本發(fā)明屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及補(bǔ)肺活血膠囊用于治療和/或預(yù)防慢性阻塞性肺疾病藥物的用途及其制備方法。

背景技術(shù)：
祖國(guó)醫(yī)學(xué)沒(méi)有慢性阻塞性肺疾病專用的病名記載，根據(jù)其臨床表現(xiàn)，現(xiàn)代學(xué)者多將其納入“肺脹”、“內(nèi)傷咳嗽”、“喘證”、痰飲”等范疇?！秲?nèi)經(jīng)五臟生成篇》云“諸氣者，皆歸于肺”；《靈樞脹論》說(shuō)“肺脹者，虛滿而喘咳”；《靈樞經(jīng)脈》又說(shuō)肺手太陰之脈……是動(dòng)則病肺脹滿，膨膨而喘咳”。明確指出了本病的病位和主要臨床癥狀。清代沈金鰲《雜病源流犀燭·咳嗽哮喘源流》云：“肺不傷不咳，脾不傷不久咳，腎不傷火不熾，咳不甚，其大較也……”?！额愖C治裁喘證》亦云：肺為氣之主，腎為氣之根，肺主出氣，腎主納氣，陰陽(yáng)相交，呼吸乃和”。提出咳喘不僅局哏于肺，隨著疾病病程的進(jìn)展也與脾、腎有著密切的聯(lián)系，肺、脾、腎三臟功能協(xié)調(diào)是保證呼吸調(diào)勻的關(guān)鍵?，F(xiàn)代學(xué)者多認(rèn)為本病的病機(jī)多屬本虛標(biāo)實(shí)。急性發(fā)作期主要是以標(biāo)實(shí)為主，多見(jiàn)痰油、血疾、熱毒等。緩解期主要是以肺脾腎三臟虛損為特點(diǎn)，早期表現(xiàn)為外邪侵襲、首先犯肺致肺氣虛損，易感外邪，致病情反復(fù)發(fā)作，遷延不愈。周仲琪認(rèn)為，其病因主要為嗜煙或反復(fù)感受外邪，煙毒或六淫之邪犯肺，易致肺氣虛損，布津失職，蘊(yùn)津成痰，內(nèi)阻于肺，氣失肅降。薛漢榮認(rèn)為，氣陽(yáng)之虛和痰擦之實(shí)貫穿于本病始終。二者相互并存、相互影響。氣陽(yáng)虛衰是關(guān)鍵，是內(nèi)在發(fā)病因素，與宿根“痰瘀伏肺”相關(guān)。劉忠義等認(rèn)為，發(fā)作期病位在肺，以痰氣交阻、氣機(jī)壅塞、行滯濕、痰?；ソY(jié)為主要病機(jī)，肺病日久。損傷脾、腎，導(dǎo)致肺、脾、腎俱虛，從而加重痰濁內(nèi)生，壅塞氣道，氣滯血疾，痰疾互結(jié)。針對(duì)呼吸系統(tǒng)疾病，強(qiáng)調(diào)“正氣存內(nèi)，邪不可干”，考慮通過(guò)補(bǔ)益肺氣可增強(qiáng)機(jī)體抵御外邪的能力，防止外邪入侵、并阻止疾病傳變。鑒此，臨床迫切需要療效明確、毒副作用小、服用方便且藥物易于儲(chǔ)存的可用于治療和/或預(yù)防慢性阻塞性肺疾病的藥物，以滿足市場(chǎng)和患者之需。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明旨在提供補(bǔ)肺活血膠囊用于制備治療和/或預(yù)防慢性阻塞性疾病的藥物的用途，該中藥組合物選用藥材配伍相宜，符合中醫(yī)藥及現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究理論，藥效好且毒副作用低。為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：補(bǔ)肺活血膠囊用于制備治療和/或預(yù)防慢性阻塞性肺疾病的藥物的用途，所述的補(bǔ)肺活血膠囊主要由黃芪、赤芍和補(bǔ)骨脂組成，所述的補(bǔ)肺活血膠囊的制備方法為：(1)將黃芪切片、赤芍和補(bǔ)骨脂粉碎成粗粉，加入60-70％的乙醇浸潤(rùn)24h，之后以1ml/min速度滲漉速度提取，收集10倍量的滲漉液，減壓濃縮至1.30～1.40的流浸膏，并真空干燥得干膏，粉碎；(2)加1.0～2.0倍重量份的淀粉，混勻，90％乙醇制粒，干燥，加入不超過(guò)5％的滑石粉和0.1％-2％的硬脂酸鎂，混勻，裝入膠囊，即得。優(yōu)選的，黃芪為50～100份(重量)、赤芍為50～100份(重量)、補(bǔ)骨脂為25～50份(重量)。更優(yōu)選的，黃芪為72份(重量)、赤芍為72份(重量)、補(bǔ)骨脂為36份(重量)。補(bǔ)肺活血膠囊用于制備治療和/或預(yù)防慢性阻塞性肺疾病的藥物的用途，所述的補(bǔ)肺活血膠囊含有重量百分比的下列活性物質(zhì)：≥1.8％的黃芪甲苷、≥2％的毛蕊異黃酮和毛蕊異黃酮葡萄糖苷、≥2.5％的芍藥苷和≥0.62％的補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素。補(bǔ)肺活血膠囊用于制備治療和/或預(yù)防慢性阻塞性肺疾病的藥物的用途，所述的補(bǔ)肺活血膠囊降低呼吸系統(tǒng)阻力和主氣道阻力，升高呼吸系統(tǒng)彈力和呼吸系統(tǒng)順應(yīng)性。補(bǔ)肺活血膠囊用于制備治療和/或預(yù)防慢性阻塞性肺疾病的藥物的用途，所述的補(bǔ)肺活血膠囊降低肺組織分泌型免疫球蛋白和TNF-α的分泌。補(bǔ)肺活血膠囊用于制備治療和/或預(yù)防慢性阻塞性肺疾病的藥物的用途，所述的補(bǔ)肺活血膠囊降低肺組織免疫球蛋白和肺組織角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子的含量。