用于提高蛋白質(zhì)消化速率和吸收的蛋白酶及其使用方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種食品增補(bǔ)劑，其包含選自下列的至少一種蛋白酶：(i)CAS#9001-92-7，來自于曲霉屬(Aspergillus)的IUB 3.4.23.18蛋白酶；(ii)CAS#9001-92-7，來自于芽孢桿菌屬(Bacillus)的IUB3.4.21.7蛋白酶；(iii)CAS#9001-61-0，來自于曲霉屬的IUB 3.4.11.1蛋白酶；(iv)CAS#9074-07-1，來自于曲霉屬的IUB 3.4.21.63蛋白酶；(v)CAS#9073-78-3，來自于曲霉屬的IUB 3.4.24.27蛋白酶；(vi)CAS#9025-49-4，來自于曲霉屬的IUB 3.4.23.18蛋白酶；和(vii)它們的組合。所述食品增補(bǔ)劑還可以包含蛋白質(zhì)、穩(wěn)定劑、基質(zhì)改良劑、載體、防腐劑、增量劑、干燥劑、乳化劑、酶涂層或其組合。本發(fā)明公開了一種增加蛋白質(zhì)在人類胃腸系統(tǒng)中的吸收的方法，所述方法包括攝食如上指定的食品增補(bǔ)劑的步驟。
【專利說明】用于提高蛋白質(zhì)消化速率和吸收的蛋白酶及其使用方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種食品增補(bǔ)劑，其包含至少一種真菌或細(xì)菌的蛋白酶，所述蛋白酶 在胃蛋白酶存在下表現(xiàn)出提高的蛋白水解活性，產(chǎn)生提高的蛋白質(zhì)消化速率和吸收，本發(fā) 明還涉及使用所述食品增補(bǔ)劑的方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 幾乎一個世紀(jì)以來，從各種真菌和細(xì)菌菌株的發(fā)酵分離到的蛋白酶已在食品加工 工業(yè)中被用作添加劑（Underkofler，L.A.等，"微生物學(xué)方法報告--微生物酶的生產(chǎn)及其 應(yīng)用''(Microbiological process report-Production of microbial enzymes and their applications)，Applied Microbiology, Vol. 6, pp. 212-221 (1958))。還已向動物飼料添 加酶，以在用于食品和乳品生產(chǎn)的各種家畜中引起體重增加 （Leahy KT等，"用α-淀粉酶 和（或）山梨酸處理玉米青IC飼料對肉牛生長和畜體特征的影響"（Effects of treating corn silage with alpha amylase and (or)sorbic acid on beef cattle growth and carcass characteristics)，J. Anim. Sci. 1990 ;68 (2) : 490-7,和 Stokes, MR.，"酶混合物這 種接種劑和它們的相互作用對青IC飼料發(fā)酵和乳品生產(chǎn)的影響"（Effects of an enzyme mixture, an inoculant, and their interaction on silage fermentation and dairy production)，J. Dairy Sci. 1992 ;75 (3) : 764-73)。更近些時候，已在膳食增補(bǔ)劑工業(yè)中，在 消化助劑類別中提倡酶。在2009年，與前一年相比，消化助劑和酶的銷售增長超過8%，其 中酶在這個不斷增長的類別中占6900萬美元（Wright, R.，"酶市場"(The Enzyme Market)， Nutraceuticals World(2010年 6 月））。
[0003] 存在從各種來源或甚至同一來源但是通過不同方法獲得的用作膳食增補(bǔ)性消化 助劑的各種不同的蛋白酶。然而，通常在使用和添加它們時并沒有評估它們?nèi)绾卧谥付ǖ?使用條件下發(fā)揮作用。
[0004] 這種缺乏了解的一個原因可能是不存在可用于比較來自于相同或不同來源的不 同蛋白酶作為消化助劑的相對活性的已接受的統(tǒng)一分析方法。不存在可用于評估它們在存 在內(nèi)源消化酶的目標(biāo)使用條件下的相對活性并可用于確定有效劑量的目的的已接受的統(tǒng) 一分析方法。
[0005] 《食品和化學(xué)品法典》(Food and Chemical Codex) (FCC)和《美國藥典膳食增補(bǔ)劑 綱要》（United States Pharmacopeia Dietary Supplement Compendium) (USP)列出了區(qū) 分真菌來源和細(xì)菌來源之間的蛋白酶活性的相同測定法。然而，所述測定法在不同條件下 進(jìn)行，并各自報告不同的蛋白酶單位。對于這些酶單位如何在定量上不同，當(dāng)用作消化助劑 時蛋白酶活性受到何種影響或者在內(nèi)源消化酶存在下蛋白酶活性是否受到影響，沒有提供 解釋。例如，使用FCC或USP方法，從米曲霉（Aspergillus oryzae)產(chǎn)生的中性真菌蛋白 酶的活性可以用HUT單位（來自于在pH 4.7和40°C下測定的血紅蛋白）來報告，而來自 于同一來源的酸性蛋白酶活性用SAP單位（來自于在pH 3和37°C下測定的酪蛋白）來報 告。關(guān)于這些酶單位如何在定量上彼此相關(guān)聯(lián)，當(dāng)用作消化助劑時蛋白酶活性受到何種影 響或者在內(nèi)源消化酶存在下蛋白酶活性是否受到影響，沒有提供解釋。另一個實例是兩種 細(xì)菌蛋白酶的活性。一種來自于枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis)，另一種來自于地衣芽 孢桿菌（Bacillus Iichentformis)，兩者都使用相同的FCC和USP方法用PC單位（來自于 在7. 0和37°C下測定的酪蛋白）報告。關(guān)于當(dāng)用作消化助劑時任一者的蛋白酶活性如何或 是否受到影響，或者在內(nèi)源消化酶存在下蛋白酶活性是否受到影響，沒有提供信息或解釋。 此外，在本領(lǐng)域中，總的來說，HUT、SAP和PC單位之間的精確差異還沒有被定量。
