本發(fā)明屬于動物保健技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種中藥益生菌制劑及其制備方法，具體涉及一種清開靈方劑與益生菌制劑復(fù)配而成的新型制劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
益生菌是指能夠改善宿主腸道菌群生態(tài)平衡，提高宿主健康水平和健康狀態(tài)的活菌制劑及其代謝產(chǎn)物。益生菌能夠在數(shù)量和種類上補充腸道內(nèi)減少或缺乏的正常微生物，調(diào)整或維持腸道內(nèi)微生物平衡，增強機體免疫功能，促進營養(yǎng)物質(zhì)的消耗和吸收，從而達(dá)到防病治病的目地。
清開靈制劑對發(fā)熱、咳嗽、咽痛、鼻塞流涕等癥狀的改善均有明顯的效果，還具有較強的抗炎作用，對化學(xué)性和內(nèi)毒素引起的發(fā)熱具有明顯解熱作用。
發(fā)明人首次利用清開靈方劑治療或預(yù)防動物流感時發(fā)現(xiàn)，清開靈方劑在與益生菌制劑混合使用時，二者具有協(xié)同作用，提高了預(yù)防及治療效果。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
鑒于清開靈方劑與益生菌制劑混合使用時具有協(xié)同作用，本發(fā)明提供了一種中藥益生菌制劑及其制備方法，將清開靈方劑與益生菌制劑進行復(fù)配，用于預(yù)防和治療動物流感，以提高動物流感的治療效果。
本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的：
一種中藥益生菌制劑，由清開靈方劑與益生菌制劑按照0.5～1:8～10的質(zhì)量比復(fù)配而成，其中：所述清開靈方劑由1.2～1.6g膽酸、1.4～1.8g豬去氧膽酸、18～25g珍珠母粉、8～12g水牛角粉、32～38g金銀花、8～12g梔子、75～85g板藍(lán)根、1.8～2.5g黃芩苷組成；益生菌制劑由乳酸菌、酵母菌、芽孢桿菌組成。
一種上述中藥益生菌制劑的制備方法，包括如下步驟：
一、清開靈方劑的制備：
1、將梔子和板藍(lán)根加入到400～2000ml水中煎煮1～2小時，過濾，再將濾渣加入到400～2000ml水中煎煮0.5～1.5小時，過濾，合并兩次過濾的濾液，然后將濾液濃縮至相對密度為1.05～1.20的清膏，再加入乙醇至乙醇的體積濃度為50～70％，靜置12～24小時，過濾，減壓回收濾液中乙醇，然后將濾液濃縮至相對密度為1.05～1.40的梔子和板藍(lán)根清膏；
2、將金銀花加入到150～1000ml、40～60℃的水中浸泡0.5～1小時，然后煎煮1～2小時，過濾，再將濾渣加入到150～1000ml水中煎煮1～2小時，過濾，合并兩次過濾的濾液，將濾液濃縮至相對密度為1.05～1.40的清膏，再加入乙醇至乙醇的體積濃度為50～70％，靜置12～24小時，過濾，減壓回收濾液中乙醇，然后將濾液濃縮至相對密度為1.05～1.40的金銀花清膏；
3、將水牛角粉加入到30～150ml濃度為2～6mol/l氫氧化鋇溶液中煎煮6～8小時，在80～100℃的條件下過濾，得到水牛角濾液，冷卻至室溫；將珍珠母粉加入到60～300ml濃度為2～6mol/l硫酸水溶液中煎煮6～8小時，在80～100℃的條件下過濾，得到珍珠母濾液，冷卻至室溫；將珍珠母濾液加入到水牛角濾液中，攪拌均勻后過濾，將濾液濃縮至10～100ml，冷卻至室溫，加入乙醇至乙醇的體積濃度為50～70％，靜置12～24小時，過濾，減壓回收濾液中乙醇，然后用