本發(fā)明涉及藥物制劑技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑及其制備方法。

背景技術(shù)：

他莫昔芬(tam)是一種選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑(serm)，它能干擾雌激素(estrogen)的某些活動，模擬其它雌激素作用，上調(diào)轉(zhuǎn)化生長因子β生成，此因子減少與惡性腫瘤的發(fā)展有關(guān)，還對蛋白激酶c有特異性抑制作用。這些作用都對依賴雌激素才能繼續(xù)生長的腫瘤細胞有抑制作用。臨床上多用于絕經(jīng)期前雌激素(er+)和孕激素受體(pr+)呈進行性發(fā)展的乳癌的治療。

世界上近百個國家用tam來治療晚期復(fù)發(fā)性乳腺癌和卵巢癌，主要用于治療和預(yù)防乳腺癌，近年來國內(nèi)外對tam的實驗和臨床研究發(fā)展很快，全球每年越有40萬例患者因為tam治療而免于死亡，盡管乳腺癌內(nèi)分泌治療新藥層出不窮，但是卻無法動搖其地位，然而，口服tam存在很多不可避免的副作用，熱潮，子宮內(nèi)膜增厚等，在臨床實踐中，藥物治療依從性往往不高，如果能在保證乳腺局部劑量的前提下改善不良反應(yīng)，無疑是一個巨大的突破，從某種意義上來說，打開了化學(xué)治療的一個新窗口。

tam在臨床應(yīng)用的制劑多為片劑。tam在體內(nèi)分布較廣，在殺滅腫瘤細胞的同時也會損害正常細胞，在治療中可能會引起dna損傷、高甘油三酯血癥、骨髓抑制、眼毒性、精神病發(fā)作、內(nèi)分泌紊亂、血管栓塞性疾病、卵巢病變，子宮內(nèi)膜異位癥等，甚至誘發(fā)子宮內(nèi)膜癌，增大了全身不良反應(yīng)而影響臨床應(yīng)用。為使tam能更多地聚集在腫瘤部位，tam的制劑研究成為了熱點，現(xiàn)代研究表明，將tam制備成凝膠，發(fā)現(xiàn)tam凝膠劑與口服方案ki67標(biāo)記指數(shù)下降程度相似，而全身效應(yīng)較小。朱玲等人發(fā)現(xiàn)枸櫞酸他莫昔芬凝膠制劑經(jīng)皮給藥后在乳腺及其周圍的組織形成藥物儲庫，有一定的緩釋特性，顯著延長他莫昔芬在血漿中的半衰期。劉讓如等人制備的tam磁性微球，提高其在腫瘤部位的藥物濃度，而增加其藥效，張怡等人制備的tam微乳外用制劑具有良好的促透皮作用，這些使得tam的制劑開發(fā)成為了研究改善他莫昔芬副作用、提高藥效的首選，據(jù)報道tam外用制劑有軟膏劑和霜劑，但是未見tam傳遞體凝膠劑的報道，因此有必要對現(xiàn)有的劑型進行改進，制備出釋藥速度恒定，生物利用度高，毒副作用小的劑型，這需要科研工作者的努力探索。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

基于上述現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明提供了一種他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑及其制備方法，該凝膠劑對他莫昔芬有較高的載藥量和包封效果，且穩(wěn)定性和透皮滲透性好。

其制備方法簡單，操作方便，制備成本低。

實現(xiàn)本發(fā)明上述目的所采取的技術(shù)方案為：

一種他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑，由以下質(zhì)量分數(shù)的原料制備而成：

一種他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑，由以下質(zhì)量分數(shù)的原料制備而成：

進一步，所述的磷脂材料為大豆卵磷脂、氫化大豆卵磷脂和二棕櫚酰磷脂酰膽堿中的一種，或者為氫化大豆磷脂和大豆卵磷脂的復(fù)合磷脂，或者為氫化大豆卵磷脂和二棕櫚酰磷脂酰膽堿的復(fù)合磷脂。

