注射針和裝置對(duì)序列表的引用本申請(qǐng)與電子格式的序列表一起遞交。所述序列表以名稱為SequenceListingTRIPEP125.TXT的文件（創(chuàng)建于2012年6月6日，146KB大小）提供。電子格式序列表的信息的全部?jī)?nèi)容以引用的方式被結(jié)合到本說(shuō)明書中。技術(shù)領(lǐng)域在本說(shuō)明書中公開的實(shí)施方案的方面總體上涉及用于遞送并由受試者（例如人）的組織攝取治療性物質(zhì)（例如，化學(xué)制品、化合物、蛋白和核酸）的裝置和方法。優(yōu)選實(shí)施方案涉及用于向多種細(xì)胞（優(yōu)選為動(dòng)物細(xì)胞，例如人類細(xì)胞）遞送遺傳物質(zhì)或核酸（包括但不限于DNA、RNA和修飾的核酸）的裝置和方法。

背景技術(shù)：
向組織遞送治療性物質(zhì)（例如遺傳物質(zhì)）有各種各樣有用的應(yīng)用，包括接種、缺陷基因的替換、DNA免疫、免疫原的導(dǎo)入、反義療法，以及miRNA、RNAi、適配體或siRNA療法。例如，核酸，比如說(shuō)DNA，舉例來(lái)說(shuō)，可被注射入組織中，在該處核酸可由周圍的細(xì)胞攝取（即使低效）。以這種方式導(dǎo)入的DNA會(huì)產(chǎn)生該DNA編碼的蛋白。向組織成功地遞送核酸以及所述核酸成功地被細(xì)胞攝取是比較困難的，尤其是在需要產(chǎn)生大量的蛋白表達(dá)的時(shí)候（例如，對(duì)于基于DNA的接種的需要）。傳統(tǒng)的向組織注射遺傳物質(zhì)通常會(huì)導(dǎo)致較差的細(xì)胞攝取和低水平的蛋白表達(dá)（如果還有的話）。將來(lái)基因治療會(huì)是治療人類和動(dòng)物疾病的一種重要手段。近年來(lái)已經(jīng)取得了一些臨床上的進(jìn)展，其中一個(gè)例子是通過(guò)基因治療使病人部分恢復(fù)了視覺(jué)（Bainbridge，NewEnglJMed.（新英格蘭醫(yī)學(xué)雜志），2008，358(21):2231）?；蛑委熢谂R床應(yīng)用的一個(gè)主要領(lǐng)域是用于傳染病的基因疫苗接種。然而，使基因治療成為現(xiàn)實(shí)的一個(gè)主要限制是難以可再生地遞送遺傳物質(zhì)?；蚩赏ㄟ^(guò)病毒載體或以質(zhì)粒DNA的形式進(jìn)行遞送。病毒載體的限制是它們會(huì)引起抗載體的應(yīng)答，這限制了它們重復(fù)使用，并且它們的生產(chǎn)和儲(chǔ)存都很昂貴。DNA的優(yōu)勢(shì)是其不會(huì)引起抗載體的應(yīng)答，并且生產(chǎn)和儲(chǔ)存相對(duì)比較便宜。然而，DNA的一個(gè)重大問(wèn)題是難以被體內(nèi)的人類細(xì)胞所攝取。因此，新型實(shí)用的且可耐受的向體內(nèi)的人類細(xì)胞遞送DNA的方法能夠加速基因治療的整個(gè)領(lǐng)域。血管內(nèi)的施用方法也已經(jīng)被開發(fā)用于向動(dòng)物遞送治療試劑（參見例如，美國(guó)專利第6,379,966、6,897,068、7,015,040、7,214,369、7,473,419和7,589,059號(hào)，所有這些專利的全部?jī)?nèi)容以引用的方式被明確結(jié)合到本說(shuō)明書中）。血管內(nèi)的施用很難在實(shí)際操作中執(zhí)行；然而，需要熟練的臨床醫(yī)生，并且如果執(zhí)行不正確的話，該程序可導(dǎo)致血管穿孔、血腫，以及出現(xiàn)內(nèi)部血塊，這會(huì)導(dǎo)致栓塞。此外，血管內(nèi)的施用方法會(huì)導(dǎo)致被導(dǎo)入的治療試劑（例如，核酸和蛋白）的廣泛分布，這在嘗試促進(jìn)身體對(duì)所遞送的試劑建立免疫反應(yīng)時(shí)是不希望的。因此，對(duì)于能夠促進(jìn)治療性分子（例如核酸和蛋白）的遞送和攝取的裝置和方法仍然存在需要。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本說(shuō)明書公開了用于向動(dòng)物（例如，人）組織遞送預(yù)防性和/或治療性試劑（例如化學(xué)制品、化合物、化學(xué)治療劑、蛋白、特異性交換劑、核酸（例如DNA、RNA、其它天然核酸、修飾的核酸）、或DNA或核酸適配體）的裝置和方法，憑借所述裝置和方法，所述試劑（“遞送試劑”）可被位于注射位點(diǎn)周圍組織的細(xì)胞所攝取，所述試劑表達(dá)，以產(chǎn)生治療性或美容性的益處。在本說(shuō)明書中使用時(shí)，術(shù)語(yǔ)“遞送試劑”可以指代在向組織或受試者注射或遞送之前或遞送之后的預(yù)防性和/或治療性試劑，包括上文中所列舉的任何物質(zhì)。在一些實(shí)施方案中，本文中描述的一種或多種針和/或裝置被用于施用細(xì)胞群（例如，再生細(xì)胞、干細(xì)胞、祖細(xì)胞或它們的混合物），以產(chǎn)生治療性和/或美容性的益處。在這些實(shí)施方案中，所述細(xì)胞被導(dǎo)入到有需要的受試者的組織（例如，乳房的脂肪組織、心、腎、骨、皮膚、脂肪組織、椎間盤）中，以促進(jìn)產(chǎn)生治療性或美容性的益處（例如，促進(jìn)或完成乳房再造術(shù)，改善缺血性區(qū)域，修復(fù)退化的椎間盤，促進(jìn)骨修復(fù)，促進(jìn)傷口愈合，或改善皮膚上的皺紋或痘痕）。本說(shuō)明書所公開的多個(gè)實(shí)施方案包括能夠用于活體動(dòng)物（包括人）的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置。一些細(xì)胞內(nèi)遞送裝置的操作方式是在局部（例如，在由裝置的針陣列限定的區(qū)域內(nèi)）向動(dòng)物組織過(guò)載遞送試劑并向該區(qū)域或注射區(qū)域提供電場(chǎng)以促進(jìn)更大量的遞送和/或攝取遞送試劑。一些實(shí)施方案，例如包括：細(xì)胞內(nèi)遞送儀，所述細(xì)胞內(nèi)遞送儀包括控制注射參數(shù)的遞送單元，與所述遞送單元相連、包括至少一個(gè)電連接件的集合器（hub）；與所述集合器相連的多根針，其中所述多根針的每一根針包括：封閉端；針梗（needlebarrel）；設(shè)置在所述針梗上的多個(gè)孔，其中位于每個(gè)針梗上的孔相向于位于至少一個(gè)其它針梗上的孔，以便形成使遞送試劑以相向的遞送方向遞送或使遞送試劑以交叉噴射模式的遞送；電極；以及被設(shè)置為用于在所述電極處生成電場(chǎng)的電源供應(yīng)裝置，其中所述電源供應(yīng)裝置通過(guò)至少一個(gè)電連接件與電極相連。在一些實(shí)施方案中，細(xì)胞內(nèi)遞送儀的多根針中的至少一根針為針電極，所述針電極與電源供應(yīng)裝置電連接并被設(shè)置為形成電場(chǎng)。在一些實(shí)施方案中，細(xì)胞內(nèi)遞送儀包括多個(gè)針電極，所述多個(gè)針電極與電源供應(yīng)裝置電連接并被設(shè)置為形成電場(chǎng)。在一些實(shí)施方案中，細(xì)胞內(nèi)遞送儀包括排列成Y形樣式的四根針，含一根中心針及三根設(shè)置在中心針周圍的外部針，其中中心針為針電極，被設(shè)置為應(yīng)用第一極性電壓，三根外部針為針電極，被設(shè)置為應(yīng)用第二極性電壓。在細(xì)胞內(nèi)遞送儀的一些實(shí)施方案中，所述中心針包括沿著針梗的孔，所述孔被設(shè)置為引導(dǎo)遞送試劑向位于三根外部針的每根針上的孔處遞送，三根外部針的每一根針均包括沿著針梗的孔，所述孔被設(shè)置為引導(dǎo)遞送試劑向位于中心針上的孔處遞送，并且其中所述外部針不具有被設(shè)置為將遞送試劑遠(yuǎn)離中心針遞送的孔。在一些實(shí)施方案中，細(xì)胞內(nèi)遞送儀包括一陣列的針，所述一陣列的針包括一根中心針和設(shè)置在中心針周圍的多根外部針，其中所述中心針為設(shè)置為應(yīng)用第一極性電壓的針電極，所述外部針為設(shè)置為應(yīng)用第二極性電壓的針電極，其中所述中心針包括沿著針梗的孔，所述孔被設(shè)置為引導(dǎo)遞送試劑向外部針處遞送，所述外部針包括沿著針梗的孔，所述孔被設(shè)置為引導(dǎo)遞送試劑向中心針和/或鄰近的針處遞送，并且其中所述外部針不具有能夠?qū)⑦f送試劑向遠(yuǎn)離由針的陣列內(nèi)的區(qū)域限定的作用區(qū)遞送的孔。在一些實(shí)施方案中，細(xì)胞內(nèi)遞送儀進(jìn)一步包括排列成六角形樣式的七根針，其中作為針電極的一根針位于六角形樣式的中心。本文中公開的一些實(shí)施方案描述了如上所述的細(xì)胞內(nèi)遞送儀，包括：與集合器流體連接的注射器；用于接收注射器的通道；用于可操作地將注射器固定在所述通道內(nèi)的套環(huán)；手柄，用于將注射器及集合器封裝在通道內(nèi)，使得針梗的封閉端從所述通道中伸出并可用來(lái)與受試者接合；加料元件，所述加料元件被設(shè)置為由手柄的操作而進(jìn)行加料，所述加料元件與觸發(fā)器和注射器連結(jié)，使得觸發(fā)器的運(yùn)行釋放了加料元件，所述加料元件作用于注射器，從而將預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)從注射器中置換出來(lái)；以及電端口，所述電端口被設(shè)置為與皮下注射針裝置的集合器上的電連接件配合，從而建立起在電源供應(yīng)裝置和電極和/或針電極之間的電連接。在一些實(shí)施方案中，所述集合器為袋形集合器，包括對(duì)于每根針或針電極的遞送試劑的單獨(dú)儲(chǔ)存器。在一些實(shí)施方案中，所述集合器包括對(duì)于每根針或針電極的遞送試劑的單個(gè)儲(chǔ)存器。在一些實(shí)施方案中，所述多根針的至少一根針至少部分地由不導(dǎo)電材料層壓。在一些實(shí)施方案中，所述細(xì)胞內(nèi)遞送儀進(jìn)一步包括被設(shè)置為控制電場(chǎng)生成的電源供應(yīng)裝置控制器。在一些實(shí)施方案中，控制電場(chǎng)的生成包括控制一個(gè)或多個(gè)脈沖電壓、針電極的極性、脈沖數(shù)量、脈沖類型或脈沖持續(xù)時(shí)間。在一些實(shí)施方案中，所述加料元件為被設(shè)置成由手柄的運(yùn)行而壓縮且被設(shè)置成在觸發(fā)器運(yùn)行時(shí)減壓的彈簧。在一些實(shí)施方案中，應(yīng)用到所述電極和/或針電極的電場(chǎng)為整流電場(chǎng)。本文所公開的其它實(shí)施方案包括將遞送試劑導(dǎo)入受試者的組織中的方法，包括：提供如本文所描述的細(xì)胞內(nèi)遞送儀；提供電壓源；將所述電穿孔儀的多根針和多個(gè)電極或多個(gè)針電極插入受試者的組織中；將遞送試劑通過(guò)多根針或多個(gè)針電極的腔道置換出來(lái)并導(dǎo)入受試者的組織中；以及向受試者的組織施加電場(chǎng)。在一些實(shí)施方案中，在向組織施加電場(chǎng)之前進(jìn)行遞送試劑的置換。在一些實(shí)施方案中，在向組織施加電場(chǎng)之后進(jìn)行遞送試劑的置換。在一些實(shí)施方案中，遞送試劑的置換以兩階段法進(jìn)行，其中第一階段包括將遞送試劑置換進(jìn)入作用區(qū)的組織中，第二階段包括將一個(gè)或多個(gè)電極或針電極通電以使作用區(qū)內(nèi)的細(xì)胞電穿孔。在一些實(shí)施方案中，注射參數(shù)為注射速度或注射壓力。在一些實(shí)施方案中，本文所描述的電穿孔儀用于DNA接種。在一些實(shí)施方案中，所述DNA接種包括導(dǎo)入編碼肝炎抗原的多核苷酸。在一些實(shí)施方案中，所述肝炎抗原為丙型肝炎病毒（HCV）抗原。在一些實(shí)施方案中，所述HCV抗原包括NS3。附圖說(shuō)明圖1A示出了含兩個(gè)針梗的細(xì)胞內(nèi)遞送儀的一個(gè)實(shí)施方案的側(cè)視圖，每個(gè)針梗具有5個(gè)孔，用于向針梗之間的區(qū)域遞送預(yù)防性和/或治療性試劑。圖1B示出了含四個(gè)針梗的皮下注射針集合器的一個(gè)實(shí)施方案的分解立體圖，所述針梗用于向所述針梗之間的區(qū)域遞送預(yù)防性和/或治療性試劑。圖2A示出了含兩個(gè)針梗的細(xì)胞內(nèi)遞送儀的一個(gè)實(shí)施方案的側(cè)視圖，每個(gè)針梗具有三個(gè)孔，用于向針梗之間的區(qū)域遞送預(yù)防性和/或治療性試劑。圖2B示出了細(xì)胞內(nèi)遞送儀的一個(gè)實(shí)施方案，在每根針上以相同的間距設(shè)有五個(gè)孔。圖2C示出了含三根針的針集合器的一個(gè)實(shí)施方案，并描述了皮下注射針集合器的尺寸。圖2D示出了含四根交錯(cuò)設(shè)置的針的針集合器的一個(gè)實(shí)施方案。圖3示出了含兩個(gè)針梗的細(xì)胞內(nèi)遞送儀的一個(gè)實(shí)施方案的側(cè)視圖，每個(gè)針梗具有十個(gè)孔，用于向針梗之間的區(qū)域遞送治療性試劑。圖4示出了細(xì)胞內(nèi)遞送儀的一個(gè)實(shí)施方案的側(cè)視圖，所述細(xì)胞內(nèi)遞送儀用于向肌細(xì)胞中遞送包括DNA的預(yù)防性和/或治療性試劑。圖5A是含三根針的細(xì)胞內(nèi)遞送儀的俯視圖。圖5B示出了含三個(gè)針梗的細(xì)胞內(nèi)遞送儀的一個(gè)實(shí)施方案的側(cè)視圖。圖5C示出了通過(guò)交叉噴射方式向受試者的組織遞送治療性試劑的圖5B的細(xì)胞內(nèi)遞送儀的立體圖。圖6A示出了含兩個(gè)針梗的細(xì)胞內(nèi)遞送儀的一個(gè)實(shí)施方案的側(cè)視圖，其中每個(gè)針筒以相對(duì)于所述裝置的縱向軸呈一定角度進(jìn)行設(shè)置。圖6B示出了含兩個(gè)針梗和一個(gè)連接器配件的細(xì)胞內(nèi)遞送儀的一個(gè)實(shí)施方案的立體圖。圖6C示出了含一個(gè)連接器配件的細(xì)胞內(nèi)遞送儀的俯視圖。圖7A示出了含六個(gè)針梗的細(xì)胞內(nèi)遞送儀的一個(gè)實(shí)施方案的立體圖，每個(gè)針梗具有多個(gè)孔，用于向受試者的組織遞送預(yù)防性和/或治療性試劑。圖7B是圖7A的細(xì)胞內(nèi)遞送儀的俯視圖。圖8A示出了含四個(gè)針梗的細(xì)胞內(nèi)遞送儀的一個(gè)實(shí)施方案的側(cè)視圖。圖8B示出了具有“Y”形樣式的圖8A的細(xì)胞內(nèi)遞送儀的一個(gè)實(shí)施方案的俯視圖。圖8C示出了具有“O”形樣式的圖8A的細(xì)胞內(nèi)遞送儀的一個(gè)實(shí)施方案的俯視圖。圖9示出了含四個(gè)針梗的細(xì)胞內(nèi)遞送儀的一個(gè)實(shí)施方案的俯視圖。圖10A示出了含具有星形樣式的七個(gè)針梗的細(xì)胞內(nèi)遞送儀的一個(gè)實(shí)施方案的俯視圖。圖10B示出了含七個(gè)針梗的針集合器的立體圖。圖11示出了含十個(gè)針梗的細(xì)胞內(nèi)遞送儀的一個(gè)實(shí)施方案的俯視圖。圖12示出了含三個(gè)針梗的細(xì)胞內(nèi)遞送儀的一個(gè)實(shí)施方案的俯視圖。圖13示出了含三個(gè)針梗的細(xì)胞內(nèi)遞送儀的一個(gè)實(shí)施方案的俯視圖。圖14示出了含四個(gè)針梗的細(xì)胞內(nèi)遞送儀的一個(gè)實(shí)施方案的俯視圖。圖15示出了含四個(gè)針梗的細(xì)胞內(nèi)遞送儀的一個(gè)實(shí)施方案的俯視圖。圖16示出了包括環(huán)形針梗的細(xì)胞內(nèi)遞送儀的一個(gè)實(shí)施方案的俯視圖。圖17示出了包括環(huán)形針梗的細(xì)胞內(nèi)遞送儀的一個(gè)實(shí)施方案的俯視圖。圖18示出了包括環(huán)形針梗的細(xì)胞內(nèi)遞送儀的一個(gè)實(shí)施方案的俯視圖。圖19示出了含單個(gè)腔道的一個(gè)針梗的一個(gè)實(shí)施方案的剖視圖。圖20示出了含兩個(gè)腔道的一個(gè)針梗的一個(gè)實(shí)施方案的剖視圖。圖21A-D為與本文中描述的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置配套使用的彈簧驅(qū)動(dòng)裝置的一個(gè)實(shí)施方案的立體圖和側(cè)視圖。圖22A-B為與本文中描述的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置配套使用的觸發(fā)器裝置的一個(gè)實(shí)施方案的立體圖和側(cè)視圖。圖23A-C示出了含一個(gè)頂端集合器部分和一個(gè)底部集合器部分的針集合器的一個(gè)實(shí)施方案。圖24示出了與本文所描述的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置配套使用的可調(diào)節(jié)的遞送裝置的一個(gè)實(shí)施方案的立體圖。圖25示出了與細(xì)胞內(nèi)遞送裝置配套使用的可調(diào)節(jié)遞送單元的一個(gè)實(shí)施方案的截面圖。圖26示出了含切口形孔和封閉端的細(xì)胞內(nèi)遞送儀的一個(gè)實(shí)施方案。圖27A-C示出了含微集合器及封閉端針的細(xì)胞內(nèi)遞送儀的實(shí)施方案。圖28A-B示出了與含連接至注射器的微集合器的細(xì)胞內(nèi)遞送儀一起使用的可調(diào)節(jié)的遞送裝置的立體圖。圖29A-C示出了用于電穿孔的細(xì)胞內(nèi)遞送儀的一個(gè)或多根針的電連接。