Jnk抑制劑化合物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及通式（Ⅰ）所示的JNK抑制劑化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽或其立體異構(gòu)體，這些化合物的制備方法，含有這些化合物的藥物制劑，以及這些化合物在制備治療和/或預(yù)防缺血再灌注損傷、糖尿病、神經(jīng)退行性病變、慢性炎癥、肺纖維化、肝纖維化、脂肪肝或肝硬化的藥物中的用途，其中R1、R2、R3、R4和R5如說明書中所定義。
【專利說明】JNK抑制劑化合物 1、

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及JNK抑制劑化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽或 其立體異構(gòu)體，這些化合物的制備方法，含有這些化合物的藥物制劑，以及這些化合物在制 備制備治療和/或預(yù)防缺血再灌注損傷、糖尿病、神經(jīng)退行性病變、慢性炎癥、肺纖維化、肝 纖維化、脂肪肝或肝硬化的藥物中的用途。 2、

【背景技術(shù)】
[0002] JNK 又被稱為應(yīng)激活化蛋白激酶（stress-activated kinases, SAPK)，是 1990 年被發(fā)現(xiàn)的促分裂原活化蛋白激酶，為MAPK家族的主要成員之一。促分裂原活化蛋白 激酶（m itogen-activated protein kinase, MAPK)是哺乳動物細胞內(nèi)廣泛存在的一類 絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，目前已鑒定出4種家族成員，分別為細胞外信號調(diào)節(jié)激酶 (extracellular signal-regu lated kinasel/2, ERK1/2)、c_Jun 氨基末端激酶（c_Jun N-terminal kinase, JNK)、p38 及 ERK5。JNK 基因有 3 個亞型，即 JNK1, JNK2 和 JNK3,經(jīng)過 選擇性剪切形成。JNK1和JNK2在組織中廣泛表達，而JNK3僅在腦、心和睪丸中表達。每 個JNK基因都可以編碼46和54kD的蛋白產(chǎn)物。3種JNK異構(gòu)體通過不同的方式激活、結(jié)合 和磷酸化不同的蛋白底物。
[0003] JNK信號通路可被細胞因子[如腫瘤壞死因子a (tumor necrosis factor α，TNF α )、白介素 1 (interleukinl, IL-1)、表皮生長因子（epidermal growth factor, EGF)]、某些G蛋白偶聯(lián)受體、應(yīng)激（如電離福射、滲透壓、熱休克和氧化損傷）等多 種因素激活，參與細胞增殖與分化、細胞形態(tài)維持、細胞骨架構(gòu)建、細胞凋亡和細胞惡變等 多種生物學(xué)反應(yīng)。JNK信號通路功能失調(diào)可造成缺血再灌注損傷、慢性炎癥、神經(jīng)退行性變、 糖尿病和腫瘤等多種疾病。
[0004] 典型的促分裂原活化的蛋白激酶（MAPK)信號通路包括3個連續(xù)的酶促反應(yīng)，即 MAPKKKs - MAPKKs - MAPKs。JNKs的直接上游激酶MAPKKs目前確認的只有MKK4和MKK7， TXY序列是MKK活化JNK的雙磷酸化位點，MKK4和MKK7通過磷酸化TXY序列的第183位蘇 氨酸殘基（Thrl83)和第185位酪氨酸殘基（Tyrl85)激活JNK，引起細胞增殖與分化、細胞 凋亡和細胞惡變等多種生物學(xué)反應(yīng)。
