本發(fā)明屬于材料科學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，特別是一種基于環(huán)糊精的雙重響應(yīng)多種藥物傳輸系統(tǒng)。

背景技術(shù)：

化學(xué)療法是利用化學(xué)藥物阻止癌細(xì)胞的增值、浸潤、轉(zhuǎn)移，直至最終殺滅癌細(xì)胞的一種治療方式。它是一種全身性治療手段，和手術(shù)、放療一起，并稱為癌癥的3大治療手段。但由于化療藥物的選擇性不強，在殺滅癌細(xì)胞時同時也會不可避免地?fù)p傷人體正常的細(xì)胞，從而出現(xiàn)藥物的不良反應(yīng)，而且易出現(xiàn)抗藥性等問題。為了解決上述問題，多重藥物傳輸系統(tǒng)應(yīng)運而生，其能夠抑制耐藥性，產(chǎn)生協(xié)同作用，更好的殺滅癌細(xì)胞。

在大多數(shù)研究體系中，并不能實現(xiàn)多重藥物一起投放，且在未達傳送地點前會釋放部分藥物，引發(fā)副作用，不能準(zhǔn)確的控制釋放藥物的劑量。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種基于環(huán)糊精的雙重響應(yīng)多種藥物傳輸系統(tǒng)。

實現(xiàn)本發(fā)明目的的技術(shù)解決方案為：一種基于環(huán)糊精的雙重響應(yīng)多種藥物傳輸系統(tǒng)，其結(jié)構(gòu)如下：

其中，A表示納米容器介孔二氧化硅納米微球，B表示吸附小分子對香豆酸，C表示吸附大分子阿霉素。

一種基于環(huán)糊精的雙重響應(yīng)多種藥物傳輸系統(tǒng)的制備方法，包括如下步驟：

步驟1，制備介孔二氧化硅微球；

步驟2，將介孔二氧化硅微球與硅烷偶聯(lián)劑于無水甲苯中進行無水無氧縮醇反應(yīng)；

步驟3，制備2-溴-乙氧基-2-疊氮基-乙氧基丙烷：將2,2-二-(2-溴-乙氧基)丙烷與TBAB溶于無水N,N-二甲基甲酰胺中，常溫下緩慢加入疊氮化鈉并攪拌反應(yīng)48～72小時得到產(chǎn)物；

步驟4，將步驟2獲得的產(chǎn)物與步驟3獲得的產(chǎn)物于N,N-二甲基甲酰胺中進行點擊化學(xué)反應(yīng)生成五元環(huán)；

步驟5，將2-O-單炔丙基-β-環(huán)糊精和疊氮甲基二茂鐵溶于無水N,N-二甲基甲酰胺進行點擊反應(yīng)得到2-O-單{1-(二茂鐵甲基)-1H-[1,2,3]三唑-4-亞甲基}-β-環(huán)糊精；

步驟6，在三苯基膦的催化下，步驟5獲得的產(chǎn)物與碘于無水N,N-二甲基甲酰胺中反應(yīng)得到2-O-單{1-(二茂鐵甲基)-1H-[1,2,3]三唑-4-亞甲基}-七-6-碘-6-脫氧-β-環(huán)糊精；

步驟7，步驟6獲得的產(chǎn)物與疊氮化鈉溶于無水N,N-二甲基甲酰胺中，反應(yīng)得到2-O-單{1-(二茂鐵甲基)-1H-[1,2,3]三唑-4-亞甲基}-七-6-疊氮-6-脫氧-β-環(huán)糊精；

步驟8，步驟7獲得的產(chǎn)物與三苯基膦溶于無水N,N-二甲基甲酰胺中，反應(yīng)得到2-O-單{1-(二茂鐵甲基)-1H-[1,2,3]三唑-4-亞甲基}-七-6-氨基-6-脫氧-β-環(huán)糊精；

步驟9，步驟4獲得的產(chǎn)物經(jīng)真空干燥后分散在含有吸附分子pH＝7的磷酸鹽緩沖溶液中，吸附結(jié)束后加入步驟8獲得的產(chǎn)物，氮氣氛圍60～80℃攪拌20～24h，得到上述藥物傳輸系統(tǒng)。