圖30A-F示出了微集合器注射裝置的針和電極設(shè)置的實(shí)施方案，顯示了針或電極的極性、電場(chǎng)以及噴射流的方向。圖31A示出了含非袋狀集合器的細(xì)胞內(nèi)遞送儀的遠(yuǎn)端的實(shí)施方案。圖31B示出了另一個(gè)含袋狀集合器的細(xì)胞內(nèi)遞送儀的遠(yuǎn)端的實(shí)施方案。圖32A-B示出了含層壓針（部分電絕緣）的細(xì)胞內(nèi)遞送儀的實(shí)施方案。圖33A-D示出了含雙注射器的細(xì)胞內(nèi)遞送儀的實(shí)施方案以及含雙注射器的皮下注射針裝置的遞送和電場(chǎng)模式。圖34A-C示出了含隔離閥的細(xì)胞內(nèi)遞送儀的實(shí)施方案以及含隔離閥的皮下注射針裝置的針和電極結(jié)構(gòu)。圖35A示出了處于兩階段遞送法的第一階段的細(xì)胞內(nèi)遞送儀的實(shí)施方案。圖35B示出了處于兩階段遞送法的第一階段的針和電極結(jié)構(gòu)的實(shí)施方案。圖35C示出了處于兩階段遞送法的第二階段的細(xì)胞內(nèi)遞送儀的實(shí)施方案。圖35D示出了處于兩階段遞送法的第二階段的圖35B的裝置的針和電極結(jié)構(gòu)。圖36示出了與含連接至注射器的微集合器的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置一起使用的提供了電源的可重復(fù)使用的遞送裝置的立體圖。圖37示出了內(nèi)部設(shè)有細(xì)胞內(nèi)遞送儀的提供了電源的可重復(fù)使用的遞送裝置的內(nèi)部視圖。圖38A-C示出了含設(shè)置用于電穿孔的微集合器的細(xì)胞內(nèi)遞送儀的實(shí)施方案。圖39A-C示出了含設(shè)置用于電穿孔的微集合器的、具有Y形結(jié)構(gòu)的細(xì)胞內(nèi)遞送儀的實(shí)施方案。圖40A-B描繪了小號(hào)HIP（高注射壓力）注射器和大號(hào)HIP注射器。圖41為用編碼NS3/4A的核酸免疫5天后的兔研究的圖示，提供了在T細(xì)胞增殖試驗(yàn)中當(dāng)將細(xì)胞與不同濃度的各種抗原孵育時(shí)以每分鐘計(jì)數(shù)的細(xì)胞的放射性，以顯示放射性胸苷的攝入。圖42為示出了作為用HIP注射器免疫的結(jié)果的HCVNS3特異性T細(xì)胞增殖情況的圖。增殖可通過(guò)用抗原孵育的細(xì)胞的放射性除以僅用培養(yǎng)基孵育的細(xì)胞的放射性而測(cè)量。圖43A-C為用常規(guī)的27號(hào)針（圖43A）、小號(hào)HIP注射器（圖43B）和大號(hào)HIP注射器（圖43C）在注射位點(diǎn)處組織的組織學(xué)評(píng)價(jià)。圖44A-I示出了包含NS3/4A平臺(tái)和含及不含NS3蛋白酶切割位點(diǎn)的HBcAg的各種構(gòu)建體。圖45A描述了用于測(cè)量使用本發(fā)明公開的一種注射針裝置注射物質(zhì)時(shí)所需要的力的裝置的一個(gè)實(shí)施方案。圖46A-F為顯示使用本文描述的細(xì)胞內(nèi)遞送儀向雞胸注射染色水的試驗(yàn)7-9的俯視圖和截面圖。圖47A-F為顯示使用本文描述的細(xì)胞內(nèi)遞送儀向雞胸注射染色水的試驗(yàn)25-27的俯視圖和截面圖。圖48A-F為顯示使用本文描述的細(xì)胞內(nèi)遞送儀向雞胸注射染色水的試驗(yàn)16-18的俯視圖和截面圖。圖49A-F為顯示使用本文描述的細(xì)胞內(nèi)遞送儀向雞胸注射染色水的試驗(yàn)34-36的俯視圖和截面圖。圖50A-F為使用本文描述的細(xì)胞內(nèi)遞送儀手動(dòng)注射染色水的雞胸的俯視圖和截面圖。圖51A-F為使用單根針手動(dòng)注射染色水的雞胸的俯視圖和截面圖。圖52示出了使用5mL注射器采用針構(gòu)造“3Y01(72)”、“3O01(96)”和“6X01(144)”注射安慰劑液體的最大力的圖。圖53示出了使用10mL注射器采用針構(gòu)造“3Y01(72)”、“3O01(96)”和“6X01(144)”將水注入空氣中的最大力的圖。圖54示出了使用10mL注射器采用針構(gòu)造“3Y05(72)”、“3O05(72)”和“3X05(72)”將水注入空氣中的最大力的圖。圖55示出了采用標(biāo)準(zhǔn)針手動(dòng)遞送，或使用具有“3Y05(72)”、“3O05(72)”、“3X05(72)”、“3Y01(72)”或“3O01(96)”針構(gòu)造的勞埃德張力計(jì)將染色水注入雞的圖像。圖56A1-B2為采用標(biāo)準(zhǔn)針和使用本文所描述的細(xì)胞內(nèi)遞送儀聯(lián)合電穿孔注射的示例性結(jié)果。圖57A1-C2為使用在兩個(gè)注射力值下的本文所描述的細(xì)胞內(nèi)遞送儀聯(lián)合電穿孔相比于常規(guī)針聯(lián)合電穿孔的注射的示例性結(jié)果。圖58A示出了使用IVIN細(xì)胞內(nèi)遞送儀而沒(méi)有使用電穿孔的小鼠的免疫數(shù)據(jù)。圖58B示出了使用常規(guī)注射針而沒(méi)有使用電穿孔的小鼠的免疫數(shù)據(jù)。圖58C示出了使用IVIN細(xì)胞內(nèi)遞送儀及電穿孔的小鼠的免疫數(shù)據(jù)。圖58D示出了使用常規(guī)注射針及電穿孔的小鼠的免疫數(shù)據(jù)。圖59A-B示出了非免疫豬的免疫數(shù)據(jù)。圖59C-D示出了免疫豬的免疫數(shù)據(jù)。具體實(shí)施方式在本文中描述的本發(fā)明的方面涉及向組織遞送試劑（比如核酸）的裝置和方法。有些實(shí)施方案涉及被設(shè)置為向靶組織導(dǎo)入試劑（例如核酸，尤其是DNA）的細(xì)胞內(nèi)遞送儀，其中這些分子被位于靠近或注射位點(diǎn)附近處的區(qū)域中（例如，在由本文所描述的細(xì)胞內(nèi)遞送儀的一個(gè)針陣列內(nèi)的區(qū)域所限定的區(qū)域內(nèi)）的細(xì)胞所攝取。細(xì)胞內(nèi)遞送儀的針可包括適配連接器或針集合器，其可包括含內(nèi)螺紋的套管。所述適配連接器或針集合器被設(shè)置為將所述針附接到含待導(dǎo)入的試劑的注射器或?qū)Ч苌稀Ｔ谝恍?shí)施方案中，所述套管構(gòu)成了附接器件，可被旋擰到注射器的附接部分的外部螺紋上。所述適配連接器或針集合器也可包括壓緊組件、扣緊組件或魯爾錐形連接器（LuerTaperconnection），例如魯爾旋鎖接口（LuerLok）或魯爾滑鎖接口（LuerSlip）連接器或蝴蝶連接器。本文所描述的細(xì)胞內(nèi)遞送儀的針可以附接至一個(gè)或多個(gè)注射器針筒（例如，永久附接或可移除的連接），并且所述注射器針筒或裝置可包含待遞送的預(yù)防性和/或治療性試劑。例如，在一些實(shí)施方案中，所述針和連接的注射器可預(yù)先裝入預(yù)防性和/或治療性試劑，例如一次性使用的核酸、蛋白、修飾的核酸、適配體或細(xì)胞群。在一些實(shí)施方案中，試劑可通過(guò)設(shè)置在針上的孔被吸入注射器中。注射器針筒可具有不同尺寸（例如，0.3cc-100cc或更大）。即，注射器針筒可以為大于或等于0.1、0.3、0.4、0.5、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99或100cc的尺寸或?yàn)樯鲜鰯?shù)字之間的任意尺寸。所述注射器針筒可以用多種材料（例如，金屬、塑料、尼龍、聚乙烯、玻璃）制作而成。本文所描述的細(xì)胞內(nèi)遞送儀的針可被附接到幫助將預(yù)防性和/或治療性分子或試劑遞送到組織中的一個(gè)或多個(gè)裝置上，包括但不限于基因槍、電穿孔系統(tǒng)和微針裝置?？梢詫?duì)在本文中描述的注射針進(jìn)行改進(jìn)，以與現(xiàn)有的技術(shù)一起使用，所述現(xiàn)有技術(shù)包括基因槍遞送系統(tǒng)（參見例如美國(guó)專利第5,036,006號(hào)、5,240,855號(hào)和5,702,384號(hào)，這些專利公開的全部?jī)?nèi)容因此以引用的方式被明確結(jié)合至本文），使用電穿孔的遞送系統(tǒng)（參見例如美國(guó)專利第6,610,044和5,273,525號(hào)，6,132,419號(hào)和6,527,216號(hào)，這些專利所公開的全部?jī)?nèi)容因此以引用的方式被明確結(jié)合至本文）和微針遞送系統(tǒng)（參見例如美國(guó)專利第6,960,193號(hào)、6,623,457號(hào)、6,334,856號(hào)、5,457,041號(hào)、5,527,288號(hào)、5,697,901號(hào)、6,440,096號(hào)、6,743,211號(hào)和7,226,439號(hào)，這些專利公開的全部?jī)?nèi)容因此以引用的方式被明確結(jié)合至本文）。如本文所描述的，包括針的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置也可包含多種預(yù)防性和/或治療性試劑（例如細(xì)胞群（如包括干細(xì)胞的細(xì)胞群）、化學(xué)制品、化合物、化學(xué)治療劑、蛋白、特異性交換劑、核酸（例如DNA、RNA、其它天然核酸、修飾的核酸）、或DNA或核酸適配體）。在一些實(shí)施方案中，包括一根或多根在本文中描述的針的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置包括DNA，所述DNA編碼免疫原（優(yōu)選為病毒抗原，例如丙型肝炎病毒（HCV）、乙型肝炎病毒（HBV）、人類免疫缺陷病毒（HIV）、流感病毒、日本腦炎病毒（JEV）、人乳頭瘤病毒（HPV）；或寄生蟲抗原，例如瘧疾抗原；或植物抗原，例如樺樹抗原；或細(xì)菌抗原，例如葡萄球菌或炭疽抗原；或腫瘤抗原）。在一些實(shí)施方案中，包括一根或多根在本文中描述的針的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置包括預(yù)裝載有一種或多種上述的DNA（例如，預(yù)裝載的、與含測(cè)量劑量的遞送試劑的針連接的一次性使用的注射器）。在一些實(shí)施方案中，在如本文中描述的注射器、針或注射裝置中遞送或容納的預(yù)防性和/或治療性試劑包括天然核酸，而在其它實(shí)施方案中，在如本文中描述的注射器、針或細(xì)胞內(nèi)遞送裝置中遞送或容納的預(yù)防性和/或治療性試劑包括非天然核酸（例如，包含人造核苷酸、通用堿基或間隔區(qū)）?？捎米髦委熢噭⒃谌绫疚乃枋龅淖⑸淦骰蜃⑸溲b置中遞送或容納的天然核酸包括脫氧核糖磷酸或核糖磷酸骨架?？捎米黝A(yù)防性和/或治療性試劑、在如本文所描述的注射器、針或細(xì)胞內(nèi)遞送裝置中遞送或容納的人造或合成的多核苷酸可以包括在體外或在無(wú)細(xì)胞系統(tǒng)中聚合的任何多核苷酸，所述多核苷酸包含相同或相似的堿基，但可以包含不同于天然核糖磷酸骨架類型的骨架。這些骨架包括：PNA（肽核酸）、硫代磷酸、磷酰二胺、嗎啉代，以及天然核酸的磷酸骨架的其它變體?？杀话ㄔ诒疚闹忻枋龅囊粋€(gè)或多個(gè)實(shí)施方案的堿基包括嘌呤和嘧啶，進(jìn)一步包括天然化合物腺嘌呤、胸腺嘧啶、鳥嘌呤、胞嘧啶、尿嘧啶、肌苷和天然類似物。可被包括在本文中描述的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案的合成的嘌呤和嘧啶衍生物包括但不局限于設(shè)置新的反應(yīng)基團(tuán)（例如但不局限于胺、醇、硫醇、羧酸和鹵代烷）的修飾。在本文中使用的術(shù)語(yǔ)“堿基”，包括任何已知的DNA和RNA的堿基類似物，包括但不限于4-乙酰胞嘧啶、8-羥基-N6-甲基腺苷、吖丙啶基胞嘧啶、假異胞嘧啶、5-（羧基羥基甲基）尿嘧啶、5-氟尿嘧啶、5-溴尿嘧啶、5-羰甲基氨甲基-2-硫脲嘧啶、5-羧甲基-氨甲基尿嘧啶、二氫尿嘧啶、肌苷、N6-異戊烯基腺嘌呤、1-甲基腺嘌呤、1-甲基假尿嘧啶、1-甲基鳥嘌呤、1-甲基肌苷、2,2-二甲基-鳥嘌呤、2-甲基腺嘌呤、2-甲基鳥嘌呤、3-甲基胞嘧啶、5-甲基胞嘧啶、N6-甲基腺嘌呤、7-甲基鳥嘌呤、5-甲基氨甲基尿嘧啶、5-甲氧基氨基甲基-2-硫脲嘧啶、β-D-甘露糖基辮苷、5'-甲氧羰基甲基尿嘧啶、5-甲氧基尿嘧啶、2-甲硫基-N6-異戊烯基腺嘌呤、尿嘧啶-5-羥乙酸甲酯、尿嘧啶-5-羥乙酸、oxybutoxosine、假尿嘧啶、辮苷（queosine）、2-硫胞嘧啶、5-甲基-2-硫脲嘧啶、2-硫脲嘧啶、4-硫脲嘧啶、5-甲基尿嘧啶、N-尿嘧啶-5-羥乙酸甲酯、尿嘧啶-5-羥乙酸、假尿嘧啶、辮苷、2-硫胞嘧啶和2,6-二氨基嘌呤。術(shù)語(yǔ)多核苷酸包括脫氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）和DNA、RNA和其它天然的和合成的核苷酸的組合。在如本文中描述的注射器、針或細(xì)胞內(nèi)遞送裝置中遞送或容納的所述預(yù)防性和/或治療性試劑可以包括DNA，其可能的形式有cDNA、體外聚合DNA、質(zhì)粒DNA、質(zhì)粒DNA的部分、源自病毒的遺傳物質(zhì)、線性DNA、載體（P1、PAC、BAC、YAC、人工染色體）、表達(dá)盒、嵌合序列、重組DNA、染色體DNA、寡核苷酸、反義DNA或這些組的衍生物。RNA可能的形式為寡核苷酸RNA、tRNA（轉(zhuǎn)移RNA）、snRNA（小核RNA）、rRNA（核糖體RNA）、mRNA（信使RNA）、體外聚合RNA、重組體RNA、嵌合序列、反義RNA、siRNA（小干擾RNA）、miRNA（微小RNA）、核糖酶或這些組的衍生物。在如本說(shuō)明書中描述的注射器、針或細(xì)胞內(nèi)遞送裝置中遞送或容納的所述預(yù)防性和/或治療性試劑也可包括反義多核苷酸，所述反義多核苷酸是一種干擾DNA和/或RNA功能的多核苷酸。反義多核苷酸包括但不局限于：?jiǎn)徇?'-O-甲基多核苷酸、DNA、RNA等等。siRNA包括通常包含15到50個(gè)堿基對(duì)，優(yōu)選為21到25個(gè)堿基對(duì)的雙鏈結(jié)構(gòu)，具有與細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的靶基因或RNA相同或幾乎相同的核苷酸序列。干擾可能會(huì)導(dǎo)致抑制表達(dá)。所述多核苷酸是一種序列，它在細(xì)胞中的存在或表達(dá)會(huì)改變細(xì)胞內(nèi)基因或RNA的表達(dá)或功能。另外，DNA和RNA可以是單鏈、雙鏈、三鏈或四鏈的。雙鏈、三鏈和四鏈的多核苷酸可以包含RNA和DNA二者或天然的和/或合成的核酸的其它組合物。這些多核苷酸可被遞送到細(xì)胞中表達(dá)外源性核苷酸序列，以抑制、消除、增加或改變內(nèi)源性核苷酸序列的表達(dá)，或者表達(dá)與細(xì)胞非天然相關(guān)的特殊的生理特征。多核苷酸可以被編碼以表達(dá)整個(gè)或部分的蛋白，或者可以為反義。所述遞送的多核苷酸可以停留在細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞核內(nèi)，遠(yuǎn)離內(nèi)源性遺傳物質(zhì)?；蛘撸鼍酆衔锟梢栽俳Y(jié)合內(nèi)源性遺傳物質(zhì)或成為其一部分。例如，在如本說(shuō)明書中描述的注射器或細(xì)胞內(nèi)遞送裝置中遞送或容納的治療性試劑可以包括DNA，所述DNA能夠通過(guò)同源或非同源重組，將其本身嵌入染色體DNA中。在如本說(shuō)明書中描述的注射器、針或細(xì)胞內(nèi)遞送裝置中遞送或容納的所述預(yù)防性和/或治療性試劑也可包括RNA抑制劑，所述RNA抑制劑是包含一種序列的任何的核酸或核酸類似物，所述序列在細(xì)胞中的存在或表達(dá)會(huì)以序列特異的方式引起特定的細(xì)胞RNA，通常是mRNA的降解或抑制其功能或翻譯。RNA抑制劑也可抑制基因轉(zhuǎn)錄為RNA。RNA的抑制可有效地抑制轉(zhuǎn)錄所述RNA的基因的表達(dá)。RNA抑制劑包括但不局限于siRNA、微小RNA(miRNA),干擾RNA或RNAi、dsRNA、RNA聚合酶Ⅲ轉(zhuǎn)錄的DNA、核糖酶和反義核酸，其可以為RNA、DNA或人造核酸。微小RNA（miRNA）也通常有大約15-50個(gè)核苷酸的長(zhǎng)度，優(yōu)選大約20-25個(gè)核苷酸的長(zhǎng)度，并且miRNA可被用作轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)劑，與靶信使RNA轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物（mRNA）上的互補(bǔ)序列結(jié)合，通常導(dǎo)致翻譯抑制和基因沉默。反義多核苷酸包括但不局限于：?jiǎn)徇?'-O-甲基多核苷酸、DNA、RNA等等。RNA聚合酶Ⅲ轉(zhuǎn)錄的DNA可包括啟動(dòng)子，例如U6啟動(dòng)子。這些DNA可在細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄生成起siRNA作用的小發(fā)夾RNA或起反義RNA作用的線性RNA。所述RNA抑制劑可以為在體外聚合，重組體RNA，包含嵌合序列或這些組的衍生物。所述RNA抑制劑可以包括核糖核苷酸、脫氧核糖核苷酸、合成的核苷酸或任何合適的組合，使得靶RNA和/或基因被抑制。另外，這些形式的核酸可以是單鏈、雙鏈、三鏈或四鏈的。在如本說(shuō)明書中描述的注射器、針或細(xì)胞內(nèi)遞送裝置中遞送或容納的所述預(yù)防性和/或治療性試劑也可包括結(jié)合到載體（例如，表達(dá)載體）中的核酸。載體為起源于病毒、質(zhì)粒或高等有機(jī)體的細(xì)胞的多核苷酸分子，合適大小的另一核酸片段能夠整合至其中；載體通常將外源DNA導(dǎo)入到寄主細(xì)胞中，并在宿主細(xì)胞中進(jìn)行復(fù)制。