本發(fā)明涉及葉黃素用于治療癌癥，特別是腎上腺皮質(zhì)癌、骨肉瘤或多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的新穎用途。

背景技術(shù)：

葉黃素在分子中除含有碳及氫的外，亦含有氧的一群類胡蘿卜素。蝦紅素(astaxanthin，其為一種葉黃素類胡蘿卜素)為天然抗氧化劑，其在諸多生物體中產(chǎn)生(hussein等人,2006)。其天然存在于某些藻類中，且使鮭魚、鱒魚、龍蝦、蝦及其他海產(chǎn)食品呈現(xiàn)粉紅色或紅色。蝦紅素為一種天然膳食組分，同時(shí)亦可作為食品補(bǔ)充劑使用。美國食品藥物管理局(u.s.foodanddrugadministration，fda)已批準(zhǔn)將蝦紅素特定地用于動(dòng)物及魚飼料中作為食品著色劑(或著色添加物)。歐洲委員會(huì)認(rèn)為其為食用色素，且給與其e編號(hào)e161j。天然的蝦紅素通常被fda認(rèn)為安全(gras)，但在美國，作為食品著色劑，其僅局限用于動(dòng)物食品。

已于諸多動(dòng)物模型及臨床測試中測試蝦紅素的生物活性。蝦紅素可阻斷好氧代謝產(chǎn)生的自由基，諸如羥基、過氧化物及活性氧物質(zhì)，由此防止異常dna損傷(higuera-ciapara等人,2006)。其他研究亦顯示蝦紅素可參與免疫反應(yīng)(kim等人,2009；park等人,2010)。在每日接受蝦紅素8周后的受試者中顯示有絲分裂原誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞增殖上調(diào)、自然殺手細(xì)胞的細(xì)胞毒性活性增加及t及b白血球總數(shù)增加。us6,773,708b1揭示葉黃素(例如蝦紅素)治療自體免疫疾病、慢性病毒感染及細(xì)胞內(nèi)細(xì)菌感染的用途，其在患者發(fā)生感染及/或發(fā)炎期間，于該患者體內(nèi)抑制過量th1細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)，并刺激th2細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)。

經(jīng)口投予的蝦紅素在血管內(nèi)皮損傷小鼠模型中及易于自發(fā)中風(fēng)的高血壓大鼠中抑制血栓形成(khan等人,2010；sasaki等人,2011)。cn101361726a揭示，蝦紅素可改善由大鼠腦缺血再灌注損傷所導(dǎo)致的行為癥狀，減少腦梗塞體積及并降低腦缺血大鼠的腦水腫，因此可用于制備供預(yù)防及治療腦中風(fēng)的藥物。

此外，蝦紅素亦可保護(hù)神經(jīng)元細(xì)胞。在蜘蛛膜下腔出血之后，用蝦紅素進(jìn)行的治療可藉由活化核因子紅血球相關(guān)因子2及抗氧化反應(yīng)性元素(nrf2-are)路徑來改善神經(jīng)發(fā)炎及早期腦損傷(wu等人,2014；zhang等人,2014a；zhang等人,2014b)。更重要地是，蝦紅素可穿透天然血腦障壁(bbb)，因此可用于治療腦神經(jīng)元疾病(wu等人,2014)。ep1867327a1揭示包含蝦紅素及/或其酯的神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)劑，其可緩解神經(jīng)細(xì)胞中粒線體功能障礙及氧化壓力。該神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)劑可有效保護(hù)黑質(zhì)的多巴胺激導(dǎo)性神經(jīng)元及藍(lán)斑核的去甲腎上腺素激導(dǎo)性神經(jīng)元免于退化，而建議該神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)劑可用于帕金森氏病(parkinson'sdisease)。

蝦紅素亦被認(rèn)為是有潛力的抗腫瘤化合物。其藉由阻斷stat、erk或pi3k/akt信號(hào)傳導(dǎo)來抑制倉鼠口腔癌細(xì)胞生長(kavitha等人,2013；kowshik等人,2014)。亦有關(guān)于蝦紅素的治療于肝細(xì)胞癌細(xì)胞中誘導(dǎo)粒線體依賴性細(xì)胞凋亡的報(bào)告(song等人,2011)。us6,277,417b1揭示蝦紅素可抑制酶5α-還原酶的活性，因此提出其可用于治療或預(yù)防由此酶活性引起的病癥，特別是良性前列腺增生及前列腺癌。

