本發(fā)明涉及一種以藥物-磷脂-膽固醇三元復(fù)合物為基礎(chǔ)的脂質(zhì)體制備方法，屬于藥物制劑技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

據(jù)報(bào)道，目前新藥開(kāi)發(fā)中至少有40％的藥物表現(xiàn)出低水溶性，由此可能導(dǎo)致不理想的口服生物利用度，或者難以開(kāi)發(fā)成液體制劑(如注射劑等)，從而成為制約藥物發(fā)展的瓶頸。提高難溶性藥物溶解度的傳統(tǒng)策略包括形成可溶性鹽、調(diào)節(jié)pH、潛溶及增溶等。然而，對(duì)某些藥物而言，即便使用以上方法有時(shí)仍難以達(dá)到適于臨床使用的濃度，或者由于輔料的使用量過(guò)多而產(chǎn)生潛在的安全性風(fēng)險(xiǎn)。因此，研究者們一直在探尋更多、更安全的方法用于提高難溶性藥物的溶解度。新的納米給藥系統(tǒng)，如脂質(zhì)體、納米粒、亞微乳、膠束等，成為其中一個(gè)重要的研究方向。

脂質(zhì)體是納米給藥系統(tǒng)中最常見(jiàn)也是最早商業(yè)化的一種可用于注射的、較安全的給藥系統(tǒng)。脂質(zhì)體由單層或多層磷脂雙分子層形成封閉囊狀結(jié)構(gòu)，既可以將水溶性藥物包載于內(nèi)部水相，也可以將脂溶性藥物包封在磷脂雙分子層中，因此對(duì)不同類(lèi)別藥物都具有較廣泛的適用范圍。脂質(zhì)體與一般的藥物劑型相比具有以下優(yōu)勢(shì)：(1)脂質(zhì)體能降低藥物毒性；(2)脂質(zhì)體能保護(hù)被包封的藥物；(3)脂質(zhì)體具有一定的細(xì)胞親和性與組織相容性。

脂質(zhì)體的制備技術(shù)有很多，根據(jù)雙分子層在水相中分散方式的差異，主要分為物理分散法、兩相分散法等等。物理分散法的基本原理是將脂質(zhì)材料和(或)脂溶性藥物溶于有機(jī)溶劑中，除去溶劑使材料成膜，再與水相混合，采用諸如震蕩、超聲等方式使之水化形成脂質(zhì)體。兩相分散法是將油相溶液與水相溶液充分混合，再通過(guò)攪拌、通氮?dú)獾姆绞匠ビ袡C(jī)溶劑，得脂質(zhì)體混懸液。以上方法中，普遍存在有機(jī)溶劑使用量多、除去困難，制備步驟耗時(shí)，生產(chǎn)效率低等缺陷，因而產(chǎn)品生產(chǎn)成本較高。

經(jīng)檢索發(fā)現(xiàn)，申請(qǐng)?zhí)枮镃N200810039032.7，公開(kāi)號(hào)為CN101292957A，名稱(chēng)為《一種替尼泊苷磷脂復(fù)合物的脂質(zhì)體制劑及其制備方法》的中國(guó)發(fā)明專(zhuān)利申請(qǐng)，其制備方法包括：(1)先將替尼泊苷和磷脂加到有機(jī)溶劑中，加熱回流反應(yīng)至溶液澄清透明，且磷脂與替尼泊苷的摩爾比為1-3:1；(2)將(1)所得溶液減壓蒸發(fā)除去有機(jī)溶劑，并置真空干燥機(jī)中干燥，得替尼泊苷磷脂復(fù)合物粉末；(3)將替尼泊苷磷脂復(fù)合物粉末與磷脂、膽固醇按預(yù)定配比置容器中，加入有機(jī)溶劑，水浴加熱攪拌使溶液澄清透明，然后減壓蒸發(fā)除去有機(jī)溶劑，在容器壁上形成透明薄膜，加入緩沖液進(jìn)行充分水化，得初步脂質(zhì)體；(4)按常規(guī)藥劑學(xué)方法制得制劑。

