本發(fā)明涉及補(bǔ)骨脂酚在治療及預(yù)防心臟疾病中的應(yīng)用，特別是涉及補(bǔ)骨脂酚在治療或者預(yù)防細(xì)菌性?xún)?nèi)膜炎，系統(tǒng)性或者其他臟器感染所致菌血癥或膿毒血癥等導(dǎo)致的心肌炎性病變心肌損傷中的一種或者多種應(yīng)用。

背景技術(shù)：

補(bǔ)骨脂酚是從豆科植物補(bǔ)骨脂果實(shí)中提取的單萜烯類(lèi)化合物，具有廣泛的藥理活性。研究表明，補(bǔ)骨脂酚具有抗菌活性、抗腫瘤活性、消炎作用、降糖降血脂作用、抗氧化活性、抗抑郁、植物雌激素樣作用等。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

發(fā)明人通過(guò)敗血癥細(xì)胞模型并觀(guān)察炎癥及心肌損傷各項(xiàng)指標(biāo)發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)骨脂酚可濃度依賴(lài)性的降低白介素-1(il-1)及腫瘤壞死因子-α(tnf-α)水平，恢復(fù)心肌細(xì)胞活力，減少心肌凋亡率，發(fā)揮顯著地抗炎和抗心肌凋亡作用；通過(guò)敗血癥動(dòng)物模型，證實(shí)補(bǔ)骨脂酚可濃度依賴(lài)性地降低小鼠血清中il-1、tnf-α、乳酸脫氫酶1(ldh1)和肌酸激酶同工酶(ck-mb)水平，提高左室射血分?jǐn)?shù)(lvef％)和左室短軸縮短率(lvfs％)值，減少心肌組織破壞與炎細(xì)胞浸潤(rùn)，減少心肌凋亡率，發(fā)揮較強(qiáng)的抗炎，抗心肌壞死及凋亡，改善心臟收縮功能的作用。研究表明，補(bǔ)骨脂酚較強(qiáng)的抗炎，抗心肌壞死及凋亡，改善心臟收縮功能的作用，有著很好的臨床應(yīng)用前景。

本發(fā)明提供了補(bǔ)骨脂酚用于制備感染性心肌損傷藥物或保護(hù)劑的應(yīng)用。

本發(fā)明的藥物或保護(hù)劑為靜脈注射給藥制劑。

本發(fā)明的藥物或保護(hù)劑給藥劑量為每千克體重25mg-100mg。

本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)：

1、補(bǔ)骨脂酚可以抑制炎癥引起的心肌細(xì)胞凋亡，具有抗炎抗凋亡作用。

2、補(bǔ)骨脂酚可以抑制炎癥引起的心肌損傷，提高心功能，改善心臟收縮功能。

3、補(bǔ)骨脂酚能夠激活sirt1信號(hào)通路，降低內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)，較少心肌細(xì)胞凋亡，保護(hù)心肌細(xì)胞。

附圖說(shuō)明

圖1為不同濃度bak對(duì)lps心肌細(xì)胞損傷模型炎癥因子及細(xì)胞活力的影響。(a)不同濃度的bak處理膿毒血癥細(xì)胞模型后培養(yǎng)基中的il-1和tnf-α濃度；(b)不同濃度的bak處理膿毒血癥細(xì)胞模型后的細(xì)胞活性，od值即吸光度值。結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，n＝6。與control組比較ap<0.05，aap<0.01，aaap<0.001；與lps組比較bp<0.05，bbp<0.01，bbbp<0.001；與bak1μm+lps組比較cp<0.05，ccp<0.01，cccp<0.001；與bak5μm+lps組比較dp<0.05，ddp<0.01。

圖2為不同濃度bak對(duì)lps心肌細(xì)胞損傷模型細(xì)胞凋亡的影響。結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，n＝6。與control組比較ap<0.05，aap<0.01，aaap<0.001；與lps組比較bp<0.05，bbp<0.01，bbbp<0.001；與bak1μm+lps組比較cp<0.05，ccp<0.01，cccp<0.001；與bak5μm+lps組比較dp<0.05，ddp<0.01。

圖3為不同濃度bak處理后小鼠心功能。(a)不同濃度bak處理后小鼠超聲心動(dòng)圖。(b)不同濃度bak處理后小鼠左心室lvef％和lvfs％。結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，n＝20。與control組比較ap<0.05，aap<0.01，aaap<0.001；與lps組比較bp<0.05，bbp<0.01，bbbp<0.001；與bak25mg/kg+lps組比較cp<0.05，ccp<0.01；與bak50mg/kg+lps組比較dp<0.05。

