本發(fā)明涉及一種降糖降脂的黃連解毒湯組合物及其檢測方法，屬于中藥領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

黃連《神農(nóng)本草經(jīng)》：“味苦，寒。主治熱氣，目痛，眥傷，泣出，明目，腸澼，腹痛，下痢，婦人陰中腫痛。久服令人不忘”?！睹t(yī)別錄》：“微寒，無毒。主治五藏冷熱，久下泄?jié)?、膿血，止消渴、大驚，除水，利骨，調(diào)胃，厚腸，益膽，治口瘡”?！侗静菔斑z》：“主羸瘦氣急”。《藥性論》：“惡白僵蠶，忌豬肉，惡冷水。殺小兒疳蟲，點(diǎn)赤眼昏痛，鎮(zhèn)肝，去熱毒”。現(xiàn)代藥理研究黃連藥理作用有抗?jié)?、抑制胃酸分泌、保護(hù)胃粘膜、抗炎鎮(zhèn)痛、抑菌。廣泛用于濕熱痞滿，嘔吐，瀉痢，黃疸，高熱神昏，心火亢盛，心煩不寐，血熱吐衄，目赤吞酸，牙痛，消渴，癰腫疔瘡；外治濕疹，濕瘡，耳道流膿。

黃連為毛茛科植物黃連Coptischinensis Franch.、三角葉黃連Coptis deltoideaC.Y.Cheng et Hsiao.或云連Coptis teeta wall.的干燥根莖，味苦性寒，主要含有小檗堿等生物堿類成分，黃連及其主要成分小檗堿治療糖尿病及其并發(fā)癥、血脂異常等的藥理活性。但是，給大鼠連續(xù)灌胃較大劑量的黃連水煎劑10天后，對大鼠胃腸激素胃動(dòng)素、胃泌素等均有明顯影響，可導(dǎo)致胃粘膜PGE2水平下降、氧自由基體系代謝活躍，胃黏膜脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物堆積，進(jìn)而導(dǎo)致大鼠胃腸功能紊亂甚至死亡；臨床應(yīng)用時(shí)也常有黃連及小檗堿制劑的不良反應(yīng)報(bào)道?？梢姡S連或小檗堿雖然藥效作用明顯，但，單獨(dú)用藥安全劑量范圍窄，安全性不佳，在臨床前研究和臨床使用中均存在一定的風(fēng)險(xiǎn)，就有必要進(jìn)行中藥復(fù)方配伍來提高黃連臨床使用的安全性。

黃連解毒湯始載于《外臺秘要》“黃連3兩，黃柏2兩，黃芩2兩，梔子14枚。水6升，煎取2升，分2次服?！保捎凇皟?、枚、升”的具體用量不清楚”，雖然，在用于清熱解毒時(shí)，黃連解毒湯的用量被公開為“黃連(9克)黃芩(6克)黃柏(6克)梔子(9克)”，但是，由于清熱解毒屬于表癥、屬于急癥，其用量和制備工藝是不能直接套用到制備治療消渴這種里癥的藥物上來的，黃連、黃柏、黃芩、梔子這四種藥材在制備降糖降脂的組合物依然處于空白狀態(tài)，由于本領(lǐng)域技術(shù)人員不能通過常規(guī)的用量選擇、工藝優(yōu)選來加以確定，不能簡單通過常規(guī)方法來提高黃連臨床使用的安全性，無法開發(fā)出臨床上使用方便、安全有效的藥物制劑。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是提供一種降糖、或、降脂的黃連解毒湯組合物，以及該組合物的制備方法和檢測方法。

本發(fā)明提供一種降糖、或、降脂的黃連解毒湯組合物，黃連、黃芩、黃柏、梔子的質(zhì)量比是：(1-20)、(1-10)、(1-10)、(20-50)。

本發(fā)明提供一種降糖、或、降脂的黃連解毒湯組合物，黃連、黃芩、黃柏、梔子的質(zhì)量比是：(1-20)、(1-10)、(1-10)、(20-50)。

本發(fā)明提供一種降糖、或、降脂的黃連解毒湯組合物，將黃連、黃芩、黃柏、梔子混合，粉碎，過100目篩，制成散劑。

本發(fā)明提供一種降糖、或、降脂的黃連解毒湯組合物，將黃連、黃芩、黃柏、梔子混合，用5-15倍量的水煎煮1-3次，每次1-3小時(shí)，合并提取液，制成湯劑。

本發(fā)明提供一種降糖、或、降脂的黃連解毒湯組合物，將黃連、黃芩、黃柏、梔子混合，用5-15倍量的水煎煮1-3次，每次1-3小時(shí)，合并提取液，加入矯味劑適量，制成口服液。

本發(fā)明提供一種降糖、或、降脂的黃連解毒湯組合物，將黃連、黃芩、黃柏、梔子混合，用5-15倍量的水煎煮1-3次，每次1-6小時(shí)，合并提取液，適量濃縮后，浸膏真空干燥；按照浸膏10-40g，乳糖200-500g，微粉硅膠10-30g，羧甲基淀粉鈉10-40g，可溶性淀粉50-200g，硬脂酸鎂1-3g，混合均勻，制成片劑。

