本發(fā)明涉及脂質(zhì)體技術領域，具體而言，涉及一種納米銀脂質(zhì)體及其制備方法和應用。

背景技術：

當兩性分子如磷脂和鞘脂分散于水相時，分子的疏水尾部傾向于聚集在一起，避開水相，而親水頭部暴露在水相，形成具有雙分子層結構的的封閉囊泡，此稱為脂質(zhì)體(liposome)。脂質(zhì)體是類似生物膜結構的囊泡，具有細胞親和性與組織相容性，直徑大多在25-1000nm。利用脂質(zhì)體與細胞膜可以相融合的這一優(yōu)良特性，可將其廣泛應用于轉基因、藥物載體等領域，對其作為藥物載體的性能的研究以及其與細胞相互作用的研究也隨之成為熱門的科研領域。

脂質(zhì)體作為藥物載體，可將疏水性藥物包封于脂質(zhì)雙分子層中疏水性部位，將親水性藥物包封于脂質(zhì)體內(nèi)部親水性區(qū)域。常見的藥物有多種，其中，銀作為天然抗菌材料，很早就應用于醫(yī)藥抗菌領域。早在《本草綱目》中記載：生銀，無毒；1968年，磺胺嘧啶銀(Sulfadiazine Silver)引入市場，由于它對各種細菌、真菌都有高效的殺滅作用，能夠自然、無痛地對傷口部位進行完全修復，不用植皮，已成為治療外傷(如燒傷)的重要藥物，目前已被列入國家基本醫(yī)療保險藥品目錄。美國公共衛(wèi)生局1990年《關于銀毒性的調(diào)查報告》中說明：銀對人體無明顯毒副作用；納米銀是局部用藥，銀含量少，是最安全的用藥方式。需要說明的是，在《本草綱目》李時珍指的生銀，是單質(zhì)銀，是無毒的。不是銀離子，銀離子有細胞毒性。

納米銀就是將粒徑做到納米級的金屬銀單質(zhì)，作為新一代的天然抗菌材料，納米銀具有廣譜抗菌、殺菌能力強、滲透性強、抗菌持久、無耐藥性和安全等特點。納米銀顆粒直接進入菌體與氧代謝酶(-SH)結合，使菌體窒息而死的獨特作用機制，可殺死與其接觸的大多數(shù)細菌、真菌、霉菌、孢子、疥螨等微生物。經(jīng)權威機構研究發(fā)現(xiàn)：其對耐藥病原菌如耐藥大腸桿菌、耐藥金黃色葡萄球菌、耐藥綠膿桿菌、化膿鏈球菌、耐藥腸球菌，厭氧菌等有全面的抗菌活性；對燒燙傷及創(chuàng)傷表面常見的細菌如金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌、白色念珠菌及其它G+、G-性致病菌都有殺菌作用；對沙眼衣原體、引起性傳播性疾病的淋球菌也有強大的殺菌作用。根據(jù)納米銀的抗菌原理，納米銀必須要突破細菌的細胞壁和細胞膜屏障，進入細胞質(zhì)后才能破壞細胞質(zhì)中的酶系統(tǒng)，干擾細菌的新陳代謝，或進入核質(zhì)，破壞細菌DNA。所以，納米銀需要與載體配合，穿過細菌的細胞壁和細胞膜屏障，發(fā)揮抗菌殺菌的功效。

在目前公布的文獻和專利來看，大多數(shù)納米銀制劑是通過添加強氧化劑如硝酸銀來獲得，硝酸銀本身具有一定的腐蝕性和毒性，在特定情況下和體內(nèi)微生物反應會生成亞硝酸鹽，后者有劇毒，作為一種用于人體的制劑，存在極大的安全隱患。在臨床上，用硝酸銀制備的納米銀制劑存在皮膚過敏率較高的問題。傳統(tǒng)使用化學方法獲得的納米銀離子，因具有較強的氧化性，會和生物體產(chǎn)生強烈的氧化還原反應，能與生物體的活性組織產(chǎn)生氧化還原反應，從而失去活性、產(chǎn)生對生物體損害(傳統(tǒng)叫毒性)，因而不適合作用于人體。另外，由于具有很大極性，面對選擇性通過的細胞壁和細胞膜，納米銀離子很難快速進入細胞質(zhì)起作用。

惰性氣體蒸發(fā)凝聚法和化學沉積法制備納米銀，因為需要產(chǎn)生高溫和使用催化劑，不可避免會遇到金屬粒子氧化變性的問題，制備出的納米金屬材料粒徑分布不均勻，形狀不規(guī)則，經(jīng)過檢測，其粒徑分布在20-180nm之間，形狀和分布不均勻。

有鑒于此，特提出本發(fā)明以解決上述技術問題。

技術實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的第一個目的在于提供一種納米銀脂質(zhì)體，所述納米銀脂質(zhì)體主要由納米銀、卵磷脂、膽固醇、抗氧劑、金屬絡合劑、乳化劑、防聚合劑和水等原料組成，通過納米銀和脂質(zhì)體的協(xié)同作用，提高納米銀突破人體細胞屏障的能力，從而極大地提高了納米銀進入微生物細胞的速度，并在病灶周圍聚集形成高濃度的藥物效應，在保證安全的同時，達到快速、持久地殺菌的目的；且在殺菌的同時將納米銀脂質(zhì)體包裹的營養(yǎng)物質(zhì)傳遞給細胞，補充細胞能量，促進細胞的生長，提高細胞的自我修復能力。

本發(fā)明的第二個目的在于提供一種納米銀脂質(zhì)體的制備方法，所述制備方法通過將各原料混合均質(zhì)后采用超高壓微射流納米設備進行超高壓微射流循環(huán)處理，一步法即可得到納米銀脂質(zhì)體，該制備方法簡單，操作容易，整個生產(chǎn)過程綠色環(huán)保，可工業(yè)化大批量生產(chǎn)。且通過該法制備的納米銀脂質(zhì)體顆粒均勻，穩(wěn)定性高，具有良好的抗菌功效。