[0006] 在藥典的活性測定法中使用的用于分析的底物、PH和溫度的變化性，使得難以比 較各種不同蛋白酶的活性。此外，這些測定法都沒有提供一種機(jī)制來確定特定酶、酶的組合 或酶配方是否在胃蛋白酶和胰酶存在下對提高蛋白質(zhì)消化速率有貢獻(xiàn)。當(dāng)在本文中使用 時，"對消化活性有貢獻(xiàn)"是指在生理條件下，在特定底物上，將消化速率提高到高于由單獨 的胃蛋白酶或胰酶或其組合所產(chǎn)生的速率。這一信息在確定蛋白酶之間消化活性的差異 以及蛋白酶用作膳食增補(bǔ)劑以提高蛋白質(zhì)消化和吸收速率的有效劑量中，是有價值的。提 高餐后蛋白質(zhì)消化速率可以減少消化不良并促進(jìn)血液中肽和氨基酸水平的快速提高。血 中氨基酸快速超過正常含量（rapid hyperaminoacidemia)進(jìn)而通過增加蛋白質(zhì)吸收來幫 助增加肌肉量，這對于運動員以及遭受衰老相關(guān)的蛋白質(zhì)喪失和可能的肌肉減少癥的人來 說是有價值的（Boirie，Y.等，"緩慢和快速的膳食蛋白質(zhì)差異調(diào)節(jié)餐后蛋白質(zhì)堆積"（Slow and fast dietary proteins differently modulate postprandial protein accretion)， Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1997 ;94 ;14930-14935 ;Fujita, S.等，"支鏈氨基酸：代謝、生理 功能和應(yīng)用'，（BranchechChain Amino Acids:Metabolism, Physiological Function, and Application)，J. Nutr. 2006 ;136:277S-280S ;以及 Dangin 等，"在年輕和年老對象中蛋 白質(zhì)消化速率對蛋白質(zhì)更新的影響"（Influence of the Protein Digestion Rate on Protein Turnover in Young and Elderly Subjects)，J. Nutr. 2002; 132:3228S-32335)〇
[0007] 為了解決本領(lǐng)域中的難題，正如本文中所公開的，評估了各種蛋白酶用作本文中 的膳食增補(bǔ)劑的蛋白水解活性，并分析了它們在胃蛋白酶存在下對特定蛋白質(zhì)的消化活性 的貢獻(xiàn)。在攝入后，本發(fā)明的食品增補(bǔ)劑中的蛋白酶與被攝入的蛋白質(zhì)和人類胃中天然存 在的酶例如胃蛋白酶組合并且相互作用。胃蛋白酶由胃中的細(xì)胞以胃蛋白酶原的形式釋 放，并且必須在低于5的pH下被激活成胃蛋白酶。被激活的胃蛋白酶隨后將食物蛋白質(zhì)降 解成肽。在胃中存在的酶中，據(jù)了解，胃蛋白酶在切開疏水性氨基酸并且優(yōu)選為芳香族氨基 酸之間的肽鍵中最為有效。
[0008] 在本文中，通過開發(fā)并執(zhí)行能夠在溫度、pH和存在內(nèi)源消化酶例如胃蛋白酶的生 理條件下標(biāo)準(zhǔn)化并比較蛋白水解活性的分析方法，來評估和分析蛋白水解活性。本公開解 決了上述在本領(lǐng)域中認(rèn)識到的問題，并鑒定到特定的蛋白酶，其在胃蛋白酶存在下，在胃的 消化條件下提高蛋白水解活性，引起蛋白質(zhì)吸收（消化）速率提高并產(chǎn)生改進(jìn)的食品增補(bǔ) 劑。
[0009] 發(fā)明概述
[0010] 本公開涉及一種食品增補(bǔ)劑，其包含選自下列的至少一種蛋白酶：（i) CAS#9001-92-7，來自于曲霉屬（Aspergillus)的 IUB 3.4.23.18 蛋白酶；（ii) CAS#9001-92-7，來自于芽孢桿菌屬（Bacillus)的 IUB3. 4.21.7 蛋白酶；（iii) CAS#9001-61-0,來自于曲霉屬的 IUB 3.4. 11. 1 蛋白酶；（iv)CAS#9074-07-l，來自于曲 霉屬的IUB 3· 4· 21. 63蛋白酶；（V)CAS#9073-78-3,來自于曲霉屬的IUB 3· 4· 24. 27蛋 白酶；（vi)CAS#9025-49-4,來自于曲霉屬的IUB 3. 4. 23. 18蛋白酶；以及（vii)它們的 組合。在某些實施方式中，CAS#9001-92-7,來自于曲霉屬的IUB 3. 4. 23. 18蛋白酶來自 于米曲霉（〇巧^6)種；0六5#9001-92-7，來自于芽孢桿菌屬的1耶3.4.21.7蛋白酶來自 于枯草芽孢桿菌（subtilis)種；CAS#9001-61-0,來自于曲霉屬的IUB 3. 4. 11. 1蛋白酶 來自于米曲霉種<45#9074-07-1，來自于曲霉屬的1耶3.4.21.63蛋白酶來自于蜂蜜曲 霉（melleus)種；CAS#9073-78-3,來自于曲霉屬的IUB 3. 4. 24. 27蛋白酶來自于米曲霉 種；并且CAS#9025-49-4,來自于曲霉屬的IUB3. 4. 23. 18蛋白酶來自于黑曲霉（niger) 種。在優(yōu)選實施方式中，所述至少一種蛋白酶是（i)CAS#9001-92-7,來自于米曲霉的IUB 3. 4. 23. 18蛋白酶和（iv)CAS#9074-07-l，來自于蜂蜜曲霉的IUB 3. 4. 21. 63蛋白酶的組 合，（i)CAS#9001-92-7,來自于米曲霉的 IUB 3. 4. 23. 18 蛋白酶和（v)CAS#9073-78-3,來自 于米曲霉的IUB 3. 4. 24. 27蛋白酶的組合，或者是（iv)CAS#9074-07-l，來自于蜂蜜曲霉的 1皿3.4.21.63蛋白酶和&)〇六5#9073-78-3，來自于米曲霉的1皿3.4.24.27蛋白酶的組 合。在某些實施方式中，食品增補(bǔ)劑還包含選自乳清蛋白、大豆蛋白、酪蛋白及其組合的蛋 白質(zhì)，或者還包含選自穩(wěn)定劑、基質(zhì)改良劑、載體、防腐劑、增量劑、干燥劑、乳化劑、酶涂層 及其組合的其他成分。在某些實施方式中，所述基質(zhì)改良劑選自磷酸二氫鹽、硝酸鹽、檸檬 酸鹽、多聚煙酸鹽、吡啶甲酸鹽、弱有機(jī)酸、多酚類化合物及其組合，所述多酚類化合物的至 少一個pka為5或更低。
