液，上清液冷凍或噴霧干燥，得到荷葉生物堿的原料粉。

所述石榴皮藥用活性成分的提取工藝流程為：依次包括以下步驟：

c1、成熟石榴果實(shí)，將果皮剝下，干燥，干燥溫度不大于50℃；

c2、將干燥石榴皮粉碎，過30目至80目篩；

c3、提?。菏衿し郯?:30-1:50(w/v)加入40％-80％乙醇，超聲功率：1000-1300w，60℃提取2-4小時(shí)，提取完成后細(xì)篩過濾去除濾渣，得到提取液進(jìn)8000-10000rpm離心，得到上清液；

c4、將上述步驟中的上清液旋蒸去除酒精，離心收集上清液，上清液用弱極性大孔樹脂吸附過液，蒸餾水沖洗去除糖類等雜質(zhì)，樹脂用80-95％乙醇洗脫，收集洗脫液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去掉酒精，濃縮至小體積后烘箱烘干，干燥固體粉碎后得到石榴皮多酚的原料粉。

桑葉生物堿原料粉的提取工藝為：

d1、采摘：采摘桑葉，每年5月至10月；

d2、干燥：將采摘的桑葉干燥，干燥溫度不大于50℃；

d3、粉碎：粉碎粒度30目至80目；

d4、加入酒精，然后超聲波提?。壕凭珴舛?0-70％，料液的重量比為1：30-50，提取時(shí)間4-6小時(shí)，提取溫度30-50℃，超聲功率：1000-1300w，提取完成后細(xì)篩過濾去除濾渣，得到提取液進(jìn)行8000-10000rpm離心，得到上清液；

d5、將d4步驟產(chǎn)生的上清液旋蒸去除酒精，離心收集上清液，上清液用酸型陽離子交換樹脂吸附12-24小時(shí)，自來水沖洗去雜后，樹脂用0.25-0.5mol/l的氨水洗脫，收集洗脫液旋蒸去除氨水，濃縮至小體積后離心得上清夜；

d6、重復(fù)步驟d5，將上清液用強(qiáng)酸型陽離子交換樹脂吸附2-4小時(shí)，自來水沖洗去雜后，樹脂用0.25-0.5mol/l的氨水洗脫，收集洗脫液旋蒸去除氨水，濃縮至小體積后冷凍或噴霧干燥，得到桑葉生物堿的原料粉。

除了上述重量百分比外，還可以采用桑葉中提取的生物堿原料粉20％、苦瓜中提取的多糖原料粉60％、荷葉中提取的生物堿原料粉5％、石榴皮中提取的多酚原料粉15％。

或者，桑葉中提取的生物堿原料粉35％、苦瓜中提取的多糖原料粉25％、荷葉中提取的生物堿原料粉15％、石榴皮中提取的多酚原料粉25％。

或者，桑葉中提取的生物堿原料粉60％、苦瓜中提取的多糖原料粉20％、荷葉中提取的生物堿原料粉10％、石榴皮中提取的多酚原料粉10％。

或者，桑葉中提取的生物堿原料粉45％、苦瓜中提取的多糖原料粉35％、荷葉中提取的生物堿原料粉15％、石榴皮中提取的多酚原料粉5％。

將上述四種原料粉按比例充分混勻后，制成不同劑型即可。

采用上述工藝生產(chǎn)的原料粉可以選自以下劑型：片劑、膠囊劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、顆粒劑、丸劑、散劑、口服液、混懸劑、溶液劑。以下是對采用本工藝生產(chǎn)的原料進(jìn)行藥理藥效實(shí)驗(yàn)。

1.試驗(yàn)?zāi)康?/p>

觀察本工藝生產(chǎn)的藥劑對小鼠糖耐量的影響以及對stz誘導(dǎo)損傷的胰島β細(xì)胞保護(hù)作用，為本工藝生產(chǎn)的藥劑降糖作用提供初步的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

2.受試藥物

本工藝生產(chǎn)的藥劑片原料，形狀：棕黃色粉末，批號：170320，貯存方法：避光、干燥、常溫(25℃以下)保存，配制方法：臨用前用無菌0.9％生理鹽水溶解至所需濃度。

3.試驗(yàn)動(dòng)物

品種品系：c57/b6小鼠，級別：spf級，性別：雌性，體重：18-20g，數(shù)量：60只，來源：中國科學(xué)院上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心/上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司[生產(chǎn)許可證：scxk(滬)2012-0005]。