優(yōu)選地，步驟1中，所述的介孔二氧化硅微球為MCM-41。

優(yōu)選地，步驟2中，所述的硅烷偶聯(lián)劑為乙炔基三乙氧基硅烷，介孔二氧化硅微球與硅烷偶聯(lián)劑的物質(zhì)的量比為1:1～1.2:1。

優(yōu)選地，步驟4與步驟5中，所述點擊反應(yīng)采用的催化劑為亞磷酸三乙酯碘化亞銅，反應(yīng)在氮氣保護下進行，反應(yīng)溫度為100～120℃，反應(yīng)時間為3～5小時。

優(yōu)選地，步驟6中，所述的三苯基膦、2-O-單{1-(二茂鐵甲基)-1H-[1,2,3]三唑-4-亞甲基}-β-環(huán)糊精與碘的物質(zhì)的量比為20:1:20～20:2:20，反應(yīng)溫度為70～90℃，反應(yīng)時間為18～20小時。

優(yōu)選地，步驟7中，所述的2-O-單{1-(二茂鐵甲基)-1H-[1,2,3]三唑-4-亞甲基}-七-6- 碘-6-脫氧-β-環(huán)糊精與疊氮化鈉的物質(zhì)的量比為1:10～1:20，反應(yīng)溫度為70～90℃，反應(yīng)時間為18～20小時。

優(yōu)選地，步驟8中，所述的2-O-單{1-(二茂鐵甲基)-1H-[1,2,3]三唑-4-亞甲基}-七-6-疊氮-6-脫氧-β-環(huán)糊精與三苯基膦的物質(zhì)的量比為1:15～1:16，反應(yīng)時間為18～20小時。

優(yōu)選地，步驟9中，所述吸附分子為對香豆酸和阿霉素，吸附分子在溶液中的濃度為飽和濃度，吸附時間為48小時。

本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，其顯著優(yōu)點在于：(1)具有雙重刺激響應(yīng)，可以有多重模式觸發(fā)釋放；(2)具有高度可控性，可根據(jù)所需釋放量即時刺激響應(yīng)；(3)具有操作簡單方便，快速響應(yīng)的優(yōu)點。

附圖說明

圖1為本發(fā)明所述基于環(huán)糊精的雙重響應(yīng)多種藥物傳輸系統(tǒng)的裝配與藥物釋放示意圖。

圖2為本發(fā)明所述基于環(huán)糊精的雙重響應(yīng)多種藥物傳輸系統(tǒng)氧化響應(yīng)對香豆酸單一釋放圖。

圖3為本發(fā)明所述基于環(huán)糊精的雙重響應(yīng)多種藥物傳輸系統(tǒng)酸響應(yīng)對香豆酸-阿霉素共釋放圖。

具體實施方式

下面結(jié)合附圖及具體實施例，對本發(fā)明做進一步詳細(xì)說明。

結(jié)合圖1，本發(fā)明基于環(huán)糊精的pH-刺激響應(yīng)型智能納米容器，具有以下結(jié)構(gòu)：

其中，A表示納米容器，即為介孔二氧化硅納米微球，B表示吸附小分子，即為對香豆酸，C表示吸附大分子，即為阿霉素。

本發(fā)明的原理是：如圖1所示組裝結(jié)構(gòu)，在中性水溶液中，二茂鐵基團包結(jié)在環(huán)糊精疏水空腔中，與其形成自包結(jié)結(jié)構(gòu)，納米閥門關(guān)閉，吸附在介孔二氧化硅微球中的兩種藥物分子出入通道被堵塞；加入一當(dāng)量的氧化劑后，二茂鐵氧化為二茂鐵鹽，與環(huán)糊精結(jié)合力大大減弱，從而脫開環(huán)糊精空腔，此時納米閥門打開，介孔二氧化硅微球中吸附的小分子藥物對香豆酸得到釋放，大分子藥物阿霉素由于尺寸大于環(huán)糊精空腔，仍然存在于二氧化硅微球中不會釋放；再加入一當(dāng)量的還原劑后，二茂鐵鹽還原為二茂鐵，重新與環(huán)糊精包結(jié)，閥門再次關(guān)閉；在酸性環(huán)境中，縮醛鍵斷鏈，環(huán)糊精拋開二氧化硅微球，大分子得到釋放。