本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)：(1)本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊選用優(yōu)質(zhì)中藥材制成，成本低廉且配伍相宜，符合中醫(yī)藥及現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究理論，并利用現(xiàn)代醫(yī)藥制藥技術(shù)制成相關(guān)劑型，安全毒副作用低。(2)在COPD小鼠模型中，本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊與模型對(duì)照組相比，可明顯降低呼吸系統(tǒng)阻力及主氣道阻力，明顯升高呼吸系統(tǒng)彈力和呼吸系統(tǒng)順應(yīng)性，可顯著降低小鼠血清分泌型免疫球蛋白(sIga)和TNF-α的分泌，可顯著降低小鼠肺組織中免疫球蛋白(Iga)和肺組織角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子(KGF)的含量，使COPD模型小鼠肺組織形態(tài)學(xué)改變有所改善。(3)在COPD小鼠模型中，本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊對(duì)照藥組相比，可明顯降低呼吸系統(tǒng)阻力及主氣道阻力，明顯升高呼吸系統(tǒng)彈力和呼吸系統(tǒng)順應(yīng)性，可明顯降低小鼠血清血清分泌型免疫球蛋白(sIga)和TNF-α的分泌，可明顯降低小鼠肺組織中免疫球蛋白(Iga)和肺組織角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子(KGF)的含量。(4)本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊采用滲漉法提取，制備工藝簡(jiǎn)單易操作，活性物質(zhì)黃芪甲苷、毛蕊異黃酮和毛蕊異黃酮葡萄糖苷、芍藥苷和補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素的含量高，明顯高于對(duì)照組合物。(5)本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊制備簡(jiǎn)單，易于臨床應(yīng)用。(6)本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊對(duì)活性物質(zhì)黃芪甲苷、毛蕊異黃酮和毛蕊異黃酮葡萄糖苷、芍藥苷和補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素的含量進(jìn)行限定，質(zhì)量更為可控。附圖說(shuō)明圖1為COPD模型小鼠肺組織形態(tài)學(xué)。具體實(shí)施方式以下通過(guò)實(shí)施例形式的具體實(shí)施方式，對(duì)本發(fā)明的上述內(nèi)容作進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下實(shí)施例。實(shí)施例1本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊的原料配方組合物1：黃芪500g，赤芍1000g，補(bǔ)骨脂360g。組合物2：黃芪1000g，赤芍500g，補(bǔ)骨脂250g。組合物3：黃芪720g，赤芍720g，補(bǔ)骨脂360g。實(shí)施例2本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊的提取物的制備及活性物質(zhì)的含量稱取實(shí)施例1中的3組組合物的原料配方，將黃芪切片、赤芍和補(bǔ)骨脂粉碎成粗粉，加入60-70％的乙醇浸潤(rùn)24h，之后以1ml/min速度滲漉速度提取，收集10倍量的滲漉液，減壓濃縮至1.30～1.40的流浸膏，并真空干燥得干膏，粉碎。所述補(bǔ)肺活血膠囊提取物中含有下列活性物質(zhì)：黃芪甲苷、芍藥苷、補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素，結(jié)果見(jiàn)表1，測(cè)定方法依照《中國(guó)藥典》(2015版)第一部的方法。毛蕊異黃酮和毛蕊異黃酮葡萄糖苷的含量測(cè)定方法如下：(1)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以0.3％甲酸水溶液為流動(dòng)相A，乙腈為流動(dòng)相B，按下表中的規(guī)定進(jìn)行梯度洗脫；檢測(cè)波長(zhǎng)為260nm。時(shí)間(分鐘)流動(dòng)相A(％)流動(dòng)相B(％)0～1280～6320～3712～1663～6037～4016～2260～5040～5022～2850～050～100(2)對(duì)照品溶液的制備：取毛蕊異黃酮和毛蕊異黃酮葡萄糖苷適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，即得。