申請(qǐng)?zhí)枮镃N201610586554.3，申請(qǐng)公布號(hào)為CN106074390A，名稱(chēng)為《一種沙利度胺脂質(zhì)體納米制劑及其制備方法和應(yīng)用》的中國(guó)發(fā)明專(zhuān)利申請(qǐng)，其制備方法包括：將沙利度胺、磷脂和膽固醇置于圓底燒瓶中，加入有機(jī)溶劑乙醇對(duì)上述物質(zhì)進(jìn)行溶解，然后在50℃水浴溫度下減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)40min，除去有機(jī)溶劑，在瓶壁上會(huì)形成一層均勻透明的薄膜；加入生理鹽水，搖勻，然后置于37℃振蕩器中恒速振搖30min，形成沙利度胺磷脂復(fù)合物；取10ml上述沙利度胺磷脂復(fù)合物，置于25ml燒杯中，超聲處理15min，即得沙利度胺脂質(zhì)體納米制劑。

然而，發(fā)明人經(jīng)進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，以上述專(zhuān)利為代表的現(xiàn)有技術(shù)中，雖然分別將磷脂與藥物或?qū)⒘字?、膽固醇與藥物反應(yīng)形成了二元或三元復(fù)合物，但是在制備脂質(zhì)體的過(guò)程中，都不可避免地采用了薄膜分散法，而薄膜分散法存在明顯的不利之處：該法的有機(jī)溶劑使用量多、單次處理量少、生產(chǎn)設(shè)備占地面積大，因而生產(chǎn)效率低、生產(chǎn)成本高、不適合工業(yè)化。因此，亟需研發(fā)出有機(jī)溶劑使用量少，單次處理量大、避免采用占地面積過(guò)大的生產(chǎn)設(shè)備、提高生產(chǎn)效率的脂質(zhì)體制備方法。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是：克服現(xiàn)有技術(shù)存在的問(wèn)題，提供一種以藥物-磷脂-膽固醇三元復(fù)合物為基礎(chǔ)的脂質(zhì)體制備方法，能減少有機(jī)溶劑的使用量，工藝簡(jiǎn)單，生產(chǎn)效率高，易于工業(yè)化放大。

本發(fā)明解決其技術(shù)問(wèn)題的技術(shù)方案如下：

以藥物-磷脂-膽固醇三元復(fù)合物為基礎(chǔ)的脂質(zhì)體制備方法，其特征是，包括以下步驟：

第一步、將處方量的磷脂分成第一用量的磷脂和第二用量的磷脂；取目標(biāo)藥物、第一用量的磷脂以及膽固醇置容器中，加入反應(yīng)溶劑使物料完全溶解，持續(xù)保溫?cái)嚢?，然后蒸發(fā)除去反應(yīng)溶劑，所得產(chǎn)物在真空中放置，即得藥物-磷脂-膽固醇三元復(fù)合物；

第二步、再取第二用量的磷脂置純水中，經(jīng)超聲處理或以高速分散儀進(jìn)行剪切后，得磷脂水分散液；

第三步、將第一步所得藥物-磷脂-膽固醇三元復(fù)合物放入第二步所得的磷脂水分散液中，采用以下第一方式或第二方式進(jìn)行處理，即得藥物脂質(zhì)體；

第一方式為：先以高速分散儀進(jìn)行剪切，再以高壓均質(zhì)機(jī)進(jìn)行循環(huán)均質(zhì)；

第二方式為：先以探頭進(jìn)行超聲處理，再以微孔濾膜進(jìn)行過(guò)濾處理。

該制備方法中，僅在第一步制備藥物-磷脂-膽固醇三元復(fù)合物時(shí)使用了少量有機(jī)溶劑，在其余步驟中不再使用任何有機(jī)溶劑，因此大幅減少了有機(jī)溶劑的使用量。此外，從第一步形成三元復(fù)合物至第三步獲得脂質(zhì)體，全程均不需要成膜，因此設(shè)備體積小，單次處理量大，生產(chǎn)工藝簡(jiǎn)單，生產(chǎn)效率高，易于工業(yè)化放大。

本發(fā)明進(jìn)一步完善的技術(shù)方案如下：

優(yōu)選地，第一步中，所述第一用量小于第二用量；第一用量磷脂的質(zhì)量是目標(biāo)藥物質(zhì)量的至少3倍，目標(biāo)藥物與膽固醇的質(zhì)量比為1:(0.1-10)；