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)濾液的ph值為5～7，在0～10℃的條件下冷藏12～48h，過濾，將濾液濃縮至相對密度為1.05～1.40的清膏，向清膏中加入1～10倍清膏質(zhì)量的β-環(huán)糊精，再加入1～2倍β-環(huán)糊精質(zhì)量的水，攪拌均勻，用膠體磨研磨10～30分鐘進行包合，然后在60～120℃噴霧干燥，得水牛角和珍珠母包合粉，或者在60～100℃的條件下減壓干燥12～36小時、再粉碎，得水牛角和珍珠母包合粉；
4、將膽酸和豬去氧膽酸加入到3～50ml乙醇中超聲溶解，過濾，將1～10倍膽酸和豬去氧膽酸總質(zhì)量的β-環(huán)糊精加入濾液中，再加入1～2倍β-環(huán)糊精質(zhì)量的水，攪拌均勻，然后用膠體磨研磨10～30分鐘進行包合，然后在60～120℃噴霧干燥，得膽酸和豬去氧膽酸包合粉，或者在60～100℃的條件下減壓干燥12～36小時、再粉碎，得膽酸和豬去氧膽酸包合粉；
5、將黃芩苷加入到10～50ml水中，在攪拌的條件下用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)ph值為7，得到黃芩苷溶液；
二、益生菌制劑的制備：
培養(yǎng)基：碳源0.5～10％、有機氮源0.2～3％、磷酸氫二鉀或磷酸二氫鉀0.01～1％、硫酸鎂0.01～0.5％、碳酸鈣0.03～1％，將培養(yǎng)基滅菌降溫后接入芽孢桿菌種子液、乳酸菌種子液和酵母菌種子液，在溫度為30～37℃的條件下培養(yǎng)24～48小時，終止發(fā)酵；
三、清開靈與益生菌劑復(fù)配：
將梔子和板藍(lán)根清膏、金銀花清膏、水牛角和珍珠母包合粉、膽酸和豬去氧膽酸包合粉、黃芩苷溶液溶于水中潤濕溶解，然后加入到益生菌制劑內(nèi)，攪勻，灌裝，即得中藥益生菌制劑。
本發(fā)明將中藥清開靈與益生菌進行復(fù)配制備成動物用中藥益生菌制劑，充分發(fā)揮二者的協(xié)同作用優(yōu)勢，取得了對消化系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)疾病進行同時預(yù)防和治療的效果，同時也避免了中藥單方需要添加防腐劑等添加劑的問題，可作為動物保健品應(yīng)用于養(yǎng)殖業(yè)。
具體實施方式
下面結(jié)合實施例對本發(fā)明的技術(shù)方案作進一步的說明，但并不局限于此，凡是對本發(fā)明技術(shù)方案進行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的精神和范圍，均應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護范圍中。
實施例1：
本實施例中，中藥益生菌制劑由清開靈方劑與益生菌制劑按照0.5～1:8～10的質(zhì)量比復(fù)配而成，其中：所述清開靈方劑由1.2～1.6g膽酸、1.4～1.8g豬去氧膽酸、18～25g珍珠母粉、8～12g水牛角粉、32～38g金銀花、8～12g梔子、75～85g板藍(lán)根、1.8～2.5g黃芩苷組成；益生菌制劑由乳酸菌、酵母菌、芽孢桿菌組成，乳酸菌、酵母菌和芽孢桿菌的質(zhì)量比為任意比，優(yōu)選為3～4∶1～2∶5～6。
一種上述中藥益生菌制劑的制備方法，包括如下步驟：
一、清開靈方劑的制備：