本發(fā)明的第三個目的在于提供一種納米銀脂質(zhì)體的應用，將所述納米銀脂質(zhì)體制作成適宜的劑型應用于日用品或者醫(yī)藥產(chǎn)品中，從而起到抗菌消炎的作用。

為了實現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，特采用以下技術方案：

本發(fā)明提供一種納米銀脂質(zhì)體，按重量百分比計，所述納米銀脂質(zhì)體主要由以下原料制成：納米銀0.005-30％，卵磷脂1-3％，膽固醇0.3-2％，抗氧劑0.1-2％，金屬絡合劑0.1-3％，乳化劑2-10％，防聚合劑1-5％，水補齊余量至100％。

本發(fā)明的有益效果為：本發(fā)明提供的一種納米銀脂質(zhì)體，所述納米銀脂質(zhì)體主要由納米銀、卵磷脂、膽固醇、抗氧劑、金屬絡合劑、乳化劑、防聚合劑和水等原料組成，其中納米銀是以納米銀單質(zhì)的形式存在，與采用傳統(tǒng)化學方法制備的納米銀離子相比，納米銀單質(zhì)不會與生物體內(nèi)多種生物活性物質(zhì)結合而沉積，不會產(chǎn)生毒性，且具有強大的殺菌作用。

同時，通過納米銀和脂質(zhì)體的協(xié)同作用，提高納米銀突破人體細胞屏障的能力，從而極大地提高了納米銀進入微生物細胞的速度，并在病灶周圍聚集形成高濃度的藥物效應，在保證安全的同時，達到快速、持久地殺菌的目的；且在殺菌的同時將脂質(zhì)體包裹的營養(yǎng)物質(zhì)傳遞給細胞，補充細胞能量，促進細胞的生長，提高細胞的自我修復能力。

進一步的，所述納米銀脂質(zhì)體主要由以下原料制成：納米銀0.005-30％，卵磷脂1-3％，膽固醇0.3-2％，抗氧劑0.1-2％，金屬絡合劑0.1-3％，乳化劑2-10％，防聚合劑1-5％，月見草油1-10％，透明質(zhì)酸0.1-3％，膠原蛋白0.1-3％，水補齊余量至100％。

進一步的，所述抗氧劑為丁基羥基茴香醚(BHA)、2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT)或維生素E中的一種或至少兩種的組合；

和/或，所述金屬絡合劑為乙二胺四乙酸二鈉、氨三乙酸鈉或聚丙烯酸鈉中的一種或至少兩種的組合。

進一步的，所述乳化劑為司盤80(SP80)、吐溫80(TW80)、脂肪酸甘油酯或單硬脂酸甘油酯中的一種或至少兩種的組合；

和/或，所述防聚合劑為聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮或聚二甲基硅氧烷中的一種或至少兩種的組合。

進一步的，還包括增稠劑，所述增稠劑的重量百分比為1-5％，所述增稠劑為賽比克305、PEG-100硬脂酸酯或漢生膠中的一種或至少兩種的組合；

和/或，還包括增溶劑，所述增溶劑的重量百分比為1-45％，所述增溶劑為乙醇、丙二醇或甘油中的一種或至少兩種的組合；

進一步的，所述卵磷脂從大豆卵磷脂或蛋黃卵磷脂中提純得到，所述卵磷脂中磷脂酰膽堿的含量為50-99％；

和/或，還包括硫磺，所述硫磺的重量百分比為0.5-10％。

本發(fā)明還提供了一種納米銀脂質(zhì)體的制備方法，包括如下步驟

(1)按照配方量稱取防聚合劑、水、任選地透明質(zhì)酸和任選地膠原蛋白混合，制成水相混合物；

(2)按配方量稱取納米銀、卵磷脂、膽固醇、抗氧劑、金屬絡合劑、乳化劑、任選地硫磺、任選地月見草油和任選地增溶劑混合，制成油相混合物；

(3)將步驟(2)所得的油相混合物加入到步驟(1)中的水相混合物后，均質(zhì)，得到納米銀初乳；

(4)將步驟(3)所得的納米銀初乳移至超高壓微射流設備中，進行超高壓微射流循環(huán)處理，得到納米銀脂質(zhì)體。

所述制備方法通過將各原料混合均質(zhì)后采用超高壓微射流納米設備進行超高壓微射流循環(huán)處理，一步法即可得到納米銀脂質(zhì)體，其中納米銀以納米銀單質(zhì)的形式存在，相比采用傳統(tǒng)的化學方法使用硝酸銀、防腐劑、氯仿、乙醚及其他化學溶劑制備的納米銀離子，納米銀單質(zhì)不會與生物體內(nèi)多種生物活性物質(zhì)結合而沉積，不會產(chǎn)生毒性，降低皮膚過敏率，能夠解決傳統(tǒng)銀制劑中氯仿、乙醚、防腐劑等殘留物可能對細胞和環(huán)境產(chǎn)生危害物質(zhì)的問題。且采用該法制備的納米銀脂質(zhì)體，納米銀大部分都被包裹在脂質(zhì)體內(nèi)部，只有少量的吸附在脂質(zhì)體表面。納米銀與脂質(zhì)體協(xié)同作用，有利于納米銀快速進入細胞從而起到抗菌消炎的作用。

該制備方法簡單，操作容易，整個生產(chǎn)過程綠色環(huán)保，可工業(yè)化大批量生產(chǎn)。

進一步的，在步驟(2)中，所述混合的溫度為40-60℃；

和/或，在步驟(3)中，所述均質(zhì)的轉速為3000-10000rpm，均質(zhì)的時間為1-5min。

進一步的，在步驟(4)中，所述超高壓微射流循環(huán)處理次數(shù)為1-3次，處理溫度為0-4℃，處理壓力為150-250MPa；

和/或，步驟(4)之后，還包括將步驟(4)所得的納米銀脂質(zhì)體與配方量的增稠劑混合攪拌，制成膏霜狀納米銀脂質(zhì)體。

此外，本發(fā)明還提供了一種納米銀脂質(zhì)體在日用品或者醫(yī)藥產(chǎn)品中的應用。

所述納米銀脂質(zhì)體通過納米銀與脂質(zhì)體的協(xié)同作用，使得其在日用品或者醫(yī)藥產(chǎn)品中可以更安全高效的進入生物細胞內(nèi)部，從而起到抗菌消炎的作用。