示例包括質(zhì)粒、粘粒和酵母人工染色體；載體通常為包含多個(gè)來(lái)源的DNA序列的重組體分子。在本文中使用的術(shù)語(yǔ)“載體”指的是可以包括將DNA序列轉(zhuǎn)移進(jìn)入細(xì)胞中進(jìn)行表達(dá)的相關(guān)分子的任何DNA分子。示例包括裸DNA、非病毒DNA復(fù)合體（例如DNA加聚合物[陽(yáng)離子或陰離子的]、DNA加轉(zhuǎn)染增強(qiáng)化合物，以及DNA加兩性分子化合物）和病毒顆粒。在本文中使用時(shí)，載體也可以包括病毒載體：例如，腺病毒，DNA，源自腺病毒相關(guān)病毒且比腺病毒小的腺相關(guān)病毒載體（AAV）和逆轉(zhuǎn)錄病毒（逆轉(zhuǎn)錄病毒家族中的任何病毒，以RNA作為其核酸，使用逆轉(zhuǎn)錄酶將其基因組復(fù)制至宿主細(xì)胞的染色體DNA中；示例包括VSVG和包括慢病毒（包括HIV類型病毒）的成分的逆轉(zhuǎn)錄病毒）。在如本說(shuō)明書中描述的注射器、針或細(xì)胞內(nèi)遞送裝置中遞送或容納的所述預(yù)防性和/或治療性試劑也可包括一種或多種可提高所述治療性試劑（例如，在本說(shuō)明書中描述的核酸）的攝取的化合物。在如本說(shuō)明書中描述的注射器、針或細(xì)胞內(nèi)遞送裝置中遞送或容納的所述治療性試劑可包括聚合物，例如，由稱為單體的較小單元重復(fù)結(jié)合在一塊形成的分子。術(shù)語(yǔ)“聚合物”可包括兩種寡聚物，這兩種寡聚物為具有兩個(gè)到約80個(gè)單體和具有多于80個(gè)單體的聚合物。所述聚合物可以是線形、分支網(wǎng)絡(luò)狀、星形、梳狀或梯狀的聚合物。所述聚合物可以是同聚物，在其中使用一種的單體；或者可以是共聚物，在其中使用兩種或更多種單體。共聚物的種類包括交替、無(wú)歸、嵌段和接枝。在如本說(shuō)明書中描述的注射器、針或細(xì)胞內(nèi)遞送裝置中遞送或容納的預(yù)防性和/或治療性試劑也可包括核酸-聚陽(yáng)離子復(fù)合體。陽(yáng)離子蛋白如組蛋白和魚精蛋白或合成的聚合物如聚賴氨酸、聚精氨酸、聚鳥氨酸、DEAE右聚糖苷、聚凝胺和聚乙烯亞胺均是有效的細(xì)胞內(nèi)遞送劑。聚陽(yáng)離子為含凈正電荷的聚合物，例如聚-L-賴氨酸氫溴酸鹽。所述聚陽(yáng)離子可包括為正電荷、中性電荷或負(fù)電荷的單體單元，然而，所述聚合物的凈電荷優(yōu)選為正的。術(shù)語(yǔ)“聚陽(yáng)離子”也可指包括兩個(gè)或更多個(gè)正電荷的非聚合分子。聚陰離子為含凈負(fù)電荷的聚合物，例如多聚谷氨酸。所述聚陰離子可包括為負(fù)電荷、中性電荷或正電荷的單體單元，然而，所述聚合物上的凈電荷必須是負(fù)的。術(shù)語(yǔ)“聚陰離子”也可指包括兩個(gè)或更多個(gè)負(fù)電荷的非聚合分子。術(shù)語(yǔ)“聚離子”包括聚陽(yáng)離子、聚陰離子、兩性離子聚合物，以及包括等量的陰離子和陽(yáng)離子的中性聚合物。術(shù)語(yǔ)“兩性離子”指的是在屬于同一分子的一部分的酸性基團(tuán)和堿性基團(tuán)之間反應(yīng)的產(chǎn)物（鹽）。鹽為離子化合物，當(dāng)溶解在溶液中時(shí)，會(huì)電離成陽(yáng)離子和陰離子。鹽增加了溶液的離子強(qiáng)度，因此減少了核酸和其它陽(yáng)離子之間的相互作用。在如本說(shuō)明書中描述的注射器、針或細(xì)胞內(nèi)遞送裝置中遞送或容納的所述預(yù)防性和/或治療性試劑也可包括特異性交換劑。有幾種類型的特異性交換劑是已知的，在如本文中描述的注射器、針或注射裝置中可遞送或容納這些分子中的任意一種或多種。例如，美國(guó)專利第7,318,926、7,019,111、6,933,366、6,660,842、6,469,143、6,245,895、6,040,137、5,869,232、7,943,149、6,417,324號(hào)描述了特異性交換劑，這些專利的公開內(nèi)容以其整體被明確結(jié)合至本文。優(yōu)選地，使用包括針對(duì)連接至低聚糖的病原體上的受體（例如gal表位或Galαl-3Gal-β1-4GlcNAc-R）的配體的特異性交換劑，優(yōu)選合成組裝的特異性交換劑或復(fù)合糖，例如由固相肽合成法制備的特異性交換劑或復(fù)合糖。一些實(shí)施方案涉及包括多根針的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置，這些針被安排或被設(shè)置為向靶組織遞送治療性試劑。在一些實(shí)施方案中，所述試劑由注射器遞送經(jīng)過(guò)所述注射裝置的近端，所述試劑經(jīng)過(guò)設(shè)置在或靠近多個(gè)針梗的遠(yuǎn)端上的多個(gè)孔被遞送到靶組織中。在其它實(shí)施方案中，所述孔的端部可被設(shè)置在針梗的近端上。在一些實(shí)施方案中，在注射裝置上設(shè)置具有本文所描述的任意一個(gè)或多個(gè)上述結(jié)構(gòu)特征的多根針。本文所描述的實(shí)施方案還包括含如上所述設(shè)置的多根針的插管。即，在一些實(shí)施方案中，所述細(xì)胞內(nèi)遞送裝置和/或插管可包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10或更多根針，或由1、2、3、4、5、6、7、8、9或10或更多根針組成，或基本由1、2、3、4、5、6、7、8、9或10或更多根針組成。所述針可以是相同大小和長(zhǎng)度，或可以具有不同的大小和長(zhǎng)度。具有多于一根針的實(shí)施方案中的每根針可具有多個(gè)孔，可位于如上所述的第一或第二區(qū)，或者位于這兩個(gè)區(qū)（例如，沿所述帶的長(zhǎng)度）。優(yōu)選地，如上所述，所述細(xì)胞內(nèi)遞送裝置的針具有封閉端。包括2、3、4、5、6、7、8、9或10根針，或由2、3、4、5、6、7、8、9或10根針組成，或基本由2、3、4、5、6、7、8、9或10根針組成的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置和/或插管可被設(shè)置為使得至少兩根針具有不同數(shù)量的孔和/或不同尺寸的孔和/或不同形狀的孔和/或不同位置的孔，并且所述針優(yōu)選具有封閉端。優(yōu)選地，所述針和孔的朝向?yàn)槭沟妹扛樕系目紫嘞蛴诹硪桓樕系目?，以便形成遞送試劑相向方向的遞送或遞送試劑交叉噴射模式的遞送（例如，在具有一根中心針和三根外部針的四針陣列中，外部針的孔可以引導(dǎo)遞送試劑朝向中心針上的孔，中心針上在三個(gè)區(qū)處有孔，其中每個(gè)區(qū)朝向外部針上的孔，從中心針流出的遞送試劑朝向位于每根外部針上的孔）。在一些細(xì)胞內(nèi)遞送裝置的實(shí)施方案中，這樣的針陣列連接至或設(shè)置在包括至少一個(gè)電連接件的集合器上。再一次，優(yōu)選地，陣列中每根針上的孔朝向另一根針上的孔，以便形成遞送試劑的交叉噴射模式或遞送試劑相向遞送的區(qū)域。這樣，針陣列內(nèi)的某一個(gè)區(qū)局部過(guò)載遞送試劑，從而在該區(qū)內(nèi)形成了高濃度的遞送試劑，這在當(dāng)施加電場(chǎng)從而誘導(dǎo)遞送試劑的攝取時(shí)尤為有用。所述注射裝置、皮下注射針組件或細(xì)胞內(nèi)遞送裝置也優(yōu)選包括電極（在一些實(shí)施方案中，一根或多根針自身即為電極）和設(shè)置為在電極處生成電場(chǎng)的電源供應(yīng)裝置，其中所述電源供應(yīng)裝置通過(guò)至少一個(gè)電連接件連接至電極上。在一些實(shí)施方案中，一根針或多根針在靠近針梗的封閉端的第一區(qū)具有孔，且一根針或多根針在遠(yuǎn)離針梗的封閉端的第二區(qū)具有孔。另外，一些實(shí)施方案可以具有第一針（例如，位于如下所述的單根針裝置上的單根針，或具有多根針的裝置中的第一針）或第一多根針，所述第一針或第一多根針的孔在其最寬處的尺寸等于、大于或小于0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08、0.09、0.1、0.15、0.2、0.25、0.3、0.35、0.4、0.45、0.5、0.55、0.6、0.65、0.7、0.75、0.8、0.85、0.9、0.95、1.0、1.05、1.10、1.15、1.20、1.25、1.30、1.35、1.40、1.45、1.50、1.55、1.60、1.65、1.70、1.75、1.80、1.85、1.90、1.95、2.0、2.05、2.10、2.15、2.20、2.25、2.30、2.35、2.40、2.45、2.50、2.55、2.60、2.65、2.70、2.75、2.80、2.85、2.90、2.95、3.0、3.05、3.10、3.15、3.20、3.25、3.30、3.35、3.40、3.45、3.50、3.55、3.60、3.65、3.70、3.75、3.80、3.85、3.90、3.95或4.0mm。在一些實(shí)施方案中，一根針或多根針的孔在其最寬處小于1μm。在一些實(shí)施方案中，一根針或多根針的孔在其最寬處小于大約900nm。在一些實(shí)施方案中，一根針或多根針的孔在其最寬處小于大約500nm。在一些實(shí)施方案中，具有多根針的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置中的第一針的孔小于或基本上小于所述裝置中第二針或第二多根針的孔。在一些實(shí)施方案中，所述細(xì)胞內(nèi)遞送裝置僅包括一根針。所述針可包括本文中公開的任何結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。例如所述針可具有封閉或開口端。所述針可包括多個(gè)孔，例如，至少多于或等于大約5、10、20、30、50、70、100、120、140、160、180、200、500個(gè)孔或在其中間的任意數(shù)量的孔（例如，至少大約5-100、10-100、20-100、30-100、40-100、50-100或5-200、10-200、20-200、30-200、40-200、50-200、100-200、100-500、140-500、150-500、200-500個(gè)孔）。這些孔可以均勻間隔，或隨意分布。在一些實(shí)施方案中，這些孔在針上形成了規(guī)則的圖案。例如，所述孔可形成沿針的軸旋轉(zhuǎn)對(duì)稱的圖案。所述旋轉(zhuǎn)對(duì)稱可包括2重軸、3重軸、4重軸、5重軸、6重軸或更高程度的旋轉(zhuǎn)對(duì)稱。作為另一個(gè)例子，所述孔可形成具有螺旋軸對(duì)稱的圖案。所述螺旋軸對(duì)稱可包括2重軸、3重軸、4重軸、5重軸、6重軸或更高程度的旋轉(zhuǎn)對(duì)稱。螺旋軸的平移矢量可以，例如，約為、至少為、至少約為、不超過(guò)、不超過(guò)約0.01mm、0.05mm、0.1mm、0.15mm、0.2mm、0.25mm、0.3mm、0.4mm、0.5mm、0.6mm、0.7mm、0.8mm、0.9mm、1mm、2mm、3mm、4mm、5mm、6mm、7mm、8mm、9mm、1cm、2cm或3cm。在一些實(shí)施方案中，所述孔被設(shè)置為在注射預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)時(shí)形成放射狀。在一些實(shí)施方案中，所述細(xì)胞內(nèi)遞送裝置包括流體連接至含預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)的注射器或儲(chǔ)存器的一根或多根針，使得所述一根或多根針與注射器或儲(chǔ)存器的相對(duì)定位是固定的。在一些實(shí)施方案中，所述一根或多根針的端部可以兩端都是流體連接并設(shè)置在靠近含預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)的注射器或儲(chǔ)存器的位置。例如，所述一根或多根針的一端可以距離含預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)的注射器或儲(chǔ)存器大約為、不超過(guò)、不超過(guò)約1mm、5mm、1cm、2cm、3cm、4cm、5cm、6cm、7cm、8cm、9cm或10cm。在一些實(shí)施方案中，所述一根或多根針的端部距離與所述針流體連接并含有預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)的注射器或儲(chǔ)存器不超過(guò)大約10cm。一些實(shí)施方案涉及包括含如在本說(shuō)明書中描述的試劑（例如，藥用化合物、化學(xué)制品、核酸、肽、特異性交換劑，以及特別是DNA）的流體的注射裝置、細(xì)胞內(nèi)遞送裝置、插管和針。在一些實(shí)施方案中，在本說(shuō)明書中描述的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置、插管和針為一次性使用的。即，有些實(shí)施方案包括在本說(shuō)明書中描述的與容器（優(yōu)選為無(wú)菌容器，例如滅菌的注射器）連接的一種或多種針的設(shè)計(jì)，所述容器包括單次應(yīng)用或劑量的遞送試劑（例如，藥用化合物、化學(xué)制品、核酸、肽、特異性交換劑，以及特別是DNA）。因此，單次應(yīng)用或裝置可被方便地進(jìn)行包裝并提供給醫(yī)師或最終用戶，他們可在合適的位置施用所述試劑，在施用后，可以合適地丟棄使用過(guò)的包括多根針的注射裝置、針或插管。一些實(shí)施方案還包括制造及使用上述裝置的方法以及誘導(dǎo)對(duì)所希望的抗原的免疫應(yīng)答的方法。在一些實(shí)施方案中，所述細(xì)胞內(nèi)遞送裝置并未設(shè)置為在注射位點(diǎn)周圍的組織和/或通過(guò)注射位點(diǎn)的組織導(dǎo)入預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)（例如DNA）之后不久或同時(shí)施用電場(chǎng)。例如，所述細(xì)胞內(nèi)遞送裝置可不包括與所述裝置連接并設(shè)置為向注射位點(diǎn)處或附近的組織施加電場(chǎng)的電壓源。在其它實(shí)施方案中，所述細(xì)胞內(nèi)遞送裝置被設(shè)置為在注射位點(diǎn)周圍的組織和/或通過(guò)注射位點(diǎn)的組織導(dǎo)入預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)（例如DNA）之后不久或同時(shí)施用電場(chǎng)。例如，所述細(xì)胞內(nèi)遞送裝置可包括與所述裝置連接并設(shè)置為向注射位點(diǎn)處或附近的組織施加電場(chǎng)的電壓源。一些在本說(shuō)明書中公開的實(shí)施方案包括向有需要的受試者遞送預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)的方法，其中所述預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)使用在本說(shuō)明書中公開的任何細(xì)胞內(nèi)遞送裝置進(jìn)行施用。所述預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)可以是在本說(shuō)明書中公開的任何物質(zhì)。在一些實(shí)施方案中，所述方法也可包括在注射完預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)后但在抽回所述一根或多根針之前，維持所述一根或多根針插入在所述組織中至少預(yù)設(shè)的時(shí)間。在注射所述治療性物質(zhì)后但在抽回所述一根或多根針之前，所述一根或多根針可在組織中維持，例如，至少大于或等于1s、2s、3s、4s、5s或更長(zhǎng)時(shí)間。在一些實(shí)施方案中，在少于大約60秒、40秒、30秒、20秒、15秒、10秒、5秒、4秒、3秒、2秒、1.5秒、1.0秒、0.8秒、0.5秒、0.4秒、0.3秒或0.2秒的期間內(nèi)遞送全部劑量。將一根或多根針插進(jìn)組織和將所述一根或多根針從組織中移出之間的時(shí)間也可有所不同。所述時(shí)間可以為，例如，大約、至少、至少約、不超過(guò)、不超過(guò)約0.5秒、1秒、2秒、3秒、4秒、5秒、6秒、7秒、8秒、9秒、10秒、15秒、30秒、45秒或60秒。在一些實(shí)施方案中，在本說(shuō)明書中描述的針和任何裝置可被固定到受試者的身體上更長(zhǎng)的時(shí)間，使得可以長(zhǎng)期遞送預(yù)防性和/或治療性試劑（例如至少遞送大于或等于1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或14天），并且所述的針和裝置可被固定到微型泵上，以便在延長(zhǎng)的期間內(nèi)向所述受試者施用少量的預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)（例如細(xì)胞群（如包括干細(xì)胞的細(xì)胞群）、化學(xué)制品、化合物、化學(xué)治療劑、蛋白、核酸（例如DNA、RNA、其它天然核酸、修飾的核酸）、或DNA或核酸適配體）。在一些實(shí)施方案中，所述預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)可在使用壓力生成元件、在高壓下通過(guò)本文所描述的任何細(xì)胞內(nèi)遞送裝置而被遞送至身體中。