本發(fā)明屬于微球制備方法領(lǐng)域，涉及一種包載碳酸氫鈉的微球及制備方法，具體涉及一種包載熱敏、水溶性小分子藥物例如碳酸氫鈉，并且具有緩釋作用的微球及其制備方法。

背景技術(shù)：

熱敏、水溶性小分子藥物的緩釋是藥劑學(xué)中的一個(gè)難題。水難溶性材料微球常用于包封水溶性藥物，以實(shí)現(xiàn)水溶性藥物的緩慢釋放。利用噴霧干燥法制備微球，操作簡單且經(jīng)濟(jì)實(shí)惠(G.F.Palmieri,G.Bonacucina,P.Di Martino and S.Martelli,DRUG DEV IND PHARM,2001,27,195-204.)，但是在微球的制備過程中，需要在高溫環(huán)境下?lián)]發(fā)含有微球材料與藥物的溶劑，所以它不適用于那些熱敏性藥物。因此，乳化溶劑蒸發(fā)法被廣泛用于熱敏性藥物的包載，因?yàn)樗闹苽溥^程能在常溫下進(jìn)行(T.Niwa,H.Takeuchi,T.Hino,N.Kunou and Y.Kawashima,J Pharm Sci,1994,83,727-732.)。傳統(tǒng)的乳化溶劑揮發(fā)法為：制備水包油(O/W)的乳劑，然后揮發(fā)內(nèi)油相溶劑，使溶解在內(nèi)油相中的微球材料析出，形成微球。在制備過程中，水溶性的小分子藥物可能會擴(kuò)散到外水相中，造成所制得的微球載藥量較低，并且難以實(shí)現(xiàn)藥物的緩釋。因此，將外水相替換成一種有機(jī)溶劑，制備油包油(O/O)的乳劑，更有利于水溶性小分子藥物的包載。因?yàn)樗苄缘男》肿铀幬镌谕庥拖嘀腥芙庑暂^低，藥物不易擴(kuò)散至外油相，所得微球能有更高的載藥量和更好的緩釋效果。在此基礎(chǔ)上，有學(xué)者將藥物以顆粒的形態(tài)分散到含有微球材料的內(nèi)油相中，再將內(nèi)油相分散到與之不溶的有機(jī)溶劑中，構(gòu)建油包油包固體(S/O/O)的乳劑，然后揮發(fā)內(nèi)油相溶劑，形成微球(Q.Lin,Y.Cai,M.Yuan,L.Ma,M.Qiu and J.Su,ONCOL REP,2014,32,2405-2410.)。由于藥物以顆粒的形態(tài)包埋于微球中，所得的微球有很好的緩釋效果。

在微球的制備中，乙基纖維素由于其熱穩(wěn)定性、水不溶性，價(jià)格低廉，可塑形性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，被廣泛用作微球材料以實(shí)現(xiàn)藥物的緩慢釋放(W.J.Lin and T.L.Wu,J MICROENCAPSUL,1999,16,639-646；X.W.Li and T.F.Yang,KOREAN J CHEM ENG,2008,25,1201-1204.)。碳酸氫鈉能中和腫瘤部位的乳酸，增強(qiáng)抗腫瘤的療效(M.Chao,H.Wu,K.Jin,B.Li,J.Wu,G.Zhang,G.Yang and X.Hu,ELIFE,2016,5.)。但是碳酸氫鈉有很高的水溶性，20℃時(shí)溶解度為9.7g/100mL，并且?guī)缀醪蝗苡谟袡C(jī)溶劑，此外，碳酸氫鈉受熱易分解，是一種熱敏、水溶性小分子化合物。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是提供一種包載碳酸氫鈉的微球，是一種包載熱敏、水溶性小分子藥物例如碳酸氫鈉的微球，主要由碳酸氫鈉、乙基纖維素組成，各組分質(zhì)量百分比如下：碳酸氫鈉1.42％-2.93％，乙基纖維素97.07％-98.58％。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供所述的包載碳酸氫鈉的微球的制備方法，通過以下制備步驟實(shí)現(xiàn)：

