本發(fā)明涉及一類(lèi)苯[g]雜芳基并[a,g]喹嗪類(lèi)化合物的新用途及其制備方法。具體而言，本發(fā)明涉及如通式(i)所示的苯[g]雜芳基并[a,g]喹嗪類(lèi)化合物在制備治療和/或預(yù)防由ampk通路引起的代謝性疾病，尤其是胰島素抵抗引起的糖尿病、肥胖癥、脂肪肝及其并發(fā)癥的藥物中的用途。

背景技術(shù)：

糖尿病(diabetesmellitus)是一種遺傳因素和環(huán)境因素長(zhǎng)期共同作用所導(dǎo)致的慢性、全身性、代謝性疾病，以血漿葡萄糖水平增高為特征，主要是因體內(nèi)胰島素分泌不足或作用障礙(胰島素抵抗)引起的糖、脂肪、蛋白質(zhì)代謝紊亂而影響正常生理活動(dòng)的一種疾病，表現(xiàn)為多種急性并發(fā)癥和慢性并發(fā)癥?？煞譃?型糖尿病、2型糖尿病以及其他特殊類(lèi)型糖尿病(如妊娠糖尿病等)。2型糖尿病以葡萄糖和脂類(lèi)的異常代謝為特征，雖然其病因與遺傳背景和生活方式有關(guān)，但是發(fā)病的基本病因?yàn)橐葝u素抵抗和(或)胰島素分泌相對(duì)不足。

據(jù)國(guó)際糖尿病聯(lián)盟(internationaldiabetesfederation，idf)發(fā)布的數(shù)據(jù)顯示，2014年全球患者人數(shù)已達(dá)3.87億，西太平洋地區(qū)是患病人數(shù)最多的地區(qū)，達(dá)到1.38億，中國(guó)糖尿病的患病人數(shù)約為9865萬(wàn)，成為世界上患有糖尿病人口最多的國(guó)家。預(yù)計(jì)到2035年全球患者將達(dá)到5.92億，中國(guó)的糖尿病患病人數(shù)將達(dá)到1.43億。2014年糖尿病導(dǎo)致至少6120億美元衛(wèi)生醫(yī)療支出，占成年人總支出的11％。據(jù)世界衛(wèi)生組織(who)統(tǒng)計(jì)全世界糖尿病患者中約90％為2型糖尿病。因此糖尿病治療一直是全世界范圍的研究熱點(diǎn)。

臨床上主要采用胰島素和多種口服降糖藥來(lái)治療，按照作用靶點(diǎn)可以分為：胰島素及其類(lèi)似物、胰高血糖素樣肽-1(glp-1)受體激動(dòng)劑、鈉-葡萄糖協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(sglt2)抑制劑、二肽基肽酶iv(dppiv)抑制劑、過(guò)氧化物酶體增殖物活化受體(pparγ)抑制劑以及α-葡萄糖苷酶抑制劑、膽汁酸螯合劑、多巴胺-2-激動(dòng)劑、胰淀素類(lèi)似物等，品種眾多但每類(lèi)藥物都存在一些缺點(diǎn)，如：低血糖、體重增加、胃腸道副作用、生殖系統(tǒng)感染等。因此尋找新的抗糖尿病的作用機(jī)制，對(duì)針對(duì)新靶點(diǎn)進(jìn)行藥物開(kāi)發(fā)具有重要的研究意義。

腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine5’-monophosphateactivatedproteinkinase，ampk)是真核細(xì)胞內(nèi)的能量代謝調(diào)節(jié)感受器，在調(diào)節(jié)機(jī)體的能量平衡中發(fā)揮極其重要的作用。ampk是絲氨酸/蘇氨酸激酶，是α、β、γ三種亞基組成的三聚體復(fù)合物。ampk作為一種重要的蛋白激酶參與機(jī)體多種代謝過(guò)程，其活性受amp/atp比值調(diào)控。一旦機(jī)體需要能量供給(即當(dāng)atp水平下降，amp水平增加)或細(xì)胞受到任何引起atp生成減少與消耗增加的應(yīng)激刺激時(shí)，amp/atp比值增加，最終ampk被激。內(nèi)源性物質(zhì)(瘦素、脂聯(lián)素、白細(xì)胞介素-6、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子)、激素通過(guò)增加細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度激活camkk從而間接激活ampk。此外，熱刺激、壓力、缺氧均會(huì)導(dǎo)致amp/atp比值增加，從而間接激活ampk。ampk激活會(huì)促進(jìn)肌肉組織增加葡萄糖攝取、增加糖酵解、減少肝臟糖異生，增加脂肪酸氧化、減少脂肪合成等，即通過(guò)促進(jìn)合成代謝，抑制分解代謝，增加atp生成，降低atp消耗。

研究表明ampk紊亂與多種代謝疾病如糖尿病或肥胖相關(guān)。ampkα2敲除的正常小鼠具有糖耐量損傷，同時(shí)降低了胰島素刺激的葡萄糖代謝，而給予高脂飲食后，這些小鼠葡萄糖耐量恢復(fù)，表明了ampk在調(diào)節(jié)代謝紊亂中重要作用。在2型糖尿病患者中，胰島素介導(dǎo)的葡萄糖攝取和利用明顯受損，骨骼肌細(xì)胞內(nèi)glut4mrna和蛋白的含量明顯降低，ampk基因突變和藥理實(shí)驗(yàn)表明：ampk激活會(huì)上調(diào)glut基因轉(zhuǎn)錄和表達(dá)，同時(shí)可抑制磷酸烯醇丙酮酸羧化酶、果糖-1,6-二磷酸酶基因的表達(dá)，從而抑制肝臟糖異生。高血糖、高血脂以及肥胖會(huì)引發(fā)系列能量代謝相關(guān)的疾病，統(tǒng)稱(chēng)為代謝綜合征，表現(xiàn)為內(nèi)臟脂肪細(xì)胞炎癥，導(dǎo)致氧化應(yīng)激及炎性表現(xiàn)增加、胰島素信號(hào)也受損、游離脂肪酸累積、保護(hù)性的脂聯(lián)素分泌減少等，在大鼠模型上給予ampk直接激動(dòng)劑(aicar)治療可改善脂代謝紊亂，抑制胰島素抵抗。因此，靶向ampk激活可作為治療包括2型糖尿病、肥胖、高血脂等代謝性疾病的靶標(biāo)和研究策略。

目前按照ampk的激活機(jī)制，ampk激動(dòng)劑又可以分為直接激動(dòng)劑和間接激動(dòng)劑，ampk直接激動(dòng)劑直接作用于ampk亞基，如amp、adp、atp及其結(jié)構(gòu)類(lèi)似物；而ampk間接激動(dòng)劑則通過(guò)上游的激酶lkb1，camkkβ和tak1，或者通過(guò)上調(diào)amp/atp的比例而激活ampk。

2014年5月，勃林格殷格翰(boehringeringelheim)宣布，與印度生物技術(shù)公司connexioslifesciences簽署了一項(xiàng)獨(dú)家全球研發(fā)合作協(xié)議，開(kāi)發(fā)用于治療2型糖尿病的ampk激動(dòng)劑。cnx-012-570(《cnx-012-570,adirectampkactivatorprovidesstrongglycemicandlipidcontrolalongwithsignificantreductioninbodyweight；studiesfrombothdiet-inducedobesemiceanddb/dbmicemodels》，《cardiovasculardiabetology》第13期，2014年1月)是來(lái)自connexios公司ampk激動(dòng)劑項(xiàng)目中的先導(dǎo)候選藥物，能夠直接激活ampk蛋白特定的異構(gòu)體，在臨床前研究中，該藥已表現(xiàn)出對(duì)肝臟、肌肉、脂肪及其他相關(guān)組織靶向調(diào)控的有益結(jié)果。merk公司于2012-2014年申請(qǐng)多部專(zhuān)利用于保護(hù)氮雜苯并咪唑類(lèi)聯(lián)多羥基類(lèi)糖環(huán)化合物，可作為ampk激活劑用來(lái)治療ii型糖尿病、肥胖、高血脂、高血壓等疾病，該類(lèi)化合物對(duì)重組人源ampk復(fù)合物7的ec50達(dá)到1-7nm?；衔颽diporon是ampk間接激動(dòng)劑，通過(guò)作用于脂聯(lián)素受體激活ampk，從而改善葡萄糖耐量和胰島素抵抗。上市藥物二甲雙胍、羅格列酮、小檗堿對(duì)機(jī)體代謝的影響也部分通過(guò)ampk途徑起效。

小檗堿(berberine)是傳統(tǒng)中藥黃連中的主要活性生物堿，黃連作為傳統(tǒng)中藥用于治療“消渴癥”(糖尿病)可追溯到公元500年前，至今已有2000年的歷史。除此之外，小檗堿還具有其他十分豐富的生理功能，如抗菌、抗瘧、抗癌、抗心血管疾病等活性。在美國(guó)，小檗堿可作為營(yíng)養(yǎng)品，在中國(guó)小檗堿作為糖尿病改善藥物被廣泛使用，臨床劑量方案為：500mg～1.5g，每天服用一次，或300mg每日服用三次，有報(bào)道稱(chēng)小檗堿改善血糖控制要優(yōu)于二甲雙胍，因?yàn)樾￠迚A還能夠降低低密度脂蛋白和膽固醇。在脂肪細(xì)胞中小檗堿治療可以不依賴(lài)上游的lkb1、camkkβ激酶，而通過(guò)改變amp/atp的比例激活ampk。作用機(jī)制表明：小檗堿可作用于線粒體復(fù)合物i，抑制線粒體的呼吸，改變amp/atp比例從而激活ampk。在3t3-l1脂肪細(xì)胞和l6肌管細(xì)胞上實(shí)驗(yàn)表明：小檗堿可以明顯地降低這些細(xì)胞的有氧呼吸，使細(xì)胞轉(zhuǎn)入無(wú)氧呼吸。與其他的ampk激動(dòng)劑類(lèi)似，小檗堿以非胰島素依賴(lài)的形式增加葡萄糖攝取。在飲食誘導(dǎo)的肥胖(dio)小鼠模型中，小檗堿在250-380mg/kg/d給藥劑量下給藥5周可以顯著地降低空腹血糖和空腹胰島素水平，同時(shí)改善對(duì)胰島素的敏感性。

然而小檗堿存在很大的缺點(diǎn)，早期的藥動(dòng)學(xué)研究表明小檗堿在體內(nèi)的生物利用度極低，michael等報(bào)道小檗堿在大鼠上灌胃給藥10.4、20.8、41.6和83.2g/kg，生物利用度分別為0.0001％、0.002％、0.024％和0.011％。因此，小檗堿必須以較大劑量(100–560mg/kg/d)給藥才會(huì)在體內(nèi)發(fā)揮作用。在dio小鼠模型上，125mg/kg給藥劑量下，一天兩次給藥能降低隨機(jī)血糖和空腹血糖；在380mg/kg/d給藥劑量下，能降低血漿中的甘油三酯和改善胰島素抵抗。在db/db小鼠上，則需要更大的給藥劑量(560mg/kg)才能發(fā)揮藥效。此外，小檗堿具有潛在的毒性，michael等報(bào)道在icr小鼠上靜脈注射給藥小檗堿，其ld50為10mg/kg，腹腔注射給藥，其ld50約為57mg/kg，灌胃給藥41.6和83.2g/kg時(shí)，小鼠致死率為30％。rodriguez等報(bào)道小檗堿在hek-293細(xì)胞上對(duì)herg鉀通道的抑制活性ic50為3.1μm。