進一步，所述的水溶性凝膠基質(zhì)為纖維素衍生物，所述的纖維素衍生物為甲基纖維素或羧甲基纖維素鈉。

進一步，所述的透皮促滲劑為胺、薄荷醇、月桂氮卓酮、泊洛沙姆、月桂醇硫酸鈉、脂肪酸或脂肪酸酯。

進一步，所述的胺為尿素；所述的脂肪酸為油酸或月桂酸；所述的脂肪酸酯為月桂醇乳酸酯、肉豆蔻酸異丙酯、丙二醇二壬酸酯或癸二酸二乙酯。

進一步，所述的表面活性劑a為膽酸鈉、去氧膽酸鈉、脂肪酸甘油酯、蔗糖脂肪酸酯、聚山梨酯或聚氧乙烯脂肪酸酯，所述的表面活性劑b為膽酸鈉、去氧膽酸鈉或脂肪酸甘油酯。

進一步，所述的防腐劑為苯甲酸、苯甲酸鈉、山梨酸或尼泊金酯類，所述的尼泊金酯類為對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸丙酯或?qū)αu基苯甲酸丁酯。

進一步，所述的保濕劑為甘油、丙二醇或山梨醇。

一種他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑的制備方法，包括如下步驟：

1)將他莫昔芬、膽固醇、磷脂材料、表面活性劑a溶于有機溶劑中，所述的有機溶劑為氯仿、乙醇或乙醚，得到溶液a，將溶液a濃縮去除有機溶劑，加入pbs緩沖液，pbs緩沖液加入的質(zhì)量為水溶性凝膠基質(zhì)質(zhì)量的1-5％，在常溫常壓下進行水合，得到他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體混懸液；

2)將水溶性凝膠基質(zhì)、表面活性劑b和蒸餾水混合均勻，蒸餾水加入的質(zhì)量為水溶性凝膠基質(zhì)質(zhì)量的0.1-1％，得溶液b，再將透皮促滲劑、防腐劑和保濕劑溶于乙醇中，乙醇加入的質(zhì)量為水溶性凝膠基質(zhì)質(zhì)量的7-12％，得溶液c，攪拌下將溶液c加入溶液b中，溶脹好后，加入氨水調(diào)節(jié)至中性，氨水加入的質(zhì)量為水溶性凝膠基質(zhì)質(zhì)量的1-5％，得到空白凝膠基質(zhì)；

3)將空白凝膠基質(zhì)和他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體混懸液混勻，得到他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果和優(yōu)點在于：

1、在載藥量和包封率方面，本發(fā)明研究發(fā)現(xiàn)，他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑的載樣量0.5～1.2mg/ml，包封率為85.6～96.0％，說明本發(fā)明的柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑對他莫昔芬有較高的載藥量和包封效果。

2、在穩(wěn)定性方面，本發(fā)明研究發(fā)現(xiàn)，他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑的粒徑在50.2±0.12～100.8±0.26nm之間，電位為-21.8±0.15～-37.7±0.45mv，多分散系數(shù)為0.1±0.05～0.18±0.01，將他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑分別放入室溫和4℃條件下，于1、5、10、15天內(nèi)觀察外觀、粒徑、電位和藥物含量，發(fā)現(xiàn)他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑在室溫下，粒徑稍有增加，電位無明顯變化，他莫昔芬含量稍有減少，而4℃下無明顯變化，由此表明，本發(fā)明的他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑在室溫和4℃條件下穩(wěn)定性良好。

3、在體外透皮滲透性方面，本發(fā)明研究發(fā)現(xiàn)，他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑經(jīng)皮穩(wěn)態(tài)滲透速率和皮內(nèi)滯留量約為普通他莫昔芬凝膠劑的3-7倍，說明柔性納米脂質(zhì)體是一種能有效促進經(jīng)皮滲透的新型載體。

