本發(fā)明涉及化妝品原料技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種中草藥活性物的制備方法。

背景技術(shù)：

人類源于美化自身的渴望，自古以來(lái)便對(duì)化妝品有不斷的追求。使用化妝品時(shí)，化妝品直接涂覆在使用者的皮膚上，而化妝品的大部分成分是由化學(xué)物質(zhì)制備而成的，由此可見，化妝品既有保護(hù)和美膚的功能，同時(shí)亦會(huì)產(chǎn)生有毒物質(zhì)以致引起一定的副作用，因此，有必要嚴(yán)格把控化妝品的成分，以平衡化妝品的美膚性能和綠色性能。況且，隨著人們生活質(zhì)量的提高，消費(fèi)者對(duì)化妝品的消費(fèi)觀念已不停留在美膚效果層面上，對(duì)化妝品的天然性能也有較大的權(quán)重追求，因此，制備出天然且美膚效果好的化妝品已成為化妝品行業(yè)的長(zhǎng)期追求?，F(xiàn)有制備天然健康化妝品的工藝主要是使用綠色有機(jī)原料代替化學(xué)原料，而添加的綠色有機(jī)原料是直接將綠色有機(jī)原料的自身成分與化妝品的主體成分加工，進(jìn)而生產(chǎn)出受人們歡迎的綠色天然化妝品。

然而，上述直接添加將綠色有機(jī)原料自身成分制備化妝品的工藝存在以下不足之處：第一，綠色有機(jī)原料主要來(lái)自已發(fā)育完全的植物，但已發(fā)育完全的植物活性成分少，不利于提高化妝品的活性效力；第二，使用綠色有機(jī)原料為添加成分時(shí)，還需先對(duì)綠色有機(jī)原料進(jìn)行多重前處理才能用作制備化妝品，而這些前處理步驟延長(zhǎng)了制備化妝品的生產(chǎn)線程，不利于簡(jiǎn)化化妝品的制備程序。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明目的在于提供一種中草藥活性物的制備方法，該方法能夠制備出作為化妝品有效成分的中草藥活性物，有效提高了中草藥在化妝品中的活性效力，且能簡(jiǎn)化化妝品的制備程序。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供以下技術(shù)方案：

提供一種中草藥活性物的制備方法，包括以下步驟：

步驟一，采樣：摘取具有生命活性的中草藥植物為原料；

步驟二，滅菌：將步驟一所述中草藥植物消毒滅菌，然后切取滅菌后的所述中草藥植物的組織器官為外植體；

步驟三，培養(yǎng)：將步驟二所得的外植體置于n6固體培養(yǎng)基中誘導(dǎo)培養(yǎng)，得到中草藥植物的愈傷組織；

步驟四，活性細(xì)胞的制備：

1）選取細(xì)胞：從步驟三所得的愈傷組織中選取形體較好的細(xì)胞團(tuán)；

2）傳代培養(yǎng)：把形態(tài)較好的細(xì)胞團(tuán)傳代培養(yǎng)，從而獲得疏松顆粒狀的細(xì)胞團(tuán)；

3）懸浮培養(yǎng)：把疏松顆粒狀的細(xì)胞團(tuán)移至裝有培養(yǎng)液的搖瓶中進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)，得到游離的細(xì)胞；

4）篩選：把游離的植物細(xì)胞過(guò)濾，篩選單個(gè)細(xì)胞或小數(shù)目的細(xì)胞團(tuán)作為活性細(xì)胞；

步驟五，清洗：將步驟四所得的活性細(xì)胞放在紗布上，然后用清水沖洗，從而去除培養(yǎng)液中的雜質(zhì)，得到干凈的活性細(xì)胞；

步驟六，分散：將步驟五所得的干凈的活性細(xì)胞分散于甘油中，得到中草藥活性物。

其中，所述中草藥植物是番紅花藥、銀杏、法國(guó)薔薇中的任意一種。

其中，所述步驟二中，消毒滅菌的步驟包括先用酒精擦洗中草藥植物，然后將中草藥植物浸泡于飽和漂白粉的上清液中，接著經(jīng)無(wú)菌水清洗，得到消毒滅菌的中草藥植物。

其中，所述步驟二中，所述酒精的濃度是40~80%。

其中，所述步驟二中，所述中草藥植物在飽和漂白粉的上清液中的浸泡時(shí)間是5~15min。

其中，所述步驟二中，無(wú)菌水清洗的次數(shù)是2~5次。

其中，所述步驟三中，所述n6固體培養(yǎng)基中含有質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.05~0.3%的吲哚乙酸、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.01~0.5%的6-芐基嘌呤、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.01~0.2%的赤霉酸、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1~1.0%的果糖。