1、將梔子和板藍(lán)根加入到400～2000ml水中煎煮1～2小時，過濾，再將濾渣加入到400～2000ml水中煎煮0.5～1.5小時，過濾，合并兩次過濾的濾液，然后將濾液濃縮至相對密度為1.05～1.20的清膏，再加入乙醇至乙醇的體積濃度為50～70％，靜置12～24小時，過濾，減壓回收濾液中乙醇，然后將濾液濃縮至相對密度為1.05～1.40的梔子和板藍(lán)根清膏；
2、將金銀花加入到150～1000ml、40～60℃的水中浸泡0.5～1小時，然后煎煮1～2小時，過濾，再將濾渣加入到150～1000ml水中煎煮1～2小時，過濾，合并兩次過濾的濾液，將濾液濃縮至相對密度為1.05～1.40的清膏，再加入乙醇至乙醇的體積濃度為50～70％，靜置12～24小時，過濾，減壓回收濾液中乙醇，然后將濾液濃縮至相對密度為1.05～1.40的金銀花清膏；
3、將水牛角粉加入到30～150ml濃度為2～6mol/l氫氧化鋇溶液中煎煮6～8小時，在80～100℃的條件下過濾，得到水牛角濾液，冷卻至室溫；將珍珠母粉加入到60～300ml濃度為2～6mol/l硫酸水溶液中煎煮6～8小時，在80～100℃的條件下過濾，得到珍珠母濾液，冷卻至室溫；將珍珠母濾液加入到水牛角濾液中，攪拌均勻后過濾，將濾液濃縮至10～100ml，冷卻至室溫，加入乙醇至乙醇的體積濃度為50～70％，靜置12～24小時，過濾，減壓回收濾液中乙醇，然后用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)濾液的ph值為5～7，在0～10℃的條件下冷藏12～48h，過濾，將濾液濃縮至相對密度為1.05～1.40的清膏，向清膏中加入1～10倍清膏質(zhì)量的β-環(huán)糊精，再加入1～2倍β-環(huán)糊精質(zhì)量的水，攪拌均勻，用膠體磨研磨10～30分鐘進行包合，然后在60～120℃噴霧干燥，得水牛角和珍珠母包合粉，或者在60～100℃的條件下減壓干燥12～36小時、再粉碎，得水牛角和珍珠母包合粉；
4、將膽酸和豬去氧膽酸加入到3～50ml乙醇中超聲溶解，過濾，將1～10倍膽酸和豬去氧膽酸總質(zhì)量的β-環(huán)糊精加入濾液中，再加入1～2倍β-環(huán)糊精質(zhì)量的水，攪拌均勻，然后用膠體磨研磨10～30分鐘進行包合，然后在60～120℃噴霧干燥，得膽酸和豬去氧膽酸包合粉，或者在60～100℃的條件下減壓干燥12～36小時、再粉碎，得膽酸和豬去氧膽酸包合粉；
5、將黃芩苷加入到10～50ml水中，在攪拌的條件下用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)ph值為7，得到黃芩苷溶液；
二、益生菌制劑的制備：
1、菌種制備：
芽孢桿菌種子液的制備：將營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基滅菌降溫后，接入活化的芽孢桿菌(接種量2～10％)，培養(yǎng)條件：溫度為30～37℃，通氣量為1：0.5～1：1vvm，攪拌轉(zhuǎn)速為100～200rpm，培養(yǎng)時間為18～24小時；
乳酸菌種子液的制備：培養(yǎng)基：碳源0.5～10％、有機氮源0.2～3％、磷酸氫二鉀或磷酸二氫鉀0.01～1％、硫酸鎂0.01～0.5％、碳酸鈣0.03～1％，將培養(yǎng)基滅菌降溫后接入按常規(guī)活化的乳酸菌(接種量2～10％)，培養(yǎng)條件：溫度為30～37℃，培養(yǎng)時間為24～48小時；
酵母菌種子液的制備：培養(yǎng)基：碳源0.5～10％、有機氮源0.2～3％、磷酸氫二鉀或磷酸二氫鉀0.01～1％、硫酸鎂0.01～0.5％，將培養(yǎng)基滅菌降溫后接入按常規(guī)活化的酵母菌(接種量1～5％)，培養(yǎng)條件：溫度為26～32℃，培養(yǎng)時間為16～48小時；