(3)供試品溶液的制備：取制得的提取物適量，精密稱定，置圓底燒瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，加熱回流4小時(shí)，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)液25ml，回收溶劑至干，殘?jiān)蛹状既芙?，轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。。(4)測(cè)定法：分別精密稱取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。表1本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊活性物質(zhì)含量對(duì)照組合物制備方法：黃芪720g，赤芍720g，補(bǔ)骨脂360g，取赤芍180g粉碎成細(xì)粉，備用；其余藥味加水煎煮二次，第一次加8倍量水，第二次加6倍量水，每次1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.05～1.15(80℃)，加乙醇使含醇量達(dá)60％，充分?jǐn)嚢瑁o置24小時(shí)，濾取上清液，回收乙醇至無(wú)醇味，繼續(xù)濃縮至相對(duì)密度為1.35～1.40(80℃)，加入上述赤芍細(xì)粉，混勻，干燥，粉碎。表2對(duì)照組合物活性物質(zhì)含量實(shí)施例3本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊劑的制備根據(jù)實(shí)施例2的制備方法制得的提取物，加1.0～2.0倍重量份的淀粉，混勻，90％乙醇制粒，干燥，加入不超過(guò)5％的滑石粉和0.1％-2％的硬脂酸鎂，混勻，裝入膠囊，制成1000粒，即得。實(shí)施例4本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊對(duì)COPD小鼠模型的影響動(dòng)物：試驗(yàn)用動(dòng)物為SPF級(jí)健康ICR雌性小鼠40只，體重18-20g。在溫度22℃-28℃，適應(yīng)性飼養(yǎng)1周，隨機(jī)分為4組，即空白對(duì)照組、模型對(duì)照組、對(duì)照藥組(實(shí)施例2中的對(duì)照組合物)和本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊組(實(shí)施例1的組合物3)，每組10只。藥物：對(duì)照藥組和本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊組，根據(jù)其成人用量，配成0.41g生藥/ml，灌胃給藥。小鼠模型建立與藥物干預(yù)：采用鼻腔滴入脂多糖(LPS)加熏香煙的方法建立COPD小鼠動(dòng)物模型。模型對(duì)照組、對(duì)照藥組和本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊組分別于第1、29和57天經(jīng)鼻腔滴入LPS(30ug/6uL)，第2-84天(除第29、57天)采取熏香煙法，將小鼠放入自制的玻璃熏香，10支/次，30min/次，5d/周，共12周；空白對(duì)照組分別于第1、29和57天經(jīng)鼻腔滴入相同量的0.9％氯化鈉溶液，其余時(shí)間正常飼養(yǎng)。對(duì)照藥組和本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊組于第13周開(kāi)始每只0.2ml/d灌胃，空白對(duì)照組和模型對(duì)照組以同樣方法予0.9％氯化鈉溶液灌胃，共4周。肺組織形態(tài)學(xué)標(biāo)本采集及處理：脫頸處死小鼠(10只/組)，開(kāi)胸暴露胸腔，取左側(cè)肺葉固定于10％甲醛溶液24h，常規(guī)脫水石蠟包埋，切片備用。試驗(yàn)結(jié)果及分析：1、一般情況空白對(duì)照組小鼠無(wú)死亡，毛發(fā)光澤，呼吸均勻，活動(dòng)正常；COPD模型小鼠死亡2只，毛發(fā)無(wú)光澤，部分有脫毛現(xiàn)象，躁動(dòng)，熏煙時(shí)喜扎堆，倦怠蜷縮，汗出，腹部脹大，呼吸急促，出現(xiàn)點(diǎn)頭運(yùn)動(dòng)，甚者張口呼吸明顯。對(duì)照藥組死亡3只，造模時(shí)一般情況同COPD模型組，灌服對(duì)照藥后與模型組相比毛發(fā)較有光澤，躁動(dòng)程度減輕，呼吸較均勻。本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊組死亡1只，造模時(shí)一般情況同COPD模型組，灌服本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊后與模型組相比毛發(fā)有光澤，躁動(dòng)程度明顯減輕，呼吸均勻。