化學(xué)家們?yōu)榱颂岣咝￠迚A的體內(nèi)藥效、改善藥代性質(zhì)和安全性，分別采用了化學(xué)結(jié)構(gòu)修飾、前藥修飾以及成鹽修飾等策略進(jìn)行研究。jiang等人對(duì)小檗堿環(huán)上的各個(gè)位置的取代基進(jìn)行了系統(tǒng)考察。首先，他們研究發(fā)現(xiàn)當(dāng)9-位甲氧基替換到11-位，得到化合物其促進(jìn)ldlr-mrna表達(dá)的能力與小檗堿相比提高1.2倍，但促進(jìn)胰島素受體mrna表達(dá)的能力弱于小檗堿，且促進(jìn)ampk磷酸化的能力也較弱。對(duì)小檗堿的各個(gè)位置取代基進(jìn)行系統(tǒng)考察，引入烷氧基、羥基和鹵素取代，均未得到活性更好的化合物。藥代實(shí)驗(yàn)表明：小檗堿在體內(nèi)經(jīng)cyp代謝，生成9-位和10-位脫甲基的代謝產(chǎn)物，在9-位通過(guò)羥甲基鏈引入多種不同的酯基進(jìn)行前藥修飾，發(fā)現(xiàn)棕櫚酸酯前藥體內(nèi)的降脂活性略?xún)?yōu)于小檗堿，表明通過(guò)代謝產(chǎn)物的前藥修飾策略在一定程度可上提高小檗堿的口服生物利用度。lv等報(bào)道將小檗堿與p-gp抑制劑聯(lián)合使用或?qū)⑿￠迚A制成葵酸鈉鹽可以提高小檗堿的口服吸收。

此外，研究人員對(duì)二氫小檗堿和四氫小檗堿衍生物進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾并研究其降糖降脂活性。上海藥物所胡立宏和李佳課題組合作發(fā)現(xiàn)二氫小檗堿具有ampk間接激動(dòng)活性，體內(nèi)生物利用度達(dá)到2.65％，優(yōu)于小檗堿，藥代實(shí)驗(yàn)表明：二氫小檗堿在體內(nèi)酸性條件下不穩(wěn)定，脫氫轉(zhuǎn)化為小檗堿，為提高其代謝穩(wěn)定性，他們又設(shè)計(jì)合成了8,8-二甲基取代的二氫小檗堿，其絕對(duì)生物利用度提高到10.03％，同時(shí)其體內(nèi)活性大大提高，在dio小鼠模型中，該化合物在15mg/kg給藥劑量下，能明顯改善糖耐量、增加胰島素敏感性等。作用機(jī)制研究表明：8,8-二甲基二氫小檗堿為ampk的間接激動(dòng)劑。bian等研究發(fā)現(xiàn)四氫小檗堿季銨鹽具有降糖活性。將小檗堿直接四氫化后得到的化合物由于構(gòu)象發(fā)生較大變化，降糖活性喪失，將n原子進(jìn)行季銨化修飾得到化合物在給藥200mg/kg劑量下在四氧嘧啶誘導(dǎo)的高血糖小鼠模型上表現(xiàn)出一定的降糖活性。

綜上所述，ampk是細(xì)胞和組織能量代謝的主要調(diào)節(jié)器，共有12種雜聚體復(fù)合物，目前各雜聚體的組織分布還不清楚。因此開(kāi)發(fā)選擇性的ampk激動(dòng)劑對(duì)于化學(xué)研究人員來(lái)說(shuō)是巨大挑戰(zhàn)。鑒于ampk介導(dǎo)信號(hào)通路在代謝性疾病治療中的重要性和復(fù)雜性，迫切需要開(kāi)發(fā)更多的ampk激動(dòng)劑，用于作用機(jī)制的研究以及用于高血糖、高血脂、肥胖等代謝疾病藥物的開(kāi)發(fā)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種苯[g]雜芳基并[a,g]喹嗪類(lèi)化合物的藥物的新用途。

具體的，本發(fā)明提供了通式(i)所示的苯[g]雜芳基并[a,g]喹嗪類(lèi)化合物，其立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體，及其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物在制備治療和/或預(yù)防由ampk通路引起的代謝性疾病，尤其是胰島素抵抗引起的糖尿病、肥胖癥、脂肪肝及其并發(fā)癥的藥物中的用途，

其中，x、y、z相同或不同，各自獨(dú)立選自s，o，n或c；

r1’和r1為x、y、z所在的五元環(huán)上的取代基，所述取代基r1’和r1各自獨(dú)立的選自氫、鹵素、取代或未取代的c1-c12直鏈或支鏈的烷基、取代或未取代的c2-c12烯基、取代或未取代的c2-c12炔基、取代或未取代的c3-c10環(huán)烷基、取代或未取代的c3-c6環(huán)烷基取代的c1-c3烷基、芳基取代的c1-c3烷基、取代或未取代的雜芳基取代的c1-c3烷基、取代或未取代的c5-c6雜環(huán)基取代的c1-c3烷基、c1-c4烷氧基取代的c1-c3烷基、c1-c4酰基氧基取代的c1-c3烷基、c1-c4?；〈腸1-c3烷基、取代或未取代的c1-c4酰胺取代的c1-c3烷基、取代或未取代c1-c6烷基氨基取代的c1-c3烷基、取代或未取代c3-c6環(huán)烷基氨基取代的c1-c3烷基；所述的雜環(huán)基、雜芳基中，所含雜原子為1-3個(gè)選自n、o、s的雜原子，所述定義“取代或未取代的”中的“取代”是指被選自如下的一種或多種取代基所取代：鹵素、氰基、氨基、羥基、c1-c6烷基、c1-c6烷氧基、c1-c6酰氧基、叔丁氧羰基；

當(dāng)r1’和r1為相鄰取代基時(shí)，r1’和r1可以與連接它們的五元環(huán)上的x、y、z原子形成取代或未取代5-7元環(huán)，所述5-7元環(huán)含有0至3個(gè)選自n、o和s中的雜原子，所述定義“取代或未取代的”中的“取代”是指被選自如下的一種或多種的取代基所取代：鹵素、c1-c4烷基、羥基、氨基、c1-c4烷氧基；

r2、r3、r4、r9各自獨(dú)立地選自氫、鹵素、腈基、被鹵素取代或未取代的c1-c12直鏈或支鏈的烷基；

r5、r6、r7、r8取代基相同或不同，各自獨(dú)立地選自氫、鹵素、c1-c6直鏈或支鏈烴基、取代或未取代的c1-c6烷氧基、取代或未取代的芐氧基、取代或未取代的c1-c18酰氧基、氨基、羥基、羥甲基，取代或未取代的c1-c6烷基酰胺基、取代或未取代的c1-c6烷基磺酰胺基，所述定義“取代或未取代的”中的“取代”是指由選自如下的一種或多種取代基所取代：鹵素、氨基、羥基、c1-c4烷基、c1-c4烷氧基、c1-c4酰氧基；r5和r6可以與連接它們的碳原子形成5-7元環(huán)，該5-7元環(huán)可以無(wú)取代、被鹵素取代、被c1-c6烷基取代、或被含有鹵素原子的c1-c6烷基取代，所述5-7元環(huán)含有0至3個(gè)選自n、o和s中的雜原子。

通式(i)化合物中的手性碳原子的構(gòu)型為r型或s型。

優(yōu)選地，在通式(i)化合物中，

其中，x、y、z相同或不同，獨(dú)立選自s，o，n或c；

r1’和r1為x、y、z所在的五元環(huán)上的取代基，所述取代基r1’和r1各自獨(dú)立的選自氫、鹵素、取代或未取代的c1-c10直鏈或支鏈的烷基、取代或未取代的c2-c10烯基、取代或未取代的c2-c10炔基、取代或未取代的c3-c8環(huán)烷基、取代或未取代的c3-c6環(huán)烷基取代的亞甲基、芳基取代的亞甲基、取代或未取代雜芳基取代的亞甲基、取代或未取代的c5-c6雜環(huán)基取代的亞甲基、c1-c4烷氧基取代的亞甲基、c1-c4?；趸〈膩喖谆1-c4?；〈膩喖谆?、取代或未取代的c1-c4酰胺取代的亞甲基、取代或未取代c1-c6烷基氨基取代的亞甲基、取代或未取代c3-c6環(huán)烷基氨基取代的亞甲基；所述雜環(huán)基、雜芳基，其中所含雜原子為1-3個(gè)選自n、o、s的雜原子，所述定義“取代或未取代的”中的“取代”是指被選自如下一種或多種的取代基所取代：鹵素、氰基、氨基、羥基、c1-c6烷基、c1-c6烷氧基、c1-c6酰氧基、叔丁氧羰基；

當(dāng)r1’和r1為相鄰取代基時(shí)，r1’和r1可以與連接它們的五元環(huán)上的x、y、z原子形成取代或未取代5-7元環(huán)，所述5-7元環(huán)含有0至3個(gè)選自n、o和s中的雜原子，所述定義“取代或未取代的”中的“取代”是指被選自如下的一種或多種的取代基所取代：鹵素、c1-c4烷基、c1-c4烷氧基；

r2、r3、r4、r9各自獨(dú)立地選自氫、鹵素、腈基、被鹵素取代或未取代的c1-c6直鏈或支鏈的烷基；

r5、r6、r7、r8取代基相同或不同，各自獨(dú)立地選自氫、鹵素、c1-c4直鏈或支鏈烴基、取代或未取代的c1-c4烷氧基、取代或未取代的芐氧基、取代或未取代的c1-c16酰氧基、氨基、羥基、羥甲基，被c1-c4直鏈或支鏈烷基取代或未取代的烷基酰胺基、取代或未取代的c1-c4烷基磺酰胺基，所述定義“取代或未取代的”中的“取代”是指被選自如下的一種或多種取代基所取代：鹵素、氨基、羥基、c1-c4烷基、c1-c4烷氧基、c1-c4酰氧基；當(dāng)r5和r6可以與連接它們的碳原子形成5-7元環(huán)，該5-7元環(huán)可以無(wú)取代、被鹵素取代、被c1-c6烷基取代、或被含有鹵素原子的c1-c6烷基取代，所述5-7元環(huán)含有0至3個(gè)選自n、o和s中的雜原子。

通式(i)化合物中的手性碳原子的構(gòu)型為r型或s型。

更優(yōu)選地，在通式(i)化合物中，

x、y、z相同或不同，各自獨(dú)立的選自s，o，n或c；

r1’和r1為x、y、z所在的五元環(huán)上的取代基，所述取代基r1’和r1各自獨(dú)立的選自氫、鹵素、被鹵素、羥基、氨基取代或未取代的c1-c7直鏈或支鏈的烷基、被鹵素取代或未取代的c2-c6烯基、被鹵素、c1-c4烷基取代或未取代的c3-c6環(huán)烷基、被鹵素、氨基、羥基取代或未取代的c3-c6環(huán)烷基取代的亞甲基、c1-c4烷氧基取代的亞甲基、c1-c4?；趸〈膩喖谆?、c1-c4酰基取代的亞甲基、c1-c4酰胺取代的亞甲基、c1-c6烷基氨基取代的亞甲基、c3-c6環(huán)烷基氨基取代的亞甲基，芳基取代的亞甲基、雜芳基取代的亞甲基、叔丁氧羰基取代或未取代的c5-c6雜環(huán)基取代的亞甲基；所述的雜環(huán)基、雜芳基中，所含雜原子為1-3個(gè)選自n、o、s的雜原子；

當(dāng)r1’和r1為相鄰取代基時(shí)，r1’和r1可以與連接它們的五元環(huán)上的x、y、z原子形成被鹵素、羥基、氨基取代或未取代的5-7元環(huán)，所述5-7元環(huán)含有0-3個(gè)選擇n、o和s中的雜原子；

r2、r3、r4、r9各自獨(dú)立地選自氫、鹵素、被鹵素取代或未取代的c1-c4直鏈或支鏈的烷基；

r5、r6、r7、r8取代基相同或不同，各自獨(dú)立地選自氫、鹵素、c1-c4直鏈或支鏈烴基、被鹵素取代或未取代的c1-c4烷氧基、被鹵素、氨基、c1-c4烷基、c1-c4烷氧基、c1-c4酰胺取代或未取代的芐氧基、氨基；當(dāng)r5和r6與連接它們的碳原子形成5-7元環(huán)，該5-7元環(huán)可以無(wú)取代、被鹵素取代、被c1-c6烷基取代、或被含有鹵素原子的c1-c4烷基取代，所述5-7元環(huán)含有0至3個(gè)選自n、o和s中的雜原子。