2、益生菌制劑的復(fù)合培養(yǎng)：
培養(yǎng)基：碳源0.5～10％、有機氮源0.2～3％、磷酸氫二鉀或磷酸二氫鉀0.01～1％、硫酸鎂0.01～0.5％、碳酸鈣0.03～1％，將培養(yǎng)基滅菌降溫后接入芽孢桿菌種子液、乳酸菌種子液和酵母菌種子液，在溫度為30～37℃的條件下培養(yǎng)24～48小時，終止發(fā)酵；
所述碳源選自單糖、雙糖、多糖的糖化液中的一種或幾種；有機氮源選自蛋白胨、牛肉膏、玉米漿、魚粉、酵母粉、酵母膏、酵母膏代用品(cn1164763c)、菌體抽提物(cn100410385c)的一種或幾種；
三、清開靈與益生菌劑復(fù)配：
將梔子和板藍(lán)根清膏、金銀花清膏、水牛角和珍珠母包合粉、膽酸和豬去氧膽酸包合粉、黃芩苷溶液溶于水中潤濕溶解，然后加入到益生菌制劑內(nèi)，攪勻，灌裝，即得中藥益生菌制劑。
實施例2：
本實施例提供了一種中藥益生菌制劑及其制備方法，所述中藥益生菌制劑由清開靈方劑與益生菌制劑按照0.8:9的質(zhì)量比復(fù)配而成，其中：所述清開靈方劑由1.3g膽酸、1.5g豬去氧膽酸、20g珍珠母粉、10g水牛角粉、35g金銀花、10g梔子、80g板藍(lán)根、2.0g黃芩苷、組成；益生菌制劑由乳酸菌、酵母菌、芽孢桿菌按照3：1∶5的質(zhì)量比組成。
上述中藥益生菌制劑的制備步驟如下：
一、清開靈方劑的制備：
1、將梔子和板藍(lán)根加入到1000ml水中煎煮1.5小時，過濾，再將濾渣加入到1000ml水中煎煮1小時，過濾，合并兩次過濾的濾液，然后將濾液濃縮至相對密度為1.10的清膏，再加入乙醇至乙醇的體積濃度為60％，靜置20小時，過濾，減壓回收濾液中乙醇，然后將濾液濃縮至相對密度為1.20的梔子和板藍(lán)根清膏；
2、將金銀花加入到500ml、50℃的水中浸泡0.5小時，然后煎煮1.5小時，過濾，再將濾渣加入到500ml水中煎煮1.5小時，過濾，合并兩次過濾的濾液，將濾液濃縮至相對密度為1.20的清膏，再加入乙醇至乙醇的體積濃度為60％，靜置20小時，過濾，減壓回收濾液中乙醇，然后將濾液濃縮至相對密度為1.20的金銀花清膏；
3、將水牛角粉加入到100ml濃度為4mol/l氫氧化鋇溶液中煎煮7小時，在100℃的條件下過濾，得到水牛角濾液，冷卻至室溫；將珍珠母粉加入到200ml濃度為4mol/l硫酸水溶液中煎煮7小時，在100℃的條件下過濾，得到珍珠母濾液，冷卻至室溫；將珍珠母濾液加入到水牛角濾液中，攪拌均勻后過濾，將濾液濃縮至50ml，冷卻至室溫，加入乙醇至乙醇的體積濃度為60％，靜置20小時，過濾，減壓回收濾液中乙醇，然后用質(zhì)量濃度為20％的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)濾液的ph值為6，在10℃的條件下冷藏24h，過濾，將濾液濃縮至相對密度為1.20的清膏，向清膏中加入5倍清膏質(zhì)量的β-環(huán)糊精，再加入1.5倍β-環(huán)糊精質(zhì)量的水，攪拌均勻，用膠體磨研磨20分鐘進行包合，然后在100℃噴霧干燥，得水牛角和珍珠母包合粉；
4、將膽酸和豬去氧膽酸加入到30ml乙醇中超聲溶解，過濾，將5倍膽酸和豬去氧膽酸總質(zhì)量的β-環(huán)糊精加入濾液中，再加入1.5倍β-環(huán)糊精質(zhì)量的水，攪拌均勻，然后用膠體磨研磨20分鐘進行包合，然后在100℃噴霧干燥，得膽酸和豬去氧膽酸包合粉；