[0005] 信號通路的調(diào)節(jié)是個極其復(fù)雜的系統(tǒng)，JNK信號通路的調(diào)節(jié)主要有兩種不同的機 制，一是識別MKKK和MKK以及MKK和MAPK間的序列；二是支架蛋白使MKKK-MKK-MAPK模 塊組裝成蛋白復(fù)合物。MAPK通過保守序列與特異性上游分子MKK和底物（如c-Jun，ATF2 等）實現(xiàn)對接。在所有MAPK中（包括JNK)，有一組帶負電荷的羧基端氨基酸連接到激 酶的結(jié)構(gòu)域序列，這個位點被稱為共同對接域（common dock ing doma in,⑶)，用于 MKK，MAPK，特異性底物以及支架蛋白的對接。另一個保守序列稱為谷氨酸-天冬氨酸域， 同樣用于MAPK的對接。MKK，底物，MAPK及支架蛋白中的對接位點具有一個共同的保守序 列R/K-X4A-0A-X- 0Β(0Α和0B是亮氨酸、異亮氨酸和纈氨酸的疏水殘基）。當(dāng)對接位點 (docking doma in, DD)中的堿性殘基與MAPK的⑶域的酸性殘基結(jié)合時，疏水殘基位于對 接槽內(nèi)，使得必Α-Χ-0Β疏水序列與DD序列結(jié)合。這些對接位點間的相互作用在MAPK的 特異性結(jié)合和活化中扮演重要角色。除了 ΜΑΡΚ與ΜΚΚ、底物和調(diào)節(jié)因子間的對接作用，還 有特異性序列調(diào)控ΜΚΚΚ和ΜΚΚ間的相互作用。研究發(fā)現(xiàn)，在一些ΜΚΚ中，包括調(diào)節(jié)JNK的 ΜΚΚ4/7,存在一種多功能對接域，被稱為多功能對接位點（doma in for versatile dock ing, DVD)。DVD 位點位于 ΜΚΚ 的羧基端，連接 MKKK [包括 MEKK1, MEKK4 (MTK1)，ASK1, Tao2 和Takl]，所有這些都可以激活JNK信號通路。MKKK內(nèi)的N形激酶結(jié)合域與ΜΚΚ的DVD位 點結(jié)合。
[0006] 控制JNK信號通路的另一方面是通過支架蛋白組合信號通路復(fù)合物。支架蛋白本 身沒有催化功能，但是能編碼對接位點，連接MAPK模塊成員ΜΚΚΚ,ΜΚΚ和MAPK。一般情 況下，支架蛋白通過和SH2，SH3，PTB等結(jié)合域相互作用與其他蛋白結(jié)合，而這些結(jié)構(gòu)域 使得細胞中的MAPK信號通路復(fù)合物定位至不同位點。不同的激活物使得支架蛋白和特異 性MKKK選擇性活化MAPK，并具有時空動態(tài)性。在不同的支架蛋白中，JNK相互作用蛋白 (JNK-interacting prote ins，JIPs)結(jié)合特異性驅(qū)動蛋白和MKKK的混合譜系激酶（m ixed lineage k inase，MLK)族；抑制蛋白β-arrestin為G蛋白偶聯(lián)受體磷酸化的輔助因子； 多結(jié)合域蛋白P〇SH(plenty of SH3s)含有多個SH3結(jié)構(gòu)域，參與哺乳動物和果蠅細胞凋 亡中的JNK信號通路；接頭蛋白C rk II通過黏附因子與JNK信號通路結(jié)合。此外，MEKK1 不僅能與MKK4結(jié)合，還能與JNK1/2結(jié)合，這表明它本身具有類似支架蛋白的作用。
[0007] 敲除小鼠模型中目標(biāo)同源重組基因，使得不同的JNK或其上游調(diào)節(jié)分子表達缺 失，從而影響其在生理和疾病中發(fā)揮作用，通過JNK抑制劑也進一步證明了 JNK信號通路 在不同疾病中的重要作用。JNK抑制劑可抑制由缺血及其他應(yīng)激誘導(dǎo)凋亡反應(yīng)導(dǎo)致的細胞 死亡，這顯示出了巨大的治療潛力。已有文獻證明JNK抑制劑可以用于治療或預(yù)防呼吸系 統(tǒng)疾病(如肺纖維化)、脂肪肝、肝纖維化、肝硬化、缺血/再灌注損傷、慢性炎癥性疾病、神經(jīng) 退行性疾病、糖尿病及腫瘤等。
