本申請(qǐng)要求2014年5月12日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)No.61/992,169的優(yōu)先權(quán)，將其全文通過(guò)引用并入本文。
2.發(fā)明領(lǐng)域
本文提供通過(guò)給藥半胱天冬酶抑制劑治療某些慢性肝臟疾病并發(fā)癥的方法。
3.
背景技術(shù)：
由慢性肝臟疾病引起的并發(fā)癥影響大量患者群，并且與高度的發(fā)病率和死亡率有關(guān)。門靜脈高壓是一種重要且常見(jiàn)臨床病癥，其是慢性肝臟疾病的并發(fā)癥，定義為當(dāng)通過(guò)肝臟靜脈壓力梯度(HVPG)測(cè)定時(shí)肝臟中升高的血壓大于5mmHg。正常的HVPG被認(rèn)為在3至5mmHg之間。雖然高于5mmHg的所有門靜脈血壓被認(rèn)為異常，但是大于10mmHg的HVPG測(cè)量結(jié)果被證明能高度預(yù)測(cè)重度虛弱和潛在威脅生命后果的發(fā)展。具有10mmHg或以上的門靜脈壓力的患者的臨床結(jié)果是：發(fā)展為食管靜脈曲張、腹水、肝性腦病、靜脈曲張出血和肝細(xì)胞癌。門靜脈高壓可能是由于阻止肝臟內(nèi)和向肝臟的正常血流和正常血液動(dòng)力學(xué)的多種臨床病癥引起的。病癥比如脾靜脈或門靜脈的血栓形成、Budd-Chiari綜合征或例如血吸蟲病引起門靜脈高壓。在這些病癥中，血管被阻斷，引起血壓升高。門靜脈高壓也是肝硬化或肝臟瘢痕形成的并發(fā)癥。肝硬化中肝臟的瘢痕形成增加了肝臟硬度，導(dǎo)致門靜脈高壓和肝功能受損。肝硬化的瘢痕形成也增加了肝臟中的細(xì)胞死亡。一種肝臟細(xì)胞死亡的形式是通過(guò)被稱為細(xì)胞凋亡的方式進(jìn)行。另一種肝臟細(xì)胞死亡的形式是通過(guò)炎癥進(jìn)行。肝硬化是所有慢性肝臟疾病的末期臨床并發(fā)癥。
晚期慢性肝臟疾病影響大量患者群，且與高度的發(fā)病率和死亡率有關(guān)。在2009年，慢性肝臟疾病是美國(guó)45歲至54歲之間人群的主要死亡原因(參見(jiàn)Asrani et al.Hepatology,2013；145:375-382)。鑒于慢性肝臟疾病的并發(fā)癥影響大量患者群，強(qiáng)烈需要向這些患者提供新的有效的藥用試劑。
4.發(fā)明簡(jiǎn)述
本文提供的方法、化合物、藥物組合物和制品具有多種組成成分、制備步驟和實(shí)施步驟及相關(guān)生物物理學(xué)、物理學(xué)、生物化學(xué)或化學(xué)參數(shù)的特征。如將本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見(jiàn)的是，本文提供的方法可以包括如下所述化合物、組合物、制品和相關(guān)成分、步驟和/或參數(shù)的任何和所有的排列與組合。
在一個(gè)方面，本文提供通過(guò)半胱天冬酶抑制劑治療門靜脈高壓的方法。在某些實(shí)施方案中，門靜脈高壓是慢性肝臟疾病本文本文結(jié)果。本文預(yù)期了本領(lǐng)域技術(shù)人員已知且理解的半胱天冬酶抑制劑。用于所述方法的示例性的化合物為本文在其他地方描述的。還提供了用于所述方法的藥物組合物。
在一些實(shí)施方案中，本文提供的方法包括治療慢性肝臟疾病導(dǎo)致的門靜脈高壓。在一個(gè)實(shí)施方案中慢性肝臟疾病是由于毒素引起的，所述毒素包括酒精、某些藥物和血液中正常物質(zhì)的異常組合。在另一個(gè)實(shí)施方案中，慢性肝臟疾病是由于感染自身免疫病癥引起的。在一些實(shí)施方案中，慢性肝臟疾病的準(zhǔn)確原因未知。在一些實(shí)施方案中，慢性肝臟疾病包括但不限于、脂肪肝、肝硬化、原發(fā)性膽汁性肝硬變、原發(fā)性硬化性膽管炎、Budd-Chiari綜合征和α1-抗胰蛋白酶缺乏。
在一個(gè)實(shí)施方案中，慢性肝臟疾病包括，但不限于肝硬化、肝纖維化、非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、肝炎(包括病毒性和酒精性肝炎)、原發(fā)性膽汁性肝硬變(PBC)和原發(fā)性硬化性膽管炎(PSC)。
在一些實(shí)施方案中，提供了用于治療患有由于慢性肝臟疾病引起的門靜脈高壓的治療失敗的患者的治療方法。在一個(gè)實(shí)施方案中，本文提供的方法降低了與慢性肝臟疾病有關(guān)的門靜脈高壓。在一個(gè)實(shí)施方案中，本文提供的方法降低了肝酶的升高水平，比如ALT(丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶)和AST(天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶)水平的升高水平。在一個(gè)實(shí)施方案中，本文提供的方法改善了與慢性肝臟疾病有關(guān)的肝功能。
還提供了用于本文提供的方法的半胱天冬酶抑制劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，用于本文提供的方法的半胱天冬酶抑制劑化合物選自∶
或其可藥用衍生物。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述可藥用衍生物為可藥用鹽。
在一個(gè)實(shí)施方案中，用于本文提供的方法中的半胱天冬酶抑制劑為
或其可藥用衍生物。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述可藥用衍生物為可藥用鹽。
在某些實(shí)施方案中，在本文提供的方法中可以順序或同時(shí)使用多于一種半胱天冬酶抑制劑。
還提供了包含治療有效量的本文提供的化合物和可藥用載體的藥物組合物，其中所述藥物組合物用于預(yù)防、治療或改善肝臟疾病的一種或多種癥狀。在某些實(shí)施方案中，所述癥狀為門靜脈高壓。在其它實(shí)施方案中，肝臟疾病為慢性肝臟疾病，選自肝硬化、肝纖維化、非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、肝炎(包括病毒性和酒精性肝炎)、原發(fā)性膽汁性肝硬變(PBC)和原發(fā)性硬化性膽管炎(PSC)。在仍然其它實(shí)施方案中，門靜脈高壓是慢性肝臟疾病的結(jié)果。在某些實(shí)施方案中，慢性肝臟疾病為肝硬化。
進(jìn)一步提供包含包裝材料、本文提供的化合物或其可藥用衍生物的制品，其用于治療、預(yù)防或改善與肝臟疾病有關(guān)的一種或多種癥狀，以及標(biāo)簽，其指示所述化合物或其可藥用衍生物用于治療、預(yù)防或改善肝臟疾病的一種或多種癥狀。在某些實(shí)施方案中，所述癥狀癥狀為門靜脈高壓。在其它實(shí)施方案中，肝臟疾病為慢性肝臟疾病，選自肝硬化、肝纖維化、非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、肝炎(包括病毒性和酒精性肝炎)、原發(fā)性膽汁性肝硬變(PBC)和原發(fā)性硬化性膽管炎(PSC)。在仍然其它實(shí)施方案中，門靜脈高壓是慢性肝臟疾病的結(jié)果。在某些實(shí)施方案中，慢性肝臟疾病為肝硬化。
5.優(yōu)選的實(shí)施方案的詳細(xì)說(shuō)明
5.1.定義
除非另有定義，否則本文使用的所有技術(shù)術(shù)語(yǔ)和科學(xué)術(shù)語(yǔ)具有如本領(lǐng)域普通技術(shù)人員通常理解的相同含義。將本文提及的所有專利、申請(qǐng)、公開的申請(qǐng)及其他出版物的全文通過(guò)引用并入本文。在本文使用的術(shù)語(yǔ)存在多個(gè)定義的情況下，除非另有說(shuō)明，否則以此部分中定義為準(zhǔn)。
除非上下文另有明確的規(guī)定，否則單數(shù)形式“一個(gè)”、“一種”和“所述”包括復(fù)數(shù)指示。
如本文使用的術(shù)語(yǔ)“對(duì)象”為動(dòng)物，比如為哺乳動(dòng)物，包括人類，比如患者。
如本文使用的生物活性指化合物的體內(nèi)活性，或者當(dāng)化合物、組合物或其它混合物在體內(nèi)給藥時(shí)產(chǎn)生的生理反應(yīng)。因此，生物活性涵蓋這樣的化合物、組合物和混合物的治療效果和藥代動(dòng)力學(xué)行為?？梢栽诒辉O(shè)計(jì)用來(lái)測(cè)試生物活性的體外系統(tǒng)中觀察這樣的活性。
如本文使用的化合物的可藥用衍生物包括其鹽、酯、縮醛、縮酮、原酸酯、半縮醛、半縮酮、酸、堿、溶劑化物、水合物或前藥。這樣的衍生物可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員使用已知用于這樣的衍生化的方法輕易制備。制備的化合物可以對(duì)動(dòng)物或人給藥，沒(méi)有實(shí)質(zhì)性的毒性作用，并且該化合物具有藥物活性或者是前藥。可藥用鹽包括，但不限于胺鹽，比如但不限于N,N'-二芐基乙二胺、氯普魯卡因、膽堿、氨、二乙醇胺及其它羥基烷基胺、乙二胺、N-甲基葡糖胺、普魯卡因、N-芐基苯乙胺、1-對(duì)-氯芐基-2-吡咯烷-1'-基甲基苯并咪唑、二乙胺及其它烷基胺、哌嗪和三(羥甲基)氨基甲烷；堿金屬鹽，比如但不限于鋰鹽、鉀鹽和鈉鹽；堿土金屬鹽，比如但不限于鋇鹽、鈣鹽和鎂鹽；過(guò)渡金屬鹽，比如但不限于鋅鹽；和無(wú)機(jī)鹽，比如但不限于磷酸氫二鈉和磷酸二鈉；以及包括，但不限于，無(wú)機(jī)酸的鹽，比如但不限于鹽酸鹽和硫酸鹽；和有機(jī)酸鹽，比如但不限于乙酸鹽、乳酸鹽、蘋果酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、抗壞血酸鹽、琥珀酸鹽、丁酸鹽、戊酸鹽、甲磺酸鹽和富馬酸鹽?？伤幱悯グ?，但不限于酸性基團(tuán)的烷基、烯基、炔基、芳基、芳烷基和環(huán)烷基酯，所述酸性基團(tuán)包括但不限于羧酸、磷酸、膦酸、磺酸、亞磺酸和硼酸?？伤幱萌軇┗锖退衔锸腔衔锱c一或多個(gè)溶劑或水分子，或1至約100個(gè)，或1至約10個(gè)，或1至約2、3或4個(gè)溶劑或水分子的復(fù)合物。
如本文使用的治療指任何改善或以其他方式有益地改變疾病或病癥的一種或多種癥狀的方式。治療也涵蓋本文組合物的任何藥學(xué)應(yīng)用，例如用于治療肝臟疾病。
如本文使用的通過(guò)給藥特定化合物或藥物組合物來(lái)改善特定病癥的癥狀，指可以歸于給藥該組合物或與給藥該組合物相關(guān)的任何減輕，不管是永久的減輕還是暫時(shí)的減輕，持續(xù)的減輕還是短暫的減輕。
如本文使用的“并發(fā)癥”指與病癥或疾病相關(guān)而發(fā)展的病癥。并發(fā)癥可能是病癥或疾病引起的直接后果，或者可能與原發(fā)性病癥或疾病的存在相關(guān)。例如，門靜脈高壓是慢性肝臟疾病的并發(fā)癥。另外，肝硬化可能是慢性肝臟疾病的并發(fā)癥。在某些實(shí)施方案中，疾病的并發(fā)癥可以表現(xiàn)為癥狀，并且在那些情形中，這兩個(gè)術(shù)語(yǔ)在本文中可互換地使用。
如本文使用的，且除非另有說(shuō)明，否則術(shù)語(yǔ)“控制”涵蓋預(yù)防特定疾病或病癥在已經(jīng)經(jīng)受過(guò)該疾病或病癥的患者中復(fù)發(fā)，和/或使患有該疾病或病癥的患者停留在癥狀緩解的時(shí)間延長(zhǎng)。該術(shù)語(yǔ)涵蓋調(diào)節(jié)該疾病或病癥的閥值、發(fā)展和/或持續(xù)時(shí)間，或者改變患者對(duì)該疾病或病癥的反應(yīng)方式。