位于腎臟上方的腎上腺由外部腎上腺皮質(zhì)部分及內(nèi)部髓質(zhì)部分所組成(else等人,2014)。腎上腺皮質(zhì)分泌數(shù)種類固醇，諸如糖皮質(zhì)激素及鹽皮質(zhì)激素，以調(diào)節(jié)體內(nèi)的代謝穩(wěn)定。腎上腺皮質(zhì)癌為一種罕見疾病，且每年每一百萬人中有1至2人發(fā)病。其為一種具侵略性的腫瘤，且經(jīng)常轉(zhuǎn)移至其他器官，其5年總存活率僅為20至35％。于腎上腺皮質(zhì)中發(fā)生的腫瘤可誘導(dǎo)類固醇的異常分泌，且表現(xiàn)類似庫欣氏癥候群(cushing'ssyndrome)及男性化的癥狀(erickson等人,2014)。目前使用數(shù)種方法來治療腎上腺皮質(zhì)癌，例如完全外科切除術(shù)、放射線療法及組合化學(xué)療法(抗腫瘤藥物的組合為順鉑(cisplatin)、小紅莓(doxorubicin)及依托泊苷(etoposide))。到目前為止，并沒有可有效阻止腎上腺皮質(zhì)腫瘤細(xì)胞生長的單一方法。仍需要開發(fā)一種能安全且有效地治療腎上腺皮質(zhì)癌的治療劑。

骨肉瘤為原發(fā)性骨癌的最常見組織學(xué)形式。其在兒童及青少年中最為流行。目前，歐洲批準(zhǔn)以米伐木肽(mifamurtide)治療骨肉瘤。高劑量甲胺喋呤(methotrexate)與甲酰四氫葉酸(leucovorin)治療劑、動(dòng)脈內(nèi)投予順鉑、阿德力霉素(adriamycin)、異環(huán)磷酰胺(ifosfamide)與美司鈉(mesna)、bcd(博萊霉素(bleomycin)、環(huán)磷酰胺、放線菌素(dactinomycin))、依托泊苷及胞壁酰基三肽的組合亦可用于治療骨肉瘤。

多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤(glioblastomamultiforme；gbm)為最嚴(yán)重的惡性神經(jīng)膠質(zhì)瘤的一。gbm被認(rèn)為不可治愈的，且與高罹患率及死亡率相關(guān)聯(lián)，其在若干治療之后的中值存活期為15個(gè)月(aldape等人,2015；alifieris及trafalis,2015)。目前，歐洲及美國批準(zhǔn)以替莫唑胺(temozolomide)治療gbm。替莫唑胺為一種烷化藥物，其用于與放射線療法并用治療新診斷患有g(shù)bm的成年患者，接著作為維持治療。目前有數(shù)種用于治療gbm的侵性組合療法，諸如最安全的外科截除術(shù)、放射線療法及替莫唑胺治療(stupp等人,2009)。許多gbm患者對習(xí)知化學(xué)療法及放射線療法反應(yīng)不佳，預(yù)后為12至15個(gè)月的不良存活期范圍(中值為14.6個(gè)月)。

us8,632,825b2揭示四氫大麻酚(thc)及大麻二酚(cbd)用于制造治療gbm的藥劑的用途。us8,058,243b2揭示一種用于治療涉及神經(jīng)前驅(qū)細(xì)胞、早期神經(jīng)祖細(xì)胞、神經(jīng)干細(xì)胞(nsc)或其組合的神經(jīng)膠母細(xì)胞瘤癌的方法，該方法包含向有需要的個(gè)體投予治療有效量的包含艾芬地爾(ifenprodil)的組合物。迄今為止，尚無在不存在其他抗腫瘤藥物情況下可有效抑制gbm腫瘤生長的單一化合物。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的之一為提供用于預(yù)防或治療選自由腎上腺癌、骨癌及腦癌組成的群組的癌癥的方法及/或藥劑。

本發(fā)明的一方面為提供一種用于抑制腫瘤細(xì)胞生長的方法，其包含使該腫瘤細(xì)胞與包含治療有效量的至少一種葉黃素的組合物接觸。

在本發(fā)明的一較佳實(shí)施例中，該腫瘤細(xì)胞為腎上腺腫瘤細(xì)胞。

在本發(fā)明的一較佳實(shí)施例中，該腫瘤細(xì)胞為骨腫瘤細(xì)胞。

在本發(fā)明的一較佳實(shí)施例中，該腫瘤細(xì)胞為腦腫瘤細(xì)胞。

本發(fā)明的另一方面為提供一種用于預(yù)防或治療選自由腎上腺癌、骨癌及腦癌組成的群組的癌癥的方法，其包含向有需要的個(gè)體投予包含治療有效量的至少一種葉黃素的組合物。

本發(fā)明亦提供一種用于預(yù)防或治療選自由腎上腺癌、骨癌及腦癌組成的群組的癌癥的組合物，其包含治療有效量的至少一種葉黃素及生理學(xué)上可接受的載劑。

本發(fā)明進(jìn)一步提供葉黃素用于制造用以預(yù)防或治療選自由腎上腺癌、骨癌及腦癌組成的群組的癌癥的藥劑的用途。

在本發(fā)明的一較佳實(shí)施例中，該腎上腺癌選自由以下組成的群組：腎上腺皮質(zhì)腺瘤、腎上腺皮質(zhì)癌、神經(jīng)母細(xì)胞瘤及嗜鉻細(xì)胞瘤。