第二步中，第二用量磷脂的質(zhì)量是第一步所得藥物-磷脂-膽固醇三元復(fù)合物質(zhì)量的至少3倍。

該優(yōu)選方案中，將磷脂巧妙地分成前少后多兩部分，通過(guò)對(duì)磷脂第一、第二用量的具體限定，確保藥物-磷脂-膽固醇三元復(fù)合物的復(fù)合率，并確保脂質(zhì)體的包封率；而且，第一用量磷脂量少也能進(jìn)一步降低有機(jī)溶劑的使用量。

優(yōu)選地，第一步中，保溫溫度范圍為30℃-80℃，攪拌時(shí)間為1-8h；真空中放置的時(shí)間為8-16h。

優(yōu)選地，第一步中，所述反應(yīng)溶劑的使用量為能將物料完全溶解的最低用量的1-1.5倍；所述反應(yīng)溶劑為四氫呋喃、丙酮、氯仿之一或其組合。

優(yōu)選地，第一步所得藥物-磷脂-膽固醇三元復(fù)合物呈粉末狀固體或海綿狀半固體。

優(yōu)選地，第三步的第一方式中，剪切速度為1000-10000rpm，剪切時(shí)間為1-30min，均質(zhì)壓力為100-1000bar，均質(zhì)循環(huán)次數(shù)為1-10次。

優(yōu)選地，第三步的第二方式中，采用100-1000W探頭進(jìn)行超聲，超聲處理時(shí)間為1-60min，微孔濾膜的孔徑為0.22-0.8μm。

優(yōu)選地，第三步所得藥物脂質(zhì)體的粒徑為25-500nm。

優(yōu)選地，所述目標(biāo)藥物為非甾體抗炎藥、抗原抗體蛋白、蛋白多肽類(lèi)藥物、金屬離子、中藥活性成分之一或其組合。

優(yōu)選地，所述磷脂為二肉豆蔻磷脂酰膽堿、二肉豆蔻磷脂酰甘油、蛋黃卵磷脂、氫化大豆卵磷脂、大豆卵磷脂之一或其組合。

本發(fā)明先將藥物與磷脂、膽固醇形成藥物-磷脂-膽固醇三元復(fù)合物，再將上述三元復(fù)合物與磷脂反應(yīng)制備成脂質(zhì)體，其中，將藥物與磷脂、膽固醇形成復(fù)合物可以改善許多藥物的不良性質(zhì)，特別是提高藥物的親水、親油性質(zhì)；以藥物-磷脂-膽固醇三元復(fù)合物作為基礎(chǔ)，通過(guò)利用磷脂水分散液，以高壓均質(zhì)或探頭超聲方法制備脂質(zhì)體，能大幅減少有機(jī)溶劑的使用量，單次處理量大，工藝簡(jiǎn)單，生產(chǎn)效率高，易于工業(yè)化放大。

附圖說(shuō)明

圖1為本發(fā)明實(shí)施例1采用高壓均質(zhì)法所得脂質(zhì)體的透射電鏡圖。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)描述。但是本發(fā)明不限于所給出的例子。

本發(fā)明具體實(shí)施的以藥物-磷脂-膽固醇三元復(fù)合物為基礎(chǔ)的脂質(zhì)體制備方法，包括：

第一步、將處方量的磷脂分成第一用量的磷脂和第二用量的磷脂，第一用量小于第二用量；取目標(biāo)藥物、第一用量的磷脂以及膽固醇置容器中，加入反應(yīng)溶劑使物料完全溶解，在30℃-80℃保溫?cái)嚢?-8h，然后蒸發(fā)除去反應(yīng)溶劑，所得產(chǎn)物在真空中放置，真空中放置的時(shí)間為8-16h，即得呈粉末狀固體或海綿狀半固體的藥物-磷脂-膽固醇三元復(fù)合物；第一用量磷脂的質(zhì)量是目標(biāo)藥物質(zhì)量的至少3倍，目標(biāo)藥物與膽固醇的質(zhì)量比為1:(0.1-10)；反應(yīng)溶劑的使用量為能將物料完全溶解的最低用量的1-1.5倍，反應(yīng)溶劑為四氫呋喃、丙酮、氯仿之一或其組合。

第二步、再取第二用量的磷脂置純水中，經(jīng)超聲處理或以高速分散儀進(jìn)行剪切后，得磷脂水分散液；第二用量磷脂的質(zhì)量是第一步所得藥物-磷脂-膽固醇三元復(fù)合物質(zhì)量的至少3倍。其中，超聲處理既可以采用普通超聲分散設(shè)備，也可以采用探頭超聲。