應(yīng)當(dāng)理解，本文提供的化合物可以包含手性中心。這樣的手性中心可以是(R)或(S)構(gòu)型，或者可以是其混合物。因此，本文提供的化合物可以是對(duì)映異構(gòu)體純的，或者是立體異構(gòu)或非對(duì)映異構(gòu)的混合物。同樣地，本領(lǐng)域技術(shù)人員將認(rèn)識(shí)到對(duì)于在體內(nèi)進(jìn)行差向異構(gòu)的化合物，以(R)形式給藥該化合物和以(S)形式給藥該化合物是等效的。
如本文使用的基本上純的指足夠均質(zhì)，如通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員用于分析這樣的純度使用的標(biāo)準(zhǔn)分析方法(比如薄層色譜法(TLC)、凝膠電泳、高效液相色譜法(HPLC)和質(zhì)譜法(MS))測(cè)定時(shí)顯示出沒(méi)有容易可檢測(cè)的雜質(zhì)，或者足夠純，以致進(jìn)一步純化沒(méi)有可檢測(cè)地改變物質(zhì)的物理和化學(xué)性質(zhì)，比如酶活性和生物學(xué)活性。用于純化化合物以制備基本化學(xué)純的化合物的方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的。然而，基本化學(xué)純的化合物可以是立體異構(gòu)體的混合物。在這樣的情況下，進(jìn)一步的純化可能會(huì)增加化合物的比活性。本發(fā)明公開內(nèi)容意味著包括所有這樣的可能異構(gòu)體，以及其外消旋和光學(xué)純形式。光學(xué)活性的(+)和(-)、(R)-和(S)-、或者(D)-和(L)-異構(gòu)體，可以使用手性合成子或手性試劑制備，或者使用常規(guī)方法比如反相HPLC拆分。當(dāng)本文描述的化合物包含烯烴雙鍵或其它幾何不對(duì)稱中心時(shí)，除非另外指定，其指化合物包含E和Z兩種幾何異構(gòu)體。同樣地，也意味著包括所有的互變異構(gòu)形式。
在一些實(shí)施方案中，本文提供的方法中使用的化合物是“立體化學(xué)純的”。立體化學(xué)純的化合物具有被本領(lǐng)域技術(shù)人員認(rèn)可為“純”的立體化學(xué)純度水平。在一些實(shí)施方案中，“立體化學(xué)純的”指基本不含其它異構(gòu)體的化合物。在特定的實(shí)施方案中，化合物是85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、99.5％或99.9％的不含其它異構(gòu)體。
如本文使用的“用于肝臟疾病的治療”指用任何已知并在市場(chǎng)上可得到或正在被開發(fā)用于治療肝臟疾病的藥物治療。例如，門靜脈高壓的治療指用市場(chǎng)上可得到的用于治療門靜脈高壓的藥物治療患者。在下文“聯(lián)合治療”部分中描述了一些示例性的藥物。
如本文使用的“慢性肝臟疾病的治療”指用任何已知并在市場(chǎng)上可得到或正在被開發(fā)用于治療慢性肝臟疾病的藥物治療。例如，門靜脈高壓的治療指用市場(chǎng)上可得到的用于治療門靜脈高壓治療的藥物治療患者。在下文“聯(lián)合治療”部分中描述了一些示例性的藥物。
如本文使用的“治療”指任何改善或以其他方式有益地改變疾病或病癥的一種或多種癥狀的方式?！爸委煛币埠w本文組合物的任何藥學(xué)應(yīng)用，例如用于治療肝臟疾病。
如本文使用的“減輕”指減少或消除癥狀。減輕也指降低疾病的嚴(yán)重程度或延遲疾病進(jìn)展或以其他方式有益的改變。
如本文使用的通過(guò)給藥特定化合物或藥物組合物來(lái)改善特定病癥的癥狀，指可以歸于給藥該組合物或與給藥該組合物相關(guān)的任何減輕，不管是永久的減輕還是暫時(shí)的減輕，持續(xù)的減輕還是短暫的減輕。
如本文使用的“曾經(jīng)歷治療失敗的患者”指本文在其他地方描述的患者群，包括之前用市場(chǎng)上目前可得到的任何藥物治療肝臟疾病且對(duì)治療沒(méi)有反應(yīng)(本文使用的“治療失敗”的同義詞)、不能耐受治療或?qū)τ谄涠栽撝委熡嗅t(yī)學(xué)禁忌的患者。例如，對(duì)于其門靜脈壓力在6至10mm Hg的患者的門靜脈高壓的治療反應(yīng)定義為門靜脈壓力從患有門靜脈高壓的患者的基準(zhǔn)門靜脈壓力值降低10％或更大。沒(méi)有獲得門靜脈壓力從基準(zhǔn)門靜脈壓力值降低10％或更大的患者是在醫(yī)學(xué)上歸類為對(duì)于治療沒(méi)有反應(yīng)的患者。具有門靜脈壓力大于12mmHg的患者，反應(yīng)定義為從患者的基準(zhǔn)門靜脈壓力降低至低于12mmHg或降低20％或更大。沒(méi)有獲得上述反應(yīng)的患者被認(rèn)為是治療失敗的。
門靜脈高壓的治療對(duì)于某些患者是禁忌的。例如，用非選擇性β阻斷劑治療還患有哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD)或竇性心律徐緩和部分AV阻斷(心臟的電傳導(dǎo)延長(zhǎng))的患者的門靜脈高壓是醫(yī)學(xué)禁忌的。
某些患者由于如本領(lǐng)域技術(shù)人員所理解的不期望的副作用的發(fā)展而不能耐受門靜脈高壓的治療。不能耐受治療可以包括，但不限于虛弱、呼吸急促和疲勞。
如本文使用的術(shù)語(yǔ)“組合”指使用超過(guò)一種治療劑(例如，半胱天冬酶抑制劑及其它試劑)。使用術(shù)語(yǔ)“組合”并不限制其中向患有病癥的對(duì)象給藥治療劑(例如，半胱天冬酶抑制劑和其他試劑)的順序。第一治療(例如，半胱天冬酶抑制劑及其它試劑)可以在向患有病癥的對(duì)象給藥其它治療(例如，半胱天冬酶抑制劑及其它試劑)之前(例如，之前5分鐘、15分鐘、30分鐘、45分鐘、1小時(shí)、2小時(shí)、4小時(shí)、6小時(shí)、12小時(shí)、24小時(shí)、48小時(shí)、72小時(shí)、96小時(shí)、1周、2周、3周、4周、5周、6周、8周或12周)、同時(shí)或之后(例如，5分鐘、15分鐘、30分鐘、45分鐘、1小時(shí)、2小時(shí)、4小時(shí)、6小時(shí)、12小時(shí)、24小時(shí)、48小時(shí)、72小時(shí)、96小時(shí)、1周、2周、3周、4周、5周、6周、8周或12周后)給藥。
如本文使用的術(shù)語(yǔ)“協(xié)同”指半胱天冬酶抑制劑和另外的試劑的組合，其比作為單一療法單獨(dú)給藥這兩種化合物的累加效應(yīng)更有效。治療組合(例如半胱天冬酶抑制劑和另外的試劑)的協(xié)同效應(yīng)，允許對(duì)患有病癥的個(gè)體使用較低劑量的一種或多種治療和/或較低頻率地施用治療。使用較低劑量的治療(例如半胱天冬酶抑制劑和另外的試劑)和/或以較低頻率施用該治療的能力，減少了對(duì)對(duì)象施用該治療伴隨的毒性，但沒(méi)有減少該治療在病癥的預(yù)防或治療中的功效。另外，協(xié)同作用可以在病癥的預(yù)防或治療中引起藥劑功效的改善。最后，治療組合(例如半胱天冬酶抑制劑和另外的試劑)的協(xié)同效應(yīng)，可以避免或減少單獨(dú)使用其中一種治療時(shí)伴隨的不良作用或不想要的副作用。
5.2.用于所述方法的化合物
文獻(xiàn)中已經(jīng)報(bào)道了在本文提供的方法中可以使用的一些半胱天冬酶抑制劑。用于所述方法的一些示例性的半胱天冬酶抑制劑為由Linton在Current Topics in Medicinal Chemistry,(2005)5:1-20中；和Linton et al.在J.Med.Chem.,2005,11,295-322 295,U.S.專利號(hào)7,351,702；7,410,956；7,443,790；7,553,852；7,652,153；7,612,091；7,807,659；7,857,712；7,960,415；8,071,618；7,074,782；7,053,057；6,689,784；6,632,962；6,559,304；6,201,118；6,800,619,6,197,750；6,544,951；6,790,989；7,053,056；7,183,260；7,692,038和國(guó)際申請(qǐng)?zhí)朩O 2006/017295；WO 2005/021516；WO 04/002961；WO 02/085899；WO 02/094263和WO 01/094351中描述的。將這些參考文獻(xiàn)的全部?jī)?nèi)容都通過(guò)引用并入本文。
在一個(gè)實(shí)施方案中，用于本文提供的方法中的半胱天冬酶抑制劑選自：
或其可藥用衍生物。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述可藥用衍生物為可藥用鹽。
在一個(gè)實(shí)施方案中，用于本文提供的方法中的半胱天冬酶抑制劑選自
或其可藥用衍生物。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述可藥用衍生物為可藥用鹽。
在某些實(shí)施方案中，在本文提供的方法中可以順序或同時(shí)使用多于一種半胱天冬酶抑制劑。
在一些實(shí)施方案中，本文所述化合物在肝臟疾病模型中在口服給藥0.001-1000mg/Kg之后具有功效。在一些實(shí)施方案中，本文所述化合物在肝臟疾病模型中在口服給藥0.01-100mg/Kg之后具有功效。
5.3.治療方法
在一些實(shí)施方案中，所本文提供的方法包括治療慢性肝臟疾病。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述方法用于治療慢性肝臟疾病的并發(fā)癥。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述方法用于降低與慢性肝臟疾病有關(guān)的門靜脈高壓。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述方法用于減少肝硬化。不受任何特定理論的束縛，據(jù)信在本文提供的方法中使用的半胱天冬酶抑制劑起抑制血管活性細(xì)胞因子的細(xì)胞凋亡和/或炎癥及產(chǎn)生和信號(hào)傳導(dǎo)，所述血管活性細(xì)胞因子影響肝臟和腸道血管系統(tǒng)，導(dǎo)致門靜脈高壓。
在一個(gè)實(shí)施方案中，慢性肝臟疾病是由于肝臟損傷導(dǎo)致的病癥。在一個(gè)實(shí)施方案中，肝臟損傷是由于毒素引起的，包括酒精、某些藥物和血液中正常物質(zhì)的異常組合。在另一個(gè)實(shí)施方案中，慢性肝損傷是由于感染或自身免疫疾病引起的。在一些實(shí)施方案中，所述損傷的準(zhǔn)確原因未知。
在一個(gè)實(shí)施方案中，慢性肝臟疾病包括，但不限于肝硬化、肝纖維化、非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、肝炎(包括病毒性和酒精性肝炎)、原發(fā)性膽汁性肝硬變(PBC)和原發(fā)性硬化性膽管炎(PSC)。在一個(gè)實(shí)施方案中，慢性肝臟疾病表現(xiàn)為本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的病癥，包括但不限于門靜脈高壓、肝酶(例如ALT和AST)、堿性磷酸酶(ALP)升高、膽紅素升高、肝硬化、皮脂腺病(脂肪肝)或纖維化的病理學(xué)證據(jù)，.