在本發(fā)明的一更佳實(shí)施例中，該腎上腺癌為腎上腺皮質(zhì)癌。

在本發(fā)明的一較佳實(shí)施例中，該骨癌選自由以下組成的群組：骨瘤、骨樣骨瘤、骨軟骨瘤、骨母細(xì)胞瘤、內(nèi)生軟骨瘤、骨骼的巨細(xì)胞瘤、動(dòng)脈瘤樣骨囊腫、骨骼的纖維性結(jié)構(gòu)不良、骨肉瘤、軟骨肉瘤、尤文氏肉瘤(ewing'ssarcoma)及纖維肉瘤。

在本發(fā)明的一更佳實(shí)施例中，該骨癌為骨肉瘤。

在本發(fā)明的一較佳實(shí)施例中，該腦癌選自由以下組成的群組：神經(jīng)膠質(zhì)瘤、脊膜瘤、垂體腺瘤及神經(jīng)鞘腫瘤，較佳地多形性星形細(xì)胞瘤、星形細(xì)胞瘤、中樞神經(jīng)細(xì)胞瘤、脈絡(luò)叢癌瘤、脈絡(luò)叢乳頭狀瘤、脈絡(luò)叢腫瘤、胚胎發(fā)育不良性神經(jīng)上皮腫瘤、腦室膜腫瘤、原纖維性星形細(xì)胞瘤、巨細(xì)胞神經(jīng)膠母細(xì)胞瘤、多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤(gbm)、腦神經(jīng)膠瘤病、神經(jīng)膠質(zhì)肉瘤、血管外皮瘤、神經(jīng)管胚細(xì)胞瘤、髓上皮瘤、腦膜癌病、神經(jīng)母細(xì)胞瘤、神經(jīng)細(xì)胞瘤、少枝星形細(xì)胞瘤、少枝膠質(zhì)瘤、視神經(jīng)鞘腦膜瘤、嬰兒室管膜瘤、毛細(xì)胞型星形細(xì)胞瘤、松果腺母細(xì)胞瘤、松果體細(xì)胞瘤、多形性未分化神經(jīng)母細(xì)胞瘤、多形態(tài)黃星形細(xì)胞瘤、原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤、蝶骨脊腦膜瘤、室管膜下巨細(xì)胞型星形細(xì)胞瘤、室管膜下瘤及三側(cè)性視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤。

在本發(fā)明的一更佳實(shí)施例中，該腦癌為多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤。

在本發(fā)明的一較佳實(shí)施例中，該葉黃素為蝦紅素及/或其酯。

在本發(fā)明的一較佳實(shí)施例中，該葉黃素來源于天然來源，諸如紅球藻屬(haematococcussp.)藻類的培養(yǎng)物。

在本發(fā)明的一更佳實(shí)施例中，該紅球藻屬藻類為雨生紅球藻(haematococcuspluvialis)。

在本發(fā)明的另一較佳實(shí)施例中，該葉黃素為化學(xué)合成的。

在本發(fā)明的一較佳實(shí)施例中，葉黃素的治療有效量在經(jīng)口投藥的情形下為每天約0.1mg至約10g，或在非經(jīng)腸投藥的情形下為每天約0.01mg至約5g。

本發(fā)明的組合物或藥劑可單獨(dú)或與其他治療并用。在一個(gè)較佳實(shí)施例中，該組合物或藥劑不與放射線療法及/或化學(xué)療法一起使用。在另一個(gè)較佳實(shí)施例中，該組合物或藥劑與放射線療法及/或化學(xué)療法并用。在另一較佳實(shí)施例中，該組合物或藥劑與用于預(yù)防或治療選自由腎上腺癌、骨癌及腦癌組成的群組的癌癥或控制腎上腺癌、骨癌及腦癌的癥狀或并發(fā)癥的一或多種治療劑同時(shí)或分開投予。

在本發(fā)明的一較佳實(shí)施例中，該癌癥已經(jīng)以手術(shù)方式自個(gè)體移除。

本發(fā)明詳細(xì)描述于以下部分中。本發(fā)明的其他特征、目的及優(yōu)點(diǎn)可輕易在本發(fā)明的詳細(xì)描述及申請專利范圍中發(fā)現(xiàn)。

附圖說明

圖1展示以dmso(對照組)或40μm蝦紅素處理24小時(shí)(a)或48小時(shí)(b)的y1細(xì)胞的明視野顯微鏡圖。

圖2展示在以蝦紅素處理(藍(lán)線或◆)及以dmso處理(紅線或■)后，y1細(xì)胞的生長曲線。每次以四個(gè)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，以平均值±s.d.表示。

圖3展示在dmso或蝦紅素存在下存活y1細(xì)胞群的定量。**表示與對照組(dmso處理組)比較，p<0.01。

圖4展示在以蝦紅素處理后，u87mg細(xì)胞數(shù)目減少。每次以四個(gè)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，且以平均值±s.d.表示。