所述壓力生成元件可以為注射器中的活塞，并且可以包括彈簧或抑制活塞的其它元件以對(duì)預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)產(chǎn)生高的作用力或壓力。由壓力生成元件生成的高的作用力或壓力被施加到預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)上以將其通過(guò)針進(jìn)行置換（例如，通過(guò)向連接到針的注射器中的活塞施加作用力）。最大的作用力可以為例如，大約、至少、至少約、不超過(guò)、不超過(guò)約25N、40N、50N、75N、100N、150N、200N或500N。施加到治療性物質(zhì)上的最大壓力可以為，例如，大約、至少、至少約、不超過(guò)、不超過(guò)約50kPa、100kPa、200kpa、300kPa、400kPa、500kPa、600kPa、700kPa、800kPa、900kPa、1000kPa、1100kPa、1200kPa、1300kPa、1400kPa、1500kPa、1600kPa、1700kPa、1800kPa、1900kPa、2000kPa、2100kPa、2200kPa、2300kPa、2400kPa、2500kPa、2600kPa、2700kPa、2800kPa、2900kPa、3000kPa、3100kPa、3200kPa、3300kPa、3400kPa、3500kPa、3600kPa、3700kPa、3800kPa、3900kPa、4000kPa、4100kPa、4200kPa、4300kPa、4400kPa、4500kPa、4600kPa、4700kPa、4800kPa、4900kPa、5000kPa、6000kPa、7000kPa、8000kPa、9000kPa、10MPa、15MPa、20MPa、25MPa或30MPa。在一些實(shí)施方案中，所述預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)可以以高的孔速度（即流體排出孔的平均速度）進(jìn)行遞送。所述孔速度可以為，例如，大約、至少、至少約、不超過(guò)、不超過(guò)約1mm/s、1.5mm/s、2mm/s、2.5mm/s、3mm/s、3.5mm/s、4mm/s、5mm/s、6mm/s、7mm/s、8mm/s、9mm/s或10mm/s。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述孔速度可以為至少約3mm/s。可以例如通過(guò)注射預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)的體積速率除以孔的平均尺寸確定孔速度。本文公開的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置可任選地被設(shè)置為以如上所述的任何孔速度進(jìn)行遞送。例如，所述細(xì)胞內(nèi)遞送裝置可與彈簧活塞結(jié)合，設(shè)置為以足以產(chǎn)生所希望的孔速度的體積速率注射預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)。本發(fā)明的一些方面涉及一種細(xì)胞內(nèi)遞送裝置，包括針，所述針含適于預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)通過(guò)的腔道以及針梗，所述針梗在所述針梗的長(zhǎng)度上包括多個(gè)孔，其中所述針梗具有封閉端；以及連接件，所述連接件被設(shè)置為將所述針連接到壓力生成元件上。在一些實(shí)施方案中，上述細(xì)胞內(nèi)遞送裝置包括如本文所述的多根針，在一些實(shí)施方案中，所述細(xì)胞內(nèi)遞送裝置包括圓形、菱形、三角形、正方形、矩形、梯形、卵形或其它形狀陣列的針。優(yōu)選地，所述細(xì)胞內(nèi)注射遞送裝置被設(shè)計(jì)為多根所述的針被設(shè)置為位于所述針梗上的孔彼此面對(duì)，但在一些實(shí)施方案中，所述皮下注射針組件具有多根所述的針，所述針被設(shè)置為使得位于所述針梗上的孔彼此背離。在一些實(shí)施方案中，所述細(xì)胞內(nèi)遞送裝置進(jìn)一步包括與所述細(xì)胞內(nèi)遞送裝置連接的壓力產(chǎn)生元件，所述壓力產(chǎn)生元件可以是注射器。上述細(xì)胞內(nèi)遞送裝置可具有直徑約為10nm-4mm、0.01mm-4mm、0.1mm-4mm、1.0mm-4mm、1.5mm-4mm、2.0mm-4mm或3.0mm-4mm的孔。在一些實(shí)施方案中，上述細(xì)胞內(nèi)遞送裝置包括與至少三根所述的針連接的單個(gè)注射器。在一些實(shí)施方案中，所述至少三根所述針相距大約2mm和約10mm之間。在其它實(shí)施方案中，上述細(xì)胞內(nèi)遞送裝置可包括與至少四根皮下注射針連接的單個(gè)注射器。在一些實(shí)施方案中，所述細(xì)胞內(nèi)遞送裝置具有至少四根皮下注射針，相距在約3mm和約6mm之間。一次性使用的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置也同樣是一個(gè)實(shí)施方案，這種裝置優(yōu)選包括多根附接于至少一個(gè)注射器上的針，其中所述針包括沿所述針梗分布的多個(gè)孔以及一個(gè)封閉端；所述至少一個(gè)注射器包括單次劑量的預(yù)防性和/或治療性試劑。在一些實(shí)施方案中，細(xì)胞內(nèi)遞送裝置中的預(yù)防性和/或治療性試劑為核酸。所述預(yù)防性和/或治療性試劑可以是編碼蛋白的DNA。在一些實(shí)施方案中，上述細(xì)胞內(nèi)遞送裝置包括與至少三根皮下注射針連接的單個(gè)注射器，在一些實(shí)施方案中，所述至少三根皮下注射針相距約2mm和約10mm之間。在其它實(shí)施方案中，上述細(xì)胞內(nèi)遞送裝置包括與至少四根針連接的單個(gè)注射器，在一些實(shí)施方案中，所述至少四根皮下注射針相距約3mm和約6mm之間。本發(fā)明的方面也包括制造和使用上述裝置的方法。通過(guò)一種方法，在本說(shuō)明書中描述的有些裝置被用于向受試者遞送預(yù)防性和/或治療性試劑，所述方法的實(shí)踐方式為提供在本說(shuō)明書中描述的一種遞送裝置，將所述裝置的針插入受試者的組織中，然后將所述治療試劑從注射器中推動(dòng)，通過(guò)所述針進(jìn)入組織中。在一些實(shí)施方案中，所述預(yù)防性和/或治療性試劑為核酸，所述核酸可以編碼抗原，例如病毒抗原，優(yōu)選為肝炎抗原，如HCV或HBV抗原，使得在本文中描述的一些遞送裝置可用于在受試者中誘導(dǎo)針對(duì)由所述的裝置遞送的抗原的免疫應(yīng)答的目的。其它的實(shí)施方案包括用于向組織中遞送預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置，所述裝置包括與壓力產(chǎn)生元件連接的連接器；適于預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)通過(guò)的腔道；以及針梗，其中所述針梗包括沿所述針梗的長(zhǎng)度延伸的多個(gè)孔。在一些實(shí)施方案中，所述治療性物質(zhì)包括核酸、多肽、糖類、特異性交換劑、類固醇、細(xì)胞群、化學(xué)制品或免疫原。在一些實(shí)施方案中，所述預(yù)防性和/或治療性試劑誘導(dǎo)免疫系統(tǒng)。所述針?？蛇m于傳送電流，所述裝置可進(jìn)一步包括適于傳送電磁場(chǎng)的電極。在一些實(shí)施方案中，所述預(yù)防性和/或治療性試劑進(jìn)入細(xì)胞，在其它實(shí)施方案中，所述試劑保留在細(xì)胞外。在一些實(shí)施方案中，使用液體介質(zhì)或氣體介質(zhì)傳遞壓力。在一些實(shí)施方案中，所述核酸包括源自肝炎病毒的序列，所述肝炎病毒如乙型肝炎抗原（HBV），例如HBcAg，或丙型肝炎病毒（HCV）抗原，例如NS3/4A，或它們的組合，如源自感染了鸛或蒼鷺的HBV病毒的與NS3/4A連接的HBcAg的序列。在其它實(shí)施方案中，所述核酸包括源自人猿病毒抗原的序列。優(yōu)選地，所述核酸包括編碼能夠生成增殖性T細(xì)胞應(yīng)答的抗原的序列，在一些實(shí)施方案中，所述核酸包括源自人類免疫缺陷性病毒的序列。其它的實(shí)施方案包括，用于向組織中遞送預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置包括預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)壓力產(chǎn)生元件；與所述壓力產(chǎn)生元件連接的一陣列的針梗；其中在該陣列中的至少一個(gè)所述針梗包括多個(gè)孔，所述孔適于將從所述壓力產(chǎn)生元件傳遞來(lái)的壓力傳遞進(jìn)入組織中，以增加細(xì)胞膜的滲透性，并且在該陣列中的至少一個(gè)所述針梗適于使在本文其它處描述的預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)通過(guò)。更多的實(shí)施方案，包括具有縱向軸的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置，所述裝置包括被設(shè)置為與增壓流體源接合的連接器；以及針組件，所述針組件包括在與所述裝置的縱向軸基本上平行的方向上從所述連接器延伸的莖，所述莖包括與所述連接器流體連接的第一腔道，在與所述裝置的縱向軸基本上平行的方向上從所述莖處延伸的第一針梗，所述第一針梗包括與所述莖流體連接的第二腔道和與所述第二腔道流體連接的至少一個(gè)孔，以及在與所述裝置的縱向軸基本上平行的方向上從所述莖處延伸的第二針梗，所述第二針梗包括與所述莖流體連接的第三腔道和與所述第三腔道流體連接的至少一個(gè)孔。在一些實(shí)施方案中，所述第一針梗和所述第二針梗在它們之間形成了注射腔空間。在一些實(shí)施方案中，所述注射腔空間被設(shè)置為容納受試者的至少一部分，例如組織。在一些實(shí)施方案中，所述第一針梗和第二針梗每個(gè)均包括相同數(shù)量的孔。在一些實(shí)施方案中，位于所述第一針梗上的每個(gè)孔均朝向位于所述第二針的針梗上的孔。在一些實(shí)施方案中，所述第一針梗和所述第二針梗包括設(shè)置為相對(duì)于所述莖的削尖末梢端。在一些實(shí)施方案中，所述孔一般為曲線形的。在一些實(shí)施方案中，所述孔一般為多邊形的。在一些實(shí)施方案中，所述孔沿與所述裝置的縱向軸基本上平行的線段均勻地設(shè)置。在一些實(shí)施方案中，第三針梗在與所述裝置的縱向軸基本上平行的方向上從所述莖處延伸，所述第三針梗包括與所述莖流體連接的第四腔道和與所述第四腔道流體連接的至少一個(gè)孔。在一些實(shí)施方案中，至少一個(gè)孔被設(shè)置為向所述注射腔空間施加負(fù)壓。進(jìn)一步的實(shí)施方案涉及向受試者遞送預(yù)防性和/或治療性試劑的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置，所述裝置具有縱向軸，并包括與所述裝置的所述縱向軸基本上平行設(shè)置的多個(gè)注射器，每個(gè)注射器包括一根針，所述針沿所述針的長(zhǎng)度上設(shè)置了多個(gè)孔，其中所述孔朝向所述裝置的縱向軸。在這些實(shí)施方案中，所述至少一個(gè)注射器包括含基因的預(yù)防性和/或治療性試劑。在一些實(shí)施方案中，每根針包括尖端，多根針的所述尖端被設(shè)置在與所述裝置的所述縱向軸基本垂直的平面上。其它的實(shí)施方案包括皮下注射針，所述皮下注射針包括沿所述針的所述針梗設(shè)置的多個(gè)孔，其中所述針的端部閉合。在一些實(shí)施方案中，所述的封閉端為鈍形的。在一些實(shí)施方案中，所述組件進(jìn)一步包括附接至針的注射器。在一些實(shí)施方案中，所述的注射器包括預(yù)防性和/或治療性試劑，所述試劑可以是核酸，例如編碼蛋白的DNA。本發(fā)明的進(jìn)一步方面涉及包含多根皮下注射針的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置，所述皮下注射針包括沿所述針的針梗設(shè)置的多個(gè)孔，所述針與一個(gè)或多個(gè)注射器連接。優(yōu)選地，所述針的端部閉合。在一些實(shí)施方案中，所述針的端部為鈍形的。在一些實(shí)施方案中，所述注射器包括預(yù)防性和/或治療性試劑，例如編碼蛋白的DNA。在一些實(shí)施方案中，上述注射裝置包括與至少三根皮下注射針連接的單個(gè)注射器。一些實(shí)施方案涉及包括附接到至少一個(gè)注射器上的多根針的一次性使用的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置，其中所述針包括沿所述針的針梗設(shè)置的多個(gè)孔，且所述至少一個(gè)注射器包括單次劑量的預(yù)防性和/或治療性試劑。在一些實(shí)施方案中，所述針的端部閉合。在一些實(shí)施方案中，所述針的端部為鈍形的。在一些實(shí)施方案中，所述預(yù)防性和/或治療性試劑為核酸。在一些實(shí)施方案中，所述核酸為編碼蛋白的DNA。在一些實(shí)施方案中，所述細(xì)胞內(nèi)遞送裝置包括含多根針的針集合器，所述多根針部分設(shè)置在針集合器中；所述多根針的每一根包括適于治療性物質(zhì)通過(guò)的腔道，以及針梗，所述針梗在沿所述針梗的長(zhǎng)度上包括多個(gè)孔，其中所述針梗具有封閉端，并且其中所述孔在每根針的針梗上均勻間隔，孔的平均直徑在大約0.01mm到大約6mm的范圍內(nèi)；含活塞的注射器；被設(shè)置為流體連接至注射器和針集合器的連接器，所述連接器被設(shè)置為在連接器和針集合器之間形成缺口。在一些實(shí)施方案中，所述皮下注射針包括位于針梗上的區(qū)，其中每個(gè)區(qū)被設(shè)置為以不同方向通過(guò)治療性物質(zhì)。在一些實(shí)施方案中，所述皮下注射針包括具有相當(dāng)于針梗的軸的第一尺寸和垂直于針梗的軸的第二尺寸的切口，其中第一尺寸長(zhǎng)于第二尺寸。使用任一種或多種上述裝置的方法也是實(shí)施方案，包括向細(xì)胞遞送核酸的方法，所述方法包括使用本文所描述的注射裝置。在一些實(shí)施方案中，向受試者遞送預(yù)防性和/或治療性試劑的方法包括：通過(guò)提供電壓源、向受試者的組織中插入細(xì)胞內(nèi)遞送裝置的一根或多根針而進(jìn)行電穿孔，其中所述一根或多根針的每一根都包括具有腔道和多個(gè)孔的針梗，所述針梗由導(dǎo)電材料制成，還包括與電壓源相連的電連接；將預(yù)防性和/或治療性試劑通過(guò)針的腔道置換出來(lái)，通過(guò)多個(gè)孔進(jìn)入組織中，其中一根或多根針連接至含所述預(yù)防性和/或治療性試劑的注射器，從而使得注射器和一根或多根針形成了剛性或非柔性的結(jié)構(gòu)；以及通過(guò)使用作為電極的一根或多根針向受試者的組織施加電場(chǎng)。在一些實(shí)施方案中，在向組織施加電場(chǎng)之前進(jìn)行預(yù)防性和/或治療性試劑的置換。在一些實(shí)施方案中，在向組織施加電場(chǎng)之后進(jìn)行預(yù)防性和/或治療性試劑的置換。在一些實(shí)施方案中，在向組織施加電場(chǎng)之前進(jìn)行預(yù)防性和/或治療性試劑的置換。在一些實(shí)施方案中，在與向組織施加電場(chǎng)大致相同的時(shí)間進(jìn)行預(yù)防性和/或治療性試劑的置換（例如，可在向預(yù)防性和/或治療性試劑的注射位點(diǎn)處或附近的受試者組織施加電場(chǎng)之前、期間或之后，通過(guò)將所述預(yù)防性和/或治療性試劑穿過(guò)針梗上的孔而施加預(yù)防性和/或治療性試劑，如編碼抗原的核酸）。在一些實(shí)施方案中，所述核酸為編碼蛋白（例如抗原）的DNA。一些實(shí)施方案涉及含多對(duì)針的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置，所述多對(duì)針的每一根針包括封閉端、針梗以及沿所述針梗的多個(gè)孔，其中在多對(duì)針的至少一根針上的孔相對(duì)于至少一根其它針排列以生成交叉噴射模式；其中所述多對(duì)針的至少一對(duì)包括一對(duì)具有相反極性的電極，所述電極被設(shè)置為向受試者施加電場(chǎng)。在一些實(shí)施方案中，所述DNA編碼病毒抗原。在一些實(shí)施方案中，所述病毒抗原為HCV或HBV抗原。此外，在一些實(shí)施方案中，使用HBcAg或其片段或編碼HBcAg的核酸或其片段作為佐劑。通過(guò)一些方法，所述HBcAg或其片段或編碼HBcAg的核酸或其片段為選自SEQ.IDNO.1-32的序列。提高針對(duì)抗原的免疫應(yīng)答的方法也同樣為一個(gè)實(shí)施方案，所述方法可包括在向受試者提供HBcAg或其片段或編碼HBcAg的核酸或其片段的同時(shí)或其不久之后向所述受試者提供所述抗原或編碼所述抗原的核酸。在一些方法中，所述HBcAg或其片段或編碼HBcAg的核酸或其片段為選自SEQ.IDNO.1-32的序列。在一些方法中，所述DNA編碼NS3/4A和/或HBcAg（例如，源自感染鸛和蒼鷺的病毒的HBcAg）。在一些實(shí)施方案中，本文中描述的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置用于向有需要的受試者遞送致免疫組合物。優(yōu)選地，所述致免疫組合物為編碼抗原（例如，HCV抗原，例如NS3/4A或NS5，和/或HBV抗原，例如HBcAg，優(yōu)選源自感染鸛或蒼鷺的HBV）的核酸。