本發(fā)明一種基于環(huán)糊精的雙重響應(yīng)多種藥物傳輸系統(tǒng)，采用下述方法制備所得，步驟如下：

步驟1，制備介孔二氧化硅微球；所述的介孔二氧化硅微球為MCM-41。

步驟2，將介孔二氧化硅微球與硅烷偶聯(lián)劑在無水甲苯中進行無水無氧縮醇反應(yīng)；所述的硅烷偶聯(lián)劑為乙炔基三乙氧基硅烷，介孔二氧化硅微球與硅烷偶聯(lián)劑的物質(zhì)的量比為1:1～1.2:1。

步驟3，制備2-溴-乙氧基-2-疊氮基-乙氧基丙烷：將2,2-二-(2-溴-乙氧基)丙烷與TBAB溶于無水N,N-二甲基甲酰胺中，常溫下緩慢加入疊氮化鈉并攪拌反應(yīng)48～72小時得到產(chǎn)物；

步驟4，將步驟2獲得的產(chǎn)物與步驟3獲得的產(chǎn)物于N,N-二甲基甲酰胺中進行點擊化學(xué)反應(yīng)生成五元環(huán)；所述點擊反應(yīng)采用的催化劑為亞磷酸三乙酯碘化亞銅，反應(yīng)在氮氣保護下進行，反應(yīng)溫度為100～120℃，反應(yīng)時間為3～5小時。

步驟5，將2-O-單炔丙基-β-環(huán)糊精和疊氮甲基二茂鐵溶于無水N,N-二甲基甲酰胺進行點擊反應(yīng)得到2-O-單{1-(二茂鐵甲基)-1H-[1,2,3]三唑-4-亞甲基}-β-環(huán)糊精；所述點擊反應(yīng)采用的催化劑為亞磷酸三乙酯碘化亞銅，反應(yīng)在氮氣保護下進行，反應(yīng)溫度為100～120℃，反應(yīng)時間為3～5小時。

步驟6，在三苯基膦的催化下，步驟5獲得的產(chǎn)物與碘于無水N,N-二甲基甲酰胺中反應(yīng)得到2-O-單{1-(二茂鐵甲基)-1H-[1,2,3]三唑-4-亞甲基}-七-6-碘-6-脫氧-β-環(huán)糊精；所述的三苯基膦、2-O-單{1-(二茂鐵甲基)-1H-[1,2,3]三唑-4-亞甲基}-β-環(huán)糊精與碘的物質(zhì)的量比為20:1:20～20:2:20，反應(yīng)溫度為70～90℃，反應(yīng)時間為18～20小時。

步驟7，步驟6獲得的產(chǎn)物與疊氮化鈉溶于無水N,N-二甲基甲酰胺中，反應(yīng)得到2-O-單{1-(二茂鐵甲基)-1H-[1,2,3]三唑-4-亞甲基}-七-6-疊氮-6-脫氧-β-環(huán)糊精；所述的2-O-單{1-(二茂鐵甲基)-1H-[1,2,3]三唑-4-亞甲基}-七-6-碘-6-脫氧-β-環(huán)糊精與疊氮化鈉的物質(zhì)的量比為1:10～1:20，反應(yīng)溫度為70～90℃，反應(yīng)時間為18～20小時。

步驟8，步驟7獲得的產(chǎn)物與三苯基膦溶于無水N,N-二甲基甲酰胺中，反應(yīng)得到2-O-單{1-(二茂鐵甲基)-1H-[1,2,3]三唑-4-亞甲基}-七-6-氨基-6-脫氧-β-環(huán)糊精；所述的2-O-單{1-(二茂鐵甲基)-1H-[1,2,3]三唑-4-亞甲基}-七-6-疊氮-6-脫氧-β-環(huán)糊精與三苯基膦的物質(zhì)的量比為1:15～1:16，反應(yīng)時間為18～20小時。

步驟9，步驟4獲得的產(chǎn)物經(jīng)真空干燥后分散在含有吸附分子pH＝7的磷酸鹽緩 沖溶液中，吸附結(jié)束后加入步驟8獲得的產(chǎn)物，氮氣氛圍60～80℃攪拌20～24h，得到上述一種基于環(huán)糊精的雙重響應(yīng)多種藥物傳輸系統(tǒng)；所述吸附分子為對香豆酸和阿霉素，吸附分子在溶液中的濃度為飽和濃度，吸附時間為48小時。