(1)將碳酸氫鈉充分溶解于去離子水中，制得碳酸氫鈉水溶液；

(2)將乙基纖維素和穩(wěn)定劑分散于乙腈中，水浴超聲溶解，制得乙基纖維素溶液；穩(wěn)定劑選用吐溫20、吐溫60、吐溫80、普朗尼克F-68或PEG400中的一種；

(3)將上述碳酸氫鈉水溶液注入到快速攪拌的乙基纖維素溶液中，制備得到碳酸氫鈉混懸液，碳酸氫鈉混懸液進(jìn)一步進(jìn)行探頭超聲，制得內(nèi)油相；

(4)將上述內(nèi)油相加入到快速攪拌的含有司班80的大豆油中，形成S/O/O乳液，繼續(xù)攪拌至乙腈揮發(fā)完全；

(5)將上述乳液離心，去上清液，收集微球，微球用正己烷洗滌3遍，洗去殘余的大豆油，司班80及穩(wěn)定劑，然后自然干燥。

本發(fā)明采用乙基纖維素微球包載碳酸氫鈉，可實(shí)現(xiàn)碳酸氫鈉的緩慢釋放。

本發(fā)明采用新型S/O/O乳化溶劑揮發(fā)法制備包載碳酸氫鈉的乙基纖維素微球。在制備過程中，先將碳酸氫鈉水溶液分散于乙基纖維素的乙腈溶液中，制得內(nèi)油相(S/O)，然后將內(nèi)油相注入到含有司班80的大豆油中，形成S/O/O的乳液，然后揮發(fā)乙腈，內(nèi)油相中的乙基纖維素析出形成微球。所得包載碳酸氫鈉的乙基纖維素微球，水溶性的碳酸氫鈉微球是以納米顆粒的形式分散于乙基纖維素微球中，有利于水溶性碳酸氫鈉的包封和實(shí)現(xiàn)碳酸氫鈉的緩釋。