在一個(gè)實(shí)施方案中，慢性肝臟疾病表現(xiàn)為本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的病癥，包括但不限于肝門靜脈壓力升高、肝酶(例如ALT、AST)升高、肝損傷和肝硬化的組織學(xué)證據(jù)。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本文提供的方法用于治療門靜脈高壓。門靜脈高壓的癥狀可以包括，但不限于脾腫大、皮膚的小蜘蛛樣靜脈、以黑色柏油樣便或便血為特征的胃腸出血、腹水(液體在腹腔中蓄積(build-up))、腦病、蜘蛛痣(放射出許多小分枝血管的中心小動(dòng)脈)。門靜脈高壓的癥狀可以根據(jù)嚴(yán)重程度和個(gè)體而變化。在一些實(shí)施方案中，指定為在6至10mmHg之間的輕度門靜脈高壓可能根本不會(huì)顯示出任何癥狀。中等水平的門靜脈高壓在10至12mmHg之間，重度門靜脈高壓歸類為大于或等于12mmHg。用于測(cè)定門靜脈高壓的方法是本領(lǐng)域熟知的(參見(jiàn)Berzigotti,A.et al.Assessing portal hypertension in liver diseases,Expert Reviews Gastroenterol.Hepatol.2013；7:141-155.and Koh,C.et al.Approach to the diagnosis of portal hypertension.Clinical Liver Disease 2012；1:133-135，將其全文通過(guò)引用并入本文)。在一個(gè)實(shí)施方案中，臨床上定義的門靜脈壓力的水平升高降低了至少95％、至少90％、至少80％、至少70％、至少60％、至少50％、至少40％、至少30％、至少20％、至少10％、至少5％、至少2％或至少1％。
在一些實(shí)施方案中，提供用于治療已經(jīng)治療失敗的患者的門靜脈高壓的方法。治療門靜脈高壓的示例性的方法為Bari,K et al.Treatment of portal hypertension.World J.Gastroenterology 2012；18:1166-1175.和Giannelli,V.et al.Beta-blockers in liver cirrhosis.Annal.Gastroenterology 2014；27:20-26描述的，將其全文通過(guò)引用并入本文)。
在一些實(shí)施方案中，患者為因?yàn)橐环N或多種與治療有關(guān)的不良事件而中止門靜脈高壓治療的患者。由于包括疲勞、虛弱和呼吸急促的副作用，約15％的患者中止了采用非選擇性β阻斷劑(NSBB)的常規(guī)一線治療。在一些實(shí)施方案中，患者為沒(méi)有指示采用當(dāng)前治療的患者。例如，某些患者對(duì)于治療患有絕對(duì)的或相對(duì)的禁忌癥。禁忌癥包括，但不限于某些心血管疾病和多種呼吸系統(tǒng)疾病。約15％的其他患者患有對(duì)于采用NSBB治療的絕對(duì)的或相對(duì)的禁忌癥。
在一些實(shí)施方案中，提供用于治療采用對(duì)于門靜脈高壓而言目前市售可得到的治療和半胱天冬酶抑制劑組合來(lái)治療門靜脈高壓的方法。門靜脈高壓的示例性的治療方法為Bari K et al.的Treatment of portal hypertension World J.Gastroenterology 2012；18:1166-1175.和Giannelli,V.et al.的Beta-blockers in liver cirrhosis.Annal.Gastroenterology 2014；27:20-26中描述的，將其全文通過(guò)引用并入本文。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本文提供的方法可以降低升高的肝酶水平(比如ALT和AST水平)。用于測(cè)量升高的肝酶水平方法是本領(lǐng)域熟知的(參見(jiàn)，例如Jeong S.Y.et al.Sandwich ELISA for measurement of cytosolic aspartate aminotransferase in sera from patients with liver diseases,Clin Chem.,2003；49(5):826 9and Burin des Roziers N.et al.A microtiter plate assay for measurement of serum alanine aminotransferase in blood donors,Transfusion.,1995；35(4):331 4，將其中每篇的全文通過(guò)引用并入本文)。在一個(gè)實(shí)施方案中，一種或多種肝酶比如ALT或AST的升高水平或肝酶升高的總量，降低了超過(guò)約90％或超過(guò)95％。在一個(gè)實(shí)施方案中，一種或多種肝酶的升高水平，比如ALT或AST的升高水平，或肝酶升高的總量降低了至少95％、至少90％、至少80％、至少70％、至少60％、至少50％、至少40％、至少30％、至少20％、至少10％、至少5％、至少2％或至少1％。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本文提供一種用于治療肝硬化的方法。在某些實(shí)施方案中，用于治療肝硬化的方法進(jìn)一步減少了與肝硬化有關(guān)的癥狀。在一些實(shí)施方案中，肝硬化的癥狀可以包括，但不限于門靜脈高壓、神經(jīng)功能異常、腹水(液體在腹腔中蓄積)、男性乳房肥大、咳血或嘔血、手指變形(手掌的腱膜攣縮)、膽結(jié)石、脫發(fā)、發(fā)癢、黃疸、腎衰竭、肝腦病、肌肉喪失、食欲不振、手掌變紅、面頰中唾液腺肥大、睪丸萎縮、皮膚中小的蜘蛛樣靜脈、虛弱、體重?fù)p失、蜘蛛痣(放射出許多小分枝血管的中心小動(dòng)脈)、腦病和撲翼樣震顫(撲動(dòng)狀震顫)。肝硬化的癥狀可以變化。肝硬化定義為代償性的或失代償性的，并且使用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的所謂的Child-Pugh系統(tǒng)進(jìn)一步分類?；谀承┡R床上參數(shù)對(duì)肝硬化患者分類。Child Pugh A是代償性的，可顯示最小明顯的癥狀。分類為Child Pugh B或Child Pugh C的患者是失代償性的，可顯示出外部癥狀，比如腹水。
在其它實(shí)施方案中，肝硬化的原因包括任何原因誘導(dǎo)的肝炎、過(guò)度脂肪沉積、病毒(例如，HCV和HBV)、某些藥物的使用、化學(xué)暴露、膽管阻塞、自體免疫疾病、血液從肝臟流出障礙(即，Budd-Chiari綜合癥)、心臟和血管失調(diào)、α1-抗胰蛋白酶缺乏、血半乳糖水平高、血酪氨酸水平高、糖原貯積病、糖尿病、營(yíng)養(yǎng)失調(diào)、過(guò)多的銅(Wilson疾病)或鐵(血色素沉著癥)的遺傳性積累。在一個(gè)實(shí)施方案中，肝硬化的原因是濫用酒精。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本文提供用于治療肝硬化的方法。在一個(gè)實(shí)施方案中，肝硬化的病理學(xué)特征是正常微觀小葉結(jié)構(gòu)的喪失和結(jié)節(jié)再生。用于測(cè)量肝硬化程度的方法是本領(lǐng)域熟知的。例如，肝硬化存在的測(cè)量是由臨床病理學(xué)家通過(guò)組織學(xué)檢查從肝硬化患者的肝臟采集的肝活組織檢查樣品確定的。
在一些實(shí)施方案中，提供用于治療采用對(duì)于門靜脈高壓(portal hypertension)而言目前市售可得到的或試驗(yàn)性的治療和半胱天冬酶抑制劑組合來(lái)治療肝硬化的方法。門靜脈高壓的示例性的治療方法為Bari,K et al.Treatment of portal hypertension.World J.Gastroenterology 2012；18:1166-1175和Giannelli,V.et al.Beta-blockers in liver cirrhosis.Annal.Gastroenterology 2014；27:20-26描述的，將其全文通過(guò)引用并入本文。用于門靜脈高壓的示例性的化合物和目前試驗(yàn)性的治療劑包括普萘洛爾、納多洛爾、卡維地洛及本領(lǐng)域技術(shù)人員理解的其類似物或衍生物。用于治療肝硬化的示例性的化合物和目前試驗(yàn)性的治療劑包括Gilead的Simtuzumab(GS-6624)、Bayer和Onyx的索拉非尼、Norvartis的Serelaxin(RLX030)、噻嗎洛爾、NCX-1000、特利加壓素(Terlipressin)、NGM Biopharmaceuticals的NGM282、Lumena Pharmaceuticals的LUM001及本領(lǐng)域技術(shù)人員理解的其類似物或衍生物。
在一些實(shí)施方案中，提供用于治療采用對(duì)于門靜脈高壓而言目前市售可得到的或試驗(yàn)性的治療和半胱天冬酶抑制劑組合來(lái)治療肝硬化的方法。門靜脈高壓的示例性的治療方法為Bari,K et al.Treatment of portal hypertension.World J.Gastroenterology 2012；18:1166-1175和Giannelli,V.et al.Beta-blockers in liver cirrhosis.Annal.Gastroenterology 2014；27:20-26中描述的，將其全文通過(guò)引用并入本文。用于治療門靜脈高壓的示例性的化合物和目前試驗(yàn)性的治療劑包括普萘洛爾((RS)-1-(1-甲基乙基氨基)-3-(1-萘氧基)丙-2-醇)、納多洛爾((2R*,3S*)-5-{[(2R*)-3-(叔-丁基氨基)-2-羥丙基]氧基}-1,2,3,4-四氫萘-2,3-二醇)、卡維地洛((±)-[3-(9H-咔唑-4-基氧基)-2-羥丙基][2-(2-甲氧基苯氧基)乙基]胺)及本領(lǐng)域技術(shù)人員理解的其類似物或衍生物。用于治療肝硬化的示例性的化合物和目前試驗(yàn)性的治療劑包括單克隆抗體，比如Gilead的人化的單克隆抗體Simtuzumab(GS-6624,其結(jié)合賴氨酰氧化酶-樣2(LOXL2)酶，且可以充當(dāng)免疫調(diào)節(jié)劑)、SorafenibBayer和Onyx的索拉非尼(4-[4-[[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]氨基甲?；被鵠苯氧基]-N-甲基吡啶-2-甲酰胺)、激素比如Norvartis的Serelaxin(RLX030，人松弛素-2的重組形式，由如下序列表示L-絲氨酸、L-α-天冬氨?；?L-絲氨?；?L-色氨?；?L-甲硫氨酰基-L-α-谷氨?；?L-α-谷氨酰基-L-纈氨?；?L-異亮氨?；?L-賴氨?；?L-亮氨酰基-L-半胱氨?；拾滨；?L-精氨?；?L-α-谷氨?；?L-亮氨?；?L-纈氨酰基-L-精氨?；?L-丙氨?；?L-谷氨酰胺?；?L-異亮氨?；?L-丙氨酰基L-異亮氨?；?L-半胱氨?；拾滨；?L-甲硫氨酰基-L-絲氨?；?L-蘇氨?；?L-色氨?；h(huán)(11→11'),(23→24')-雙(二硫化物)與5-氧代-L-脯氨?；?L-亮氨?；?L-酪氨酰基-L-絲氨?；?L-丙氨?；?L-亮氨?；?L-丙氨?；?L-天冬酰胺酰基-L-賴氨?；?L-半胱氨酰基基-L-半胱氨?；?L-組氨?；?L-基-纈氨?；拾滨；?L-半胱氨?；鵏-蘇氨酰基-L-賴氨?；?L-精氨?；?L-絲氨?；?L-亮氨?；?L-丙氨?；?L-精氨?；?L-苯基丙氨?；?L-半胱氨酸環(huán)(10'→15')-二硫化物)、噻嗎洛爾((S)-1-(叔丁基氨基)-3-[(4-嗎啉-4-基-1,2,5-噻二唑-3-基)氧基]丙-2-醇)、NCX-1000(例如Fiorucci et al.in Cardiovasc Drug Rev.2004Summer；22(2):135-46描述的)、特利加壓素(1-{[(4R,7S,10S,13S,16S,19R)-19-{[({[(氨基乙?；?氨基]乙?；鶀氨基)乙?；鵠氨基}-7-(2-氨基-2-氧代乙基)-10-(3-氨基-3-氧代丙基)-13-芐基-16-(4-羥基苯甲基)-6,9,12,15,18-五氧代-1,2-二硫代-5,8,11,14,17-五氮雜環(huán)二十烷(pentaazacycloicosan)-4-基]羰基}-L-脯氨?；?N-(2-氨基-2-氧代乙基)-L-賴氨?；０?、NGM282(一種成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子的工程化類似物)(參見(jiàn)例如Rossi et al.,Journal of Hepatology,Volume 60,Issue 1,Supplement,Page S533,April 2014)、LUM001(參見(jiàn)例如，美國(guó)專利申請(qǐng)?zhí)?0130338093；20130109671；20130108573和20130034536)，以及本領(lǐng)域技術(shù)人員理解的其類似物或衍生物。
在一些實(shí)施方案中，提供采用目前用于門靜脈高壓的試驗(yàn)性治療和半胱天冬酶抑制劑組合來(lái)治療肝硬化的方法。門靜脈高壓的示例性的治療方法為Bari,K et al.Treatment of portal hypertension.World J.Gastroenterology 2012；18:1166-1175和Giannelli,V.et al.Beta-blockers in liver cirrhosis.Annal.Gastroenterology 2014；27:20-26描述的，并將其全文通過(guò)引用并入本文。
在一些實(shí)施方案中，本文提供用于治療原發(fā)性膽汁性肝硬化(PBC)的方法。原發(fā)性膽汁性肝硬化是由肝臟內(nèi)部的膽管炎癥開始。該炎癥阻礙了膽汁從肝臟流出；因此，膽汁停留在肝細(xì)胞中或外溢到血流中。隨著炎癥從膽管擴(kuò)散到肝臟的其余部分，疤痕組織的網(wǎng)格在整個(gè)肝臟內(nèi)發(fā)展。門靜脈高壓是一種PBC常見(jiàn)并發(fā)癥。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述方法用于治療35到60歲的女性中的PBC。在一些實(shí)施方案中，PBC是由自身免疫病癥引起的。本文提供的方法用于治療一種或多種前述原發(fā)性膽汁性肝硬化的癥狀。
