本發(fā)明屬于醫(yī)用敷料技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種膠原蛋白-再生纖維素復(fù)合敷料的制備方法。

背景技術(shù)：

雖然各種皮膚修復(fù)材料以其不同的特點(diǎn)被應(yīng)用于臨床不同的創(chuàng)面修復(fù)領(lǐng)域，但是迄今為止沒有一種材料能夠完全滿足傷口修復(fù)治療的各種條件，所以尋找一種能夠滿足創(chuàng)面修復(fù)各個(gè)條件的材料是創(chuàng)面修復(fù)領(lǐng)域亟待解決的問題。

纖維素是一種天然的生物高聚物，其較高的機(jī)械強(qiáng)度，能為創(chuàng)面提供力學(xué)支撐；其特殊的多孔網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，良好的水合度、氣液通透性，能在創(chuàng)面愈合初期控制水分的流失、其良好的生物相容性，能與活性組織兼容，無免疫排斥反應(yīng)。膠原蛋白是細(xì)胞外基質(zhì)最主要的成分，其拉伸強(qiáng)度高、延展性低，具有類似真皮的形態(tài)結(jié)構(gòu)；免疫原性低，具有良好的生物相容性，在創(chuàng)面修復(fù)中，能促進(jìn)成纖維細(xì)胞的增殖和分化，誘導(dǎo)成核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的聚集，促進(jìn)毛細(xì)血管的生長(zhǎng)，進(jìn)而加速組織再生和創(chuàng)面愈合；可以通過適當(dāng)?shù)慕宦?lián)，來調(diào)控其多孔網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)、溶脹性和生物降解性，其特殊的多孔網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)能夠滿足成纖維細(xì)胞或者表皮細(xì)胞的植入，為組織工程化皮膚的制備提供了良好的基材。

然而，纖維素屬于天然多糖類物質(zhì)，在生物活性和生物相容性等方面不如膠原蛋白等蛋白類物質(zhì)，且目前廣泛用作皮膚修復(fù)材料的纖維素多為細(xì)菌纖維素，應(yīng)其來源于細(xì)菌，所以具有一定的免疫原性，同時(shí)其多孔網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)多為納米級(jí)，不足以滿足細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖的孔徑要求，細(xì)胞不能向其內(nèi)部生長(zhǎng)并擴(kuò)增。而膠原蛋白的機(jī)械強(qiáng)度較低，不足以承受整個(gè)創(chuàng)面的應(yīng)力，而且容易被酶降解，在整個(gè)創(chuàng)面修復(fù)過程中容易塌陷，不能保持固有的形態(tài)。

隨著材料學(xué)和組織工程學(xué)的發(fā)展，皮膚組織修復(fù)材料的研究日益深入，人們發(fā)現(xiàn)僅靠單一的材料無法滿足不同傷口的修復(fù)要求，開發(fā)性能更為優(yōu)越的復(fù)合材料是目前皮膚組織工程領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足而提供一種膠原蛋白-再生纖維素復(fù)合敷料的制備方法，所得復(fù)合敷料具有良好的機(jī)械性能、透濕透氣性、保濕性和生物相容性。

一種膠原蛋白-再生纖維素復(fù)合敷料的制備方法，其特征在于：

步驟1，取植物纖維，破碎，將所得干粉與3-5wt％氫氧化鈉溶液按重量比1：10混合，60-80℃反應(yīng)2-3h，冷卻后過濾除去堿水，得到濕粉；

步驟2，以重量份計(jì)，取濕粉10份加至氫氧化鋰和尿素的混合水溶液20-30份中，混合水溶液中氫氧化鋰的質(zhì)量百分比濃度為8％，尿素的體積百分比濃度為12％；分散后在-20℃條件下放置24-36h，解凍，加入卡波姆0.3-0.8份、檸檬酸鈉0.1-0.6份、戊二醛0.5-1.2份，攪拌，得到再生纖維素溶液；

步驟3，以重量份計(jì)，將高碘酸鈉0.5-1.5份加至再生纖維素溶液中，調(diào)節(jié)pH至2-3，35-45℃避光攪拌反應(yīng)10-15h，得到改性纖維素溶液；