5、將黃芩苷加入到30ml水中，在攪拌的條件下用質(zhì)量濃度為20％的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)ph值為7，得到黃芩苷溶液。
二、益生菌制劑的制備：
1、菌種制備：
芽孢桿菌種子液的制備：將營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基滅菌降溫后，接入活化的地衣芽孢桿菌(bacilluslicheniformis)cicc20684，培養(yǎng)條件：溫度為35℃，通氣量為1∶0.5vvm，攪拌轉(zhuǎn)速為150rpm，培養(yǎng)時間為20小時；
乳酸菌種子液的制備：培養(yǎng)基：碳源5％、有機氮源2％、磷酸氫二鉀0.5％、硫酸鎂0.1％、碳酸鈣0.05％，將培養(yǎng)基滅菌降溫后接入按常規(guī)活化的嗜酸乳酸菌(lactobacillusacidophilus)，培養(yǎng)條件：溫度為35℃，培養(yǎng)時間為30小時；
酵母菌種子液的制備：培養(yǎng)基：碳源5％、有機氮源2％、磷酸氫二鉀0.5％、硫酸鎂0.1％，將培養(yǎng)基滅菌降溫后接入按常規(guī)活化的酵母菌，培養(yǎng)條件：溫度為30℃，培養(yǎng)時間為24小時；
2、益生菌制劑的復(fù)合培養(yǎng)：
培養(yǎng)基：碳源5％、有機氮源2％、磷酸氫二鉀0.5％、硫酸鎂0.1％、碳酸鈣0.05％，將培養(yǎng)基滅菌降溫后接入地衣芽孢桿菌種子液、嗜酸乳酸菌種子液和酵母菌種子液，在溫度為305℃的條件下培養(yǎng)30小時，終止發(fā)酵；
所述碳源選自單糖，有機氮源選自蛋白胨。
三、清開靈與益生菌劑復(fù)配：
將梔子和板藍(lán)根清膏、金銀花清膏、水牛角和珍珠母包合粉、膽酸和豬去氧膽酸包合粉、黃芩苷溶液溶于水中潤濕溶解，然后加入到益生菌制劑內(nèi)，攪勻，灌裝，即得中藥益生菌制劑。
實施例3：
本實施例提供了一種中藥益生菌制劑及其制備方法，所述中藥益生菌制劑由清開靈方劑與益生菌制劑按照0.8:10的質(zhì)量比復(fù)配而成，其中：所述清開靈方劑由1.3g膽酸、1.5g豬去氧膽酸、20g珍珠母粉、10g水牛角粉、35g金銀花、10g梔子、80g板藍(lán)根、2.0g黃芩苷組成；益生菌制劑由乳酸菌、酵母菌、芽孢桿菌按照4∶2∶6的質(zhì)量比組成。
上述中藥益生菌制劑的制備步驟如下：
一、清開靈方劑的制備：
1、將梔子和板藍(lán)根加入到500ml水中煎煮1.5小時，過濾，再將濾渣加入到500ml水中煎煮1小時，過濾，合并兩次過濾的濾液，然后將濾液濃縮至相對密度為1.10的清膏，再加入乙醇至乙醇的體積濃度為60％，靜置15小時，過濾，減壓回收濾液中乙醇，然后將濾液濃縮至相對密度為1.10的梔子和板藍(lán)根清膏；
2、將金銀花加入到200ml、50℃的水中浸泡1小時，然后煎煮1小時，過濾，再將濾渣加入到200ml水中煎煮1小時，過濾，合并兩次過濾的濾液，將濾液濃縮至相對密度為1.10的清膏，再加入乙醇至乙醇的體積濃度為60％，靜置15小時，過濾，減壓回收濾液中乙醇，然后將濾液濃縮至相對密度為1.10的金銀花清膏；
3、將水牛角粉加入到50ml濃度為2mol/l氫氧化鋇溶液中煎煮6小時，在80℃的條件下過濾，得到水牛角濾液，冷卻至室溫；將珍珠母粉加入到100ml濃度為2mol/l硫酸水溶液中煎煮6小時，在80℃的條件下過濾，得到珍珠母濾液，冷卻至室溫；將珍珠母濾液加入到水牛角濾液中，攪拌均勻后過濾，將濾液濃縮至80ml，冷卻至室溫，加入乙醇至乙醇的體積濃度為60％，靜置15小時，過濾，減壓回收濾液中乙醇，然后用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)濾液的ph值為6，在0℃的條件下冷藏15h，過濾，將濾液濃縮至相對密度為1.10的清膏，向清膏中加入2倍清膏質(zhì)量的β-環(huán)糊精，再加入1倍β-環(huán)糊精質(zhì)量的水，攪拌均勻，用膠體磨研磨15分鐘進行包合，然后在80℃的條件下減壓干燥24小時、再粉碎，得水牛角和珍珠母包合粉；