通式(i)化合物中的手性碳原子的構(gòu)型為r型或s型。

所述的鹵素為氟、氯、溴或碘。

本發(fā)明中進(jìn)一步優(yōu)選的是，通式(i)化合物選自以下化合物：

本發(fā)明中最優(yōu)選的通式(i)化合物選自化合物a4、a5、a6、a8、a14和a18。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供包含一種藥物組合物，其包括治療有效量的通式(i)所示苯[g]雜芳基并[a,g]喹嗪類(lèi)化合物、藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、其立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體或前藥，和藥學(xué)上可接受的載體。

本發(fā)明涉及以通式(i)所示的苯[g]雜芳基并[a,g]喹嗪類(lèi)化合物、藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體及前藥中的一種或多種的混合物為有效成分制備治療和/或預(yù)防與ampk通路激動(dòng)相關(guān)的代謝性疾病的藥物的用途，特別是在制備治療和/或預(yù)防ii型糖尿病、高血脂、肥胖等代謝綜合征藥物中的用途。

所述藥物可通過(guò)注射、噴射、滴鼻、滴眼、滲透、吸收、物理或化學(xué)介導(dǎo)的方法導(dǎo)入機(jī)體如肌肉、皮內(nèi)、皮下、靜脈、粘膜組織；或是被其他物質(zhì)混合或包裹導(dǎo)入機(jī)體。

需要的時(shí)候，在上述藥物中還可以加入一種或多種藥學(xué)上可接受的載體。所述載體包括藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)的稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、潤(rùn)濕劑、崩解劑、吸收促進(jìn)劑、表面活性劑、吸附載體、潤(rùn)滑劑等。

利用通式(i)所示的苯[g]雜芳基并[a,g]喹嗪類(lèi)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑合物、立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、前藥作為活性成分，單獨(dú)或組合使用或與其他藥物、輔料等配制成各種劑型，包括不限于片劑、散劑、丸劑、注射劑、膠囊劑、膜劑、栓劑、膏劑、沖劑等多種形式。上述各種劑型的藥物均可以按照藥學(xué)領(lǐng)域的常規(guī)方法制備。

所述“藥學(xué)上可接受的鹽”為通式(i)化合物與無(wú)機(jī)酸或有機(jī)酸反應(yīng)形成常規(guī)的無(wú)毒鹽。例如，常規(guī)的無(wú)毒鹽可通過(guò)通式(i)化合物與無(wú)機(jī)酸或有機(jī)酸反應(yīng)制得，所述無(wú)機(jī)酸包括鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、胺基磺酸和磷酸等，所述有機(jī)酸包括檸檬酸、酒石酸、乳酸、丙酮酸、乙酸、苯磺酸、對(duì)甲苯磺酸、甲磺酸、萘磺酸、乙磺酸、萘二磺酸、馬來(lái)酸、蘋(píng)果酸、丙二酸、富馬酸、琥珀酸、丙酸、草酸、三氟乙酸、硬酯酸、撲酸、羥基馬來(lái)酸、苯乙酸、苯甲酸、水楊酸、谷氨酸、抗壞血酸、對(duì)胺基苯磺酸、2-乙酰氧基苯甲酸和羥乙磺酸等；或者通式(i)化合物與丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、富馬酸、馬來(lái)酸、乳酸、蘋(píng)果酸、酒石酸、檸檬酸、天冬氨酸或谷氨酸形成酯后再與無(wú)機(jī)堿形成的鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、鋁鹽或銨鹽；或者通式(i)化合物與有機(jī)堿形成的甲胺鹽、乙胺鹽或乙醇胺鹽；或者通式(i)化合物與賴(lài)氨酸、精氨酸、鳥(niǎo)氨酸形成酯后再與鹽酸、氫溴酸、氫氟酸、硫酸、硝酸或磷酸形成的對(duì)應(yīng)的無(wú)機(jī)酸鹽或與甲酸、乙酸、苦味酸、甲磺酸或乙磺酸形成的對(duì)應(yīng)的有機(jī)酸鹽。

本發(fā)明還提供了通式(i)化合物的制備方法，本發(fā)明所用原料及試劑如無(wú)特殊說(shuō)明，均為商業(yè)購(gòu)買(mǎi)。

本發(fā)明的另一目的在于提供一種通式(ι)所示的苯[g]雜芳基并[a,g]喹嗪類(lèi)化合物、其對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體、外消旋體、其混合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、結(jié)晶水合物或溶劑合物的制備方法，該制備方法按如下方法之一進(jìn)行：

方法a：

所述方法a包括如下步驟：

a1)化合物a1與化合物a2在縮合劑作用下經(jīng)過(guò)縮合反應(yīng)生成化合物a3；

a2)化合物a3在縮合劑作用下發(fā)生脫水環(huán)合反應(yīng)生成化合物a4；

a3)化合物a4在硼氫化鈉、甲醇條件下；或者手性催化劑和氫化試劑作用下發(fā)生不對(duì)稱(chēng)還原反應(yīng)生成化合物a5；

a4)化合物a5與取代的醛類(lèi)化合物r4cho在酸性條件下發(fā)生pictet–spengler反應(yīng)生成化合物a6；

具體地，化合物a5與取代的醛類(lèi)化合物r4cho在酸性條件下進(jìn)行反應(yīng)，當(dāng)酸選用鹽酸時(shí)，確保ph在2-3之間，常溫反應(yīng)2-3天；當(dāng)酸選用甲酸時(shí)，將體系加熱至80-90℃反應(yīng)2小時(shí)，后處理調(diào)制堿性，有機(jī)溶劑萃取得到化合物a6。

其中，x、y、z、r1、r2、r3、r4、r5、r6、r7、r8、r9、r1’的定義與前述相同。

其中，在步驟a1)中，所用溶劑為二氯甲烷、三乙胺、四氫呋喃、乙醚或氯仿等中的一種或多種，反應(yīng)溫度為室溫，反應(yīng)時(shí)間2-10小時(shí)；反應(yīng)所用縮合劑為1-乙基-3-(3-二甲胺丙基)碳二亞胺；具體地一種方法可以為，化合物a1(由方法c制備或商業(yè)購(gòu)買(mǎi))和等當(dāng)量化合物a2(商業(yè)購(gòu)買(mǎi))室溫下，在1-乙基-3(3-二甲基丙胺)碳二亞胺、三乙胺、無(wú)水二氯甲烷存在的條件下進(jìn)行縮合，產(chǎn)物經(jīng)過(guò)柱層析純化或者用乙酸乙酯重結(jié)晶，得到化合物a3；

在步驟a2)中，所用溶劑為無(wú)水乙腈、無(wú)水甲苯或苯等，優(yōu)選無(wú)水乙腈；反應(yīng)所用縮合劑為氧氯化磷、三溴氧磷或五氧化二磷等，優(yōu)選三氯氧磷；使用惰性氣體n2或者氬氣保護(hù)；反應(yīng)溫度為加熱至回流，反應(yīng)時(shí)間30分鐘-1小時(shí)；

在步驟a3)中，不對(duì)稱(chēng)還原時(shí)，以無(wú)水n,n-二甲基甲酰胺為溶劑，使用(r,r)-noyori’s催化劑(ru[(r,r)-tsdpen](η⁶-p-cymene))或(s,s)-noyori’s催化劑(ru[(s,s)-tsdpen](η⁶-p-cymene))，在三乙胺與甲酸存在條件下，進(jìn)行不對(duì)稱(chēng)還原；反應(yīng)在氬氣保護(hù)下、28-30℃下進(jìn)行，時(shí)間為10小時(shí)-18小時(shí)。

方法b：

部分化合物由方法b合成：

b1)化合物b1在正丁基鋰、無(wú)水thf存在下、在-78℃條件下，與rcho發(fā)生adol縮合反應(yīng)，得到化合物b2；其中，r選自甲基、乙基、1-乙基丙基、1-環(huán)丙基、1-氯代甲基、苯基、3-吡啶基、4-(n-叔丁氧羰基)-哌啶基；

b2)化合物b2在et3sih、bf3·et2o、二氯甲烷、-40℃的條件下或者在et3sih、三氟乙酸中回流得到化合物b3；

b3)化合物b1在正丁基鋰、無(wú)水thf存在的條件下、在-78℃下、與無(wú)水dmf發(fā)生甲醛化反應(yīng)，得到化合物b4；

b4)化合物b4在硼氫化鈉、meoh存在的條件下，直接還原得到相應(yīng)的醇類(lèi)化合物b5；化合物b5可以進(jìn)一步溶于二氯甲烷中，然后加入ch3cocl和三乙胺經(jīng)縮合得到

b5)化合物b1在正丁基鋰、無(wú)水thf存在下、在-78℃條件下、與n-溴代丁二酰亞胺(nbs)、n-氯代丁二酰亞胺(ncs)、b2、i2、n-氟代雙苯磺酰胺反應(yīng)，得到鹵代化合物b6；

b6)化合物b4與r’nh在乙酸或者三氟乙酸的催化下、在乙腈存在的條件下，形成亞胺，再在醋酸硼氫化鈉的作用下還原得到相應(yīng)的還原胺化產(chǎn)物b7；其中，r’nh選自四氫吡咯、嗎啉；

b7)將化合物b4溶于無(wú)水二氯甲烷，0℃下加入雙(2-甲氧基乙基)氨基三氟化硫(bast)，攪拌下自然升溫至室溫反應(yīng)10h后得到化合物b8。

其中，x、y、z、r1、r2、r3、r4、r5、r6、r7、r8、r9、r1’的定義與前述相同。

在制備方法a中的起始原料化合物a1可商業(yè)購(gòu)買(mǎi)或通過(guò)本領(lǐng)域的常規(guī)方法制備，例如按下述路線c合成。

路線c：

c1)化合物1a在路易斯酸和二氯甲醚或酰氯r2cocl條件下發(fā)生取代反應(yīng)生成化合物2a；

具體地，化合物1a在0℃溶于無(wú)水二氯甲烷，分別緩慢加入四氯化鈦和二氯甲醚或酰氯r2cocl，在0℃到室溫反應(yīng)1-2小時(shí)，然后加冰水處理攪拌，二氯甲烷萃取得化合物2a；

c2)化合物2a與硝基烷化物發(fā)生縮合反應(yīng)生成化合物3a，可不經(jīng)分離直接進(jìn)行下步反應(yīng)；

具體地，化合物2a溶于適量冰醋酸，并向其中加入1.2-2.0當(dāng)量醋酸銨，在室溫下向上述混合液中加入5-10當(dāng)量硝基烷化物，移置80℃油浴中反應(yīng)10小時(shí)，反應(yīng)移置室溫冷卻，有大量固體析出，過(guò)濾得到化合物3a；

所述硝基烷化物選自硝基甲烷、硝基乙烷等；

c3)化合物3a在四氫鋁鋰和無(wú)水四氫呋喃條件下發(fā)生還原反應(yīng)生成化合物a1；

具體地，將四氫鋁鋰懸浮于適量無(wú)水四氫呋喃中，在放置在冰水浴中，緩慢向其中滴加無(wú)水四氫呋喃的不飽和硝基化合物3a溶液，滴加完畢后，將上步反應(yīng)液轉(zhuǎn)移置油浴中回流3小時(shí)，冷卻至室溫，緩慢加入定量的水，過(guò)濾得到澄清溶液，無(wú)水硫酸鈉干燥，蒸干得到油狀化合物a1。其中，x、y、z各自獨(dú)立的選自s、o或n；r1、r1’、r3各自獨(dú)立的選自氫、甲基、乙基、1-甲基乙烯基、叔丁基、異丙基、環(huán)己基，或r1、r1’與連接它們的五元環(huán)上的原子環(huán)成六元脂肪環(huán)。

附圖說(shuō)明

圖1為化合物對(duì)大鼠肝原代細(xì)胞的ampk和acc磷酸化水平的影響(bl：1％dmso；pc：小檗堿(5μm)；化合物濃度單位：μm)；

圖2為化合物a5慢性治療dio小鼠改善糖代謝紊亂——小鼠體重的變化曲線；

圖3為化合物a5慢性治療dio小鼠改善糖代謝紊亂——累積的食物攝取柱狀圖；

圖4為化合物a5慢性治療dio小鼠改善糖代謝紊亂——肝(liver)，皮下脂肪(s-fat)，腹部脂肪(a-fat)，腎周脂肪(k-fat)及肩胛間棕色脂肪(bat)的絕對(duì)重量柱狀圖；