圖5a及圖5b展示在以蝦紅素處理后，u87mg細(xì)胞的存活率降低。在dmso或不同濃度的蝦紅素存在下對存活u87mg細(xì)胞群進(jìn)行定量。

圖6展示在以蝦紅素處理后，m059k細(xì)胞數(shù)目減少。每次以四個(gè)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，以平均值±s.d.表示。

圖7展示在以蝦紅素處理后，m059j細(xì)胞數(shù)目減少。每次以四個(gè)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，以平均值±s.d.表示。

圖8展示在以蝦紅素處理后，u2os細(xì)胞數(shù)目減少。每次以四個(gè)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，以平均值±s.d.表示。

具體實(shí)施方式

除非本文另外定義，在本發(fā)明中使用的科學(xué)及技術(shù)術(shù)語應(yīng)具有本領(lǐng)域技術(shù)人員通常所理解的意義。術(shù)語的意義及范疇?wèi)?yīng)為明確的；然而，若存在任何潛在不明確性，則本文所提供的定義優(yōu)先于任何詞典或外來定義。

除非另外指明，否則如根據(jù)本發(fā)明所利用，以下術(shù)語應(yīng)理解為具有以下意義。

如本文所使用的術(shù)語“腎上腺皮質(zhì)癌(acc)”指起源于腎上腺皮質(zhì)(產(chǎn)生類固醇激素的組織)的侵襲性癌。腎上腺皮質(zhì)癌可于兒童及成人中以不同形式存在。兒童中的大部分腫瘤為功能性的，且男性化為目前最常呈現(xiàn)的癥狀，其次為庫欣氏癥候群(cushing'ssyndrome)及早熟癥。在成人呈現(xiàn)的激素癥候群中，單獨(dú)的庫欣氏癥候群最常見，其次為混合性庫欣氏及男性化(糖皮質(zhì)激素及雄激素過度產(chǎn)生)。女性化及康氏癥候群(connsyndrome)(鹽皮質(zhì)激素過量)發(fā)生小于10％例。在少數(shù)情況下，有報(bào)告于腎上腺皮質(zhì)癌中發(fā)生嗜鉻細(xì)胞瘤樣兒茶酚胺分泌過多。非功能性腫瘤(約40％，依官方數(shù)據(jù)改變)通常伴隨腹部或側(cè)腹疼痛、精索靜脈腫及腎靜脈血栓一起存在，或其可為無癥狀的，且偶然地偵測到。

術(shù)語“腎上腺癌”包括(但不限于)腎上腺皮質(zhì)腺瘤、腎上腺皮質(zhì)癌、神經(jīng)母細(xì)胞瘤及嗜鉻細(xì)胞瘤。

術(shù)語“骨癌”包括(但不限于)骨瘤、骨樣骨瘤、骨軟骨瘤、骨母細(xì)胞瘤、內(nèi)生軟骨瘤、骨骼的巨細(xì)胞瘤、動(dòng)脈瘤樣骨囊腫、骨骼的纖維性結(jié)構(gòu)不良、骨肉瘤、軟骨肉瘤、尤文氏肉瘤及纖維肉瘤。

術(shù)語“骨肉瘤”指骨骼中的癌性腫瘤。具體地講，其為由間葉細(xì)胞源性原始轉(zhuǎn)化細(xì)胞引起的侵襲性惡性贅瘤(因此其為肉瘤)，且其呈現(xiàn)骨母細(xì)胞分化并產(chǎn)生惡性骨樣瘤。

術(shù)語“腦癌”包括(但不限于)神經(jīng)膠質(zhì)瘤、脊膜瘤、垂體腺瘤及神經(jīng)鞘腫瘤，較佳地多形性星形細(xì)胞瘤、星形細(xì)胞瘤、中樞神經(jīng)細(xì)胞瘤、脈絡(luò)叢癌瘤、脈絡(luò)叢乳頭狀瘤、脈絡(luò)叢腫瘤、胚胎發(fā)育不良性神經(jīng)上皮腫瘤、腦室膜腫瘤、原纖維性星形細(xì)胞瘤、巨細(xì)胞神經(jīng)膠母細(xì)胞瘤、多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤(gbm)、腦神經(jīng)膠瘤病、神經(jīng)膠質(zhì)肉瘤、血管外皮瘤、神經(jīng)管胚細(xì)胞瘤、髓上皮瘤、腦膜癌病、神經(jīng)母細(xì)胞瘤、神經(jīng)細(xì)胞瘤、少枝星形細(xì)胞瘤、少枝膠質(zhì)瘤、視神經(jīng)鞘腦膜瘤、嬰兒室管膜瘤、毛細(xì)胞型星形細(xì)胞瘤、松果腺母細(xì)胞瘤、松果體細(xì)胞瘤、多形性未分化神經(jīng)母細(xì)胞瘤、多形態(tài)黃星形細(xì)胞瘤、原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤、蝶骨脊腦膜瘤、室管膜下巨細(xì)胞型星形細(xì)胞瘤、室管膜下瘤及三側(cè)性視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤。

