本發(fā)明涉及甲磺酸伊馬替尼的制劑，具體涉及一種甲磺酸伊馬替尼脂質(zhì)體制劑。
背景技術(shù)：
：甲磺酸伊馬替尼屬于苯胺喹啉類(lèi)化合物，是由諾華公司研發(fā)，全球第一個(gè)上市的腫瘤發(fā)生相關(guān)信號(hào)傳導(dǎo)抑制劑，臨床用于治療費(fèi)城染色體陽(yáng)性的慢性髓性白血病(Ph+CML)的慢性期、加速期或急變期，治療不能切除和/或發(fā)生轉(zhuǎn)移的惡性胃腸道間質(zhì)瘤(GIST)的成人患者。甲磺酸伊馬替尼是選擇性酪氨酸激酶抑制劑。其具體作用機(jī)制是：伊馬替尼在體內(nèi)外均可在細(xì)胞水平上抑制Bcr-Abl酪氨酸激酶，能選擇性抑制Bcr-Abl陽(yáng)性細(xì)胞系細(xì)胞、費(fèi)城染色體陽(yáng)性(Ph+)的慢性髓性白血病(CML)和急性淋巴細(xì)胞白血病患者的新鮮細(xì)胞的增殖，以及誘導(dǎo)其凋亡。此外，伊馬替尼還可抑制血小板衍化生長(zhǎng)因子(PDGF)、干細(xì)胞因子(SCF)，從而抑制由PDGF和SCF介導(dǎo)的細(xì)胞行為。該品種于2001年5月首先在美國(guó)上市，隨后進(jìn)入歐洲、澳大利亞、日本、加拿大等多國(guó)市場(chǎng)，并于2002年在中國(guó)上市。其商品名為“格列衛(wèi)”(Glivec)，劑型為普通膠囊和普通薄膜包衣片。普通膠囊和普通薄膜衣片雖然制備簡(jiǎn)單，但由于其不具有對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性，吸收入血后不可避免地會(huì)對(duì)正常細(xì)胞有危害作用，因此開(kāi)發(fā)合適的劑型以降低其毒副作用是非常必要的。脂質(zhì)體作為一種優(yōu)良的藥物載體，具有靶向性、生物相容性、提高藥物穩(wěn)定性和降低藥物毒性等優(yōu)點(diǎn)。因此急需一種能夠提高藥物穩(wěn)定性和降低藥物毒性的制劑。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是提供一種包封率高、穩(wěn)定性好、成本低、毒副作用小的甲磺酸伊馬替尼脂質(zhì)體制劑及其制備方法。一種甲磺酸伊馬替尼的脂質(zhì)體制劑，甲磺酸伊馬替尼脂質(zhì)體含空白脂質(zhì)體和甲磺酸伊馬替尼原藥；其中，空白脂質(zhì)體為磷脂、膽固醇、親水性高分子脂質(zhì)衍生物、枸櫞酸-枸櫞酸鈉溶液和堿性物質(zhì)；甲磺酸伊馬替尼與磷脂的質(zhì)量比為1:8～1:30，膽固醇與磷脂的質(zhì)量比為1:1～1:8，親水性脂質(zhì)衍生物與磷脂的摩爾比1:30～1:10。其中，甲磺酸伊馬替尼與磷脂的質(zhì)量比為1:8～30，所述甲磺酸伊馬替尼脂質(zhì)體還包括助劑，助劑添加量為脂質(zhì)體總重量的2％～10％；其中，助劑包括葡萄糖、甘露醇、蔗糖等。具體，甲磺酸伊馬替尼脂質(zhì)體中還可加入以下助劑：(1)糖類(lèi)，如葡萄糖，乳糖，麥芽糖等。(2)多元醇類(lèi)，如甘露醇，丙三醇，山梨醇等。(3)氨基酸類(lèi)，如精氨酸，賴(lài)氨酸等。(4)表面活性劑類(lèi)，如吐溫80等。將以上助劑加入脂質(zhì)體混懸液中，采用常規(guī)冷凍干燥方法制備凍干粉針劑，制備方法可參見(jiàn)《脂質(zhì)體的冷凍及冷凍干燥》(林東海，顧學(xué)裘，高曉燕，中國(guó)藥學(xué)雜志，1990,25(2):71-75)。所述甲磺酸伊馬替尼脂質(zhì)體以及至少一種藥學(xué)上可接受的稀釋劑或載體。