在一些實(shí)施方案中，本文提供用于治療原發(fā)性硬化性膽管炎(PSC)的方法。原發(fā)性硬化性膽管炎的特征在于慢性膽汁郁積，其與肝臟內(nèi)膽道中的慢性炎癥和細(xì)胞凋亡有關(guān)。該慢性病癥可導(dǎo)致患者的肝硬化和癌癥。PSC的病因?qū)W沒(méi)有被充分理解，目前沒(méi)有任何有效的醫(yī)學(xué)療法。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述方法用于治療PSC。門靜脈高壓是一種PSC常見(jiàn)并發(fā)癥。在一個(gè)實(shí)施方案中，原發(fā)性硬化性膽管炎的出現(xiàn)與炎性腸病相關(guān)。本文提供的方法用于治療一種或多種前述原發(fā)性硬化性膽管炎的癥狀。
細(xì)胞凋亡主要經(jīng)由兩個(gè)信號(hào)途徑出現(xiàn)：死亡受體介導(dǎo)的外源性途徑或線粒體介導(dǎo)的內(nèi)源性途徑。在被稱為死亡受體的細(xì)胞因子受體家族(比如，腫瘤壞死因子受體1(TNF-R1)，F(xiàn)as/CD95，及腫瘤壞死因子相關(guān)的凋亡誘導(dǎo)的配體受體1和2(TRAIL-R1和TRAIL-R2))與它們的同源配體(TNF-、Fas配體(FasL)/CD95L,TRAIL)結(jié)合之后，外源性途徑在質(zhì)膜上開始。參見(jiàn)，Guicciardi et al.Gut,2005:54,1024-1033和Ghavami et al.,Med.Sci.Monit.,2005:11(11):RA337-345。如Mookerjee et al.in Gut 2003；52:1182-1187所示，TNF-可介導(dǎo)患者的門靜脈高壓。
如本領(lǐng)域技術(shù)人員已知，細(xì)胞因子白細(xì)胞介素1β(IL-1β)和白細(xì)胞介素18(IL-18)介導(dǎo)肝臟中的炎癥且與慢性肝臟疾病有關(guān)。因此，預(yù)防或抑制肝臟中的炎癥是慢性肝臟疾病治療中的一個(gè)組成部分。IL-1β和IL-18需要半胱天冬酶的作用由它們各自的前體蛋白pro-IL1β和pro-IL-18活化它們各自的炎癥活性。前體蛋白pro-IL1β和pro-IL-18缺乏炎癥活性。不受任何特定理論的束縛，據(jù)信在一些實(shí)施方案中，本文提供的化合物預(yù)防或抑制肝臟中的過(guò)度炎癥有助于減少與慢性肝臟疾病有關(guān)的肝損傷。如Buck,M et al.在Hepatology 2014；59:1052-1059中所示，IL1-α可介導(dǎo)患者的門靜脈高壓。
5.4.化合物的制備
用于本文提供的方法的化合物可以使用常規(guī)合成步驟制備。用于制備本文使用的半胱天冬酶抑制劑的示例性的方法描述在(6,197,750；6,544,951；6,790,989；7,053,056；7,183,260；7,692,038和Linton S.et al J.Med Chem.2005；48:,6779,Ueno H.et al.Biorg.Med.Chem.Lett.2009；19,199-102中，將其中每篇的全文通過(guò)引用并入本文)。一種制備恩利卡生(emricasan)的示例性的方法描述在實(shí)施例1中。
5.5.藥物組合物的制劑
本文提供的藥物組合物包含治療有效量的一種或多種本發(fā)明提供的用于預(yù)防、治療或改善肝臟疾病的一種或多種癥狀的化合物和可藥用載體。
將所述化合物配制成合適的藥物制劑，比如用于口服給藥的溶液、混懸液、片劑、分散片、丸劑、膠囊、散劑、緩釋制劑或酏劑，用于腸胃外給藥的無(wú)菌溶液或混懸液，以及透皮貼劑制劑和干粉吸入劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，使用本領(lǐng)域熟知的技術(shù)和方法將上述化合物配制成藥物組合物(參見(jiàn)，例如Remington’s Pharmaceutical Sciences,20th eds.,Mack Publishing,Easton PA(2000))。
在組合物中，有效濃度的一種或多種化合物或可藥用衍生物，與合適的藥物載體或溶媒混合。在配制前，所述化合物可以如上所述衍生化為相應(yīng)的鹽、酯、酸、堿、溶劑化物、水合物或前藥。所述化合物在組合物中的濃度是當(dāng)給藥時(shí)能有效治療、預(yù)防或改善肝臟疾病的一種或多種癥狀的給藥量。
在一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物配制用于單一劑量給藥。為了配制組合物，以緩解或改善治療病癥的有效濃度，將重量百分比的化合物溶解、懸浮、分散、或以其他方式混合在所選擇的溶媒中。適于給藥本文提供的化合物的藥物載體或溶媒包括本領(lǐng)域技術(shù)人員已知適合特定給藥方式的任何載體。
另外，所述化合物可以配制為組合物中的單一可藥用活性成分，或者可以與其它活性成分組合。脂質(zhì)體混懸液，包括組織靶向脂質(zhì)體，比如腫瘤靶向脂質(zhì)體，也可以適合作為可藥用載體。這些可以根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法制備。例如，脂質(zhì)體制劑可以如本領(lǐng)域已知的制備。簡(jiǎn)而言之，脂質(zhì)體比如多層囊泡(MLV’s)可以通過(guò)在燒瓶?jī)?nèi)壁上干燥蛋磷脂酰膽堿和腦磷脂酰絲氨酸(摩爾比7∶3)而形成。加入本文提供的化合物在缺乏二價(jià)陽(yáng)離子的磷酸鹽緩沖液(PBS)中的溶液，并振搖燒瓶直到脂質(zhì)膜分散。洗滌所得到的囊泡，以除去未包封的化合物，離心沉淀，然后再懸浮在PBS中。
活性化合物以對(duì)治療的患者足以發(fā)揮治療有用效果而不存在不期望的副作用的量包括在可藥用載體中。治療有效濃度可以憑經(jīng)驗(yàn)決定，通過(guò)在本領(lǐng)域已知的體外和體內(nèi)系統(tǒng)中測(cè)試化合物，然后從中外推出用于人類的劑量。
藥物組合物中活性化合物的濃度將取決于活性化合物的吸收、失活和排泄速率，化合物的物理化學(xué)性質(zhì)，劑量時(shí)間表和給藥量，以及本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其它因素。例如，遞送量足以改善肝臟疾病的一種或多種癥狀。
在一個(gè)實(shí)施方案中，治療有效劑量將產(chǎn)生如下的活性成分血清濃度：約0.1ng/ml到約50-100μg/ml、約0.5ng/ml至約80μg/ml、約1ng/ml至約60μg/ml、約5ng/ml至約50μg/ml、約5ng/ml至約40μg/ml、約10ng/ml至約35μg/ml、約10ng/ml至約25μg/ml、約10ng/ml至約10μg/ml、約25ng/ml至約10μg/ml、約50ng/ml至約10μg/ml、約50ng/ml至約5μg/ml、約100ng/ml至約5μg/ml、約200ng/ml至約5μg/ml、約250ng/ml至約5μg/ml、約500ng/ml至約5μg/ml、約1μg/ml至約50μg/ml、約0.1ng/ml至約5ng/ml、約1ng/ml至約10ng/ml或約1μg/ml至約10μg/ml。在一些實(shí)施方案中、藥物組合物將提供如下劑量：約0.001mg至約2000mg化合物/千克體重/日、約0.002ml至約1000mg化合物/千克體重/日、約0.005ml至約500mg化合物/千克體重/日、約0.005ml至約250mg化合物/千克體重/日、約0.005ml至約200mg化合物/千克體重/日、約0.005ml至約100mg化合物/千克體重/日、約0.001ml至約0.005mg化合物/千克體重/日、約0.01ml至約100mg化合物/千克體重/日、約0.02ml至約100mg化合物/千克體重/日、約0.05ml至約100mg化合物/千克體重/日、約0.1ml至約100mg化合物/千克體重/日、約0.5ml至約100mg化合物/千克體重/日、約0.75ml至約100mg化合物/千克體重/日、約1ml至約100mg化合物/千克體重/日、約1ml至約10mg化合物/千克體重/日、約0.001ml至約5mg化合物/千克體重/日約200ml至約2000mg化合物/千克體重/日、或約10ml至約100mg化合物/千克體重/日。藥物劑量單位形式制備為提供每個(gè)劑量單元形式約1ml至約1000mg、約1ml至約800mg、約5ml至約800mg、約1ml至約100mg、約1ml至約50mg、約5ml至約100mg、約10ml至約50mg、約10ml至約100mg、約25ml至約50mg和約10ml至約500mg的主要活性成分或主要成分的組合。
所述活性成分可以一次給藥，或者可以分成許多較小的劑量以間隔時(shí)間給藥。應(yīng)當(dāng)理解，精確劑量和治療的持續(xù)時(shí)間隨受治療的疾病變化，，并且可以使用已知的測(cè)試方案憑經(jīng)驗(yàn)確定，或者通過(guò)體內(nèi)或體外測(cè)試數(shù)據(jù)外推確定。應(yīng)當(dāng)注意濃度和劑量值也可以隨著要緩解的病癥的嚴(yán)重程度而變化。應(yīng)當(dāng)進(jìn)一步理解，對(duì)于任何特定的對(duì)象，具體劑量方案應(yīng)當(dāng)隨著時(shí)間根據(jù)個(gè)體需要和給藥或監(jiān)督組合物給藥的人的專業(yè)判斷來(lái)調(diào)整，而且，本文列出的濃度范圍僅僅為示例性的，而不意味著限制權(quán)利要求的組合物的范圍或?qū)嵤?/p>
可藥用衍生物包括酸、堿和酯、鹽、水合物、溶劑化物和前藥形式。選擇衍生物，使得其藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)優(yōu)于相應(yīng)的中性化合物。
因此，有效濃度或數(shù)量的本文所述一種或多種化合物或其可藥用衍生物與用于全身、局部或區(qū)域給藥的合適藥物載體或溶媒混合，以形成藥物組合物?；衔镆杂糜谥委熁蝾A(yù)防肝臟疾病或改善其一種或多種癥狀的有效量被包括。組合物中活性化合物的濃度將取決于活性化合物的吸收、失活和排泄速率，劑量時(shí)間表、給藥量、具體制劑、以及本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其它因素。
所述組合物旨在通過(guò)合適的途徑給藥，包括口服、腸胃外、直腸、局部、區(qū)域或經(jīng)由鼻飼管(nasogastric tube)或口胃管(orogastric tube.)。對(duì)于口服給藥，可以使用膠囊和片劑。所述組合物是液體、半液體或固體形式，而且以適合每種給藥途徑的方式配制。在一個(gè)實(shí)施方案中，給藥方式包括腸胃外和口服給藥模式。在一些實(shí)施方案中，預(yù)期口服給藥。
用于腸胃外、皮內(nèi)、皮下或局部應(yīng)用的溶液或懸浮液可以包括任一種下述組分：無(wú)菌稀釋劑，比如注射用水、鹽溶液、非揮發(fā)油、聚乙二醇、甘油、丙二醇、二甲基乙酰胺或其它合成溶劑；抗微生物劑，比如苯甲醇和尼泊金甲酯；抗氧劑，比如抗壞血酸和亞硫酸氫鈉；螯合劑，比如乙二胺四乙酸(EDTA)；緩沖液，比如乙酸鹽、檸檬酸鹽和磷酸鹽；以及用于調(diào)節(jié)張力的試劑，比如氯化鈉或葡萄糖。腸胃外制劑可以封裝在安瓿、一次性注射器、或者由玻璃、塑料或其它合適的材料制成的單一劑量或多次劑量小瓶中。
在化合物顯示出溶解性不足的情況下，可以使用增溶化合物的方法。這樣的方法是本領(lǐng)域那些技術(shù)人員已知的，包括但不限于使用共溶劑比如二甲亞砜(DMSO)，使用表面活性劑比如或溶解在碳酸氫鈉水溶液中。
在混合或加入化合物時(shí)，得到的混合物可以是溶液、懸浮液、乳液等。得到的混合物的形式取決于多種因素，包括預(yù)期的給藥方式和化合物在選擇的載體或溶媒中的溶解性。所述有效濃度足以改善受治療的疾病、障礙或病癥的癥狀，其可以憑經(jīng)驗(yàn)確定。
為了給藥至人類和動(dòng)物，以單位劑型提供所述藥物組合物，比如片劑、膠囊、丸劑、粉末、顆粒劑、無(wú)菌腸胃外溶液或懸浮液、和口服溶液或懸浮液、以及油包水乳液，其包含了適量的化合物或其可藥用衍生物。可藥用治療活性化合物及其衍生物以單位劑型或多次劑型被配制和給藥。如本文使用的單位劑型指適合人類和動(dòng)物對(duì)象且如本領(lǐng)域已知的獨(dú)立包裝的物理上離散單元。每個(gè)單位劑量包含預(yù)定量的足以產(chǎn)生期望治療效果的治療活性化合物，與需要的藥物載體、溶媒或稀釋劑組合。單位劑型的實(shí)例包括安瓿和注射器，以及獨(dú)立包裝的片劑或膠囊。單位劑型可以以部分或多倍給藥。多次劑型是多個(gè)同樣的單位劑型，包裝在單一容器中，以分開的單位劑型給藥。多次劑型的實(shí)例包括小瓶、片劑或膠囊瓶、或品脫或加侖瓶。因此，多次劑型是沒(méi)有在包裝中分開的多個(gè)單位劑量。
也可以制備緩釋釋放制劑。緩釋釋放制劑的合適的實(shí)施例包括其包含本文提供的化合物的固體疏水性聚合物的半滲透性基質(zhì)，其中所述基質(zhì)是成形制品的形式，例如薄膜或微膠囊。緩釋釋放基質(zhì)的實(shí)例包括聚酯、水凝膠(例如聚(2-羥乙基-甲基丙烯酸酯)或聚(乙烯醇))、聚交酯、L-谷氨酸和乙基-L-谷氨酸酯的共聚物、不可降解的乙烯-乙酸乙烯酯、可降解的乳酸-羥基乙酸共聚物比如LUPRON DEPOTTM(由乳酸-乙醇酸共聚物和醋酸亮丙瑞林組成的可注射微球體)、和聚-D-(-)-3-羥基丁酸。雖然聚合物比如乙烯-乙酸乙烯酯和乳酸-乙醇酸能夠在100天內(nèi)釋放分子，但是一些水凝膠釋放蛋白的時(shí)間段較短。當(dāng)包封的化合物在體內(nèi)保持很長(zhǎng)時(shí)間時(shí)，在37℃下暴露于水分導(dǎo)致它們可能變性或聚合，使得生物活性的喪失，并且它們結(jié)構(gòu)的可能改變。根據(jù)參與的作用機(jī)制，可以設(shè)計(jì)合理策略以實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定化。例如，如果發(fā)現(xiàn)聚合機(jī)制是通過(guò)硫代-二硫化物交換而形成分子間S--S鍵，那么可以通過(guò)修飾巰基殘基、從酸性溶液中凍干、控制含水量、使用合適的添加劑和開發(fā)特定聚合物基質(zhì)組合物，以實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定化。