[0008] 研究較多的JNK抑制劑主要是多肽和小分子類化合物，W02005025567和 W02006076595中，均報道了新型JNK小分子類抑制劑在多個治療領(lǐng)域的作用。目前，暫無 JNK抑制劑類藥物上市，因此，需要研發(fā)更多的JNK抑制劑結(jié)構(gòu)類型，選擇有效性和安全性 較好的化合物，用于呼吸系統(tǒng)疾病、脂肪肝、肝纖維化、肝硬化、慢性炎癥性疾病的治療。
[0009] CC-930是Celgene公司開發(fā)的用于治療纖維化的藥物，目前正處于臨床II期，在 W02006076595中提到了該化合物，結(jié)構(gòu)式如下：
[0010]

【權(quán)利要求】
1. 通式（I )所示的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽或其立體異構(gòu)體：
其中， R1，R2分別獨立的為氫、Cm烷基、未被取代或至少被一個R6取代的6-14元芳基、5-14 元雜芳基、3-14元飽和或部分飽和環(huán)烷基、3-14元飽和或部分飽和雜環(huán)烷基、7-12元螺環(huán) 基、7-12元橋環(huán)基，其中所述3-14元飽和或部分飽和雜環(huán)烷基的任意CH 2可被C(0)取代； R3為氫、心_6烷基、-(CH2) P-C (0) N (RaRb)、未被取代或至少被一個R7取代的6-14元芳基、 5-14元雜芳基、3-14元飽和或部分飽和環(huán)烷基、3-14元飽和或部分飽和雜環(huán)烷基、-(CH2) P-W、7-12元螺環(huán)基、7-12元橋環(huán)基，其中W代表3-14元飽和或部分飽和雜環(huán)烷基，所述3-14 元飽和或部分飽和雜環(huán)烷基的任意CH 2可被C(0)取代； R4, R5分別獨立的為氫、心_6烷基、未被取代或至少被一個R8取代的6-14元芳基、5-14 元雜芳基、3-14元飽和或部分飽和環(huán)烷基、3-14元飽和或部分飽和雜環(huán)烷基、7-12元螺環(huán) 基、7-12元橋環(huán)基； R6, R7, R8分別獨立的為磺?；?、鹵素、未被取代或至少被一個Ra取代的-(CH2)P-0H、 氨基取代的(V6烷基、羥基、Cm烷氧基、氨基、-(ch2)p-nh 2、鹵代cv6烷基、-(：(ο)-ο-(ν6烷 基、-C (0) -Ck 燒基、-(CH2) p-c (0) -〇-(^_6 燒基、-(ch2) ρ-ο-(ν6 燒基、-(CH2) p-c (0) NH2、-C (0) NH2、氰基、(V6烷基、C2_6烯基、C 2_6炔基、3-14元環(huán)烷基、6-14元芳基或3-14元雜環(huán)基； Ra、Rb分別獨立的為氫、(^_6烷基、-(agp-OCH烷基或6-14元芳基k烷基； P選自1，2,3或4。
2. 如權(quán)利要求1所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽或其立體異構(gòu)體： 其中， R1為（V6烷基、未被取代或至少被一個R6取代的6-14元芳基、5-14元雜芳基、3-14元 飽和或部分飽和環(huán)烷基、3-14元飽和或部分飽和雜環(huán)烷基、7-12元螺環(huán)基、7-12元橋環(huán)基， 所述3-14元飽和或部分飽和雜環(huán)烷基的任意CH 2可被C(0)取代； R2為氫、(V6烷基； R3為氫、心_6烷基、-(CH2) P-C (0) N (RaRb)、未被取代或至少被一個R7取代的6-14元芳基、 