2、對(duì)COPD模型小鼠肺功能的影響表3本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊對(duì)COPD模型小鼠肺功能的影響注：不同組別小鼠肺功能分析，表達(dá)量分析用表示，*表示與模型組相比P<0.05；#表示與對(duì)照藥組相比P<0.05。肺功能結(jié)果提示經(jīng)熏煙和LPS干預(yù)后小鼠肺組織功能明顯改變，呼吸系統(tǒng)阻力及主氣道阻力較正常小鼠明顯增大(P＜0.05)，呼吸系統(tǒng)彈力及呼吸系統(tǒng)順應(yīng)性較正常小鼠明顯減弱(P＜0.05)；經(jīng)本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊干預(yù)后呼吸系統(tǒng)阻力及主氣道阻力較模型組明顯降低(P＜0.05)，而呼吸系統(tǒng)彈力及呼吸系統(tǒng)順應(yīng)性較模型組小鼠顯著升高(P＜0.05)；本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊組與對(duì)照藥組相比，呼吸系統(tǒng)阻力及主氣道阻力較模型組明顯降低(P＜0.05)，而呼吸系統(tǒng)彈力及呼吸系統(tǒng)順應(yīng)性較模型組小鼠明顯升高(P＜0.05)?？紤]通過(guò)本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊干預(yù)后COPD模型小鼠肺組織彈性及肺功能有明顯好轉(zhuǎn)，藥效好于對(duì)照藥組。3、本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊對(duì)COPD模型小鼠肺組織形態(tài)學(xué)影響空白對(duì)照組小鼠肺泡結(jié)構(gòu)清晰，肺泡大小均勻，氣道黏膜上皮結(jié)構(gòu)完整，纖毛排列整齊(圖1-A)；模型對(duì)照組小鼠部分肺泡壁塌陷，肺泡不規(guī)則擴(kuò)大并相互融合，形成肺大泡，肺間質(zhì)內(nèi)可見(jiàn)不同程度的炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，支氣管黏膜上皮脫落，黏膜皺襞增多，突入管腔，纖毛黏縮，管腔變窄(圖1-B)，符合COPD病理改變；本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊組小鼠肺組織仍存在肺大泡形成，肺組織及氣道炎性細(xì)胞浸潤(rùn)相對(duì)減少，氣道纖毛排列整齊，少量纖毛脫落，本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊組使COPD模型小鼠肺組織形態(tài)學(xué)改變有所改善(圖1-C)。圖1：小鼠肺組織切片HE染色。A為空白對(duì)照組，A1(×200)可見(jiàn)小鼠肺泡結(jié)構(gòu)清晰，大小均勻，A2(×400)氣道黏膜上皮結(jié)構(gòu)完整，纖毛排列整齊；B為模型對(duì)照組，B1(×200)可見(jiàn)小鼠肺泡腔不規(guī)則擴(kuò)大，并相互融合，形成肺大泡，B2(×400)肺間質(zhì)內(nèi)可見(jiàn)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，支氣管黏膜皺襞增多，突入管腔，管腔變窄；C為固本止咳中藥組，C1(×200)可見(jiàn)仍有肺大泡存在，但肺組織及氣道炎性細(xì)胞浸潤(rùn)相對(duì)減少，C2(×400)氣道纖毛排列整齊，少量纖毛脫落。4、本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊對(duì)COPD模型小鼠肺組織相關(guān)炎性介質(zhì)含量的ELISA檢測(cè)模型對(duì)照組BALF較空白對(duì)照組分泌型免疫球蛋白(sIgA)顯著性降低(P<0.01)；本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊組較模型對(duì)照組sIgA分泌量顯著性增高(P<0.01)；本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊組較對(duì)照藥組sIgA分泌量明顯增高(P<0.05)；本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊組sIgA低于空白組(P＜0.01)。表明COPD小鼠氣道黏膜sIgA含量減少，sIgA通過(guò)中和或防止病毒、細(xì)菌和毒素吸附從而對(duì)粘膜表面進(jìn)行保護(hù)，同時(shí)sIgA可以阻止病原微生物在黏膜上皮層停留繁殖，禁止它們進(jìn)入上皮層，經(jīng)本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊治療后可改善氣道黏膜sIgA分泌量，減輕小鼠氣道感染狀態(tài)，延緩COPD疾病進(jìn)程。