附圖說明

圖1為實施例5納米銀脂質(zhì)體的電鏡圖；

圖2為實施例5納米銀的電鏡圖；

圖3為對比例1脂質(zhì)體的電鏡圖；

圖4為實施例5納米銀脂質(zhì)體的激光粒度檢測圖。

具體實施方式

下面將結合實施例對本發(fā)明的實施方案進行詳細描述，但是本領域技術人員將會理解，下列實施例僅用于說明本發(fā)明，而不應視為限制本發(fā)明的范圍。實施例中未注明具體條件者，按照常規(guī)條件或制造商建議的條件進行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以通過市售購買獲得的常規(guī)產(chǎn)品。

根據(jù)本發(fā)明的一個方面，提供了一種納米銀脂質(zhì)體，按重量百分比計，所述納米銀脂質(zhì)體主要由以下原料制成：納米銀0.005-30％，卵磷脂1-3％，膽固醇0.3-2％，抗氧劑0.1-2％，金屬絡合劑0.1-3％，乳化劑2-10％，防聚合劑1-5％，水補齊余量至100％。

本發(fā)明的有益效果為：本發(fā)明提供的一種納米銀脂質(zhì)體，所述納米銀脂質(zhì)體主要由納米銀、卵磷脂、膽固醇、抗氧劑、金屬絡合劑、乳化劑、防聚合劑和水等原料組成，其中納米銀是以納米銀單質(zhì)的形式存在，與采用傳統(tǒng)化學方法制備的納米銀離子相比，納米銀單質(zhì)不會與生物體內(nèi)多種生物活性物質(zhì)結合而沉積，不會產(chǎn)生毒性，且具有強大的殺菌作用

同時，通過納米銀和脂質(zhì)體的協(xié)同作用，提高納米銀突破人體細胞屏障的能力，從而極大地提高了納米銀進入微生物細胞的速度，并在病灶周圍聚集形成高濃度的藥物效應，在保證安全的同時，達到快速、持久地殺菌的目的；且在殺菌的同時將脂質(zhì)體包裹的營養(yǎng)物質(zhì)傳遞給細胞，補充細胞能量，促進細胞的生長，提高細胞的自我修復能力。

在本發(fā)明中，納米銀是原子結構組成的“銀粒子”，不帶電荷，也稱為納米銀單質(zhì)，納米銀的應用與其真實顆粒大小和是否具有納米效應緊密相關，不會與生物體內(nèi)多種生物活性物質(zhì)結合而沉積，所以不會產(chǎn)生毒性。

納米銀單質(zhì)與納米銀離子有本質(zhì)的不同。納米銀離子無納米效應，一般以水溶液形式存在，銀離子是帶正電荷的“陽離子”，是通過化學反應發(fā)生電子轉移形成的；銀離子應用取決于離子本身屬性和所荷電價，與離子大小無關，更沒有納米效應。通過傳統(tǒng)化學方法獲得的納米銀離子，具有很大極性，面對選擇性通過的細胞壁和細胞膜，納米銀很難快速進入細胞質(zhì)起作用。又由于其具有較強的氧化性，會和生物體產(chǎn)生強烈的氧化還原反應，能與生物體的活性組織產(chǎn)生氧化還原反應，從而使其失去活性，對生物體產(chǎn)生損害(傳統(tǒng)叫毒性)，因而不適合作用于人體。

所以說，納米銀和銀離子無論其特征和形成，還是其應用屬性都是有本質(zhì)的區(qū)別的。

在本發(fā)明中，納米銀典型但非限制性的重量百分比為0.005％、0.01％、0.05％、0.1％、0.25％、0.5％、0.8％、1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、12％、14％、16％、18％、20％、22％、25％、28％或30％。

卵磷脂由于原料成本低廉且易得，故常常作為脂質(zhì)體的主要成膜材料。在本發(fā)明中，卵磷脂典型但非限制性的重量百分比為1％、1.2％、1.5％、1.7％、1.9％、2％、2.2％、2.5％、2.6％、2.8％或3％。

膽固醇與卵磷脂是共同構成細胞膜和脂質(zhì)體的基礎物質(zhì)，膽固醇具有調(diào)節(jié)膜流動性的作用，而且一定比例的膽固醇可以穩(wěn)定脂質(zhì)體的化學性質(zhì)，改善脂質(zhì)體分子結構，使得脂質(zhì)體被氧化速率顯著降低，同時能夠改善脂質(zhì)體膜的通透性以及流動性。

在本發(fā)明中，膽固醇典型但非限制性的重量百分比為0.3％、0.4％、0.6％、0.8％、0.9％、1％、1.2％、1.5％、1.7％、1.9％或2％。

另外，由于脂質(zhì)體容易氧化變色，故需要添加抗氧劑以增強其抗氧化能力。在本發(fā)明中，抗氧劑典型但非限制性的重量百分比為0.1％、0.2％、0.25％、0.3％、0.4％、0.6％、0.7％、0.8％、0.9％、1％、1.2％、1.4％、1.5％、1.6％、1.8％或2％。

金屬絡合劑本身具有分散、懸浮作用，使用的目的主要是防止重金屬沉淀、分層等，保證納米銀脂質(zhì)體體系的穩(wěn)定。

在本發(fā)明中，金屬絡合劑典型但非限制性的重量百分比為0.1％、0.2％、0.25％、0.3％、0.4％、0.6％、0.7％、0.8％、0.9％、1％、1.2％、1.4％、1.5％、1.6％、1.8％、2％、2.2％、2.4％、2.6％、2.8％或3.0％。

