硫酸化寡聚糖衍生物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及多元硫酸化寡聚糖衍生物化合物，其作為硫酸乙酰肝素-結(jié)合蛋白和類肝素酶的抑制劑具有活性；制備所述化合物的方法；包含所述化合物的組合物，以及所述化合物及其組合物用于對哺乳動物受試者進行抗血管生成、抗轉(zhuǎn)移、抗炎、抗微生物、抗凝血和/或抗血栓形成的治療、降低血液的甘油三酯水平以及抑制心血管疾病的用途。
【專利說明】硫酸化寡聚糖衍生物
[0001]本申請是中國專利申請?zhí)?00580006833.8 (PCT/AU2005/000314),申請日為2005年3月4日發(fā)明名稱為“硫酸化寡聚糖衍生物”的分案申請。
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0002]本發(fā)明在此的描述涉及具有作為硫酸乙酰肝素-結(jié)合蛋白和類肝素酶的抑制劑活性的化合物。具體地，本發(fā)明涉及硫酸化寡聚糖衍生物，盡管本發(fā)明的范圍不是必然地被限制于此。具體地，本發(fā)明涉及多元硫酸化寡聚糖衍生物，所述衍生化優(yōu)選在單糖單元還原端的C-1上和/或非還原端的C-6上。本發(fā)明還涉及制備所述化合物的方法，包含所述化合物的組合物，以及所述化合物及其組合物對哺乳動物受試者進行抗血管生成、抗轉(zhuǎn)移、抗炎、抗微生物、抗凝血和/或抗血栓形成的治療的用途。所述化合物及其組合物還具有在哺乳動物受試者中降低血液甘油三酯水平以及抑制心血管疾病的作用。當(dāng)將其對哺乳動物受試者進行給藥時，所述化合物還對預(yù)防上述病癥具有作用。
【背景技術(shù)】
[0003]已知的硫酸化寡聚糖試劑P1-88[1，2](參見下面的化合物I)已經(jīng)被證明是有價值的腫瘤生長和轉(zhuǎn)移抑制劑[1，3]并且正在癌癥病人中進行II期臨床試驗[4]。P1-88通過抑制血管生成生長因子(具體地是FGF-l、FGF-2和VEGF)以及它們的受體與硫酸乙酰肝素的相互作用來發(fā)揮抗血管生成作用[1，5]。另外，P1-88是一種類肝素酶的有效抑制劑，該酶是一種分解蛋白聚糖的硫酸乙酰肝素側(cè)鏈的糖苷酶，該蛋白聚糖是腫瘤細(xì)胞周圍的細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)和基底膜的主要成分[1，2]。已經(jīng)將類肝素酶與血管緊密地聯(lián)系起來:它能夠從所述ECM中釋放活性硫酸乙酰肝素-結(jié)合的血管生成生長因子并且與所述ECM的降解以及隨后的與新血管的生長相聯(lián)系的組織重塑有關(guān)[6]。所述的通過類肝素酶的ECM的降解在所述腫瘤細(xì)胞的擴散(轉(zhuǎn)移)中也是決定性的，該腫瘤細(xì)胞的擴散(轉(zhuǎn)移)是通過允許它們進入血流并且固定在遠(yuǎn)處的，在那里它們能夠形成次生瘤[6，7]。
[0004]除它的抗血管生成作用之外，P1-88通過以下來抑制凝血系統(tǒng):(i)抑制在固有途徑中的蛋白酶，(?)刺激組織因子途徑抑制物(TFPI)的釋放，以及(iii)活化肝素輔因子
I1-介導(dǎo)的凝血酶的抑制。然而，P1-88不與ATIII相互作用并且因此顯示無抗-Xa或AT
II1-介導(dǎo)的抗-1Ia的活性[8，9]。在猴子的體內(nèi)研究中表明低劑量的P1-88促進完全硫酸乙酰肝素結(jié)合的TFPI從血管細(xì)胞壁釋放[9]。除了其在凝血方面的影響，TFPI最近被證明是一種抗血管生成劑[10]和轉(zhuǎn)移抑制劑[11]。P1-88還顯示出阻滯血管平滑肌細(xì)胞增殖以及內(nèi)膜增厚[12]，抑制細(xì)胞的單純皰疹病毒(HSV)感染以及HSV-1及HSV-2的細(xì)胞向細(xì)胞的傳播[13],以及抑制在被動埃曼腎炎(passive Heymann nephritis)中的蛋白尿征
[14]。
[0005]P1-88是一種高度硫酸化、大小范圍為二 -至己糖的單磷酸化甘露糖寡聚糖的混合物[15，16]。通過完全磺化[ 2，16]所述寡聚糖磷酸鹽部分(2)(參見在本段之后的式I)制得P1-88，該寡聚糖磷酸鹽部分⑵是通過溫和的、酸催化水解所述酵母Pichia(Hansenula)holstii NRRL Y-2448的細(xì)胞外磷酸甘露聚糖獲得的[17，18]。所述主要組分分別地是五-和四糖磷酸鹽3 (~60%)以及4 (~30%)，同時剩余的10%是由二 -、三-和己糖磷酸鹽(5-7)以及四糖基胺(tetrasaccharylamine,未示出)組成的[15，16]。
[0006]式I
【權(quán)利要求】
1.一種通式化合物:
X-LYln-Z-UR1 其中: X、Y和Z每個是單糖單元，其具有通過單或多鍵與X、Y和Z的每個非連接的碳結(jié)合的基團UR，除具有通過單或多鍵結(jié)合的UR1的單糖Z的碳-1之外；η是0-6的整數(shù)； 每個U獨立地是C、N、S或O或者它們的高氧化態(tài)，包括CO、COO、NO、NO2, S (O)、S (O) O ；每個R獨立地是SO3M或H，其中M是任何藥學(xué)上可接受的陽離子或者是任何烷基、芳基、?；?、芳?；⑼榛酋；?、芳基磺?；?、PEG、PEG衍生物、H或基團
2.一種通式化合物:

3.權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的化合物，其中M是鈉。
4.權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的化合物，其中η是3。
5.權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的化合物，其中R1是正辛基。
6.權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的化合物，其中至少50%的R基團含有S03M。
7.權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的化合物，其中70至100%的R基團含有S03M。
8.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中所述化合物是如以上所描述的PG500、PG501、PG502、PG503、PG504、PG506、PG507、PG508、PG509、PG510、PG511、PG512、PG513、PG514。
9.一種用于預(yù)防或治療哺乳動物受試者的由血管生成、轉(zhuǎn)移、炎癥、凝血/血栓、升高的血液甘油三酯水平、微生物感染和/或心血管疾病產(chǎn)生的病癥的藥物或獸藥組合物，所述組合物包含至少一種根據(jù)權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的化合物以及用于所述至少一種化合物的藥學(xué)或獸醫(yī)學(xué)上可接受的載體或稀釋劑。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的組合物，其進一步包含藥學(xué)或獸醫(yī)學(xué)上可接受的賦形劑、緩沖劑、穩(wěn)定劑、等滲化試劑、防腐劑或抗氧化劑。
11.根據(jù)權(quán)利要求所述9的組合物，其中所述化合物以酯、游離酸或堿、水合物或前藥的形式存在。
12.根據(jù)權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的化合物在制備用于預(yù)防或治療哺乳動物受試者的由血管生成、轉(zhuǎn)移、炎癥、凝血/血栓、升高的血液甘油三酯水平、微生物感染和/或心血管疾病產(chǎn)生的病癥的藥物中的應(yīng)用。
13.根據(jù)權(quán)利要求12的應(yīng)用，其中所述哺乳動物受試者是人類受試者。
14.一種用于預(yù)防或治療哺乳動物受試者的由血管生成、轉(zhuǎn)移、炎癥、凝血/血栓、升高的血液甘油三酯水平、微生物感染和/或心血管疾病產(chǎn)生的病癥的方法，所述方法包括向所述受試者以有效量的至少一種根據(jù)權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的化合物或包含所述至少一種化合物的組合物給藥。
15.根據(jù)權(quán)利要求14的方法，其中所述哺乳動物受試者是人類受試者。
16.根據(jù)權(quán)利要求14的方法，其中由血管生成產(chǎn)生的所述病癥是增生性視網(wǎng)膜病或由實體瘤生長的血管生成。
17.根據(jù)權(quán)利要求14的方法，其中由炎癥產(chǎn)生的所述病癥是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化、炎癥性腸病、同種異體移植排斥或慢性哮喘。
18.根據(jù)權(quán)利要求14的方法，其中由凝血和/或血栓產(chǎn)生的所述病癥是深度靜脈血栓形成、肺栓塞、血栓性中風(fēng)、外周動脈血栓形成、不穩(wěn)定性心絞痛或心肌梗塞。
19.一種用于制備根據(jù)權(quán)利要求1的化合物的方法，所述方法包括: i)活化被保護的寡聚糖以及將所述被活化的寡聚糖與供體化合物縮合； ?)將從步驟(i)得到的所述糖甙脫保護；以及 iii)任選地衍生化所述的脫保護的糖甙。
20.根據(jù)權(quán)利要求19的方法，其中步驟(i)中的所述的活化是通過路易斯酸。
21.權(quán)利要求19的方法，其中所述寡聚糖的非還原的碳是磷酸化的。
【文檔編號】A61K31/7016GK103788141SQ201410042932
【公開日】2014年5月14日 申請日期:2005年3月4日 優(yōu)先權(quán)日:2004年3月4日
【發(fā)明者】V·費爾羅, J·K·法爾威瑟, T·卡洛麗, 劉立功 申請人:普羅吉恩制藥有限公司