[0011] 本發(fā)明還涉及一種提高蛋白質(zhì)在人類胃腸系統(tǒng)中的吸收（消化速率）的方法，所 述方法包括攝食食品增補(bǔ)劑的步驟，所述食品增補(bǔ)劑包含選自下列的至少一種蛋白酶：（i) CAS#9001-92-7,來自于曲霉屬的IUB 3. 4. 23. 18蛋白酶；（ii)CAS#9001-92-7,來自于芽孢 桿菌屬的IUB 3. 4. 21. 7蛋白酶；（iii)CAS#9001-61-0,來自于曲霉屬的IUB3. 4. 11. 1蛋白 酶；（iv)CAS#9074-07-l，來自于曲霉屬的 IUB 3. 4. 2L 63 蛋白酶；（v)CAS#9073-78-3,來自 于曲霉屬的1皿3.4.24.27蛋白酶；卜1)〇八5#9025-49-4，來自于曲霉屬的1皿3.4.23.18 蛋白酶；以及（vii)它們的組合。在提高蛋白質(zhì)在人類胃腸系統(tǒng)中的吸收的方法的優(yōu)選 實施方式中，所述至少一種蛋白酶是（i)CAS#9001-92-7,來自于米曲霉的IUB 3. 4. 23. 18 蛋白酶和（^)〇六5#9074-07-1，來自于蜂蜜曲霉的1耶3.4.21.63蛋白酶的組合，（1) 〇八5#9001-92-7，來自于米曲霉的1皿3.4.23.18蛋白酶和&)0六5#9073-78-3，來自于米 曲霉的IUB3. 4. 24. 27蛋白酶的組合，或者是（iv)CAS#9074-07-l，來自于蜂蜜曲霉的IUB 3. 4. 21. 63蛋白酶和（v)CAS#9073-78-3,來自于米曲霉的IUB3. 4. 24. 27蛋白酶的組合。在 某些實施方式中，本發(fā)明的方法還包括攝食選自乳清蛋白、大豆蛋白、酪蛋白及其組合的蛋 白質(zhì)。
[0012] 附圖簡述
[0013] 圖1示出了在37°C下溫育的模擬胃液（SGF)中，在特定時間點處作為蛋白水解活 性的產(chǎn)物的游離胺濃度的相對增加的積分面積。圖示結(jié)果包括：在SGF和胃蛋白酶中溫育 的乳清蛋白的分析（SGF-WP中的WPC);與乳清蛋白組合并在不含胃蛋白酶的SGF中溫育的 蛋白酶#4 (酶#4+WPC，在SGF-NP中），和與乳清蛋白組合并在含有胃蛋白酶的SGF中溫育 的蛋白酶#4 (酶#4+WPC，在SGF-WP中）。在每個相應(yīng)的數(shù)據(jù)集中從每個時間點減去時間為 零時（t = 0)的吸收值。
[0014] 圖2示出了蛋白酶#4的原始吸收數(shù)據(jù)，其如圖2中所示被用于計算特定時間點處 游離胺濃度的相對增加的積分面積。
[0015] 圖3示出了在37°C下溫育的模擬胃液（SGF)中，在特定時間點處作為蛋白水解活 性的產(chǎn)物的游離胺濃度的相對增加的積分面積。圖示結(jié)果包括：在SGF和胃蛋白酶中溫育 的乳清蛋白的分析（SGF-WP中的WPC);與乳清蛋白組合并在不含胃蛋白酶的SGF中溫育的 蛋白酶#1(酶#1+WPC，在SGF-NP中），和與乳清蛋白組合并在含有胃蛋白酶的SGF中溫育 的蛋白酶#1 (酶#1+WPC，在SGF-WP中）。在每個相應(yīng)的數(shù)據(jù)集中從每個時間點減去時間為 零時（t = 0)的吸收值。
[0016] 圖4示出了在37°C下溫育的模擬胃液（SGF)中，在特定時間點處作為蛋白水解活 性的產(chǎn)物的游離胺濃度的相對增加的積分面積。圖示結(jié)果包括：在SGF和胃蛋白酶中溫育 的乳清蛋白的分析（SGF-WP中的WPC);與乳清蛋白組合并在不含胃蛋白酶的SGF中溫育的 蛋白酶#2(酶#2+WPC，在SGF-NP中），和與乳清蛋白組合并在含有胃蛋白酶的SGF中溫育 的蛋白酶#2 (酶#2+WPC，在SGF-WP中）。在每個相應(yīng)的數(shù)據(jù)集中從每個時間點減去時間為 零時（t = 0)的吸收值。
[0017] 圖5示出了在37°C下溫育的模擬胃液（SGF)中，在特定時間點處作為蛋白水解活 性的產(chǎn)物的游離胺濃度的相對增加的積分面積。圖示結(jié)果包括：在SGF和胃蛋白酶中溫育 的乳清蛋白的分析（SGF-WP中的WPC);與乳清蛋白組合并在不含胃蛋白酶的SGF中溫育的 蛋白酶#3(酶#3+WPC，在SGF-NP中），和與乳清蛋白組合并在含有胃蛋白酶的SGF中溫育 的蛋白酶#3 (酶#3+WPC，在SGF-WP中）。在每個相應(yīng)的數(shù)據(jù)集中從每個時間點減去時間為 零時（t = 0)的吸收值。
[0018] 圖6示出了在37°C下溫育的模擬胃液（SGF)中，在特定時間點處作為蛋白水解活 性的產(chǎn)物的游離胺濃度的相對增加的積分面積。圖示結(jié)果包括：在SGF和胃蛋白酶中溫育 的乳清蛋白的分析（SGF-WP中的WPC);與乳清蛋白組合并在不含胃蛋白酶的SGF中溫育的 蛋白酶#5(酶#5+WPC，在SGF-NP中），和與乳清蛋白組合并在含有胃蛋白酶的SGF中溫育 的蛋白酶#5 (酶#5+WPC，在SGF-WP中）。在每個相應(yīng)的數(shù)據(jù)集中從每個時間點減去時間為 零時（t = 0)的吸收值。
[0019] 圖7示出了在37°C下溫育的模擬胃液（SGF)中，在特定時間點處作為蛋白水解活 性的產(chǎn)物的游離胺濃度的相對增加的積分面積。圖示結(jié)果包括：在SGF和胃蛋白酶中溫育 的乳清蛋白的分析（SGF-WP中的WPC);與乳清蛋白組合并在不含胃蛋白酶的SGF中溫育的 蛋白酶#6(酶#6+WPC，在SGF-NP中），和與乳清蛋白組合并在含有胃蛋白酶的SGF中溫育 的蛋白酶#6 (酶#6+WPC，在SGF-WP中）。在每個相應(yīng)的數(shù)據(jù)集中從每個時間點減去時間為 零時（t = 0)的吸收值。