在這些方法中的一部分中，對(duì)致免疫組合物（例如由核酸編碼的抗原，如NS3/4A、NS5或HBcAg）的免疫應(yīng)答進(jìn)行評(píng)價(jià)、測(cè)量、分析或觀察。用于遞送這些致免疫組合物的優(yōu)選裝置為包括能夠連接至本文所描述的一根或多根針的注射器的那種，使得注射器和針組件是非柔性的，或者是剛性的（即，不是導(dǎo)管）。在一些實(shí)施方案中，將至少大約0.3mL的預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)（例如，懸浮在0.2、0.3、0.4或0.5ml中的致免疫組合物）在不到60、45、30、15、10、5或1秒內(nèi)，以及至少大約200kpa的壓力下遞送給受試者。在一些實(shí)施方案中，所述預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)的量可為至少大約1mL。因此，本發(fā)明的方面涉及被設(shè)置為用于遞送預(yù)防性和/或治療性試劑（例如細(xì)胞群（如包括干細(xì)胞的細(xì)胞群）、化學(xué)制品、化合物、化學(xué)治療劑、蛋白、特異性交換劑、核酸（例如DNA、RNA、其它天然核酸、修飾的核酸）、或DNA或核酸適體）的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置，其中所述細(xì)胞內(nèi)遞送裝置包括多根針，所述多根針含閉合或開口端以及沿每根針的長(zhǎng)度延伸的多個(gè)孔。在一些實(shí)施方案中，所述細(xì)胞內(nèi)遞送裝置包括如本文所描述的一根針。在一些實(shí)施方案中，所述細(xì)胞內(nèi)遞送裝置包括如本文所描述的多根針。所述針可以為鈍形端（例如具有封閉端）或可具有斜面形、尖形或尖銳的端部，每根針也可具有封閉端。所述針可被制成多種規(guī)格（例如，至少，等于或大于7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33或34號(hào)）。優(yōu)選地，所述針的規(guī)格大于或等于20號(hào)（例如，大于或等于20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33或34號(hào)），更加優(yōu)選地，所述針的規(guī)格大于或等于23號(hào)（例如，23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33或34號(hào)），最優(yōu)選地，所述針的規(guī)格大于或等于25號(hào)（例如，25、26、27、28、29、30、31、32、33或34號(hào)）。在一些實(shí)施方案中，所述孔并不位于或靠近于一根或多根針的針尖。例如，所述孔可位于距針尖至少1mm、2mm、3mm、4mm、5mm、6mm、7mm、8mm、9mm、10mm、11mm、12mm、13mm、14mm、15mm、16mm、17mm、18mm、19mm、2cm、3cm、4cm或更遠(yuǎn)處。針的長(zhǎng)度可根據(jù)所希望遞送的類型發(fā)生改變。為了靶向于皮膚或特定組織中的特定細(xì)胞上，例如，優(yōu)選的靶向深度取決于待被靶向的特定細(xì)胞或組織以及特定受試者皮膚的厚度（例如為了靶向于人類皮膚真皮處的朗格罕氏細(xì)胞，希望所述遞送至少部分包含通常在人類中深度約0.025mm到約0.2mm的表皮組織）。因此，在其中需要遞送到朗格罕氏細(xì)胞的實(shí)施方案中，針的長(zhǎng)度可以是約0.025mm到約0.2mm。在一些實(shí)施方案中，希望將治療性試劑在角質(zhì)層正下方且包含表皮和上層真皮的靶向的深度處遞送（例如，在這些實(shí)施方案中，優(yōu)選的針的長(zhǎng)度包括約0.025mm到約2.5mm）。在其它實(shí)施方案中，所述治療性試劑被遞送至肌肉組織或脂肪組織中（例如，在這些實(shí)施方案中，優(yōu)選的針的長(zhǎng)度包括約0.5cm到約15cm是所希望的）。因此，本發(fā)明的方面涉及包含一個(gè)或多根針的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置及其用途，其中針的長(zhǎng)度大于、等于、小于或位于如下數(shù)字之間的任何數(shù)字：約0.025mm、0.05mm、0.075mm、0.1mm、0.2mm、0.3mm、0.4mm、0.5mm、0.6mm、0.7mm、0.8mm、0.9mm、1mm、5mm、10mm、15mm、20mm、25mm、30mm、35mm、40mm、45mm、50mm、55mm、60mm、65mm、70mm、75mm、80mm、85mm、90mm、95mm、100mm、125mm、150mm、175mm、200mm、225mm、250mm、275mm、300mm、325mm、350mm、375mm、400mm、425mm、450mm、475mm、500mm、525mm、550mm、575mm、600mm、625mm、650mm、675mm、700mm、725mm、750mm、775mm、800mm、825mm、850mm、875mm、900mm、925mm、950mm、975mm、1cm、1.25cm、1.5cm、2.0cm、2.25cm、2.5cm、2.75cm、3.0cm、3.25cm、3.5cm、3.75cm、4.0cm、4.25cm、4.5cm、4.75cm、5.0cm、5.25cm、5.5cm、5.75cm、6.0cm、6.25cm、6.5cm、6.75cm、7.0cm、7.25cm、7.5cm、7.75cm、8.0cm、8.25cm、8.5cm、8.75cm、9.0cm、9.25cm、9.5cm、9.75cm、10.0cm、10.25cm、10.5cm、10.75cm、11.0cm、11.25cm、11.5cm、11.75cm、12.0cm、12.25cm、12.5cm、12.75cm、13.0cm、13.25cm、13.5cm、13.75cm、14.0cm、15.25cm、14.5cm、14.75cm或15cm。在一些實(shí)施方案中，針的長(zhǎng)度大于10mm。在一些實(shí)施方案中，針的長(zhǎng)度大于約15mm。在一些實(shí)施方案中，針的長(zhǎng)度大于約20mm。在一些實(shí)施方案中，針的長(zhǎng)度大于約30mm。本文所描述的任何針（例如如上所述的形狀和尺寸的任意一種或多種針）可包括不同大小與形狀（例如，橢圓形、圓形、切口或卵形）的多個(gè)孔，這些孔可通過(guò)機(jī)械加工或激光制成。一根或多根針中的每根針可包括，例如，大于、等于、少于或在下面數(shù)字之間的任何數(shù)量的孔：2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、50、60、70、80、90、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200、300、400或500。在優(yōu)選實(shí)施方案中，裝置中的所有的一根或多根針的孔的總量可以為72、96或144。在一些實(shí)施方案中，所述孔可沿針的長(zhǎng)度均勻間隔。在一些實(shí)施方案中，所述孔可聚集在一個(gè)區(qū)域（例如，位于所述針的第一或第二區(qū)（例如，其中所述兩個(gè)區(qū)由相對(duì)于所述針的長(zhǎng)度的中點(diǎn)處兩個(gè)側(cè)部所區(qū)分）或所述孔位于沿所述針的長(zhǎng)度處），或沿所述針的長(zhǎng)度非均勻的間隔開。所述針可具有封閉或開口端，但封閉端是優(yōu)選的，這樣設(shè)計(jì)可在使用小孔徑孔（例如，其最寬處的尺寸等于或小于0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08、0.09、0.1、0.15、0.2、0.25、0.3、0.35、0.4、0.45、0.5、0.55、0.6、0.65、0.7、0.75、0.8、0.85、0.9、0.95、1.0mm）時(shí)增加遞送的壓力。所述針可由手術(shù)鋼、不銹鋼或金屬合金（例如基本上由至少大約52%的鎳和至少大約48%的鈦組成）組成。在一些實(shí)施方案中，所述針可包括導(dǎo)電材料。在一些實(shí)施方案中，當(dāng)針例如通過(guò)魯爾鎖機(jī)制附接或連接至增壓流體儲(chǔ)存器（例如注射器）時(shí)，注射器和針形成了剛性、非柔性體，使得注射器和針組件并不是導(dǎo)管。類似地，本文所描述的許多實(shí)施方案包括與本文所描述的一根或多根針連接的注射器，使得注射器和針組件缺少覆蓋針的外部的外套，而這是導(dǎo)管所需要的。雖然本文所描述的多種裝置具有與在導(dǎo)管中發(fā)現(xiàn)的相似的特征，但本發(fā)明的許多實(shí)施方案并不是導(dǎo)管，當(dāng)注射器連接至針時(shí)（例如，當(dāng)注射器直接連接至含本文所描述的一根或多根針的集合器時(shí)），本文所描述的許多裝置是剛性且非柔性的。在本文中公開的實(shí)施方案并不局限于制造所公開的針?；蚩椎娜魏尉唧w制造工藝。針?？赏ㄟ^(guò)使用任何標(biāo)準(zhǔn)的針生產(chǎn)工藝，包括（僅舉例來(lái)說(shuō)）壓鑄、注塑成型、吹塑成型、機(jī)器加工、激光加工等等進(jìn)行制造。類似地，針的材料可從任意數(shù)量的已知的針的材料，例如不銹鋼、碳鋼和各種金屬合金中進(jìn)行選擇。針梗上的孔可以作為針梗制造過(guò)程的一部分進(jìn)行制造，或者通過(guò)鉆孔或激光蝕刻的方式在過(guò)后添加上。這些各種制造方法在本領(lǐng)域中都是熟知的。本發(fā)明的方面同樣總體上涉及使用如上所述的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置跨膜遞送藥品、核酸或其它生物活性分子和化合物的方法。有效成分（例如DNA、RNA、核酸、蛋白或化合物）可在多種溶液中進(jìn)行配制，用于通過(guò)在本文中描述的針進(jìn)行遞送。在一些實(shí)施方案中，所述有效成分（例如DNA、RNA、核酸、蛋白或化合物）可以在載體溶液（如水、緩沖液、鹽水、油乳劑、油或甘油）中混合。該液體可繼而通過(guò)在本文中描述的針。在一些實(shí)施方案中，所述有效成分（例如DNA、RNA、核酸、蛋白或化合物）可被固定在載體上（例如納米顆粒、蛋白、糖或丸），并與一種或多種上述載體溶液（例如水、緩沖液、鹽水、油乳劑、油或甘油）混合，且結(jié)合載體的試劑通過(guò)在本文中描述的針。應(yīng)該理解的是，存在多種運(yùn)載介質(zhì)和載體，使用本申請(qǐng)未明確提及的運(yùn)載介質(zhì)或載體并不會(huì)背離本發(fā)明的精神。例如，所述運(yùn)載介質(zhì)可以是陽(yáng)離子油。如上所述，預(yù)計(jì)與本文所描述的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置配套使用的核酸可以是源自如下的核酸：人、非人的靈長(zhǎng)類、小鼠、細(xì)菌、病毒、霉菌、原生動(dòng)物、鳥、爬行動(dòng)物、鳥類（例如鸛和蒼鷺）、小鼠、倉(cāng)鼠、大鼠、兔、豚鼠、土撥鼠、豬、小型豬、山羊、狗、貓、人和非人的靈長(zhǎng)類，例如狒狒、猴和黑猩猩。在一些實(shí)施方案中，本文所描述的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置可被用于遞送編碼在丙型肝炎病毒（HCV）中發(fā)現(xiàn)的蛋白的核酸。HCV基因產(chǎn)物可以為已知感染任何物種的動(dòng)物（包括但不限于兩棲類、爬行動(dòng)物、鳥類（例如鸛和蒼鷺）、小鼠、倉(cāng)鼠、大鼠、兔、豚鼠、土撥鼠、豬、小型豬、山羊、狗、貓、人和非人類的靈長(zhǎng)類，例如狒狒、猴和黑猩猩）的病毒。在一些實(shí)施方案中，本文所描述的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置可被用于遞送編碼在乙型肝炎病毒（HBV）中發(fā)現(xiàn)的蛋白的核酸。HBV基因產(chǎn)物可以為已知感染任何物種的動(dòng)物（包括但不限于兩棲類、爬行動(dòng)物、鳥類（例如鸛和蒼鷺）、小鼠、倉(cāng)鼠、大鼠、兔、豚鼠、土撥鼠、豬、小型豬、山羊、狗、貓、人和非人類的靈長(zhǎng)類，例如狒狒、猴和黑猩猩）的病毒。在一些實(shí)施方案中，可以向有效成分中添加輔藥。例如，根據(jù)增加或輔助其效果的需要，可以向由在本文中描述的裝置遞送的藥物中添加藥理學(xué)試劑。在另一個(gè)示例中，可以在本文中描述的裝置中使用增加抗原應(yīng)答的免疫學(xué)試劑。例如，美國(guó)專利第6,680,059號(hào)（其全部?jī)?nèi)容以引用的方式被結(jié)合至本文），描述了含三唑核苷作為疫苗佐劑的疫苗的用途。然而，輔藥可以指代有能力提高或促進(jìn)免疫應(yīng)答或增加或輔助預(yù)防性和/或治療性試劑效果的任何物質(zhì)。在一些實(shí)施方案中，與本文所公開的一種或多種抗原或編碼抗原（例如NS3/4A）的核酸一起施用的輔藥為IL-12或編碼IL-12的核酸，這些輔藥可以位于也可以不位于與編碼所關(guān)心的抗原（例如，NS3/4A）的核酸相同的構(gòu)建體上。在一些實(shí)施方案中，可在所提供的裝置和方法中使用任何核酸，例如，質(zhì)粒DNA、線形DNA、反義DNA和RNA。例如，核酸可以是本領(lǐng)域所熟知類型的DNA表達(dá)載體。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明被用于DNA或RNA接種的目的。即，本發(fā)明包括提高向細(xì)胞內(nèi)間隙注射DNA或RNA核酸的跨膜流速的方法。在一些實(shí)施方案中，所述細(xì)胞內(nèi)遞送裝置可用于向有機(jī)體的各種組織高壓注射，其中希望遞送預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)。例如，所述組織可以是骨骼肌、脂肪組織、內(nèi)臟器官、骨、結(jié)締組織、神經(jīng)組織、皮膚組織等等。例如，DNA疫苗可通過(guò)向動(dòng)物的骨骼肌進(jìn)行肌肉注射或者通過(guò)向動(dòng)物的真皮進(jìn)行皮內(nèi)注射而進(jìn)行遞送。在其它實(shí)施方案中，治療性物質(zhì)可通過(guò)胃腸外遞送的方式遞送進(jìn)入皮下或腹膜內(nèi)的組織中。根據(jù)靶組織和待遞送的預(yù)防性和/或治療性試劑，針的參數(shù)可進(jìn)行適當(dāng)修改，以提供對(duì)于達(dá)到產(chǎn)生足夠用于提高試劑遞送的壓力所必需的希望的物理性質(zhì)。在一些實(shí)施方案中，細(xì)胞內(nèi)遞送裝置可被設(shè)置為按照預(yù)設(shè)的遞送速度進(jìn)行遞送預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)。例如，注射器可以由產(chǎn)生用于推壓注射器活塞所希望的推動(dòng)速度的彈簧驅(qū)動(dòng)的裝置進(jìn)行控制，以產(chǎn)生所希望的遞送速度。美國(guó)專利第6,019,747號(hào)公開了一種這類裝置的示例，該專利的全部?jī)?nèi)容以引用的方式結(jié)合至本文。在一些實(shí)施方案中，注射器可由氣體彈簧、機(jī)電機(jī)構(gòu)、壓縮空氣或其它類似的驅(qū)動(dòng)機(jī)構(gòu)進(jìn)行控制。所述遞送速度可以，例如，至少為0.1mL/s、0.3mL/s、0.5mL/s、0.8mL/s、0.9mL/s、1.0mL/s、1.1mL/s、1.2mL/s、1.3mL/s、1.4mL/s、1.5mL/s、2.0mL/s或3.0mL/s。所述遞送速度可以，例如，不超過(guò)20.0mL/s、10.0mL/s、7mL/s、6mL/s、5mL/s、4mL/s、3mL/s或2mL/s。正如在下面所進(jìn)一步討論的，本申請(qǐng)包括使用所述注射裝置的方法。因此，所述方法可以包括以預(yù)設(shè)的速度，如任何在上面所公開的速度遞送治療性物質(zhì)。在一些實(shí)施方案中，細(xì)胞內(nèi)遞送裝置包含預(yù)防性和/或治療性試劑。所述裝置可包括，例如，配制的用于肌肉內(nèi)遞送的核酸。理想地，在包含本文所描述的一根或多根針的裝置中裝載編碼免疫原的DNA或含DNA的免疫原性組合物（例如，DNA疫苗）。然而，可以通過(guò)本文所描述的一個(gè)實(shí)施方案遞送廣泛多樣的核酸。即，在本文中描述的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案可包括從如下組成的組中選擇的一或多種核酸：mRNA、tRNA、rRNA、cDNA、miRNA（微小RNA）、siRNA（小干擾RNA）、RNAi（干擾RNA）、piRNA（Piwi-干擾RNA）、aRNA（反義RNA）、snRNA（小核RNA）、snoRNA（小核仁RNA）、gRNA（向?qū)NA）、shRNA（小發(fā)夾RNA）、stRNA（小時(shí)序RNA）、ta-siRNA（反作用小干擾RNA）、cpDNA（葉綠體DNA）、gDNA（基因組DNA）、msDNA（多拷貝單鏈DNA）、mtDNA（線粒體DNA）、GNA（乙二醇核酸）、LNA（鎖核酸）、PNA（肽核酸）、TNA（蘇糖核酸）、含嗎啉代的核酸、含硫核酸、2-O-甲基核酸，以及含一種或多種修飾的堿基或間隔區(qū)的核酸。在本說(shuō)明書描述的裝置中容納或由其遞送的核酸的濃度可從約0.1ng/ml到約50mg/ml間變化。在一些方面，在本文所描述的裝置中容納或由其遞送的核酸濃度（例如，由在本文中描述的裝置所遞送的核酸的合適劑量）位于約10ng/ml到25mg/ml之間。