本發(fā)明提供一種降糖、或、降脂的黃連解毒湯組合物，將黃連、黃芩、黃柏、梔子、大黃混合，粉碎，過100目篩，制成散劑。

本發(fā)明提供一種降糖、或、降脂的黃連解毒湯組合物，將黃連、黃芩、黃柏、梔子、大黃混合，用5-15倍量的水煎煮1-3次，每次1-3小時(shí)，合并提取液，制成湯劑。

本發(fā)明提供一種降糖、或、降脂的黃連解毒湯組合物，將黃連、黃芩、黃柏、梔子、大黃混合，用5-15倍量的水煎煮1-3次，每次1-3小時(shí)，合并提取液，加入矯味劑適量，制成口服液。

本發(fā)明提供一種降糖、或、降脂的黃連解毒湯組合物，將黃連、黃芩、黃柏、梔子、大黃混合，用5-15倍量的水煎煮1-3次，每次1-6小時(shí)，合并提取液，適量濃縮后，浸膏真空干燥；按照浸膏10-40g，乳糖200-500g，微粉硅膠10-30g，羧甲基淀粉鈉10-40g，可溶性淀粉50-200g，硬脂酸鎂1-3g，混合均勻，制成片劑。

一種降糖、或、降脂的組合物可單一或與藥學(xué)上可接受的藥物載體用于制備預(yù)防或治療代謝綜合征的藥物或保健品制劑。

所述的藥物制劑形式可以是任何可藥用的劑型，這些劑型包括：湯劑、散劑、顆粒劑、膠囊劑、丸劑、片劑、或口服液等。

本發(fā)明利用原發(fā)性高血壓大鼠、高脂飼料結(jié)合鏈脲佐菌素誘導(dǎo)的II型糖尿病大鼠、果糖飼料誘導(dǎo)的代謝綜合征大鼠、db/db小鼠、四氧嘧啶誘導(dǎo)的I型糖尿病小鼠、高脂飼料誘導(dǎo)的代謝綜合征小鼠進(jìn)行體內(nèi)藥效實(shí)驗(yàn)。

結(jié)果表明：本發(fā)明優(yōu)選了組分用量、優(yōu)選了工藝，提供的中藥組合物可明顯降低模型動(dòng)物血清甘油三酯、膽固醇、低密度脂蛋白等水平，改善血糖和葡萄糖、胰島素耐量，抑制高脂飲食造成的高血脂、高血糖，顯示出良好的降糖降脂的藥用價(jià)值。

本發(fā)明的技術(shù)方案如下：

一種黃連解毒湯組合物的檢測方法，包括如下鑒別方法中的一種或幾種：

A.黃連鑒別

取黃連解毒湯組合物細(xì)粉2-10g，加入乙酸乙酯10-50ml，PH調(diào)到7.2-7.5，超聲提取0.5-2小時(shí)，濾過，作為供試品溶液；

取黃連藥材適量，加乙酸乙酯，PH調(diào)到7.2-7.5，制成每1ml含1-10mg藥材的溶液，，超聲提取0.5-2小時(shí)，濾過，作為對照品溶液；

分別吸取上述溶液各1-5μl，點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積份數(shù)比為(3-5)∶(0.5-2)異丙醇-冰醋酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以重量體積比2％三氯化鐵乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同或類似顏色的斑點(diǎn)；

本發(fā)明的鑒定方法，專屬性強(qiáng)，進(jìn)一步確保了產(chǎn)品質(zhì)量安全、均一、有效、質(zhì)量可控。

本發(fā)明提供一種降糖、或、降脂的黃連解毒湯組合物，黃連、黃芩、黃柏、梔子的質(zhì)量比是：(1-20)、(1-10)、(1-10)、(20-50)。

本發(fā)明提供一種降糖、或、降脂的黃連解毒湯組合物，黃連、黃芩、黃柏、梔子、大黃的質(zhì)量比是：(1-20)、(1-10)、(1-10)、(20-50)、(1-10)。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明做進(jìn)一步詳細(xì)、完整的說明。

實(shí)施例1

將黃連、黃芩、黃柏、梔子以質(zhì)量比1g∶1g∶1g∶1g混合，粉碎，過100目篩，用200g水煎煮1次，每次3小時(shí)，合并提取液，適量濃縮后，浸膏真空干燥。

實(shí)施例2

將黃連、黃芩、黃柏、梔子以質(zhì)量比1g∶1g∶1g∶5g混合，粉碎，過100目篩，用200g水煎煮1次，每次3小時(shí)，合并提取液，適量濃縮后，浸膏真空干燥。

實(shí)施例3

將黃連、黃芩、黃柏、梔子以質(zhì)量比1g∶1g∶1g∶10g混合，粉碎，過100目篩，用200g水煎煮1次，每次3小時(shí)，合并提取液，適量濃縮后，浸膏真空干燥。