所述磷脂選自天然磷脂、半合成磷脂、合成磷脂中的一種或多種；如大豆卵磷脂、蛋黃卵磷脂、磷脂酰甘油、磷脂酸、心肌磷脂、鞘磷脂、磷脂酸絲氨酸、磷脂酰肌醇、磷脂酰乙醇胺、氫化大豆卵磷脂、氫化蛋黃卵磷脂、二硬脂酰磷脂酰膽堿，二月桂酰磷脂酰膽堿、二棕櫚酰磷脂酰膽堿、二油酰磷脂酰膽堿、二肉豆蔻酰磷脂酰膽堿、二癸酰磷脂酰膽堿、二辛酰磷脂酰膽堿、二己酰磷脂酰膽堿、二硬脂酰磷脂酰甘油及其鹽，二棕櫚酰磷脂酰甘油及其鹽，L-α-二肉豆蔻酰磷脂酰甘油及其鹽，二癸酰磷脂酰甘油、二辛酰磷脂酰甘油、二己酰磷脂酰甘油、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺，二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺、二油酰磷脂酰乙醇胺，二肉豆蔻酰磷脂酰乙醇胺、雙二肉豆蔻酰磷脂酰甘油及其鹽、二硬脂酰磷脂酰肌醇、二棕櫚酰磷脂酰肌醇、二油酰磷脂酰肌醇、二月桂酰磷脂酰肌醇、二肉豆蔻酰磷脂酰肌醇、棕櫚酰油酰磷脂酰膽堿、棕櫚酰亞油酰磷脂酰膽堿、硬脂酰油酰磷脂酰膽堿、硬脂酰亞油酰磷脂酰膽堿、硬脂?；ㄉ南Ａ字Ｄ憠A。優(yōu)選選自氫化大豆卵磷脂、二硬脂酰磷脂酰膽堿、氫化蛋黃卵磷脂、棕櫚酰磷脂酰膽堿中的一種或多種；親水性聚合物脂類(lèi)物質(zhì)選自DSPE-PEG(聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺)、DPPE-PEG(聚乙二醇-二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺)、DMPE-PEG(聚乙二醇-二肉豆蔻酰磷脂酰乙醇胺)、DLPE-PEG(聚乙二醇-二月桂酰磷脂酰乙醇胺)，DSPG-PEG(聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰甘油)，CHOL-PEG(聚乙二醇-膽固醇)，DSPE-PVP(聚維酮-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺)，DSPG-PVP(聚維酮-二硬脂酰磷脂酰甘油)，CHOL-PVP(聚維酮-膽固醇)，吐溫80、吐溫20或聚乙二醇維生素E琥珀酸酯中的一種或多種；優(yōu)選所述親水性高分子脂質(zhì)衍生物選自DSPE-PEG(乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺)、DPPE-PEG(乙二醇-二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺)、DMPE-PEG(乙二醇-二肉豆蔻酰磷脂酰乙醇胺)、DOPE-PEG(聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰甘油)，CHOL-PEG(聚乙二醇-膽固醇)中的一種或多種；最優(yōu)選聚乙二醇-二磷脂酰乙醇胺衍生物；PEG的分子量為100～100000，優(yōu)選1000～5000。所述堿性物質(zhì)選自碳酸鹽類(lèi)、磷酸鹽類(lèi)、磷酸鹽緩沖液、氫氧化鈉、胺丁三醇、葡甲氨、堿性氨基酸中的一種或幾種；所述磷酸鹽緩沖液選自濃度為50～600mmol·L-1的磷酸鈉-磷酸溶液、磷酸氫二鈉-磷酸溶液、磷酸鈉-磷酸二氫鈉溶液、磷酸氫二鈉-磷酸二氫鈉溶液中的一種或多種。所述的堿性物質(zhì)，可以是碳酸鹽類(lèi)、磷酸鹽類(lèi)、磷酸鹽緩沖液、氫氧化鈉、胺丁三醇、葡甲氨、堿性氨基酸，其中優(yōu)選磷酸鹽緩沖液類(lèi)。