圖5為化合物a5慢性治療dio小鼠改善糖代謝紊亂——空腹血糖柱狀圖；

圖6為化合物a5慢性治療dio小鼠改善糖代謝紊亂——口服葡萄糖耐量試驗(yàn)結(jié)果；

圖7為化合物a5慢性治療dio小鼠改善糖代謝紊亂——口服葡萄糖耐量曲線下面積；

圖8為化合物a5慢性治療dio小鼠改善糖代謝紊亂——胰島素耐受實(shí)驗(yàn)結(jié)果；

圖9為化合物a5慢性治療dio小鼠改善糖代謝紊亂——胰島素耐受實(shí)驗(yàn)曲線下面積；

圖10為本發(fā)明化合物a1和a2對(duì)大鼠肝原代細(xì)胞的糖異生抑制作用；

圖11為本發(fā)明化合物a3和a4對(duì)大鼠肝原代細(xì)胞的糖異生抑制作用；

圖12為本發(fā)明化合物a5和a6對(duì)大鼠肝原代細(xì)胞的糖異生抑制作用；

圖13為本發(fā)明化合物a7和a19對(duì)大鼠肝原代細(xì)胞的糖異生抑制作用；

圖14為本發(fā)明化合物a9和a13對(duì)大鼠肝原代細(xì)胞的糖異生抑制作用；

圖15為本發(fā)明化合物a10和a14對(duì)大鼠肝原代細(xì)胞的糖異生抑制作用；

圖16為本發(fā)明化合物a8和a12對(duì)大鼠肝原代細(xì)胞的糖異生抑制作用；

圖17為本發(fā)明化合物a16和a18對(duì)大鼠肝原代細(xì)胞的糖異生抑制作用；

圖18為二甲雙胍和小檗堿對(duì)大鼠肝原代細(xì)胞的糖異生抑制作用；

附圖中^*p<0.05，^**p<0.01和^***p<0.001，是指與高脂誘導(dǎo)空白組相比。

具體實(shí)施方式

本發(fā)明還針對(duì)通式(i)所示的苯[g]雜芳基并[a,g]喹嗪類(lèi)化合物對(duì)l6肌管細(xì)胞的線粒體膜電位和l6肌管細(xì)胞葡萄糖消耗和大鼠肝原代細(xì)胞的糖異生作用的影響，挑選出優(yōu)選化合物評(píng)價(jià)對(duì)鼠肝原代細(xì)胞ampk及acc的磷酸化具有激活作用來(lái)驗(yàn)證提出的作用機(jī)制；在dio小鼠模型上評(píng)價(jià)對(duì)隨機(jī)空腹血糖、糖耐量、胰島素抵抗的影響，以及其他糖脂代謝的相關(guān)血漿指標(biāo)。藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)所需要的實(shí)驗(yàn)材料除特殊說(shuō)明外，均可商業(yè)購(gòu)買(mǎi)。

實(shí)施例1：9-甲氧基-10-芐氧基-4,7,12,12a-四氫-5h-噻吩[3',2':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉a1

1.1噻吩-2-醛

將噻吩在0℃溶于無(wú)水二氯甲烷，分別緩慢加入四氯化鈦和二氯甲醚，在0℃到室溫反應(yīng)約1小時(shí)，tlc監(jiān)測(cè)只反應(yīng)完全。加冰水處理攪拌，二氯甲烷萃取蒸干制得。

1.22-(2-硝基乙烯基)噻吩

將1.5g噻吩-2-甲醛溶于適量10ml冰醋酸，并向其中加入2當(dāng)量醋酸銨，在室溫向上述混合液中加入5當(dāng)量硝基甲烷，移置80℃油浴中反應(yīng)10小時(shí)，tlc監(jiān)測(cè)原料消失。將反應(yīng)移置室溫冷卻，蒸干大部分溶劑，用飽和碳酸氫鈉調(diào)節(jié)至中性，二氯甲烷萃取3次，合并、蒸干有機(jī)層。柱層析純化得黃色固體產(chǎn)物1.89g，收率91％。

¹hnmr(cdcl3,300mhz):δ8.15(d,j＝13.2hz,1h),7.84(d,j＝13.2hz,1h,)7.65(d,j＝4.2hz,1h),7.15(dd,j＝4.2hz,3.8hz,1h),7.01(d,j＝4.2hz,j＝3.8hz,1h).esi-msm/z:156.0[m+h]⁺.

1.3噻吩-2-乙胺

將1.89g2-(2-硝基乙烯基)噻吩溶于無(wú)水四氫呋喃，在冰浴下分批加入四當(dāng)量四氫化鋁鋰后，回流過(guò)夜。將溶劑蒸干，加少量水淬滅反應(yīng)，過(guò)濾掉固體用二氯甲烷洗滌濾餅，濾液用無(wú)水硫酸鈉干燥，蒸干溶劑得到油狀物1.42g，收率92％。

¹hnmr(cdcl3,300mhz):δ7.24(dd,1h,j＝5.1，1.3hz),6.96(dd,j＝5.1，1.3hz,1h),6.89(d,1h,j＝3.3hz),3.09-3.23(m,4h).esi-msm/z:128.2[m+h]⁺.

1.4n-(噻吩-2-乙基)-3-芐氧基-4-甲氧基苯乙酰胺

將1g3-芐氧基-4-甲氧基苯乙酸溶于無(wú)水二氯甲烷，攪拌中分批加入縮合劑1-乙基-3-(3-二甲胺丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(edci)，加入2eq的三乙胺，然后將1eq的噻吩-2-乙胺加入，室溫反應(yīng)6-8小時(shí)。完成后加水淬滅反應(yīng)，用二氯甲烷萃取蒸干，乙酸乙酯重結(jié)晶，產(chǎn)率85％。

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.42(d,j＝7.3hz,2h),7.36(t,j＝7.3hz,2h),7.30(t,j＝7.1hz,1h),7.11(dd,j＝5.1,0.7hz,1h),6.88(dd,j＝5.1,3.4hz,1h),6.84(d,j＝7.8hz,1h),6.74-6.72(m,2h),6.64(d,j＝3.1hz,1h),5.46(br,1h),5.11(s,2h),3.89(s,3h),3.47(s,3h),3.42(q,j＝6.3hz,2h),2.91(t,j＝6.5hz,2h).lrms(esi)m/z:382.5[m+h]⁺.

1.54-(3-芐氧基-4-甲氧基)-6,7-二氫噻吩[3,2-c]吡啶

將n-噻吩乙基-2-乙酰氧基-3-甲氧基-4-芐氧基苯乙酰胺(1.19g)用適量的無(wú)水乙腈溶解，在氮?dú)獗Ｗo(hù)條件下，加入pocl3(6eq)，回流反應(yīng)反應(yīng)0.5小時(shí)，tlc觀察。將溶劑蒸干，用少量二氯甲烷溶解，加入飽和碳酸氫鈉調(diào)節(jié)溶液至堿性。以二氯甲烷萃取三次，飽和食鹽水洗滌，硫酸鈉干燥。將溶劑蒸干后黃色油狀粗產(chǎn)品，未經(jīng)純化。

1.64-(3-芐氧基-4-甲氧基)-4,5,6,7-四氫噻吩[3,2-c]吡啶

將上一步產(chǎn)品1.07g用少量meoh(5ml)溶解，0℃下分批加入nabh4(3eq)，反應(yīng)1-2小時(shí)，tlc待反應(yīng)完全后濃縮，用飽和nh4cl洗滌，用二氯甲烷萃取三次，飽和食鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，將溶劑蒸干后得到黃色油狀固體。

1.79-甲氧基-10-芐氧基-4,7,12,12a-四氫-5h-苯[g]噻吩[3,2-a]并喹嗪a1

將4-(3-芐氧基-4-甲氧基)-4,5,6,7-四氫噻吩[3,2-c]吡啶與甲醛/甲酸(5ml/7.5ml/每1mmol底物)混合，氮?dú)獗Ｗo(hù)下60℃反應(yīng)3小時(shí)。蒸干大部分溶劑，以飽和碳酸氫鈉調(diào)節(jié)溶液至堿性，以二氯甲烷萃取三次蒸干。柱層析得到產(chǎn)品。(87％產(chǎn)率)mp:129-130℃。

¹hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.44–7.28(m,5h),7.13(d,j＝5.1hz,1h),6.86(d,j＝5.2hz,1h),6.66(s,1h),6.60(s,1h),5.13(s,2h),3.97(d,j＝14.2hz,1h),3.86(s,3h),3.69–3.49(m,2h),3.24–3.07(m,3h),2.86-2.72(m,3h).13cnmr(125mhz,cdcl3)148.12,146.75,137.23,136.94,133.67,128.46,127.72,127.25,126.93,125.95,124.24,123.06,114.30,109.71,71.11,58.56,57.43,56.10,52.05,35.46,25.39.lrms(esi)m/z:378.0[m+h]⁺.hrms(esi)m/z:c23h24no2s⁺calcdfor378.1526,found378.1522.

實(shí)施例2：9-芐氧基-10-甲氧基-4,7,12,12a-四氫-5h-噻吩[3',2':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉a2

按化合物a1的制備方法制得，將3-芐氧基-4-甲氧基苯乙酸替換為3-甲氧基-4-芐氧基苯乙酸。mp:126-127℃。

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.43–7.26(m,5h),7.14(d,j＝5.2hz,1h),6.88(d,j＝5.2hz,1h),6.67(s,1h),6.59(s,1h),5.12(s,2h),3.89(d,j＝14.5hz,1h),3.86(s,3h),3.61(d,j＝14.5hz,1h),3.51(d,j＝10.9hz,1h),3.22–3.10(m,3h),2.86–2.65(m,3h).

¹³cnmr(125mhz,cdcl3)148.41,146.50,137.25,136.95,133.73,128.48,127.73,127.25,126.72,126.21,124.23,123.09,112.19,111.90,71.22,58.58,57.33,56.06,52.04,35.62,25.39.

lrms(esi)m/z:378.0[m+h]⁺.hrms(esi)m/z:c23h24no2s+calcdfor378.1519,found378.1522.

實(shí)施例39-芐氧基-4,7,12,12a-四氫-5h-噻吩[3',2':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉-10-胺a3

按照化合物a1的制備方法，將3-芐氧基-4-甲氧基苯乙酸替換為3-胺基4-芐基苯乙酸制得。mp:179-180℃。

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.46-7.34(m,5h),7.16(d,j＝5.2hz,1h),6.90(d,j＝5.1hz,1h),6.59(s,1h),6.55(s,1h),5.07(s,2h),3.95(d,j＝14.4hz,1h),3.77(br,2h),3.67(d,j＝14.4hz,1h),3.54(d,j＝10.8hz,1h),3.32–3.08(m,3h),2.86(d,j＝17.4hz,3h).

¹³cnmr(125mhz,cdcl3)145.18,137.18,137.11,134.96,133.66,128.53,127.94,127.52,126.65,124.32,123.99,123.01,114.92,109.90,70.60,58.76,57.54,52.10,35.31,25.38.

lrms(esi)m/z:363.0[m+h]⁺.hrms(esi)m/z:c22h23n2os+calcdfor363.1530,found363.1526.

實(shí)施例48,11-二甲氧基-4,7,12,12a-四氫-5h-噻吩[3',2':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉a4

按化合物a1的制備方法，將3-芐氧基-4-甲氧基苯乙酸替換為2,5-二甲氧基苯乙酸制得。mp:145-146℃。

¹hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.13(d,j＝5.2hz,1h),6.96(d,j＝5.2hz,1h),6.65(s,2h),4.20(d,j＝15.8hz,1h),3.79(s,6h),3.46–3.14(m,5h),2.87–2.50(m,3h).

¹³cnmr(125mhz,cdcl3)151.18,149.90,137.23,133.67,124.72,124.59,122.88,107.42,107.07,57.69,55.68,55.59,52.97,52.13,30.74,25.44.

lrms(esi)m/z:302.0[m+h]⁺.hrms(esi)m/z:c17h20no2s+calcdfor302.1206,found302.1215.