圖4為不同濃度bak處理后小鼠血清炎癥因子水平及l(fā)dh-1、ck-mb水平。(a)小鼠血清tnf-α水平(b)小鼠血清il-1水平(c)小鼠血清ldh-1水平(d)小鼠血清ck-mb。結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，n＝20。與control組比較ap<0.05，aap<0.01，aaap<0.001；與lps組比較bp<0.05，bbp<0.01，bbbp<0.001；與bak25mg/kg+lps組比較cp<0.05，ccp<0.01；與bak50mg/kg+lps組比較dp<0.05,ddp<0.05。

圖5為不同濃度bak處理后小鼠心肌he染色及視野內(nèi)細(xì)胞核數(shù)，放大倍數(shù)200×。結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，n＝5。與control組比較ap<0.05，aap<0.01，aaap<0.001；與lps組比較bp<0.05，bbp<0.01；與bak25mg/kg+lps組比較cp<0.05，ccp<0.01；與bak50mg/kg+lps組比較dp<0.05,ddp<0.05。

圖6為不同濃度bak處理后小鼠心肌凋亡水平檢測(cè)，放大倍數(shù)400×。結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，n＝5。與control組比較ap<0.05，aap<0.01，aaap<0.001；與lps組比較bp<0.05，bbp<0.01；與bak25mg/kg+lps組比較cp<0.05，ccp<0.01；與bak50mg/kg+lps組比較dp<0.05,ddp<0.05。

圖7為不同濃度bak處理后小鼠sirt1通路，ers及凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)情況。所有數(shù)據(jù)表示為control組的倍數(shù)變化，結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，n＝6。與control組比較ap<0.05，aap<0.01，aaap<0.001；與lps組比較bp<0.05，bbp<0.01，bbbp<0.001；與bak25mg/kg+lps組比較cp<0.05，ccp<0.01，cccp<0.01；與bak50mg/kg+lps組比較dp<0.05,ddp<0.05。

具體實(shí)施方式

本發(fā)明所述的感染性心肌損傷，特別是①細(xì)菌性心內(nèi)膜炎；②系統(tǒng)性或者其他臟器感染所致菌血癥導(dǎo)致的心肌炎性病變；③系統(tǒng)性或者其他臟器感染所致膿毒血癥導(dǎo)致的心肌炎性病變。

以下通過(guò)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的闡述。實(shí)施例是對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明，但本發(fā)明并不受這些的任何限定。

以下實(shí)驗(yàn)所用的補(bǔ)骨脂酚購(gòu)自大連美侖生物技術(shù)有限公司，純度為hplc≥98％。

實(shí)施例1:發(fā)明人研究發(fā)現(xiàn)補(bǔ)骨脂酚能夠減輕lps誘導(dǎo)的心肌原代細(xì)胞炎癥反應(yīng)，減少細(xì)胞凋亡。

方案：

采用lps處理心肌原代細(xì)胞，在細(xì)胞水平模擬細(xì)菌性心肌炎導(dǎo)致心肌損傷的模型，給予不同濃度補(bǔ)骨脂酚進(jìn)行處理。

步驟：

1)大鼠心肌原代細(xì)胞分離與培養(yǎng)：無(wú)菌條件下取sd大鼠乳鼠心室部分，pbs漂洗后剪成0.5mm²的小塊，加入ii型膠原酶消化，收集細(xì)胞，離心。將所得細(xì)胞置于含10％胎牛血清的dmem培養(yǎng)基中，于37℃、5％co2培養(yǎng)箱中貼壁60-90min，差速貼壁去除貼壁的心肌成纖維細(xì)胞，將培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移至明膠處理過(guò)的培養(yǎng)板培養(yǎng)，前3天加入brdu抑制成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)，獲得心肌細(xì)胞。倒置顯微鏡下觀(guān)察，可見(jiàn)到視野中細(xì)胞產(chǎn)生有節(jié)律自主收縮，隨機(jī)選取5個(gè)視野進(jìn)行計(jì)數(shù)，可自主收縮細(xì)胞占總細(xì)胞數(shù)95％以上即可視為得到較純的原代心肌細(xì)胞。

