本發(fā)明公開了人參果花青素在制備預(yù)防急性肝損傷藥物的新用途，屬于中藥中化合物的新生物活性的醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

對(duì)乙酰氨基酚(acetaminophen,apap)，又稱撲熱息痛，在臨床上廣泛用于鎮(zhèn)痛和退熱，apap在治療范圍內(nèi)是安全的，但過(guò)量攝入apap會(huì)導(dǎo)致肝損傷。攝入過(guò)量apap時(shí)，細(xì)胞中大量產(chǎn)生的napqi與gsh結(jié)合，導(dǎo)致gsh水平下降，大量產(chǎn)生的活性氧ros以及硝基酪氨酸，從而影響細(xì)胞的能量生成和脂質(zhì)代謝以及細(xì)胞的增殖、分化與凋亡。

肝臟疾病是人類最常見(jiàn)的疾病之一，嚴(yán)重威脅人類的健康。急性肝損傷是肝病發(fā)生、發(fā)展以及惡化的基本途徑，情況嚴(yán)重者甚至引發(fā)肝硬化、肝癌，因此開發(fā)治療和預(yù)防肝臟疾病的藥物顯得尤為重要。保肝類西藥治療強(qiáng)、見(jiàn)效快，但很多化學(xué)藥常有的嚴(yán)重不良反應(yīng)和耐藥性，植物藥為植物或其提取物制成的藥物，具有整體和多靶點(diǎn)治療觀念，在人類歷史上被廣泛用來(lái)預(yù)防、保健和治療疾病，且植物藥很少發(fā)生單一化學(xué)藥物所常有的嚴(yán)重不良反應(yīng)和耐藥性，因此天然植物藥對(duì)治療肝病具有廣闊的研究前景。

花青素是一類廣泛存在于植物中的水溶性天然色素，具有抗氧化、抗炎，抑菌，抗衰老、抗癌以及對(duì)肝臟，對(duì)心腦血管和視力的保護(hù)作用。人參來(lái)源于五加科植物人參(panaxginsengc.a.meyer)的干燥根及根莖，是我國(guó)傳統(tǒng)的名貴中藥材^[11]。人參果是人參的成熟果實(shí)，含有人參皂苷、黃酮、多糖、生物堿、甾醇和揮發(fā)油等多種化學(xué)成分，其中皂苷及多糖含量最多且被人們深入研究，人參大部分化學(xué)成分具都有顯著的藥理活性，在對(duì)肝保護(hù)作用方面均有顯著影響。

人參果花青素(ginsengfruitanthocyanins,gfa)是從人參果中提取的類黃酮類成分，是一種水溶性色素，具有抗氧化、抗自由基等作用。目前為止，盡管人參皂苷類成分的肝損傷保護(hù)活性屢見(jiàn)報(bào)道，但有關(guān)人參果中花青素類成分是否具有保護(hù)肝損傷的藥理作用尚不明確。本文從人參果花青素的抗氧化、抑制硝化應(yīng)激，減少炎癥反應(yīng)及抑制細(xì)胞凋亡等機(jī)制證明人參果花青素對(duì)apap誘導(dǎo)的小鼠肝損傷具有保護(hù)作用，為人參果花青素的臨床應(yīng)用提供一定的理論參考。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明提供了人參果花青素在制備預(yù)防撲熱息痛（apap）誘導(dǎo)的急性肝損傷藥物中的應(yīng)用。

本發(fā)明所述的人參果花青素在用于上述用途時(shí)，其口服或胃腸外給藥，均是安全的，在口服情況下，其可以以任何常規(guī)的形式給藥，如片劑，膠囊劑，粉針劑，注射劑，丸劑，軟膠囊，顆粒劑和貼劑等。

本發(fā)明制備保護(hù)急性肝損傷藥物是由有效成分與固體或液體的賦形劑一起構(gòu)成的，這里使用的固體或液體的賦形劑在本領(lǐng)域是眾所周知的，下面舉幾個(gè)例子，散劑是內(nèi)服的粉末劑，它的賦形劑有乳糖，淀粉，糊精，碳酸鈣，合成或天然硫酸鋁，氧化鎂，硬脂酸鎂，碳酸氫鈉，干燥酵母等；溶液劑的賦形劑有水，甘油，1，2-丙二醇，單糖漿，乙醇，乙二醇，聚乙二醇，山梨糖醇等；軟膏劑的賦形劑可以使用脂油，含水羊毛脂、凡士林、甘油、蜂蠟、木蠟、液體石蠟等組合成的疏水劑或親水劑。本發(fā)明的藥物組合物可以按現(xiàn)有技術(shù)中已知的方法如混合、制粒、壓片來(lái)制備。本發(fā)明藥物組合物還可以包括各種藥學(xué)使用的任何組分，如香味劑、著色劑、甜味劑等。