實(shí)施例5(s)-8,11-二甲氧基-4,7,12,12a-四氫-5h-噻吩[3',2':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉a5

5.1n-(2-(2-噻吩)乙基)-2-(2,5-二甲氧基苯)乙酰胺

將1g2,5-二甲氧基苯乙酸溶于無(wú)水二氯甲烷，攪拌中分批加入縮合劑1-乙基-3-(3-二甲胺丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(edci)，加入2eq的三乙胺，然后將1eq的噻吩-2-乙胺加入，室溫反應(yīng)6-8h。反應(yīng)結(jié)束后加水淬滅，用二氯甲烷萃取蒸干，乙酸乙酯重結(jié)晶，產(chǎn)率85％。

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.11(dd,j＝5.1,1.2hz,1h),6.88(dd,j＝5.1,3.4hz,1h),6.82–6.75(m,3h),6.65(dd,j＝3.4,0.9hz,1h),5.99(br,1h),3.76(s,3h),3.69(s,3h),3.52(s,2h),3.46(q,j＝6.3hz,2h),2.94(t,j＝6.5hz,2h).esi-ms:306.0[m+h]⁺.

5.24-(2,5-二甲氧基芐基)-6,7-二氫噻吩[3,2-c]吡啶

將n-(2-(2-噻吩)乙基)-2-(2,5-二甲氧基苯)乙酰胺(1.19g)用適量的無(wú)水乙腈溶解，在氮?dú)獗Ｗo(hù)條件下，加入pocl3(6eq)，回流反應(yīng)0.5h，tlc監(jiān)測(cè)反應(yīng)完全后，將溶劑蒸干，用少量二氯甲烷溶解，加入飽和碳酸氫鈉調(diào)節(jié)溶液至堿性。以二氯甲烷萃取三次，飽和食鹽水洗滌，硫酸鈉干燥。將溶劑蒸干后得到黃色油狀粗產(chǎn)品，未經(jīng)純化直接進(jìn)行下一步反應(yīng)。

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.02(d,j＝5.2hz,1h),6.96(d,j＝5.2hz,1h),6.82–6.79(m,2h),6.71(dd,j＝8.8,3.1hz,1h),3.94(s,2h),3.84(t,j＝8.1hz,2h),3.82(s,3h),3.70(s,3h),2.84(t,j＝8.3hz,2h).esi-msm/z:288.0[m+h]⁺.

5.3(s)-4-(2,5-二甲氧基芐基)-4,5,6,7-四氫噻吩[3,2-c]吡啶

將4-(2,5-二甲氧基芐基)-6,7-二氫噻吩[3,2-c]吡啶(1.00g,3.48mmol)溶解于無(wú)水dmf(10ml)中，加入rucl[(r,r)-tsdpen](p-cymene)(44.3mg,0.02eq)，以及甲酸/三乙胺混合物(v/v＝5/2，1.74ml)，氮?dú)獗Ｗo(hù)28℃條件下攪拌過(guò)夜。反應(yīng)完成后，以飽和碳酸氫鈉水溶液調(diào)節(jié)ph至8左右，以乙酸乙酯萃取三次，合并有機(jī)相，并用飽和食鹽水洗有機(jī)相一次，na2so4干燥，蒸干溶劑，得到淡綠色油狀固體(0.8g,產(chǎn)率79％)，未經(jīng)純化，直接進(jìn)行下一步反應(yīng)。

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.08(d,j＝5.1hz,1h),6.87(d,j＝5.2hz,1h),6.84–6.74(m,3h),4.23(dd,j＝10.0,2.9hz,1h),3.80(s,3h),3.76(s,3h),3.34–3.21(m,2h),3.01–2.86(m,2h),2.84–2.70(m,2h).esi-msm/z:290.0[m+h]⁺.

5.4(s)-8,11-二甲氧基-4,7,12,12a-四氫-5h-噻吩[3',2':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉a5

將(s)-4-(2,5-二甲氧基芐基)-4,5,6,7-四氫噻吩[3,2-c]吡啶(0.95g,3.28mmol)與hcooh/40％hcho(v/v＝3/2,40ml)混合，氮?dú)獗Ｗo(hù)下60℃反應(yīng)3h。蒸干大部分溶劑，以飽和na2co3調(diào)節(jié)ph至9，以二氯甲烷萃取三次蒸干。柱層析(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝4/1)得到產(chǎn)品(0.68g，產(chǎn)率69％)。[α]²⁵d＝-336(c＝1.0chcl3)。mp:79-81℃。

¹hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.13(d,j＝5.2hz,1h),6.96(d,j＝5.2hz,1h),6.65(s,2h),4.20(d,j＝15.8hz,1h),3.79(s,6h),3.46–3.14(m,5h),2.87–2.50(m,3h).

¹³cnmr(125mhz,cdcl3)151.18,149.90,137.17,133.67,124.66,124.58,122.91,107.46,107.10,57.70,55.68,55.60,52.95,52.13,30.71,25.42.

lrms(esi)m/z:302.0[m+h]⁺.hrms(esi)m/z:c17h20no2s+calcdfor302.1208,found302.1209.

實(shí)施例6(r)-8,11-二甲氧基-4,7,12,12a-四氫-5h-噻吩[3',2':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉a6

按a5的制備方法，將rucl[(r,r)-tsdpen](p-cymene)替換為rucl[(s,s)-tsdpen](p-cymene)為催化劑制得。[α]²⁵d＝+321(c＝1.0chcl3)。mp:81-82℃。

¹hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.13(d,j＝5.2hz,1h),6.96(d,j＝5.2hz,1h),6.65(s,2h),4.20(d,j＝15.8hz,1h),3.79(s,6h),3.46–3.14(m,5h),2.87–2.50(m,3h).

¹³cnmr(125mhz,cdcl3)151.19,149.91,137.24,133.68,124.73,124.60,122.89,107.43,107.08,57.70,55.69,55.61,52.97,52.14,30.74,25.45.

lrms(esi)m/z:302.0[m+h]⁺.hrms(esi)m/z:c17h20no2s+calcdfor302.1207,found302.1215.

實(shí)施例78,11-二甲氧基-2-甲基-4,7,12,12a-四氫-5h-噻吩[3',2':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉a7

按化合物a4的制備方法，以5-甲基噻吩-2-乙胺代替噻吩-2-乙胺作為初始原料制得。mp:143-144℃。

¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ6.64(d,j＝9.2hz,2h),6.61(s,1h),4.17(d,j＝15.9hz,1h),3.78(s,6h),3.41–3.35(m,2h),3.29–3.22(m,2h),3.12–3.07(m,1h),2.75–2.66(m,2h),2.56–2.50(m,1h),2.44(s,3h).¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ151.20,149.93,137.30,136.91,131.32,124.78,124.73,122.63,107.44,107.07,57.64,55.69,55.61,53.03,52.22,30.71,25.39,15.32.esi-msm/z:316.0[m+h]⁺.

實(shí)施例82-乙基-8,11-二甲氧基-4,7,12,12a-四氫-5h-噻吩[3',2':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉a8的制備方法

8.12-(1-羥基乙基)-8,11-二甲氧基-4,7,12,12a-四氫-5h-苯[g]噻吩[3,2-a]并喹嗪

將化合物a4(1g,3.32mmol)，溶于無(wú)水thf(20ml)，在氮?dú)獗Ｗo(hù)-78℃條件下，用針加入正丁基鋰(2.76ml,6.64mmol)，反應(yīng)1h后加入乙醛(272μl,4.98mmol)，反應(yīng)過(guò)夜，tlc反應(yīng)完全后，用飽和nh4cl淬滅，濃縮后加水，用二氯甲烷萃取三次，飽和nacl洗，無(wú)水na2so4干燥，抽濾蒸干柱層析的白色固體(850mg,產(chǎn)率74％，dr1:1)。

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ6.81(d,j＝11.0hz,1h),6.70–6.60(m,2h),5.06–4.99(m,1h),4.19(d,j＝15.7hz,1h),3.79(s,6h),3.51–3.05(m,5h),2.80–2.50(m,3h),1.57(d,j＝6.4hz,3h).esi-msm/z:346.0[m+h]⁺.

8.22-乙基-8,11-二甲氧基-4,7,12,12a-四氫-5h-噻吩[3',2':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉a8

將上一步得到的2-(1-羥基乙基)-8,11-二甲氧基-4,7,12,12a-四氫-5h-苯[g]噻吩[3,2-a]并喹嗪(0.2g,0.58mmol)溶于無(wú)水二氯甲烷(5ml)，氮?dú)獗Ｗo(hù)-40℃條件下，用針加入三乙基硅烷(139μl,0.87mmol)和三氟化硼乙醚溶液(223μl,0.87mmol,48％)，反應(yīng)2h。反應(yīng)完成后加水淬滅后用nahco3中和至堿性，濃縮后二氯甲烷萃取，蒸干柱層析得固體(170mg,產(chǎn)率89％)。mp:46-47℃。

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ6.74–6.69(m,2h),6.62(s,1h),4.62(d,j＝16.0hz,1h),4.05–3.95(m,1h),3.80(s,6h),3.85–3.70(m,2h),3.52–3.40(m,2h),3.12(t,j＝11.2hz,1h)2.95(d,j＝16.9hz,1h),2.83–2.77(m,3h),1.30(t,j＝7.5hz,3h).esi-msm/z:330.0[m+h]⁺.

實(shí)施例92-正丙基-8,11-二甲氧基-4,7,12,12a-四氫-5h-噻吩[3',2':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉a9

按化合物a8的方法，以正丙醛替代乙醛為初始原料制得油狀物。

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ6.67–6.63(m,3h),4.18(d,j＝15.9hz,1h),3.79(s,6h),3.43–3.34(m,2h),3.31–3.24(m,2h),3.16–3.07(m,1h),2.87–2.68(m,4h),2.55(dd,j＝16.6,11.4hz,1h),1.74–1.65(m,2h),0.99(t,j＝7.3hz,3h).esi-msm/z:344.0[m+h]⁺.

實(shí)施例102-(2-乙基丁基)-8,11-二甲氧基-4,7,12,12a-四氫-5h-噻吩[3',2':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉a10

按化合物a8的方法，以2-乙基丁醛替代乙醛為初始原料制得油狀物。

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ6.70–6.62(m,2h),6.59(s,1h),4.18(d,j＝15.9hz,1h),3.79(s,6h),3.50–3.02(m,5h),2.81–2.48(m,5h),1.53–1.45(m,1h),1.39–1.30(m,4h),0.89(t,j＝7.4hz,6h).esi-msm/z:386.0[m+h]⁺.

實(shí)施例112-(環(huán)丙基甲基)-8,11-二甲氧基-4,7,12,12a-四氫-5h-噻吩[3',2':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉(a11)

按化合物a8的方法，以環(huán)丙基-1-甲醛替代乙醛為初始原料制得油狀物。

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ6.69–6.63(m,3h),4.18(d,j＝16.0hz,1h),3.79(s,6h),3.39–3.12(m,5h),2.78–2.50(m,5h),1.07–1.01(m,1h),0.59–0.55(m,2h),0.26-0.23(m,2h).

實(shí)施例122-(2-氯乙基)-8,11-二甲氧基-4,7,12,12a-四氫-5h-噻吩[3',2':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉a12

按化合物a8的方法，以氯乙酰氯替代乙醛為初始原料制得油狀物。

¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ6.80(s,1h),6.66(q,j＝7.5hz,2h),4.19–4.09(m,2h),4.03(td,j＝12.2,3.3hz,1h),3.91(d,j＝17.4hz,1h),3.84(s,3h),3.80(s,3h),3.35(d,j＝17.2hz,1h),3.30(td,j＝12.2,3.7hz,1h),3.20–3.04(m,4h),2.93–2.83(m,1h),2.70(dd,j＝17.5,7.0hz,1h),2.63–2.55(m,1h).

