皮膚活性因子類柔性納米脂質(zhì)體及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種皮膚活性因子類柔性納米脂質(zhì)體及其制備方法和應(yīng)用。本發(fā)明的柔性納米脂質(zhì)體包括下列重量份的組分所制成：1-1000份中性磷脂、1-1000份膽固醇、0.5-500份表面活性劑、0.1-20份透明質(zhì)酸和0.5-500份皮膚活性因子類成分。本發(fā)明的皮膚活性因子類活性成分柔性納米脂質(zhì)體，可以顯著提高皮膚活性因子類成分的穩(wěn)定性，促進(jìn)這些活性成分的透皮吸收并提高其作用效率，還能提高活性成分在皮膚表面和皮膚深層的滯留和作用時(shí)間；凍干粉末狀態(tài)的皮膚活性因子類柔性納米脂質(zhì)體還利于使用、運(yùn)輸和貯存；本發(fā)明的柔性納米脂質(zhì)體的制備方法均可采用機(jī)械化方法，產(chǎn)品工藝和質(zhì)量的穩(wěn)定性好、重現(xiàn)性高。
【專利說(shuō)明】皮膚活性因子類柔性納米脂質(zhì)體及其制備方法和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種柔性納米脂質(zhì)體及其制備方法及用途，特別的涉及一種皮膚活性因子類柔性納米脂質(zhì)體及其制備方法，以及該柔性納米脂質(zhì)體在化妝品方面的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]隨著對(duì)于皮膚生理病理的認(rèn)識(shí)越來(lái)越清楚，越來(lái)越多的具有生物活性的動(dòng)植物成分和/或生物高分子成分應(yīng)用到化妝品行業(yè)，取得了巨大的社會(huì)和經(jīng)濟(jì)效益。但是，將這些具有生物活性的物質(zhì)應(yīng)用到化妝品中，需要解決以下幾個(gè)問(wèn)題:
[0003]1、這些生物活性物質(zhì)的穩(wěn)定性如何解決，這類物質(zhì)的穩(wěn)定性除了由其結(jié)構(gòu)和空間構(gòu)象決定外，外界環(huán)境因素的影響也不容小視，例如表皮活性因子溶液，在外界環(huán)境中的活性持續(xù)時(shí)間僅有短短的數(shù)小時(shí)，在其被皮膚吸收發(fā)揮作用之前就基本失活了，根本不能發(fā)揮其應(yīng)有的作用和效果；
[0004]2、如何使這些高分子成分能夠被人體皮膚吸收，通常來(lái)說(shuō)，活性物分子量越小，越容易透過(guò)皮膚，一旦分子量大于600，活性物就很難被皮膚吸收了，而近年來(lái)應(yīng)用的具有特定皮膚活性功能的物質(zhì)大多數(shù)是肽類等高分子物質(zhì)，其分子量少則數(shù)千，多則數(shù)十萬(wàn)，這就決定了它們很難透過(guò)皮膚從而被有效吸收；
[0005]3、為了滿足皮膚生理活動(dòng)的多方面需求，通常的化妝品中活性成分的種類少則幾種，多則達(dá)到數(shù)十種，活性成分之間的理化反應(yīng)限制了化妝品處方篩選的范圍。為了解決這些問(wèn)題，新的藥物制劑技術(shù)越來(lái)越多地被應(yīng)用到化妝品行業(yè)，目前，解決活性物穩(wěn)定性和相容性主要采取加入穩(wěn)定劑、冷凍干燥、制備成乳劑、用環(huán)糊精、微囊(球)、脂質(zhì)體進(jìn)行包裹等方法；而促進(jìn)皮膚吸收則采用了以下一些方法:將藥物本身的顆粒制備成納米級(jí)、加入Azone等透皮促進(jìn)劑、采用離子導(dǎo)入或電致孔、制備成具有促透性能的納米級(jí)包裹體等。