附圖說明

圖1是微球中碳酸氫鈉的體外釋放行為。

具體實(shí)施方式

本發(fā)明結(jié)合附圖和以下實(shí)施例予以解釋，這些實(shí)施例的目的只是為了解釋而不是以任何方式限制本發(fā)明。

實(shí)施例1包載碳酸氫鈉的微球的制備

(1)包載碳酸氫鈉的微球的處方如表一所示：

表一

(2)包載碳酸氫鈉的微球的制備

將碳酸氫鈉充分溶解于去離子水中，制得碳酸氫鈉水溶液。

將乙基纖維素分散于乙腈中，水浴超聲溶解，制得乙基纖維素溶液。

將上述碳酸氫鈉水溶液注入到快速攪拌的乙基纖維素溶液中，制備得到碳酸氫鈉混懸液，碳酸氫鈉混懸液進(jìn)一步進(jìn)行探頭超聲，制得內(nèi)油相。

將上述內(nèi)油相加入到快速攪拌的含有司班80的大豆油中，形成S/O/O乳液；在處方規(guī)定的溫度下，繼續(xù)攪拌至乙腈揮發(fā)完全。

將上述乳液離心，去上清液，收集微球。微球用正己烷洗滌3遍，洗去殘余的大豆油和司班80，然后自然干燥。

(3)回收率、載藥量和數(shù)均粒徑的測定

將收集到的微球稱重，測得回收率為89.8％。

取50mg微球，加二氯甲烷破壞，使包載的碳酸氫鈉游離，然后用去離子水萃取碳酸氫鈉，用酸堿滴定法測得微球的載藥量為1.42％。

通過掃描電子顯微鏡測得微球的數(shù)均粒徑為403μm。

實(shí)施例2包載碳酸氫鈉的微球的制備

(1)包載碳酸氫鈉的微球的處方如表二所示：

表二

(2)包載碳酸氫鈉的微球的制備

將碳酸氫鈉充分溶解于去離子水中，制得碳酸氫鈉水溶液。

將乙基纖維素和吐溫20分散于乙腈中，水浴超聲溶解，制得乙基纖維素溶液。

將上述碳酸氫鈉水溶液注入到快速攪拌的乙基纖維素溶液中，制備得到碳酸氫鈉混懸液，碳酸氫鈉混懸液進(jìn)一步進(jìn)行探頭超聲，制得內(nèi)油相。

將上述內(nèi)油相加入到快速攪拌的含有司班80的大豆油中，形成S/O/O乳液；在處方規(guī)定的溫度下，繼續(xù)攪拌至乙腈揮發(fā)完全。

將上述乳液離心，去上清液，收集微球。微球用正己烷洗滌3遍，洗去殘余的大豆油，司班80及吐溫20，然后自然干燥。

(3)回收率、載藥量和數(shù)均粒徑的測定

將收集到的微球稱重，測得回收率為72.0％。

取50mg微球，加二氯甲烷破壞，使包載的碳酸氫鈉游離，然后用去離子水萃取碳酸氫鈉，用酸堿滴定法測得微球的載藥量為1.46％。

通過掃描電子顯微鏡測得微球的數(shù)均粒徑為158μm。

實(shí)施例3包載碳酸氫鈉的微球的制備

(1)包載碳酸氫鈉的微球的處方如表三所示：

表三

(2)包載碳酸氫鈉的微球的制備

將碳酸氫鈉充分溶解于去離子水中，制得碳酸氫鈉水溶液。

將乙基纖維素和吐溫60分散于乙腈中，水浴超聲溶解，制得乙基纖維素溶液。

將上述碳酸氫鈉水溶液注入到快速攪拌的乙基纖維素溶液中，制備得到碳酸氫鈉混懸液，碳酸氫鈉混懸液進(jìn)一步進(jìn)行探頭超聲，制得內(nèi)油相。

將上述內(nèi)油相加入到快速攪拌的含有司班80的大豆油中，形成S/O/O乳液；在處方規(guī)定的溫度下，繼續(xù)攪拌至乙腈揮發(fā)完全。

將上述乳液離心，去上清液，收集微球。微球用正己烷洗滌3遍，洗去殘余的大豆油，司班80及吐溫60，然后自然干燥。

(3)回收率、載藥量和數(shù)均粒徑的測定

將收集到的微球稱重，測得回收率為73.6％。

取50mg微球，加二氯甲烷破壞，使包載的碳酸氫鈉游離，然后用去離子水萃取碳酸氫鈉，用酸堿滴定法測得微球的載藥量為1.51％。

通過掃描電子顯微鏡測得微球的數(shù)均粒徑為254μm。

實(shí)施例4包載碳酸氫鈉的微球的制備

(1)包載碳酸氫鈉的微球的處方如表四所示：

表四

(2)包載碳酸氫鈉的微球的制備

將碳酸氫鈉充分溶解于去離子水中，制得碳酸氫鈉水溶液。

