1.一種小鵝瘟滅活疫苗的制備方法,包括以下步驟:
1)篩選健康易感鵝胚;
2)生產(chǎn)用毒液的制備
毒種繁殖
將種毒稀釋,接種于11日齡易感鵝胚的尿囊腔內(nèi),接種后每日照胚3~4次,選取48~120小時內(nèi)死亡且病變明顯的鵝胚,收獲無菌且對1%雞紅細胞懸浮液凝集陰性的尿囊液樣品,
接種
將上述尿囊液樣品稀釋,接種于11日齡易感鵝胚的尿囊腔,繼續(xù)孵育,每日照蛋1次,將48小時內(nèi)死亡的鵝胚棄去,然后每4~6小時照胚1次,隨時取出48~144小時死亡的鵝胚,置于2~8℃冷藏庫冷卻4小時以上,
收獲
將上述冷卻的鵝胚取出,吸取尿囊液清亮的絨毛尿囊膜及羊膜的胚液,純化濃縮、滅活、高速低溫乳化及分裝。
2.根據(jù)權利要求1所述的制備方法,所述步驟1)均為11日齡易感鵝胚,通過對非免疫鵝胚卵黃中GPV瓊擴抗體和/或接種前鵝胚內(nèi)小鵝瘟病毒的檢測來確保非免疫鵝胚的質(zhì)量,并同時按照2010版的《中國獸藥典》附錄中關于外源毒檢測的方法進行檢測。
3.根據(jù)權利要求1所述的制備方法,所述經(jīng)純化和濃縮后的胚液中的病毒含量不低于108.0ELD50/ml。
4.根據(jù)權利要求1所述的制備方法,所述滅活劑為0.1%的BEI。
5.根據(jù)權利要求1所述的制備方法,所述乳化的方法為:取3份油相放入乳化罐中,慢速攪拌的同時緩緩加入1份水相,加完后,攪拌混勻,然后使用剪切機高速連續(xù)乳化,溫度設定為10~20℃之間。
6.根據(jù)權利要求1所述的制備方法,所述步驟3)包括純化濃縮中所使用的純化設備為瑞典Alta Laval在線碟片式離心機,所使用的濃縮設備為美國PALL抗原濃縮機。
7.根據(jù)權利要求1所述的制備方法,所述步驟3)包括乳化,乳化后制得油包水劑型滅活疫苗。
8.根據(jù)權利要求1至7任一所述的小鵝瘟滅活疫苗的制備方法所制得的疫苗產(chǎn)品。