[0006]將脂質(zhì)體制備工藝應(yīng)用到化妝品行業(yè)已有數(shù)十年的歷史，大量的研究結(jié)果證明，將化妝品活性成分包裹到脂質(zhì)體中，可以極大提高這些活性成分的穩(wěn)定性，這些活性成分從脂質(zhì)體中釋放具有緩釋性能，同時(shí)，由于脂質(zhì)體膜成分與人體細(xì)胞生物膜的成分極其接近，因此這類制劑生物相容性好，安全性高。特別是二十世紀(jì)六十年代出現(xiàn)的柔性納米脂質(zhì)體，可以通過(guò)其自身的柔性和變形性，高效地穿透比自身直徑小數(shù)倍的皮膚孔道從而達(dá)到良好的透皮吸收效果，柔性納米脂質(zhì)體不僅可以包裹小分子活性物，對(duì)于分子量高達(dá)IO6的生物大分子活性物質(zhì)亦具有比較優(yōu)良的皮膚透過(guò)性能，是化妝品制備中極具潛力的制備方法。另外，化妝品活性成分分別用脂質(zhì)體包裹，可以有效避免這些成分可能存在的相互作用和理化反應(yīng)，進(jìn)一步提高了其穩(wěn)定性和使用的安全性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明為了解決上述問(wèn)題，提供一種透皮能力強(qiáng)且生物相容性好的柔性納米脂質(zhì)體制劑。
[0008]本發(fā)明提供一種皮膚活性因子類柔性納米脂質(zhì)體，能保證皮膚活性因子類在其的穩(wěn)定性和使用安全性。
[0009]本發(fā)明提供了一種簡(jiǎn)單，且具有較高的包封率和載藥量的皮膚活性因子類柔性納米脂質(zhì)體制備方法。
[0010]本發(fā)明提供了一種皮膚活性因子類柔性納米脂質(zhì)體在化妝品中的應(yīng)用。
[0011]本發(fā)明的技術(shù)方案如下:
[0012]所述的柔性納米脂質(zhì)體包括下列重量份的組分所制成:1-1000份中性磷脂、1-1000份膽固醇、0.5-500份表面活性劑、0.1-20份透明質(zhì)酸和0.5-500份皮膚活性因子類成分。
[0013]在本發(fā)明一較佳實(shí)施例中，本發(fā)明的柔性納米脂質(zhì)體包括下列重量份的組分所制成:100-120份中性磷脂、15-100份膽固醇、10-100份表面活性劑、0.1-20份透明質(zhì)酸和
0.5-60份皮膚活性因子類成分。[0014]在本發(fā)明一更佳實(shí)施例中，本發(fā)明的柔性納米脂質(zhì)體包括下列重量份的組分所制成:100-120份中性磷脂、15-20份膽固醇、10-20份表面活性劑、0.1-20份透明質(zhì)酸和30份皮膚活性因子類成分。
[0015]在本發(fā)明一較佳實(shí)施例中，本發(fā)明的柔性納米脂質(zhì)體其還包括占脂質(zhì)體總重量
0.1-0.5%的抗氧化劑；優(yōu)選地為0.2% ;所述的氧化劑選自維生素C、維生素E、丁基羥基茴香醚(BHA)、2，6-二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT)、茶多酚、愈創(chuàng)樹脂、芝麻酚或者波爾定堿中的一種或多種。
[0016]在本發(fā)明一較佳實(shí)施例中，本發(fā)明還包括相當(dāng)于所述的脂質(zhì)體總重量2-8倍的冷凍保護(hù)劑；所述的冷凍保護(hù)劑選自甘油、乳糖、蔗糖、甘露醇、葡萄糖或者海藻糖的一種或多種。
[0017]優(yōu)選地，所述的凍干保護(hù)劑:脂質(zhì)體的重量比在3:1至6:1。
[0018]在本發(fā)明一較佳實(shí)施例中，所述的柔性納米脂質(zhì)體的粒徑范圍50_200nm。
[0019]在本發(fā)明一較佳實(shí)施例中,所述的中性磷脂選自大豆卵磷脂、氫化大豆卵磷脂、蛋黃卵磷脂、腦磷脂、二棕櫚酸磷脂酰膽堿、二硬脂酸磷脂酰膽堿、二肉豆蘧酸磷脂酰膽堿、二月桂酸磷脂酰膽堿或者二棕櫚酸磷脂酰乙醇胺中的一種或多種；所述的表面活性劑是膽酸鈉或去氧膽酸鈉。
[0020]優(yōu)選地，中性磷脂為大豆卵磷脂、氫化大豆卵磷脂、二棕櫚酰磷脂酰膽堿中的一種或多種。