2)細(xì)胞模型構(gòu)建及給藥：所得心肌原代細(xì)胞提前12h各組使用等體積無(wú)血清dmem/f12培養(yǎng)基換液，無(wú)菌生理鹽水溶解lps制成20ug/ml母液，按照100ng/ml的終濃度進(jìn)行給藥，共處理12h。給予補(bǔ)骨脂酚組，按照1um、5um、10um濃度給予預(yù)處理4h。預(yù)處理完成后，吸棄培養(yǎng)基，加入與lps組等lps濃度等體積培養(yǎng)基。12h后共同進(jìn)行取材及檢測(cè)。

3)cck-8法檢測(cè)細(xì)胞活性：差速貼壁完成的心肌細(xì)胞懸液接種于96孔板，控制每孔細(xì)胞數(shù)為10000-12000個(gè)之間，48h后觀(guān)察并換液；各組處理后，小心吸棄各孔上清液，37℃pbs洗滌2遍；避光條件下，按照10：1比例配置dmem/f12與cck-8試劑混合液，每孔加入110ul混合液；37℃/5％co2細(xì)胞孵箱培養(yǎng)2h后，使用酶標(biāo)儀檢測(cè)各孔在450nm處吸光度；各組od值與細(xì)胞活力呈正比。

4)elisa法檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)基il-1和tnf-α水平：收集各組細(xì)胞培養(yǎng)基，于4℃離心機(jī)中以12000rpm離心15分鐘，以除去細(xì)胞碎片等雜質(zhì)，小心吸取上清；按照elisa試劑盒說(shuō)明書(shū)要求，配置各工作液，分別設(shè)置空白孔、標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照孔及待測(cè)樣品孔，每孔均設(shè)兩個(gè)副孔；按照說(shuō)明依次將100ul不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品及待測(cè)培養(yǎng)基加入孔內(nèi)，空白孔加入等體積標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液；37℃水浴90分鐘；輕輕甩干孔內(nèi)液體，每孔加入100ul生物素化抗體工作液，覆蓋新的酶標(biāo)版膜，37℃孵育60分鐘；甩去孔內(nèi)液體并在吸水紙上用力拍干；拍干后，每孔加入100ul酶結(jié)合工作液，覆蓋酶標(biāo)版膜，37℃孵育30分鐘；吸棄孔內(nèi)液體，甩干后，每孔使用350ul洗滌液洗板6次x2分鐘，甩去孔內(nèi)液體并在吸水紙上用力拍干；每孔加入100ultmb發(fā)光底物工作液加入終止液結(jié)束反應(yīng)；用酶標(biāo)儀檢測(cè)酶標(biāo)版各孔在450nm出的吸光；根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品濃度梯度及各自的吸光度值計(jì)算機(jī)擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，計(jì)算各待測(cè)樣品的相應(yīng)濃度。

5)tunel檢測(cè)細(xì)胞凋亡：差速貼壁心肌細(xì)胞懸液，接種于激光共聚焦顯微鏡專(zhuān)用皿，48h后構(gòu)建細(xì)胞模型，并按照各組方案進(jìn)行給藥處理；處理完成后，棄去培養(yǎng)基，將皿置于水平搖床上，pbs緩沖液洗滌，60rpm，5分鐘；吸棄pbs，使用4％多聚甲醛固定細(xì)胞，30-60分鐘；pbs緩沖液洗滌一次，60rpm，5分鐘；加入0.1％tritonx-100溶液進(jìn)行細(xì)胞打孔，置于冰上5分鐘；按照試劑盒說(shuō)明書(shū)配置tunel反應(yīng)液，1號(hào)液與2號(hào)液配置比例為1:9，每皿加入200ul，37℃避光孵育2小時(shí)。后續(xù)步驟都應(yīng)處于避光條件；染色完畢，使用pbs緩沖液在水平搖床上洗滌三遍，90rpm，5分鐘；吸棄pbs，使用dapi染料染核，每皿加入200ul，室溫孵育15分鐘；染色完畢，使用pbs緩沖液在水平搖床上洗滌三遍，90rpm，5分鐘；立即使用激光共聚焦顯微鏡高倍鏡下觀(guān)察熒光，隨機(jī)選取5個(gè)視野計(jì)數(shù)凋亡細(xì)胞核數(shù)，計(jì)算心肌細(xì)胞凋亡率。