總之，本發(fā)明以他莫昔芬作為藥物，以柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑作為載體，解決了他莫昔芬副作用大，藥物依從性的缺陷，本發(fā)明的他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑能在24h內(nèi)持續(xù)藥物釋放和透皮，藥物通過皮膚進入到給藥部位，能夠維持局部穩(wěn)定的血藥濃度，同時減少患者的服藥次數(shù)，增加了患者的依從性。另外，本發(fā)明的他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑避免了藥物口服經(jīng)胃腸道及肝的首過效應(yīng)，提高了生物利用度。因此，本發(fā)明的他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑吸收速率快，透皮量高，具有穩(wěn)定、高效的特點，在臨床應(yīng)用上具有明顯的優(yōu)勢，能有有效的實現(xiàn)藥物長時間的持續(xù)透皮，從而達到局部給藥的靶向作用。

說明書附圖

圖1為實施例1制備的他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑和普通他莫昔芬凝膠劑的經(jīng)皮滲透曲線。

圖2為實施例2制備的他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑和普通他莫昔芬凝膠劑的經(jīng)皮滲透曲線。

圖3為實施例3制備的他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑和普通他莫昔芬凝膠劑的經(jīng)皮滲透曲線。

圖4為實施例1制備的他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑和普通他莫昔芬凝膠劑的皮膚藥物滯留量對比圖。

圖5為實施例2制備的他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑和普通他莫昔芬凝膠劑的皮膚藥物滯留量對比圖。

圖6為實施例3制備的他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑和普通他莫昔芬凝膠劑的皮膚藥物滯留量對比圖。

具體實施方式

下面結(jié)合具體實施方式對本發(fā)明進行詳細說明。

實施例1

一種他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑，由以下質(zhì)量分數(shù)的原料制備而成：

所述的磷脂材料為氫化大豆磷脂和大豆卵磷脂的復(fù)合磷脂，記為spc/hspc(spc和hspc的摩爾比為3：1)。

上述他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑的制備方法，其步驟是：

1)將他莫昔芬、膽固醇、spc/hspc、膽酸鈉溶于氯仿中，得到溶液a，將溶液a在37℃下減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去氯仿，加入pbs緩沖液(ph＝7.4)，在常溫常壓下水合15min，得到他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體混懸液；

2)將羧甲基纖維素鈉、去氧膽酸鈉和蒸餾水混合均勻，得溶液b，再將月桂氮卓酮、苯甲酸和丙二醇溶于乙醇中，得溶液c，將溶液c逐漸加入溶液b中，以500rpm的轉(zhuǎn)速攪拌15min，混勻并溶脹好后，加入氨水(25wt％)調(diào)節(jié)ph值至7.0左右，得到空白凝膠基質(zhì)；

3)將空白凝膠基質(zhì)和他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體混懸液混合，以500rpm的轉(zhuǎn)速攪拌15min，得到他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑。

試驗一、本發(fā)明的他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑的透皮實驗

試驗方法：

1)將處理好的乳豬皮固定在frank擴散池上，在接受池中加入pbs緩沖液(ph＝7.4)，供給室中加入他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑(實施例1制備)，37℃恒溫水浴，同時300r·min^-1攪拌，在0.5h、1h、2h、4h、6h、8h、12h、24h、48h時取接收液，并補充等量的pbs，將接收液用流動相(乙腈：水＝60：40)稀釋10倍，高效液相色譜法分析，測定他莫昔芬的含量，計算累計經(jīng)皮滲透量；以普通他莫昔芬凝膠劑(實驗室按照本實施例步驟2方法制備的空白凝膠與他莫昔芬混合攪拌制備而成)為對照，在相同條件下進行實驗，測量他莫昔芬的含量，計算累計經(jīng)皮滲透量。

2)將1)中皮膚滲透試驗完成后的乳豬皮取下，去掉乳豬皮表面藥物，用pbs緩沖液沖洗角質(zhì)層和真皮層，擦拭表面水分后，精密稱重，再剪碎乳豬皮，置于10ml容量瓶中，甲醇超聲提取1h后定容，得到皮膚提取液，將皮膚提取液在12000r·min-1下離心10min，取上清液，將上清液用流動相(乙腈：水＝60：40)稀釋10倍，高效液相色譜法分析，測定他莫昔芬的含量，計算單位質(zhì)量皮膚的他莫昔芬滯留量。