本發(fā)明可以通過(guò)下面的實(shí)驗(yàn)例進(jìn)一步說(shuō)明。

實(shí)驗(yàn)例1.人參果花青素的制備方法

1.1人參果花青素制備方法采用如下步驟：

首先，將成熟的人參果，通過(guò)機(jī)器擠壓分離果肉和種子，將果肉按100:0.5加入naco3，充分混勻，靜置72小時(shí)以上。將靜置好的果肉投入提取罐，按12:1加入深井水或蒸餾水，加熱至35~40℃，提取8~10小時(shí)，沉降凈化10~16小時(shí)，過(guò)濾，稍濃縮至原液體積的80~90%為宜。將上述濃縮液注入大孔樹脂柱進(jìn)行吸附。用4倍柱體積的30~50%乙醇洗脫樹脂柱，收集回收液，進(jìn)一步沉降凈化8~10小時(shí)，在35~45%下進(jìn)行低溫濃縮，分離乙醇，冷凍干燥12小時(shí)以上，取出即得人參果花青素。

naco3能夠有效去除人參果漿中的雜質(zhì)，與不添加naco3比較，人參果花青素的收率提高15~20%。

1.2人參果花青素成分分析

通過(guò)分析：人參果花青素以原花青素為主，主要為兒茶素、表兒茶素及形成的二聚體，此外尚含少量黃酮類成分，如人參黃酮苷(panasenoside)

實(shí)驗(yàn)例2.人參果花青素對(duì)撲熱息痛致小鼠肝損傷的保護(hù)作用

1材料與方法

1.1動(dòng)物:雄性icr小鼠，spf級(jí)，5~6周，體重20~22g，購(gòu)自長(zhǎng)春市億斯實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限責(zé)任公司，合格證號(hào)：scxk（吉）2011-0004，自由飲水，適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后隨機(jī)分為4組后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

材料儀器:人參果花青素，來(lái)自撫松安東參業(yè)有限公司；apap（對(duì)乙酰氨基酚）源于阿拉丁試劑有限公司；蘇木素-伊紅染液（h&e），hoechst33258染色液，上海碧云天生物技術(shù)有限公司；谷丙轉(zhuǎn)氨酶（alt）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（ast）、丙二醛（mda）及谷胱甘肽（gsh）試劑盒，購(gòu)于南京建成生物工程有限公司；兔來(lái)源單克隆抗鼠誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（inos）、誘導(dǎo)型環(huán)氧化酶（cox-2）和3-硝基絡(luò)氨酸（3-nt），購(gòu)于美國(guó)cellsignalingtechnology公司；免疫組化試劑盒（sv0002）、免疫熒光試劑盒（sa1074），購(gòu)于博士德生物技術(shù)有限公司；hoechst33258染色試劑盒（c0003），碧云天。pl303電子天平，上海梅特勒-托利多儀器有限公司；顯微鏡leicadm500和leicadm2500熒光顯微鏡，德國(guó)徠卡；德國(guó)spectrostarnano全波長(zhǎng)掃描式酶標(biāo)儀，德國(guó)bmglabtech公司；高速冷凍離心機(jī)，北京昊特斯科技有限公司。

方法

1.3.1藥物配制：稱取gfa，加cmc-na混懸至所需濃度（200mg/kg、400mg/kg）；稱取apap溶于熱的生理鹽水至所需濃度。

動(dòng)物分組及處理：icr小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后隨機(jī)分為4組，即空白對(duì)照組（normal）、模型組（apap）、gfa低劑量組（200mg/kg,apap+gfa）、gfa高劑量組（400mg/kg,apap+gfa），每組8只，gfa采用灌胃方式給藥，空白對(duì)照組和模型組以等量生理鹽水灌胃，一天一次，連續(xù)給藥7天。末次給藥后，禁食不禁水12小時(shí)后模型組按250mg/kg腹腔注射apap，造模12小時(shí)后禁食不禁水，斷頸處死。眼球取血，血液室溫凝結(jié)1h后以3000rpm/10min離心，留取上清供血清指標(biāo)alt和ast檢測(cè)。取肝臟組織溶于生理鹽水中制成肝勻漿用于檢測(cè)gsh和mda水平，取相同部位的肝組織固定于10%甲醛中，用于肝組織切片觀察病理變化。