一種甲磺酸伊馬替尼的脂質(zhì)體制劑的制備方法，其特征在于，(1)制備空白脂質(zhì)體：按上述比例，將經(jīng)溶解的磷脂、膽固醇和親水性高分子脂質(zhì)衍生物混合均勻(其中溶解磷脂、膽固醇和親水性高分子脂質(zhì)衍生物可采用有機(jī)溶劑，有機(jī)溶劑目的僅是溶解，不參見(jiàn)反應(yīng)，有機(jī)溶劑可選無(wú)水乙醇)；而后再加入上述體系中添加枸櫞酸-枸櫞酸鈉緩沖液(pH4.0)至其終濃度達(dá)100～500mmol·L-1，55～65℃水浴攪拌，得空白脂質(zhì)體初品；將初品破碎處理，再通過(guò)濾膜反復(fù)過(guò)濾，即得空白脂質(zhì)體混懸液；(2)制備具有跨膜pH梯度的脂質(zhì)體：通過(guò)堿性物質(zhì)調(diào)節(jié)空白脂質(zhì)體混懸液外水相pH調(diào)節(jié)至6.5～9.5，得到具有跨膜pH梯度的空白脂質(zhì)體；(3)制備甲磺酸伊馬替尼脂質(zhì)體：將具有跨膜pH梯度的空白脂質(zhì)體與甲磺酸伊馬替尼原藥按1:4～1:30質(zhì)量比混合，于40～80℃孵育1～60min，得甲磺酸伊馬替尼脂質(zhì)體。進(jìn)一步的說(shuō)，甲磺酸伊馬替尼脂質(zhì)體注射劑的制備方法，包含下列步驟：(1)制備空白脂質(zhì)體：將處方量的磷脂、膽固醇和親水性高分子脂質(zhì)衍生物溶于無(wú)水乙醇；注入一定量枸櫞酸-枸櫞酸鈉緩沖液(pH4.0)，55～65℃水浴攪拌，得空白脂質(zhì)體初品；將初品以超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)處理后，再依次通過(guò)0.8、0.45μm微孔濾膜3次，即得空白脂質(zhì)體混懸液；(2)制備具有跨膜pH梯度的脂質(zhì)體：在空白脂質(zhì)體混懸液中加入一定量的堿性物質(zhì)調(diào)節(jié)其pH至一定值，得到具有跨膜pH梯度的空白脂質(zhì)體；(3)制備甲磺酸伊馬替尼脂質(zhì)體：將梯度脂質(zhì)體與藥物溶液以一定質(zhì)量比混合，于一定溫度下孵育一定時(shí)間，冰水浴終止載藥，即得藥物脂質(zhì)體。上述空白脂質(zhì)體還可采用多種適當(dāng)?shù)姆椒▉?lái)制備，包括：薄膜分散法、逆向蒸發(fā)法、注入法、微射流分散法、勻質(zhì)機(jī)處理法、超聲波分散法、冷凍干燥法、擠出法、凍融法等。較優(yōu)的，可以選用薄膜分散法、逆向蒸發(fā)法、微射流分散法、注入法；作為具體的實(shí)施例，我們選用薄膜分散法、擠出法、注入法；其中效果最優(yōu)的實(shí)施例采用反向乙醇注入法。所述甲磺酸伊馬替尼脂質(zhì)體中再添加助劑，而后通過(guò)冷凍干燥的方式即得到甲磺酸伊馬替尼脂質(zhì)體凍干粉。上述反應(yīng)過(guò)程中優(yōu)選條件為，所述枸櫞酸-枸櫞酸鈉緩沖液至終濃度達(dá)200～400mmol·L-1；所述調(diào)節(jié)外水相pH至7～9；所述藥物脂質(zhì)比為1:8～1:20；所述孵育溫度為50℃～70℃，時(shí)間為3min～30min。本發(fā)明甲磺酸伊馬替尼脂質(zhì)體中加入膽固醇，調(diào)節(jié)脂質(zhì)體雙分子膜的流動(dòng)性，提高脂質(zhì)體穩(wěn)定性。同時(shí)，再加入親水性脂質(zhì)衍生物，使脂質(zhì)體表面暴露出一些親水性的多羥基基團(tuán)，減少與血漿中蛋白、調(diào)理素的作用，從而增加其在血液中的穩(wěn)定性。為了增加脂質(zhì)體藥物的靶向性，膜材料中尚可以加入特定抗體或配體，如各種單克隆抗體、轉(zhuǎn)鐵蛋白配體、葉酸配體、半乳糖配體、葡萄糖配體、白蛋白，尚包括細(xì)胞膜穿透肽脂質(zhì)衍生物。