5-14元雜芳基、3-14元飽和或部分飽和環(huán)烷基、3-14元飽和或部分飽和雜環(huán)烷基、-(CH2) P-W、7-12元螺環(huán)基、7-12元橋環(huán)基，其中W代表3-14元飽和或部分飽和雜環(huán)烷基，所述3-14 元飽和或部分飽和雜環(huán)烷基的任意CH 2可被C(0)取代； R4為氫、(V6烷基； R5為氫、(V6烷基、未被取代或至少被一個R8取代的6-14元芳基、5-14元雜芳基、3-14 元飽和或部分飽和環(huán)烷基、3-14元飽和或部分飽和雜環(huán)烷基、7-12元螺環(huán)基、7-12元橋環(huán) 基； R6為磺酰基、鹵素、未被取代或至少被一個Ra取代的_(CH2) p-〇H、氨基取代的(^6烷 基、羥基、cv6烷氧基、氨基、-(ch2)p-nh2、鹵代(V 6烷基、-cW-o-Ch烷基、烷 基、-(CH2) p-c (0) -〇-(^_6 燒基、-(CH2) p-O-Ci-6 燒基、-(CH2) p-c (0) NH2、-C (0) NH2、氰基、Ck 燒 基； R7為磺?；Ⅺu素、未被取代或至少被一個Ra取代的-(CH2) p-〇H、氨基取代的Cm烷 基、羥基、cv6烷氧基、氨基、-(ch2)p-nh2、鹵代(V 6烷基、-cW-o-Ch烷基、烷 基、-(CH2) p-c (0) -〇-(^_6 燒基、-(CH2) p-O-Ci-6 燒基、-(CH2) p-c (0) NH2、-C (0) NH2、氰基、Ck 燒 基； R8為磺?；Ⅺu素、未被取代或至少被一個Ra取代的-(CH2) p-〇H、氨基取代的Cm烷 基、羥基、cv6烷氧基、氨基、-(ch2)p-nh2、鹵代(V 6烷基、-cW-o-Ch烷基、烷 基、-(CH2) p-c (0) -〇-(^_6 燒基、-(CH2) p-O-Ci-6 燒基、-(CH2) p-c (0) NH2、-C (0) NH2、氰基、Ck 燒 基； Ra、Rb分別獨立的為氫、(ν6烷基或-(α^-ο-?^烷基； P選自1，2,3或4。
3. 如權(quán)利要求2所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽或其立體異構(gòu)體： 其中， R1為(^6烷基、未被取代或至少被一個R6取代的6-14元芳基、3-14元飽和或部分飽和 環(huán)烷基、3-14元飽和或部分飽和雜環(huán)烷基、7-12元螺環(huán)基，所述3-14元飽和或部分飽和雜 環(huán)烷基的任意CH2可被C(0)取代； R2為氫、(V6烷基； R3為氫、Cm烷基、-(CH2)P-C (0) N(RaRb)、未被取代或至少被一個R7取代的3-14元飽和 或部分飽和環(huán)烷基、3-14元飽和或部分飽和雜環(huán)烷基、-(CH2)P-W、7-12元螺環(huán)基，其中W代 表3-14元飽和或部分飽和雜環(huán)烷基，所述3-14元飽和或部分飽和雜環(huán)烷基的任意CH 2可 被C(0)取代； R4為氫、(V6烷基； R5為氫、(V6烷基、未被取代或至少被一個R8取代的6-14元芳基、5-14元雜芳基、3-14 元飽和或部分飽和環(huán)烷基、3-14元飽和或部分飽和雜環(huán)烷基； R6為磺酰基、鹵素、未被取代或至少被一個Ra取代的_(CH2) p-〇H、氨基取代的(^6烷 基、羥基、（V6烷氧基、氨基、-(CH2)P-NH2、鹵代(V 6烷基、-(:(0)-0-(^烷基、烷 基、-(CH2) p-c (〇) -〇-(^_6 燒基、-(ch2) p-o-Ck 燒基、-(CH2) p-c (0) NH2、-C (0) NH2、氰基、(^_6 燒 基； R7為磺?