下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明做進一步詳細(xì)說明。

實施例1

本發(fā)明一種基于環(huán)糊精的雙重響應(yīng)多種藥物傳輸系統(tǒng)的制備方法，步驟如下：

1.制備介孔二氧化硅微球MCM-41

將十六烷基三甲基溴化銨(CTAB，0.5g)，NaOH溶液(2mol/L，1.75mL)與H₂O(240mL)混合，80℃下攪拌30min。逐滴加入正硅酸乙酯(TEOS，2.5mL)，充分?jǐn)嚢?0min后形成白色沉淀。80℃下攪拌2h，趁熱過濾，用水和甲醇充分清洗產(chǎn)物，90℃下真空干燥。

稱取0.3g干燥固體，超聲分散于異丙醇(60mL)和濃鹽酸(3mL)的混合溶液，加熱回流6h，離心分離，用水和甲醇充分清洗，90℃下真空干燥得到介孔二氧化硅微球(MCM-41)。

2.制備2-溴-乙氧基-2-疊氮基-乙氧基丙烷

將1mmol 2,2-(2-溴-乙氧基)丙烷與0.0494mmol TBAB溶于無水N,N-二甲基甲酰胺中，常溫下緩慢加入1mmol疊氮化鈉并攪拌反應(yīng)72小時，反應(yīng)結(jié)束后先后使用水和正己烷進行萃取，正己烷所萃取產(chǎn)物進行旋蒸得上述產(chǎn)物。

3.介孔二氧化硅的表面修飾

將干燥后的MCM-41(200mg)超聲分散在無水甲苯(10mL)中，逐滴加入乙炔基三乙氧基硅烷(200uL)，加熱回流，攪拌反應(yīng)24h，反應(yīng)結(jié)束后固體粉末通過離心收集并用無水甲苯和甲醇清洗若干遍。60℃真空干燥過夜得白色粉末MSNs-Alkyne。

將干燥后的MSNs-Alkyne(100mg)與過量的2-溴-乙氧基-2-疊氮基-乙氧基丙烷加入無水N,N-二甲基甲酰胺(10ml)中，在亞磷酸三乙酯碘化亞銅的催化下進行點擊化學(xué)反應(yīng)，反應(yīng)溫度為105℃，反應(yīng)時間為12小時。60℃真空干燥過夜得白色粉末MSNs-Br。

3.制備基于環(huán)糊精的納米閥門

制備2-(O-炔丙基)-β-環(huán)糊精：將β-環(huán)糊精(0.881mmol)和氫化鋰(1.322mmol) 溶于無水二甲基亞砜中，在室溫下氮氣保護并攪拌反應(yīng)12～24小時，然后加入炔丙基溴(0.881mmol)和少量碘化鋰，避光反應(yīng)5～12小時，反應(yīng)結(jié)束后將反應(yīng)液倒入丙酮溶液(300mL)中，減壓抽濾得到粗產(chǎn)物，以乙腈-水-氨水為流動相對粗產(chǎn)物進行柱層析分離得到產(chǎn)物。

制備2-O-單{1-(二茂鐵甲基)-1H-[1,2,3]三唑-4-亞甲基}-β-環(huán)糊精：將2-(O-炔丙基)-β-環(huán)糊精(300mg)和疊氮甲基二茂鐵(100mg)溶于無水N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中，加入少量催化劑亞磷酸三乙酯碘化亞銅，反應(yīng)溫度90～120℃，反應(yīng)時間為3-5小時。

制備2-O-單{1-(二茂鐵甲基)-1H-[1,2,3]三唑-4-亞甲基}-七-6-碘-6-脫氧-β-環(huán)糊精：在三苯基膦(8.8mmol)的催化下，2-O-單{1-(二茂鐵甲基)-1H-[1,2,3]三唑-4-亞甲基}-β-環(huán)糊精(0.44mmol)與碘(8.8mmol)于無水N,N-二甲基甲酰胺(9mL)中70～90℃反應(yīng)18～20小時得到產(chǎn)物。

制備2-O-單{1-(二茂鐵甲基)-1H-[1,2,3]三唑-4-亞甲基}-七-6-疊氮-6-脫氧-β-環(huán)糊精：2-O-單{1-(二茂鐵甲基)-1H-[1,2,3]三唑-4-亞甲基}-七-6-碘-6-脫氧-β-環(huán)糊精(0.157mmol)與疊氮化鈉(1.538mmol)溶于無水N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中，氮氣保護下70～90℃攪拌反應(yīng)18～20小時得到。