術(shù)語“多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤(gbm)”指人類中發(fā)現(xiàn)的最高級(jí)別的神經(jīng)膠質(zhì)瘤(iv級(jí))。依據(jù)who分類，gbm亦指“神經(jīng)膠母細(xì)胞瘤”。神經(jīng)膠母細(xì)胞瘤自正常腦組織產(chǎn)生。其可侵入且于腦內(nèi)遷移遠(yuǎn)離主要腫瘤；然而，神經(jīng)膠母細(xì)胞瘤會(huì)很少擴(kuò)散至體內(nèi)其他處。神經(jīng)膠母細(xì)胞瘤存在兩種亞型：新發(fā)性(denovo)(新或原發(fā)性)及繼發(fā)性。新發(fā)性腫瘤產(chǎn)生快速，且往往為突然發(fā)現(xiàn)。其為最常見且極具侵略性的神經(jīng)膠母細(xì)胞瘤形式。在55歲及55歲以上的人中，新發(fā)性腫瘤占神經(jīng)膠母細(xì)胞瘤的大部分。繼發(fā)性神經(jīng)膠母細(xì)胞瘤最常見于45歲及45歲以下的患者中，通常以低級(jí)別或中等級(jí)別星形細(xì)胞瘤開始，其由基因程序化最終會(huì)轉(zhuǎn)型成惡性、快速生長的神經(jīng)膠母細(xì)胞瘤。

術(shù)語“放射線療法”指使用高能量放射線殺死癌細(xì)胞或收縮腫瘤的一類癌癥治療。用于放射線療法的放射線劑量以格雷(gy)為單位進(jìn)行量測，且取決于所治療的癌癥的類型及分期而變化。

術(shù)語“化學(xué)療法”包括(但不限于)投予化學(xué)治療性化合物，諸如阿德力霉素、順鉑、小紅莓、依托泊苷、氟嘧啶、伊立替康(irinotecan)、奧沙利鉑(oxaliplatin)、紫杉醇(taxol)、拓樸替康(topotecan)等。

如本文所使用的術(shù)語“葉黃素”指在分子中除含有碳及氫的外，亦含有氧的一群類胡蘿卜素或其衍生物。類胡蘿卜素由植物、真菌及一些細(xì)菌重新產(chǎn)生。在本發(fā)明的一較佳實(shí)施例中，葉黃素為蝦紅素或其酯。

本發(fā)明的組合物或藥劑中所含蝦紅素及/或其酯為以下式表示的類胡蘿卜素：

其中在蝦紅素的情形下，r¹及r²均為氫，且r¹及r²各自獨(dú)立地為氫原子或脂肪酸殘基，其限制條件為在蝦紅素的酯的情形下，r¹及r²中的至少一者為脂肪酸殘基。蝦紅素的酯中脂肪酸殘基的實(shí)例包括(但不限于)：飽和脂肪酸，諸如棕櫚酸及硬脂酸；或不飽和脂肪酸，諸如油酸、亞麻油酸、α-次亞麻油酸、γ-次亞麻油酸、雙高-γ-次亞麻油酸、二十碳四烯酸、二十碳五烯酸及二十二碳六烯酸。本發(fā)明中所使用的蝦紅素酯可為任何均質(zhì)或非均質(zhì)的單酯或二酯。蝦紅素具有一種結(jié)構(gòu)，其中額外的側(cè)氧基及額外的羥基存在于β-胡蘿卜素分子的各端，使得該分子不同于β-胡蘿卜素具有較低的穩(wěn)定性。另一方面，在兩端處的羥基以不飽和脂肪酸酯化的酯形式(例如，如磷蝦萃取物中獲得)較穩(wěn)定。

本發(fā)明中所使用的蝦紅素及/或其酯可化學(xué)合成或來源于天然存在的產(chǎn)物。天然存在的產(chǎn)物的實(shí)例包括：紅酵母；甲殼動(dòng)物，諸如劍水蚤(tigriopus)(紅水蚤(redwaterflea))及磷蝦的外殼；及微藻，諸如綠藻，其含有蝦紅素及/或其酯。在本發(fā)明中，可使用藉由任何方法產(chǎn)生的含有蝦紅素及/或其酯的任何萃取物，只要其具有蝦紅素及/或其酯的性質(zhì)。一般而言，可使用來自那些天然存在的產(chǎn)物的萃取物，且萃取物可為粗品，或必要時(shí)，可經(jīng)純化。在本發(fā)明中，必要時(shí)，可單獨(dú)或組合使用含有該蝦紅素及/或其酯的天然存在的產(chǎn)物的粗萃取物或碾碎的粉末，或經(jīng)純化產(chǎn)物或化學(xué)合成產(chǎn)物。鑒于化學(xué)穩(wěn)定性，較佳為使用蝦紅素的酯形式。