可以制備包含如下范圍活性成分的劑型或組合物：0.001％至100％活性成分、0.002％至100％活性成分、0.005％至90％活性成分、0.01％至100％活性成分、0.05％至100％活性成分、0.05％至90％活性成分、0.1％至100％活性成分、0.1％至1％活性成分、0.1％至0.5％活性成分、1％至100％活性成分、1％至99％活性成分、1％至98％活性成分、1％至97％活性成分、1％至96％活性成分、1％至95％活性成分、5％至95％活性成分、10％至100％活性成分、10％至95％活性成分、15％至95％活性成分、20％至95％活性成分、25％至100％活性成分、50％至100％活性成分、50％至95％活性成分、60％至95％活性成分或75％至100％活性成分，其余是無(wú)毒性載體。對(duì)于口服給藥，通過(guò)加入任何常用的賦形劑，比如例如，藥物級(jí)的甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸鎂、滑石、纖維素衍生物、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、葡萄糖、蔗糖、碳酸鎂或糖精鈉，形成可藥用無(wú)毒組合物。這樣的組合物包括溶液、懸浮液、片劑、膠囊、粉末和緩釋釋放制劑，比如但不限于植入物和微膠囊遞送系統(tǒng)，以及可生物降解的生物相容的聚合物，比如膠原、乙烯醋酸乙烯、聚酐、聚乙醇酸、聚原酸酯、聚乳酸等。用于制備這些組合物的方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的。預(yù)期的組合物可以包含0.001％至100％的活性成分，在一個(gè)實(shí)施方案中，包含75-95％的活性成分。
活性化合物或可藥用衍生物可以與保護(hù)化合物使其不會(huì)被身體快速清除的載體一起制備，例如延時(shí)釋放制劑或包衣。
所述組合物可以包括其它活性化合物，以獲得期望的性質(zhì)組合。如本文所述的，本文提供的化合物或其可藥用衍生物也可以為了治療或預(yù)防目的，與一般領(lǐng)域中已知的對(duì)治療肝臟疾病具有價(jià)值的另一種藥理學(xué)試劑一起有利地給藥。應(yīng)當(dāng)理解，這樣的組合治療構(gòu)成了本文提供的組合物和治療方法的一個(gè)進(jìn)一步的方面。
口服給藥的組合物
口服藥物劑型是固體、凝膠或液體。固體劑型是片劑、膠囊、顆粒和散裝粉末?？诜瑒┑念愋桶▔褐频摹⒖删捉赖腻V劑和可以包腸溶衣、糖衣或薄膜衣的片劑。膠囊可以是硬膠囊或軟明膠膠囊，而顆粒和粉末可以與本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其它成分組合，以非泡騰或泡騰形式提供。
在一些實(shí)施方案中，制劑是固體劑型，比如膠囊或片劑。片劑、丸劑、膠囊、錠劑等，可以包含任一種下述成分或類似性質(zhì)的化合物：粘合劑；稀釋劑；崩解劑；潤(rùn)滑劑；助流劑；甜味劑；和矯味劑。
粘合劑的實(shí)例包括微晶纖維素、西黃蓍膠、葡萄糖溶液、阿拉伯膠漿、明膠溶液、蔗糖和淀粉糊。潤(rùn)滑劑包括滑石、淀粉、硬脂酸鎂或硬脂酸鈣、石松子和硬脂酸。稀釋劑包括例如乳糖、蔗糖、淀粉、高嶺土、鹽、甘露醇和磷酸氫鈣。助流劑包括，但不限于膠態(tài)二氧化硅。崩解劑包括交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、淀粉羥乙酸鈉、海藻酸、玉米淀粉、馬鈴薯淀粉、膨潤(rùn)土、甲基纖維素、瓊脂和羧甲基纖維素。著色劑包括，例如任何批準(zhǔn)認(rèn)可的水溶性FD和C染料，其混合物；以及懸浮在氧化鋁水合物中的水不溶性FD和C染料。甜味劑包括蔗糖、乳糖、甘露醇和人造甜味劑比如糖精，以及任意數(shù)量的噴霧干燥的調(diào)味劑。調(diào)味劑包括從植物比如水果中萃取的天然調(diào)味劑，和產(chǎn)生愉快感覺(jué)的化合物的合成混合物，比如但不限于薄荷和水楊酸甲酯。潤(rùn)濕劑包括單硬脂酸丙二醇酯、脫水山梨糖醇單油酸酯、二甘醇單月桂酸酯和聚氧乙烯月桂醚。腸溶衣包括脂肪酸、脂肪、蠟、蟲膠、氨化蟲膠和鄰苯二甲酸醋酸纖維素。膜包衣包括羥乙基纖維素、羧甲基纖維素鈉、聚乙二醇4000和鄰苯二甲酸醋酸纖維素。
如果期望口服給藥，化合物可以提供在保護(hù)其免于胃的酸性環(huán)境的組合物中。例如，組合物可以配制在于胃中保持其完整性且在腸中釋放活性化合物的腸溶衣中。所述組合物也可以與抗酸劑或其它這樣的成分配制。
當(dāng)劑量單位形式是膠囊時(shí)，除了上述類型的材料之外，其還可以包含液體載體，比如脂肪油。另外，劑量單位形式可以包含改變劑量單位物理形式的各種其它材料，例如糖衣和其它腸溶劑包衣。所述化合物也可以作為酏劑、懸浮液、糖漿、糯米紙囊劑、噴霧劑(sprinkle)、咀嚼膠等的組分給藥。除了活性化合物之外，糖漿可以包含作為甜味劑的蔗糖和一些防腐劑、染料和色素、及調(diào)味劑。
活性物質(zhì)也可以與不損害期望的作用的其它活性物質(zhì)或者與補(bǔ)充期望的作用的物質(zhì)混合，所述物質(zhì)比如抗酸劑、H2阻斷劑和利尿劑。所述活性成分為如本文描述的化合物或其可藥用衍生物?？梢园ㄝ^高濃度，至多約98％重量的活性成分。
片劑中包括的可藥用載體為粘合劑、潤(rùn)滑劑、稀釋劑、崩解劑、著色劑、調(diào)味劑和潤(rùn)濕劑。腸溶衣片因?yàn)槟c溶包衣而有抵抗胃酸的作用，并在中性或堿性的腸中溶解或崩解。糖衣片是壓制片，應(yīng)用了不同層的可藥用物質(zhì)。膜抱衣片是壓制片，其已經(jīng)包有聚合物或其它合適的包衣。多層壓制片劑是壓制片，使用之前提及的可藥用物質(zhì)，通過(guò)超過(guò)一個(gè)壓制循環(huán)來(lái)制造的。著色劑也可以在上述劑型中使用。調(diào)味劑和甜味劑在壓制片、糖衣片、多次壓制片和可咀嚼片中使用。調(diào)味劑和甜味劑在可咀嚼片和錠劑的形成中是特別有用的。
液體口服劑型包括水溶液、乳液、懸浮液、溶液、和/或由非泡騰顆粒重構(gòu)的懸浮液和由泡騰顆粒重構(gòu)的泡騰制劑。水溶液包括例如酏劑和糖漿。乳液是水包油型或油包水型。
酏劑是澄清的、甜的、水醇制劑。在酏劑中使用的可藥用載體包括溶劑。糖漿是糖例如蔗糖的濃縮水溶液，并且可以包含防腐劑。乳液是一種液體以小珠形式完全分散在另一種液體中的兩相系統(tǒng)。在乳液中使用的可藥用載體是非水液體、乳化劑和防腐劑。懸浮液使用可藥用助懸劑和防腐劑。在重構(gòu)成液體口服劑型的非泡騰顆粒中使用的可藥用物質(zhì)包括稀釋劑、甜味劑和潤(rùn)濕劑。在重構(gòu)成液體口服劑型的泡騰顆粒中使用的可藥用物質(zhì)包括有機(jī)酸和二氧化碳源。上述所有劑型中都使用著色劑和調(diào)味劑。
溶劑包括甘油、山梨醇、乙醇和糖漿。防腐劑的實(shí)施例包括甘油、尼泊金丙甲酯和尼泊金丙酯、苯甲酸、苯甲酸鈉和乙醇。在乳液中使用的非水液體的實(shí)例包括礦物油和棉籽油。乳化劑的實(shí)施例包括明膠、阿拉伯樹膠、西黃蓍膠、膨潤(rùn)土和表面活性劑比如聚氧乙烯脫水山梨醇酐單油酸酯。助懸劑包括羧甲基纖維素鈉、果膠、西黃蓍膠、硅酸鎂鋁和阿拉伯樹膠。稀釋劑包括乳糖和蔗糖。甜味劑包括蔗糖、糖漿、甘油和人造甜味劑，比如糖精。潤(rùn)溫劑包括單硬脂酸丙二醇酯、脫水山梨糖醇單油酸酯、二甘醇單月桂酸酯和聚氧乙烯月桂基醚。有機(jī)酸包括檸檬酸和酒石酸。二氧化碳源包括碳酸氫鈉和碳酸鈉。著色劑包括任何批準(zhǔn)認(rèn)可的水溶性FD和C染料，及其混合物。調(diào)味劑包括從植物比如水果中萃取的天然調(diào)味劑，和產(chǎn)生愉快味覺(jué)的化合物的合成混合物。
對(duì)于固體劑型，在例如碳酸丙烯酯、植物油或甘油三酸酯中的溶液或懸浮液可以被包封入明膠膠囊。這樣的溶液以及其制劑和包封公開在美國(guó)專利號(hào)4,328,245；4,409,239；和4,410,545中。對(duì)于液體劑型，溶液例如聚乙二醇中的溶液，可以用足量的可藥用液體載體例如水稀釋，以便于測(cè)量給藥。
可選地，液體或半固體口服制劑，可以通過(guò)將活性化合物或鹽溶解或分散在植物油、二醇、甘油三酯、丙二醇酯(例如碳酸丙烯酯)和其它這樣的載體中，并把這些溶液或懸浮液包封入硬或軟的明膠膠囊殼中來(lái)制備。其它有用的制劑，包括但不限于下述制劑：其包含本文提供的化合物、二烷基化的單-或多-烷撐乙二醇(包括，但不限于1,2-二甲氧基甲烷、二甘醇二甲醚、三甘醇二甲醚、四甘醇二甲醚、聚乙二醇-350-二甲醚、聚乙二醇-550-二甲醚、聚乙二醇-750-二甲醚，其中350、550和750指聚乙二醇的近似平均分子量)，以及一種或多種抗氧劑(比如丁基化羥基甲苯(BHT)、丁羥茴醚(BHA)、沒(méi)食子酸丙酯、維生素E、氫醌、羥基香豆素、乙醇胺、卵磷脂、腦磷脂、抗壞血酸、蘋果酸、山梨醇、磷酸、硫代二丙酸及其酯和二硫代氨基甲酸酯)。
其它制劑包括，但不限于包含可藥用縮醛的含水醇溶液。在這些制劑中使用的醇是具有一個(gè)或多個(gè)羥基的任何可藥用水可混溶溶劑，包括但不限于丙二醇和乙醇?？s醛包括，但不限于低級(jí)烷基醛的二(低級(jí)烷基)縮醛，比如乙醛二乙縮醛。
在所有的實(shí)施方案中，為了改變或維持活性成分的溶解，片劑和膠囊制劑可以如本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的進(jìn)行包衣。因此，例如，它們可以用常規(guī)腸可消化的包衣進(jìn)行包衣，所述包衣為例如水楊酸苯酯、蠟和鄰苯二甲酸醋酸纖維素。
可注射的溶液和乳液
本文也預(yù)期了腸胃外給藥，通常特征為皮下、肌肉或靜脈注射。注射劑可以用常規(guī)形式制備成液體溶液或懸浮液、適合在注射前在液體中成為溶液或懸浮液的固體形式或乳液。合適的賦形劑為例如水、鹽水、葡萄糖、甘油或乙醇。另外，如果期望，要給藥的藥物組合物也可以包含少量無(wú)毒輔助物質(zhì)，比如潤(rùn)濕劑或乳化劑、pH緩沖劑、穩(wěn)定劑、溶解性增強(qiáng)劑和其它這樣的試劑，比如例如乙酸鈉、脫水山梨醇單月桂酸酯、油酸三乙醇胺酯和環(huán)糊精。本發(fā)明也預(yù)期緩慢釋放或緩釋釋放系統(tǒng)的植入，使得劑量維持恒定水平。簡(jiǎn)而言之，本文提供的化合物分散在固體內(nèi)部基質(zhì)中，例如聚甲基丙烯酸甲酯、聚甲基丙烯酸丁酯、增塑或未增塑過(guò)的聚氯乙烯、增塑的尼龍、增塑的聚對(duì)苯二甲酸乙二醇酯、天然橡膠、聚異戊二烯、聚異丁烯、聚丁二烯、聚乙烯、乙烯-醋酸乙烯酯共聚物、硅酮橡膠、聚二甲基硅氧烷、硅氧烷碳酸酯共聚物、親水聚合物比如丙烯酸酯和甲基丙烯酸酯的水凝膠、膠原、交聯(lián)聚乙烯醇和交聯(lián)的部分水解的聚乙酸乙烯酯，其被外部聚合膜包圍，例如聚乙烯、聚丙烯、乙烯/丙烯共聚物、乙烯/丙烯酸乙酯共聚物、乙烯/醋酸乙烯酯共聚物、硅酮橡膠、聚二甲基硅氧烷、氯丁橡膠、氯化聚乙烯、聚氯乙烯、氯乙烯和醋酸乙烯酯的共聚物、偏二氯乙烯、乙烯和丙烯、聚對(duì)苯二甲酸乙二醇酯離聚物、丁基橡膠表氯醇橡膠、乙烯/乙烯醇共聚物、乙烯/乙酸乙烯酯/乙烯醇三元共聚物、和乙烯/乙烯氧基乙醇共聚物，其在體液中不溶。在釋放速率控制步驟中，化合物通過(guò)外部聚合膜擴(kuò)散。在這樣的腸胃外組合物中包含的活性化合物的百分比高度取決于其具體性質(zhì)，以及化合物的活性和對(duì)象的需要。
組合物的腸胃外給藥包括靜脈、皮下和肌內(nèi)給藥。用于腸胃外給藥的制劑包括準(zhǔn)備注射的無(wú)菌溶液、無(wú)菌無(wú)水可溶性產(chǎn)品比如凍干粉(其在使用前與溶劑結(jié)合)，包括皮下注射片劑、準(zhǔn)備注射用無(wú)菌懸浮液、無(wú)菌無(wú)水不溶性產(chǎn)品(易于在使用前與溶媒結(jié)合)和無(wú)菌乳液。溶液可以是水溶液或非水溶液。
如果靜脈內(nèi)給藥，合適的載體包含生理鹽水或磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)和包含增稠劑和增溶劑的溶液，所述增稠劑和增溶劑比如葡萄糖、聚乙二醇和聚丙二醇及其混合物。
在腸胃外制劑中使用的可藥用載體，包括水性溶媒、非水性溶媒、抗微生物劑、等滲劑、緩沖液、抗氧劑、局部麻醉劑、助懸劑和分散劑、乳化劑、多價(jià)螯合劑或螯合劑，及其它可藥用物質(zhì)。
水性溶媒的實(shí)例包括氯化鈉注射液、林格氏注射液、等滲葡萄糖注射液、無(wú)菌水注射液、葡萄糖和乳酸鹽林格氏注射液。非水性腸胃外溶媒包括來(lái)自植物的不揮發(fā)性油、棉籽油、玉米油、芝麻油和花生油。以抑菌濃度或抑真菌濃度的抗微生物劑必須加入到以多次劑量容器包裝的腸胃外制劑中，所述抗微生物劑包括苯酚或甲酚、汞劑、苯甲醇、氯丁醇、對(duì)羥基苯甲酸甲酯和丙酯、硫柳汞、苯扎氯銨和芐索氯胺。等滲劑包括氯化鈉和葡萄糖。緩沖液包括磷酸鹽和檸檬酸鹽?？寡鮿┌蛩釟溻c。局部麻醉劑包括鹽酸普魯卡因。助懸劑和分散劑包括羧甲基纖維素鈉、羥丙甲基纖維素和聚乙烯吡咯烷酮。乳化劑包括聚山梨醇酯80金屬離子的多價(jià)螯合劑或螯合劑包括EDTA。藥物載體也包括用于水混溶性溶媒的乙醇、聚乙二醇和丙二醇，和用于pH調(diào)節(jié)的氫氧化鈉、鹽酸、檸檬酸或乳酸。
調(diào)節(jié)藥學(xué)活性化合物的濃度以使注射液提供產(chǎn)生期望藥理學(xué)效果的有效量。精確劑量取決于患者或動(dòng)物的年齡、體重和狀況，如本領(lǐng)域已知的。
單位劑量的腸胃外制劑被包裝在安瓿、小瓶或含針注射器中。如本領(lǐng)域已知并且實(shí)踐的，用于腸胃外給藥的所有制劑都必須是無(wú)菌的。
作為例證，包含活性化合物的無(wú)菌水溶液的靜脈內(nèi)或動(dòng)脈內(nèi)輸注是一種有效的給藥方式。另一個(gè)實(shí)施方案是無(wú)菌水性或油性溶液或懸浮液，其包含根據(jù)需要產(chǎn)生期望藥理學(xué)效果的可注射的活性物質(zhì)。
