本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術領域，具體涉及一種預防皮瓣缺血再灌注損傷的藥物。

背景技術：

皮瓣移植是臨床上進行軟組織修復的重要技術，主要用于體表組織缺損修復和器官的再造。皮瓣移植過程中皮瓣組織常常存在不同程度的缺血再灌注損傷，嚴重的缺血再灌注損傷可導致皮瓣壞死，不僅影響臨床治療效果，同時也給患者帶來巨大的心理及經濟負擔。目前，臨床上預防皮瓣壞死多采取擴充血容量、靜脈給予活血藥物等方法，但這些常規(guī)方法的療效并不確定。

硝酸鹽是自然界廣泛存在的一種無機物，植物能夠吸收和利用土壤中的硝酸鹽以供應體內所需的氮元素。食物中的硝酸鹽大部分來源于綠色蔬菜中。進食富含硝酸鹽食物可使血漿，唾液硝酸鹽濃度在短時間內大大升高，高于內源性合成硝酸鹽的總量。因此，飲食對唾液及循環(huán)硝酸鹽濃度及代謝具有十分重要的影響。從食物中攝取的硝酸鹽，由十二指腸吸收進入血液循環(huán)，進食60分鐘后，血液硝酸鹽濃度達到峰值，硝酸鹽在血液中的半衰期為5-6小時。目前，硝酸鹽及其下游通路產生的一氧化氮(nitricoxide，no)在降低血壓，調節(jié)血管張力，承擔神經信號傳遞信號分子和免疫調節(jié)等方面的確切作用已經達到共識，這種通過外源性硝酸鹽的加載，增加體內硝酸鹽及其下游通路no等的表達水平，為某些疾病的防治開辟了一條新的途徑。

目前，尚未有研究或專利報道硝酸鹽在預防皮瓣缺血再灌注損傷方面的應用。

技術實現(xiàn)要素：

為了解決現(xiàn)有技術中存在的問題，本發(fā)明的技術方案如下：

一種預防皮瓣缺血再灌注損傷的藥物，包含硝酸鹽。

在上述方案的基礎上，所述的硝酸鹽為硝酸鈉。

本發(fā)明的有益效果

本發(fā)明預防皮瓣缺血再灌注損傷的藥物可以降低皮瓣中性粒細胞浸潤數(shù)，改善皮瓣炎癥狀態(tài)；可以有效提高機體硝酸鹽水平，有助于預防游離皮瓣因缺血再灌注損傷而發(fā)生壞死；此外，本發(fā)明的藥物可應用于皮瓣危象的預防。

本發(fā)明藥物可有效降低因皮瓣缺血再灌注損傷而發(fā)生壞死的幾率，為臨床上預防皮瓣壞死提供有效的方法。

附圖說明

圖1為硝酸鹽處理組的處理方式；

圖2為皮瓣中性粒細胞浸潤數(shù)，“*”表示硝酸鹽組與模型組相比p<0.05，差異顯著；

圖3為大鼠皮瓣壞死率，“*”表示硝酸鹽組與模型組相比p<0.05，差異顯著；

圖4為大鼠血清中的硝酸鹽含量，“*”表示硝酸鹽組與模型組相比p<0.05，差異顯著。

具體實施方式

在本發(fā)明中所使用的術語，除非有另外說明，一般具有本領域普通技術人員通常理解的含義。

下面結合具體實施例，并參照數(shù)據(jù)進一步詳細的描述本發(fā)明。以下實施例只是為了舉例說明本發(fā)明，而非以任何方式限制本發(fā)明的范圍。

實施例

1、動物模型的建立

皮瓣模型選擇選擇12周齡雌性sd大鼠，采用大鼠腹部軸型皮瓣模型。常規(guī)麻醉、消毒后掀起以腹壁淺動脈為蒂的3cm×6cm腹部皮瓣。離斷腹壁淺動脈伴行神經，充分游離腹壁淺動脈發(fā)出點周圍的股動脈，結扎發(fā)出點遠端之股動脈，于發(fā)出點近端股動脈放置無創(chuàng)傷動脈夾。10小時后去除動脈夾，恢復皮瓣血供并加以確認。所有大鼠單籠飼養(yǎng)，自由進食。