在進(jìn)一步的其它方面，所述核酸濃度位于100ng/ml到10mg/ml之間。在有些方面，在本文所描述的裝置中容納或由其遞送的核酸濃度（例如，由在本文中描述的裝置所遞送的核酸的合適劑量）大于或等于或低于約100ng/ml、150ng/ml、200ng/ml、250ng/ml、300ng/ml、350ng/ml、400ng/ml、450ng/ml、500ng/ml、550ng/ml、600ng/ml、650ng/ml、700ng/ml、750ng/ml、800ng/ml、850ng/ml、900ng/ml、950ng/ml、1μg/ml、2μg/ml、3μg/ml、4μg/ml、5μg/ml、6μg/ml、7μg/ml、8μg/ml、9μg/ml、10μg/ml、11μg/ml、12μg/ml、13μg/ml、14μg/ml、15μg/ml、16μg/ml、17μg/ml、18μg/ml、19μg/ml、20μg/ml、21μg/ml、22μg/ml、23μg/ml、24μg/ml、25μg/ml、26μg/ml、27μg/ml、28μg/ml、29μg/ml、30μg/ml、31μg/ml、32μg/ml、33μg/ml、34μg/ml、35μg/ml、36μg/ml、37μg/ml、38μg/ml、39μg/ml、40μg/ml、41μg/ml、42μg/ml、43μg/ml、44μg/ml、45μg/ml、46μg/ml、47μg/ml、48μg/ml、49μg/ml、50μg/ml、55μg/ml、60μg/ml、65μg/ml、70μg/ml、75μg/ml、80μg/ml、85μg/ml、90μg/ml、95μg/ml、100μg/ml、150μg/ml、200μg/ml、250μg/ml、300μg/ml、350μg/ml、400μg/ml、450μg/ml、500μg/ml、550μg/ml、600μg/ml、650μg/ml、700μg/ml、750μg/ml、800μg/ml、850μg/ml、900μg/ml、950μg/ml、1.0mg/ml、1.1mg/ml、1.2mg/ml、1.3mg/ml、1.4mg/ml、1.5mg/ml、1.6mg/ml、1.7mg/ml、1.8mg/ml、1.9mg/ml、2.0mg/ml、2.1mg/ml、2.2mg/ml、2.3mg/ml、2.4mg/ml、2.5mg/ml、2.6mg/ml、2.7mg/ml、2.8mg/ml、2.9mg/ml、3.0mg/ml、3.1mg/ml、3.2mg/ml、3.3mg/ml、3.4mg/ml、3.5mg/ml、3.6mg/ml、3.7mg/ml、3.8mg/ml、3.9mg/ml、4.0mg/ml、4.1mg/ml、4.2mg/ml、4.3mg/ml、4.4mg/ml、4.5mg/ml、4.6mg/ml、4.7mg/ml、4.8mg/ml、4.9mg/ml、5.0mg/ml、5.1mg/ml、5.2mg/ml、5.3mg/ml、5.4mg/ml、5.5mg/ml、5.6mg/ml、5.7mg/ml、5.8mg/ml、5.9mg/ml、6.0mg/ml、6.1mg/ml、6.2mg/ml、6.3mg/ml、6.4mg/ml、6.5mg/ml、6.6mg/ml、6.7mg/ml、6.8mg/ml、6.9mg/ml、7.0mg/ml、7.1mg/ml、7.2mg/ml、7.3mg/ml、7.4mg/ml、7.5mg/ml、7.6mg/ml、7.7mg/ml、7.8mg/ml、7.9mg/ml、8.0mg/ml、8.1mg/ml、8.2mg/ml、8.3mg/ml、8.4mg/ml、8.5mg/ml、8.6mg/ml、8.7mg/ml、8.8mg/ml、8.9mg/ml、9.0mg/ml、9.1mg/ml、9.2mg/ml、9.3mg/ml、9.4mg/ml、9.5mg/ml、9.6mg/ml、9.7mg/ml、9.8mg/ml、9.9mg/ml、10.0mg/ml、11mg/ml、12mg/ml、13mg/ml、14mg/ml、15mg/ml、16mg/ml、17mg/ml、18mg/ml、19mg/ml、20mg/ml、21mg/ml、22mg/ml、23mg/ml、24mg/ml、25mg/ml、26mg/ml、27mg/ml、28mg/ml、29mg/ml、30mg/ml、31mg/ml、32mg/ml、33mg/ml、34mg/ml、35mg/ml、36mg/ml、37mg/ml、38mg/ml、39mg/ml、40mg/ml、41mg/ml、42mg/ml、43mg/ml、44mg/ml、45mg/ml、46mg/ml、47mg/ml、48mg/ml、49mg/ml、50mg/ml，或位于由這些數(shù)值的任意兩個(gè)所限定且包括的范圍內(nèi)。由在本文中描述的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置提供的核酸的量可在從約1ng到10g間變化。在一些方面，在細(xì)胞內(nèi)遞送裝置中容納或由細(xì)胞內(nèi)遞送裝置所提供的核酸的量少于、大于或等于約1ng、5ng、10ng、20ng、30ng、40ng、50ng、60ng、70ng、80ng、90ng、100ng、150ng、200ng、250ng、300ng、350ng、400ng、500ng、600ng、700ng、800ng、900ng、1μg、2μg、3μg、4μg、5μg、6μg、7μg、8μg、9μg、10μg、11μg、12μg、13μg、14μg、15μg、16μg、17μg、18μg、19μg、20μg、21μg、22μg、23μg、24μg、25μg、26μg、27μg、28μg、29μg、30μg、31μg、32μg、33μg、34μg、35μg、36μg、37μg、38μg、39μg、40μg、41μg、42μg、43μg、44μg、45μg、46μg、47μg、48μg、49μg、50μg、55μg、60μg、65μg、70μg、75μg、80μg、85μg、90μg、95μg、100μg、105μg、110μg、115μg、120μg、125μg、130μg、135μg、140μg、145μg、150μg、155μg、160μg、165μg、170μg、175μg、180μg、185μg、190μg、195μg、200μg、205μg、210μg、215μg、220μg、225μg、230μg、235μg、240μg、245μg、250μg、255μg、260μg、265μg、270μg、275μg、280μg、285μg、290μg、295μg、300μg、305μg、310μg、315μg、320μg、325μg、330μg、335μg、340μg、345μg、350μg、355μg、360μg、365μg、370μg、375μg、380μg、385μg、390μg、395μg、400μg、405μg、410μg、415μg、420μg、425μg、430μg、435μg、440μg、445μg、450μg、455μg、460μg、465μg、470μg、475μg、480μg、485μg、490μg、495μg、500μg、505μg、510μg、515μg、520μg、525μg、530μg、535μg、540μg、545μg、550μg、555μg、560μg、565μg、570μg、575μg、580μg、585μg、590μg、595μg、600μg、605μg、610μg、615μg、620μg、625μg、630μg、635μg、640μg、645μg、650μg、655μg、660μg、665μg、670μg、675μg、680μg、685μg、690μg、695μg、700μg、705μg、710μg、715μg、720μg、725μg、730μg、735μg、740μg、745μg、750μg、755μg、760μg、765μg、770μg、775μg、780μg、785μg、790μg、795μg、800μg、805μg、810μg、815μg、820μg、825μg、830μg、835μg、840μg、845μg、850μg、855μg、860μg、865μg、870μg、875μg、880μg、885μg、890μg、895μg、900μg、905μg、910μg、915μg、920μg、925μg、930μg、935μg、940μg、945μg、950μg、955μg、960μg、965μg、970μg、975μg、980μg、985μg、990μg、995μg、1.0mg、1.1mg、1.2mg、1.3mg、1.4mg、1.5mg、1.6mg、1.7mg、1.8mg、1.9mg、2.0mg、2.1mg、2.2mg、2.3mg、2.4mg、2.5mg、2.6mg、2.7mg、2.8mg、2.9mg、3.0mg、3.1mg、3.2mg、3.3mg、3.4mg、3.5mg、3.6mg、3.7mg、3.8mg、3.9mg、4.0mg、4.1mg、4.2mg、4.3mg、4.4mg、4.5mg、4.6mg、4.7mg、4.8mg、4.9mg、5.0mg、5.1mg、5.2mg、5.3mg、5.4mg、5.5mg、5.6mg、5.7mg、5.8mg、5.9mg、6.0mg、6.1mg、6.2mg、6.3mg、6.4mg、6.5mg、6.6mg、6.7mg、6.8mg、6.9mg、7.0mg、7.1mg、7.2mg、7.3mg、7.4mg、7.5mg、7.6mg、7.7mg、7.8mg、7.9mg、8.0mg、8.1mg、8.2mg、8.3mg、8.4mg、8.5mg、8.6mg、8.7mg、8.8mg、8.9mg、9.0mg、9.1mg、9.2mg、9.3mg、9.4mg、9.5mg、9.6mg、9.7mg、9.8mg、9.9mg、10.0mg、11mg、12mg、13mg、14mg、15mg、16mg、17mg、18mg、19mg、20mg、21mg、22mg、23mg、24mg、25mg、26mg、27mg、28mg、29mg、30mg、31mg、32mg、33mg、34mg、35mg、36mg、37mg、38mg、39mg、40mg、41mg、42mg、43mg、44mg、45mg、46mg、47mg、48mg、49mg、50mg、55mg、60mg、65mg、70mg、75mg、80mg、85mg、90mg、95mg、100mg、150mg、200mg、250mg、300mg、350mg、400mg、450mg、500mg、550mg、600mg、650mg、700mg、750mg、800mg、850mg、900mg、950mg、1g、2g、3g、4g、5g、6g、7g、8g、9g、10g，或位于由這些數(shù)值中的任意兩個(gè)所限定且包括的范圍內(nèi)。由本文所描述的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置提供的預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)的體積可在例如從約100μL到100mL變化。在有些方面，皮下注射壓力裝置容納或由皮下注射壓力裝置提供的預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)的體積少于、大于或等于約100μL、150μL、200μL、250μL、300μL、350μL、400μL、500μL、600μL、700μL、800μL、900μL、1mL、2mL、3mL、4mL、5mL、6mL、7mL、8mL、9mL、10mL、20mL、30mL、40mL、50mL、60mL、70mL、80mL、90mL或100mL或位于由這些數(shù)值的任意兩個(gè)所限定且包括的范圍內(nèi)。本發(fā)明的方面也涉及制造一種或多種上述裝置的方法。通過(guò)一種方法，可提供一種或多種在本文中描述的針，所述針連接在含治療試劑（例如，核酸（如DNA、RNA）、蛋白或化合物）的注射器上。所述針和所述注射器的連接可以是使得所述針不能從所述注射器上移除（例如，所述針和注射器被共同模鑄）或所述連接可以是使得所述針與所述注射器是可拆分的。優(yōu)選地，在向注射器裝載治療試劑前連接所述針和注射器。所述針和注射器可在加入治療試劑之前或之后進(jìn)行滅菌。優(yōu)選地，所述針和注射器組件在加入治療試劑前滅菌，在滅菌后不久，以無(wú)菌方式加入已滅菌的治療試劑。使用理想的制造工藝生產(chǎn)包括一根或多根在本文中描述的滅菌針的一次性使用的裝置，所述滅菌針被接合在含單次劑量的一種或多種滅菌的治療試劑的一個(gè)或多個(gè)滅菌注射器上。這些一次性使用的裝置可被分開無(wú)菌包裝，使得使用者僅僅需要撕開包裝并將治療試劑注射入合適的組織中（例如，通過(guò)向肌肉注射的方式一次性使用的DNA接種）。本發(fā)明的方面也涉及使用一種或多種本文所描述的裝置的方法。通過(guò)一種方式，提供了向細(xì)胞內(nèi)遞送化合物的方法，其中容納在本文中描述的裝置中的化合物被施用到受試者上。在一些實(shí)施方案中，在本文中描述的裝置（如，包括一根或多根在本文中描述的針的注射器）中設(shè)置了化合物（例如，核酸，如DNA，或蛋白）。繼而通過(guò)將針插入受試者組織中，按壓活塞以對(duì)注射器中的溶液施加壓力，從而以所希望的壓力將所述化合物壓出所述針的孔的方式將該化合物遞送給所述受試者。組織中增加的壓力提高了細(xì)胞對(duì)化合物的攝取，從而可以進(jìn)行化合物的細(xì)胞內(nèi)遞送。事實(shí)上，任何適于以較高注射壓力將物質(zhì)注入的預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)均可被用于與本發(fā)明相結(jié)合，包括但不限于多肽、糖類、微顆粒、類固醇或低分子量的分子。例如，核酸和蛋白可同時(shí)或連續(xù)地被導(dǎo)入承受較高注射壓力的組織中。一些實(shí)施方案涉及從DNA表達(dá)蛋白的方法，其中提供了如在本文中描述的裝置（例如，包括一根或多根在本文中描述的針和DNA的注射器），所述針被插入受試者的組織（例如，肌肉）中，所述DNA在壓力下（例如，由使用活塞并將其向注射器中的DNA溶液推壓的方式施加的壓力）通過(guò)排出孔的方式被導(dǎo)入組織中，然后DNA被肌細(xì)胞所攝取?？蛇x地，含DNA的所述裝置以促進(jìn)產(chǎn)生炎性應(yīng)答的方式（例如，活化或激活與炎性應(yīng)答有關(guān)的細(xì)胞）被導(dǎo)入或使用?？蛇x地，所述裝置的針的設(shè)計(jì)（例如，多個(gè)孔）或配置方式可產(chǎn)生炎性應(yīng)答（例如，活化或激活與炎性應(yīng)答有關(guān)的細(xì)胞）?？蛇x地，對(duì)與炎性應(yīng)答有關(guān)的蛋白表達(dá)和/或細(xì)胞活化的量進(jìn)行了測(cè)量?？梢允褂妹庖邔W(xué)和/或組織化學(xué)方式進(jìn)行這樣的測(cè)量。因此,本發(fā)明的有些方面涉及對(duì)所希望的抗原誘導(dǎo)免疫應(yīng)答的方法，由此，提供了如在本文中描述的裝置（例如，包括一根或多根在本文中描述的針和DNA的注射器），所述針被插入受試者的組織（例如，肌肉）中，所述DNA在壓力下（例如，由使用活塞并將其向注射器中的DNA溶液推壓的方式施加的壓力）通過(guò)排出孔的方式被導(dǎo)入組織中，然后DNA被肌細(xì)胞所攝取。隨后，由所述DNA編碼的蛋白在細(xì)胞中得以生成，免疫系統(tǒng)對(duì)所述蛋白產(chǎn)生反應(yīng)。可選地，對(duì)由導(dǎo)入的DNA所產(chǎn)生的抗原的免疫應(yīng)答進(jìn)行測(cè)量（例如，抗體、特異性T細(xì)胞的存在情況，感染的減少或者清除，或疾病病征的減少或消失的情況）。通過(guò)使用本發(fā)明的某些實(shí)施方案，可以向骨骼肌組織中直接施用基因構(gòu)建體，便于細(xì)胞對(duì)所述基因的攝取，用于隨后合成所編碼的產(chǎn)品。在本發(fā)明的一些方法中，可使用高壓注射針向受試者的組織中推進(jìn)含DNA或RNA分子的液體。液體以足夠的速度推進(jìn)，使得在組織的影響下，所述液體向組織上施加了較高的壓力，增加了細(xì)胞滲透性，并導(dǎo)致DNA或RNA分子滲透該區(qū)域處的細(xì)胞。在一些實(shí)施方案中，可使用本文所描述的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置向其它器官的組織遞送遺傳物質(zhì)，從而向所述器官的細(xì)胞中導(dǎo)入核酸分子。事實(shí)上，很容易地認(rèn)識(shí)到，本領(lǐng)域所熟知的其它的基因遞送機(jī)制也適合用于本發(fā)明的實(shí)施方案中，包括脂質(zhì)體衍生系統(tǒng)、人造病毒包膜和其它的本領(lǐng)域所知的系統(tǒng)（Rossi,J.J.（1995）Br.Med.Bull.51:217-225；Boado,R.J.等人（1998）J.Pharm.Sci.87:1308-1315；Morris,M.C.等人（1997）NucleicAcidsRes.25:2730-2736，所有這些的全部?jī)?nèi)容均以引用的方式被包括在本申請(qǐng)中）。另外，也可使用多種輔藥（例如，三唑核苷或IL-12或編碼IL-12的核酸），以提高免疫原性和/或細(xì)胞滲透性。例如，僅通過(guò)舉例而非任何形式的限制，本發(fā)明的一些實(shí)施方案可以與在美國(guó)公開號(hào)2005-0277192和美國(guó)公開號(hào)2005-0124573中描述的構(gòu)建體聯(lián)用，這些申請(qǐng)的全部?jī)?nèi)容因此以引用的方式被明確結(jié)合至本文。這些參考文獻(xiàn)描述了編碼丙型肝炎病毒（HCV）的非結(jié)構(gòu)性蛋白3/4A（NS3/4A）的核酸在人體中促進(jìn)免疫反應(yīng)的用途。例如，觀察到當(dāng)HCVNS3/4A基因被轉(zhuǎn)染進(jìn)哺乳動(dòng)物細(xì)胞時(shí)，相對(duì)于真核表達(dá)載體，可觀察到明顯水平的NS3表達(dá)。