注射劑被設(shè)計(jì)成用于局部和全身給藥。在一些實(shí)施方案中，治療有效劑量被配制為包含對(duì)于要治療的組織，濃度為至少約0.1％w/w直至約90％w/w或更多，或超過(guò)1％w/w的所述活性化合物?；钚猿煞挚梢砸淮涡越o藥，或者也可以被分成許多較小劑量，以間隔時(shí)間給藥。應(yīng)當(dāng)理解，精確劑量和治療的持續(xù)時(shí)間隨治療組織而變化，并且可以使用已知的測(cè)試方案憑經(jīng)驗(yàn)確定，或者通過(guò)體內(nèi)或體外測(cè)試數(shù)據(jù)外推出。應(yīng)當(dāng)注意，濃度和劑量值也可以隨著要治療個(gè)體的年齡而變化。應(yīng)當(dāng)進(jìn)一步理解，對(duì)于任何特定對(duì)象，具體劑量方案應(yīng)當(dāng)隨時(shí)間推移根據(jù)個(gè)人需要和給藥或監(jiān)督制劑給藥的人的專業(yè)判斷來(lái)調(diào)節(jié)，而且，本文列出的濃度范圍僅僅是示例性的，而不意味著限制權(quán)利要求的制劑的范圍或?qū)嵤?/p>
為了制備更可溶的活性產(chǎn)品或制備前藥，所述化合物可以為微粉化的或其它合適的形式懸浮或者可以被衍生化。得到的混合物的形式取決于多種因素，包括例如預(yù)期給藥方式和化合物在選擇的載體或溶媒中的溶解性。有效濃度足以改善病癥的癥狀，并且可以憑經(jīng)驗(yàn)確定。
凍干粉末
凍干粉末也是本文感興趣的，其可以重構(gòu)作為溶液、乳液和其它混合物給藥。它們也可以重構(gòu)并配制成固體或凝膠。
通過(guò)將本文提供的化合物或其可藥用衍生物溶解在合適的溶劑中制備無(wú)菌凍干粉末。溶劑可以包含賦形劑，其改善了粉末或由粉末制備的重構(gòu)溶液的穩(wěn)定性或其它藥理學(xué)組分?？梢允褂玫馁x形劑包括，但不限于葡萄糖、山梨醇、果糖、玉米糖漿、木糖醇、甘油、葡萄糖、蔗糖或其它合適的試劑。溶劑也可以包含緩沖液，比如檸檬酸鹽、磷酸鈉或磷酸鉀、或本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其它這樣的緩沖液，pH值為接近中性。隨后無(wú)菌過(guò)濾溶液，接著在本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的標(biāo)準(zhǔn)條件下凍干，提供期望的制劑。通常，將得到的溶液分配到小瓶中凍干。每個(gè)小瓶將包含單一劑量(10-1000mg或100-500mg)或多次劑量的化合物。凍干粉末可以在合適的條件下儲(chǔ)存，比如在約4℃到室溫。
用注射用水重構(gòu)該凍干粉末提供了在腸胃外給藥中使用的制劑。對(duì)于重構(gòu)，在每毫升無(wú)菌水或其它合適的載體中，加入約1-50mg、5-35mg或約9-30mg的凍干粉末。精確數(shù)量取決于所選擇的化合物。這樣的量可以憑經(jīng)驗(yàn)確定。
局部給藥
局部混合物是如用于局部和全身給藥的描述來(lái)制備的。得到的混合物可以是溶液、混懸液、乳液等，并且制劑成乳膏、凝膠、軟膏、乳液、溶液、酏劑、洗劑、懸浮液、酊劑、糊劑、泡沫劑、氣霧劑、沖洗劑、噴霧劑、栓劑、繃帶、皮膚貼劑或適于局部給藥的任何其他制劑。
所述化合物或其可藥用衍生物可以配制為用于局部應(yīng)用的氣霧劑，比如通過(guò)吸入(參見(jiàn)，例如美國(guó)專利號(hào)4,044,126、4,414,209和4,364,923，其中描述了用于治療炎癥性疾病特別是哮喘的類固醇遞送用氣溶膠)。這些用于向呼吸道給藥的制劑可以單獨(dú)或與惰性載體比如乳糖組合，以氣溶膠或溶液形式用噴霧器使用，或者以微細(xì)粉末形式用于吹入使用。在這種情況下，制劑的微粒直徑將具有小于50微米或小于10微米的直徑。
所述化合物可以配制用于區(qū)域或局部應(yīng)用，比如用于向皮膚和粘膜局部應(yīng)用，比如在眼睛中，以凝膠、乳膏和洗劑形式，應(yīng)用于眼睛或者用于腦池內(nèi)或脊柱內(nèi)應(yīng)用。局部給藥預(yù)期是透皮遞送，以及向眼睛或粘膜給藥，或者用于吸入治療。所述活性化合物單獨(dú)或與其它可藥用賦形劑組合的鼻溶液也可以被給藥。
這些溶液，特別是設(shè)計(jì)用于眼科用途的那些，可以用合適的鹽配制成0.01％-10％的等滲溶液，pH約5-7。
用于其他給藥途徑的組合物
本文還預(yù)期其它給藥途徑，比如局部應(yīng)用、透皮貼片和直腸給藥。例如，用于直腸給藥的藥物劑型為用于全身效果的直腸栓劑、膠囊和片劑。本發(fā)明使用的直腸栓劑指用于插入直腸的固體，其在體溫下融化或變軟，釋放出一種或多種藥理學(xué)或治療活性成分。在直腸栓劑中使用的可藥用物質(zhì)是基質(zhì)或溶媒和升高熔點(diǎn)的試劑?；|(zhì)的實(shí)施例包括可可脂(可可油)、甘油-明膠、聚乙二醇(聚氧乙二醇)以及脂肪酸的甘油單酯、甘油二酯和甘油三酯的合適混合物?？梢允褂枚喾N基質(zhì)的組合。升高栓劑熔點(diǎn)的試劑包括鯨蠟和蠟。直腸栓劑可以通過(guò)壓制方法或模制來(lái)制備。在一些實(shí)施方案中，直腸栓劑的重量為約2至3克。
使用如用于配制口服給藥的制劑相同的可藥用物質(zhì)，通過(guò)相同的方法制備用于直腸給藥的片劑和膠囊。
緩釋組合物
活性成分比如本文提供的化合物可以通過(guò)控制釋放方式或本領(lǐng)域普通技術(shù)人員熟知的遞送裝置來(lái)給藥。實(shí)例包括，但不限于在如下美國(guó)專利號(hào)中描述的那些：3,845,770；3,916,899；3,536,809；3,598,123；4,008,719；5,674,533；5,059,595；5,591,767；5,120,548；5,073,543；5,639,476；5,354,556；5,639,480；5,733,566；5,739,108；5,891,474；5,922,356；5,972,891；5,980,945；5,993,855；6,045,830；6,087,324；6,113,943；6,197,350；6,248,363；6,264,970；6,267,981；6,376,461；6,419,961；6,589,548；6,613,358和6,699,500將其中每篇通過(guò)引用并入本文。這樣的劑型可以用于提供一種或多種活性成分的緩慢或控制釋放，使用例如羥丙甲基纖維素、其它聚合物基質(zhì)、凝膠、可滲透膜、滲透系統(tǒng)、多層包衣、微粒、脂質(zhì)體、微球或其組合，以不同的比例提供期望的釋放特征。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的合適的控釋制劑，包括本文描述的那些，可以容易地選擇與本文提供的活性成分一起使用。因此，提供的組合物包含適合口服給藥的單一單位劑型，比如但不限于適于控制釋放的片劑、膠囊、膠囊錠(gelcaps)和囊片。
所有控制釋放的藥物產(chǎn)品都具有共同目標(biāo)：改善藥物的治療，超過(guò)它們的非控釋對(duì)應(yīng)藥物所能達(dá)到的療效。理想地，最佳設(shè)計(jì)的控制釋放制劑在醫(yī)學(xué)治療中的使用具有如下特征：應(yīng)用最少量的藥物，在最短的時(shí)間里治愈或控制病癥?？蒯屩苿┑膬?yōu)點(diǎn)包括延長(zhǎng)藥物的活性、減少給藥頻率，并增加患者的順應(yīng)性。另外，控釋制劑可以用于影響作用的起效時(shí)間或其它特征，比如藥物的血液水平，并且因此可以影響副作用(例如不良作用)的發(fā)生。
大多數(shù)控釋制劑被設(shè)計(jì)為最初釋放一定量的藥物(活性成分)，其迅速產(chǎn)生期望的治療效果，并逐漸和連續(xù)地釋放其它量的藥物，以在延長(zhǎng)的時(shí)間段內(nèi)保持治療或預(yù)防效果的水平。為了在體內(nèi)保持這種恒定的藥物水平，藥物必須從劑型中以一定速率釋放，該速率將替換被代謝和從體內(nèi)排泄的藥物量?；钚猿煞值目刂漆尫趴梢允芨鞣N條件刺激，包括但不限于pH、溫度、酶、水或其它生理?xiàng)l件或化合物。
在一些實(shí)施方案中，可以使用靜脈內(nèi)輸注、可植入滲透泵、透皮貼劑、脂質(zhì)體或其它給藥方式給藥藥物。在一個(gè)實(shí)施方案中，可以使用泵(參見(jiàn)，Sefton,CRC Crit.Ref.Biomed.Eng.14:201(1987)；Buchwald et al.,Surgery 88:507(1980)；Saudek et al.,N.Engl.J.Med.321:574(1989))。在另一個(gè)實(shí)施方案中，可以使用聚合材料。在仍然另一個(gè)實(shí)施方案中，可以將控制釋放系統(tǒng)置于對(duì)象中由本領(lǐng)域?qū)I(yè)人員確定的合適部位，即因此僅需要全身劑量的一小部分(參見(jiàn)例如Goodson,Medical Applications of Controlled Release,vol.2,pp.115-138(1984))。其它控制釋放系統(tǒng)在Langer的綜述(Science 249:1527-1533(1990))中有論述?；钚猿煞挚梢苑稚⒃诠腆w內(nèi)部基質(zhì)中，例如聚甲基丙烯酸甲酯、聚甲基丙烯酸丁酯、增塑或未增塑的聚氯乙烯、增塑的尼龍、增塑的聚對(duì)苯二甲酸乙二醇酯、天然橡膠、聚異戊二烯、聚異丁烯、聚丁二烯、聚乙烯、乙烯-醋酸乙烯酯共聚物、硅酮橡膠、聚二甲基硅氧烷、硅氧烷碳酸酯共聚物、親水性聚合物比如丙烯酸酯和甲基丙烯酸酯的水凝膠、膠原、交聯(lián)的聚乙烯醇和交聯(lián)的部分水解的聚乙酸乙烯酯，其被外部聚合膜包圍，例如聚乙烯、聚丙烯、乙烯/丙烯共聚物、乙烯/丙烯酸乙酯共聚物、乙烯/乙酸乙烯酯共聚物、硅酮橡膠、聚二甲基硅氧烷、氯丁橡膠、氯化聚乙烯、聚氯乙烯、氯乙烯和乙酸乙烯酯共聚物、偏二氯乙烯、乙烯和丙烯、聚對(duì)苯二甲酸乙二醇酯離聚物、丁基橡膠表氯醇橡膠、乙烯/乙烯醇共聚物、乙烯/乙酸乙烯酯/乙烯醇三元共聚物和乙烯/乙烯氧基乙醇共聚物，其不溶于體液中。然后，在釋放速率控制步驟中，活性成分?jǐn)U散通過(guò)外部聚合膜。在這樣的腸胃外組合物中，活性成分的百分比高度取決于其具體性質(zhì)和對(duì)象的需求。
靶向制劑
本文提供的化合物或其可藥用衍生物也可以配制成靶向特定的組織、受體或待治療對(duì)象的其它身體區(qū)域。許多這樣的靶向方法是本領(lǐng)域那些技術(shù)人員熟知的。所有這樣的靶向方法都可以在本文中預(yù)期用于本發(fā)明的組合物。對(duì)于靶向方法的非限制性實(shí)例，參見(jiàn)例如美國(guó)專利號(hào)6,316,652、6,274,552、6,271,359、6,253,872、6,139,865、6,131,570、6,120,751、6,071,495、6,060,082、6,048,736、6,039,975、6,004,534、5,985,307、5,972,366、5,900,252、5,840,674、5,759,542和5,709,874。
在一個(gè)實(shí)施方案中，脂質(zhì)體懸浮液，包括組織靶向脂質(zhì)體，比如腫瘤靶向脂質(zhì)體，也可以適合作為可藥用載體。這些可以根據(jù)本領(lǐng)域那些技術(shù)人員已知的方法來(lái)制備。例如，脂質(zhì)體制劑可以如美國(guó)專利號(hào)4,522,811中描述的制備。簡(jiǎn)而言之，脂質(zhì)體比如多層囊泡(MLV′s)可以通過(guò)在燒瓶?jī)?nèi)壁上干燥蛋磷脂酰膽堿和腦磷脂酰絲氨酸(摩爾比7∶3)而形成。加入本文提供的化合物在缺乏二價(jià)陽(yáng)離子的磷酸鹽緩沖液(PBS)中的溶液，并振搖燒瓶直到脂質(zhì)膜分散。洗滌得到的囊泡，以去除未包封的化合物，通過(guò)離心沉淀，然后再懸浮在PBS中。
劑量和單位劑型
在人類治療學(xué)中，醫(yī)生將決定劑量，他最適當(dāng)?shù)馗鶕?jù)預(yù)防或治療性治療并根據(jù)受治療對(duì)象的年齡、體重、疾病階段和其它特異性因素來(lái)考慮。通常，劑量對(duì)于成人是每日約1至約1000mg，或每日約5至約250mg，或每日約10至50mg。在一些實(shí)施方案中，劑量對(duì)于每個(gè)成年人每日約5至約400mg或每日25至200mg。還預(yù)期每日約50至約500mg的給藥速率。
在一些實(shí)施方案中，將有效地預(yù)防或治療肝臟疾病或其一種或多種癥狀的化合物或組合物的量將隨疾病或病癥的性質(zhì)和嚴(yán)重程度，以及活性成分的給藥途徑而變化。頻率和劑量也將依照每個(gè)對(duì)象的具體因素而變化，取決于給藥的具體治療(例如，治療劑或預(yù)防劑)，病癥、疾病或病況的嚴(yán)重程度，給藥途徑，以及對(duì)象的年齡、身體、體重、反應(yīng)和既往病史。有效劑量可以由源自體外或動(dòng)物模型測(cè)試系統(tǒng)的劑量反應(yīng)曲線外推出。
組合物的示例性的劑量包括每千克對(duì)象或樣本重量計(jì)毫克或微克量和半胱天冬酶抑制劑(例如，每千克約10微克至每千克約50毫克，每千克約100微克至每千克約25毫克，或每千克約100微克至每千克約10毫克)。在一些實(shí)施方案中，對(duì)對(duì)象給藥的劑量在0.20mg/kg至2.00mg/kg對(duì)象體重之間，或在0.30mg/kg至1.50mg/kg對(duì)象體重之間。
在一些實(shí)施方案中，對(duì)于本文描述的病癥，本文描述的和半胱天冬酶抑制劑的推薦日劑量范圍在每日約0.1mg至約1000mg的每種和半胱天冬酶抑制劑范圍內(nèi)之內(nèi)，作為單一的一日一次劑量給予，或作為分開的劑量在一天期間給予。在一個(gè)實(shí)施方案中，日劑量以等分的劑量每日給藥兩次。特別地，日劑量范圍應(yīng)當(dāng)為每日約10mg至約200mg，更特別地，在每日約10mg至約150mg之間，或者甚至更特別地，在每日約25至約100mg之間。在某些情況下，在本文公開的范圍外使用活性成分的劑量可能是必要的，這對(duì)本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將是顯然的。此外，應(yīng)當(dāng)注意臨床醫(yī)師或治療醫(yī)生結(jié)合對(duì)象的反應(yīng)將懂得如何和何時(shí)中斷、調(diào)整或終止治療。