2、硝酸鹽給藥方式

實驗分為3組：假手術組、模型組及硝酸鹽組，每組10只。

假手術組皮瓣造模后，不阻斷血管蒂，皮瓣無缺血再灌注損傷；正常飲水(不含硝酸鈉)。

模型組在皮瓣造模后，阻斷皮瓣血供，正常飲水(不含硝酸鈉)。

硝酸鹽組在阻斷皮瓣血供的前3天給予硝酸鈉飲水，濃度為2.5mmol/l，每只大鼠每日攝取的硝酸鹽含量約為0.5mmol/kgb.w.，具體處理方式如圖1所示。

3、組織學檢查

術后1d，于各組皮瓣中心處取一全層組織塊，多聚甲醛固定，石蠟包埋切片，常規(guī)he染色。400倍顯微鏡下進行中性粒細胞計數(shù)，選取10個不同視野進行計數(shù)。

4、皮瓣壞死比率測定

術后7d，采用數(shù)碼相機進行皮瓣攝像，通過image-proplus.v6.0進行圖像分析，計算皮瓣壞死率，計算公式為：

皮瓣壞死率(％)＝皮瓣壞死面積/皮瓣總面積×100％

5、血清中硝酸鹽的測量：

使用r&d公司(貨號kge001)硝酸鹽檢測試劑盒，并根據(jù)說明書檢測血清中硝酸鹽的含量。步驟如下：

(1)配制標準品：倍比稀釋原標準品為200-3.125μm

(2)硝酸鹽濃度測定：

1)加50μl反應緩沖液于空白孔中；

2)向反應緩沖液中加入50μl樣品或標準品；

3)各孔中依次加入25μlnadh；

4)各孔中依次加入25μl硝酸鹽還原酶；

5)依次加入50μlgriessreagenti于各孔中；

6)依次加入50μlgriessreagentii于各孔中，室溫孵育10分鐘；

7)酶標儀540nm讀取od值，690nm作為校正。

6、統(tǒng)計學方法

采用spss17.0統(tǒng)計學軟件進行統(tǒng)計學分析，多組計量資料比較采用anova分析，p<0.05有統(tǒng)計學意義。

7、試驗結果及分析

7.1皮瓣中中性粒細胞的浸潤數(shù)如圖2所示：

模型組皮瓣中性粒細胞浸潤明顯，而硝酸鹽組皮瓣中性粒細胞的浸潤數(shù)顯著降低，說明口服硝酸鈉可以有效降低皮瓣因缺血再灌注損傷導致的炎癥狀態(tài)。

7.2皮瓣的壞死率，如圖3所示：

模型組皮瓣壞死率較高，而硝酸鹽組皮瓣壞死率顯著降低，說明口服硝酸鈉可以有效降低皮瓣因缺血再灌注損傷導致的皮瓣壞死。

7.3血清中硝酸鹽的含量，如圖4所示：

模型組未應用硝酸鹽，其血清中的硝酸鹽濃度較低，而硝酸鹽組血清中的硝酸鹽濃度顯著升高，說明口服硝酸鈉可以有效提高機體的硝酸鹽濃度，有利于皮瓣缺血再灌注損傷的預防。

技術特征：

技術總結
本發(fā)明公開了一種預防皮瓣缺血再灌注損傷的藥物，屬于醫(yī)藥技術領域。所述預防皮瓣缺血再灌注損傷的藥物，包含硝酸鹽；所述硝酸鹽為硝酸鈉。本發(fā)明預防皮瓣缺血再灌注損傷的藥物可以降低皮瓣中性粒細胞浸潤數(shù)，改善皮瓣炎癥狀態(tài)；可以有效提高機體硝酸鹽水平；有效降低因皮瓣缺血再灌注損傷而發(fā)生壞死的幾率；可應用于皮瓣危象的預防。

技術研發(fā)人員：龐寶興;袁榮濤;尚偉;鄧婧;馮元勇;劉延山;盧曉虹;姜松磊
受保護的技術使用者：青島大學附屬醫(yī)院
技術研發(fā)日：2017.04.05
技術公布日：2017.07.04