本發(fā)明在制備過(guò)程中甲磺酸伊馬替尼可采用“離子梯度法”來(lái)包裹到空白脂質(zhì)體中，離子梯度法是通過(guò)脂質(zhì)體雙分子層內(nèi)外離子的濃度差來(lái)產(chǎn)生動(dòng)力使藥物裝載進(jìn)入脂質(zhì)體內(nèi)水相的，這些離子包括Na+、K+、NH4+、H+等，使用H+時(shí)的方法稱(chēng)作“pH梯度法”。本發(fā)明采用pH梯度法制備的甲磺酸伊馬替尼脂質(zhì)體，可以獲得大于90％的包封率，甚至達(dá)到100％，且不受脂質(zhì)體膜材料和脂質(zhì)體粒徑影響，工藝重現(xiàn)性好，制劑穩(wěn)定，非常適合于工業(yè)化大生產(chǎn)。本發(fā)明的帶來(lái)的有益結(jié)果：本發(fā)明的脂質(zhì)體的粒徑置于50nm～200nm之間，不同膜材料制備的藥物脂質(zhì)體包封率可達(dá)95％以上，甚至達(dá)到100％，工藝穩(wěn)定，重現(xiàn)性好。本發(fā)明將甲磺酸伊馬替尼制備成脂質(zhì)體，以期達(dá)到增強(qiáng)適應(yīng)性，降低藥物毒性的目的。因?yàn)槟[瘤細(xì)胞生長(zhǎng)速度快，其血管間隙可以達(dá)到100～780nm，而正常血管內(nèi)皮細(xì)胞之間的間隙通常在2nm左右。因此粒度在200nm以下的脂質(zhì)體只要在血液中的循環(huán)時(shí)間足夠長(zhǎng)，就可以利用腫瘤組織的高滲透長(zhǎng)滯留效應(yīng)(Enhancedpermeabilityandretentioneffect，簡(jiǎn)稱(chēng)EPR效應(yīng))被動(dòng)聚集在腫瘤組織，實(shí)現(xiàn)靶向腫瘤的目的。本發(fā)明甲磺酸伊馬替尼脂質(zhì)體制劑的制備工藝顯著提高了脂質(zhì)體包封率，又具有長(zhǎng)循環(huán)特性，可利用腫瘤組織的EPR效應(yīng)，達(dá)到靶向腫瘤組織、增強(qiáng)抗腫瘤療效的目的。本發(fā)明的技術(shù)方案是根據(jù)脂質(zhì)體的特性，以磷脂和膽固醇為膜材制備空白脂質(zhì)體，處方中還加入親水性脂質(zhì)衍生物，以提高脂質(zhì)體穩(wěn)定性、降低粒徑，采用pH梯度法裝載藥物，藥物包封率高達(dá)95％以上，制劑穩(wěn)定，工藝重現(xiàn)性好。具體實(shí)施方式以下通過(guò)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步闡明。應(yīng)當(dāng)理解，本發(fā)明的實(shí)施并不局限于下面的實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明所做的任何形式上的變通和/或改變都將落入本發(fā)明保護(hù)范圍。實(shí)施例中所用各成分的簡(jiǎn)稱(chēng)如下：實(shí)施例1制備空白脂質(zhì)體：將處方量的HSPC、CH、PEG-DSPE(PEG分子量為2000)，以10mL無(wú)水乙醇于55℃溶解；注入預(yù)熱至相同溫度的水化介質(zhì)，孵育10min，得脂質(zhì)體初品；將初品經(jīng)200W超聲初步混合處理2min后，400W超聲分散4min(工作1s，間歇1s)，再依次通過(guò)0.8、0.45、0.22μm的微孔濾膜，即得空白脂質(zhì)體。制備藥物脂質(zhì)體：取一定量空白脂質(zhì)體，加入適量磷酸鈉-磷酸緩沖液(濃度為100mmol·L-1)調(diào)節(jié)pH至7.0，以藥脂比1:10(w/w)與甲磺酸伊馬替尼溶液的針劑。對(duì)其測(cè)得包封率為98.6％，粒徑為124nm。同時(shí)在上述獲得針劑的基礎(chǔ)上按照現(xiàn)有技術(shù)的記載方式進(jìn)一步可以獲得其相應(yīng)的凍干粉制劑。