[0021]本發(fā)明膽固醇的使用是為了調(diào)節(jié)脂質(zhì)體膜的流動(dòng)性和通透性，進(jìn)而調(diào)整脂質(zhì)體膜的穩(wěn)定性。
[0022]本發(fā)明使用的表面活性劑，可以使脂質(zhì)體膜具有更大的彈性與變形性，從而促進(jìn)脂質(zhì)體的透皮吸收性能。優(yōu)選膽酸鈉或去氧膽酸鈉。
[0023]本發(fā)明的柔性納米脂質(zhì)體中的抗氧化劑的使用，以防止其在常溫條件下貯存時(shí)被氧化。所述的氧化劑選自維生素C、維生素E、丁基羥基茴香醚(BHA)、2，6-二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT)、茶多酚、愈創(chuàng)樹脂、芝麻酚或者波爾定堿中的一種或多種。優(yōu)選維生素E和丁基羥基茴香醚(BHA)組成的混合抗氧化劑。
[0024]在本發(fā)明脂質(zhì)成分與所包裹活性成分的重量比，對(duì)脂質(zhì)體的穩(wěn)定性、包封率及載藥量有較大影響，適宜的脂質(zhì)成分與所包裹活性成分的重量比在2:1至5:1 ;凍干保護(hù)劑與脂質(zhì)體的重量比，對(duì)最終產(chǎn)品的載藥量亦有較大影響，適宜的比例范圍是凍干保護(hù)劑:脂質(zhì)體 3:1 至 6:1。
[0025]在本發(fā)明一較佳實(shí)施例中，所述的皮膚活性因子類選自表皮生長(zhǎng)因子(EGF)、角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子(KGF)、胰島素生長(zhǎng)因子(IGF-1)、堿性纖維原細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)或者酸性纖維原細(xì)胞生長(zhǎng)因子(aFGF)的一種或多種。
[0026]本發(fā)明提供了脂質(zhì)體混懸液中，脂質(zhì)體包裹的活性成分與游離的活性成分分離的低溫超速離心法，還可以采用透析方法、柱層析法等分離脂質(zhì)體與游離成分。
[0027]本發(fā)明柔性納米脂質(zhì)體的制備方法，所述方法采用薄膜分散-超聲-均質(zhì)-擠出-凍干法，其包括如下步驟:
[0028]I)將所述比例的中性磷脂、膽固醇在10_50°C水浴條件下溶解于揮發(fā)性有機(jī)溶劑中；
[0029]2)將步驟I)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，得到均勻的脂質(zhì)膜；
[0030]3)將所述比例的表面活性劑、皮膚活性因子、冷凍干燥保護(hù)劑在10-50°C水浴條件下溶解于PH=7.0的磷酸緩沖溶液中；
[0031]4)將步驟3)加入2)進(jìn)行超聲混合，得到脂質(zhì)體混懸液，并超聲破碎60-90次后，5000PS1-10000PSI均質(zhì)，最后通過(guò)擠出儀過(guò)濾膜；
[0032]5)將步驟4)得到的混懸液，采用低溫超速離心法分離脂質(zhì)體包裹的活性成分和游離在磷酸緩沖液中的活性成分；
[0033]6)在步驟5)得到的脂質(zhì)體混懸液于-50至-100°C預(yù)凍12小時(shí)以上，再置于冷凍干燥機(jī)凍干，得到凍干柔性納米脂質(zhì)體粉末。
[0034]優(yōu)選地，所述步驟I中加入占脂質(zhì)體總重量0.1-0.5%的復(fù)合抗氧化劑的脂溶性成分。
[0035]本發(fā)明的另一方面，一種柔性納米脂質(zhì)體在制備皮膚活性因子類化妝品活性成分方面的應(yīng)用