乳化劑修飾能給脂質(zhì)體帶來一定促進作用，如通過改變表面電荷及親水親脂性、脂質(zhì)膜的特征等，來達到增加包封率，增加穩(wěn)定性，改變體內(nèi)生物過程等目的。

在本發(fā)明中，乳化劑典型但非限制性的重量百分比為2％、3％、4％、4.5％、5％、6％、6.5％、7％、8％、9％或10％。

為減少納米銀脂質(zhì)體之間的團聚，保證納米銀脂質(zhì)體的穩(wěn)定性，需要加入防聚合劑。

在本發(fā)明中，防聚合劑典型但非限制性的重量百分比為1％、1.5％、1.7％、2％、2.2％、2.5％、2.6％、2.8％、3％、3.2％、3.5％、3.8％、4％、4.2％、4.5％、4.8％或5％。

在本發(fā)明中，水典型但非限制性的重量百分比為2％、5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、68％、70％、72％、75％、78％、80％、82％、85％、88％、90％、92％、95％或96％。

在本發(fā)明的一種優(yōu)選實施方式中，所述納米銀脂質(zhì)體主要由以下原料制成：納米銀0.005-30％，卵磷脂1-3％，膽固醇0.3-2％，抗氧劑0.1-2％，金屬絡合劑0.1-3％，乳化劑2-10％，防聚合劑1-5％，月見草油1-10％，透明質(zhì)酸0.1-3％，膠原蛋白0.1-3％，水補齊余量至100％。

納米銀脂質(zhì)體是一種混懸液，在貯存過程中容易發(fā)生聚集、融合，并可能導致所包埋的藥物泄漏。納米銀脂質(zhì)體的物理化學穩(wěn)定性涉及到多個因素，且各個因素之間相互制約，故選取特定的原料組成和含量之間的配比，就必須控制多種因素，以制備穩(wěn)定有效的納米銀脂質(zhì)體。

通過將納米銀脂質(zhì)體的原料組成進一步優(yōu)化，使得各原料組成之間，使得制備的納米銀脂質(zhì)體的穩(wěn)定性更好，穿透細胞膜的能力更強，緩釋作用更持久。

通過向脂質(zhì)體中加入月見草油，使得納米銀脂質(zhì)體中的營養(yǎng)成分更充足。在本發(fā)明中，月見草油典型但非限制性的重量百分比為1％、2％、3％、4％、4.5％、5％、6％、6.5％、7％、8％、9％或10％。

透明質(zhì)酸，又名玻璃酸，是一種獨特的線性大分子酸性黏多糖，將其加入脂質(zhì)體中可以促進包裹的藥物的吸收，提高脂質(zhì)體的穩(wěn)定性，是靶向制劑、緩釋和控釋制劑很好的輔料。

在本發(fā)明中，向納米銀脂質(zhì)體中加入透明質(zhì)酸，可加強納米銀脂質(zhì)體對細胞膜的穿透能力，具有一定的緩釋作用。透明質(zhì)酸典型但非限制性的重量百分比為0.1％、0.2％、0.25％、0.3％、0.4％、0.6％、0.7％、0.8％、0.9％、1％、1.2％、1.4％、1.5％、1.6％、1.8％、2％、2.2％、2.5％、2.6％、2.8％或3％。

為進一步增強納米銀脂質(zhì)體的營養(yǎng)成分，還可以向其添加膠原蛋白。

在本發(fā)明中，膠原蛋白典型但非限制性的重量百分比為0.1％、0.2％、0.25％、0.3％、0.4％、0.6％、0.7％、0.8％、0.9％、1％、1.2％、1.4％、1.5％、1.6％、1.8％、2％、2.2％、2.5％、2.6％、2.8％或3％。

此處還應說明的是，本發(fā)明中所用的水優(yōu)選為去離子水。

在本發(fā)明的一種優(yōu)選實施方式中，所述抗氧劑為丁基羥基茴香醚、2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚、維生素E或維生素C中的一種或至少兩種的組合；

和/或，所述金屬絡合劑為乙二胺四乙酸二鈉、氨三乙酸鈉或聚丙烯酸鈉中的一種或至少兩種的組合。

維生素E是一種脂溶性維生素，又稱生育酚，是最主要的抗氧化劑之一。采用維生素E，或者與維生素C與BHT的協(xié)同作用，可有效抑制脂質(zhì)體中的卵磷脂的氧化。通過對抗氧劑的種類作進一步限定，從而使得脂質(zhì)體的抗氧化能力增強，更穩(wěn)定。

在本發(fā)明的一種優(yōu)選實施方式中，所述乳化劑為司盤80、吐溫80、脂肪酸甘油酯或單硬脂酸甘油酯中的一種或至少兩種的組合；

和/或，所述防聚合劑為聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮或聚二甲基硅氧烷中的一種或至少兩種的組合。

此處需要說明的是，吐溫80的加入可以讓納米銀脂質(zhì)體懸液的包封率和分散性變得更好，加入吐溫80后，藥物除與納米銀脂質(zhì)體相互作用外，還被增容在吐溫80的膠束中，所以包封率有所提高。但是吐溫80的含量不能加入太多，會有一定的生理毒性。

在本發(fā)明的一種優(yōu)選實施方式中，還包括增稠劑，所述增稠劑的重量百分比為1-5％，所述增稠劑為賽比克305、PEG-100硬脂酸酯或漢生膠中的一種或至少兩種的組合；

和/或，還包括增溶劑，所述增溶劑的重量百分比為1-45％，所述增溶劑為乙醇、丙二醇或甘油中的一種或至少兩種的組合。

如需將納米銀脂質(zhì)體制成膏霜狀，可以采用增稠劑對其稠度進行調(diào)節(jié)，以滿足實際所需。在本發(fā)明中，所述增稠劑典型但非限制性的重量百分比為1％、1.5％、2％、2.5％、3％、3.5％、4％、4.5％或5％。