將處方中HSPC等量替換成DPPC、HEPC、DSPC后，測(cè)得鹽酸小檗堿脂質(zhì)體包封率分別為90.3％、92.2％、92.9％，粒徑分別為132nm、121nm、127nm。實(shí)施例2脂質(zhì)體初品的制備工藝同“實(shí)施例1”，將脂質(zhì)體初品用微射流進(jìn)行處理(12000psi處理2個(gè)循環(huán)，14000psi處理2個(gè)循環(huán))，之后依次通過(guò)0.8、0.45、0.22、0.10、0.05μm的微孔濾膜，即得空白脂質(zhì)體。將空白脂質(zhì)體按“實(shí)施例1”的藥脂比和載藥條件進(jìn)行載藥，測(cè)定脂質(zhì)體包封率95.2％，粒徑116nm。在甲磺酸伊馬替尼脂質(zhì)體中加入海藻糖作為凍干保護(hù)劑(海藻糖與磷脂的干重量之比為4)后按照常規(guī)工藝進(jìn)行凍干，可得到甲磺酸伊馬替尼凍干脂質(zhì)體制劑。復(fù)溶時(shí)，向凍干脂質(zhì)體中加入注射用水復(fù)溶，即得甲磺酸伊馬替尼脂質(zhì)體制劑，測(cè)定復(fù)溶后的包封率為93.1％，粒徑120nm。實(shí)施例3脂質(zhì)體膜材由HSPC、CH和mPEG2000-DSPE組成，其中HSPC與mPEG2000-DSPE的質(zhì)量比為3:1，CH與HSPC的質(zhì)量比分別為1:0.5、1:1、1:1.5、1:3、1:5、1:10，并制備不加入CH的脂質(zhì)體。按照“實(shí)施例1”所述方法制備甲磺酸伊馬替尼脂質(zhì)體，所得脂質(zhì)體包封率及粒徑見(jiàn)表1。表1膽固醇含量對(duì)脂質(zhì)體粒徑及包封率的影響由表1可知，處方中膽固醇含量對(duì)甲磺酸伊馬替尼脂質(zhì)體的包封率及粒徑影響較大。當(dāng)處方中不含有CH時(shí)，甲磺酸伊馬替尼脂質(zhì)體的包封率小于10.0％；隨膽固醇含量增加，包封率逐漸增大，當(dāng)處方中CH與HSPC的質(zhì)量比為1:3時(shí)，甲磺酸伊馬替尼脂質(zhì)體的包封率達(dá)到98.9％；繼續(xù)增加膽固醇含量則包封率開(kāi)始下降，當(dāng)處方中CH與HSPC的質(zhì)量比為1:1時(shí)，包封率降低為87.2；處方中CH與HSPC的質(zhì)量比大于1:1時(shí)，甲磺酸伊馬替尼脂質(zhì)體的包封率降低至10％左右。當(dāng)將脂質(zhì)體膜材中的HSPC更換為同樣重量的SPC、DPPC或者HEPC時(shí)，也得到了相似的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。因此，甲磺酸伊馬替尼脂質(zhì)體處方中膽固醇與磷脂的重量比選擇為1:1～1:8。實(shí)施例4脂質(zhì)體膜材由HSPC、CH和親水性高分子脂質(zhì)衍生物組成，其中HSPC與CH的質(zhì)量比為3:1，并且親水性高分子脂質(zhì)衍生物選自mPEG2000-DSPE、mPEG2000-CHS、mPEG2000-DPPE、mPEG2000-DMPE、mPEG2000-DOPE，HSPC與親水性高分子脂質(zhì)衍生物的摩爾比為量為1:0.1。按照“實(shí)施例1”所述方法制備甲磺酸伊馬替尼脂質(zhì)體，所得脂質(zhì)體包封率及粒徑見(jiàn)表2。表2親水性高分子脂質(zhì)衍生物對(duì)脂質(zhì)體粒徑及包封率的影響上述結(jié)果表明，相同工藝條件下，采用不同親水性高分子脂質(zhì)衍生物制得的甲磺酸伊馬替尼脂質(zhì)體包封率均大于90％。