4、將膽酸和豬去氧膽酸加入到20ml乙醇中超聲溶解，過濾，將2倍膽酸和豬去氧膽酸總質(zhì)量的β-環(huán)糊精加入濾液中，再加入1倍β-環(huán)糊精質(zhì)量的水，攪拌均勻，然后用膠體磨研磨15分鐘進行包合，然后在80℃的條件下減壓干燥24小時、再粉碎，得膽酸和豬去氧膽酸包合粉；
5、將黃芩苷加入到20ml水中，在攪拌的條件下用質(zhì)量濃度為20％的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)ph值為7，得到黃芩苷溶液。
二、益生菌制劑的制備：
1、菌種制備：
芽孢桿菌種子液的制備：將營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基滅菌降溫后，接入活化的地衣芽孢桿菌(bacilluslicheniformis)cicc20684，培養(yǎng)條件：溫度為32℃，通氣量為1：1vvm，攪拌轉(zhuǎn)速為100rpm，培養(yǎng)時間為20小時；
乳酸菌種子液的制備：培養(yǎng)基：碳源8％、有機氮源2％、磷酸二氫鉀0.05％、硫酸鎂0.2％、碳酸鈣0.1％，將培養(yǎng)基滅菌降溫后接入按常規(guī)活化的嗜酸乳酸菌(lactobacillusacidophilus)，培養(yǎng)條件：溫度為32℃，培養(yǎng)時間為24小時；
酵母菌種子液的制備：培養(yǎng)基：碳源8％、有機氮源2％、磷酸二氫鉀0.05％、硫酸鎂0.2％，將培養(yǎng)基滅菌降溫后接入按常規(guī)活化的酵母菌，培養(yǎng)條件：溫度為28℃，培養(yǎng)時間為32小時；
2、益生菌制劑的復(fù)合培養(yǎng)：
培養(yǎng)基：碳源8％、有機氮源2％、磷酸二氫鉀0.05％、硫酸鎂0.2％、碳酸鈣0.1％，將培養(yǎng)基滅菌降溫后接入地衣芽孢桿菌種子液、嗜酸乳酸菌種子液和酵母菌種子液，在溫度為30℃的條件下培養(yǎng)30小時，終止發(fā)酵；所述碳源選自雙糖，有機氮源選自牛肉膏。
三、清開靈與益生菌劑復(fù)配：
將梔子和板藍(lán)根清膏、金銀花清膏、水牛角和珍珠母包合粉、膽酸和豬去氧膽酸包合粉、黃芩苷溶液溶于水中潤濕溶解，然后加入到益生菌制劑內(nèi)，攪勻，灌裝，即得中藥益生菌制劑。
實施例4：
本實施例提供了一種中藥益生菌制劑及其制備方法，所述中藥益生菌制劑由清開靈方劑與益生菌制劑按照0.8:10的質(zhì)量比復(fù)配而成，其中：所述清開靈方劑由1.3g膽酸、1.5g豬去氧膽酸、20g珍珠母粉、10g水牛角粉、35g金銀花、10g梔子、80g板藍(lán)根、2.0g黃芩苷組成；益生菌制劑由乳酸菌、酵母菌、芽孢桿菌按照4：1：5的質(zhì)量比組成。
上述中藥益生菌制劑的制備步驟如下：
一、清開靈方劑的制備：
1、將梔子和板藍(lán)根加入到1500ml水中煎煮2小時，過濾，再將濾渣加入到1500ml水中煎煮1.5小時，過濾，合并兩次過濾的濾液，然后將濾液濃縮至相對密度為1.20的清膏，再加入乙醇至乙醇的體積濃度為60％，靜置24小時，過濾，減壓回收濾液中乙醇，然后將濾液濃縮至相對密度為1.30的梔子和板藍(lán)根清膏；