結(jié)果：

各組細(xì)胞培養(yǎng)基中il-1及tnf-α含量如圖1a所示，給予bak預(yù)處理后，可觀(guān)察到培養(yǎng)液中il-1、tnf-α含量降低(與lps組相比，p<0.05)，提示大鼠心室肌原代細(xì)胞炎癥反應(yīng)減輕。同時(shí)可以觀(guān)察到，培養(yǎng)液中il-1、tnf-α含量降低幅度隨著bak給藥濃度升高而增大，提示在10um的給藥劑量?jī)?nèi)，bak抗炎作用與藥物劑量呈正相關(guān)(p<0.05)。

細(xì)胞活力檢測(cè)如圖1b所示給予bak預(yù)處理后，細(xì)胞活力明顯有所恢復(fù)(與lps組相比，p<0.05)，隨著bak給藥劑量增加，呈現(xiàn)出濃度依賴(lài)性的心肌活力恢復(fù)趨勢(shì)(p<0.05)，但仍低于control組(p<0.05)。

細(xì)胞凋亡tunel染色結(jié)果如圖2所示，給予bak預(yù)處理后，細(xì)胞凋亡比例明顯降低(與lps組相比，p<0.05)，各給藥組組凋亡率均低于control組(p<0.05)。凋亡的降低幅度亦與bak給藥劑量正相關(guān)(p<0.05)，提示bak在10um劑量?jī)?nèi)表現(xiàn)出濃度依賴(lài)性的抗心肌凋亡功能。

實(shí)施例2：發(fā)明人研究發(fā)現(xiàn)補(bǔ)骨脂酚可以減輕lps誘導(dǎo)的小鼠心肌炎癥，提高心功能，減少心肌細(xì)胞凋亡。

方案：

采用注射lps建立小鼠心肌損傷模型，在動(dòng)物水平模擬細(xì)菌性心肌炎導(dǎo)致心肌損傷的模型，給予不同濃度補(bǔ)骨脂酚進(jìn)行處理。

步驟：

1)動(dòng)物模型建立：12周健康雄性c57bl/6小鼠，按照10mg/kg體重進(jìn)行腹腔注射lps，6小時(shí)候行超聲檢測(cè)。對(duì)于需要給予補(bǔ)骨脂酚組，于lps給藥前5天按照25mg/kg、50mg/kg、75mg/kg、100mg/kg劑量每日給予補(bǔ)骨脂酚腹腔注射，最后一次給藥為lps注射前40分鐘。使用vevo高分辨率小動(dòng)物超聲影像系統(tǒng)檢測(cè)小鼠心功能，使用系統(tǒng)自帶分析軟件計(jì)算小鼠lvef％值和lvfs％值。

2)組織蛋白提?。喝∽笮氖医M織，加入0.5ml預(yù)冷的pbs緩沖液；剪碎組織塊至1mm³大小，吸棄大部分上清，再加入1mlpbs緩沖液洗滌一遍，4℃，3000rpm離心3min；吸棄上清，加入2400ul強(qiáng)效裂解液、300ul磷酸酶抑制劑和300ul蛋白酶抑制劑，使用組織研磨器插入各ep管研磨組織，后于冰上靜置裂解20分鐘；4℃，12000rpm離心20分鐘蛋白定量。

3)心肌組織he染色：心尖部緩慢注入含肝素生理鹽水，右心耳流出的液體變?yōu)橥该鲿r(shí)，將灌注液體替換為4％多聚甲醛固定液；多聚甲醛組織固定成功后，沿心臟根部剪斷各血管，完整取下心臟。將心臟放入4％多聚甲醛中，進(jìn)行后固定至少24小時(shí)；石蠟包埋、切片與脫蠟(按照順序依次在30％、50％、70％、80％、95％、95％、100％乙醇中浸泡40分鐘，再按照100％乙醇、100％乙醇/二甲苯1:1混合液、二甲苯濃度梯度浸泡30分鐘進(jìn)行組織脫水透明；按照二甲苯/軟蠟1:130分鐘、軟蠟55分鐘、硬蠟50分鐘順序進(jìn)行組織透蠟包埋；切片，設(shè)置切片厚度為5um，使用撈片法將切片貼于多聚賴(lài)氨酸覆膜載玻片上，70℃烤片1h后，60℃烤片5h；將切片置于二甲苯中浸泡10分鐘，更換二甲苯再次浸泡10分鐘，按照100％、100％、95％、95％、80％、70％、50％、30％乙醇、去離子水的順序依次浸泡2分鐘脫蠟至水，以備染色。)；心肌組織he染色(將切片浸入蘇木素染液染色2分鐘30秒，使用自來(lái)水輕柔沖洗3分鐘；浸入1％鹽酸乙醇30秒，1％氨水10秒脫色，使用自來(lái)水輕柔沖洗6分鐘；浸入伊紅染液染色1分鐘，使用自來(lái)水輕柔沖洗6分鐘；按照70％、80％、95％、95％、95％、100％、100％濃度梯度乙醇、二甲苯、二甲苯分別浸泡2分鐘進(jìn)行脫水透明處理；中性樹(shù)膠封片。)