實(shí)施例132-二氟甲基-8,11-二甲氧基-4,7,12,12a-四氫-5h-噻吩[3',2':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉a13

13.18,11-二甲氧基-4,7,12,12a-四氫-5h-噻吩[3',2':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉-2-甲醛

將化合物a4(1g，3.32mmol)，溶于無(wú)水thf，在氮?dú)獗Ｗo(hù)-78℃條件下，用針加入正丁基鋰(2.76ml,6.64mmol,2minthf)，反應(yīng)1h后加入無(wú)水dmf(0.22g,4.98mmol)，反應(yīng)4h反應(yīng)逐漸升溫至室溫后過(guò)夜，tlc監(jiān)測(cè)反應(yīng)完全后，用飽和nh4cl淬滅，濃縮后加水，用二氯甲烷萃取三次，飽和nacl洗，無(wú)水na2so4干燥，抽濾蒸干柱層析得到白色固體(0.85g,產(chǎn)率78％)。mp:160-161℃。

¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ9.85(s,1h),7.66(s,1h),6.67(s,2h),4.20(d,j＝15.9hz,1h),3.80(s,6h),3.48–3.42(m,2h),3.37–3.28(m,14.0,4.6hz,2h),3.25–3.18(m,1h),2.94–2.90(m,1h),2.75–2.70(m,1h),2.60–2.55(m,1h).esi-msm/z:330.0[m+h]⁺.

13.22-二氟甲基-8,11-二甲氧基-4,7,12,12a-四氫-5h-噻吩[3',2':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉a13

將化合物8,11-二甲氧基-4,7,12,12a-四氫-5h-噻吩[3',2':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉-2-甲醛(100mg,0.303mmol)溶于無(wú)水二氯甲烷，0℃下加入雙(2-甲氧基乙基)氨基三氟化硫bast(134mg,0.607mmol)，攪拌下自然升溫至室溫反應(yīng)10h后，加水淬滅，二氯甲烷萃取3次，飽和nacl洗，無(wú)水na2so4干燥，抽濾蒸干柱層析，得到白色固體(38mg,產(chǎn)率36％)。mp:114-115℃。

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.15(s,1h),6.79(t,j＝56.2hz,1h),6.69–6.64(m,2h),4.21(d,j＝15.4hz,1h),3.79(s,6h),3.46–3.10(m,5h),2.88–2.50(m,3h).esi-msm/z:352.0[m+h]⁺.

實(shí)施例142-芐基-8,11-二甲氧基-4,7,12,12a-四氫-5h-噻吩[3',2':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉a14

按化合物a8的方法，以苯甲醛替代乙醛為初始原料制得。mp:55-56℃。

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.34–7.21(m,5h),6.67(s,1h),6.66–6.62(m,2h),4.17(d,j＝16.0hz,1h),4.09(s,2h),3.78(s,6h),3.49–3.01(m,5h),2.74–2.51(m,3h).esi-msm/z:392.0[m+h]⁺.

實(shí)施例152-氟-8,11-二甲氧基-4,7,12,12a-四氫-5h-噻吩[3',2':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉a15

化合物a4(200mg,0.663mmol)溶于無(wú)水thf(2ml)，在氮?dú)獗Ｗo(hù)-78℃條件下，用針加入正丁基鋰(553μl，1.33mmol,2.4mthf溶液)，反應(yīng)1h后加入n-氟代雙苯磺酰胺(314mg,0.995mmol)，反應(yīng)4h反應(yīng)逐漸升溫至室溫過(guò)夜反應(yīng)，tlc監(jiān)測(cè)反應(yīng)結(jié)束后，用飽和nh4cl淬滅，濃縮后加水，用二氯甲烷萃取三次，飽和nacl洗，無(wú)水na2so4干燥，反相柱層析制得白色固體(150mg,產(chǎn)率71％)。mp:122-123℃。

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ6.67–6.63(m,2h),6.33(d,j＝2.0hz,1h),4.15(d,j＝15.9hz,1h),3.79(s,3h),3.78(s,3h),3.49–2.96(m,5h),2.82–2.43(m,3h).esi-msm/z:320.0[m+h]⁺.

實(shí)施例162-溴-8,11-二甲氧基-4,7,12,12a-四氫-5h-噻吩[3',2':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉a16

按化合物a15的方法，以br2代替氟試劑為起始原料制得。mp:137-140℃。

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ6.92(s,1h),6.65(s,2h),4.16(d,j＝16.0hz,1h),3.79(s,6h),3.47–2.99(m,5h),2.81–2.47(m,3h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ151.14,149.86,137.88,135.39,127.44,124.50,124.22,109.54,107.44,107.18,57.32,55.67,55.63,52.92,51.85,30.63,25.46.esi-msm/z:381.0[m+h]⁺.

實(shí)施例172-氯-8,11-二甲氧基-4,7,12,12a-四氫-5h-噻吩[3',2':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉a17

按化合物a15的方法，以ncs代替氟試劑為起始原料制得。

¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ6.82(s,1h),6.66(q,j＝7.5hz,2h),4.11(t,j＝7.0hz,1h),3.90(d,j＝17.4hz,1h),3.82(d,j＝20.0hz,6h),3.35(d,j＝17.4hz,1h),3.18–3.09(m,2h),3.09–3.04(m,1h),2.93–2.82(m,1h),2.71(dd,j＝17.5,7.1hz,1h),2.64–2.54(m,1h).esi-msm/z:336.8[m+h]⁺.

實(shí)施例182-碘-8,11-二甲氧基-4,7,12,12a-四氫-5h-噻吩[3',2':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉a18

按化合物a15的方法，以i2代替氟試劑為起始原料制得。mp:124-125℃。

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.10(s,1h),6.69–6.60(m,2h),4.18(d,j＝15.9hz,1h),3.79(s,6h),3.47–3.02(m,5h),2.86–2.45(m,3h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ151.14,149.86,139.97,139.34,134.45,124.51,124.21,107.47,107.20,77.34,77.23,77.02,76.71,57.17,55.68,55.64,52.84,51.90,30.64,25.54.esi-msm/z:428.0[m+h]⁺.

實(shí)施例191,2-二甲基-8,11-二甲氧基-4,7,12,12a-四氫-5h-噻吩[3',2':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉a19

按化合物a4的制備方法，以4,5-二甲基噻吩-2-甲醛代替5-甲基噻吩-2-甲醛作為初始原料制得。mp:130-132℃。

¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ6.64(d,j＝9.4hz,2h),4.14(d,j＝16.2hz,1h),3.79(s,3h),3.75(s,3h),3.69(d,j＝16.2hz,1h),3.59(dd,j＝9.7,1.5hz,1h),3.40–3.34(m,1h),3.19–3.15(m,1h),3.03–2.97(m,1h),2.77–2.70(m,2h),2.52-2.46(m,1h),2.31(s,3h),2.11(s,3h).¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ151.27,150.13,136.94,130.30,130.04,129.78,125.03,124.70,107.52,107.02,57.09,55.76,55.63,52.93,50.11,28.57,26.06,13.33,13.14.esi-msm/z:330.0[m+h]⁺.

實(shí)施例202-(吡啶-3-甲基)-8,11-二甲氧基-4,7,12,12a-四氫-5h-噻吩[3',2':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉a20

按化合物a8的方法，以吡啶-3-甲醛替代乙醛為初始原料，三氟醋酸和三乙基硅烷中加熱回流8h制得。mp:56-58℃。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.61–8.52(m,1h),8.50(dd,j＝4.9,1.6hz,1h),7.57(dt,j＝7.8,1.9hz,1h),7.26–7.19(m,1h),6.70–6.60(m,3h),4.17(d,j＝15.8hz,1h),4.10(s,2h),3.82–3.73(s,6h),3.46–3.17(m,4h),3.08(d,j＝12.8hz,1h),2.82–2.63(m,2h),2.53(dd,j＝16.6,11.8hz,1h).esi-msm/z:393.0[m+h]⁺.

實(shí)施例214-((8,11-二甲氧基-4,7,12,12a-四氫-5h-噻吩[3',2':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉-2-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯a21

按化合物a8的方法，以1-叔丁氧羰基哌啶-4-甲醛替代乙醛為初始原料制得油狀物。

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ6.68–6.60(m,2h),6.60(s,1h),4.12–3.97(m,3h),3.79(s,6h),3.42–3.07(m,5h),2.77–2.49(m,7h),1.73–1.63(m,3h),1.46(s,9h),1.18-1.10(m,2h).esi-msm/z:499.2[m+h]⁺.

實(shí)施例228,11-二甲氧基-4,7,12,12a-四氫-5h-噻吩[3',2':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉-2-甲醇a22

化合物8,11-二甲氧基-4,7,12,12a-四氫-5h-噻吩[3',2':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉-2-甲醛(0.2g,0.61mmol)溶于無(wú)水甲醇(2ml)，分批加入nabh4(69mg,1.82mmol)，室溫反應(yīng)2h，濃縮后用飽和nh4cl稀釋?zhuān)枚燃淄檩腿∪?，飽和nacl洗，無(wú)水na2so4干燥，抽濾蒸干柱層析得白色固體(0.18g,產(chǎn)率89％)。mp:187-188℃。

¹hnmr(400mhz,cd3od)δ6.82(s,1h),6.71(s,2h),4.64(s,2h),4.10(d,j＝16.0hz,1h),3.75(s,3h),3.75(s,3h),3.40–3.29(m,3h),3.26–3.19(m,1h),3.11–2.98(m,1h),2.81–2.76(m,1h),2.70–2.63(m,1h),2.47–2.40(m,1h).esi-msm/z:332.0[m+h]⁺.

實(shí)施例23(8,11-二甲氧基-4,7,12,12a-四氫-5h-噻吩[3',2':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉-2-基)乙酸甲酯a23

將化合物a22(0.15g,0.45mmol)溶于無(wú)水二氯甲烷中，0℃下加入乙酰氯(39mg,0.49mmol)，和三乙胺(55mg,0.54mmol)，反應(yīng)1h后，加水淬滅，二氯甲烷萃取三次，飽和nacl洗，無(wú)水na2so4干燥，抽濾蒸干后柱層析白色固體(150mg,產(chǎn)率89％)。mp:69-71℃。

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ6.97(d,j＝11.9hz,1h),6.70–6.59(m,2h),5.19(q,j＝12.8hz,2h),4.18(d,j＝15.9hz,1h),3.79(s,6h),3.41(d,j＝15.6hz,2h),3.31–3.24(m,2h),3.18–3.11(m,1h),2.81–2.77(m,1h),2.70(td,j＝11.3,3.7hz,1h),2.54(dd,j＝16.6,11.5hz,1h),2.10(s,3h).esi-msm/z:374.0[m+h]⁺.

實(shí)施例244-((8,11-二甲氧基-4,7,12,12a-四氫-5h-噻吩[3',2':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉-2-基)甲基)嗎啉a24

化合物8,11-二甲氧基-4,7,12,12a-四氫-5h-噻吩[3',2':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉-2-甲醛(0.2g,0.61mmol)、嗎啉(79mg,0.91mmol)和乙酸(催化量)溶于1,2-二氯乙烷(10ml)，室溫反應(yīng)1h后加入醋酸硼氫化鈉(142mg,0.67mmol)，室溫?cái)嚢柽^(guò)夜。反應(yīng)完用dcm稀釋后，用飽和nahco3洗、nacl洗后，無(wú)水mgso4干燥，柱層析得油狀固體(0.15g,產(chǎn)率62％)。

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ6.78(s,1h),6.70–6.60(m,2h),4.20(d,j＝15.5hz,1h),3.79(s,6h),3.77–3.70(m,4h),3.65(s,2h),3.43(d,j＝15.0hz,2h),3.29(d,j＝13.6hz,2h),3.15(t,j＝23.0hz,1h),2.75(dd,j＝26.4,12.9hz,2h),2.63–2.42(m,5h).esi-msm/z:401.0[m+h]⁺.

實(shí)施例258,11-二甲氧基-2-(吡咯烷基甲基)-4,7,12,12a-四氫-5h-噻吩[3',2':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉a25

按化合物a24的方法，以四氫吡咯代替嗎啉作為起始原料制得。mp:51-52℃。

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ6.78(s,1h),6.68–6.60(m,2h),4.17(d,j＝15.8hz,1h),3.79(s,3h),3.79(s,3h),3.77(s,2h),3.46–3.34(m,2h),3.33–3.21(m,2h),3.18–3.04(m,1h),2.79–2.67(m,2h),2.58(t,j＝5.4hz,4h),2.55–2.48(m,1h),1.81(dt,j＝6.5,3.3hz,4h).esi-msm/z:385.0[m+h]⁺.