試驗結(jié)果：

1、實施例1制備的他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑和普通他莫昔芬凝膠劑的經(jīng)皮滲透曲線如圖1所示，該他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑經(jīng)皮滲透曲線的擬合方程為q＝8.196t-15.935(r＝0.994)，普通他莫昔芬凝膠劑的擬合方程為q＝2.1717t-4.03(r＝0.991)。勻速釋藥48h，實施例1制備的他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑的累計透過量378.26μg·cm^-1，經(jīng)皮穩(wěn)態(tài)滲透速率j為8.196ug·cm^-2·h^-1。

2、實施例1制備的他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑和普通他莫昔芬凝膠劑的皮膚藥物滯留量如圖4所示，從圖4可以看出，實施例1制備的他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑的皮膚藥物滯留量為15.96μg·g^-1，普通他莫昔芬凝膠劑的皮膚藥物滯留量為5.63μg·g^-1。

由此可見，本發(fā)明的他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑控制釋放藥物良好，可顯著的提高藥物皮膚滯留量，從而延長藥物作用時間，降低藥物毒副作用，實現(xiàn)局部治療。

實施例2

一種他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑，由以下質(zhì)量分數(shù)的原料制備而成：

所述的磷脂材料為二棕櫚酰磷脂酰膽堿和大豆卵磷脂的復(fù)合磷脂，記為dppc/hspc(dppc和hspc的摩爾比為1：3)。

上述他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑的制備方法，其步驟是：

1)將他莫昔芬、膽固醇、dppc/hspc、膽酸鈉溶于氯仿中，得到溶液a，將溶液a在37℃下減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去氯仿，加入pbs緩沖液(ph＝7.4)，在常溫常壓下水合15min，得到他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體混懸液；

2)將羧甲基纖維素鈉、去氧膽酸鈉和蒸餾水混合均勻，得溶液b，再將月桂氮卓酮、苯甲酸和丙二醇溶于乙醇中，得溶液c，將溶液c逐漸加入溶液b中，以500rpm的轉(zhuǎn)速攪拌15min，混勻并溶脹好后，加入氨水調(diào)節(jié)ph值至7.0左右，得到空白凝膠基質(zhì)；

3)將空白凝膠基質(zhì)和他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體混懸液混合，以500rpm的轉(zhuǎn)速攪拌15min，得到他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑。

試驗二、本發(fā)明的他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑的透皮實驗

試驗方法：

1)將處理好的乳豬皮固定在frank擴散池上，在接受池中加入pbs緩沖液(ph＝7.4)，供給室中加入他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑(實施例2制備)，37℃恒溫水浴，同時300r·min^-1攪拌，在0.5h、1h、2h、4h、6h、8h、12h、24h、48h時取接收液，并補充等量的pbs，將接收液用流動相(乙腈：水＝60：40)稀釋10倍，高效液相色譜法分析，測定他莫昔芬的含量，計算累計經(jīng)皮滲透量；以普通他莫昔芬凝膠劑(實驗室按照本實施例步驟2方法制備的空白凝膠與他莫昔芬混合攪拌制備而成)為對照，在相同條件下進行實驗，測量他莫昔芬的含量，計算累計經(jīng)皮滲透量。

2)將1)中皮膚滲透試驗完成后的乳豬皮取下，去掉乳豬皮表面藥物，用pbs緩沖液沖洗角質(zhì)層和真皮層，擦拭表面水分后，精密稱重，再剪碎乳豬皮，置于10ml容量瓶中，甲醇超聲提取1h后定容，得到皮膚提取液，將皮膚提取液在12000r·min-1下離心10min，取上清液，將上清液用流動相(乙腈：水＝60：40)稀釋10倍，高效液相色譜法分析，測定他莫昔芬的含量，計算單位質(zhì)量皮膚的他莫昔芬滯留量。

試驗結(jié)果：

1、實施例2制備的他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑和普通他莫昔芬凝膠劑的經(jīng)皮滲透曲線如圖2所示，勻速釋藥48h，實施例2制備的他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑的累計透過量523.87μg·cm^-1，經(jīng)皮穩(wěn)態(tài)滲透速率j為11.383ug·cm^-2·h^-1。