由于納米銀脂質(zhì)體是由油相和水相共同混合制作而成，為增加各相的相容性，故可添加增溶劑，從而使得納米銀脂質(zhì)體整個體系穩(wěn)定性更好。

在本發(fā)明中，所述增溶劑典型但非限制性的重量百分比為1％、3％、5％、6％、8％、10％、12％、15％、18％、20％、22％、25％、28％、30％、32％、35％、38％、40％、42％或45％。

在本發(fā)明的一種優(yōu)選實施方式中，所述卵磷脂從大豆卵磷脂或蛋黃卵磷脂中提純得到，所述卵磷脂中磷脂酰膽堿的含量為50-99％；和/或，還包括硫磺，所述硫磺的重量百分比為0.5-10％。

選擇大豆卵磷脂或蛋黃卵磷脂進行卵磷脂的提取，主要是因為易得且價格低廉。在本發(fā)明中，所述卵磷脂中磷脂酰膽堿典型但非限制性的的含量為50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或99％。

為進一步加強納米銀脂質(zhì)體的殺滅螨蟲及微生物的能力，還可以添加硫磺。在本發(fā)明中，硫磺典型但非限制性的重量百分比為0.5％、0.6％、0.8％、1％、1.5％、2％、2.5％、3％、3.5％、4％、4.5％、5％、5.5％、6％、6.5％、7％、7.5％、8％、8.5％、9％、9.5％或10％。

根據(jù)本發(fā)明的另一個方面，還提供了一種納米銀脂質(zhì)體的制備方法，包括如下步驟：

(1)按照配方量稱取防聚合劑、水、任選地透明質(zhì)酸和任選地膠原蛋白混合，制成水相混合物；

(2)按配方量稱取納米銀、卵磷脂、膽固醇、抗氧劑、金屬絡合劑、乳化劑、任選地硫磺、任選地月見草油和任選地增溶劑混合，制成油相混合物；

(3)將步驟(2)所得的油相混合物加入到步驟(1)中的水相混合物后，均質(zhì)，得到納米銀初乳；

(4)將步驟(3)所得的納米銀初乳移至超高壓微射流設備中，進行超高壓微射流循環(huán)處理，得到納米銀脂質(zhì)體。

超高壓微射流設備是結合了高壓射流技術、撞擊流技術和傳統(tǒng)高壓均質(zhì)技術，利用高壓氣體或液壓泵產(chǎn)生的高壓將物料運送至振蕩反應器中，高速流體在微孔道中發(fā)生剪切作用并分散成多股高速流體，進一步在撞擊腔內(nèi)發(fā)生高速撞擊，流體的動能瞬間轉化，產(chǎn)生巨大壓力降后形成高達100～300MPa的靜壓力，同時振蕩芯片在高速撞擊過程中產(chǎn)生高頻超聲波作用，從而使得物料發(fā)生強剪切粉碎、高速撞擊、氣蝕、振蕩和膨化等作用，可實現(xiàn)顆粒的細化、乳化、均質(zhì)和改性的效果。

該制備方法通過將各原料混合均質(zhì)后采用超高壓微射流納米設備進行超高壓微射流循環(huán)處理，一步法即可得到納米銀脂質(zhì)體，其中納米銀以納米銀單質(zhì)的形式存在，相比采用傳統(tǒng)的化學方法使用硝酸銀、防腐劑、氯仿、乙醚及其他化學溶劑制備的納米銀離子，納米銀單質(zhì)不會與生物體內(nèi)多種生物活性物質(zhì)結合而沉積，不會產(chǎn)生毒性，降低皮膚過敏率，能夠解決傳統(tǒng)銀制劑中氯仿、乙醚、防腐劑等殘留物可能對細胞和環(huán)境產(chǎn)生危害物質(zhì)的問題。

該制備方法簡單，操作容易，整個生產(chǎn)過程綠色環(huán)保，可工業(yè)化大批量生產(chǎn)。

在本發(fā)明的一種優(yōu)選實施方式中，在步驟(2)中，所述混合的溫度為40-60℃；

和/或，在步驟(3)中，所述均質(zhì)的轉速為3000-10000rpm，均質(zhì)的時間為1-5min。

在本發(fā)明中，步驟(2)所述混合過程中典型但非限定性的溫度40℃、42℃、45℃、47℃、49℃、50℃、52℃、54℃、55℃、58℃或60℃。

步驟(3)中，所述均質(zhì)過程中典型但非限定性的轉速為3000rpm、3500rpm、4000rpm、4500rpm、5000rpm、5500rpm、6000rpm、6500rpm、7000rpm、7500rpm、8000rpm、8500rpm、9000rpm、9500rpm或10000rpm。

所述均質(zhì)過程中典型但非限定性的時間為1min、2min、3min、4min或5min。

此處需要說明的是，在均質(zhì)過程中，均質(zhì)轉速和均質(zhì)時間需要控制在合理范圍內(nèi)，均質(zhì)轉速過低，均質(zhì)時間較短時，可能會造成水油相混合不均勻；均質(zhì)轉速過高，均質(zhì)時間較長時，則會使得納米銀初乳穩(wěn)定性較差，還可能造成包埋的藥物的泄露。

在本發(fā)明的一種優(yōu)選實施方式中，在步驟(4)中，超高壓微射流循環(huán)處理次數(shù)為1-3次，處理溫度為0-4℃，處理壓力為150-250MPa。

為降低進一步細化納米銀脂質(zhì)體的粒徑，采用超高壓微射流設備對脂質(zhì)體進行處理。在超高壓微射流循環(huán)處理過程中，循環(huán)次數(shù)不宜太多，否則會使得磷脂結構破壞，造成藥物的滲漏。處理壓力的選取對最終納米銀脂質(zhì)體的粒徑以及形貌有著很大的影響，處理壓力不宜太低，太低的話脂質(zhì)體的粒徑較大，且會存在較大的聚集體；處理壓力也不宜太高，否則會影響脂質(zhì)體對納米銀的包封率。