實(shí)施例262-乙基-8,11-二甲氧基-4,7,12,12a-四氫-5h-噻吩[2',3':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉a26

按照化合物a4的制備方法，以2-乙基-4-甲醛噻吩代替噻吩-2-醛為原料制得。

¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ6.66(q,j＝7.5hz,2h),6.58(s,1h),4.11(t,j＝7.0hz,1h),3.89(d,j＝17.4hz,1h),3.84(s,3h),3.80(s,3h),3.35(d,j＝17.4hz,1h),3.13–2.95(m,4h),2.94–2.80(m,2h),2.79–2.68(m,1h),2.60–2.51(m,1h),1.29(t,j＝8.0hz,3h).

實(shí)施例278,11-二甲氧基-1,3-二甲基-4,5,12,12a-四氫-7h-噻吩[3',4':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉a27

按照化合物a4的制備方法，以2,5-二甲基噻吩代替噻吩為原料制得。

¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ6.66(q,j＝7.5hz,2h),4.13(t,j＝7.0hz,1h),3.88(d,j＝17.4hz,1h),3.84(s,3h),3.80(s,3h),3.36(d,j＝17.4hz,1h),3.11–2.89(m,3h),2.83–2.72(m,2h),2.57(dt,j＝11.7,6.9hz,1h),2.39(d,j＝11.2hz,6h).

實(shí)施例282-乙基-8,11-二甲氧基-4,7,12,12a-四氫-5h-呋喃[3',2':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉a28

按照化合物a4的制備方法，以2-乙基-5-醛基呋喃代替噻吩-2-醛為原料制得。

¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ6.66(q,j＝7.5hz,2h),5.88(s,1h),4.04(t,j＝7.0hz,1h),3.90(d,j＝17.4hz,1h),3.84(s,3h),3.80(s,3h),3.34(d,j＝17.4hz,1h),3.17–3.04(m,2h),2.85(dq,j＝12.4,8.0hz,1h),2.72(dddd,j＝17.6,16.1,7.6,5.2hz,3h),2.63–2.54(m,1h),2.54–2.47(m,1h),1.29(t,j＝8.0hz,3h).

實(shí)施例292-乙基-8,11-二甲氧基-4,7,12,12a-四氫-5h-呋喃[2',3':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉a29

按照化合物a4的制備方法，以2-乙基-4-醛基呋喃代替噻吩-2-醛為原料制得。

¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ6.65(q,j＝7.5hz,2h),5.76(s,1h),4.14(t,j＝7.1hz,1h),3.89(d,j＝17.4hz,1h),3.84(s,3h),3.80(s,3h),3.34(d,j＝17.4hz,1h),3.17–3.08(m,1h),3.08–3.00(m,2h),2.90–2.70(m,4h),2.58(dt,j＝12.1,7.0hz,1h),1.29(t,j＝8.0hz,3h).

實(shí)施例302-乙基l-8,11-二甲氧基-3,4,5,7,12,12a-六氫吡咯[3',2':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉a30

按照化合物a4的制備方法，以2-乙基-5-醛基吡咯代替噻吩-2-醛為原料制得。

¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ7.50(s,1h),6.72(d,j＝7.5hz,1h),6.66(d,j＝7.5hz,1h),5.78(s,1h),4.02(t,j＝7.0hz,1h),3.89(d,j＝17.2hz,1h),3.84(s,3h),3.80(s,3h),3.34(d,j＝17.4hz,1h),3.15–3.02(m,2h),2.88–2.51(m,6h),1.22(t,j＝8.0hz,3h).

實(shí)施例311-乙基-8,11-二甲氧基-4,7,12,12a-四氫-5h-噻吩[3',2':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉a31

按照化合物a4的制備方法，以2-甲?；?4-乙基噻吩代替噻吩-2-醛為原料制得。

¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ6.78(d,j＝1.0hz,1h),6.66(q,j＝7.5hz,2h),4.13(td,j＝7.0,1.2hz,1h),3.92–3.78(m,7h),3.36(d,j＝17.4hz,1h),3.33–3.21(m,1h),3.17(dt,j＝16.9,7.0hz,1h),3.07(dt,j＝12.5,7.1hz,1h),3.02–2.86(m,2h),2.80(dd,j＝17.4,7.0hz,1h),2.61(dt,j＝12.3,7.0hz,1h),2.52(dq,j＝12.3,7.9hz,1h),1.33(t,j＝8.0hz,3h).

實(shí)施例3210,13-二甲氧基-1,2,3,4,6,9,14,14a-八氫-7h-苯[4',5']并噻吩[3',2':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉a32

按照化合物a4的制備方法，以4,5,6,7-四氫苯[b]并噻吩-2-甲醛代替噻吩-2-醛為原料制得。

¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ6.71–6.62(m,2h),4.47(t,j＝7.1hz,1h),3.96(d,j＝16.3hz,1h),3.82(d,j＝20.0hz,6h),3.61(d,j＝16.3hz,1h),3.15–2.82(m,7h),2.82–2.71(m,2h),2.71–2.64(m,2h),2.01(dddd,j＝12.2,8.0,4.2,1.7hz,2h),1.90–1.75(m,2h).

實(shí)施例331,2-二乙基-8,11-二甲氧基-4,7,12,12a-四氫-5h-噻吩[3',2':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉a33

按照化合物a4的制備方法，以2,3-二乙基噻吩代替噻吩為原料制得。

¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ6.66(q,j＝7.5hz,2h),3.91–3.78(m,7h),3.40–3.30(m,2h),3.20–2.94(m,4h),2.88(dt,j＝16.7,6.9hz,1h),2.83–2.73(m,2h),2.66–2.49(m,2h),1.32(dt,j＝14.3,8.0hz,6h).

實(shí)施例342-環(huán)己基-8,11-二甲氧基-4,7,12,12a-四氫-5h-噻吩[3',2':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉a34

按照化合物a4的制備方法，以2-環(huán)己基噻吩代替噻吩為原料制得。

¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ6.86(s,1h),6.66(d,j＝12.3hz,2h),4.10(s,1h),3.90(d,j＝17.4hz,1h),3.82(d,j＝20.0hz,6h),3.35(d,j＝17.2hz,1h),3.16–3.06(m,4h),2.88(d,j＝17.4hz,1h),2.70(d,j＝17.6hz,1h),2.58(s,1h),2.46–2.37(m,2h),1.82–1.71(m,4h),1.65(d,j＝13.0hz,2h),1.39–1.30(m,2h).

實(shí)施例352-異丙基-8,11-二甲氧基-4,7,12,12a-四氫-5h-噻吩[3',2':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉a35

按照化合物a4的制備方法，以2-異丙基噻吩代替噻吩為原料制得。

¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ6.85(s,1h),6.66(q,j＝7.5hz,2h),4.10(t,j＝7.0hz,1h),3.90(d,j＝17.4hz,1h),3.82(d,j＝20.0hz,6h),3.38–3.25(m,2h),3.17–3.03(m,3h),2.93–2.82(m,1h),2.70(dd,j＝17.6,7.0hz,1h),2.64–2.54(m,1h),1.32(dd,j＝24.9,6.8hz,6h).

實(shí)施例362-(叔丁基)-8,11-二甲氧基-4,7,12,12a-四氫-5h-噻吩[3',2':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉a36

按照化合物a4的制備方法，以2-叔丁基噻吩代替噻吩為原料制得。

¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ6.91(s,1h),6.66(q,j＝7.5hz,2h),4.10(t,j＝7.0hz,1h),3.90(d,j＝17.2hz,1h),3.82(d,j＝20.0hz,6h),3.35(d,j＝17.2hz,1h),3.17–3.09(m,2h),3.09–3.03(m,1h),2.93–2.82(m,1h),2.70(dd,j＝17.5,7.0hz,1h),2.64–2.54(m,1h),1.39(s,9h).

實(shí)施例378,11-二甲氧基-2-(丙-1-烯-2-基)-4,7,12,12a-四氫-5h-噻吩[3',2':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉a37

按照化合物a4的制備方法，以2-(丙-1-烯-2-基)噻吩代替噻吩為原料制得。

¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ7.10(s,1h),6.66(q,j＝7.5hz,2h),5.26(dt,j＝2.0,1.1hz,1h),4.80(dd,j＝2.1,1.1hz,1h),4.11(t,j＝7.0hz,1h),3.90(d,j＝17.2hz,1h),3.82(d,j＝20.0hz,6h),3.35(d,j＝17.4hz,1h),3.23–3.13(m,1h),3.13–3.04(m,2h),2.93(dt,j＝16.9,6.8hz,1h),2.71(dd,j＝17.4,7.0hz,1h),2.59(dt,j＝12.5,7.1hz,1h),2.10(d,j＝1.2hz,3h).

實(shí)施例382-乙基-8,11-二甲氧基-5-甲基-4,7,12,12a-四氫-5h-噻吩[3',2':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉a38

按照化合物a8的制備方法，以2-乙基噻吩代替噻吩，以硝基乙烷代替硝基甲烷為原料制得。

¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ6.75(s,1h),6.66(q,j＝7.5hz,2h),4.14(t,j＝7.1hz,1h),4.06(d,j＝17.6hz,1h),3.82(d,j＝20.0hz,6h),3.29(d,j＝17.6hz,1h),3.11(dd,j＝17.3,7.1hz,1h),3.07–2.97(m,2h),2.97–2.80(m,2h),2.69(ddd,j＝20.7,17.2,6.9hz,2h),1.32(t,j＝8.0hz,3h),1.25(d,j＝6.7hz,3h).

實(shí)施例392-乙基-8,11-二甲氧基-7-甲基-4,7,12,12a-四氫-5h-噻吩[3',2':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉a39

按照化合物a8的制備方法，以乙醛代替甲醛為原料制得。

¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ6.74(s,1h),6.70–6.62(m,2h),4.13(t,j＝7.0hz,1h),3.82(d,j＝20.0hz,6h),3.73(q,j＝6.8hz,1h),3.21–3.08(m,3h),3.02(dq,j＝12.5,8.0hz,1h),2.94–2.80(m,2h),2.68(dd,j＝15.8,7.1hz,1h),2.59–2.47(m,1h),1.44(d,j＝6.8hz,3h),1.32(t,j＝8.0hz,3h).