4.實(shí)驗(yàn)條件

屏障系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)飼養(yǎng)室，溫度：22±1℃，濕度：50-70％，光照：150-200lx，12小時(shí)明暗交替，噪音<50db。飲水：自來水，置于飲水瓶中自由飲用。飼料：全價(jià)營養(yǎng)顆粒飼料。飼養(yǎng)方式：自由飲食，飼養(yǎng)籠中給予充足的飼料和水，每籠飼養(yǎng)8只小鼠。

5.試劑與儀器

5.1試劑

鏈脲佐菌素(stz)，sigma公司產(chǎn)品；蔗糖，500g/瓶，中國醫(yī)藥(集團(tuán))上?；瘜W(xué)試劑公司，配制方法：臨用前用生理鹽水配制成濃度為0.30g/ml的蔗糖溶液；氯化鈉注射液，250ml/瓶，含量0.9％，由浙江平湖莎普愛思制藥有限公司生產(chǎn)；血糖試劑條，由美國強(qiáng)生公司生產(chǎn)；胰島β細(xì)胞株ins-1，中國科學(xué)院上海細(xì)胞庫提供。胎牛血清(杭州民康生物技術(shù)有限公司)、rpmi1640培養(yǎng)基(杭州昊天生物技術(shù)有限公司)；dmso(中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院生物工程研究所)；臺盼藍(lán)染色液(北京索萊寶科技有限公司)；氮藍(lán)四唑(nbt)、吩嗪硫酸甲酯(pms)和輔酶ⅰ(nadh)，購自美國sigma公司；水溶性維生素e，購自日本東京化工有限公司；甘油三酯試劑盒、總膽固醇試劑盒均購自南京建成生物科技有限公司。

5.2儀器設(shè)備

onetouchrultra血糖儀，強(qiáng)生(上海)醫(yī)療器材有限公司；spectramaxm5多功能酶標(biāo)儀，美國分子儀器公司；countstar細(xì)胞計(jì)數(shù)儀，上海睿鈺生物科技有限公司；co2培養(yǎng)箱，美國therom公司；超凈工作臺，新加坡esco公司。

6.試驗(yàn)方法

6.1小鼠篩選

取體重為18-20g的雌性c57/b6小鼠，禁食不禁水12小時(shí)，篩選空腹血糖在4-6mmol/l的糖尿病小鼠20只。

6.2糖耐量實(shí)驗(yàn)

試驗(yàn)小鼠禁食不禁水12小時(shí)后尾靜脈取血，用onetouch^rultra血糖儀測定小鼠的空腹血糖值。本工藝生產(chǎn)的藥劑組口服給予藥劑50mg/kg，對照組口服給予相等劑量的生理鹽水溶液，30分鐘過后各組口服給予0.3g/ml的蔗糖溶液0.1ml/10g，測定給糖后30min、60min、120min的血糖。

6.3降血脂試驗(yàn)

取體重為18-20g的雌性小鼠40只，分為4組，每組10只。4組小鼠分別飼喂正常日糧、正常日糧+1mg/ml受試藥劑飲水、高脂日糧、高脂日糧+1mg/ml受試藥劑飲水。試驗(yàn)第30天禁食不禁水12小時(shí)后屠宰取血，分離血清，試劑盒測量血清中甘油三酯和總膽固醇含量。

6.4胰島β細(xì)胞保護(hù)作用

將胰島β細(xì)胞ins-1以1*10⁵個(gè)/ml的密度接種于24孔板中，每孔250μl。實(shí)驗(yàn)組加入不同劑量本工藝生產(chǎn)的藥劑溶液，每孔250μl使本工藝生產(chǎn)的藥劑終濃度分別為0.125、1.25μg/ml，空白對照組加入同體積rpmi1640完全培養(yǎng)液，每組設(shè)6復(fù)孔。

另外，實(shí)驗(yàn)孔加入16mmstz溶液125μl，同時(shí)加入0.125、1.25μg/ml本工藝生產(chǎn)的藥劑溶液125μl，每個(gè)濃度設(shè)6個(gè)復(fù)孔，并設(shè)正常對照組(細(xì)胞，未加stz)、stz損傷模型組(細(xì)胞，加stz，不加藥物)。培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h后，每孔棄去培養(yǎng)液，加入pbs洗滌細(xì)胞，0.25％胰酶消化，收集細(xì)胞，離心棄去上清液，加入500μlpbs，吹打均勻，即為細(xì)胞懸液。20μl臺盼藍(lán)染料與20μl細(xì)胞懸液混勻，用countstar細(xì)胞計(jì)數(shù)儀進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。