[0020] 發(fā)明詳述
[0021] 本發(fā)明的目的是確定和教示能夠在胃腸系統(tǒng)中最快速地消化蛋白質(zhì)并促進(jìn)蛋白 質(zhì)吸收的酶或酶組合。所試驗的蛋白酶屬于被接受可能用在膳食增補(bǔ)劑中的幾類真菌和細(xì) 菌酶。本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，取決于蛋白質(zhì)底物以及胃蛋白酶和模擬胃液的存在，蛋白酶的蛋白水 解活性可以極大地變化。本發(fā)明人還發(fā)現(xiàn)，在這些條件下的蛋白酶活性不是顯而易見的，并 且不能從制造商提供的活性技術(shù)指標(biāo)準(zhǔn)確地推演出來。此外，迄今為止，尚未發(fā)現(xiàn)在模擬胃 液存在下和存在和不存在胃蛋白酶的情況下比較對不同膳食蛋白質(zhì)底物的蛋白水解活性 的數(shù)據(jù)或信息。
[0022] 本發(fā)明的第一實施方式涉及一種食品增補(bǔ)劑，其包含選自下列由CAS號、IUB號 和屬指定的至少一種蛋白酶：（i)CAS#9001-92-7,來自于曲霉屬的IUB 3. 4. 23. 18蛋白酶； (ii)CAS#9001-92-7,來自于芽孢桿菌屬的 IUB 3. 4. 2L 7 蛋白酶；（iii)CAS#9001-61-0,來 自于曲霉屬的IUB 3. 4. 11. 1蛋白酶；（iv)CAS#9074-07-l，來自于曲霉屬的IUB 3. 4. 21.63 蛋白酶；（v)CAS#9073-78-3,來自于曲霉屬的 IUB3. 4. 24. 27 蛋白酶；（vi)CAS#9025-49-4， 來自于曲霉屬的IUB 3. 4. 23. 18蛋白酶；以及（vii)它們的組合。
[0023] 蛋白酶在本文中被定義為源自于真菌或細(xì)菌來源，能夠通過水解來分解蛋白質(zhì)及 其降解產(chǎn)物多肽和肽，并且在從約2的pH到約8的pH范圍內(nèi)的pH環(huán)境中有活性的酶。"蛋 白酶"和"蛋白水解酶"在本文中可互換使用。適合用于本發(fā)明的所有蛋白酶是可以從已知 來源商購的，或者可以通過已知方法產(chǎn)生。
[0024] 優(yōu)選地，CAS#9001-92-7,來自于曲霉屬的IUB 3. 4. 23. 18蛋白酶可以來自于 米曲霉種；045#9001-92-7，來自于芽孢桿菌屬的1耶3.4.21.7蛋白酶可以來自于枯 草芽孢桿菌種；CAS#9001-61-0,來自于曲霉屬的IUB 3. 4. 11. 1蛋白酶可以來自于米 曲霉種；CAS#9074-07-l，來自于曲霉屬的IUB 3.4.21.63蛋白酶可以來自于蜂蜜曲霉 種；CAS#9073-78-3,來自于曲霉屬的IUB 3.4.24.27蛋白酶可以來自于米曲霉種；并且 CAS#9025-49-4,來自于曲霉屬的IUB 3. 4. 23. 18蛋白酶可以來自于黑曲霉種。
[0025] 這些酶的詳細(xì)的制造商技術(shù)指標(biāo)如下。CAS#9001-92-7,來自于米曲霉的IUB 3.4. 23. 18蛋白酶，在后文中被稱為"蛋白酶#1"，在6-9的pH范圍內(nèi)有活性，最適pH為7. 5， 活性溫度范圍為25-60°C，最適溫度為50°C，活性測定為400, 000HU/g。蛋白酶#1的顏色為 淺棕色至棕色，并具有低于10%的干燥失重（"L0D"）。
[0026] 045#9001-92-7，來自于枯草芽孢桿菌的1耶3.4.21.7蛋白酶，在后文中被稱為 "蛋白酶#2"，具有6-8的活性pH范圍，最適pH為7. 5,活性溫度范圍為40-60°C，最適溫度 為55°C，活性測定為2,000,000PC/g。蛋白酶#2的顏色為淺褐色至褐色，并具有低于10% 的 LOD0
[0027] CAS#9001-61-0,來自于米曲霉的IUB 3. 4. 11. 1蛋白酶，在后文中被稱為"蛋白酶 #3"，具有5. 5-8. 5的活性pH范圍，最適pH為7,活性溫度范圍為30-60°C，最適溫度為50°C， 并且活性測定為500LAP/g。蛋白酶#3的顏色為淺棕色至棕色，并具有低于10%的L0D。
[0028] CAS#9074-07-l，來自于蜂蜜曲霉的IUB 3. 4. 21. 63蛋白酶，在后文中被稱為"蛋 白酶#4"，具有5-11的活性pH范圍，最適pH為8,活性溫度范圍為30-50°C，最適溫度為 45°C，并且活性測定為203, 000HUT/g。
[0029] CAS#9073-78-3,來自于米曲霉的IUB 3. 4. 24. 27蛋白酶，在后文中被稱為"蛋白 酶#5"，具有3-11的活性pH范圍，最適pH為7,活性溫度范圍為25-60°C，最適溫度為45°C， 并且活性測定為657, 000HUT/g。
[0030] CAS#9025-49-4,來自于黑曲霉的IUB 3. 4. 23. 18蛋白酶，在后文中被稱為"蛋白 酶#6"，具有1-4的活性pH范圍，最適pH為2. 5,活性溫度范圍為30-60°C，最適溫度為 55°C，并且活性測定為111，000HUT/g。
[0031] 本文中使用的活性測定參考《食品和化學(xué)品法典》（Food and Chemical Codex) (FCC)、《美國藥典騰食增補(bǔ)劑綱要》（United States Pharmacopeia Dietary Supplement Compendium) (USP)中發(fā)表的或從信譽(yù)良好的供應(yīng)商（即Bio-Cat, Troy, Virginia)獲得的 數(shù)據(jù)，以確定真菌或細(xì)菌蛋白酶的活性。選擇每克底物7500HUT單位的活性的標(biāo)準(zhǔn)值來比 較相對酶活性。蛋白酶#4、#5和#6在購買時活性用HUT單位表示。蛋白酶#1、#2和#3在 購買時分別用HU、PC和LAP單位表示。這些酶的活性單位與HUT單位的近似轉(zhuǎn)換，在數(shù)學(xué) 上使用產(chǎn)品重量當(dāng)量和摩爾當(dāng)量來估算。在測定法中使用的每克底物的酶的量從分析證明 書上報告的酶活性來計算。