其中，所述步驟三中，使用uv紫外燈誘導(dǎo)步驟二所得的外植體。

其中，所述步驟三中，誘導(dǎo)培養(yǎng)的時(shí)間是2~5周。

其中，所述步驟四中，所述傳代培養(yǎng)的傳代次數(shù)是2~4代。

本發(fā)明的有益效果：

（1）本發(fā)明的一種中草藥活性物的制備方法，該方法通過(guò)從中草藥植物的組織中培養(yǎng)獲得活性細(xì)胞，接著把活性細(xì)胞提取并置于甘油中分散保存，從而得到中草藥活性物。與現(xiàn)有技術(shù)相比，該制備方法培育出原生態(tài)的中草藥活性細(xì)胞作為活性物，保證了中草藥在化妝品中的活性效力，并且，該方法使用甘油分散中草藥活性細(xì)胞，不但能長(zhǎng)期保持中草藥活性物的品質(zhì)，而且使得中草藥活性物成品化，即，生產(chǎn)化妝品時(shí)，直接把甘油中的活性物加入化妝品原料中即可用作生產(chǎn)化妝品，而不需經(jīng)過(guò)提取中草藥的繁瑣步驟，進(jìn)而簡(jiǎn)化了化妝品的制備程序，此外，成品化的中草藥活性物可供按需配量，進(jìn)而提高了人工調(diào)控化妝品的可控性。

（2）本發(fā)明提供的一種中草藥活性物的制備方法，具有操作方法簡(jiǎn)單、生產(chǎn)成本低、并能夠適用于大規(guī)模生產(chǎn)的特點(diǎn)。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1。

提供一種中草藥活性物的制備方法，包括以下步驟：

步驟一，采樣：摘取具有生命活性的種草藥植物為原料，優(yōu)選地，該中草藥植物是番紅花；

步驟二，滅菌：將步驟一所述番紅花植物消毒滅菌，具體地，消毒滅菌的步驟包括：先用40%的酒精擦洗番紅花植物，然后將番紅花植物浸泡于飽和漂白粉的上清液中5min，接著經(jīng)無(wú)菌水清洗2次，得到消毒滅菌的番紅花植物，然后切取滅菌后的番紅花植物的組織器官為外植體；

步驟三，培養(yǎng)：將步驟二所得的外植體置于n6固體培養(yǎng)基中使用uv紫外燈誘導(dǎo)培養(yǎng)2周，得到番紅花的愈傷組織；

其中，n6固體培養(yǎng)基含有質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.05%的吲哚乙酸、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.01%的6-芐基嘌呤、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.01%的赤霉酸、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的果糖的添加成分，該添加成分是生產(chǎn)調(diào)節(jié)劑，能誘發(fā)組織器官的生長(zhǎng)；

步驟四，活性細(xì)胞的制備：

1）選取細(xì)胞：從步驟三所得的愈傷組織中選取形體較好的細(xì)胞團(tuán)，形態(tài)較好的細(xì)胞團(tuán)具有較好的活性，利于后續(xù)生產(chǎn)；

2）傳代培養(yǎng)：把形態(tài)較好的細(xì)胞團(tuán)傳代培養(yǎng)2代，使細(xì)胞處于不分化的增殖狀態(tài)，從而獲得疏松顆粒狀的細(xì)胞團(tuán)；

3）懸浮培養(yǎng)：把疏松顆粒狀的細(xì)胞團(tuán)移至裝有培養(yǎng)液的搖瓶中進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)，得到游離的細(xì)胞；

4）篩選：把游離的植物細(xì)胞過(guò)濾，篩選出單個(gè)細(xì)胞或小數(shù)目的細(xì)胞團(tuán)作為活性細(xì)胞；

步驟五，清洗：將步驟四所得的活性細(xì)胞放在紗布上，然后用清水沖洗，以去除培養(yǎng)液中的雜質(zhì)，得到干凈的活性細(xì)胞；

步驟六，分散：將步驟五所得的干凈活性細(xì)胞分散于甘油中，得到番紅花中草藥活性物。

實(shí)施例2。

提供一種中草藥活性物的制備方法，包括以下步驟：

步驟一，采樣：摘取具有生命活性的中草藥植物為原料，優(yōu)選地，該中草藥植物是銀杏；

步驟二，滅菌：將步驟一所述番銀杏植物消毒滅菌，具體地，消毒滅菌的步驟包括：先用80%的酒精擦洗銀杏薔薇植物，然后將銀杏植物浸泡于飽和漂白粉的上清液中15min，接著經(jīng)無(wú)菌水清洗5次，得到消毒滅菌的銀杏植物，然后切取滅菌后的銀杏植物的組織器官為外植體；