第三步、將第一步所得藥物-磷脂-膽固醇三元復(fù)合物放入第二步所得的磷脂水分散液中，采用以下第一方式或第二方式進(jìn)行處理，即得藥物脂質(zhì)體，粒徑為25-500nm。

第一方式為：先以高速分散儀進(jìn)行剪切，再以高壓均質(zhì)機(jī)進(jìn)行循環(huán)均質(zhì)；其中，剪切速度為1000-10000rpm，剪切時(shí)間為1-30min，均質(zhì)壓力為100-1000bar，均質(zhì)循環(huán)次數(shù)為1-10次。

第二方式為：先以探頭進(jìn)行超聲處理，再以微孔濾膜進(jìn)行過(guò)濾處理；其中，采用100-1000W探頭進(jìn)行超聲，超聲處理時(shí)間為1-60min，微孔濾膜的孔徑為0.22-0.8μm。

以上方法中，目標(biāo)藥物優(yōu)選非甾體抗炎藥、抗原抗體蛋白、蛋白多肽類(lèi)藥物、金屬離子、中藥活性成分之一或其組合；需要說(shuō)明的是，目標(biāo)藥物也可以是除上述限定以外的其它藥物，經(jīng)實(shí)驗(yàn)證明，本發(fā)明方法具有廣泛地普遍適用性。

磷脂為二肉豆蔻磷脂酰膽堿、二肉豆蔻磷脂酰甘油、蛋黃卵磷脂、氫化大豆卵磷脂、大豆卵磷脂之一或其組合。

實(shí)施例1

處方中各組分的質(zhì)量體積濃度(g/ml)為：

黃芩素 0.8％

蛋黃卵磷脂 16.08％

膽固醇 1.36％

余量為純水。

制備工藝：根據(jù)上述處方，稱(chēng)取黃芩素、膽固醇和3倍黃芩素質(zhì)量的蛋黃卵磷脂(即黃芩素與第一用量蛋黃卵磷脂的質(zhì)量比為1:3，黃芩素與膽固醇的質(zhì)量比為1:1.7)，置于茄型瓶中，采用四氫呋喃作為反應(yīng)溶劑使三者完全溶解，30℃保溫?cái)嚢?h后，蒸發(fā)除去溶劑，所得產(chǎn)物真空下保持12h，即得黃芩素-蛋黃卵磷脂-膽固醇三元復(fù)合物，取出，避光，于陰涼處密封保存。這一步的實(shí)質(zhì)是采取溶劑法制備黃芩素-蛋黃卵磷脂-膽固醇三元復(fù)合物。

稱(chēng)取處方中剩余蛋黃卵磷脂(即第二用量蛋黃卵磷脂，第二用量蛋黃卵磷脂的質(zhì)量是前步所得三元復(fù)合物質(zhì)量的3倍)，超聲分散于處方量純水中，加入黃芩素-蛋黃卵磷脂-膽固醇三元復(fù)合物，然后在高速分散儀中5000rpm高速剪切5min，再加入高壓均質(zhì)機(jī)中，在500bar均質(zhì)壓力下，循環(huán)3次，即得藥物脂質(zhì)體，或者用探頭超聲處理，探頭超聲功率550W，工作時(shí)間10min，所得溶液過(guò)0.45μm微孔濾膜，即得藥物脂質(zhì)體。最終脂質(zhì)體中質(zhì)量比黃芩素：蛋黃卵磷脂：膽固醇＝1:20.1:1.7。

本實(shí)施例采用高壓均質(zhì)法所得脂質(zhì)體的透射電鏡圖如圖1所示。由圖可見(jiàn)，脂質(zhì)體外觀為球形或近球形，邊緣光滑，無(wú)可見(jiàn)藥物晶體顆粒，粒徑在100nm左右。納米粒表面顯示出指紋狀特征，表明存在脂質(zhì)體的雙分子層結(jié)構(gòu)。