制備2-O-單{1-(二茂鐵甲基)-1H-[1,2,3]三唑-4-亞甲基}-七-6-氨基-6-脫氧-β-環(huán)糊精：2-O-單{1-(二茂鐵甲基)-1H-[1,2,3]三唑-4-亞甲基}-七-6-疊氮-6-脫氧-β-環(huán)糊精(0.153mmol)與三苯基膦(2.42mmol)溶于無水N,N-二甲基甲酰胺(4mL)中，氮氣保護下攪拌1h，逐滴加入氨水(28％，2.25mL)，室溫下攪拌18～20小時得到產(chǎn)物。

4.組裝智能納米容器

將MSNs-Br(20mg)分散于對香豆酸(50mg)-阿霉素(5mg)的水溶液(5mL)中,超聲至分散充分，40℃下吸附攪拌24h。吸附結(jié)束后，加入K₂CO₃(12mg,0.08mmol)，KI(14mg.0.08mmol),2-O-單{1-(二茂鐵甲基)-1H-[1,2,3]三唑-4-亞甲基}-七-6-氨基-6-脫氧-β-環(huán)糊精(16.4mg,0.012mmol),氮氣保護，60℃攪拌24h。反應(yīng)結(jié)束后用蒸餾水洗滌數(shù)次，離心收集。隔夜真空100℃干燥得到上述一種基于環(huán)糊精的雙重響應(yīng)多種藥物傳輸系統(tǒng)MSNPs 1。

5.智能納米容器的可控性釋放

在石英比色皿中加入3.8mL四水硫酸鈰銨(9.2mg)水溶液，稱取2.0mg MSNPs 1置于折成錐形的已活化的半透膜中，將半透膜尖端朝下放入比色皿中，確保浸沒，利用熒光分光光度計測其動力學(xué)變化(EX＝351nm，EM＝439nm)。

如附圖2所示，沒有加入氧化劑時，對香豆酸基本達到零釋放；加入氧化劑后，釋放量明顯。

實施例2

本發(fā)明一種基于環(huán)糊精的pH-刺激響應(yīng)型智能納米容器的制備方法，步驟如下：

1.制備介孔二氧化硅微球MCM-41

將十六烷基三甲基溴化銨(CTAB，0.5g)，NaOH溶液(2mol/L，1.75mL)與H₂O(240mL)混合，80℃下攪拌30min。逐滴加入正硅酸乙酯(TEOS，2.5mL)，充分?jǐn)嚢?0min后形成白色沉淀。80℃下攪拌2h，趁熱過濾，用水和甲醇充分清洗產(chǎn)物，90℃下真空干燥。

稱取0.3g干燥固體，超聲分散于異丙醇(60mL)和濃鹽酸(3mL)的混合溶液，加熱回流6h，離心分離，用水和甲醇充分清洗，90℃下真空干燥得到介孔二氧化硅微球(MCM-41)。

2.制備2-溴-乙氧基-2-疊氮基-乙氧基丙烷

將1mmol 2,2-(2-溴-乙氧基)丙烷與0.0494mmol TBAB溶于無水N,N-二甲基甲酰胺中，常溫下緩慢加入1mmol疊氮化鈉并攪拌反應(yīng)72小時，反應(yīng)結(jié)束后先后使用水和正己烷進行萃取，正己烷所萃取產(chǎn)物進行旋蒸得上述產(chǎn)物。

3.介孔二氧化硅的表面修飾

將干燥后的MCM-41(200mg)超聲分散在無水甲苯(10mL)中，逐滴加入乙炔基三乙氧基硅烷(200uL)，加熱回流，攪拌反應(yīng)24h，反應(yīng)結(jié)束后固體粉末通過離心收集并用無水甲苯和甲醇清洗若干遍。60℃真空干燥過夜得白色粉末MSNs-Alkyne。

將干燥后的MSNs-Alkyne(100mg)與過量的2-溴-乙氧基-2-疊氮基-乙氧基丙烷加入無水N,N-二甲基甲酰胺(10ml)中，在亞磷酸三乙酯碘化亞銅的催化下進行點擊化學(xué)反應(yīng)，反應(yīng)溫度為105℃，反應(yīng)時間為12小時。60℃真空干燥過夜得白色粉末MSNs-Br。