步驟4，以重量份計(jì)，將膠原蛋白4-9份加至改性纖維素溶液中，調(diào)節(jié)pH至6-7，15-20℃反應(yīng)20-30h，加入N,N-二甲基丙烯酰胺0.2-0.7份、增塑劑0.3-0.9份、海藻酸鈣0.1-0.4份，制膜、凝固成形，即得。

進(jìn)一步地，所述植物纖維是指玉米、小麥、大豆、高粱、棉花、油菜等一種或者多種植物秸稈經(jīng)粉碎后所制得。

進(jìn)一步地，步驟1中是將植物纖維破碎至能通過40目篩。

進(jìn)一步地，步驟2中攪拌條件為300-500rpm、20-30min。

進(jìn)一步地，步驟3中攪拌速度為200-300rpm。

進(jìn)一步地，步驟4中采用酸性硫酸鈉溶液進(jìn)行凝固成形。

進(jìn)一步地，所述增塑劑為聚乙烯醇或者礦物油。

本發(fā)明的復(fù)合敷料具有良好的機(jī)械性能、透濕透氣性、保濕性和生物相容性，擁有作為理想的新型傷口敷料應(yīng)用于傷口修復(fù)治療的巨大潛能。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1

一種膠原蛋白-再生纖維素復(fù)合敷料的制備方法，其特征在于：

步驟1，取植物纖維，烘干、破碎，將所得干粉與3wt％氫氧化鈉溶液按重量比1：10混合，60℃反應(yīng)3h，冷卻后過濾除去堿水，得到濕粉；

步驟2，以重量份計(jì)，取濕粉10份加至氫氧化鋰和尿素的混合水溶液20份中，混合水溶液中氫氧化鋰的質(zhì)量百分比濃度為8％，尿素的體積百分比濃度為12％；分散后在-20℃條件下放置24-36h，解凍，加入卡波姆0.3份、檸檬酸鈉0.1份、戊二醛0.5份，攪拌，得到再生纖維素溶液；

步驟3，以重量份計(jì)，將高碘酸鈉0.5份加至再生纖維素溶液中，調(diào)節(jié)pH至2，35℃避光攪拌反應(yīng)15h，得到改性纖維素溶液；

步驟4，以重量份計(jì)，將膠原蛋白4份加至改性纖維素溶液中，調(diào)節(jié)pH至6，15℃反應(yīng)30h，加入N,N-二甲基丙烯酰胺0.2份、增塑劑0.3份、海藻酸鈣0.1份，制膜、凝固成形，即得。

其中，所述植物纖維是指玉米經(jīng)粉碎后所制得；步驟1中是將植物纖維破碎至能通過40目篩；步驟2中攪拌條件為300rpm、30min；步驟3中攪拌速度為200rpm；步驟4中采用酸性硫酸鈉溶液進(jìn)行凝固成形，所述增塑劑為聚乙烯醇。

實(shí)施例2

一種膠原蛋白-再生纖維素復(fù)合敷料的制備方法，其特征在于：

步驟1，取植物纖維，烘干、破碎，將所得干粉與4wt％氫氧化鈉溶液按重量比1：10混合，70℃反應(yīng)3h，冷卻后過濾除去堿水，得到濕粉；

步驟2，以重量份計(jì)，取濕粉10份加至氫氧化鋰和尿素的混合水溶液23份中，混合水溶液中氫氧化鋰的質(zhì)量百分比濃度為8％，尿素的體積百分比濃度為12％；分散后在-20℃條件下放置24-36h，解凍，加入卡波姆0.5份、檸檬酸鈉0.3份、戊二醛0.9份，攪拌，得到再生纖維素溶液；

步驟3，以重量份計(jì)，將高碘酸鈉0.7份加至再生纖維素溶液中，調(diào)節(jié)pH至2，40℃避光攪拌反應(yīng)12h，得到改性纖維素溶液；

步驟4，以重量份計(jì)，將膠原蛋白7份加至改性纖維素溶液中，調(diào)節(jié)pH至6，18℃反應(yīng)24h，加入N,N-二甲基丙烯酰胺0.6份、增塑劑0.4份、海藻酸鈣0.3份，制膜、凝固成形，即得。