實(shí)施例402-乙基-8,11-二甲氧基-12-甲基-4,7,12,12a-四氫-5h-噻吩[3',2':3,4]并吡啶[1,2-b]并異喹啉a40

按照化合物a8的制備方法，以2-(2,5-二甲氧基苯基)丙酸代替2,5-二甲氧基苯乙酸為原料制得。

¹hnmr(500mhz,chloroform-d)δ6.74(s,1h),6.66(q,j＝7.5hz,2h),4.28(d,j＝7.0hz,1h),3.93(d,j＝17.8hz,1h),3.80(s,6h),3.42–3.30(m,2h),3.19–3.04(m,2h),3.04–2.97(m,1h),2.92–2.80(m,2h),2.64–2.54(m,1h),1.41(d,j＝6.8hz,3h),1.32(t,j＝8.0hz,3h).1.化合物對(duì)l6肌管細(xì)胞的線粒體膜電位抑制作用研究

l6肌管細(xì)胞(美國(guó)模式培養(yǎng)物集存庫(kù)，americantypeculturecollection，atcc)以6000個(gè)/孔接種于96孔板中，培養(yǎng)基是高糖dulbecco'smodifiedeagle'smedium(dmem，gibco公司)10％fbs(hyclone公司)第三天將培養(yǎng)基換成2％fbs高糖dmem進(jìn)行分化，分化5天后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。準(zhǔn)備含化合物的培養(yǎng)液100μl/孔(化合物用含2％fbs的高糖dmem培養(yǎng)基配制)，陽(yáng)性化合物對(duì)照為10μmcccp(sigma-aldrich公司)，小檗堿(英文名berberine，縮寫(xiě)為bbr)以及本發(fā)明制備的苯[g]雜芳基并[a,g]喹嗪類(lèi)化合物作用濃度為20μm，每孔的dmso(sigma-aldrich公司)最終含量為1‰?；衔锾幚?h，結(jié)束前20min加入等體積的500xjc-1(碧云天生物技術(shù)公司)(jc-1的終濃度為1μg/ml)，避光處理，結(jié)束后，krphbuffer洗3遍后每孔加入100μl，flexstationii各讀取l1:530nm/580nm和l2:485nm/530nm處熒光值，l1/l2，樣品組與dmso組數(shù)值進(jìn)行比較(dmso為100％)，計(jì)算相對(duì)線粒體膜電位變化。結(jié)果見(jiàn)表1。

2.化合物促進(jìn)l6肌管細(xì)胞葡萄糖消耗作用的研究

l6肌管細(xì)胞以6000個(gè)/孔接種于96孔板中，培養(yǎng)基是10％fbs高糖dmem第三天將培養(yǎng)基換成2％fbs高糖dmem進(jìn)行分化，隔天換液，分化5天進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。細(xì)胞分化完成后，加入化合物處理，每孔70μl(化合物用含0.5％bsa低糖dmem培養(yǎng)基配制)，陽(yáng)性化合物為小檗堿10μm，本發(fā)明的苯[g]雜芳基并[a,g]喹嗪類(lèi)化合物作用濃度為20μm，dmso含量為1‰?；衔镒饔?2h后，每孔吸取4μl培養(yǎng)基于96孔板，用葡萄糖氧化酶試劑盒(上海復(fù)旦張江生物醫(yī)藥股份有限公司)檢測(cè)培養(yǎng)基的葡萄糖含量，用總的葡萄量(同樣點(diǎn)于板上在培養(yǎng)箱中蒸騰)減去培養(yǎng)基中剩余葡萄糖量便是所消耗的葡萄糖量。樣品組的消耗量與dmso組和小檗堿組分別進(jìn)行比較，計(jì)算相對(duì)葡萄糖消耗量。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1.化合物對(duì)l6肌管細(xì)胞的線粒體膜電位和葡萄糖消耗的影響

由以上可見(jiàn)，本發(fā)明所測(cè)試的通式(i)化合物作為小檗堿衍生物，在l6肌管細(xì)胞上具備不同程度的降低膜電位的作用并促進(jìn)細(xì)胞對(duì)葡萄糖的消耗，該試驗(yàn)結(jié)果提示小檗堿衍生物可以類(lèi)似于小檗堿通過(guò)抑制線粒體功能從而促進(jìn)對(duì)葡萄糖的消耗。

3.藥物對(duì)大鼠肝原代細(xì)胞的糖異生抑制作用研究

從sd大鼠(上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司)肝臟分離原代肝細(xì)胞，hepatozyme-sfm(gibco公司)10％fbs培養(yǎng)基混勻后接入24孔板中，使細(xì)胞密度為25-30萬(wàn)/ml(24孔板)。細(xì)胞于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置6小時(shí)貼附后，換為無(wú)血清lg-dmem(gibco公司)饑餓過(guò)夜。第二天將培養(yǎng)基換為無(wú)糖培養(yǎng)基(gibco公司)，給藥處理，先將原培養(yǎng)基吸取，每孔用500μlpbs洗2次，然后配制加入含有待測(cè)化合物的無(wú)酚紅，加入20mmol/l的乳酸(sigma公司)和2mmol/l的丙酮酸(sigma公司)培養(yǎng)基500μl，共同孵育6小時(shí)。小檗堿及本發(fā)明的化合物a1-a16、a18、a19、a21、a28和a30分別設(shè)置低、中、高劑量組，濃度分別為5μm，10μm和20μm，二甲雙胍(metformin，sigma公司))濃度為2mm，dmso含量為1‰。6h后，收集50μl培養(yǎng)基測(cè)定糖濃度。每孔加入200μl裂解液(含0.1％sds)裂解細(xì)胞約30min，稀釋10倍-20倍測(cè)定蛋白質(zhì)濃度。結(jié)果見(jiàn)表2和圖10-18。

表2.化合物對(duì)小鼠肝原代細(xì)胞糖異生的抑制作用

在20μm濃度下，21個(gè)化合物均表現(xiàn)出對(duì)肝細(xì)胞糖異生的抑制作用(15％-85％)，且劑量依賴(lài)關(guān)系明顯。其中，部分化合物對(duì)糖異生的抑制作用較強(qiáng)，大于70％，其中化合物a8抑制作用最強(qiáng)，在20μm濃度下，對(duì)肝細(xì)胞糖異生的抑制達(dá)到85％，且呈現(xiàn)劑量依賴(lài)關(guān)系，活性?xún)?yōu)于陽(yáng)性對(duì)照小檗堿和二甲雙胍。

4.化合物對(duì)大鼠原代肝細(xì)胞的ampk和acc磷酸化水平促進(jìn)作用研究

從sd大鼠肝臟分離原代肝細(xì)胞，hepatozyme-sfm(gibco公司)10％fbs培養(yǎng)基混勻后接入24孔板板中，使細(xì)胞密度為25-30萬(wàn)/ml(24孔板)。細(xì)胞于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置。6h貼附后，換為無(wú)血清lg培養(yǎng)基饑餓過(guò)夜。次日化合物處理，每孔500μl(化合物用無(wú)血清lg-dmem培養(yǎng)基配制)，陽(yáng)性化合物為小檗堿10μm，化合物a1-a6各設(shè)置低中高三個(gè)劑量組，作用濃度為5μm、10μm、20μm，dmso含量為1‰。6h后，80μlwesternblot加樣緩沖液裂解細(xì)胞，收取裂解液并置于100℃煮樣器10分鐘使蛋白變性。采用ampk和acc的磷酸化抗體(cst公司)分別檢測(cè)樣品經(jīng)處理后的磷酸化水平變化。結(jié)果見(jiàn)圖1。圖1中的bl組是blank空白對(duì)照組(1‰dmso)。

結(jié)果表明部分化合物具有與小檗堿相同的作用機(jī)制，能夠劑量依賴(lài)地促進(jìn)ampk的磷酸化。

5.化合物在高脂食物誘導(dǎo)的動(dòng)物模型慢性降糖藥效學(xué)研究

雄性5-6周齡的c57bl/6j小鼠(上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心)，高脂食物誘導(dǎo)8周形成肥胖與胰島素抵抗癥狀，按照體重和空腹血糖分組，每組八只，設(shè)置溶劑對(duì)照組，溶劑是0.5％mc(即將甲基纖維素溶解于生理鹽水制成質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.5％的mc溶劑)、陽(yáng)性對(duì)照二甲雙胍組(125mg/kg)、受試物組化合物a5(30mg/kg和60mg/kg)，每天灌胃給藥兩次，每天監(jiān)測(cè)食物重量和體重；每周測(cè)空腹血糖；給藥第三周測(cè)定口服葡萄糖耐受實(shí)驗(yàn)；給藥第四周測(cè)定胰島素耐受實(shí)驗(yàn)；第32天脫頸處死，取臟器稱(chēng)重，保存于-80℃。結(jié)果見(jiàn)圖2-9。

采用高脂食物誘導(dǎo)8周小鼠出現(xiàn)肥胖以及胰島素抵抗癥狀，受試物化合物a5多次給藥可有效緩解dio小鼠空腹血糖以及對(duì)葡萄糖負(fù)荷后的處置能力，并在一定程度上提高對(duì)胰島素的敏感性。

以上結(jié)果綜合表明本發(fā)明的化合物具有類(lèi)似于小檗堿可通過(guò)線粒體功能調(diào)節(jié)，從而激活ampk，提高l6肌管細(xì)胞對(duì)葡萄糖的利用以及原代肝細(xì)胞的葡萄糖異生能力。整體動(dòng)物藥效學(xué)研究表明，該類(lèi)衍生物具有降糖和改善胰島素敏感性的作用。

6.藥代動(dòng)力學(xué)研究

健康大鼠8只，按體重隨機(jī)分成2組，給藥組每組3只，空白組2只。各組大鼠饑餓8h，分別灌胃給予10～20mg/kg或靜脈注射2～10mg/kg被試化合物(a5、a8、a14或a18)。分別在給藥后0,15min,30min,1h,2h,4h,8h,24h時(shí)間點(diǎn)經(jīng)大鼠眼球后靜脈叢取血，離心分離血漿，于-20℃冰箱中冷凍待用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表3。

大鼠灌胃給予20mg/kg劑量的化合物a5，血漿濃度達(dá)峰時(shí)間tmax為0.25h，達(dá)峰濃度cmax為74.2ng/ml，藥時(shí)曲線下面積auc0-t為99.0ng·h/ml，末端消除半衰期t1/2為1.81h，生物利用度f(wàn)為1.9％。

大鼠灌胃給予10mg/kg劑量的化合物a8，血漿濃度達(dá)峰時(shí)間tmax為0.5h，達(dá)峰濃度cmax為162.4ng/ml，藥時(shí)曲線下面積auc0-t為824.6ng·h/ml，末端消除半衰期t1/2為7.2h，生物利用度f(wàn)為45.4％。

大鼠灌胃給予10mg/kg劑量的化合物a14，血漿濃度達(dá)峰時(shí)間tmax為1h，達(dá)峰濃度cmax為95.5ng/ml，藥時(shí)曲線下面積auc0-t為472.5ng·h/ml，末端消除半衰期t1/2為4.3h，生物利用度f(wàn)為106％。

大鼠灌胃給予10mg/kg劑量的化合物a18，血漿濃度達(dá)峰時(shí)間tmax為2h，達(dá)峰濃度cmax為123.5ng/ml，藥時(shí)曲線下面積auc0-t達(dá)到1360.3ng·h/ml。綜上所述，該類(lèi)化合物具有良好的藥代動(dòng)力學(xué)特性。

表3.大鼠灌胃和靜脈注射給予a5、a8、a14和a18的藥代數(shù)據(jù)

7.安全性評(píng)價(jià)

herg鉀通道的抑制活性評(píng)價(jià)

rodriguez等報(bào)道小檗堿在hek-293細(xì)胞上對(duì)herg鉀通道的抑制活性ic50為3.1μm。采用膜片鉗技術(shù)，對(duì)部分化合物進(jìn)行herg鉀通道的抑制活性(ic50)評(píng)價(jià)結(jié)果見(jiàn)表4，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：化合物a5、a6、a8、a14-a16和a18等對(duì)herg鉀通道的抑制活性較弱，安全性?xún)?yōu)于小檗堿。

表4.優(yōu)選化合物對(duì)herg鉀通道的抑制活性

小檗堿衍生物對(duì)icr小鼠的急毒測(cè)試

有文獻(xiàn)報(bào)道，小檗堿(bbr)靜脈注射給藥icr小鼠后，其ld50為10mg/kg，腹腔注射給藥后，其ld50約為57mg/kg。挑選部分化合物進(jìn)行尾靜脈給藥或口服灌胃的急毒實(shí)驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)表5，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：與小檗堿相比靜脈給藥同等劑量下安全性較高。其余化合物灌胃給藥100mg/kg和200mg/kg均未見(jiàn)小鼠異常，表明該類(lèi)化合物的安全性較高，具有巨大的應(yīng)用價(jià)值。

表5.部分化合物對(duì)icr小鼠的急毒測(cè)試

本發(fā)明的苯[g]雜芳基并[a,g]喹嗪類(lèi)化合物毒性較低、溶解性好。本發(fā)明的苯[g]雜芳基并[a,g]喹嗪類(lèi)化合物及其衍生物的制備方法具有反應(yīng)條件溫和、原料豐富易得、操作及后處理簡(jiǎn)單、對(duì)應(yīng)選擇性好等優(yōu)點(diǎn)。本發(fā)明的苯[g]雜芳基并[a,g]喹嗪類(lèi)化合物及其衍生物在體內(nèi)外均具有明顯的降糖活性，且具有新的作用機(jī)制。因此，本發(fā)明的化合物可用于制備由ampk通路引起的代謝性疾病，尤其是胰島素抵抗引起的糖尿病、肥胖癥、脂肪肝及其并發(fā)癥的藥物。