在本發(fā)明中，超高壓微射流循環(huán)處理典型但非限定性的次數(shù)為1次、2次或3次。

在本發(fā)明中，超高壓微射流循環(huán)處理典型但非限定性的溫度為0℃、1℃、2℃、3℃或4℃。

在本發(fā)明中，超高壓微射流循環(huán)典型但非限定性的處理壓力為150MPa、160MPa、170MPa、180MPa、190MPa、200MPa、205MPa、210MPa、220MPa、225MPa、230MPa、235MPa、240MPa、245MPa或250MPa。

和/或，步驟(4)之后，還包括將步驟(4)所得的納米銀脂質(zhì)體與配方量的增稠劑混合攪拌，制成膏霜狀納米銀脂質(zhì)體。

通過對制備方法中涉及的各參數(shù)以及各參數(shù)之間的特定的配合關系的研究，從而對各參數(shù)進行確定，進而保證所制備出的納米銀脂質(zhì)體具有良好的質(zhì)量以及功效。

此外，本發(fā)明還提供了一種納米銀脂質(zhì)體的應用，所述納米銀脂質(zhì)體制作成適宜的劑型應用于日用品或者醫(yī)藥領域。

所述納米銀脂質(zhì)體通過納米銀與脂質(zhì)體的協(xié)同作用，使得其在日用品或者醫(yī)藥產(chǎn)品中可以更安全高效的進入生物細胞內(nèi)部，從而起到抗菌消炎的作用。

本發(fā)明中的納米銀脂質(zhì)體中納米銀的最高濃度可達300000PPM，納米銀脂質(zhì)體化學性質(zhì)穩(wěn)定，具有雙分子特性，可以應用到日用品領域，比如抗菌消炎的面膜、乳液、精華液、面霜、粉底、消毒液、洗手液、洗腳液、洗臉液、消毒皂、洗衣液、洗衣粉、洗發(fā)液、洗發(fā)膏、沐浴露、牙膏、漱口水、濕紙巾、衛(wèi)生巾等，或者也可以應用于食品防腐劑領域等。

由于納米銀脂質(zhì)體對細菌、真菌、孢子、疥螨等感染引起的痤瘡、疥瘡、酒糟鼻、濕疹、燒傷、燙傷以及陰道霉菌感染等皮膚疾病有明顯療效，故本發(fā)明中的納米銀脂質(zhì)體還可以應用到醫(yī)藥衛(wèi)生領域，如醫(yī)用抗菌消炎藥膏、藥粉、消毒殺菌敷料、器械消毒等醫(yī)藥衛(wèi)生領域；或者應用到醫(yī)藥檢驗檢疫領域，如放射性標記物、靶向藥物治療等。

下面結合具體實施例和對比例，對本發(fā)明作進一步說明。

實施例1

本發(fā)明提供了一種納米銀脂質(zhì)體，按重量百分比計，由以下原料制成：納米銀0.005％，卵磷脂3％，膽固醇1％，維生素E 0.5％，乙二胺四乙酸二鈉0.1％，SP80 2％，TW80 2％，聚乙二醇1％，月見草油6％，透明質(zhì)酸0.5％，膠原蛋白0.1％，甘油8％，乙醇2％，賽比克305 1％，漢生膠1％，水補齊余量至100％，其中，納米銀在總原料中的濃度為50PPM。

實施例2

實施例1的制備方法，包括如下步驟：

(1)按配方稱取聚乙二醇、透明質(zhì)酸、膠原蛋白和水，溫度控制在65℃之間，制成水相。

(2)按配方稱取納米銀、卵磷脂、膽固醇、維生素E、乙二胺四乙酸二鈉、SP80、TW80、月見草油、乙醇、甘油在40℃環(huán)境下混合，制成油相。

(3)將步驟(2)所得的油相加入步驟1所得的水相，用6000rmp的均質(zhì)機均質(zhì)4min，獲得納米銀初乳。

(4)將步驟(3)所得的納米銀初乳移至超高壓微射流設備中，打開循環(huán)冷卻裝置，保證超高壓微射流設備在0-4℃環(huán)境下工作，在220MPa進行超高壓微射循環(huán)處理2次，制成乳液形式的納米銀脂質(zhì)體。

將步驟(4)所得的乳液形式的納米銀脂質(zhì)體用攪拌機攪拌，用配方量的賽比克305和漢生膠調(diào)制成膏霜狀即可。

實施例3

本發(fā)明提供了一種納米銀脂質(zhì)體，按重量百分比計，由以下原料制成：納米銀0.05％，卵磷脂3％，膽固醇1％，維生素E 0.5％，乙二胺四乙酸二鈉0.1％，SP80 2％，TW80 2％，聚乙二醇1％，月見草油6％，透明質(zhì)酸0.5％，膠原蛋白0.1％，甘油8％，乙醇2％，賽比克305 1％，漢生膠1％，水補齊余量至100％，其中，納米銀在總原料中的濃度為500PPM。

實施例4

實施例3的制備方法同實施例2，此處不再贅述。

實施例5

本發(fā)明提供了一種納米銀脂質(zhì)體，按重量百分比計，由以下原料制成：納米銀0.5％，卵磷脂3％，膽固醇1％，維生素E 0.5％，乙二胺四乙酸二鈉0.1％，SP80 2％，TW80 2％，聚乙二醇1％，月見草油6％，透明質(zhì)酸0.5％，膠原蛋白0.1％，甘油8％，乙醇2％，賽比克305 1％，漢生膠1％，水補齊余量至100％，其中，納米銀在總原料中的濃度為5000PPM。

實施例6

實施例5的制備方法同實施例2，此處不再贅述。

實施例7

本發(fā)明提供了一種納米銀脂質(zhì)體，按重量百分比計，由以下原料制成：納米銀5％，卵磷脂3％，膽固醇1％，維生素E 0.5％，乙二胺四乙酸二鈉0.1％，SP80 2％，TW80 2％，聚乙二醇1％，月見草油6％，透明質(zhì)酸0.5％，膠原蛋白0.1％，甘油8％，乙醇2％，賽比克305 1％，漢生膠1％，水補齊余量至100％，其中，納米銀在總原料中的濃度為50000PPM。