其中，所述植物纖維是指小麥經(jīng)粉碎后所制得；步驟1中是將植物纖維破碎至能通過40目篩；步驟2中攪拌條件為400rpm、20min；步驟3中攪拌速度為300rpm；步驟4中采用酸性硫酸鈉溶液進(jìn)行凝固成形，所述增塑劑為聚乙烯醇。

實(shí)施例3

一種膠原蛋白-再生纖維素復(fù)合敷料的制備方法，其特征在于：

步驟1，取植物纖維，烘干、破碎，將所得干粉與3wt％氫氧化鈉溶液按重量比1：10混合，80℃反應(yīng)2h，冷卻后過濾除去堿水，得到濕粉；

步驟2，以重量份計(jì)，取濕粉10份加至氫氧化鋰和尿素的混合水溶液27份中，混合水溶液中氫氧化鋰的質(zhì)量百分比濃度為8％，尿素的體積百分比濃度為12％；分散后在-20℃條件下放置24-36h，解凍，加入卡波姆0.6份、檸檬酸鈉0.3份、戊二醛0.9份，攪拌，得到再生纖維素溶液；

步驟3，以重量份計(jì)，將高碘酸鈉1.2份加至再生纖維素溶液中，調(diào)節(jié)pH至2，45℃避光攪拌反應(yīng)15h，得到改性纖維素溶液；

步驟4，以重量份計(jì)，將膠原蛋白7份加至改性纖維素溶液中，調(diào)節(jié)pH至6，15℃反應(yīng)30h，加入N,N-二甲基丙烯酰胺0.6份、增塑劑0.7份、海藻酸鈣0.3份，制膜、凝固成形，即得。

其中，所述植物纖維是指玉米經(jīng)粉碎后所制得；步驟1中是將植物纖維破碎至能通過40目篩；步驟2中攪拌條件為300rpm、30min；步驟3中攪拌速度為200rpm；步驟4中采用酸性硫酸鈉溶液進(jìn)行凝固成形，所述增塑劑為聚乙烯醇。

實(shí)施例4

一種膠原蛋白-再生纖維素復(fù)合敷料的制備方法，其特征在于：

步驟1，取植物纖維，烘干、破碎，將所得干粉與5wt％氫氧化鈉溶液按重量比1：10混合，80℃反應(yīng)2h，冷卻后過濾除去堿水，得到濕粉；

步驟2，以重量份計(jì)，取濕粉10份加至氫氧化鋰和尿素的混合水溶液30份中，混合水溶液中氫氧化鋰的質(zhì)量百分比濃度為8％，尿素的體積百分比濃度為12％；分散后在-20℃條件下放置24-36h，解凍，加入卡波姆0.8份、檸檬酸鈉0.6份、戊二醛1.2份，攪拌，得到再生纖維素溶液；

步驟3，以重量份計(jì)，將高碘酸鈉1.5份加至再生纖維素溶液中，調(diào)節(jié)pH至3，45℃避光攪拌反應(yīng)10h，得到改性纖維素溶液；

步驟4，以重量份計(jì)，將膠原蛋白9份加至改性纖維素溶液中，調(diào)節(jié)pH至7，20℃反應(yīng)30h，加入N,N-二甲基丙烯酰胺0.7份、增塑劑0.9份、海藻酸鈣0.4份，制膜、凝固成形，即得。

其中，所述植物纖維是指玉米經(jīng)粉碎后所制得；步驟1中是將植物纖維破碎至能通過40目篩；步驟2中攪拌條件為500rpm、20min；步驟3中攪拌速度為300rpm；步驟4中采用酸性硫酸鈉溶液進(jìn)行凝固成形，所述增塑劑為聚乙烯醇。

將實(shí)施例1至4所得符合敷料進(jìn)行性能測(cè)試，結(jié)果如下：

由上表可知，該材料具有良好的機(jī)械性能(拉伸強(qiáng)度72.4MPa，斷裂伸長(zhǎng)率9.0％)，溶脹性能(258.94％)，透濕性(675.2g·m^-2·d^-1)和保濕性(27.4％，5天后)。