3.制備基于環(huán)糊精的納米閥門(CD-Fc)

制備2-(O-炔丙基)-β-環(huán)糊精：將β-環(huán)糊精(0.881mmol)和氫化鋰(1.322mmol) 溶于無水二甲基亞砜中，在室溫下氮氣保護并攪拌反應(yīng)12～24小時，然后加入炔丙基溴(0.881mmol)和少量碘化鋰，避光反應(yīng)5～12小時，反應(yīng)結(jié)束后將反應(yīng)液倒入丙酮溶液(300mL)中，減壓抽濾得到粗產(chǎn)物，以乙腈-水-氨水為流動相對粗產(chǎn)物進行柱層析分離得到產(chǎn)物。

制備2-O-單{1-(二茂鐵甲基)-1H-[1,2,3]三唑-4-亞甲基}-β-環(huán)糊精：將2-(O-炔丙基)-β-環(huán)糊精(300mg)和疊氮甲基二茂鐵(100mg)溶于無水N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中，加入少量催化劑亞磷酸三乙酯碘化亞銅，反應(yīng)溫度90～120℃，反應(yīng)時間為3-5小時。

制備2-O-單{1-(二茂鐵甲基)-1H-[1,2,3]三唑-4-亞甲基}-七-6-碘-6-脫氧-β-環(huán)糊精：在三苯基膦(8.8mmol)的催化下，2-O-單{1-(二茂鐵甲基)-1H-[1,2,3]三唑-4-亞甲基}-β-環(huán)糊精(0.44mmol)與碘(8.8mmol)于無水N,N-二甲基甲酰胺(9mL)中70～90℃反應(yīng)18～20小時得到產(chǎn)物。

制備2-O-單{1-(二茂鐵甲基)-1H-[1,2,3]三唑-4-亞甲基}-七-6-疊氮-6-脫氧-β-環(huán)糊精：2-O-單{1-(二茂鐵甲基)-1H-[1,2,3]三唑-4-亞甲基}-七-6-碘-6-脫氧-β-環(huán)糊精(0.157mmol)與疊氮化鈉(1.538mmol)溶于無水N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中，氮氣保護下70～90℃攪拌反應(yīng)18～20小時得到。

制備2-O-單{1-(二茂鐵甲基)-1H-[1,2,3]三唑-4-亞甲基}-七-6-氨基-6-脫氧-β-環(huán)糊精：2-O-單{1-(二茂鐵甲基)-1H-[1,2,3]三唑-4-亞甲基}-七-6-疊氮-6-脫氧-β-環(huán)糊精(0.153mmol)與三苯基膦(2.42mmol)溶于無水N,N-二甲基甲酰胺(4mL)中，氮氣保護下攪拌1h，逐滴加入氨水(28％，2.25mL)，室溫下攪拌18～20小時得到產(chǎn)物。

4.組裝智能納米容器

將MSNs-Br(20mg)分散于對香豆酸(50mg)-阿霉素(5mg)的水溶液(5mL)中,超聲至分散充分，40℃下吸附攪拌24h。吸附結(jié)束后，加入K₂CO₃(12mg,0.08mmol)，KI(14mg.0.08mmol),2-O-單{1-(二茂鐵甲基)-1H-[1,2,3]三唑-4-亞甲基}-七-6-氨基-6-脫氧-β-環(huán)糊精(16.4mg,0.012mmol),氮氣保護，60℃攪拌24h。反應(yīng)結(jié)束后用蒸餾水洗滌數(shù)次，離心收集。隔夜真空100℃干燥得到上述一種基于環(huán)糊精的雙重響應(yīng)多種藥物傳輸系統(tǒng)MSNPs 1。

5.智能納米容器的可控性釋放

在石英比色皿中加入磷酸鹽緩沖溶液(pH＝2)3.8mL，稱取2.0mg MSNPs 1置 于折成錐形的已活化的半透膜中，將半透膜尖端朝下放入比色皿中，確保浸沒，利用熒光分光光度計測其動力學(xué)變化(EX＝420nm，EM＝480nm)。

如附圖3所示，酸性環(huán)境下，對香豆酸與阿霉素均會釋放。