實施例8

實施例7的制備方法同實施例2，此處不再贅述。

實施例9

本發(fā)明提供了一種納米銀脂質(zhì)體，按重量百分比計，由以下原料制成：納米銀10％，卵磷脂3％，膽固醇1％，維生素E 0.5％，乙二胺四乙酸二鈉0.1％，SP80 2％，TW80 2％，聚乙二醇1％，月見草油6％，透明質(zhì)酸0.5％，膠原蛋白0.1％，甘油8％，乙醇2％，賽比克305 1％，漢生膠1％，水補齊余量至100％，其中，納米銀在總原料中的濃度為100000PPM。

實施例10

實施例9的制備方法同實施例2，此處不再贅述。

實施例11

本發(fā)明提供了一種納米銀脂質(zhì)體，按重量百分比計，由以下原料制成：納米銀0.05％，卵磷脂3％，膽固醇1％，維生素E 0.5％，乙二胺四乙酸二鈉0.1％，SP80 2％，TW80 2％，聚乙二醇1％，水補齊余量至100％，其中，納米銀在總原料中的濃度為500PPM。

實施例12

實施例11的制備方法，包括如下步驟：

(1)按配方稱取聚乙二醇和水，溫度控制在65℃之間，制成水相。

(2)按配方稱取納米銀、卵磷脂、膽固醇、維生素E、乙二胺四乙酸二鈉、SP80和TW80在40℃環(huán)境下混合，制成油相。

(3)將步驟(2)所得的油相加入步驟1所得的水相，用6000rmp的均質(zhì)機均質(zhì)4min，獲得納米銀初乳。

(4)將步驟(3)所得的納米銀初乳移至超高壓微射流設備中，打開循環(huán)冷卻裝置，保證設備在0-4℃環(huán)境下工作，在220MPa進行超高壓微射循環(huán)處理2次，制成乳液形式的納米銀脂質(zhì)體。

實施例13

本發(fā)明提供了一種納米銀脂質(zhì)體，按重量百分比計，由以下原料制成：納米銀0.5％，卵磷脂3％，膽固醇1％，維生素E 0.5％，乙二胺四乙酸二鈉0.1％，SP80 2％，TW80 2％，聚乙二醇1％，月見草油6％，透明質(zhì)酸0.5％，膠原蛋白0.1％，甘油8％，乙醇2％，賽比克305 1％，漢生膠1％，水補齊余量至100％，其中，納米銀在總原料中的濃度為5000PPM。

實施例14

實施例13的制備方法步驟(4)中超高壓微射循環(huán)處理次數(shù)為1次，其余與實施例2一致，此處不再贅述。

實施例15

本發(fā)明提供了一種納米銀脂質(zhì)體，按重量百分比計，由以下原料制成：納米銀0.5％，卵磷脂3％，膽固醇1％，維生素E 0.5％，乙二胺四乙酸二鈉0.1％，SP80 2％，TW80 2％，聚乙二醇1％，月見草油6％，透明質(zhì)酸0.5％，膠原蛋白0.1％，甘油8％，乙醇2％，賽比克305 1％，漢生膠1％，水補齊余量至100％，其中，納米銀在總原料中的濃度為5000PPM。

實施例16

實施例15的制備方法步驟(4)中超高壓微射循環(huán)處理壓力為250MPa，其余與實施例2一致，此處不再贅述。

實施例17

本發(fā)明提供了一種納米銀脂質(zhì)體，按重量百分比計，由以下原料制成：納米銀0.5％，卵磷脂1％，膽固醇2％，丁基羥基茴香醚2％，聚丙烯酸鈉3％，脂肪酸甘油酯9％，聚乙烯吡咯烷酮4％，硫磺9％，月見草油9％，透明質(zhì)酸2％，膠原蛋白2％，丙二醇20％，漢生膠4％，水補齊余量至100％，其中，納米銀在總原料中的濃度為5000PPM。

實施例18

實施例17的制備方法，包括如下步驟：

(1)按配方稱取聚乙烯吡咯烷酮、透明質(zhì)酸、膠原蛋白和水，溫度控制在85℃之間，制成水相。

(2)按配方稱取納米銀、卵磷脂、膽固醇、丁基羥基茴香醚、聚丙烯酸鈉、脂肪酸甘油酯、硫磺、月見草油、丙二醇在40℃環(huán)境下混合，制成油相。

(3)將步驟(2)所得的油相加入步驟1所得的水相，用9000rmp的均質(zhì)機均質(zhì)2min，獲得納米銀初乳。

(4)將步驟(3)所得的納米銀初乳移至超高壓微射流設備中，打開循環(huán)冷卻裝置，保證設備在0-4℃環(huán)境下工作，在150MPa進行超高壓微射循環(huán)處理3次，制成乳液形式的納米銀脂質(zhì)體。

將步驟(4)所得的乳液形式的納米銀脂質(zhì)體用攪拌機攪拌，用配方量的漢生膠調(diào)制成膏霜狀即可。

實施例19

本發(fā)明提供了一種納米銀脂質(zhì)體，按重量百分比計，由以下原料制成：納米銀30％，卵磷脂2％，膽固醇0.3％，2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚1％，氨三乙酸鈉1％，單硬脂酸甘油酯7％，聚二甲基硅氧烷3％，硫磺0.5％，月見草油1％，透明質(zhì)酸3％，膠原蛋白3％，甘油40％，PEG-100硬脂酸酯5％，水補齊余量至100％，其中，納米銀在總原料中的濃度為300000PPM。

實施例20

實施例19的制備方法，包括如下步驟：

(1)按配方稱取聚二甲基硅氧烷、透明質(zhì)酸、膠原蛋白和水，溫度控制在75℃之間，制成水相。

(2)按配方稱取納米銀、卵磷脂、膽固醇、2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚、氨三乙酸鈉、單硬脂酸甘油酯、硫磺、月見草油和甘油在40℃環(huán)境下混合，制成油相。