實(shí)施例2

處方中各組分的質(zhì)量體積濃度(g/ml)為：

槲皮素 0.2％

蛋黃卵磷脂 4.49％

膽固醇 0.4％

余量為純水。

制備工藝：根據(jù)上述處方，稱(chēng)取槲皮素、膽固醇和3.2倍槲皮素質(zhì)量的蛋黃卵磷脂(即槲皮素與第一用量蛋黃卵磷脂的質(zhì)量比為1:3.2，槲皮素與膽固醇的質(zhì)量比為1:2)，置于茄型瓶中，采用四氫呋喃作為反應(yīng)溶劑使三者完全溶解，55℃保溫?cái)嚢?h后，蒸發(fā)除去溶劑，所得產(chǎn)物真空下保持12h，即得槲皮素-蛋黃卵磷脂-膽固醇三元復(fù)合物，取出，避光，于陰涼處密封保存。

稱(chēng)取處方中剩余蛋黃卵磷脂(即第二用量蛋黃卵磷脂，第二用量蛋黃卵磷脂的質(zhì)量是前步所得三元復(fù)合物質(zhì)量的約3.1倍)，超聲分散于處方量純水中，加入槲皮素-蛋黃卵磷脂-膽固醇三元復(fù)合物，采用550W探頭超聲處理10min，所得溶液過(guò)0.45μm微孔濾膜，密封保存，即得藥物脂質(zhì)體。

實(shí)施例3

處方中各組分的質(zhì)量體積濃度(g/ml)為：

吲哚美辛 0.5％

氫化大豆卵磷脂 16％

膽固醇 1.0％

余量為純水。

制備工藝：根據(jù)上述處方，稱(chēng)取吲哚美辛、膽固醇和4倍吲哚美辛質(zhì)量的氫化大豆卵磷脂(即吲哚美辛與第一用量氫化大豆卵磷脂的質(zhì)量比為1:4，吲哚美辛與膽固醇的質(zhì)量比為1:2)，置于茄型瓶中，采用氯仿作為反應(yīng)溶劑使三者完全溶解，55℃保溫?cái)嚢?h后，蒸發(fā)除去溶劑，所得產(chǎn)物真空下保持12h，即得吲哚美辛-氫化大豆卵磷脂-膽固醇三元復(fù)合物，取出，避光，于陰涼處密封保存。

稱(chēng)取處方中剩余氫化大豆卵磷脂(即第二用量氫化大豆卵磷脂，第二用量氫化大豆卵磷脂的質(zhì)量是前步所得三元復(fù)合物質(zhì)量的4倍)，將氫化大豆卵磷脂超聲分散于處方量純水中，并與吲哚美辛-氫化大豆卵磷脂-膽固醇三元復(fù)合物混合，在高速分散儀中5000rpm高速剪切8min，再加入高壓均質(zhì)機(jī)中，在500bar均質(zhì)壓力下，循環(huán)5次，即得藥物脂質(zhì)體。

實(shí)施例4

處方中各組分的質(zhì)量體積濃度(g/ml)為：

千層紙素 0.5％

大豆卵磷脂 16.2％

膽固醇 0.9％

余量為純水。

制備工藝：根據(jù)上述處方，稱(chēng)取千層紙素、膽固醇和5倍千層紙素質(zhì)量的大豆卵磷脂(即千層紙素與第一用量大豆卵磷脂的質(zhì)量比為1:5，千層紙素與膽固醇的質(zhì)量比為1:1.8)，置于茄型瓶中，采用丙酮作為反應(yīng)溶劑使三者完全溶解，60℃保溫?cái)嚢?.5h后蒸發(fā)除去溶劑，所得產(chǎn)物真空下保持12h，即得千層紙素-大豆卵磷脂-膽固醇三元復(fù)合物，取出，避光，于陰涼處密封保存。

稱(chēng)取處方中剩余大豆卵磷脂(即第二用量大豆卵磷脂，第二用量大豆卵磷脂的質(zhì)量是前步所得三元復(fù)合物質(zhì)量的約3.5倍)，將大豆卵磷脂分散于處方量純水中，并與千層紙素-大豆卵磷脂-膽固醇三元復(fù)合物混合，采用探頭超聲處理，探頭超聲功率550W，工作時(shí)間12min。所得溶液過(guò)0.45μm微孔濾膜，即得藥物脂質(zhì)體。