[0036]本發(fā)明的積極進(jìn)步效果在于:本發(fā)明制備的柔性納米脂質(zhì)體粒徑在50_200nm之間，保證了所包裹的活性成分具有更好的穩(wěn)定性和皮膚吸收效果。而本發(fā)明采用的薄膜分散-超聲-均質(zhì)-擠出-凍干法，產(chǎn)品制備方法簡(jiǎn)單、且具有較高的包封率和載藥量；整個(gè)工藝過(guò)程均由機(jī)械手段完成，使產(chǎn)品工藝和質(zhì)量具有較好的穩(wěn)定性和重現(xiàn)性。本發(fā)明最終的產(chǎn)品為流動(dòng)性良好的粉末，便于使用、運(yùn)輸和貯存。
【具體實(shí)施方式】:
[0037]實(shí)施例1
[0038]將120mg氫化大豆卵磷脂、IOmg膽固醇水浴超聲溶于乙醚中，將0.25mg維生素E與BHA混合抗氧化劑溶于少量乙醇中，再與乙醚液混合，置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)成膜；將1000Π表皮活性因子(EGF)和1000Π角質(zhì)細(xì)胞活性因子(KGF)、15mg膽酸鈉、1.7mg透明質(zhì)酸、500mg乳糖溶于pH7.0的磷酸緩沖液中；將前述的磷酸緩沖液加入脂質(zhì)膜，置旋渦式振蕩儀振蕩得初步的脂質(zhì)體混懸液；將脂質(zhì)體混懸液用探針式超聲細(xì)胞破碎儀超聲90個(gè)循環(huán)(每循環(huán)超聲5秒，間歇5秒，冰浴)后，用AVESTIN高壓均質(zhì)機(jī)均質(zhì)3次，再通過(guò)AVESTIN擠出儀過(guò)IOOnm的微孔濾膜10次，將擠出的脂質(zhì)體混懸液于4°C 100000轉(zhuǎn)/min離心3小時(shí)；棄去上液，得到的脂質(zhì)體混懸液-80°C預(yù)凍12小時(shí)后，放置于冷凍干燥機(jī)冷凍干燥成粉末狀。
[0039]所得到的EGF和KGF混合物柔性納米脂質(zhì)體的粒徑和Zeta電位經(jīng)Zitasizer(Nano ZS,Malvern)納米粒度及電位分析儀測(cè)定其粒徑和Zeta電位分別為97.4±18.7nm、70.0±8.2mV ;采用超速離心法分離測(cè)得產(chǎn)品的包封率為28.34%。
[0040]實(shí)施例2
[0041]將IOOmg大豆卵磷脂、50mg膽固醇水浴超聲溶于氯仿中，將0.26mg維生素E與BHA混合抗氧化劑溶于少量乙醇中，再與氯仿液混合；將2000瓜表皮活性因子(EGF)UOmg膽酸鈉、1.5mg透明質(zhì)酸、400mg甘露醇溶于pH7.0的磷酸緩沖液中；將前述的磷酸緩沖液與氯仿溶液在水浴中超聲成均勻乳濁液，靜置30分鐘后，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)得脂質(zhì)體混懸液；將脂質(zhì)體混懸液用探針式超聲細(xì)胞破碎儀超聲60個(gè)循環(huán)(每循環(huán)超聲5秒，間歇5秒，冰浴)后，用AVESTIN高壓均質(zhì)機(jī)均質(zhì)3次，再通過(guò)AVESTIN擠出儀過(guò)IOOnm的微孔濾膜10次，擠出的脂質(zhì)體混懸液放入透析袋(分子截留量8000-14000)中透析6小時(shí)；取透析袋中的脂質(zhì)體混懸液，于_80°C預(yù)凍12小時(shí)后,放置于冷凍干燥機(jī)冷凍干燥成粉末狀。
[0042]所得到的表皮活性因子柔性納米脂質(zhì)體的粒徑和Zeta電位經(jīng)Zitasizer (NanoZS, Malvern)納米粒度及電位分析儀測(cè)定其粒徑和Zeta電位分別為113.5±16.7nm、70.2±7.5mV ;采用透析法分離測(cè)得產(chǎn)品的包封率為30.44%。
[0043]實(shí)施例3