6.5自由基清除試驗(yàn)

以dmso為溶劑配制受試試劑和水溶性維生素e樣品待測液，濃度梯度為80、40、20、10、5、0mg/l。以0.1mph7.4磷酸鹽緩沖液(pbs)為溶劑，配制60μmpms、468μmnadh以及150μmnbt。向試管中依次加入0.5ml樣品待測液、1mlpms、1mlnadh和1mlnbt，震蕩混勻后室溫下反應(yīng)6min，測定560nm吸光度值。以濃度為0mg/ml待測液為對照，每個(gè)樣品設(shè)三個(gè)重復(fù)。按照下面公式計(jì)算超氧陰離子清除率：

超氧陰離子清除率＝(a對照－a樣品)/a對照×100％

7.數(shù)據(jù)處理

用spss12軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，所有數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，計(jì)量資料應(yīng)用t檢驗(yàn)評價(jià)試驗(yàn)結(jié)果。

8試驗(yàn)結(jié)果

8.1本工藝生產(chǎn)的藥劑對小鼠糖耐量的影響

從圖1結(jié)果可見，與對照組相比，本工藝生產(chǎn)的藥劑量組小鼠在口服給予蔗糖后30min(p<0.01)和60min(p<0.05)后血糖顯著下降，血糖曲下面積也明顯降低(p<0.01)。

8.1本工藝生產(chǎn)的藥劑對小鼠血脂的影響

由圖2、圖3可以看出，本工藝生產(chǎn)藥劑對飼喂高脂日糧的小鼠具有顯著的降脂作用，其血清總膽固醇和甘油三酯均有顯著的降低(p<0.01)。

8.2本工藝生產(chǎn)的藥劑對stz損傷的胰島β細(xì)胞的影響

由圖4可知，注：與stz模型組比較，**p<0.01，stz處理的胰島β細(xì)胞ins-1組活細(xì)胞數(shù)量顯著減少(p<0.01)，表明stz對胰島β細(xì)胞有顯著的損傷作用，本工藝生產(chǎn)的藥劑處理組活細(xì)胞數(shù)量顯著高于stz損傷組(p<0.01)，表明本工藝生產(chǎn)藥劑對stz損傷的胰島β細(xì)胞ins-1具有明顯的保護(hù)作用，且有隨著劑量增加而提高的趨勢，發(fā)揮這一作用可能是因?yàn)楸竟に嚿a(chǎn)的藥劑具有顯著的清除·oh、超氧陰離子的功能。顯微觀察與細(xì)胞計(jì)數(shù)測定結(jié)果基本一致，如圖5所示，注：a為正常胰島β細(xì)胞，b為stz損傷細(xì)胞，c為本工藝生產(chǎn)藥劑0.125μg/ml處理細(xì)胞，d為本工藝生產(chǎn)藥劑1.25μg/ml處理細(xì)胞，正常對照組ins-1細(xì)胞貼壁生長、呈不規(guī)則多邊形(a)；stz致ins-1細(xì)胞數(shù)量減少，貼壁不牢，形狀變圓，細(xì)胞萎縮脫落(b)；本工藝生產(chǎn)的藥劑可減輕stz對ins-1細(xì)胞的損傷，細(xì)胞數(shù)量增加，貼壁生長，細(xì)胞形態(tài)明顯改善趨向正常(c)。

8.3本工藝生產(chǎn)的藥劑對超氧陰離子的清除作用

由圖6可以看出，本工藝生產(chǎn)藥劑對超氧陰離子有很強(qiáng)的清除作用，明顯優(yōu)于常用的抗氧化劑水溶性維生素e。優(yōu)越的清除自由基能力可能是本試劑能夠保護(hù)胰島β細(xì)胞的重要原因之一。

以上所述僅為本發(fā)明的具體實(shí)施例，但本發(fā)明的技術(shù)特征并不局限于此，任何本領(lǐng)域的技術(shù)人員在本發(fā)明的領(lǐng)域內(nèi)，所作的變化或修飾皆涵蓋在本發(fā)明的專利范圍之中。