；Ⅺu素、未被取代或至少被一個Ra取代的-(CH2) p-〇H、氨基取代的Cm烷 基、羥基、cv6烷氧基、氨基、-(ch2)p-nh2、鹵代(V 6烷基、-cW-o-Ch烷基、烷 基、-(CH2) p-c (0) -〇-(^_6 燒基、-(CH2) p-O-Ci-6 燒基、-(CH2) p-c (0) NH2、-C (0) NH2、氰基、Ck 燒 基； R8為磺?；?、鹵素、未被取代或至少被一個Ra取代的-(CH2) p-〇H、氨基取代的Cm烷 基、羥基、cv6烷氧基、氨基、-(ch2)p-nh2、鹵代(V 6烷基、-cW-o-Ch烷基、烷 基、-(CH2) p-c (0) -〇-(^_6 燒基、-(CH2) p-O-Ci-6 燒基、-(CH2) p-c (0) NH2、-C (0) NH2、氰基、Ck 燒 基； Ra、Rb分別獨立的為氫、(ν6烷基或-(α^-ο-?^烷基； P選自1，2,3或4。
4. 如權(quán)利要求3所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽或其立體異構(gòu)體： 其中， R1為(V6烷基、未被取代或至少被一個R6取代的苯基、3-8元環(huán)烷基、3-8元雜環(huán)烷基、 7-10元螺環(huán)基，所述3-8元雜環(huán)烷基的任意CH2可被C(0)取代； R2為氫、(V3烷基； R3為-(CH2)p-C(0)N(RaR b)、未被取代或至少被一個R7取代的3-8元環(huán)烷基、3-8元雜環(huán) 烷基、-(CH2)P-W、7-10元螺環(huán)基，其中W代表3-8元雜環(huán)烷基，所述3-8元雜環(huán)烷基的任意 CH2可被C(O)取代； R4為氫； R5為未被取代或至少被一個R8取代的苯基、5-6元雜芳基； R6為磺?；?、鹵素、未被取代或至少被一個Ra取代的_(CH2) p-〇H、氨基取代的(^6烷 基、羥基、（V6烷氧基、氨基、-(CH2)P-NH2、鹵代(V 6烷基、-(:(0)-0-(^烷基、烷 基、-(CH2) p-c (〇) -〇-(^_6 燒基、-(ch2) p-o-Ck 燒基、-(CH2) p-c (0) NH2、-C (0) NH2、氰基、(^_6 燒 基； R7為磺?；Ⅺu素、未被取代或至少被一個Ra取代的-(CH2) p-〇H、氨基取代的Cm烷 基、羥基、cv6烷氧基、氨基、-(ch2)p-nh2、鹵代(V 6烷基、-cW-o-Ch烷基、烷 基、-(CH2) p-c (0) -〇-(^_6 燒基、-(CH2) p-O-Ci-6 燒基、-(CH2) p-c (0) NH2、-C (0) NH2、氰基、Ck 燒 基； R8為磺?；Ⅺu素、未被取代或至少被一個Ra取代的-(CH2) p-〇H、氨基取代的Cm烷 基、羥基、cv6烷氧基、氨基、-(ch2)p-nh2、鹵代(V 6烷基、-cW-o-Ch烷基、烷 基、-(CH2) p-c (0) -〇-(^_6 燒基、-(CH2) p-O-Ci-6 燒基、-(CH2) p-c (0) NH2、-C (0) NH2、氰基、Ck 燒 基； Ra、Rb分別獨立的為氫、(ν6烷基或-(α^-ο-?^烷基； P選自1，2,3或4。
5.如權(quán)利要求4所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽或其立體異構(gòu)體： 其中， R1為(V3烷基、未被取代或至少被一個R6取代的苯基、3-8元環(huán)烷基、3-8元雜環(huán)烷基、 7-10元螺環(huán)基，所述3-8元雜環(huán)烷基的任意CH2可被C(0)取代； R2為氫、(V3烷基； R3為-(CH2)p-C(0)N(RaR b)、未被取代或至少被一個R7取代的3-8元環(huán)烷基、3-8元雜環(huán) 烷基、-(CH2)P-W、7-10元螺環(huán)基，其中W代表3-8元雜環(huán)烷基，所述3-8元雜環(huán)烷基的任意 CH2可被C(0)取代； R4為氫； R5為未被取代或至少被一個R8取代的苯基； R6為鹵素、未被取代或至少被一個Ra取代的_(CH2)p-〇H、羥基、氨基、-C(0)NH 2、氰基、 (ν3烷基； R7為齒素、輕基、CV6燒氧基、氣基、Ci_6燒基； R8為齒素、輕基、CV6燒氧基、氣基； Ra、Rb分別獨立的為氫、Q_3烷基； P選自1，2,3或4。