如本文所使用的術(shù)語“預(yù)防”指推遲易感個(gè)體癥狀的發(fā)作，減少病癥或病狀出現(xiàn)，或抑制病癥或病狀出現(xiàn)，或停滯病癥或病狀的發(fā)展。

如本文所使用的術(shù)語“治療”指示：減輕、緩解、逆轉(zhuǎn)及/或改善病癥或病狀或其一或多種癥狀，或終止易感個(gè)體的疾病或病狀的癥狀。

如本文所使用的術(shù)語“個(gè)體”指示動(dòng)物，尤其是哺乳動(dòng)物。在一個(gè)較佳實(shí)施例中，術(shù)語“個(gè)體”指示“人類”。

如本文所使用的術(shù)語“治療有效量”指單獨(dú)或與其他用于預(yù)防或治療選自由腎上腺癌、骨癌及腦癌組成的群組的癌癥的治療/藥劑組合使用以展示治療功效的活性成分的量。

術(shù)語“生理學(xué)上可接受的載劑”指本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知用于制造醫(yī)藥或膳食組合物的溶劑、稀釋劑、黏合劑、黏著劑、佐劑、賦形劑、受體、穩(wěn)定劑、類似物、調(diào)味劑、甜味劑、乳化劑或防腐劑。

如本文所使用的語“投予”或“投藥”指可用于使本發(fā)明的組合物或藥劑能夠遞送至生物作用的所需部位的方法。這些方法包括(但不限于)：經(jīng)口、十二指腸內(nèi)、鼻、非經(jīng)腸注射(包括靜脈內(nèi)、皮下、肌內(nèi)、血管內(nèi)或皮內(nèi))；局部及經(jīng)直腸投藥。在一較佳實(shí)施例中，本文所述的組合物及藥劑經(jīng)口投予。

除非上下文另外需要，否則單數(shù)術(shù)語應(yīng)包括復(fù)數(shù)，且復(fù)數(shù)術(shù)語應(yīng)包括單數(shù)。

本發(fā)明的目的之一為提供一種用于預(yù)防或治療選自由腎上腺癌、骨癌及腦癌組成的群組的癌癥的藥劑。

本發(fā)明旨在提供用于預(yù)防或治療選自由腎上腺癌、骨癌及腦癌組成的群組的癌癥的方法及/或藥劑。

本發(fā)明的一方面為提供一種用于抑制腫瘤細(xì)胞生長的方法，其包含使腎上腺皮質(zhì)腫瘤細(xì)胞與包含治療有效量的至少一種葉黃素的組合物接觸。

本發(fā)明的另一方面為提供一種用于預(yù)防或治療選自由腎上腺癌、骨癌及腦癌組成的群組的癌癥的方法，其包含向有需要的個(gè)體投予包含治療有效量的至少一種葉黃素的組合物。

在本發(fā)明的方法的實(shí)施中，將包含治療有效量的至少一種葉黃素的組合物投予需要治療及/或預(yù)防來抑制腫瘤細(xì)胞生長的個(gè)體，例如人類個(gè)體。

在實(shí)施本發(fā)明的方法時(shí)，可使用來自任何來源的葉黃素，不論天然抑或合成的。根據(jù)本發(fā)明的一較佳實(shí)施例，葉黃素為蝦紅素及/或其酯。在本發(fā)明的一尤佳實(shí)施例中，蝦紅素來源于天然來源，諸如紅球藻屬藻類，例如雨生紅球藻的培養(yǎng)物。雨生紅球藻微藻為用于本發(fā)明方法中的蝦紅素的較佳的天然、可商業(yè)購得來源。在本發(fā)明的另一較佳實(shí)施例中，蝦紅素為化學(xué)合成的。用于制備蝦紅素的合成方法(r.d.g.cooper等人,j.chemsoc.perkinstrans.i,(1975)第2195頁；f.kienzle,h.mayer,helv.chim.acta.,(1978)第61卷,第2609頁)，以及自天然來源分離蝦紅素的方法(tischer,z.physiol.chem.,(1941)第267卷,第281頁；seybold及goodwin,nature,(1959)第184卷,第1714頁)為已知的。因此，蝦紅素可以合成或自天然來源分離的純形式投予。

此外，在本發(fā)明方法的一較佳實(shí)施例中，蝦紅素作為包含蛋白質(zhì)、碳水化合物及脂肪酸的組合物的一部分投予。當(dāng)使用雨生紅球藻藻類膳食作為蝦紅素的來源時(shí)，組合物較佳以來源于微藻的形式投予，其包含微藻的天然蛋白、碳水化合物及脂肪酸組分。該微藻為可商業(yè)購得的(cyanotechcorporation,kailua-kona,hi)，且通常包含以下各物作為主要組分(以重量計(jì))：約1.5至2％蝦紅素、約15至30％蛋白質(zhì)、約35至40％碳水化合物、約10至25％灰分、約5至20％脂肪及約3至10％水分。該組合物進(jìn)一步包含包括以下各物的次要組分：鐵、鎂、鈣、生物素、l-肉堿、葉酸、煙酸、泛酸，及維生素b1、b2、b6、b12、c及e。