此外，在用NS3/4A基因免疫的小鼠中發(fā)現(xiàn)已具有高水平的NS3特異性抗體和抗原特異性T細(xì)胞。最近，相似的構(gòu)建體在臨床試驗(yàn)上已被發(fā)現(xiàn)對(duì)于感染了HCV的病人可以產(chǎn)生強(qiáng)力的免疫應(yīng)答。因此，一些實(shí)施方案涉及治療和預(yù)防HCV感染的方法，其中，向感染了HCV的病人或處于HCV感染風(fēng)險(xiǎn)下的人提供在本文中描述的一種或多種裝置（含有已被顯示可以在人身上產(chǎn)生強(qiáng)力的免疫應(yīng)答的一種或多種HCVDNA構(gòu)建體）?？蛇x地，識(shí)別出對(duì)需要預(yù)防和/或治療HCV感染的藥物的個(gè)體，然后使用在本文中描述的高壓注射針裝置，向所述個(gè)體提供含已發(fā)現(xiàn)可在人體中產(chǎn)生強(qiáng)力的免疫應(yīng)答的一種或多種HCV構(gòu)建體（例如，編碼NS3/4A的表達(dá)構(gòu)建體）的藥物?？蛇x地，在治療后或處于治療階段中，對(duì)接種過(guò)的個(gè)體檢測(cè)對(duì)NS3/4A的免疫應(yīng)答，病毒效價(jià)的降低，或者抗HCV抗體的生成。然而，本發(fā)明并不局限于用于DNA免疫的HCV的抗原。事實(shí)上，本發(fā)明可在希望在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)任何抗原肽的任何時(shí)間使用。例如，與特異性疾病狀態(tài)有關(guān)的已知抗原肽的一些非限制性示例包括下列：HBV：PreSl、PreS2和表面外膜蛋白，核及polHTV：gpl20、gp40、gpl60、p24、gag、pol、env、vif、vpr、vpu、tat、rev、nef乳頭狀瘤：El、E2、E3、E4、E5、E6、E7、E8、L1、L2HSV：gL、gH、gM、gB、gC、gK、gE、gD、ICP47、ICP36、ICP4，如同在美國(guó)專利第7,074,770號(hào)，Charo等人，標(biāo)題為“DNA接種的方法（MethodofDNAvaccination）”所教導(dǎo)的，且這篇專利的全部?jī)?nèi)容以引用的方式結(jié)合至本文。在本文中描述的一些實(shí)施方案也包括和/或施用從如下組成的組中挑選出來(lái)的一種或多種核酸：mRNA、tRNA、rRNA、cDNA、miRNA（微小RNA）、siRNA、（小干擾RNA）、piRNA（Piwi-干擾RNA）、aRNA（反義RNA）、snRNA（小核RNA）、snoRNA（小核仁RNA）、gRNA（向?qū)NA）、shRNA（小發(fā)夾RNA）、stRNA（小時(shí)序RNA）、ta-siRNA（反作用小干擾RNA）、cpDNA（葉綠體DNA）、gDNA（基因組DNA）、msDNA（多拷貝單鏈DNA）、mtDNA（線粒體DNA）、GNA（乙二醇核酸）、LNA（鎖核酸）、PNA（肽核酸）、TNA（蘇糖核酸）、含嗎啉代的核酸、含硫核酸、2-O-甲基核酸，以及含一種或多種修飾的堿基或間隔區(qū)的核酸。參考附圖，圖1A描述了包含兩個(gè)針梗的皮下注射針裝置（也稱為細(xì)胞內(nèi)遞送裝置）的一個(gè)實(shí)施方案的側(cè)視圖，每個(gè)針梗具有5個(gè)孔，用于向針梗之間的區(qū)域遞送預(yù)防性和/或治療性試劑。參考圖1A，皮下注射針裝置的實(shí)施方案包括近端103，與所述近端相對(duì)的遠(yuǎn)端101，以及從遠(yuǎn)端101到近端103之間延伸的縱向軸。在一些實(shí)施方案中，細(xì)胞內(nèi)遞送裝置可包括一根或多根針。在一些實(shí)施方案中，細(xì)胞內(nèi)遞送裝置包含2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30根針。細(xì)胞內(nèi)遞送裝置包括標(biāo)準(zhǔn)連接器100和從連接器100延伸的針體102。標(biāo)準(zhǔn)連接器100和針體102被設(shè)置在與所述縱向軸基本平行的軸上。在一些實(shí)施方案中，標(biāo)準(zhǔn)連接器100為魯爾（luer）鎖或類似的機(jī)制，被設(shè)置為將所述裝置與壓力遞送裝置（未示出），比如注射器或泵進(jìn)行連接。所述針的末梢端可以是鈍形、斜面形、錐形、削尖或尖角形，使得操作者可穿透受試者（例如，人，家養(yǎng)動(dòng)物，例如貓或狗，或家畜，如馬、母牛、豬或雞）的皮膚，以到達(dá)位于下面的所希望的靶組織。例如，端部105a、105b可包括常規(guī)的醫(yī)療尖端（例如，“手術(shù)刀尖端”）。在一些實(shí)施方案中，端部105a、105b可以是鈍的。在一些實(shí)施方案中，所述針的末梢端閉合，使得端部不能夠在針梗的腔部和針體的遠(yuǎn)端之間形成流體連接。在其它實(shí)施方案中，所述末梢端是開放的，使得端部在針梗和針的遠(yuǎn)端之間建立流體連接。在一些實(shí)施方案中，所述皮下注射針裝置或細(xì)胞內(nèi)遞送裝置可被設(shè)置為是一次性處理的裝置，其中預(yù)防性和/或治療性試劑容納在所述裝置內(nèi)，不需要其它的連接。針體102可包括從莖或插管115處延伸的一個(gè)或多個(gè)針遞送針梗120a和120b。莖115可包括中央腔道或通道。每根針梗120a、120b也包括與莖115和標(biāo)準(zhǔn)連接器100流體連接的至少一個(gè)腔道。在圖示的實(shí)施方案中，針體102包括兩根針遞送針梗120a、120b，每根針梗120包括末梢端105a、105b。針梗120a、120b的長(zhǎng)度可以變化。在一些實(shí)施方案中，針梗120a、120b每個(gè)均為大約相同的長(zhǎng)度，而在一些實(shí)施方案中，所述針梗為不同的長(zhǎng)度。針梗120a、120b可處于從約2mm到約100mm的范圍內(nèi)。針梗120a和120b的規(guī)格可以在裝置到裝置之間或可在同一個(gè)裝置中的針梗120a到針梗120b之間變化。在一些實(shí)施方案中，由在所述裝置遠(yuǎn)端的針梗120a、120b之間的空間所形成的開口的尺寸足夠大，使得針梗120a、120b可以包圍一個(gè)或多個(gè)細(xì)胞。針梗120a、120b每一個(gè)均可包括沿所述針梗的長(zhǎng)度設(shè)置的孔110a、110b。在一些實(shí)施方案中，每個(gè)針梗120a、120b包括至少一個(gè)孔110a、110b。在其它實(shí)施方案中，至少有一根針梗120a、120b不包括孔110a、110b。在一些實(shí)施方案中，孔110a、110b的每一個(gè)的大小與形狀可在針梗與針梗間變化。在一些實(shí)施方案中，所述針的長(zhǎng)度可在針梗與針梗間變化。每個(gè)針梗120a、120b可包括0到100個(gè)孔。在一些實(shí)施方案中，所述針沿所述針的長(zhǎng)度具有1或2個(gè)孔（例如，閉合端部的針沿所述針的長(zhǎng)度具有至少兩個(gè)孔）。在其它實(shí)施方案中，所述針有許多孔，可以準(zhǔn)確是，少于，或多于2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99或100個(gè)。所述孔可位于靠近針梗的遠(yuǎn)端處或沿所述針梗長(zhǎng)度的任何地方。每個(gè)針筒上的每個(gè)孔可被設(shè)置在與縱向軸基本平行的平面上。所述孔也可沿著基本上與所述裝置的縱向軸平行且朝向縱向軸的線段設(shè)置。在其它實(shí)施方案中，所述孔可被設(shè)置在并非基本與所述裝置的縱向軸平行的一個(gè)或多個(gè)平面上。每個(gè)孔可朝向同一個(gè)點(diǎn)，例如，位于一個(gè)基本上與所述縱向軸平行的軸上的點(diǎn)，或者每個(gè)孔可朝向不同的點(diǎn)或方向。所述孔在尺寸和形狀上可有所變化。例如，孔可以是圓形、圓、總體為曲線、正方形、矩形、三角形、總體為多邊形、總體上為對(duì)稱、總體上不對(duì)稱或不規(guī)則形狀。另外，每個(gè)針梗內(nèi)的孔的尺寸和形狀均可有所變化。例如，在一些實(shí)施方案中，針梗上的第一孔可以是總體上為曲線的，其直徑約1mm，所述針梗上的第二孔可以是與所述第一孔相同的形狀，直徑約1.50mm。在一些實(shí)施方案中，每個(gè)孔可具有大體上相同的形狀和相同的尺寸。所述孔在尺寸和形狀上可有所變化。例如，孔可以是圓形、圓、總體為曲線、正方形、矩形、三角形、總體為多邊形、總體上為對(duì)稱、總體上不對(duì)稱或不規(guī)則形狀。另外，每個(gè)針梗內(nèi)的孔的尺寸和形狀均可有所變化。例如，在一個(gè)實(shí)施方案中，針梗上的第一孔可以是總體上為曲線的，其直徑約1mm，所述針梗上的第二孔可以是與所述第一孔相同的形狀，直徑約1.50mm。在其它實(shí)施方案中，每個(gè)孔可具有大體上相同的形狀和相同的大小。圖1B示出了含四個(gè)針梗的針集合器的一個(gè)實(shí)施方案的分解立體圖，所述針梗用于向所述針梗之間的區(qū)域遞送預(yù)防性和/或治療性試劑。含螺紋的魯爾連接器130被設(shè)置為與含預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)的注射器（未示出）接合。集合器插入段140在集合器插入段140的末梢側(cè)包含多根針150。針150可以是不同的構(gòu)造，包括本文所描述的任何構(gòu)造。套環(huán)160被設(shè)置為與含螺紋的魯爾連接器130接合并固定集合器插入段140。墊圈170可任選地設(shè)置在集合器插入段140上，以保證從注射器到多根針150的密封通道。如上面所討論的，所述針可任選地包括多個(gè)孔（例如，在圖1A中所描述的）。孔的尺寸、形狀和數(shù)量可以進(jìn)行選擇，以將注射流體或遺傳物質(zhì)的遞送效率最大化，以在所述注射腔空間內(nèi)產(chǎn)生最佳的壓力從而提高細(xì)胞膜透性，或者兩者都做到。參考圖2A，一種細(xì)胞內(nèi)遞送裝置包括兩個(gè)針梗220a、220b，每一個(gè)均包括三個(gè)孔210a、210b和尖角形的末梢端205a、205b。末梢端205a、205b由間隔203彼此分離開。從末梢端205a、205b在靠近的方向上移動(dòng)，開口203形成了在針梗220a、220b間形成的注射腔空間204。在一些實(shí)施方案中，由位于針梗220a、220b之間的空間所形成的、位于端部205a、205b之間的開口203在尺寸上足夠大，使得針梗220a、220b可以圍繞注射腔空間204中的一個(gè)或多個(gè)細(xì)胞。在一些實(shí)施方案中，為了制造用于向靶組織遞送包含所希望的試劑的流體的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置，針220a和/或220b可以包括多個(gè)總體上為曲線的孔210a、210b，孔210a、210b的寬度或直徑為從約0.01mm到約4.0mm。在一些實(shí)施方案中，孔210a、210b在它們最寬處的寬度大于、小于或等于約0.01μm、0.02μm、0.03μm、0.04μm、0.05μm、0.06μm、0.07μm、0.08μm、0.09μm、0.1μm、0.15μm、0.2μm、0.25μm、0.3μm、0.35μm、0.4μm、0.45μm、0.5μm、0.55μm、0.6μm、0.65μm、0.7μm、0.75μm、0.8μm、0.85μm、0.9μm、0.95μm、1.0μm、1.5μm、2.0μm、2.5μm、3.0μm、3.5μm、4.0μm、4.5μm、5.0μm、5.5μm、6.0μm、6.5μm、7.0μm、7.5μm、8.0μm、8.5μm、9.0μm、9.5μm、0.01mm、0.02mm、0.03mm、0.04mm、0.05mm、0.06mm、0.07mm、0.08mm、0.09mm、0.1mm、0.15mm、0.2mm、0.25mm、0.3mm、0.35mm、0.4mm、0.45mm、0.5mm、0.55mm、0.6mm、0.65mm、0.7mm、0.75mm、0.8mm、0.85mm、0.9mm、0.95mm、1.0mm、1.05mm、1.10mm、1.15mm、1.20mm、1.25mm、1.30mm、1.35mm、1.40mm、1.45mm、1.50mm、1.55mm、1.60mm、1.65mm、1.70mm、1.75mm、1.80mm、1.85mm、1.90mm、1.95mm、2.0mm、2.05mm、2.10mm、2.15mm、2.20mm、2.25mm、2.30mm、2.35mm、2.40mm、2.45mm、2.50mm、2.55mm、2.60mm、2.65mm、2.70mm、2.75mm、2.80mm、2.85mm、2.90mm、2.95mm、3.0mm、3.05mm、3.10mm、3.15mm、3.20mm、3.25mm、3.30mm、3.35mm、3.40mm、3.45mm、3.50mm、3.55mm、3.60mm、3.65mm、3.70mm、3.75mm、3.80mm、3.85mm、3.90mm、3.95mm,或位于由這些數(shù)值中的任意兩個(gè)所限定且包括的范圍內(nèi)。在其它實(shí)施方案中，可以選擇多個(gè)（例如，十個(gè)）總體上為曲線的孔210a、210b，孔210a、210b的直徑的范圍是約10nm到約2.0mm。通過(guò)調(diào)節(jié)孔210a、210b的尺寸、形狀和數(shù)量，并且結(jié)合針220a和220b所插入的壓力傳輸介質(zhì)的物理特性，所述細(xì)胞內(nèi)遞送裝置可傳遞范圍是約1到約5000千帕的局部壓力。本文所描述的針可被設(shè)置為在大于、小于、等于1、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、105、110、115、120、125、130、135、140、145、150、155、160、165、170、175、180、185、190、195、200、300、400、500、1000、2000、3000、4000或5000千帕或在這些數(shù)值之間的任何數(shù)值的范圍內(nèi)的壓力下遞送流體。注射腔空間204內(nèi)容納的的組織中增加的局部壓力改變了所述組織內(nèi)細(xì)胞的細(xì)胞膜透性特征，促進(jìn)了試劑（例如，DNA）進(jìn)入細(xì)胞。針220a和220b的長(zhǎng)度可在約0.5cm到約15cm間變化。在一些實(shí)施方案中，所述針為、約為、至少為、至少約為、不超過(guò)、不超過(guò)約0.5、0.75、1.0、1.25、1.5、2.0、2.25、2.5、2.75、3.0、3.25、3.5、3.75、4.0、4.25、4.5、4.75、5.0、5.25、5.5、5.75、6.0、6.25、6.5、6.75、7.0、7.25、7.5、7.75、8.0、8.25、8.5、8.75、9.0、9.25、9.5、9.75、10.0、10.25、10.5、10.75、11.0、11.25、11.5、11.75、12.0、12.25、12.5、12.75、13.0、13.25、13.5、13.75、14.0、15.25、14.5、14.75或15cm，或這些值間的任意值。在一些實(shí)施方案中，所述針的長(zhǎng)度大于1cm。在一些實(shí)施方案中，所述針的長(zhǎng)度大于15mm。在一些實(shí)施方案中，所述針的長(zhǎng)度大于20mm。雖然端部205a、205b被示出朝向所述裝置的縱向軸斜面成角，但斜面也可以在相反的方向或不同的方向成角（參見圖4），使得可以擴(kuò)展組織，并通過(guò)位于針梗220a、220b之間設(shè)置的區(qū)域向設(shè)置在其間的注射腔空間204中遞送至少一些靶組織。在一些實(shí)施方案中，每個(gè)端部可以包括多個(gè)斜邊，例如兩個(gè)、三個(gè)、四個(gè)、五個(gè)、六個(gè)或更多個(gè)斜邊。這可以使得端部沿其軸總體上旋轉(zhuǎn)對(duì)稱，可以為每根針提供相同的插入。在一些實(shí)施方案中，端部205a和205b可包括套針尖端（trocartip），或含四個(gè)斜邊的“四棱”（“quadcar”）端部，其可被用于本文所公開的注射裝置中的一根或多根針上。在一些實(shí)施方案中，針220a和220b可具有相似或不同的端部205a和205b。在一些實(shí)施方案中，在針端部的至少一個(gè)斜邊與在相同的針上的一個(gè)或多個(gè)孔朝向總體上相同的方向。在一些實(shí)施方案中，針端部上沒(méi)有任何斜邊與在相同的針上的任何孔朝向總體上相同的方向。試劑的遞送壓力可影響治療的效果和安全性。例如，施加過(guò)多的壓力可對(duì)細(xì)胞帶來(lái)不希望的損傷，而施加過(guò)小的壓力可能不會(huì)產(chǎn)生攝取所述試劑所需的足夠的滲透性改變。流體動(dòng)力學(xué)原理和相關(guān)方程可用于計(jì)算注射腔空間204中可接受的壓力范圍。例如，針梗220a、220b的幾何特性和試劑的流體特性（比如，粘度和密度），會(huì)影響注射腔空間204中的局部壓力。在一些實(shí)施方案中，可選擇孔210a、210b的大小與形狀，液體和遞送的試劑，以及驅(qū)動(dòng)壓力以在注射腔空間204中產(chǎn)生所希望的局部壓力。達(dá)西韋史巴赫方程，比如說(shuō)，可被用于根據(jù)流動(dòng)的流速、流體的粘度以及針梗腔道的直徑與管長(zhǎng)的比值來(lái)確定壓降情況。當(dāng)使用不同的載體媒介流體（如磷酸鹽緩沖液、甘油、乙醇、去離子水、過(guò)濾水、各種油類、乳劑等等）時(shí)，由于每種流體具有各自的粘度特性，該方程（除了其它方面以外）在確定合適的孔210a、210b的尺寸時(shí)是有用的。