[0032] -個HUT單位被定義為每分鐘產(chǎn)生與I. lOmcg/mL的酪氨酸具有相同吸收值的游 離的、釋放出的酪氨酸的酶量。對于蛋白酶#4來說，分析證明書報告的活性為203, 000HUT/ g，7500HUT/g =加入36. 9mg/g底物。對于蛋白酶#5來說，分析證明書報告的活性為 657, 000HUT/g，7500HUT/g =待加入11. 4mg/g底物。對于蛋白酶#6來說，分析證明書報告 的活性為 lll，〇〇〇HUT/g，7500HUT/g =待加入 67.6mg/g 底物。
[0033] -個血紅蛋白單位（HU)是在30分鐘內(nèi)釋放447mcg非蛋白氮的酶量=14. 9mcg 氮/分鐘。基于產(chǎn)物重量當(dāng)量，這是IHUT的約13. 54倍高的產(chǎn)物（1HU = 13. 54HUT，并且 553. 9HU = 7500HUT)。對于蛋白酶#1來說，分析證明書報告的活性為400, 000HU/g，553. 9HU =待加入 L 38mg(7500HUT)/g 底物。
[0034] 一個PC被定義為每分鐘產(chǎn)生相當(dāng)于1.5mcg/mL的酪氨酸的酶量?；诋a(chǎn)物重 量當(dāng)量，這是比1皿1'高約36.4%的產(chǎn)物（1?0= 1.364皿1'，并且5498.53?0 = 7500?!')。 對于蛋白酶#2來說，分析證明書報告的活性為2, 000, 000PC/g，5498. 53PC =待加入 2. 75mg(7500HUT)/g 底物。
[0035] 一個亮氨酸氨肽酶活性單位（LAP)被定義為每分鐘從亮氨酸對硝基苯胺釋放 Imcmol亮氨酸所需的酶量，并且根據(jù)1 :1的摩爾比從對硝基苯胺計算。Imcmole對硝基 苯胺=138. 12mcg，并且根據(jù)產(chǎn)物重量當(dāng)量，這是IHUT的125. 56倍高的產(chǎn)物（1LAP = 125. 56HUT，并且59. 7LAP = 7500HUT)。對于蛋白酶#3來說，分析證明書報告的活性為 500LAP/g，59. 7LAP =待加入 119. 4mg(7500HUT)/g 底物。
[0036] 第一實施方式的食品增補(bǔ)劑可以優(yōu)選地被設(shè)計成與蛋白質(zhì)一起攝食，以便在胃腸 系統(tǒng)中將攝食的膳食蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變成游離氨基酸，其隨后可以被身體用于肌肉蛋白質(zhì)的合 成。任何蛋白質(zhì)都適合與本發(fā)明一起使用，其中具有較高的蛋白質(zhì)重量含量的食品更加優(yōu) 選。優(yōu)選的蛋白質(zhì)包括源自于動物蛋白、植物蛋白分離物和植物蛋白濃縮物（例如大豆、 燕麥、小麥、水稻、豌豆、玉米和油菜籽蛋白分離物/濃縮物）和乳蛋白（例如酪蛋白和乳清 蛋白）的食品。在優(yōu)選實施方式中，蛋白質(zhì)是乳清蛋白、大豆蛋白或酪蛋白。在某些實施方 式中，每攝入約25g蛋白質(zhì)可以攝入約1至約500mg采取片劑、囊劑或獨立產(chǎn)品形式的蛋白 酶。在食品或蛋白質(zhì)增補(bǔ)劑的另一種實施方式中，每攝入Ig蛋白質(zhì)可以攝入約1至約50mg 蛋白酶。
[0037] 在本發(fā)明的實施方式中，食品增補(bǔ)劑還包含蛋白質(zhì)，其優(yōu)選地選自乳清蛋白、大豆 蛋白、酪蛋白及其組合。術(shù)語乳清蛋白、大豆蛋白和酪蛋白涵蓋可商購并且在食品增補(bǔ)劑 中使用的所有形式、類型和濃度的乳清蛋白、大豆蛋白和酪蛋白。乳清蛋白與"乳清蛋白蛋 白"、大豆蛋白與"大豆蛋白蛋白"、酪蛋白與"酪蛋白蛋白"在本文中可互換使用。本領(lǐng)域普 通技術(shù)人員能夠容易地理解如何確定向食品增補(bǔ)劑添加的蛋白質(zhì)的量。
[0038] 在某些優(yōu)選實施方式中，食品增補(bǔ)劑含有：（i)CAS#9001-92-7,來自于米曲霉的 1皿3.4.23.18蛋白酶；（^)〇六5#9001-92-7，來自于枯草芽孢桿菌的1皿3.4.21.7蛋白 酶；（iii)CAS#9001-61-0,來自于米曲霉的 IUB 3· 4· 11. 1 蛋白酶；（iv)CAS#9074-07-l， 來自于蜂蜜曲霉的IUB 3. 4. 21. 63蛋白酶；或（v)CAS#9073-78-3,來自于米曲霉的IUB 3. 4. 24. 27蛋白酶；以及乳清蛋白或大?蛋白。
[0039] 在本發(fā)明的實施方式中，食品增補(bǔ)劑還包含其他成分，其選自穩(wěn)定劑、基質(zhì)改良 劑、載體、防腐劑、甜味劑、增量劑、粘合劑、干燥劑、潤滑劑、填充劑、增溶劑、乳化劑、包括但 不限于延時釋放涂層的酶涂層，及其組合。適合用于本發(fā)明的增量劑的實例包括但不限于 金合歡膠、阿拉伯膠、黃原膠、瓜爾膠、果膠及其組合。適合用于本發(fā)明的甜味劑的實例包括 但不限于葡萄糖、果糖、甜菊糖苷、安賽蜜、赤蘚糖醇及其組合。適合用于本發(fā)明的涂層的實 例包括但不限于乙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、蟲膠及其組合。適合用于本發(fā)明的防腐劑 的實例包括但不限于抗微生物防腐劑，例如苯甲酸、苯甲醇、乙酸鈣及其組合。適合用于本 發(fā)明的粘合劑的實例包括但不限于交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、聚維酮、糊精及其組合。適合用于 本發(fā)明的干燥劑的實例包括但不限于二氧化硅、硅酸鈣及其組合。適合用于本發(fā)明的潤滑 劑的實例包括但不限于硬脂酸鎂、硬脂酸、二氧化硅及其組合。適合用于本發(fā)明的填充劑的 實例包括但不限于麥芽糖糊精、糊精、淀粉、鈣鹽及其組合。適合用于本發(fā)明的增溶劑的實 例包括但不限于環(huán)糊精、卵磷脂及其組合。適合用于本發(fā)明的乳化劑的實例包括但不限于 植物油、脂肪酸和甘油單酯、二酯和三酯例如中鏈甘油三酯，或它們的酯。任何所述其他成 分可以以食品增補(bǔ)劑的約〇. 5%至約95%的量存在。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將會容易地理解 如何確定向食品增補(bǔ)劑添加的其他成分的量。