步驟三，培養(yǎng)：將步驟二所得的外植體置于n6固體培養(yǎng)基中使用uv紫外燈誘導(dǎo)培養(yǎng)3周，得到銀杏的愈傷組織；

其中，n6固體培養(yǎng)基含有質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.3%的吲哚乙酸、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.5%的6-芐基嘌呤、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.2%的赤霉酸、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1.0%的果糖的添加成分，該添加成分是生產(chǎn)調(diào)節(jié)劑，能誘發(fā)組織器官的生長(zhǎng)；

步驟四，活性細(xì)胞的制備：

1）選取細(xì)胞：從步驟三所得的愈傷組織中選取形體較好的細(xì)胞團(tuán)；

2）傳代培養(yǎng)：把形態(tài)較好的細(xì)胞團(tuán)傳代培養(yǎng)4代，使細(xì)胞處于不分化的增殖狀態(tài)，從而獲得疏松顆粒狀的細(xì)胞團(tuán)；

3）懸浮培養(yǎng)：把疏松顆粒狀的細(xì)胞團(tuán)移至裝有培養(yǎng)液的搖瓶中進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)，得到游離的細(xì)胞；

4）篩選：把游離的植物細(xì)胞過(guò)濾，篩選出單個(gè)細(xì)胞或小數(shù)目的細(xì)胞團(tuán)作為活性細(xì)胞；

步驟五，清洗：將步驟四所得的活性細(xì)胞放在紗布上，然后用清水沖洗，以去除培養(yǎng)液中的雜質(zhì)，得到干凈的活性細(xì)胞；

步驟六，分散：將步驟五所得的干凈活性細(xì)胞分散于甘油中，得到銀杏中草藥活性物。

實(shí)施例3。

提供一種中草藥活性物的制備方法，包括以下步驟：

步驟一，采樣：摘取具有生命活性的中草藥植物為原料，優(yōu)選地，該中草藥植物是法國(guó)薔薇植物；

步驟二，滅菌：將步驟一所述法國(guó)薔薇植物消毒滅菌，具體地，消毒滅菌的步驟包括：先用60%的酒精擦洗番紅花、銀杏、法國(guó)薔薇植物，然后將番紅花、銀杏、法國(guó)薔薇植物植物浸泡于飽和漂白粉的上清液中10min，接著經(jīng)無(wú)菌水清洗3次，得到消毒滅菌的法國(guó)薔薇植物，然后切取滅菌后的法國(guó)薔薇植物的組織器官為外植體；

步驟三，培養(yǎng)：將步驟二所得的外植體置于n6固體培養(yǎng)基中使用uv紫外燈誘導(dǎo)培養(yǎng)4周，得到法國(guó)薔薇植物的愈傷組織；

其中，n6固體培養(yǎng)基含有質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.15%的吲哚乙酸、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.25%的6-芐基嘌呤、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的赤霉酸、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.08%的果糖的添加成分，該添加成分是生產(chǎn)調(diào)節(jié)劑，能誘發(fā)組織器官的生長(zhǎng)；

步驟四，活性細(xì)胞的制備：

1）選取細(xì)胞：從步驟三所得的愈傷組織中選取形體較好的細(xì)胞團(tuán)；

2）傳代培養(yǎng)：把形態(tài)較好的細(xì)胞團(tuán)傳代培養(yǎng)3代，使細(xì)胞處于不分化的增殖狀態(tài)，從而獲得疏松顆粒狀的細(xì)胞團(tuán)；

3）懸浮培養(yǎng)：把疏松顆粒狀的細(xì)胞團(tuán)移至裝有培養(yǎng)液的搖瓶中進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)，得到游離的細(xì)胞；

4）篩選：把游離的植物細(xì)胞過(guò)濾，篩選出單個(gè)細(xì)胞或小數(shù)目的細(xì)胞團(tuán)作為活性細(xì)胞；

步驟五，清洗：將步驟四所得的活性細(xì)胞放在紗布上，然后用清水沖洗，以去除培養(yǎng)液中的雜質(zhì)，得到干凈的活性細(xì)胞；

步驟六，分散：將步驟五所得的干凈活性細(xì)胞分散于甘油中，得到法國(guó)薔薇中草藥活性物。

最后應(yīng)當(dāng)說(shuō)明的是，以上實(shí)施例僅用以說(shuō)明本發(fā)明的技術(shù)方案，而非對(duì)本發(fā)明保護(hù)范圍的限制，盡管參照較佳實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作了詳細(xì)地說(shuō)明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和范圍。