不同的治療有效量可以應(yīng)用于不同的疾病和病癥，如本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將容易地了解的。類似地，足以預(yù)防、控制、治療或改善這樣的病癥，但不足以引起或足以減少本文描述的化合物相關(guān)的副作用的量也被上述給劑量數(shù)量和給藥頻率時(shí)間表涵蓋。進(jìn)一步，當(dāng)向?qū)ο蠼o藥多重劑量的本文所述化合物時(shí)，并非所有的劑量都需要相同。例如，可以增加給藥對(duì)象的劑量以提高化合物的預(yù)防或治療效果，或者可以減少對(duì)給藥對(duì)象的劑量，以減少特定對(duì)象經(jīng)受到的一種或多種副作用。
在一個(gè)實(shí)施方案中，給藥以預(yù)防、治療、控制或改善對(duì)象中的病癥或其一種或多種癥狀的本文所述化合物的劑量為0.1mg/kg、1mg/kg、2mg/kg、3mg/kg、4mg/kg、5mg/kg、6mg/kg、10mg/kg、或15mg/kg以上的對(duì)象體重。在另一個(gè)實(shí)施方案中，給藥預(yù)防、治療、控制或改善對(duì)象的病癥或其一種或多種癥狀的本文提供的化合物的劑量為以下單位劑量：0.1mg至200mg、0.1mg至100mg、0.1mg至50mg、0.1mg至25mg、0.1mg至20mg、0.1mg至15mg、0.1mg至10mg、0.1mg至7.5mg、0.1mg至5mg、0.1至2.5mg、0.25mg至20mg、0.25至15mg、0.25至12mg、0.25至10mg、0.25mg至7.5mg、0.25mg至5mg、0.5mg至2.5mg、1mg至20mg、1mg至15mg、1mg至12mg、1mg至10mg、1mg至7.5mg、1mg至5mg、或1mg至2.5mg。
在一些實(shí)施方案中，可以從本文提供的半胱天冬酶抑制劑的一個(gè)或多個(gè)負(fù)載劑量開始進(jìn)行治療或預(yù)防，接著是一個(gè)或多個(gè)維持劑量。在這樣的實(shí)施方案中，負(fù)載劑量可以是例如每日約60致約400mg或每日約100至約200mg，一天至五周。負(fù)載劑量后可以是一個(gè)或多個(gè)維持劑量。每個(gè)維持劑量可以獨(dú)立地為每日約10mg至約200mg，更特別地，在每日約25mg和約150mg之間，或者更特別地，在每日約25mg至約80mg之間，或在每日約25mg至約50mg之間。維持劑量可以每日給藥，而且可以作為單一劑量或分開劑量給藥。
在一些實(shí)施方案中，可以給藥本文提供的半胱天冬酶抑制劑的劑量，以在對(duì)象的在對(duì)象的血液或血清中獲得活性成分的穩(wěn)態(tài)密度。穩(wěn)態(tài)密度可以根據(jù)技術(shù)人員可獲得的技術(shù)進(jìn)行測(cè)量來(lái)測(cè)定，或者可以基于對(duì)象的物理特征比如身高、體重和年齡。在一些實(shí)施方案中，給藥足量的本文提供的化合物，以在對(duì)象的血液或血清中獲得穩(wěn)態(tài)密度約300至約4000ng/mL、約400至約1600ng/mL、或約600至約1200ng/mL?？梢允┯秘?fù)載劑量一至五天，以獲得穩(wěn)態(tài)的的血液或血清濃度約1200至約8000ng/mL或約2000至約4000ng/mL?？梢越o藥維持劑量，以在對(duì)象的血液或血清中獲得穩(wěn)態(tài)密度約300至約4000ng/mL、約400至約1600ng/mL、或約600至約1200ng/mL。
在一些實(shí)施方案中，可以重復(fù)給藥同樣的化合物，并且可以間隔至少1天、2天、3天、5天、10天、15天、30天、45天、2個(gè)月、75天、3個(gè)月或6個(gè)月給藥。在其它實(shí)施方案中，可以重復(fù)給藥同樣的預(yù)防或治療劑，并且可以間隔至少1天、2天、3天、5天、10天、15天、30天、45天、2個(gè)月、75天、3個(gè)月或6個(gè)月給藥。
在某些方面，本文提供單位劑量，以適于給藥的形式包括化合物或其可藥用衍生物。這樣的形式在上文中詳細(xì)描述。在一些實(shí)施方案中，單位劑量包括1至1000mg、5至250mg或10至50mg的活性成分。在特定的實(shí)施方案中，所述單位劑量包括約1、5、10、25、50、100、125、250、500或1000mg的活性成分。這樣的單位劑量可以根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員熟悉的技術(shù)制備。
制品
所述化合物或可藥用衍生物可以包裝為制品，其包含包裝材料、本文提供的化合物或其可藥用衍生物(其用于治療、預(yù)防或改善與肝臟疾病有關(guān)的一種或多種癥狀)和指示所述化合物或其可藥用衍生物用于治療、預(yù)防或改善肝臟疾病的一種或多種癥狀的標(biāo)簽。
本文提供的制品包括包裝材料。在包裝藥物產(chǎn)品中使用的包裝材料是本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的。參見(jiàn)，例如美國(guó)專利號(hào)5,323,907、5,052,558和5,033,252。藥物包裝材料的實(shí)例包括，但不限于泡罩包裝、瓶子、管子、吸入器、泵、袋子、小瓶、容器、注射器、瓶子、以及適合所選制劑及預(yù)期給藥和治療方式的任何包裝材料。本文涵蓋所提供化合物和組合物的各種制劑。
試劑盒
進(jìn)一步提供用于治療肝臟疾病的方法的試劑盒。試劑盒可以包括半胱天冬酶抑制劑或其組合物，提供給護(hù)理提供者關(guān)于治療或預(yù)防肝臟疾病的用法的信息的說(shuō)明書。說(shuō)明書可以印刷形式或以電子媒介比如CD或DVD的形式、或以其中可以或者這種說(shuō)明的網(wǎng)址的形式提供。單位劑量的或其組合物、或半胱天冬酶抑制劑或其組合物可以包括當(dāng)向?qū)ο蠼o藥時(shí)使得可以在對(duì)象中維持所述化合物或組合物的治療或預(yù)防有效血漿水平至少1天的劑量。在某些實(shí)施方案中，化合物或組合物可以呈無(wú)菌水性藥物組合物或干粉(例如凍干)組合物包括在其中。
5.6.化合物活性的評(píng)價(jià)
所述化合物的生物活性可以通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法證實(shí)。例如，如Abraldes,J.el al.Animal models of portal hypertension.World J.Gastroenterology 2006；41:6577-6584.Geerts,A.et al.Comparison of three research models of portal hypertension in mice:macroscopic,histological and portal pressure evaluation.Int.J.Exp.Path.2008；89:251-263.和Guerra,R.et al.A novel chronic cirrhosis TAA-induced model in rats.Braz.J.Vet.Pathol.2010；3:9-16中所述，將其全文通過(guò)引用并入本文。
可以使用循環(huán)和組織中的多種測(cè)量結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)。其中之一是測(cè)量血液中肝酶ALT的水平。在患有多種肝臟疾病的患者的血液中，通常觀察到ALT水平升高。ALT測(cè)量是對(duì)于患者肝臟疾病程度的非常普遍且相關(guān)的臨床實(shí)驗(yàn)測(cè)試。另一個(gè)測(cè)量包括肝臟疾病程度的的總評(píng)估和組織學(xué)評(píng)估。組織學(xué)通常在患有晚期肝臟疾病的患者中進(jìn)行，以測(cè)量疾病的程度。肝臟疾病的程度可以通過(guò)由經(jīng)訓(xùn)練的觀察者檢查為顯微鏡觀察制備和評(píng)估的肝樣品來(lái)分級(jí)。在一些實(shí)施方案中，肝損傷可以嚴(yán)重到足以導(dǎo)致死亡。在一些實(shí)施方案中，如通過(guò)這些參數(shù)所測(cè)定的，本文所述化合物對(duì)誘導(dǎo)的肝損傷有保護(hù)作用。
5.7.組合治療
在一些實(shí)施方案中，本文提供的半胱天冬酶抑制劑與一種或多種已知治療門靜脈高壓和/或肝硬化的試劑組合給藥。在一些實(shí)施方案中，在本文提供的組合治療中，使用低于已經(jīng)或目前用于治療門靜脈高壓和/或肝硬化的劑量。對(duì)于批準(zhǔn)用于臨床用途的那些藥劑，推薦劑量描述在例如Hardman et al.,eds.,1996,Goodman&Gilman’s The Pharmacological Basis Of Basis Of Therapeutics 9th Ed,Mc-Graw-Hill,New York；Physician’s Desk Reference(PDR)57th Ed.,2003,Medical Economics Co.,Inc.,Montvale,NJ中，將其全文通過(guò)引用并入本文。給予的劑量將取決于藥物的吸收、滅活和排泄速率以及本領(lǐng)域那些技術(shù)人員已知的其他因素。應(yīng)當(dāng)注意，劑量值也將隨要緩解的病癥的嚴(yán)重程度而變化。應(yīng)當(dāng)進(jìn)一步理解，對(duì)于任何特定對(duì)象，具體劑量方案和日程表將隨時(shí)間推移，根據(jù)個(gè)人需要和給藥組合物或監(jiān)督組合物給藥的人員的專業(yè)判斷來(lái)調(diào)節(jié)。
在多個(gè)實(shí)施方案中，給藥本文提供的化合物間隔小于5分鐘、間隔小于30分鐘、間隔小于1小時(shí)、間隔為約1小時(shí)、間隔約1小時(shí)至約2小時(shí)、間隔約2小時(shí)至約3小時(shí)、間隔約3小時(shí)至約4小時(shí)、間隔約4小時(shí)至約5小時(shí)、間隔約5小時(shí)至約6小時(shí)、間隔約6小時(shí)至約7小時(shí)、間隔約7小時(shí)至約8小時(shí)、間隔約8小時(shí)至約9小時(shí)、間隔約9小時(shí)至約10小時(shí)、間隔約10小時(shí)至約11小時(shí)、間隔約11小時(shí)至約12小時(shí)、間隔約12小時(shí)至18小時(shí)、間隔18小時(shí)至24小時(shí)、間隔24小時(shí)至36小時(shí)、間隔36小時(shí)至48小時(shí)、間隔48小時(shí)至52小時(shí)、間隔52小時(shí)至60小時(shí)、間隔60小時(shí)至72小時(shí)、間隔72小時(shí)至84小時(shí)、間隔84小時(shí)至96小時(shí)、或間隔96小時(shí)至120小時(shí)。在一些實(shí)施方案中，在同一患者就診期間給藥兩種或多種治療。
在一些實(shí)施方案中，本文提供的化合物和任選地一種另外的試劑以這樣的順序且在這樣的時(shí)間間隔內(nèi)向患者例如哺乳動(dòng)物，比如人類給藥，使得本文提供的化合物可以與其他試劑一起作用以提供與如果以其他方式給藥它們相比增加的益處。例如，所述化合物可以同時(shí)給藥或以任何順序在不同的時(shí)間點(diǎn)順序給藥；但是，如果沒(méi)有同時(shí)給藥，則為了提供期望的治療或預(yù)防效果，它們應(yīng)當(dāng)被給藥足夠接近的時(shí)間。在一個(gè)實(shí)施方案中，本文提供的化合物和任選地另一種試劑在重疊的時(shí)間內(nèi)發(fā)揮它們的作用。每種化合物可以以任何合適的形式和任何合適的途徑分別給藥。在其它實(shí)施方案中，本文提供的化合物在給藥第一化合物之前、同時(shí)或之后給藥。
本文提供的半胱天冬酶抑制劑化合物和任選地一種或多種另外的試劑可以累加或協(xié)同作用。在一個(gè)實(shí)施方案中，本文提供的半胱天冬酶抑制劑化合物可以與另一種試劑累加或協(xié)同作用。在一個(gè)實(shí)施方案中，本文提供的化合物任選地與另一種試劑同時(shí)給藥與在同一藥物組合物中給藥。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本文提供的化合物任選地與另一種試劑在不同的藥物組合物中同時(shí)給藥。在仍然另一個(gè)實(shí)施方案中，在給藥第三試劑之前或之后施用，給藥本文提供的化合物與另一種試劑。也預(yù)期通過(guò)相同或不同的給藥途徑，例如口服和腸胃外給藥本文提供的化合物。
在一些實(shí)施方案中，根據(jù)本文提供的方法與半胱天冬酶抑制劑組合給藥的另外的試劑可以包括在治療患有門靜脈高壓的患者中目前使用的產(chǎn)品：普萘洛爾、納多洛爾、卡維地洛及本領(lǐng)域技術(shù)人員了解的其類似物或衍生物。
在一些實(shí)施方案中，根據(jù)本文提供的方法與半胱天冬酶抑制劑組合給藥的另外的試劑可以，但不限于目前在用于治療門靜脈高壓和/或肝硬化的臨床前或臨床研究中的任何化合物∶Gilead的的司妥佐單抗(Simtuzumab)(GS-6624)、Bayer和Onyx的索拉非尼、Norvartis的Serelaxin(RLX030)、噻嗎洛爾、NCX-1000、特利加壓素(Terlipressin)、NGM282、LUM001和如本領(lǐng)域技術(shù)人員了解的其類似物或衍生物。
本文提供的化合物也可以與抗生素、抗病毒化合物、抗真菌劑或用于治療感染給藥的其它藥物組合給藥：利福昔明、新霉素、cefotaximine、環(huán)丙沙星、諾氟沙星、乳果糖及如本領(lǐng)域技術(shù)人員了解的其類似物或衍生物。
應(yīng)當(dāng)理解，前述詳細(xì)描述和伴隨的實(shí)施例僅僅是示例性的，并不能被看作是對(duì)主題范圍的限制。對(duì)公開的實(shí)施方案的各種改變和修正，對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員將是顯而易見(jiàn)的。這樣的改變和修飾，包括但不限于與本文的化學(xué)結(jié)構(gòu)、取代基、衍生物、中間體、合成、制劑和/或使用方法相關(guān)的那些，可以在不背離本發(fā)明的精神和范圍的情況下進(jìn)行。將本文引用的美國(guó)專利和公布并入作為參考。
6.實(shí)施例
實(shí)施例1.