將乙基纖維素和吐溫80分散于乙腈中，水浴超聲溶解，制得乙基纖維素溶液。

將上述碳酸氫鈉水溶液注入到快速攪拌的乙基纖維素溶液中，制備得到碳酸氫鈉混懸液，碳酸氫鈉混懸液進(jìn)一步進(jìn)行探頭超聲，制得內(nèi)油相。

將上述內(nèi)油相加入到快速攪拌的含有司班80的大豆油中，形成S/O/O乳液；在處方規(guī)定的溫度下，繼續(xù)攪拌至乙腈揮發(fā)完全。

將上述乳液離心，去上清液，收集微球。微球用正己烷洗滌3遍，洗去殘余的大豆油，司班80及吐溫80，然后自然干燥。

(3)回收率、載藥量和數(shù)均粒徑的測定

將收集到的微球稱重，測得回收率為80.6％。

取50mg微球，加二氯甲烷破壞，使包載的碳酸氫鈉游離，然后用去離子水萃取碳酸氫鈉，用酸堿滴定法測得微球的載藥量為2.68％。

通過掃描電子顯微鏡測得微球的數(shù)均粒徑為333μm。

實(shí)施例5包載碳酸氫鈉的微球的制備

(1)包載碳酸氫鈉的微球的處方如表五所示：

表五

(2)包載碳酸氫鈉的微球的制備

將碳酸氫鈉充分溶解于去離子水中，制得碳酸氫鈉水溶液。

將乙基纖維素和PEG400分散于乙腈中，水浴超聲溶解，制得乙基纖維素溶液。

將上述碳酸氫鈉水溶液注入到快速攪拌的乙基纖維素溶液中，制備得到碳酸氫鈉混懸液，碳酸氫鈉混懸液進(jìn)一步進(jìn)行探頭超聲，制得內(nèi)油相。

將上述內(nèi)油相加入到快速攪拌的含有司班80的大豆油中，形成S/O/O乳液；在處方規(guī)定的溫度下，繼續(xù)攪拌至乙腈揮發(fā)完全。

將上述乳液離心，去上清液，收集微球。微球用正己烷洗滌3遍，洗去殘余的大豆油，司班80及PEG400，然后自然干燥。

(3)回收率、載藥量和數(shù)均粒徑的測定

將收集到的微球稱重，測得回收率為87.2％。

取50mg微球，加二氯甲烷破壞，使包載的碳酸氫鈉游離，然后用去離子水萃取碳酸氫鈉，用酸堿滴定法測得微球的載藥量為2.12％。

通過掃描電子顯微鏡測得微球的數(shù)均粒徑為218μm。

實(shí)施例6包載碳酸氫鈉的微球的制備

(1)包載碳酸氫鈉的微球的處方如表六所示：

表六

(2)包載碳酸氫鈉的微球的制備

將碳酸氫鈉充分溶解于去離子水中，制得碳酸氫鈉水溶液。

將乙基纖維素和普朗尼克F-68分散于乙腈中，水浴超聲溶解，制得乙基纖維素溶液。

將上述碳酸氫鈉水溶液注入到快速攪拌的乙基纖維素溶液中，制備得到碳酸氫鈉混懸液，碳酸氫鈉混懸液進(jìn)一步進(jìn)行探頭超聲，制得內(nèi)油相。

將上述內(nèi)油相加入到快速攪拌的含有司班80的大豆油中，形成S/O/O乳液；在處方規(guī)定的溫度下，繼續(xù)攪拌至乙腈揮發(fā)完全。

將上述乳液離心，去上清液，收集微球。微球用正己烷洗滌3遍，洗去殘余的大豆油，司班80及普朗尼克F-68，然后自然干燥。

(3)回收率、載藥量和數(shù)均粒徑的測定

將收集到的微球稱重，測得回收率為74.8％。

取50mg微球，加二氯甲烷破壞，使包載的碳酸氫鈉游離，然后用去離子水萃取碳酸氫鈉，用酸堿滴定法測得微球的載藥量為2.05％。

通過掃描電子顯微鏡測得微球的數(shù)均粒徑為210μm。

實(shí)施例7包載碳酸氫鈉的微球的制備

(1)包載碳酸氫鈉的微球的處方如表七所示：

表七

(2)包載碳酸氫鈉的微球的制備

包載碳酸氫鈉的微球的制備方法與實(shí)施例1相同。

(3)回收率、載藥量和數(shù)均粒徑的測定

將收集到的微球稱重，測得回收率為78.1％。

取50mg微球，加二氯甲烷破壞，使包載的碳酸氫鈉游離，然后用去離子水萃取碳酸氫鈉，用酸堿滴定法測得微球的載藥量為1.76％。

通過掃描電子顯微鏡測得微球的數(shù)均粒徑為424μm。

實(shí)施例8包載碳酸氫鈉的微球的制備

(1)包載碳酸氫鈉的微球的處方如表八所示：

表八

(2)包載碳酸氫鈉的微球的制備