[0044]將IOmg 二棕櫚酰 磷脂酰膽堿、Img膽固醇溶于乙醚中，將0.25mg維生素E與BHA混合抗氧化劑溶于少量乙醇中，再與乙醚液混合；混合液于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸干形成薄膜；將0.1mg表皮生長(zhǎng)因子(EGF)、0.25mg膽酸鈉、0.2mg透明質(zhì)酸、50mg乳糖溶于ρΗ7.0的磷酸緩沖液中；將前述的磷酸緩沖液加入脂質(zhì)膜，置旋渦式振蕩儀振蕩得脂質(zhì)體混懸液；將脂質(zhì)體混懸液用探針式超聲細(xì)胞破碎儀超聲90個(gè)循環(huán)(每循環(huán)超聲5秒，間歇5秒，冰浴)后，用AVESTIN高壓均質(zhì)機(jī)均質(zhì)3次，再通過(guò)AVESTIN擠出儀過(guò)IOOnm的微孔濾膜10次；將擠出的脂質(zhì)體混懸液于4°C 100000轉(zhuǎn)/min離心6小時(shí)；棄去上液,得到的脂質(zhì)體混懸液于_80°C預(yù)凍12小時(shí)后，放置于冷凍干燥機(jī)冷凍干燥成粉末狀。
[0045]所得到的EGF柔性納米脂質(zhì)體的粒徑和Zeta電位經(jīng)Zitasizer (Nano ZS,Malvern)納米粒度及電位分析儀測(cè)定其粒徑和Zeta電位分別為54.2±8.3nm、74.1±11.8mV ;采用超速離心法分離測(cè)得產(chǎn)品的包封率為39.88%。
[0046]實(shí)施例4
[0047]將500mg氫化大豆卵磷脂、200mg膽固醇水浴超聲溶于乙醚中，將L 8mg維生素E與BHA混合抗氧化劑溶于少量乙醇中，再與氯仿液混合，混合液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)成膜；將120mg表皮生長(zhǎng)因子(EGF)、角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子(KGF)、胰島素生長(zhǎng)因子(IGF-1)、堿性纖維原細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)、酸性纖維原細(xì)胞生長(zhǎng)因子(aFGF)(質(zhì)量比1:0.5:0.2:0.2:0.1)混合物、75mg去氧膽酸鈉、8.5mg透明質(zhì)酸、2.5g甘露醇溶于pH7.0的磷酸緩沖液中；將前述的磷酸緩沖液加入脂質(zhì)膜，置旋渦式振蕩儀振蕩得脂質(zhì)體混懸液；將脂質(zhì)體混懸液用探針式超聲細(xì)胞破碎儀超聲90個(gè)循環(huán)(每循環(huán)超聲5秒，間歇5秒，冰浴)后，用AVESTIN高壓均質(zhì)機(jī)均質(zhì)3次，再通過(guò)AVESTIN擠出儀過(guò)IOOnm的微孔濾膜10次；將擠出的脂質(zhì)體混懸液于40C 100000轉(zhuǎn)/min離心5小時(shí)；棄去上液，得到的脂質(zhì)體混懸液于_80°C預(yù)凍12小時(shí)后，放置于冷凍干燥機(jī)冷凍干燥成粉末狀 。
[0048]所得到的柔性納米脂質(zhì)體的粒徑和Zeta電位經(jīng)Zitasizer (Nano ZS, Malvern)納米粒度及電位分析儀測(cè)定其粒徑和Zeta電位分別為168.2±21.9nm、54.6±8.7mV。
[0049]實(shí)施例5
[0050]將IOOmg大豆磷脂、50mg膽固醇溶于乙醚中，將0.25mg維生素E與BHA混合抗氧化劑溶于少量乙醇中，再與氯仿液混合；混合液于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸干形成薄膜；將IOmg角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子(KGF)、1.6mg膽酸鈉、1.7mg透明質(zhì)酸、400mg甘露醇溶于ρΗ7.0的磷酸緩沖液中；將前述的磷酸緩沖液加入脂質(zhì)膜，置旋渦式振蕩儀振蕩得脂質(zhì)體混懸液；將脂質(zhì)體混懸液用探針式超聲細(xì)胞破碎儀超聲80個(gè)循環(huán)(每循環(huán)超聲5秒，間歇5秒，冰浴)后，用AVESTIN高壓均質(zhì)機(jī)均質(zhì)3次，再通過(guò)AVESTIN擠出儀過(guò)IOOnm的微孔濾膜10次；將擠出的脂質(zhì)體混懸液于4°C 100000轉(zhuǎn)/min離心4小時(shí)；棄去上液，得到的脂質(zhì)體混懸液，于_80°C預(yù)凍12小時(shí)后，放置于冷凍干燥機(jī)冷凍干燥成粉末狀。