2、將金銀花加入到800ml、60℃的水中浸泡1小時，然后煎煮2小時，過濾，再將濾渣加入到800ml水中煎煮2小時，過濾，合并兩次過濾的濾液，將濾液濃縮至相對密度為1.30的清膏，再加入乙醇至乙醇的體積濃度為60％，靜置24小時，過濾，減壓回收濾液中乙醇，然后將濾液濃縮至相對密度為1.30的金銀花清膏；
3、將水牛角粉加入到150ml濃度為5mol/l氫氧化鋇溶液中煎煮8小時，在100℃的條件下過濾，得到水牛角濾液，冷卻至室溫；將珍珠母粉加入到300ml濃度為5mol/l硫酸水溶液中煎煮8小時，在100℃的條件下過濾，得到珍珠母濾液，冷卻至室溫；將珍珠母濾液加入到水牛角濾液中，攪拌均勻后過濾，將濾液濃縮至100ml，冷卻至室溫，加入乙醇至乙醇的體積濃度為60％，靜置24小時，過濾，減壓回收濾液中乙醇，然后用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)濾液的ph值為7，在5℃的條件下冷藏48h，過濾，將濾液濃縮至相對密度為1.30的清膏，向清膏中加入10倍清膏質(zhì)量的β-環(huán)糊精，再加入2倍β-環(huán)糊精質(zhì)量的水，攪拌均勻，用膠體磨研磨30分鐘進行包合，然后在120℃噴霧干燥，得水牛角和珍珠母包合粉；
4、將膽酸和豬去氧膽酸加入到40ml乙醇中超聲溶解，過濾，將10倍膽酸和豬去氧膽酸總質(zhì)量的β-環(huán)糊精加入濾液中，再加入2倍β-環(huán)糊精質(zhì)量的水，攪拌均勻，然后用膠體磨研磨30分鐘進行包合，然后在120℃噴霧干燥，得膽酸和豬去氧膽酸包合粉；
5、將黃芩苷加入到40ml水中，在攪拌的條件下用質(zhì)量濃度為20％的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)ph值為7，得到黃芩苷溶液。
二、益生菌制劑的制備：
1、菌種制備：
芽孢桿菌種子液的制備：將營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基滅菌降溫后，接入活化的地衣芽孢桿菌(bacilluslicheniformis)cicc20684，培養(yǎng)條件：溫度為37℃，通氣量為1：1vvm，攪拌轉(zhuǎn)速為200rpm，培養(yǎng)時間為24小時；
乳酸菌種子液的制備：培養(yǎng)基：碳源8％、有機氮源2.5％、磷酸氫二鉀0.8％、硫酸鎂0.4％、碳酸鈣0.8％，將培養(yǎng)基滅菌降溫后接入按常規(guī)活化的嗜酸乳酸菌(lactobacillusacidophilus)cicc6096，培養(yǎng)條件：溫度為37℃，培養(yǎng)時間為48小時；
酵母菌種子液的制備：培養(yǎng)基：碳源8％、有機氮源2.5％、磷酸氫二鉀0.8％、硫酸鎂0.4％，將培養(yǎng)基滅菌降溫后接入按常規(guī)活化的酵母菌，培養(yǎng)條件：溫度為32℃，培養(yǎng)時間為48小時；
2、益生菌制劑的復(fù)合培養(yǎng)：
培養(yǎng)基：碳源8％、有機氮源2.5％、磷酸氫二鉀0.8％、硫酸鎂0.4％、碳酸鈣0.8％，將培養(yǎng)基滅菌降溫后接入地衣芽孢桿菌種子液、嗜酸乳酸菌種子液和酵母菌種子液，在溫度為37℃的條件下培養(yǎng)48小時，終止發(fā)酵；所述碳源選自單糖和雙糖；有機氮源選自酵母粉；
三、清開靈與益生菌劑復(fù)配：
將梔子和板藍(lán)根清膏、金銀花清膏、水牛角和珍珠母包合粉、膽酸和豬去氧膽酸包合粉、黃芩苷溶液溶于水中潤濕溶解，然后加入到益生菌制劑內(nèi)，攪勻，灌裝，即得中藥益生菌制劑。