(3)將步驟(2)所得的油相加入步驟1所得的水相，用3000rmp的均質(zhì)機均質(zhì)5min，獲得納米銀初乳。

(4)將步驟(3)所得的納米銀初乳移至超高壓微射流設備中，打開循環(huán)冷卻裝置，保證設備在0-4℃環(huán)境下工作，在200MPa進行超高壓微射循環(huán)處理1次，制成乳液形式的納米銀脂質(zhì)體。

將步驟(4)所得的乳液形式的納米銀脂質(zhì)體用攪拌機攪拌，用配方量的PEG-100硬脂酸酯調(diào)制成膏霜狀即可。

實施例21

本發(fā)明提供了一種納米銀脂質(zhì)體，按重量百分比計，由以下原料制成：納米銀0.005％，卵磷脂3％，膽固醇1％，維生素E 0.5％，乙二胺四乙酸二鈉0.1％，SP80 2％，TW80 2％，聚乙二醇1％，月見草油6％，透明質(zhì)酸0.5％，膠原蛋白0.1％，甘油8％，乙醇2％，硫磺3％，賽比克305 1％，漢生膠1％，水補齊余量至100％，其中，納米銀在總原料中的濃度為500PPM。

實施例22

實施例21的制備方法與實施例2的制備方法一樣，只是步驟(2)中多加了配方量的硫磺，其余則不再贅述。

對比例1

本發(fā)明還提供了一種脂質(zhì)體，按重量百分比計，由以下原料制成：卵磷脂3％，膽固醇1％，維生素E 0.5％，乙二胺四乙酸二鈉0.1％，SP80 2％，TW80 2％，硫磺3％，月見草油6％，透明質(zhì)酸0.5％，膠原蛋白0.1％，甘油8％， 乙醇2％，賽比克305 1％，漢生膠1％，水補齊余量至100％。

對比例2

對比例1的制備方法同實施例2，此處不再贅述。

實驗例1

為了驗證納米銀脂質(zhì)體的殺菌抗菌功能，對實施例1-21及對比例1做了大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和白色念珠菌的殺菌檢測實驗，檢測依據(jù)為《消毒技術規(guī)范》(2002版)消毒劑殺微生物試驗2.1.1.7細菌定量滅殺試驗和2.1.1.9真菌定量滅殺試驗，測試時間為5 min，具體檢測數(shù)據(jù)見下表1-3：

表1為各實施例和對比例對大腸桿菌的殺菌檢測數(shù)據(jù)

表2為各實施例和對比例對金黃色葡萄球菌的殺菌檢測數(shù)據(jù)

表3為各實施例和對比例對白色念珠菌的殺菌檢測數(shù)據(jù)

由上表可以看出，隨著納米銀的濃度增加，納米銀脂質(zhì)體的殺菌抗菌效果增強。尤其是當納米銀在總原料中的濃度為300000PPM(對應實施例19)時，納米銀脂質(zhì)體展現(xiàn)出優(yōu)異的殺菌效果。但是考慮到實際成本問題，將納米銀的濃度控制在50-5000PPM比較好，此時殺菌效果和實際成本都處于合理的水平。

實施例21為實施例1的對照實驗，實施例21較實施例1多添加了硫磺，可以看出實施例21的殺菌效果由于實施例1的殺菌效果。由此可以看出，硫磺的加入使得納米銀脂質(zhì)體的殺菌抗菌能力有了一定的提升。

對實施例5的納米銀脂質(zhì)體做了電鏡和激光粒度檢測，電鏡圖如圖1所示。由圖中可以看出，納米銀脂質(zhì)體的粒徑在300-400nm之間，納米銀脂質(zhì)體表面還吸附有若干個納米銀顆粒。圖4為實施例5的納米銀脂質(zhì)體的激光粒度檢測圖，從圖中可以看出，納米銀脂質(zhì)體的平均粒徑在358nm左右，這一結果與圖1中的結果一致。圖2為附著(或包裹)在納米銀脂質(zhì)體表面(細胞中)中的納米銀的電鏡圖，外觀圓潤，分散均勻，粒徑在10-60nm之間。

圖3為對比例1脂質(zhì)體的電鏡圖，由于未添加防聚合劑，脂質(zhì)體中的磷脂自然聚合，形成直徑較大的脂質(zhì)體團聚物，直徑在2-10um。可見，防聚合劑的加入可有效較少脂質(zhì)體之間的團聚，進而減小脂質(zhì)體的平均粒徑。

實驗例2

為了衡量納米銀脂質(zhì)體急性經(jīng)口毒性大小，對實施例1-20進行了急性經(jīng)口毒性試驗，檢測依據(jù)為《消毒技術規(guī)范》(2002年版)中的急性經(jīng)口毒性試驗，雌、雄小鼠的劑量分組為5000mg/kg，各實施例的急性經(jīng)口毒性數(shù)據(jù)如表4所示：

表4各實施例納米銀脂質(zhì)體急性經(jīng)口毒性檢測數(shù)據(jù)

由上表可以看出，給予納米銀脂質(zhì)體受試物后，所有受試動物于觀察期內(nèi)未見異常反應，無死亡。雌、雄小鼠經(jīng)口急性毒性最大耐受劑大于5000mg/kg。根據(jù)《消毒技術規(guī)范》(2002年版)中的急性毒性分級標準，納米銀脂質(zhì)體屬于實際無毒物質(zhì)。

最后應說明的是：以上各實施例僅用以說明本發(fā)明的技術方案，而非對其限制；盡管參照前述各實施例對本發(fā)明進行了詳細的說明，本領域的普通技術人員應當理解：其依然可以對前述各實施例所記載的技術方案進行修改，或者對其中部分或者全部技術特征進行等同替換；而這些修改或者替換，并不使相應技術方案的本質(zhì)脫離本發(fā)明各實施例技術方案的范圍。