[0051 ] 所得到的KGF柔性納米脂質(zhì)體的粒徑和Zeta電位經(jīng)Zitasizer (Nano ZS,Malvern)納米粒度及電位分析儀測(cè)定其粒徑和Zeta電位分別為166.7土 18.5nm、54.1 ±13.8mV ;采用超速離心法分離測(cè)得產(chǎn)品的包封率為27.7%。
[0052]上述實(shí)施例中，中性磷脂由日油株式會(huì)社提供，膽固醇、去氧膽酸鈉以及膽酸鈉由天津市大茂化學(xué)試劑廠生產(chǎn)，透明質(zhì)酸由山東福瑞達(dá)生物醫(yī)藥有限公司生產(chǎn)，甘露醇和乳糖由上海實(shí)驗(yàn)試劑有限公司生產(chǎn)，BHA由上海QIGANG Pd生產(chǎn)，維生素E為美國(guó)Sigma產(chǎn)品，磷酸緩沖液根據(jù)中國(guó)藥典自配，其余試劑均為市售產(chǎn)品，除有機(jī)溶劑外均符合食品或藥用標(biāo)準(zhǔn)。
[0053]效果實(shí)施例1形態(tài)學(xué)
[0054]將EGF柔性納米脂質(zhì)體混懸液，磷鎢酸負(fù)染，透射電鏡下觀察形態(tài)，見圖1。圖1EGF柔性納米脂質(zhì)體電鏡圖。
[0055]由圖1中可以看出，所制備的脂質(zhì)體為類圓形，大小較為均一，粒徑< 200nm，脂質(zhì)體膜具有“指紋”特征，確證了方法制備脂質(zhì)體是成功的。
[0056]效果實(shí)施例2穩(wěn)定性
[0057]取3批EGF柔性納米脂質(zhì)體及凍干EGF柔性納米脂質(zhì)體粉末，分別置于室溫、4°C條件下，于Om和3m測(cè)定其包封率、pH、粒徑和Zeta電位,并觀察外觀，以確定其穩(wěn)定性。見表1。
[0058]表1脂質(zhì)體混懸液及凍干脂質(zhì)體分別放置3個(gè)月后其穩(wěn)定性結(jié)果
[0059]
【權(quán)利要求】
1.一種皮膚活性因子類柔性納米脂質(zhì)體，其特征在于:所述的柔性納米脂質(zhì)體包括下列重量份的組分所制成:1-1000份中性磷脂、1-1000份膽固醇、0.5-500份表面活性劑、0.1-20份透明質(zhì)酸和0.5-500份皮膚活性因子類成分。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的柔性納米脂質(zhì)體，其特征在于:其包括下列重量份的組分所制成:100-120份中性磷脂、15-100份膽固醇、10-100份表面活性劑、0.1-20份透明質(zhì)酸和0.5-60份皮膚活性因子類成分。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的柔性納米脂質(zhì)體，其特征在于:其包括下列重量份的組分所制成:100-120份中性磷脂、15-20份膽固醇、10-20份表面活性劑、0.1-20份透明質(zhì)酸和30份皮膚活性因子類成分。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3所述的柔性納米脂質(zhì)體，其特征在于:其還包括占脂質(zhì)體總重量0.1-0.5%的抗氧化劑，優(yōu)選地為0.2%;所述的氧化劑選自維生素C、維生素E、丁基羥基茴香醚(BHA)、2，6- 二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT)、茶多酚、愈創(chuàng)樹脂、芝麻酚或者波爾定堿中的一種或多種。