[0040] 已知適合用于食品的任何商業(yè)上可接受的穩(wěn)定劑可用于本發(fā)明。適合的穩(wěn)定劑包 括但不限于瓊脂、果膠和卵磷脂。
[0041] 已知適合用于食品的在pH 1與pH 6之間具有緩沖能力的任何商業(yè)上可接受的 基質(zhì)改良劑，包括單質(zhì)子和多質(zhì)子弱有機(jī)酸和無機(jī)酸，均可用于本發(fā)明，所述酸的至少一個 PKa為5或更低并且pH在1和6之間。優(yōu)選的基質(zhì)改良劑包括類黃酮、黃酮醇類、異黃酮類、 兒茶素類、沒食子酸、單水合或二水合磷酸鹽、硫酸鹽、抗壞血酸鹽、氨基酸、檸檬酸鈉、檸檬 酸包括檸檬酸鹽、苯甲酸鹽、葡萄糖酸包括葡萄糖酸鹽、乙酸包括乙酸鹽、吡啶甲酸鹽、煙酸 鹽、酚類或多酚類化合物，以及它們的組合，所述酚類或多酚類化合物的至少一個PKa為5 或更低并且pH在pH 1和pH 6.0之間。其他適合的緩沖劑包括磷酸二鈣、磷酸鈉、磷酸鉀 等。在優(yōu)選實施方式中，基質(zhì)改良劑選自磷酸二氫鹽（例如磷酸二氫銨）、硝酸鹽（例如硝 酸鎂）、檸檬酸鹽（例如檸檬酸鈣）、多聚煙酸鹽（例如多聚煙酸鉻（ΠΙ))、吡啶甲酸鹽（例 如吡啶甲酸鉻）、弱有機(jī)酸、多酚類化合物，及其組合，所述多酚類化合物的至少一個Pka為 5或更低。更優(yōu)選地，基質(zhì)改良劑是10%檸檬酸鈣或0.3%多聚煙酸鉻（III)。檸檬酸和煙 酸兩者都是具有一定緩沖能力的弱有機(jī)酸，所述緩沖能力是緩沖溶液對PH變化的抗性的 定量度量。這些酸可以耐受分泌的胃酸水平的增加或降低，所述胃酸可以幫助將胃蛋白酶 原激活成胃蛋白酶。它還可以幫助維持緩沖的環(huán)境以保護(hù)胃蛋白酶和增補(bǔ)的酶的活性。
[0042] 在本發(fā)明的某些實施方式中，食品增補(bǔ)劑含有：（i)CAS#9001-92-7,來自于米曲 霉的1皿3.4.23.18蛋白酶和（")〇六5#9074-07-1，來自于蜂蜜曲霉的1皿3.4.21.63 蛋白酶的組合；乳清蛋白或酪蛋白；以及檸檬酸鈣或多聚煙酸鉻（III)。在另一種實施 方式中，食品增補(bǔ)劑含有：（i)CAS#9001-92-7,來自于米曲霉的IUB 3.4.23. 18蛋白酶 和（v)CAS#9073-78-3,來自于米曲霉的IUB 3.4. 24. 27蛋白酶的組合；乳清蛋白或酪蛋 白；以及檸檬酸鈣或多聚煙酸鉻（III)。在另一種實施方式中，食品增補(bǔ)劑含有：（iv) 〇八5#9074-07-1，來自于蜂蜜曲霉的1皿3.4.21.63蛋白酶和&)〇六5#9073-78-3，來自于米 曲霉的IUB 3. 4. 24. 27蛋白酶的組合；乳清蛋白、大?蛋白、酷蛋白或其組合；以及朽1樣酸 鈣或多聚煙酸鉻（III)。
[0043] 已知適合用于食品的任何商業(yè)上可接受的載體可用于本發(fā)明。優(yōu)選的載體包括麥 芽糖糊精、聚丙烯、淀粉、改性淀粉、樹膠、蛋白質(zhì)、氨基酸以及它們的混合物。取決于所使用 的載體類型，本發(fā)明的食品增補(bǔ)劑可以采取本領(lǐng)域中已知的任何形式，包括但不限于粉末、 囊劑、片劑或液體制劑。當(dāng)在本文中使用時，術(shù)語食品增補(bǔ)劑還涵蓋營養(yǎng)增補(bǔ)劑、膳食增補(bǔ) 劑、增重增補(bǔ)劑、減肥增補(bǔ)劑、恢復(fù)增補(bǔ)劑、運動營養(yǎng)增補(bǔ)劑、消化協(xié)助增補(bǔ)劑、胰酶替換增 補(bǔ)劑等。
[0044] 本發(fā)明的食品增補(bǔ)劑在被人類攝食后，提高蛋白質(zhì)在胃腸系統(tǒng)中的消化和吸收 速率。在胃蛋白酶存在下尤為如此。當(dāng)在本文中使用時，蛋白水解活性是指以百萬單 位（M)報告的酶-蛋白質(zhì)消化圖的總積分面積，所述圖是由蛋白質(zhì)的消化（蛋白質(zhì)分解 成其組分氨基酸和肽）產(chǎn)生的肽和氨基酸隨時間的增加的定量顯示。蛋白水解活性與 在胃腸系統(tǒng)中被消化并最終以肽和氨基酸形式被吸收的蛋白質(zhì)的量直接相關(guān)。蛋白水 解活性越高，胃腸系統(tǒng)中的蛋白質(zhì)消化和吸收速率越高。蛋白質(zhì)的消化是必需的，因為 未消化的蛋白質(zhì)太大而不能跨過腸細(xì)胞和組織。提高消化速率增加了在到達(dá)盲腸并在 大腸中被發(fā)酵之前，可用于從胃和小腸吸收的氨基酸和肽的量。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)吸收速率提高 時，獲得更高的血液氨基酸水平，用于肌肉蛋白質(zhì)合成以增加肌肉量。Boirie，Y.等，"緩 慢和快速的膳食蛋白質(zhì)差異調(diào)節(jié)餐后蛋白質(zhì)堆積"（Slow and fast dietary proteins differently modulate postprandial protein accretion), Proc.Natl. Acad. Sci. USA, Vol. 94, pp. 14930-14935 (1997)。蛋白質(zhì)吸收和蛋白質(zhì)消化在本文中可互換使用。