由于本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊組小鼠仍存在COPD炎性損傷，故sIgA指標(biāo)仍低于正常小鼠。結(jié)果顯示模型組小鼠血清TNF-α顯著高于空白對(duì)照組(P＜0.01)，且模型組小鼠血清TNF-α顯著高于本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊組(P＜0.01)，本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊組小鼠血清TNF-α明顯低于對(duì)照藥組(P＜0.05)，本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊組小鼠血清TNF-α略高于空白組，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。COPD模型小鼠血清TNF-α顯著高于空白組，說(shuō)明COPD小鼠肺部炎癥反應(yīng)增多，炎性介質(zhì)TNF-α的表達(dá)升高，從而促進(jìn)炎性細(xì)胞聚集及炎性介質(zhì)的釋放，加重呼吸系統(tǒng)的炎性損傷。本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊組小鼠血清TNF-α明顯低于COPD模型組，說(shuō)明本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊組能夠有效降低TNF-α的分泌，降低其炎性誘導(dǎo)作用，減少炎性細(xì)胞聚集，從而有效減輕呼吸系統(tǒng)的炎癥反應(yīng)，改善肺損傷。表4ELISA檢測(cè)小鼠肺泡灌洗液中sIgA及血清中TNF-α注：以上相關(guān)定量分析用表示，**表示與模型組相比P<0.01，n＝10；#表示與模型組相比P<0.05，n＝10。5、本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊對(duì)COPD模型小鼠肺組織相關(guān)因子的PCR檢測(cè)模型對(duì)照組較空白對(duì)照組免疫球蛋白(IgA)顯著性升高(P<0.01)；本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊組較模型對(duì)照組IgA分泌量顯著性降低(P<0.01)；本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊組較對(duì)照藥組IgA分泌量明顯降低(P<0.05)；本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊組IgA高于空白對(duì)照組(P<0.01)。表明COPD小鼠氣道黏膜IgA含量增高，存在氣道炎癥，經(jīng)本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊治療后可改善氣道黏膜IgA分泌量，減輕小鼠氣道炎癥狀態(tài)。由于本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊小鼠仍存在COPD炎性損傷，故IgA指標(biāo)仍高于正常小鼠。模型組較空白組小鼠肺組織中肺組織角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子(KGF)含量顯著上升(P<0.01)；本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊組較模型組小鼠肺組織中KGF含量顯著減少(P<0.01)；本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊組較對(duì)照藥組小鼠肺組織中KGF含量明顯減少(P<0.05)；本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊KGF含量顯著高于空白組(P<0.01)。在肺組織受損后KGF能刺激上皮細(xì)胞在增殖，修復(fù)損傷的黏膜組織，因此本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊可減少COPD對(duì)肺組織的損害。由于本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊小鼠仍存在肺部炎性損害，故KGF指標(biāo)仍高于正常小鼠。表5PCR檢測(cè)小鼠肺組織中IgA及KGF注：KGF和IgA在不同組別小鼠肺組織中的表達(dá)。KGF和IgA在小鼠中的表達(dá)量分析用表示，**表示與模型組相比P<0.01，n＝10，#表示與模型組相比P<0.05，n＝10。空白對(duì)照組與模型組相比KGF和IgA的表達(dá)明顯降低，本發(fā)明補(bǔ)肺活血膠囊干預(yù)組炎性介質(zhì)含量顯著低于模型組，且明顯低于對(duì)照藥組。