2、實施例2制備的他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑和普通他莫昔芬凝膠劑的皮膚藥物滯留量如圖5所示，從圖5可以看出，實施例2制備的他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑的皮膚藥物滯留量為11.47μg·g^-1，普通他莫昔芬凝膠劑的皮膚藥物滯留量為5.43μg·g^-1。

由此可見，本發(fā)明的他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑控制釋放藥物良好，可顯著的提高藥物皮膚滯留量，從而延長藥物作用時間，降低藥物毒副作用，實現(xiàn)局部治療。

實施例3

一種他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑，由以下質(zhì)量分數(shù)的原料制備而成：

上述他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑的制備方法，其步驟是：

1)將他莫昔芬、膽固醇、hspc、膽酸鈉溶于氯仿中，得到溶液a，將溶液a在37℃下減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去氯仿，加入pbs緩沖液(ph＝7.4)，在常溫常壓下水合15min，得到他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體混懸液；

2)將羧甲基纖維素鈉、去氧膽酸鈉和蒸餾水混合均勻，得溶液b，再將月桂氮卓酮、苯甲酸和丙二醇溶于乙醇中，得溶液c，將溶液c逐漸加入溶液b中，以500rpm的轉(zhuǎn)速攪拌15min，混勻并溶脹好后，加入氨水調(diào)節(jié)ph值至7.0左右，得到空白凝膠基質(zhì)；

3)將空白凝膠基質(zhì)和他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體混懸液混合，以500rpm的轉(zhuǎn)速攪拌15min，得到他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑。

試驗三、本發(fā)明的他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑的透皮實驗

試驗方法：

1)將處理好的乳豬皮固定在frank擴散池上，在接受池中加入pbs緩沖液(ph＝7.4)，供給室中加入他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑(實施例3制備)，37℃恒溫水浴，同時300r·min^-1攪拌，在0.5h、1h、2h、4h、6h、8h、12h、24h、48h時取接收液，并補充等量的pbs，將接收液用流動相(乙腈：水＝60：40)稀釋10倍，高效液相色譜法分析，測定他莫昔芬的含量，計算累計經(jīng)皮滲透量；以普通他莫昔芬凝膠劑(實驗室按照本實施例步驟2方法制備的空白凝膠與他莫昔芬混合攪拌制備而成)為對照，在相同條件下進行實驗，測量他莫昔芬的含量，計算累計經(jīng)皮滲透量。

2)將1)中皮膚滲透試驗完成后的乳豬皮取下，去掉乳豬皮表面藥物，用pbs緩沖液沖洗角質(zhì)層和真皮層，擦拭表面水分后，精密稱重，再剪碎乳豬皮，置于10ml容量瓶中，甲醇超聲提取1h后定容，得到皮膚提取液，將皮膚提取液在12000r·min-1下離心10min，取上清液，將上清液用流動相(乙腈：水＝60：40)稀釋10倍，高效液相色譜法分析，測定他莫昔芬的含量，計算單位質(zhì)量皮膚的他莫昔芬滯留量。

試驗結(jié)果：

1、實施例3制備的他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑和普通他莫昔芬凝膠劑的經(jīng)皮滲透曲線如圖3所示，勻速釋藥48h，實施例3制備的他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑的累計透過量1289.32μg·cm^-1，經(jīng)皮穩(wěn)態(tài)滲透速率j為27.367ug·cm^-2·h^-1。

2、實施例3制備的他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑和普通他莫昔芬凝膠劑的皮膚藥物滯留量如圖6所示，從圖6可以看出，實施例3制備的他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑的皮膚藥物滯留量為8.27μg·g^-1，普通他莫昔芬凝膠劑的皮膚藥物滯留量為5.13μg·g^-1。

由此可見，本發(fā)明的他莫昔芬柔性納米脂質(zhì)體凝膠劑控制釋放藥物良好，可顯著的提高藥物皮膚滯留量，從而延長藥物作用時間，降低藥物毒副作用，實現(xiàn)局部治療。