計(jì)算免疫器官指數(shù)：稱取小鼠體質(zhì)量和肝臟、脾臟質(zhì)量，計(jì)算臟器指數(shù)。

肝臟（脾臟）指數(shù)=肝臟(脾臟)質(zhì)量/小鼠體質(zhì)量

1.3.4血清學(xué)指標(biāo)：依照南京建成生物有限技術(shù)公司提供的試劑盒說(shuō)明書，采用微板法檢測(cè)血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶（alt）和谷草轉(zhuǎn)氨酶（ast）肝功能指標(biāo)。

氧化應(yīng)激指標(biāo)：取凍存的肝組織，制備組織勻漿，取上清液，采用二硫代對(duì)硝基苯法和硫代巴比妥法試劑盒測(cè)定gsh和mda的含量，按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行操作。

染色：將肝組織固定于10%甲醛中，石蠟包埋切片，將切片放入二甲苯中脫蠟30min，再放入無(wú)水乙醇中30min，依次放入95%、70%、50%乙醇中3min水化，最后放入蒸餾水中5min，加入蘇木素，1min后流水沖洗反藍(lán)，返藍(lán)后依次放入50%、70%、95%乙醇中各3min，滴加伊紅，1min后放入無(wú)水乙醇，5min后放入二甲苯中保持30min，滴加樹脂，蓋玻片封片，光鏡下觀察肝組織切片的病理變化。

染色：取肝組織石蠟切片，脫蠟水化（與h&e相同）后，從蒸餾水中取出切片，用pbs緩沖液清洗兩次，每次3min，滴加hoechst33258染色劑，5min后用pbs洗兩次，每次3min，擦干后滴加抗熒光封片液，蓋上載玻片，熒光顯微鏡下觀察組織。顯微鏡下隨機(jī)選取3個(gè)高倍視野，計(jì)算陽(yáng)性肝細(xì)胞數(shù)和肝細(xì)胞總數(shù)。

肝細(xì)胞凋亡率=陽(yáng)性肝細(xì)胞數(shù)/肝細(xì)胞總數(shù)。

免疫組織化學(xué)染色：取肝組織石蠟切片，脫蠟水化（與h&e相同）后，從蒸餾水中取出切片，加入內(nèi)源性過(guò)氧化物酶37℃烘箱中保存30min，用蒸餾水洗3次，每次3min，放入抗原修復(fù)液中微波修復(fù)8min，恢復(fù)室溫后滴加5%bsa封閉液，保留10min后擦掉封閉液加入抗體inos（1:100）、cox-2（1:100），4℃孵育過(guò)夜。次日，恢復(fù)室溫后pbs沖洗三次，每次5min，擦干切片；滴加聚合hrp標(biāo)記抗兔igg置37℃烘箱保存1h，之后用pbs洗三次，每次5min；滴加dab1min，加入蘇木素1min后流水返藍(lán)，重復(fù)h&e染色返藍(lán)后過(guò)程，顯微鏡下觀察組織。

免疫熒光染色：取肝組織石蠟切片，脫蠟水化（與h&e相同）后，從蒸餾水中取出切片，放入抗原修復(fù)液中微波修復(fù)8min，恢復(fù)室溫后滴加血清封閉液，室溫放置20min，擦干后加入3-nt（1:200），4℃孵育過(guò)夜。次日，恢復(fù)室溫后pbs沖洗三次，每次5min，擦干切片，滴加生物素化羊抗兔igg置37℃烘箱保存30min，之后用pbs洗三次，每次5min，滴加cy3（試劑盒內(nèi)置）置37℃烘箱保存30min，之后用pbs洗三次，每次5min；滴加dab1min，之后用pbs洗三次，每次5min，擦干后用抗熒光猝滅pvb封片液封片，37℃烘箱保存30min，熒光顯微鏡下觀察。

統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用spss18.0軟件，單因素方差分析法（anova）進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，組間比較各項(xiàng)數(shù)據(jù)以mean±s.d.表示；ridit分析用于組織學(xué)檢查比較；采用graphpadprism6.0軟件進(jìn)行方差分析并作圖，p<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果