實(shí)施例5

背景技術(shù)中提及的申請(qǐng)?zhí)枮镃N200810039032.7，公開(kāi)號(hào)為CN101292957A，名稱(chēng)為《一種替尼泊苷磷脂復(fù)合物的脂質(zhì)體制劑及其制備方法》的中國(guó)發(fā)明專(zhuān)利申請(qǐng)，下稱(chēng)專(zhuān)利一，其方法的實(shí)質(zhì)為：藥物與磷脂溶于有機(jī)溶劑，加熱回流，隨后減壓蒸發(fā)除去有機(jī)溶劑，再真空干燥得藥物-磷脂二元復(fù)合物，藥物-磷脂二元復(fù)合物與磷脂、膽固醇再通過(guò)薄膜分散法制備脂質(zhì)體。

背景技術(shù)中提及的申請(qǐng)?zhí)枮镃N201610586554.3，申請(qǐng)公布號(hào)為CN106074390A，名稱(chēng)為《一種沙利度胺脂質(zhì)體納米制劑及其制備方法和應(yīng)用》的中國(guó)發(fā)明專(zhuān)利申請(qǐng)，下稱(chēng)專(zhuān)利二，其方法的實(shí)質(zhì)為：藥物與磷脂、膽固醇通過(guò)薄膜分散法形成薄膜，再經(jīng)生理鹽水水化得藥物-磷脂-膽固醇三元復(fù)合物，再將三元復(fù)合物超聲處理得脂質(zhì)體。

本發(fā)明方法完全不需要采用薄膜分散法，本發(fā)明方法實(shí)質(zhì)：藥物與磷脂、膽固醇溶于有機(jī)溶劑，保溫?cái)嚢?，蒸發(fā)除去有機(jī)溶劑，得藥物-磷脂-膽固醇三元復(fù)合物，制備磷脂水分散液，并加入藥物-磷脂-膽固醇三元復(fù)合物，高壓均質(zhì)或探頭超聲制備脂質(zhì)體。這樣即可完全避免薄膜分散法的不利之處。

為比較各方法的實(shí)際效果，本實(shí)施例進(jìn)行了對(duì)比實(shí)驗(yàn)，分為本發(fā)明方法組和薄膜分散法組，所用藥物為黃芩素。

具體而言，本發(fā)明方法即指先將黃芩素與磷脂、膽固醇制備成黃芩素-磷脂-膽固醇三元復(fù)合物，再與磷脂水分散液形成脂質(zhì)體。

薄膜分散法即先將黃芩素與磷脂、膽固醇加入二氯甲烷溶解，水浴加熱后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有機(jī)溶劑形成均勻薄膜，水化，探頭超聲處理，制備得脂質(zhì)體?？疾旄鹘M的粒徑、PDI、包封率以及外觀，具體數(shù)據(jù)如下表所示：

由以上實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可知：

(1)與專(zhuān)利一、專(zhuān)利二所用薄膜分散法相比，本發(fā)明方法工藝簡(jiǎn)單、有機(jī)溶劑使用量少，無(wú)需占地面積大的生產(chǎn)設(shè)備。

(2)本發(fā)明方法制備所得脂質(zhì)體的穩(wěn)定性明顯優(yōu)于薄膜分散法。

實(shí)施例6

本發(fā)明將磷脂巧妙地分成前少后多兩部分，并經(jīng)過(guò)了如下實(shí)驗(yàn)的驗(yàn)證。

磷脂分為前、后兩部分，前一部分用于制備藥物-磷脂-膽固醇三元復(fù)合物，該步驟中磷脂與藥物比例是關(guān)鍵參數(shù)，影響磷脂復(fù)合物的復(fù)合率；后一部分用于磷脂水分散液，此步驟中磷脂與三元復(fù)合物的質(zhì)量比亦是關(guān)鍵工藝參數(shù)，影響脂質(zhì)體的包封率。

(1)制備復(fù)合物時(shí)磷脂與藥物反應(yīng)投料比的篩選

以黃芩素為例。磷脂采用蛋黃卵磷脂。

采用溶劑法制備黃芩素-蛋黃卵磷脂-膽固醇三元復(fù)合物：稱(chēng)取黃芩素和蛋黃卵磷脂、膽固醇，置于茄型瓶中，黃芩素與膽固醇的質(zhì)量比為1:1，蛋黃卵磷脂與黃芩素的質(zhì)量比分別為2:1、2.5:1、3:1、3.3:1、3.5:1；加入適量反應(yīng)溶劑四氫呋喃使三者完全溶解，30℃保溫?cái)嚢?h后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，所得產(chǎn)物在真空下保持12h，取出產(chǎn)物，避光，保持干燥，于陰涼處保存，即得黃芩素-蛋黃卵磷脂-膽固醇三元復(fù)合物。測(cè)定復(fù)合率。結(jié)果如下表所示。