本發(fā)明亦提供一種包含治療有效量的至少一種葉黃素及生理學(xué)上可接受的載劑的組合物，其用于預(yù)防或治療選自由腎上腺癌、骨癌及腦癌組成的群組的癌癥。

本發(fā)明進(jìn)一步提供葉黃素用于制造用以預(yù)防或治療選自由腎上腺癌、骨癌及腦癌組成的群組的癌癥的藥劑的用途。

根據(jù)本發(fā)明的用于預(yù)防或治療選自由腎上腺癌、骨癌及腦癌組成的群組的癌癥的組合物或藥劑的投藥途徑可為口服或非經(jīng)腸。劑型根據(jù)投藥途徑適當(dāng)選擇。其實(shí)例包括非經(jīng)腸溶液、輸注溶液、散劑、顆粒劑、錠劑、膠囊、丸劑、腸溶包衣制劑、糖衣錠、供內(nèi)服的液體、懸浮液、乳液、糖漿、供外部使用的液體、泥罨劑、滴鼻劑、滴耳劑、滴眼劑、吸入劑、軟膏、洗劑、栓劑及經(jīng)腸養(yǎng)分。取決于疾病的狀況，其可單獨(dú)或組合使用。為了制備此等劑型，必要時(shí)可使用常用于醫(yī)藥制造技術(shù)領(lǐng)域中的輔助物質(zhì)，諸如賦形劑、黏合劑、消毒劑、抗氧化劑、崩解劑、潤滑劑及調(diào)味劑。

根據(jù)本發(fā)明的用于預(yù)防或治療選自由腎上腺癌、骨癌及腦癌組成的群組的癌癥的葉黃素的劑量取決于投藥的目的或擬投予的個(gè)體(性別、年齡、體重等)而變化。在本發(fā)明的一較佳實(shí)施例中，葉黃素的治療有效量在經(jīng)口投予的情形下為每天約0.1mg至約10g，較佳為約1mg至約4g，更佳為約4mg至約500mg；或在非經(jīng)腸投藥的情形下為每天約0.01mg至約5g，較佳為約0.1mg至約2g，更佳為約0.1至約500mg。

根據(jù)本發(fā)明的組合物不僅可作為如上文所描述的醫(yī)藥劑使用，亦可作為如以下的管制產(chǎn)品類別使用：“準(zhǔn)藥物”、化妝品、功能性食品、營養(yǎng)補(bǔ)充物、食品及飲料，及其他類似產(chǎn)品。當(dāng)用作準(zhǔn)藥物或化妝品時(shí)，必要時(shí)，該組合物可與常用于準(zhǔn)藥物或化妝品或其他技術(shù)的領(lǐng)域中的各種輔助物質(zhì)結(jié)合使用。或者，當(dāng)用作功能性食品、營養(yǎng)補(bǔ)充物或食品及飲料時(shí)，必要時(shí)，該藥劑可與常用于食品的添加劑，例如甜味劑、香辛料、調(diào)味料、消毒劑、防腐劑、殺菌劑及抗氧化劑結(jié)合使用。必要時(shí)，該藥劑可呈所需形式使用，諸如溶液、懸浮液、糖漿、顆粒、乳膏、糊狀物或膠狀物，或可經(jīng)成形。包含在此等產(chǎn)品中的成分的比率不受特別限制，且可根據(jù)預(yù)定目的、使用模式及劑量適當(dāng)選擇。

本發(fā)明的組合物或藥劑可單獨(dú)或與其他治療組合使用。在一個(gè)較佳實(shí)施例中，該組合物或藥劑與放射線療法及/或化學(xué)療法組合使用。在另一個(gè)較佳實(shí)施例中，該組合物或藥劑與用于預(yù)防或治療選自由腎上腺癌、骨癌及腦癌組成的群組的腎上腺皮質(zhì)癌或管理腎上腺癌、骨癌及腦癌的癥狀或并發(fā)癥的一或多種治療劑同時(shí)或分開投予。

現(xiàn)已大體上描述本發(fā)明，經(jīng)由參考如下實(shí)例可更容易理解本發(fā)明，這些實(shí)例提供用于制造本發(fā)明的醫(yī)藥組合物及使用其治療癌癥的例示性方案。這些實(shí)例僅出于說明的目的提供，且不意欲以任何方式限制本發(fā)明的范疇。已盡力確保所用數(shù)值(例如，量、溫度等)的準(zhǔn)確性，但當(dāng)然應(yīng)允許一定實(shí)驗(yàn)誤差及偏差。