4)心肌組織tunel染色：將已脫蠟至水切片用pbs緩沖液洗滌3次，60rpm，每次5分鐘；甩去pbs緩沖液，使用0.1％triton-100溶液打孔，時(shí)間10分鐘；使用pbs緩沖液洗滌打孔完畢的組織切片3次，60rpm，每次5分鐘；配置tnuel染液，每片滴加50ul，37℃水浴2h染色；染色完畢，pbs緩沖液洗滌3次，60rpm，每次10分鐘；滴加50uldapi染液復(fù)染細(xì)胞核，37℃水浴10分鐘；染色完畢，pbs緩沖液洗滌3次，60rpm，每次10分鐘；使用50％甘油封片，放置于4℃環(huán)境中過(guò)夜。次日激光共聚焦顯微鏡下觀(guān)察熒光，藍(lán)色為細(xì)胞核，綠色兩點(diǎn)為凋亡細(xì)胞染色，隨機(jī)選取5個(gè)視野計(jì)數(shù)凋亡細(xì)胞核數(shù)，計(jì)算心肌細(xì)胞凋亡率。

5)細(xì)胞因子檢測(cè)：炎癥因子il-1和tnf-α水平采用前述elisa方法檢測(cè)，ldh1及ck-mb水平使用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)。

結(jié)果：

小鼠的左心室收縮功能，如圖3所示。給予腹腔注射bak預(yù)處理后，bak25mg/kg+lps組、bak50mg/kg+lps組、bak75mg/kg+lps組、bak100mg/kg+lps組均表現(xiàn)出心臟收縮功能的好轉(zhuǎn)，左心室lvef％、lvfs％值明顯回升(與lps組相比，p<0.05)，提示bak可以一定程度恢復(fù)左心收縮功能。在bak濃度25mg/kg、50mg/kg、75mg/kg三個(gè)劑量上，lvef％、lvfs％值呈現(xiàn)出梯度升高的趨勢(shì)(p<0.05)，但均低于control組(p<0.05)，在bak濃度75mg/kg及100mg/kg之間并無(wú)顯著性差異(p>0.05)。

小鼠血清炎性因子水平如圖4a&b所示，給予bak干預(yù)組可以觀(guān)察到血清炎癥因子水平明顯降低(p<0.05)。在bak濃度25mg/kg、50mg/kg、75mg/kg三組間呈現(xiàn)劑量正依賴(lài)性降低(p<0.05)但仍高于control組(p<0.05)，同樣的，bak75mg/kg與bak100mg/kg組間血清炎性因子并無(wú)明顯差異。

小鼠血清心肌損傷指標(biāo)ldh1、ck-mb水平4c&d，給予bak干預(yù)組，血清心肌壞死標(biāo)志物ldh1與ck-mb出現(xiàn)明顯下降(與lps組比，p<0.05)，甚至在bak75mg/kg與bak100mg/kg濃度下接近c(diǎn)ontrol組小鼠的生理水平(p<0.05)。且在bak濃度25mg/kg、50mg/kg、75mg/kg三組間呈現(xiàn)劑量正相關(guān)，bak75mg/kg與bak100mg/kg組間各指標(biāo)數(shù)值相近，并無(wú)明顯差異。

小鼠心肌組織he染色結(jié)果顯示(圖5)，給予bak后he染色可見(jiàn)心肌組織結(jié)構(gòu)相對(duì)清晰，視野內(nèi)細(xì)胞核數(shù)量減少(與lps組相比，p<0.05)，肌細(xì)胞間微血管單核細(xì)胞浸潤(rùn)減少。單就視野內(nèi)細(xì)胞核數(shù)量而言，bak25mg/kg與50mg/kg之間、bak75mg/kg與100mg/kg之間并無(wú)明顯差異(p>0.05)。但是bak25mg/kg、50mg/kg兩組視野內(nèi)細(xì)胞核數(shù)量仍顯著高于bak75mg/kg、100mg/kg兩組(p<0.05)。