實(shí)施例5脂質(zhì)體膜材由HSPC、CH和mPEG2000-DSPE組成，其中HSPC與CH的質(zhì)量比為3:1，并且mPEG2000-DSPE的與HSPC的摩爾含量之比分別為1:5、1:10、1:20、1:40，同時(shí)制備不加入mPEG2000-DSPE的脂質(zhì)體。按照“實(shí)施例1”所述方法制備甲磺酸伊馬替尼脂質(zhì)體，所得脂質(zhì)體包封率及粒徑見(jiàn)表3。表3mPEG2000-DSPE含量對(duì)脂質(zhì)體粒徑及包封率的影響表中，“-”表示由于處方中mPEG2000-DSPE含量過(guò)高，未制備出脂質(zhì)體或是所制備得到的脂質(zhì)體全部快速轉(zhuǎn)變?yōu)槟z束，因此未測(cè)定包封率。當(dāng)mPEG2000-DSPE與HSPC的質(zhì)量比小于1:10時(shí)，可以制備得到粒徑較小且包封率高于90％的甲磺酸伊馬替尼脂質(zhì)體，并且其在充氮后于4℃下避光放置120天，外觀、粒徑及包封率均無(wú)顯著變化，具有較好的放置穩(wěn)定性。在本實(shí)施例中，使用相同質(zhì)量的HEPC、DPPC、DPPE和SPC替換HSPC時(shí)，得到相似的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，亦證明當(dāng)親水性高分子脂質(zhì)衍生物與磷脂的摩爾含量之比不大于1:10時(shí)，按照本發(fā)明所述工藝可以得到包封率大于90％的甲磺酸伊馬替尼脂質(zhì)體。實(shí)施例6脂質(zhì)體處方同“實(shí)施例1”，按“實(shí)施例1”方法制備空白脂質(zhì)體，取一定量空白脂質(zhì)體，分別加入濃度均為500mmol·L-1的適量磷酸鈉溶液、碳酸氫鈉溶液、氫氧化鈉溶液或磷酸鈉-磷酸緩沖液調(diào)節(jié)pH至7.0，并按“實(shí)施例1”的藥脂比和載藥條件進(jìn)行載藥，制得甲磺酸伊馬替尼脂質(zhì)體，測(cè)得包封率分別為88.3％、85.2％、79.7％、98.4％，粒徑分別為124nm、138nm、130nm、126nm。當(dāng)將磷酸鈉-磷酸緩沖液更換為同樣濃度的磷酸氫二鈉-磷酸溶液、磷酸鈉-磷酸二氫鈉溶液、磷酸氫二鈉-磷酸二氫鈉溶液時(shí)，鹽酸小檗堿脂質(zhì)體的包封率分別為97.8％、98.4％、99.4％、97.5％，粒徑分別為124nm、128nm、119nm、120nm。實(shí)施例7脂質(zhì)體處方同“實(shí)施例1”，按“實(shí)施例1”方法制備空白脂質(zhì)體，取一定量空白脂質(zhì)體，分別加入濃度為50、100、200、300、400、500mmol·L-1的適量磷酸鈉-磷酸緩沖液調(diào)節(jié)pH至7.0，并按“實(shí)施例1”的藥脂比和載藥條件進(jìn)行載藥，制得甲磺酸伊馬替尼脂質(zhì)體，測(cè)得包封率見(jiàn)表4。表4緩沖液濃度對(duì)脂質(zhì)體包封率的影響結(jié)果可知，緩沖液濃度在100～500mmol·L-1時(shí)包封率較高。實(shí)施例8脂質(zhì)體處方同“實(shí)施例1”，按“實(shí)施例1”方法制備空白脂質(zhì)體，取一定量空白脂質(zhì)體，加入濃度為500mmol·L-1的磷酸鈉-磷酸緩沖液調(diào)節(jié)pH分別至5.0、6.0、7.0、8.0、9.0，10.0，以藥脂比1:15(w/w)與甲磺酸伊馬替尼溶液(2.5mg/ml)混合，55℃孵育5min，，制得甲磺酸伊馬替尼脂質(zhì)體，測(cè)得包封率分別為34.3％、67.2％、98.7％、99.4％、98.6％、85.8％。結(jié)果可知，外水相pH在7～9之間時(shí)，甲磺酸伊馬替尼脂質(zhì)體包封率大于95％。