[0045] 除非另有指明，否則本文中所公開的蛋白水解活性被理解為是在含有和不含胃蛋 白酶的胃消化條件下測定。通過將每種蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)-酶干燥摻混物的一部分（IOOmg) 與按照USP技術(shù)指標(biāo)制造的不含胃蛋白酶的ImL模擬胃液（pH I. 2) (SGF-NP)混合，以及將 每種蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)-酶干燥摻混物的一部分與按照USP技術(shù)指標(biāo)制造的每mL含有3. 2mg 純化的胃蛋白酶（2, 566U/mL)、pH為約1. 2的模擬胃液（SGF-USP)混合，近似得到胃消化條 件（USP 30,第810頁）。所有蛋白質(zhì)-SGF混合物具有約3. 5的pH。將所有混合物在37°C 水浴中溫育，直至如圖1和3-7中所示在0、30、60、90和120分鐘時對其進(jìn)行測定。正如上 面提到的，由本發(fā)明的食品增補(bǔ)劑引起的蛋白水解活性的提高，可以針對由人類獨立消費 的蛋白質(zhì)、針對食品增補(bǔ)劑內(nèi)含有的蛋白質(zhì)或兩者。
[0046] 可以預(yù)計，由于蛋白酶#1-#5的最適pH和溫度范圍非常相近，因此在胃蛋白酶存 在下，使用相同的蛋白質(zhì)，所述蛋白酶的蛋白水解活性將近似。蛋白酶#6具有非常低的最 適pH和與蛋白酶# 1 _#5相似的最適溫度范圍。蛋白酶#6在胃液中的蛋白水解活性速率 預(yù)計將高于蛋白酶這是因為酶活性速率是pH和溫度的函數(shù)，并且它具有低的最適 pH。然而，在胃蛋白酶存在下，蛋白酶的蛋白水解活性變化。在優(yōu)選實施方式中，每種蛋白酶 #1-#5在胃蛋白酶存在下的蛋白水解活性高于蛋白酶在不存在胃蛋白酶的情況下的蛋白水 解活性。據(jù)信，胃蛋白酶和蛋白酶一起起作用，以提高攝入后在胃腸系統(tǒng)中的總體蛋白水解 活性。此外，在優(yōu)選實施方式中，蛋白酶# 1-#5在胃蛋白酶存在下的蛋白水解活性高于在不 存在蛋白酶的情況下胃蛋白酶的蛋白水解活性。在優(yōu)選實施方式中，使用乳清蛋白或大豆 蛋白時，蛋白酶#1-#5在胃蛋白酶存在下的蛋白水解活性，大于蛋白酶在不存在胃蛋白酶 的情況下的蛋白水解活性加上胃蛋白酶在不存在蛋白酶的情況下的蛋白水解活性的累加 ("超過累加效應(yīng)"）。
[0047] 優(yōu)選地，蛋白酶#1在胃蛋白酶存在下的蛋白水解活性與蛋白酶在不存在胃蛋白 酶的情況下的蛋白水解活性加上胃蛋白酶在不存在蛋白酶的情況下的蛋白水解活性之和 相比，在使用乳清蛋白時增加約1%至約10%、更優(yōu)選地約5%，并且在使用大豆蛋白時增 加約30 %至約39%，更優(yōu)選地約34%。
[0048] 優(yōu)選地，蛋白酶#2在胃蛋白酶存在下的蛋白水解活性與蛋白酶在不存在胃蛋白 酶的情況下的蛋白水解活性加上胃蛋白酶在不存在蛋白酶的情況下的蛋白水解活性之和 相比，在使用乳清蛋白時增加約75%至約85%、更優(yōu)選地約80%，并且在使用大豆蛋白時 增加約130 %至約140%，更優(yōu)選地約135%。
[0049] 優(yōu)選地，蛋白酶#3在胃蛋白酶存在下的蛋白水解活性與蛋白酶在不存在胃蛋白 酶的情況下的蛋白水解活性加上胃蛋白酶在不存在蛋白酶的情況下的蛋白水解活性之和 相比，在使用乳清蛋白時增加約78%至約88%、更優(yōu)選地約83%，并且在使用大豆蛋白時 增加約45 %至約55%，更優(yōu)選地約50%。
[0050] 優(yōu)選地，蛋白酶#4在胃蛋白酶存在下的蛋白水解活性與蛋白酶在不存在胃蛋白 酶的情況下的蛋白水解活性加上胃蛋白酶在不存在蛋白酶的情況下的蛋白水解活性之和 相比，在使用乳清蛋白時增加約38%至約47%、更優(yōu)選地約42%，并且在使用大豆蛋白時 增加約8 %至約17%，更優(yōu)選地約12%。
[0051] 優(yōu)選地，蛋白酶#5在胃蛋白酶存在下的蛋白水解活性與蛋白酶在不存在胃蛋白 酶的情況下的蛋白水解活性加上胃蛋白酶在不存在蛋白酶的情況下的蛋白水解活性之和 相比，在使用乳清蛋白時增加約15%至約25%、更優(yōu)選地約20%，并且在使用大豆蛋白時 增加約11 %至約21%，更優(yōu)選地約16%。
[0052] 表1 :在蛋白酶的優(yōu)選實施方式中，在胃蛋白酶存在下的蛋白水解活性與蛋白酶 在不存在胃蛋白酶的情況下的蛋白水解活性加上胃蛋白酶在不存在蛋白酶的情況下的蛋 白水解活性的累加相比增加的百分?jǐn)?shù)，在下面示出。
[0053]

【權(quán)利要求】
1. 一種食品增補(bǔ)劑，其包含選自下列的至少一種蛋白酶： (i)CAS#9001-92-7,來自于曲霉屬的IUB 3. 4. 23. 18蛋白酶； (11)〔45#9001-92-7，來自于芽抱桿菌屬的1冊3.4.21.7蛋白酶； (iii) CAS#9001-61-0,來自于曲霉屬的 IUB 3. 4. 11. 1 蛋白酶； (iv) CAS#9074-07-l，來自于曲霉屬的 IUB 3. 4. 21. 63 蛋白酶； (v) CAS#9073-78-3,來自于曲霉屬的IUB 3. 4. 24. 27蛋白酶； (vi) CAS#9025-49-4,來自于曲霉屬的IUB 3. 4. 23. 18蛋白酶；W及 (vii) 它們的組合。
2. 權(quán)利要求1的食品增補(bǔ)劑，其中 CAS#9001-92-7,來自于曲霉屬的IUB 3. 4. 23. 18蛋白酶來自于米曲霉（oiTzae)種； CAS#9001-92-7,來自于芽抱桿菌屬的IUB 3.4. 21.7蛋白酶來自于枯草芽抱桿菌 kubtilis)種； CAS#9001-61-0,來自于曲霉屬的IUB 3. 4. 11. 1蛋白酶來自于米曲霉種； 〔八5#9074-07-1，來自于曲霉屬的1冊3.4.21.63蛋白酶來自于蜂蜜曲霉（1116116113) 種； CAS#9073-78-3,來自于曲霉屬的IUB 3.4. 24. 27蛋白酶來自于米曲霉種；并且 CAS#9025-49-4,來自于曲霉屬的IUB 3. 4. 23. 18蛋白酶來自于黑曲霉種（niger)。
3. 權(quán)利要求1的食品增補(bǔ)劑，其中所述至少一種蛋白酶是下述組合；（i) CAS#9001-92-7,來自于曲霉屬的IUB 3. 4. 23. 18蛋白酶，和（iv)CAS#9074-07-l，來自于曲 霉屬的IUB 3.4. 21. 63蛋白酶。