蛋黃卵磷脂與黃芩素投料比(質(zhì)量比)對(duì)復(fù)合率的影響(n＝3)

由此可見(jiàn)，隨著黃芩素在復(fù)合體系中的質(zhì)量比降低，復(fù)合率隨之升高，當(dāng)磷脂質(zhì)量是黃芩素質(zhì)量的3倍及以上時(shí)，復(fù)合率接近100％。

(2)制備脂質(zhì)體時(shí)磷脂與三元復(fù)合物的質(zhì)量比的篩選

以黃芩素為例。磷脂采用蛋黃卵磷脂。處方由黃芩素、蛋黃卵磷脂、膽固醇及純水組成。

采用溶劑法制備黃芩素-蛋黃卵磷脂-膽固醇三元復(fù)合物：稱(chēng)取黃芩素和蛋黃卵磷脂、膽固醇，置于茄型瓶中，黃芩素與膽固醇的質(zhì)量比為1:1，蛋黃卵磷脂與黃芩素的質(zhì)量比為3:1；加入適量反應(yīng)溶劑四氫呋喃使三者完全溶解，30℃保溫?cái)嚢?h后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，所得產(chǎn)物在真空下保持12h，取出產(chǎn)物，避光，保持干燥，于陰涼處保存，即得黃芩素-蛋黃卵磷脂-膽固醇三元復(fù)合物。

調(diào)節(jié)蛋黃卵磷脂與黃芩素-蛋黃卵磷脂-膽固醇三元復(fù)合物的質(zhì)量比分別為5:5、8:5、10:5、13:5、15:5、18:5、20:5和23:5(換算成蛋黃卵磷脂與黃芩素質(zhì)量比則為8:1、11:1、13:1、16:1、18:1、21:1、23:1和26:1)，按黃芩素濃度80mg/ml計(jì)，分別稱(chēng)取蛋黃卵磷脂和黃芩素-蛋黃卵磷脂-膽固醇三元復(fù)合物。將蛋黃卵磷脂分散于處方量純水中得蛋黃卵磷脂水分散液，加入黃芩素-蛋黃卵磷脂-膽固醇三元復(fù)合物，在高速分散儀中5000rpm高速剪切5min，再加入高壓均質(zhì)機(jī)中，在500bar均質(zhì)壓力下，循環(huán)3次。測(cè)定所得脂質(zhì)體的包封率、粒徑和Zeta電位。

蛋黃卵磷脂與三元復(fù)合物的質(zhì)量比對(duì)脂質(zhì)體的包封率、粒徑和Zeta電位的影響(n＝3)

由此可見(jiàn)：(i)在蛋黃卵磷脂與三元復(fù)合物的質(zhì)量比為5:5-15:5范圍內(nèi)，隨著蛋黃卵磷脂與三元復(fù)合物質(zhì)量比的升高，包封率逐漸增加，當(dāng)?shù)包S卵磷脂與三元復(fù)合物質(zhì)量比達(dá)到15:5(即蛋黃卵磷脂、黃芩素、膽固醇質(zhì)量比為18:1:1)及以上時(shí)，包封率接近100％。

(ii)在蛋黃卵磷脂與三元復(fù)合物質(zhì)量比為5:5-23:5時(shí)，脂質(zhì)體粒徑在102-112nm范圍內(nèi)。

(iii)在蛋黃卵磷脂與三元復(fù)合物質(zhì)量比為5:5-23:5時(shí)，脂質(zhì)體的Zeta電位均低于-25mV且較穩(wěn)定。

(iv)綜合上述結(jié)果可以確定，蛋黃卵磷脂與三元復(fù)合物質(zhì)量比應(yīng)為15:5即3:1及以上。

需要說(shuō)明的是，本實(shí)施例中(1)、(2)兩部分篩選實(shí)驗(yàn)還采用了其它藥物、其它磷脂、以及其它符合本發(fā)明技術(shù)方案限定的處方進(jìn)行驗(yàn)證，其結(jié)果均與以上結(jié)果相符。

除上述實(shí)施例外，本發(fā)明還可以有其他實(shí)施方式。凡采用等同替換或等效變換形成的技術(shù)方案，均落在本發(fā)明要求的保護(hù)范圍。