實(shí)例

實(shí)例1：抑制腎上腺腫瘤細(xì)胞株

細(xì)胞培養(yǎng)及藥物處理

在37℃下，使小鼠腎上腺皮質(zhì)y1細(xì)胞株(atcc,ccl-79^tm)在含5％co2的潮濕氛圍中于補(bǔ)充有10％胎牛血清的達(dá)爾伯克氏改良型伊格爾培養(yǎng)基(dulbecco'smodifiedeaglemedium，dmem)-f12中生長。

將蝦紅素(型號(hào)：atp-9601a；沅育生物科技有限公司(臺(tái)灣))以20mm濃度溶解于二甲亞砜(dmso)中作為儲(chǔ)備溶液。

在分析的前，將y1細(xì)胞與dmso或40μm的蝦紅素一起培養(yǎng)1、2或3天。

mtt分析

在處理之后，以pbs洗滌細(xì)胞，接著在每個(gè)孔中添加1mlmtt(溴化3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑鎓鹽)溶液(在pbs中2mg/ml)。在37℃下培養(yǎng)3小時(shí)之后，添加2mldmso，且在暗處培養(yǎng)細(xì)胞30分鐘。在570nm波長(od570)下量測吸亮度。

結(jié)果

在1、2或3天處理后，相較于對照組(dmso處理組)，蝦紅素處理組中y1細(xì)胞的數(shù)目減少(參看圖1及圖2)。此結(jié)果進(jìn)一步藉由mtt分析確認(rèn)，該mtt分析量測粒線體丁二酸去氫酶的活性且代表細(xì)胞存活率。

如圖3所示，相較于dmso處理組，在蝦紅素處理48小時(shí)后，該處理組的od570減少。此數(shù)據(jù)可證明蝦紅素有效抑制腎上腺皮質(zhì)腫瘤細(xì)胞生長。

實(shí)例2：抑制腦腫瘤細(xì)胞株

細(xì)胞培養(yǎng)及藥物處理

在37℃下，使人類u87mg(atcc,htb-14^tm)細(xì)胞株在含5％co2的潮濕氛圍中于補(bǔ)充有10％胎牛血清的dmem培養(yǎng)基中生長。在37℃下，使m059k(atcc,crl-2365^tm)及m059j(atcc,crl-2366^tm)細(xì)胞株在含5％co2的潮濕氛圍中于補(bǔ)充有10％胎牛血清的達(dá)爾伯克氏改良型伊格爾培養(yǎng)基(dmem)-f12中生長。

將蝦紅素以20mm濃度溶解于二甲亞砜(dmso)中作為儲(chǔ)備溶液。

將u87mg、m059k及m059j細(xì)胞株以dmso，或100、200或400μm的蝦紅素處理24小時(shí)或48小時(shí)，之后進(jìn)行細(xì)胞數(shù)目計(jì)數(shù)。

結(jié)果

如圖4所示，蝦紅素以劑量依賴性及時(shí)間依賴性方式抑制u87mg細(xì)胞生長。亦藉由mtt分析確認(rèn)此結(jié)果(參看圖5)。如圖6及圖7所示，蝦紅素亦抑制m059k(圖6)及m059j(圖7)細(xì)胞生長。這些數(shù)據(jù)表示，以蝦紅素進(jìn)行的處理可以劑量依賴性方式抑制神經(jīng)膠母細(xì)胞瘤細(xì)胞生長。在不受理論限制的情況下，一般相信蝦紅素可穿透bbb(血腦障壁)，表示蝦紅素可作為抗神經(jīng)膠母細(xì)胞瘤的化合物。

實(shí)例3：抑制骨骼腫瘤細(xì)胞株

細(xì)胞培養(yǎng)及藥物處理

在37℃下，使人類u2os(atcc,htb-96^tm)細(xì)胞株在含5％co2的潮濕氛圍中于補(bǔ)充有10％胎牛血清的dmem培養(yǎng)基中生長。

將蝦紅素以20mm濃度溶解于二甲亞砜(dmso)中作為儲(chǔ)備溶液。

u2os細(xì)胞株以dmso，或100、200或400μm的蝦紅素處理72小時(shí)，接著進(jìn)行細(xì)胞數(shù)目計(jì)數(shù)。

結(jié)果

如圖8所示，蝦紅素以劑量依賴性方式抑制u2os細(xì)胞生長。此等數(shù)據(jù)表示，以蝦紅素進(jìn)行的處理可以劑量依賴性方式抑制骨肉瘤細(xì)胞生長。此數(shù)據(jù)可證明蝦紅素可有效抑制骨肉瘤細(xì)胞生長。

此等數(shù)據(jù)表示，葉黃素(蝦紅素)可在無任何放射線療法及/或化學(xué)療法情況下有效抑制腎上腺皮質(zhì)腫瘤、骨骼腫瘤及神經(jīng)膠母細(xì)胞瘤生長。

本領(lǐng)域技術(shù)人員能想到如以上說明性實(shí)例中所闡述的本發(fā)明的諸多修改及變化。因此，只有在所附的權(quán)利要求書中所記載的限制可用于局限本發(fā)明。

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