6. 如權(quán)利要求5所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽或其立體異構(gòu)體： 其中， R1為(V3烷基、未被取代或至少被一個R6取代的苯基、3-6元環(huán)烷基、3-6元雜環(huán)烷基、 7-10元螺環(huán)基，所述3-6元雜環(huán)烷基的任意CH2可被C(0)取代； R2為氫、(V3烷基； R3為-(CH2)p-C(0)N(RaR b)、未被取代或至少被一個R7取代的3-6元環(huán)烷基、3-6元雜環(huán) 烷基、-(CH2)P-W、7-10元螺環(huán)基，其中W代表3-6元雜環(huán)烷基，所述3-6元雜環(huán)烷基的任意 CH2可被C(O)取代； R4為氫； R5為未被取代或至少被一個R8取代的苯基； R6為未被取代或至少被一個Ra取代的-(CH2)P-0H、羥基、氨基、-C (0) NH2、Cl_3烷基； R7為羥基； R8為鹵素； Ra、Rb分別獨立的為氫、Q_3烷基； P選自1或2。
7. 如權(quán)利要求6所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽或其立體異構(gòu)體： 其中， R1為(V3烷基、未被取代或至少被一個R6取代的苯基、環(huán)己烷基、環(huán)戊烷基、哌啶基、哌 啶-2-酮基、四氫吡喃基
R2為氫、甲基； R3為-(CH2)p-C(0)N(RaRb)、未被取代或至少被一個R 7取代的氧雜環(huán)丁烷基、四 氫呋喃基、四氫吡喃基、環(huán)己烷基、_(CH2)p_四氫呋喃基、_(CH2) P-四氫吡咯-2-酮基、
R4為氫； R5為未被取代或至少被一個R8取代的苯基； R6為未被取代或至少被一個Ra取代的_(CH2)p-〇H、羥基、氨基、-C(0)NH 2、Ci_3烷基； R7為羥基； R8為氯或氟； Ra、Rb分別獨立的為氫、Q_3烷基； P選自1或2。
8. 如權(quán)利要求7所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽或其立體異構(gòu)體，所述化合物選 自：
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9. 包括權(quán)利要求1?8任一項所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽或其立體異構(gòu)體與 一種或多種藥用載體的藥物組合物，其特征在于所述藥物組合物為臨床上或藥學(xué)上可接受 的任一劑型。
10. 權(quán)利要求1?8任一項所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽或其立體異構(gòu)體在制 備治療和/或預(yù)防缺血再灌注損傷、糖尿病、神經(jīng)退行性病變、慢性炎癥、肺纖維化、肝纖維 化、脂肪肝或肝硬化的藥物中的用途。
【文檔編號】A61K31/437GK104098563SQ201410128788
【公開日】2014年10月15日 申請日期:2014年4月1日 優(yōu)先權(quán)日:2013年4月2日
【發(fā)明者】李麗, 張艷 申請人:山東亨利醫(yī)藥科技有限責(zé)任公司