2.1gfa對(duì)apap誘導(dǎo)小鼠肝損傷臟器指數(shù)的影響

給藥7天后，gfa對(duì)小鼠臟器指數(shù)的影響見(jiàn)表1：與空白對(duì)照組相比，模型型組小鼠肝組織顏色加深且腫大，肝指數(shù)明顯增高（p<0.05）。預(yù)給藥7天后，花青素低、高劑量組均可明顯降低小鼠的肝指數(shù)（p<0.05）。此外，與空白組相比，小鼠的脾指數(shù)可以明顯下降（p<0.05），gfa兩個(gè)給藥組明顯抑制了脾指數(shù)的下降（p<0.05）。結(jié)果表明：gfa能夠改善apap致肝損傷小鼠肝腫脹，調(diào)節(jié)機(jī)體免疫。

表1.gfa對(duì)小鼠臟器指數(shù)的影響

注：與正常對(duì)照組相比^*p<0.05；與模型組相比^#p<0.05

2.2gfa對(duì)apap誘導(dǎo)小鼠血清指標(biāo)的影響

alt和ast是肝損傷的主要酶標(biāo)記物，當(dāng)肝細(xì)胞受到損傷時(shí)，這些標(biāo)記物會(huì)從肝臟滲漏到血液中從而導(dǎo)致二者血清濃度急劇升高。如表2所示，空白對(duì)照組比較，模型組小鼠血清中alt和ast的水平顯著升高（p<0.05），gfa低、高劑量組能夠明顯抑制了血清中alt和ast水平的升高且存在一定的劑量效應(yīng)關(guān)系（p<0.05）。肝臟受損時(shí)給藥組與模型組相比血漿中alt、ast水平的降低說(shuō)明人參果花青素具有較好的保護(hù)肝臟受損的作用。

表2.人參果花青素對(duì)小鼠血清中alt和ast的影響

注：與正常對(duì)照組相比^*p<0.05；與模型組相比^#p<0.05

2.3gfa對(duì)小鼠肝臟中g(shù)sh和mda的影響

如表3所示，與空白組比較，肝損傷模型組小鼠肝組織勻漿中的gsh水平明顯低于空白組（p<0.05），給藥組顯著地抑制了gsh水平的降低。mda水平顯示組織的脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物的多少，直接說(shuō)明細(xì)胞受損程度；與空白組比較模型組的mda含量明顯高于空白組（p<0.05），gfa低、高給藥明顯抑制了肝組織中mda水平的升高。以上數(shù)據(jù)說(shuō)明gfa能夠提高肝組織抗氧化能力以及減緩apap對(duì)肝細(xì)胞產(chǎn)生的脂質(zhì)過(guò)氧化作用。

表3.gfa對(duì)小鼠勻漿中g(shù)sh和mda的影響

注：與正常對(duì)照組相比^*p<0.05；與模型組相比^#p<0.05

2.4gfa對(duì)小鼠肝組織病理變化影響

如表4所示，空白對(duì)照組小鼠肝組織細(xì)胞排列整齊且形態(tài)正常；apap模型組肝組織中央靜脈附近細(xì)胞大面積壞死，壞死處可見(jiàn)無(wú)核肝細(xì)胞殘?bào)w，肝竇擴(kuò)張充血，伴有部分細(xì)胞變性腫脹和細(xì)胞炎性浸潤(rùn)，部分凋亡細(xì)胞有明顯的點(diǎn)狀和灶狀壞死；給藥組細(xì)胞壞死程度減輕，炎性細(xì)胞浸潤(rùn)減輕，高劑量組細(xì)胞壞死顯著減輕，肝細(xì)胞排列比較規(guī)律。細(xì)胞壞死程度如表2所示，apap模型組損傷壞死較嚴(yán)重即模型成功，由此可直接反映出gfa低、高劑量組對(duì)緩解肝組織損傷均有一定的作用，圖略。

表4小鼠肝組織壞死評(píng)分結(jié)果

codeofpoint(n=8):level0calculated0mark;levelicalculated1mark;leveliicalculated2marks;leveliiicalculated3marks;levelivcalculated4marks；valuesareexpressedasthemean±s.d,n=8.*p<0.05vsnormalgroup;^#p<0.05vsapapgroup