恩利卡生是如Linton S.et al.J.Med Chem.2005；48:6779中所述制備的。
部分A∶2-[N-(2-叔丁基苯基氨基)]-2-氧代乙酸甲酯
在氮?dú)庀?，?-叔丁基苯胺(57mL,54.5g,366mmol)、三乙胺(56mL,402mmol)和亞甲基氯(370mL)的溶液冷卻至0℃(冰浴)，并攪拌。然后，給加料漏斗裝入2-氯-2-氧代乙酸甲酯(50g，408mmol)，然后經(jīng)20分鐘滴加到所述攪拌溶液中，引起明顯放熱。在加入完成之后，攪拌得到的懸浮液1小時(shí)。然后，在真空下濃縮該懸浮液，接著收集在乙酸乙酯中，并用水分配。用乙酸乙酯洗滌水層兩次，然后先用5％硫酸氫鉀水溶液萃取合并的有機(jī)層，接著用飽和的氯化鈉萃取，之后經(jīng)硫酸鎂干燥，并在減壓下濃縮。然后，將得到的油狀物干燥過(guò)夜，之后從3:1的己烷/甲苯(兩輪，two crops)中重結(jié)晶，得到呈白色結(jié)晶固體的標(biāo)題化合物(60.43g，70％)。
部分B∶N-(2-叔丁基苯基氨基)草氨酸
向2-[N-(2-叔丁基苯基氨基)]-2-氧代乙酸甲酯(59.8g,254mmol)在1,4-二噁烷(600mL)中的溶液中慢慢地加入1N氫氧化鋰(300mL,300mmol)。攪拌該溶液1小時(shí)。然后，滴加濃HCl(12M,25.0mL,300mmol)酸化該溶液，并用乙酸乙酯萃取得到的溶液(3時(shí)間)，接著用飽和的氯化鈉洗滌合并的有機(jī)萃取物，經(jīng)硫酸鎂干燥并在真空下濃縮，從乙酸乙酯/己烷重結(jié)晶，得到標(biāo)題化合物(32.55g，58％)。
部份C∶[(N-芐氧基羰基)丙氨酸基]天門冬氨酸[β]-叔丁酯
在室溫下，在氮?dú)庀?，向天門冬氨酸b-叔丁酯(3.784g，20mmol)在二甲基甲酰胺(150mL)中的懸浮液中加入雙(三甲基甲硅烷基)-三氟乙酰胺(10.6mL,40mmol)。在室溫下，攪拌30分鐘之后，用(N-芐基氧基羰基)丙氨酸N-羥基琥珀酰亞胺酯(6.406g，20mmol)處理得到的澄清溶液。在室溫下攪拌18小時(shí)之后，用水(20mL)處理該混合物，攪拌15分鐘，然后在乙酸乙酯&水之間分配。用水、5％硫酸氫鉀和飽和的氯化鈉溶液洗滌有機(jī)相，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥并蒸干。然后，將殘余物收集在乙醚中，并用飽和的碳酸氫鈉萃取。將水提取物用濃HCl酸化(pH 2.0)，并用乙酸乙酯萃取。用飽和的氯化鈉溶液洗滌乙酸乙酯萃取物，經(jīng)無(wú)水鈉干燥。
部分D：(3S,4RS)-3-[(N-芐氧基羰基)丙氨酸基]氨基-5-溴-4-氧代戊酸叔丁基酯
部分D：(3S,4RS)-3-[(N-芐氧基羰基)丙氨酸基]氨基-5-溴-4-氧代戊酸叔丁基酯
在氮?dú)庀拢?10℃(NaCl/冰浴)下，滴加異丁基氯甲酸酯(2.6g,2.47mL,19.04mmol)處理[(N-芐氧基羰基)丙氨酸基]天門冬氨酸β-叔丁基酯(5.0g,12.7mmol)和N-甲基嗎啉(2.05g,2.23mL,20.3mmol)在四氫呋喃(65mL)中的溶液。在-10℃下攪拌20分鐘之后，將該混合物過(guò)濾(多孔玻璃)到預(yù)冷卻的收集器(冰浴)中，用另外的四氫呋喃(約48mL)洗滌濾餅。在0℃下，在氮?dú)庀?，用過(guò)量的重氮甲烷/乙醚溶液(由4.67g,31.73mmol的1-甲基-3-硝基-1-亞硝基胍，34mL的40％KOH/85ml乙醚)處理合并的濾液。在0℃下攪拌15分鐘且在室溫下攪拌30分鐘之后，再次將該反應(yīng)混合物冷卻至0℃，并用在乙酸(34mL,204mmol)/乙酸(34mL)中的48％HBr處理。在0℃下攪拌15分鐘且在室溫下攪拌30分鐘之后，將該混合物分配在乙酸乙酯&水之間。用水、飽和的碳酸氫鈉和飽和的氯化鈉連續(xù)洗滌有機(jī)相；經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥并蒸干，并通過(guò)在硅膠上的快速色譜純化，用乙酸乙酯-己烷(1:2)洗脫，得到呈白色泡沫狀物的標(biāo)題化合物(3.12g，52％)。
部分E∶(3S,4RS)-3-[(N-芐氧基羰基)丙氨酸基]氨基-5-(2',3',5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸叔丁基酯
在室溫下，在氮?dú)庀拢?3S)-3-[(N-芐氧基羰基)丙氨酸基]氨基-5-溴-4-氧代戊酸叔丁基酯(0.167g,0.355mmol)和2,3,5,6-四氟苯酚(0.071g,0.426mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(2mL)中的溶液中加入氟化鉀(0.082g,1.42mmol)。在室溫下，攪拌4小時(shí)之后，用乙酸乙酯稀釋該混合物，用飽和的碳酸氫鈉和飽和的氯化鈉溶液洗滌，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥并蒸干。收集粗物質(zhì)(0.144g)用于下一步而無(wú)需純化。
部分F：(3S,4RS)-3-[(N-芐氧基羰基)丙氨酸基]氨基-5-(2',3',5',6'-四氟苯氧基)-4-羥基戊酸叔丁基酯
在0℃下，在氮?dú)庀?，向?3S)-3-[(N-芐氧基羰基)丙氨酸基]氨基-5-(2',3',5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸叔丁基酯(0.144g,0.26mmol)在四氫呋喃(4mL)中的溶液中加入硼氫化鈉(0.040g，1.04mmol)。在0℃下攪拌1小時(shí)之后，濃縮該混合物，并將殘余物分配在乙酸乙酯-半飽和的氯化銨溶液(50％飽和的氯化銨/50％水)之間。將有機(jī)相用飽和的碳酸氫鈉和飽和的氯化鈉溶液洗滌，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥，并蒸干。通過(guò)在硅膠上的快速色譜純化殘余物，用乙酸乙酯-己烷(1:2)洗脫，得到呈白色泡沫狀物的標(biāo)題化合物(0.142g，78％)。
部分G：(3S,4RS)-3-(丙氨酸基)氨基-5-(2',3',5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸叔丁基酯
向(3S,4RS)-3-[(N-芐氧基羰基)纈氨?；鵠氨基-5-(2',3',5',6'-四氟苯氧基)-4-羥基戊酸叔丁基酯(0.112g,0.201mmol)在甲醇(10mL)中的溶液中加入10％Pd-C(0.017g)，并在氫氣氛(1氣壓，氣球)下攪拌得到的混合物2小時(shí)。將該混合物過(guò)濾通過(guò)硅藻土，用甲醇洗滌濾餅。將合并的濾液蒸干，得到呈無(wú)色、粘性油狀物的粗標(biāo)題化合物(0.066g，70％)，收集其用于下一步而無(wú)需純化。
部分H：(3S,4RS)-3-[N-(N'-(2-叔丁基苯基)草氨酰基)丙氨酸基]氨基-5-(2',3',5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸叔丁基酯
在0℃下，在氮?dú)庀拢騈-(2-叔丁基苯基)草氨酸(0.041g,0.19mmol)在亞甲基氯(6.0mL)中的溶液中加入羥基苯并三唑水合物(0.030g,0.261mmol)，接著加入1-乙基-3-(3',3'-二甲基-1'-氨基丙基)-碳二亞胺鹽酸鹽(EDCI)(0.050g,0.26mmol)。在0℃下攪拌10分鐘之后，用(3S,4RS)-3-(丙氨酸基)氨基-5-(2',3',5',6'-四氟苯氧基)-4-羥基戊酸叔丁基酯(0.079g,0.19mmol)和N-甲基嗎啉(NMM)(22mL,0.20mmol)處理該混合物。在室溫下，攪拌16小時(shí)之后，將該混合物分配在乙酸乙酯&水之間。用水、5％硫酸氫鉀、飽和的碳酸氫鈉和飽和的氯化鈉溶液洗滌有機(jī)相，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥并蒸發(fā)，得到呈粘性油狀物的粗標(biāo)題化合物(0.090g,77％)。
部分I∶(3S)-3-[N-(N'-(2-叔丁基苯基)草氨?；?丙氨酸基]氨基-5-(2',3',5',6'--四氟苯氧基)-4-氧代戊酸叔丁基酯
在室溫下，在氮?dú)庀拢?3S,4RS)-3-[N-(N'-(2-叔丁基苯基)草氨?；?丙氨酸基]氨基酸-5-(2',3',5',6'-四氟苯氧基)-4-羥基戊酸叔丁基酯(0.0.092g,約0.15mmol)在亞甲基氯(6.5mL)中的溶液中加入碘代苯雙乙酸酯(0.188g，0.58mmol)，接著加入催化量的2,2,6,6-四甲基-1-哌啶基氧基自由基(TEMPO,0.0046g,0.03mmol)。在室溫下攪拌16小時(shí)之后，將該混合物分配在乙酸乙酯&水之間。用飽和的碳酸氫鈉和飽和的氯化鈉溶液洗滌有機(jī)相，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥并蒸干。通過(guò)在硅膠上的制備層色譜純化殘余物(0.096g)，用乙酸乙酯-己烷(3:7)洗脫，得到呈無(wú)色玻璃狀物的標(biāo)題化合物(0.071g，77％)。
部分J∶(3S)-3-[N-(N'-(2-叔丁基苯基)草氨?；?丙氨酸基]氨基-5-(2',3',5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸
在室溫下，在氮?dú)庀?，?3S)-3-[N-(N'-(2-叔丁基苯基)草氨?；?丙氨酸基]氨基-5-(2',3',5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸叔丁基酯(0.071g,0.11mmol)和苯甲醚(0.05mL)在亞甲基氯(2.5mL)中的溶液中加入三氟乙酸酯(1.5mL)。在室溫下，攪拌得到的澄清溶液1小時(shí)，蒸干并用甲苯-亞甲基氯(1:1)洗滌純化(chased)。通過(guò)在硅膠上的制備層色譜純化殘余物(0.061g)，用甲醇-亞甲基氯(1:9)洗脫，得到呈無(wú)色玻璃狀物的標(biāo)題化合物(0.044g，69％)。
上述實(shí)施方案僅僅是示例性的，本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)認(rèn)識(shí)到或?qū)H使用常規(guī)實(shí)驗(yàn)就能確定特定化合物、材料和操作的許多等同物。所有這樣的等同物都被認(rèn)為是在本申請(qǐng)權(quán)利要求的范圍之內(nèi)，并且被附加權(quán)利要求書涵蓋。