小鼠心肌凋亡tunel染色(圖6)顯示，在bak預(yù)處理組可觀(guān)察到，在bak75mg/kg濃度以?xún)?nèi)，隨著給藥劑量增加，心肌細(xì)胞凋亡率呈現(xiàn)梯度性的降低(p<0.05)，但仍高于control組(p<0.05)。而在bak100mg/kg濃度時(shí)，心肌凋亡率并未呈現(xiàn)出繼續(xù)下降的趨勢(shì)(與bak75mg/kg+lps組比，p>0.05)。

實(shí)施例3:發(fā)明人研究發(fā)現(xiàn)補(bǔ)骨脂酚能夠激活經(jīng)典心肌保護(hù)通路：sirt1信號(hào)通路，降低內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(ers)，減少心肌細(xì)胞凋亡。

方案：

采用注射lps建立小鼠心肌損傷模型，在動(dòng)物水平模擬細(xì)菌性心肌炎導(dǎo)致心肌損傷的模型，給予不同濃度補(bǔ)骨脂酚進(jìn)行處理，對(duì)心肌保護(hù)通路進(jìn)行檢測(cè)。

步驟：

動(dòng)物模型建立及給藥見(jiàn)前述步驟。剝離心耳與右心室，只保留左心室，進(jìn)行組織蛋白提取。western檢測(cè)sirt1信號(hào)通路和ers及凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)。

結(jié)果：

圖7所示lps組與control組相比,sirt1表達(dá)下調(diào)(p<0.001)，其下游ac-foxo1上調(diào)(p<0.001)。ers通路perk/eif2α磷酸化增加(均p<0.001)，其下游atf4/chop均被激活(atf4水平，p<0.001；chop水平，p<0.01)促凋亡蛋白bax上調(diào)(p<0.001)；抗凋亡蛋白bcl-2下調(diào)(p<0.001)。給予補(bǔ)骨脂酚處理后，sirt1表達(dá)有所上調(diào)(與lps組比，bak25mg/kg+lps組p<0.05，余組p<0.01)，但低于control組(bak25mg/kg+lps組p<0.001，bak50mg/kg+lps組p<0.01，余組p<0.05)；其下游ac-foxo1下調(diào)(與lps組比，bak25mg/kg+lps組及bak50mg/kg+lps組p<0.05，余組p<0.01)，高于control組(與lps組比，bak25mg/kg+lps組及bak50mg/kg+lps組p<0.01，余組p<0.05)；ers通路perk磷酸化水平降低(與lps組比，bak25mg/kg+lps組及bak50mg/kg+lps組p<0.05，余給藥組p<0.01)，eif2α磷酸化水平降低(與lps組比，bak25mg/kg+lps組及bak50mg/kg+lps組p<0.05，bak100mg/kg+lps組組p<0.01，bak75mg/kg+lps組p<0.001)，atf4水平下調(diào)(與lps組比，bak25mg/kg+lps組p<0.05，余給藥組p<0.01)，chop只在bak50mg/kg+lps組(p<0.05)、bak75mg/kg及bak100mg/kg組(p<0.01)有顯著升高。促凋亡蛋白bax下調(diào)(與lps組比，bak25mg/kg+lps組及bak50mg/kg+lps組p<0.05，余給藥組p<0.01)，抗凋亡蛋白bcl-2上調(diào)(與lps組比，bak25mg/kg+lps組(p<0.05)，bak50mg/kg+lps組p<0.01，余給藥組p<0.001)，bcl-2在bak100mg/kg劑量與75mg/kg劑量組表達(dá)量高于control組(p<0.05)。上述蛋白變化趨勢(shì)在75mg/kg劑量之內(nèi)呈現(xiàn)出劑量依賴(lài)性(相鄰組間相比p<0.05，p<0.01或p<0.001)，在100mg/kg劑量與75mg/kg劑量之間上述蛋白變化均無(wú)明顯差異(p>0.05)。補(bǔ)骨脂酚可以通過(guò)恢復(fù)sirt1水平來(lái)調(diào)節(jié)炎癥，減輕內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，減少細(xì)胞凋亡，發(fā)揮心肌保護(hù)作用。