2.5gfa對(duì)小鼠肝組織細(xì)胞凋亡的影響

凋亡細(xì)胞通過(guò)hoechst33258染色后細(xì)胞呈陽(yáng)性表達(dá)，空白對(duì)照組肝細(xì)胞排列整齊且細(xì)胞核清晰清晰可見(jiàn)，幾乎沒(méi)有藍(lán)色熒光細(xì)胞；模型組中央靜脈附近細(xì)胞大面積壞死，細(xì)胞核固縮，有大面積藍(lán)色細(xì)胞核且熒光較強(qiáng)；給藥組壞死面積減小，高劑量組損傷顯著緩解。推測(cè)gfa對(duì)抗apap肝損傷的保護(hù)作用可能是通過(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡實(shí)現(xiàn)的，圖略。

對(duì)小鼠肝組織cox-2和inos蛋白表達(dá)的影響

空白組小鼠細(xì)胞結(jié)構(gòu)正常，cox-2主要在胞漿中表達(dá)，模型組小鼠中央靜脈附近呈陽(yáng)性表達(dá)，細(xì)胞核排列雜亂，部分無(wú)完整細(xì)胞結(jié)構(gòu)；給藥劑量組呈現(xiàn)不同程度陽(yáng)性表達(dá)，其中高劑量組較低劑量組細(xì)胞形態(tài)健康整齊且陽(yáng)性表達(dá)較少。inos主要在細(xì)胞的細(xì)胞核上陽(yáng)性表達(dá)，模型組細(xì)胞核排列紊亂陽(yáng)性表達(dá)非常明顯，細(xì)胞結(jié)構(gòu)損傷嚴(yán)重，低劑量組細(xì)胞核陽(yáng)性表達(dá)明顯減少，高劑量組表達(dá)情況基本與對(duì)照組小鼠相同。cox-2與inos在受到炎性因子刺激的時(shí)候呈高表達(dá)狀態(tài)，推測(cè)gfa可能有抗炎癥作用，圖略。

對(duì)小鼠肝組織3-nt蛋白表達(dá)的影響

肝組織內(nèi)的活性氮族與活性氧族發(fā)生作用使蛋白質(zhì)中的酪氨酸硝化成3-硝基絡(luò)氨酸（3-nt），引起細(xì)胞壞死或者凋亡。細(xì)胞核經(jīng)dapi染色后表現(xiàn)為藍(lán)色亮點(diǎn)，3-nt細(xì)胞陽(yáng)性表達(dá)為紅色熒光亮點(diǎn)，空白對(duì)照組小鼠肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)排列整齊中央靜脈清晰可見(jiàn)且無(wú)熒光表達(dá)；apap組小鼠中央靜脈附近大面積熒光表達(dá)明顯，細(xì)胞嚴(yán)重?fù)p傷；給藥低高劑量組陽(yáng)性表達(dá)明顯減少，根據(jù)光密度軟件分析顯示，gfa低高劑量組3-nt表達(dá)率分別減少35%和42%。該結(jié)果顯示gfa保護(hù)肝損傷可能是抑制硝化應(yīng)激而實(shí)現(xiàn)的，圖略。

討論

研究結(jié)果顯示，250mg/kg的apap誘導(dǎo)小鼠血清中ast和alt水平顯著升高，肝組織中g(shù)sh水平的降低和mda水平的升高，模型組肝細(xì)胞腫脹，排列疏松，細(xì)胞核部分消失或壞死，說(shuō)明造模成功；gfa給藥組與模型組相比血清中ast、alt水平升高，肝組織中g(shù)sh升高和mda水平降低，結(jié)果顯示人參果花青素可以緩解對(duì)乙酰氨基酚造成的肝損傷。

肝組織損傷時(shí)，細(xì)胞中大量產(chǎn)生napqi與gsh結(jié)合，導(dǎo)致gsh含量下降，細(xì)胞中超氧負(fù)離子歧化作用導(dǎo)致大量活性氧生成，對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生氧化應(yīng)激作用。結(jié)果表明：gfa給藥組中g(shù)sh含量升高，mda含量降低，說(shuō)明gfa緩解了氧化應(yīng)激而發(fā)揮保護(hù)作用。正常肝組織細(xì)胞中幾乎炎癥因子inos無(wú)表達(dá)，肝組織受損時(shí)組織中大量表達(dá)的inos催化產(chǎn)生的no與大量的活性氧反應(yīng)產(chǎn)生的氧化亞硝酸鹽進(jìn)而與酪氨酸反應(yīng)生成硝基酪氨酸。從免疫熒光結(jié)果可以看出gfa給藥組3-nt陽(yáng)性表達(dá)明顯減少，推測(cè)這與gfa能夠抑制炎癥因子表達(dá)、減緩硝化應(yīng)激作用有關(guān)。除此之外，h&e和hoechst33258染色結(jié)果顯示模型組肝細(xì)胞壞死、腫脹，部分細(xì)胞發(fā)生炎性浸潤(rùn)，說(shuō)明gfa具有抗凋亡作用。