實(shí)施例9脂質(zhì)體處方組成同“實(shí)施例1”，制備工藝同“實(shí)施例1”，工藝中載藥孵育溫度分別采用30、40、50、60、70、80℃。所得甲磺酸伊馬替尼脂質(zhì)體包封率見(jiàn)表5。表5載藥溫度對(duì)脂質(zhì)體包封率的影響載藥溫度(℃)304050607080包封率(％)34.485.492.898.997.790.3結(jié)果可知，載藥溫度在40℃-80℃之間時(shí)，包封率較高，考慮到磷脂在高溫下不穩(wěn)定，因此選擇60℃為最優(yōu)載藥溫度。實(shí)施例10脂質(zhì)體處方組成同“實(shí)施例1”，制備工藝同“實(shí)施例1”，工藝中載藥孵育時(shí)間分別采用1、5、10、20、30、60、120min。所得甲磺酸伊馬替尼脂質(zhì)體包封率見(jiàn)表6。表6載藥時(shí)間對(duì)脂質(zhì)體包封率的影響載藥時(shí)間(min)1510203060120包封率(％)76.698.599.395.694.895.989.6結(jié)果可知，當(dāng)載藥時(shí)間≥5min時(shí)，脂質(zhì)體包封率均大于90％；當(dāng)載藥時(shí)間為5min時(shí)包封率大于95％，繼續(xù)增加載藥時(shí)間包封率無(wú)明顯提高。實(shí)施例11脂質(zhì)體處方組成同“實(shí)施例1”，制備工藝同“實(shí)施例1”，工藝中藥脂比分別為1:2、1:5、1:8、1:10、1:15、1:20、1:30，所得甲磺酸伊馬替尼脂質(zhì)體包封率見(jiàn)表7。表7不同藥脂對(duì)脂質(zhì)體包封率的影響結(jié)果藥脂比(w/w)1:21:51:81:101:151:201:30包封率(％)32.162.386.699.099.3100.698.6由表6可知，當(dāng)藥脂比≤1:10時(shí)脂質(zhì)體包封率均大于90％；當(dāng)藥脂比在1:10-1：30范圍內(nèi)時(shí)，脂質(zhì)體包封率均接近100％。實(shí)施例12將“實(shí)施例1和2”所得甲磺酸伊馬替尼脂質(zhì)體于4～8℃保存，檢查含量、粒徑、包封率，結(jié)果見(jiàn)表7。表7穩(wěn)定性結(jié)果實(shí)施例13將24只接種GIST腫瘤的小鼠隨機(jī)分為4組，每組6只，即生理鹽水組(NS)、甲磺酸伊馬替尼溶液組、甲磺酸伊馬替尼長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體組(實(shí)施例1的甲磺酸伊馬替尼脂質(zhì)體，包封率98.6％，粒徑124nm)、甲磺酸伊馬替尼普通脂質(zhì)體組(由SPC與CH組成，包封率86.4％，粒徑166nm)，每組6只動(dòng)物。接種當(dāng)天按照第0天計(jì)算，接種后第4天開(kāi)始分別于靜脈注射給藥(20mg/kg)，連續(xù)給藥7天。給藥后動(dòng)物正常飼養(yǎng)，每日稱(chēng)量小鼠體重，同時(shí)觀察小鼠的生長(zhǎng)狀態(tài)。接種后第11天，處死動(dòng)物，完整剝離皮下腫瘤，計(jì)算抑瘤率，結(jié)果見(jiàn)表8。抑瘤率的計(jì)算方法：抑瘤率＝(NS組腫瘤重量-試驗(yàn)組腫瘤重量)/NS組腫瘤重量*100％。表8不同粒徑脂質(zhì)體抑瘤結(jié)果由表可知，普通脂質(zhì)體的抑瘤率低，長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體的抑瘤率顯著提高。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3