包載碳酸氫鈉的微球的制備方法與實(shí)施例2相同。

(3)回收率、載藥量和數(shù)均粒徑的測定

將收集到的微球稱重，測得回收率為88.5％。

取50mg微球，加二氯甲烷破壞，使包載的碳酸氫鈉游離，然后用去離子水萃取碳酸氫鈉，用酸堿滴定法測得微球的載藥量為1.70％。

通過掃描電子顯微鏡測得微球的數(shù)均粒徑為429μm。

實(shí)施例9包載碳酸氫鈉的微球的制備

(1)包載碳酸氫鈉的微球的處方如表九所示：

表九

(2)包載碳酸氫鈉的微球的制備

包載碳酸氫鈉的微球的制備方法與實(shí)施例3相同。

(3)回收率、載藥量和數(shù)均粒徑的測定

將收集到的微球稱重，測得回收率為74.3％。

取50mg微球，加二氯甲烷破壞，使包載的碳酸氫鈉游離，然后用去離子水萃取碳酸氫鈉，用酸堿滴定法測得微球的載藥量為1.76％。

通過掃描電子顯微鏡測得微球的數(shù)均粒徑為280μm。

實(shí)施例10包載碳酸氫鈉的微球的制備

(1)包載碳酸氫鈉的微球的處方如表十所示：

表十

(2)包載碳酸氫鈉的微球的制備

包載碳酸氫鈉的微球的制備方法與實(shí)施例4相同。

(3)回收率、載藥量和數(shù)均粒徑的測定

將收集到的微球稱重，測得回收率為89.6％。

取50mg微球，加二氯甲烷破壞，使包載的碳酸氫鈉游離，然后用去離子水萃取碳酸氫鈉，用酸堿滴定法測得微球的載藥量為1.96％。

通過掃描電子顯微鏡測得微球的數(shù)均粒徑為449μm。

實(shí)施例11包載碳酸氫鈉的微球的制備

(1)包載碳酸氫鈉的微球的處方如表十一所示：

表十一

(2)包載碳酸氫鈉的微球的制備

包載碳酸氫鈉的微球的制備方法與實(shí)施例4相同。

(3)回收率、載藥量和數(shù)均粒徑的測定

將收集到的微球稱重，測得回收率為87.0％。

取50mg微球，加二氯甲烷破壞，使包載的碳酸氫鈉游離，然后用去離子水萃取碳酸氫鈉，用酸堿滴定法測得微球的載藥量為2.93％。

通過掃描電子顯微鏡測得微球的數(shù)均粒徑為345μm。

實(shí)施例12包載碳酸氫鈉的微球的制備

(1)包載碳酸氫鈉的微球的處方如表十二所示：

表十二

(2)包載碳酸氫鈉的微球的制備

包載碳酸氫鈉的微球的制備方法與實(shí)施例4相同。

(3)回收率、載藥量和數(shù)均粒徑的測定

將收集到的微球稱重，測得回收率為86.4％。

取50mg微球，加二氯甲烷破壞，使包載的碳酸氫鈉游離，然后用去離子水萃取碳酸氫鈉，用酸堿滴定法測得微球的載藥量為2.45％。

通過掃描電子顯微鏡測得微球的數(shù)均粒徑為282μm。

實(shí)施例13包載碳酸氫鈉的微球的制備

(1)包載碳酸氫鈉的微球的處方如表十三所示：

表十三

(2)包載碳酸氫鈉的微球的制備

包載碳酸氫鈉的微球的制備方法與實(shí)施例4相同。

(3)回收率、載藥量和數(shù)均粒徑的測定

將收集到的微球稱重，測得回收率為88.3％。

取50mg微球，加二氯甲烷破壞，使包載的碳酸氫鈉游離，然后用去離子水萃取碳酸氫鈉，用酸堿滴定法測得微球的載藥量為2.31％。

通過掃描電子顯微鏡測得微球的數(shù)均粒徑為300μm。

實(shí)施例14微球緩釋效果評價(jià)

通過體外釋放實(shí)驗(yàn)來評價(jià)微球?qū)τ谔妓釟溻c的緩釋效果。取實(shí)施例1，實(shí)施例2，實(shí)施例10，實(shí)施例13所制得的微球各50mg，分別加入到4mL去離子水中，在不同的時(shí)間點(diǎn)取樣，每次取1mL樣品，并且補(bǔ)充1mL去離子水。用酸堿滴定法測定樣品中的碳酸氫鈉含量，測得微球中碳酸氫鈉的體外釋放情況。由圖1可知，通過微球包載后，碳酸氫鈉能緩慢從微球中釋放，并且持續(xù)釋放達(dá)到48h。因此，微球能有效延緩碳酸氫鈉的釋放。