目前對(duì)gfa的活性研究報(bào)道相對(duì)較少，本實(shí)驗(yàn)首次證明gfa對(duì)apap誘導(dǎo)肝損傷具有保護(hù)作用，其可能的機(jī)制包括抑制氧化應(yīng)激和硝化應(yīng)激，減少炎癥反應(yīng)及抑制細(xì)胞凋亡，為gfa的深入研究及臨床應(yīng)用提供一定的理論依據(jù)。

實(shí)施例藥物的實(shí)施例

制備藥劑的實(shí)施例一

膠囊劑的制備200g人參果花青素，藥用淀粉適量，兩者充分混勻，裝膠囊，制成1000粒膠囊，每粒重0.25g，每粒人參果花青素200mg。口服，每次4粒，每日三次。

制備藥劑的實(shí)施例二

片劑的制備200g人參果花青素，藥用淀粉適量，兩者充分混勻，用乙醇做粘合劑制濕顆粒，干燥，過(guò)120目篩整粒，裝膠囊，每粒200mg，每次口服1-2粒，每日2次。

制備藥劑的實(shí)施例三

滴丸劑的制備聚乙二醇4000300g，在水浴上熔化，加入人參果花青素原料200g，攪拌均勻，傾入保溫管中，調(diào)節(jié)恒溫裝置，使藥液在80-90℃下滴入冷卻過(guò)的液體石蠟中（溫度±4℃），滴完后，將藥丸傾入濾紙上吸干石蠟油，再加入少量滑石粉，混勻，得人參果花青素滴丸1000粒?？诜淮?粒，每日三次，飯后服用。

以上根據(jù)上述實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明的人參果花青素在制備預(yù)防急性肝損傷藥物的應(yīng)用進(jìn)行了說(shuō)明，但本發(fā)明并不限于上述實(shí)施方式，在不脫離其要旨的范圍內(nèi)，可在各種方式中實(shí)施本發(fā)明。除了上述實(shí)施方式之外，其它等同技術(shù)方案也應(yīng)當(dāng)在其保護(hù)范圍之內(nèi)，在此不再一一敘述。

實(shí)施例藥物的實(shí)施例

制備藥劑的實(shí)施例一

膠囊劑的制備200g人參果花青素，藥用淀粉適量，兩者充分混勻，裝膠囊，制成1000粒膠囊，每粒重0.25g，每粒人參果花青素200mg。口服，每次4粒，每日三次。

制備藥劑的實(shí)施例二

片劑的制備200g人參果花青素，藥用淀粉適量，兩者充分混勻，用乙醇做粘合劑制濕顆粒，干燥，過(guò)120目篩整粒，裝膠囊，每粒200mg，每次口服1-2粒，每日2次。

制備藥劑的實(shí)施例三

滴丸劑的制備聚乙二醇4000300g，在水浴上熔化，加入人參果花青素原料200g，攪拌均勻，傾入保溫管中，調(diào)節(jié)恒溫裝置，使藥液在80-90℃下滴入冷卻過(guò)的液體石蠟中（溫度±4℃），滴完后，將藥丸傾入濾紙上吸干石蠟油，再加入少量滑石粉，混勻，得人參果花青素滴丸1000粒。口服，一次4粒，每日三次，飯后服用。

以上根據(jù)上述實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明的人參果花青素在制備預(yù)防急性肝損傷藥物的應(yīng)用進(jìn)行了說(shuō)明，但本發(fā)明并不限于上述實(shí)施方式，在不脫離其要旨的范圍內(nèi)，可在各種方式中實(shí)施本發(fā)明。除了上述實(shí)施方式之外，其它等同技術(shù)方案也應(yīng)當(dāng)在其保護(hù)范圍之內(nèi)，在此不再一一敘述。