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-3所述的柔性納米脂質(zhì)體，其特征在于:其還包括相當(dāng)于所述的脂質(zhì)體總重量2-8倍的冷凍保護(hù)劑；所述的冷凍保護(hù)劑選自甘油、乳糖、蔗糖、甘露醇、葡萄糖或者海藻糖的一種或多種。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的柔性納米脂質(zhì)體，其特征在于:所述的凍干保護(hù)劑:脂質(zhì)體的重量比在3:1至6:1。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-3所述的柔性納米脂質(zhì)體，其特征在于:所述的柔性納米脂質(zhì)體的粒徑范圍為50-200nm。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-3所·述的柔性納米脂質(zhì)體，其特征在于:所述的中性磷脂選自大豆卵磷脂、氫化大豆卵磷脂、蛋黃卵磷脂、腦磷脂、二棕櫚酸磷脂酰膽堿、二硬脂酸磷脂酰膽堿、二肉豆蘧酸磷脂酰膽堿、二月桂酸磷脂酰膽堿或者二棕櫚酸磷脂酰乙醇胺中的一種或多種；所述的表面活性劑是膽酸鈉或去氧膽酸鈉。
9.根據(jù)權(quán)利要求1-3所述的柔性納米脂質(zhì)體，其特征在于:所述的皮膚活性因子類選自表皮生長(zhǎng)因子(EGF)、角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子(KGF)、胰島素生長(zhǎng)因子(IGF-1)、堿性纖維原細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)或者酸性纖維原細(xì)胞生長(zhǎng)因子(aFGF)的一種或多種。
10.一種根據(jù)權(quán)利要求5所述的柔性納米脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于:所述方法采用薄膜分散-超聲-均質(zhì)-擠出-凍干法，其包括如下步驟: 1)將所述比例的中性磷脂、膽固醇在10_50°C水浴條件下溶解于揮發(fā)性有機(jī)溶劑中； 2)將步驟I)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，得到均勻的脂質(zhì)膜； 3)將所述比例的表面活性劑、皮膚活性因子和冷凍干燥保護(hù)劑在10-50°C水浴條件下溶解于PH=7.0的磷酸緩沖溶液中； 4)將步驟3)加入2)進(jìn)行超聲混合，得到脂質(zhì)體混懸液，并超聲破碎60-90次后，5000PS1-10000PSI均質(zhì)，最后通過(guò)擠出儀過(guò)濾膜； 5)將步驟4)得到的混懸液，采用低溫超速離心法分離脂質(zhì)體包裹的活性成分和游離在磷酸緩沖液中的活性成分； 6)在步驟5)得到的脂質(zhì)體混懸液于-50至-100°C預(yù)凍12小時(shí)以上，再置于冷凍干燥機(jī)凍干，得到凍干柔性納米脂質(zhì)體粉末。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的制備方法，其特征在于:所述步驟I中加入占脂質(zhì)體總重量0.1-0.5%的復(fù)合抗氧化劑的脂溶性成分。
12.一種根據(jù)權(quán)利要求1-3所述的柔性納米脂質(zhì)體在制備皮膚活性因子類化妝品活性成分方面的應(yīng)用?！?br> 【文檔編號(hào)】A61Q19/00GK103520007SQ201310479332
【公開日】2014年1月22日 申請(qǐng)日期:2013年10月15日 優(yōu)先權(quán)日:2013年10月15日
【發(fā)明者】江妍 申請(qǐng)人:天博醫(yī)藥技術(shù)（蘇州）有限公司