實(shí)施例4

將黃連、黃芩、黃柏、梔子以質(zhì)量比10g∶1g∶1g∶1g混合，粉碎，過100目篩，用200g水煎煮1次，每次3小時(shí)，合并提取液，適量濃縮后，浸膏真空干燥。

實(shí)施例5

將黃連、黃芩、黃柏、梔子以質(zhì)量比5g∶1g∶1g∶1g混合，粉碎，過100目篩，用200g水煎煮1次，每次3小時(shí)，合并提取液，適量濃縮后，浸膏真空干燥。

實(shí)施例6

將黃連、黃芩、黃柏、梔子以質(zhì)量比1g∶1g∶1g∶10g混合，粉碎，過100目篩，用200g水煎煮1次，每次3小時(shí)，合并提取液，適量濃縮后，浸膏真空干燥；按照浸膏2g，乳糖40g，微粉硅膠2g，羧甲基淀粉鈉2g，可溶性淀粉10g，硬脂酸鎂0.2g，混合均勻，制成片劑。

實(shí)施例7

選用(200±20)g健康雄性wistar大鼠，隨機(jī)分為正常組和高脂組(88％普通飼料+10％豬油+2％膽固醇)，飼喂4周后，高脂組腹腔注射鏈脲佐菌素35mg/kg，五天后剪尾測隨機(jī)血糖，篩選血糖值超過16.7mmol/L的大鼠進(jìn)入實(shí)驗(yàn)，并分為模型組、單用黃連組(生藥用5倍量水煎煮30分鐘，過濾，既得)、單用黃柏組(生藥用5倍量水煎煮30分鐘，過濾，既得)、單用黃芩組(生藥用5倍量水煎煮30分鐘，過濾，既得)、單用梔子組(生藥用5倍量水煎煮30分鐘，過濾，既得)，給藥組1-5。連續(xù)給藥2周，

正常組：生理鹽水；

模型組：生理鹽水；

單用黃連組：每天口服灌胃8g生藥/kg，1次，

單用黃柏組：每天口服灌胃8g生藥/kg，1次，

單用黃芩組：每天口服灌胃8g生藥/kg，1次，

單用梔子組：每天口服灌胃8g生藥/kg，1次，

給藥組1-5分別給予實(shí)施例1-5的產(chǎn)品，給藥組1-5每天口服灌胃8g生藥/kg，1次，

給藥結(jié)束后，測定各組大鼠血空腹血糖值。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析，結(jié)果以x±s表示。

給藥結(jié)束后測定大鼠空腹血糖、血清甘油三酯和總膽固醇水平。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析，結(jié)果以x±s表示。

注：^#P＜0.05，^###P＜0.001，與正常組相比；^*P＜0.05，^**P＜0.01，^***P＜0.001，與模型組相比。

同時(shí)，與模型組相比，中藥組合物有顯著的降低體重、血壓和血清甘油三酯的作用，同時(shí)對空腹血糖和血清總膽固醇也具有一定的調(diào)節(jié)作用，說明中藥組合物具有良好的治療代謝綜合征的作用。

給藥2周后，取其糞便。比較菌群種屬水平的組成差異。

模型組相對于正常組：

擬桿菌屬、脫硫弧菌屬、異常球菌屬的豐度顯著增長；

吉氏副擬桿菌等的豐度顯著增長；

螺桿菌屬的豐度增加；

Alistipes、Anaerotruncus、顫桿菌屬的豐度明顯降低。

單用黃連組、單用黃柏組、單用黃芩組對于正常組：

擬桿菌屬、脫硫弧菌屬、異常球菌屬、螺桿菌屬，豐度明顯降低；

吉氏副擬桿菌豐度，一定程度的降低；

顫桿菌屬的豐度顯著增加；

Alistipes、Anaerotruncus的豐度顯著增加；

給藥組1-5組：水平恢復(fù)正常組

異常球菌屬豐度降低；

擬桿菌屬、螺桿菌屬、Alistipes、Anaerotruncus、顫桿菌屬、脫硫弧菌屬、吉氏副擬桿菌的豐度水平恢復(fù)正常組。

表明該中藥組合物可在提高安全性的同時(shí)增強(qiáng)藥效，能調(diào)節(jié)腸道菌群，具有很大的藥物開發(fā)潛力和臨床應(yīng)用價(jià)值。

實(shí)施例8

一種黃連解毒湯組合物的檢測方法，包括如下鑒別方法中的一種或幾種：

A.黃連鑒別

取實(shí)施例1的黃連解毒湯組合物細(xì)粉2g，加入乙酸乙酯10ml，PH調(diào)到7.3，超聲提取0.5小時(shí)，濾過，作為供試品溶液；

取黃連藥材適量，加乙酸乙酯，PH調(diào)到7.3，制成每1ml含1mg藥材的溶液，超聲提取0.5小時(shí)，濾過，作為對照品溶液；

分別吸取上述溶液各1μl，點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積份數(shù)比為3∶0.5異丙醇-冰醋酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以重量體積比2％三氯化鐵乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同或類似顏色的斑點(diǎn)。