4. 權(quán)利要求1的食品增補(bǔ)劑，其中所述至少一種蛋白酶是下述組合；（i) CAS#9001-92-7,來自于曲霉屬的IUB 3. 4. 23. 18蛋白酶，和（v)CAS#9073-78-3,來自于曲 霉屬的IUB 3. 4. 24. 27蛋白酶。
5. 權(quán)利要求1的食品增補(bǔ)劑，其中所述至少一種蛋白酶是下述組合；（i V) 〔八5#9074-07-1，來自于曲霉屬的1冊3.4.21.63蛋白酶，和（￥)〔45#9073-78-3，來自于曲 霉屬的IUB 3.4. 24. 27蛋白酶。
6. 權(quán)利要求1的食品增補(bǔ)劑，其還包含蛋白質(zhì)。
7. 權(quán)利要求6的食品增補(bǔ)劑，其中所述蛋白質(zhì)選自乳清蛋白、大豆蛋白、酪蛋白及其組 厶 口 〇
8. 權(quán)利要求1的食品增補(bǔ)劑，其還包含選自穩(wěn)定劑、基質(zhì)改良劑、載體、防腐劑、增量 劑、干燥劑、乳化劑、酶涂層及其組合的其他成分。
9. 權(quán)利要求8的食品增補(bǔ)劑，其中所述基質(zhì)改良劑選自磯酸二氨鹽、硝酸鹽、巧樣酸 鹽、多聚煙酸鹽、化晚甲酸鹽、弱有機(jī)酸、多酪類化合物及其組合，所述多酪類化合物的至少 一個pka為5或更低。
10. 權(quán)利要求6的食品增補(bǔ)劑，其中所述至少一種蛋白酶是： (i)CAS#9001-92-7,來自于米曲霉（Aspergillus o;ryzae)的 IUB3.4.23. 18 蛋白酶； (11)〔45#9001-92-7，來自于枯草芽抱桿菌炬3(：111118 8油^113)的1冊3.4.21.7蛋 白酶； (iii)CAS#9001-61-0,來自于米曲霉的 IUB 3. 4. 11. 1 蛋白酶； (;[￥)〔45#9074-〇7-1，來自于蜂蜜曲霉（43口6巧;[11113 1116116113)的1冊3.4.21.63蛋白 酶；或 (v)CAS#9073-78-3,來自于米曲霉的IUB 3. 4. 24. 27蛋白酶；并且 其中所述蛋白質(zhì)是乳清蛋白或大豆蛋白。
11. 權(quán)利要求3的食品增補(bǔ)劑，其還包含選自乳清蛋白、大豆蛋白、酪蛋白及其組合的 蛋白質(zhì)， 其中CAS#9001-92-7,來自于曲霉屬的IUB 3.4. 23. 18蛋白酶來自于米曲霉種，并且 〔八5#9074-07-1，來自于曲霉屬的1冊3.4.21.63蛋白酶來自于蜂蜜曲霉種。
12. 權(quán)利要求11的食品增補(bǔ)劑，其還包含選自巧樣酸巧和多聚煙酸銘（III)的基質(zhì)改 良劑，并且 其中所述蛋白質(zhì)是乳清蛋白或酪蛋白。
13. 權(quán)利要求4的食品增補(bǔ)劑，其還包含選自乳清蛋白、大豆蛋白、酪蛋白及其組合的 蛋白質(zhì)， 其中CAS#9001-92-7,來自于曲霉屬的IUB 3. 4. 23. 18蛋白酶來自于米曲霉種，并且 CAS#9073-78-3,來自于曲霉屬的IUB 3. 4. 24. 27蛋白酶來自于米曲霉種。
14. 權(quán)利要求13的食品增補(bǔ)劑，其中所述蛋白質(zhì)是乳清蛋白。
15. 權(quán)利要求13的食品增補(bǔ)劑，其還包含選自巧樣酸巧和多聚煙酸銘（III)的基質(zhì)改 良劑，并且 其中所述蛋白質(zhì)是乳清蛋白或酪蛋白。
16. 權(quán)利要求5的食品增補(bǔ)劑，其還包含選自乳清蛋白、大豆蛋白、酪蛋白及其組合的 蛋白， 其中CAS#9074-07-l，來自于曲霉屬的IUB 3. 4. 21.63蛋白酶來自于蜂蜜曲霉種，并且 CAS#9073-78-3,來自于曲霉屬的IUB 3. 4. 24. 27蛋白酶來自于米曲霉種。
17. 權(quán)利要求16的食品增補(bǔ)劑，其中所述蛋白質(zhì)是乳清蛋白。
18. 權(quán)利要求16的食品增補(bǔ)劑，其還包含選自巧樣酸巧和多聚煙酸銘（III)的基質(zhì)改 良劑。
19. 一種提高蛋白質(zhì)在人類的胃腸系統(tǒng)中的吸收的方法，所述方法包括下列步驟： 攝食權(quán)利要求1的食品增補(bǔ)劑。
20. 權(quán)利要求19的方法，其中蛋白質(zhì)在胃腸系統(tǒng)中的吸收在胃蛋白酶存在下提高。
21. 權(quán)利要求19的方法，其中被吸收的蛋白質(zhì)選自乳清蛋白、大豆蛋白、酪蛋白及其組 合。
22. 權(quán)利要求19的方法，其中所述食品增補(bǔ)劑中的所述至少一種蛋白酶是下列組合： (i)CAS#9001-92-7,來自于米曲霉的 IUB 3. 4. 23. 18 蛋白酶，和（iv)CAS#9074-07-l，來自 于蜂蜜曲霉的IUB 3. 4. 21. 63蛋白酶。
23. 權(quán)利要求19的方法，其中所述食品增補(bǔ)劑中的所述至少一種蛋白酶是下列組合： (i)CAS#9001-92-7,來自于米曲霉的 IUB 3. 4. 23. 18 蛋白酶，和（v)CAS#9073-78-3,來自于 米曲霉的IUB 3. 4. 24. 27蛋白酶。
24. 權(quán)利要求19的方法，其中所述食品增補(bǔ)劑中的所述至少一種蛋白酶是下列組合： (iv)CAS#9074-07-l，來自于蜂蜜曲霉的 IUB3. 4. 21. 63 蛋白酶，和（v)CAS#9073-78-3,來自 于米曲霉的lUB 3. 4. 24. 27蛋白酶。
25. 權(quán)利要求19的方法，其還包括攝食蛋白質(zhì)的步驟。
26. 權(quán)利要求25的方法，其中在攝食所述食品增補(bǔ)劑之前、期間或之后攝食蛋白質(zhì)。
27. 權(quán)利要求25的方法，其中所述食品增補(bǔ)劑還包含蛋白質(zhì)。
【文檔編號】A61K38/48GK104470372SQ201280069900
【公開日】2015年3月25日 申請日期:2012年12月11日 優(yōu)先權(quán)日:2011年12月19日
【發(fā)明者】馬克·L·安德森 申請人:特阿科工業(yè)公司