標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算流體動(dòng)力學(xué)軟件可被用于確定針梗和孔的最佳物理參數(shù)，以達(dá)到所希望的壓降。然而，本發(fā)明并不局限于使用流體產(chǎn)生壓降，還可利用其它類型的壓力傳輸介質(zhì)。例如，在一些實(shí)施方案中，空氣或其它氣體，例如CO2或N2，可被用于將壓力傳送到組織上。圖2B示出了皮下注射針裝置或細(xì)胞內(nèi)遞送裝置的一個(gè)實(shí)施方案，在每根針上以相同的間距設(shè)孔五個(gè)孔。每根針230包括五個(gè)孔235，每個(gè)孔之間具有間距240，所述間距從每個(gè)孔的中心測(cè)量，或是從每個(gè)孔對(duì)應(yīng)的邊緣測(cè)量。在一些實(shí)施方案中，孔之間的間距對(duì)于針中的所有孔都是相同的，或者在一些實(shí)施方案中，間距240可以不同。所述間距可以為，大約、至少、至少約、不超過(guò)、不超過(guò)約0.01mm、0.05mm、0.1mm、0.15mm、0.2mm、0.25mm、0.3mm、0.4mm、0.5mm、0.6mm、0.7mm、0.8mm、0.9mm、1mm、2mm、3mm、4mm、5mm、6mm、7mm、8mm、9mm、1cm、2cm或3cm?？?35被設(shè)置為第一根針上的每個(gè)孔朝向第二根針上的相應(yīng)的第二孔。這種設(shè)置使得治療性物質(zhì)在彼此面向的孔之間進(jìn)行相對(duì)的流體流動(dòng)或交叉噴射。在一些實(shí)施方案中，所有的孔被設(shè)置為朝向（或背向）位于不同的針的另一個(gè)孔。在一些實(shí)施方案中，至少2、4、6、8、10、16、20、30、40、50或60個(gè)所述孔被設(shè)置為朝向（或背向）位于不同的針上的另一個(gè)孔。圖2C示出了含三根針的針集合器的一個(gè)實(shí)施方案，并描述了皮下注射針集合器的尺寸。集合器245包括流體連接在集合器245遠(yuǎn)端的三根針250。每根針250均具有從集合器245的遠(yuǎn)端到針尖257的針的長(zhǎng)度255。針的長(zhǎng)度255可根據(jù)靶組織而不同，以遞送預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)。針尖257和針上距針尖257最遠(yuǎn)處的孔235之間的間距265可以不同。例如，間距265可以在0.1mm和5cm之間，例如約1mm、2mm、3mm、4mm、5mm、6mm、7mm、8mm、9mm、10mm、11mm、12mm、13mm、14mm、15mm、16mm、17mm、18mm、19mm、20mm、21mm、22mm、23mm、24mm、25mm、26mm、27mm、28mm、29mm、3cm、3.5cm、4cm或更大，或這些值中的任意兩個(gè)值之間的范圍。在一些實(shí)施方案中，間距265可以大于10mm。在一些實(shí)施方案中，間距265可以大于11mm。在一些實(shí)施方案中，間距265可以大于15mm。在一些實(shí)施方案中，間距265可以大于20mm。類似地，距離針尖257最近處的孔235和距離針尖257最遠(yuǎn)處的孔之間的間距270也可不同。在一些實(shí)施方案中，間距257可以在0.5mm和10cm之間，例如約為1mm、2mm、3mm、4mm、5mm、6mm、7mm、8mm、9mm、1cm、2cm、3cm、4cm、5cm、6cm、7cm、8cm、9cm或更大。圖2D示出了含四根交錯(cuò)設(shè)置的針的針集合器的一個(gè)實(shí)施方案。集合器275包括流體連接在集合器245遠(yuǎn)端的四根針280、285、287和290。針287比針290長(zhǎng)出間距295。針280比針285、290長(zhǎng)，但短于針287。也可使用多種其它類型的交錯(cuò)布置。在一些實(shí)施方案中，所述注射裝置包括多根針，其中至少一根或多根針具有第一長(zhǎng)度，一根或多根針具有比所述第一長(zhǎng)度長(zhǎng)的第二長(zhǎng)度。在一些實(shí)施方案中，每根針可具有不同的長(zhǎng)度。在一些實(shí)施方案中，間距295可以例如為，至少0.1mm、0.15mm、0.2mm、0.25mm、0.3mm、0.4mm、0.5mm、0.6mm、0.7mm、0.8mm、0.9mm、1mm、2mm、3mm、4mm或5mm。所述針之間長(zhǎng)度的差距可以，例如，不超過(guò)5cm、2cm、1cm、5mm、4mm、3mm、2mm或1mm。圖3示出了含兩個(gè)針梗的皮下注射針裝置或細(xì)胞內(nèi)遞送裝置的一個(gè)實(shí)施方案的側(cè)視圖，其中每個(gè)針梗具有十個(gè)孔，用于向針梗之間的區(qū)域遞送治療性試劑。針梗320a、320b包括與中央腔道315流體連接的腔道。增壓的預(yù)防性和/或治療性試劑可通過(guò)中央腔道315被引導(dǎo)進(jìn)入針梗320a、320b中，并且可通過(guò)孔310a、310b從針梗320a、320b中流出。每個(gè)針梗320a、320b均包括十個(gè)沿所述針梗的末梢長(zhǎng)度處均勻分布的曲線孔?？?10a、310b被設(shè)置為將增壓的試劑引導(dǎo)向所述裝置的縱向軸，從而，位于針梗320a上的孔310a朝向針梗320b上的孔310b。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述孔可被設(shè)置在靠近針梗320a、320b的端部處，位于距針梗的近端約1mm和約3mm之間。圖4示出了皮下注射針裝置或細(xì)胞內(nèi)遞送裝置向肌細(xì)胞中遞送包括DNA的預(yù)防性和/或治療性試劑的一個(gè)實(shí)施方案的側(cè)視圖。預(yù)防性和/或治療性試劑430可包括如本文所描述的用于遞送進(jìn)入細(xì)胞450的部分中或進(jìn)入多個(gè)細(xì)胞中的基因、核酸、蛋白或其它大分子。如在圖4所圖示的，細(xì)胞內(nèi)遞送裝置已經(jīng)被插入肌肉組織中，因此注射腔空間404圍繞了一個(gè)肌細(xì)胞450的至少局部。高壓源的流體（未示出）被引導(dǎo)進(jìn)入所述裝置的中央腔道415中并穿過(guò)每一個(gè)針梗420a、420b的腔道，然后通過(guò)孔410a、410b排出并進(jìn)入注射腔空間404中。在每個(gè)孔410a、410b處存在的高壓起因于將流體壓進(jìn)位于注射腔空間404中的組織中時(shí)所施加的壓力。所引起的局部壓力的增加改變了膜的滲透性，以提高注射成分的攝取。所引起的滲透性的變化使得藥物、核酸和其它化合物進(jìn)入細(xì)胞的內(nèi)部。如本文所描述的，針梗的數(shù)量可根據(jù)注射裝置所打算的應(yīng)用、制造所述注射裝置所使用的制造工藝、所希望的局部壓力的量和/或其它因素進(jìn)行變化。在一些實(shí)施方案中，針梗的數(shù)量可以等于或大于1、2、3、4、5、6、7、8、9、10或更多。圖5A示出了細(xì)胞內(nèi)遞送裝置的俯視圖。針梗520a、520b、520c可設(shè)置在連接器或中央腔道外殼500的中心的周圍。針梗520a、520b、520c可形成等邊、等腰、不等邊或直角三角形。連接器500的直徑D1可以跟針梗520之間的距離L1一樣進(jìn)行變化。在一些實(shí)施方案中，連接器500的直徑D1在約3mm到約25mm間變化，針梗之間的距離L1在約1mm到約8mm，或更大的范圍內(nèi)變化。L1可從針梗的中心到鄰近針梗的中心測(cè)量，或從一個(gè)針梗的邊緣到鄰近針梗的對(duì)應(yīng)的邊緣測(cè)量。圖5B示出了含三個(gè)針梗的皮下注射針裝置或細(xì)胞內(nèi)遞送裝置的一個(gè)實(shí)施方案的側(cè)視圖。針梗520a-c分別連接至三個(gè)分開的注射器501a、501b、501c。所述注射器可被設(shè)置為容納有相似或不同量的向病人遞送的治療性試劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，每個(gè)注射器被設(shè)置為含有1毫升的預(yù)防性和/或治療性試劑。每個(gè)注射器501a、501b、501c包括從其中縱向延伸的針梗520a、520b、520c。每個(gè)針梗520包括多個(gè)朝向所述裝置的縱向軸的孔510a、510b、510c。位于每個(gè)針梗520a、520b、520c上的孔510a、510b、510c的數(shù)量可從1到20變化。在一個(gè)實(shí)施方案中，位于針梗520上的孔510均勻分布，每個(gè)孔相距約超過(guò)0.2mm。每單位長(zhǎng)度的針梗520的容量范圍可根據(jù)孔510之間的間距進(jìn)行變化。在一個(gè)實(shí)施方案中，每一毫米長(zhǎng)度的針梗520對(duì)應(yīng)75μl的預(yù)防性和/或治療性試劑。三個(gè)注射器501可被排列成以所述裝置的縱向軸為中心的等邊三角形的形狀，每個(gè)針梗520與另外兩個(gè)針梗的每一個(gè)的距離大約相等。針梗520之間的間距可根據(jù)孔510的數(shù)量進(jìn)行變化。在一個(gè)實(shí)施方案中，每個(gè)針梗520包括十個(gè)孔510，所述針被設(shè)置為彼此距離約3.0mm。在另一個(gè)實(shí)施方案中，每個(gè)針梗520包括8個(gè)孔510，所述針被設(shè)置為彼此距離約2.2mm。在另一個(gè)示例性實(shí)施方案中，每個(gè)針梗520包括六個(gè)孔，所述針被設(shè)置為彼此距離約1.5mm。而在另一個(gè)實(shí)施方案中，每個(gè)針梗520包括孔510a-c，所述針被設(shè)置為彼此距離約1.0mm。孔510a-c可以朝向不同的方向。在一些實(shí)施方案中，孔510a-c可面向鄰近的針。在一些實(shí)施方案中，孔510a-c可面向相反的針，并產(chǎn)生如在圖5C中示出的交叉噴射模式。圖5C示出了向受試者的組織590遞送治療性試劑的圖5B的皮下注射針裝置或細(xì)胞內(nèi)遞送裝置的立體圖。現(xiàn)在參考圖6A，示出了含兩個(gè)針梗的皮下注射針裝置或細(xì)胞內(nèi)遞送裝置的一個(gè)實(shí)施方案的側(cè)視圖，其中每個(gè)針梗以相對(duì)于裝置的縱向軸呈一定角度進(jìn)行設(shè)置。圖6A中的注射裝置包括兩個(gè)注射器620a、620b，每個(gè)均被設(shè)置為相對(duì)于所述裝置的縱向軸呈一定角度。支架670將注射器620相對(duì)于彼此保持就位，并總體上與所述裝置的縱向軸對(duì)準(zhǔn)。圖6B示出了含兩個(gè)針梗和一個(gè)連接器配件的皮下注射針裝置或細(xì)胞內(nèi)遞送裝置的一個(gè)實(shí)施方案的立體圖。針梗620a、620b流體連接至被罩在外殼或連接器600內(nèi)的共同的腔道615。針梗620a、620b彼此基本平行，將通過(guò)共同的腔道615引入至所述針梗的預(yù)防性和/或治療性試劑分配至受試者。圖6C示出了含連接器配件的皮下注射針裝置或細(xì)胞內(nèi)遞送裝置的俯視圖。針梗620a、620b可以彼此相距距離L2，連接器600可具有直徑或?qū)挾菵2。連接器600的直徑D2可以跟針梗620之間的距離L2一樣進(jìn)行變化。在一個(gè)實(shí)施方案中，連接器600的直徑D2在約3mm到約25mm間變化，針梗之間的距離L2在約1mm到約6mm間變化。圖7A示出了含六個(gè)針筒的皮下注射針裝置或細(xì)胞內(nèi)遞送裝置的一個(gè)實(shí)施方案的立體圖，每個(gè)針梗具有多個(gè)孔，用于向受試者的組織遞送預(yù)防性和/或治療性試劑。六個(gè)針的針筒720a-f從連接器700基本彼此平行地延伸。連接器700容納有共同的腔道715，共同的腔道715將增壓的預(yù)防性和/或治療性試劑分配到針梗720中。圖7B為圖7A的注射裝置的俯視圖。如圖7B所示，五個(gè)針梗720形成了以連接器700的中心為中心的五角形或五邊形。所述五個(gè)針梗720中的每一個(gè)與左側(cè)和右側(cè)的針梗720相距距離L3。第六個(gè)針梗720設(shè)置在五邊形的中心，與另外五個(gè)針梗相距距離L4。連接器700也可具有最大寬度為D3的直徑。在一些實(shí)施方案中，直徑D3可在約3mm和約25mm之間。距離L4和L3可彼此相等或不同。在一些實(shí)施方案中，距離L4在從約1mm到約6mm的范圍內(nèi)，距離L3在從約1mm到約6mm的范圍內(nèi)。圖8A示出了含四個(gè)針梗的皮下注射針裝置或細(xì)胞內(nèi)遞送裝置的一個(gè)實(shí)施方案的側(cè)視圖。針梗820與被罩在連接器800內(nèi)的共同的腔道815流體連接。每個(gè)針梗820可以包括任意數(shù)量的內(nèi)部朝向孔810a-d，比如，六或十個(gè)。在一些實(shí)施方案中，針梗820a-d可沿所述裝置的縱向軸設(shè)置，可以不設(shè)有孔810a-d，或包括背離所述裝置的中心或縱向軸的孔810a-d。例如，針梗820b可包括含孔的三個(gè)區(qū)，每個(gè)區(qū)包括朝向選自針820a、針820c或針820d的一根針的孔。所述區(qū)可包括孔，每個(gè)孔與其它區(qū)相比朝向不同的針820a-d。針梗820a-d可從連接器800處延伸出在約3mm和約100mm之間的長(zhǎng)度L5。圖8B示出了包括連接器800和針梗820a-d的圖8A的注射裝置的俯視圖。三個(gè)針梗820a、820c和820d可被設(shè)置為三角形，以所述裝置的縱向軸為中心，與連接器800共享同一個(gè)中心。針梗820b位于與周圍的針梗820a、820c和820d等距離的位置。這種針的排列方式可被稱為“Y-形構(gòu)造”。針梗820a-d可彼此相距距離L6。這一距離L6可以在約2mm和約12mm之間變化。例如，L6可以為約3mm或約6mm。連接器800的直徑或最大寬度D4的尺寸在約3mm到約20mm的范圍內(nèi)。一種所述細(xì)胞內(nèi)遞送裝置可包括如圖8B所描繪的四根針。在一些實(shí)施方案中，L6為6mm。在一些實(shí)施方案中，L6可以從約0.1mm到約6mm。在四根針上的孔的總量為72。中心針包括沿所述針的軸成三排分布的36個(gè)孔，每一排均朝向一根外部針。三根外部針的每一根均包括朝向中心針的單排的12個(gè)孔，以產(chǎn)生在針之間的交叉流動(dòng)。所述孔的直徑可以為0.1mm，間距為約0.2mm。在Y-形構(gòu)造中，所述中心針可具有被設(shè)置為向3個(gè)方向生成流動(dòng)的孔，所述流動(dòng)是從針梗向每根外部針的流動(dòng)。類似地，所述外部針可具有沿針梗的長(zhǎng)度設(shè)置的的孔，使得治療性試劑從每個(gè)針梗流向中心針。在一些實(shí)施方案中，一種所述細(xì)胞內(nèi)遞送裝置包括如圖8B所描繪的四根針，其中L6為3mm。在四根針上的孔的總量為72。中心針包括沿所述針的軸成三排分布的36個(gè)孔，每一排均朝向一根外部針。三根外部針的每一根均包括朝向中心針的單排的12個(gè)孔，以產(chǎn)生在針之間的交叉流動(dòng)。所述孔的直徑可以為0.05mm，間距為約0.2mm。圖8C示出了圖8A的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置的一個(gè)實(shí)施方案的俯視圖。針830a-d構(gòu)成了正方形或任意其它四邊形，如梯形、等腰梯形、平行四邊形、風(fēng)箏形、斜方形或矩形的點(diǎn)，在針830d和針830b之間具有距離L7。這一距離L7可在約2mm和約12mm間變化，例如3mm或6mm。在一些實(shí)施方案中，L7可以為從約0.1mm到約6mm或這兩者間的任意距離。在一些實(shí)施方案中，每根針可被設(shè)置為具有第一區(qū)的孔，所述第一區(qū)的孔朝向第一鄰近針。例如，針830b可以包括第一區(qū)的孔，所述第一區(qū)的孔朝向針830a。在一些實(shí)施方案中，每根針可被設(shè)置為具有第二區(qū)的孔，所述第二區(qū)的孔朝向第二鄰近針。例如，針830b可以包括第一區(qū)的孔和第二區(qū)的孔，所述第一區(qū)的孔朝向針830a，所述第二區(qū)的孔朝向針830c。在一些實(shí)施方案中，每根針可被設(shè)置為具有第三區(qū)的孔，所述第三區(qū)的孔朝向第三鄰近針。例如，針830b可以包括：（朝向針830a的）第一區(qū)的孔，（朝向針830c的）第二區(qū)的孔，以及（朝向針830d的）第三區(qū)的孔。在一些實(shí)施方案中，每根針被設(shè)置為具有相同數(shù)量的區(qū)。在一些實(shí)施方案中，每個(gè)區(qū)包括相同數(shù)量的孔。在一些實(shí)施方案中，每根針可包括三個(gè)區(qū)的任一個(gè)或其組合。針830可以任選地設(shè)置為形成菱形，例如平行四邊形或斜方形。根據(jù)孔區(qū)的具體組成，這種針的排列方式可被稱為“O形或X形樣式”。在O形樣式中，針830a-d上的區(qū)被設(shè)置為僅朝向鄰近的針，形成類似于“O”的噴射模式。在X-形樣式中，針830a-d上的區(qū)被設(shè)置為朝向鄰近和對(duì)面的針，形成的噴射模式部分類似于“X”。在一些實(shí)施方案中，所述注射裝置包括如圖8C所描繪的針，其中L7為3mm，每根針包括沿所述針的軸成三排分布的18個(gè)孔（18的4倍為總共72個(gè)孔）。每一排朝向三根其它針中的一根，以生成在針之間的交叉流動(dòng)，并在與四根針等距的中心附近聚合流動(dòng)。所述孔的直徑可以為0.05mm，間距為約0.2mm。在一些實(shí)施方案中，所述細(xì)胞內(nèi)遞送裝置包括如圖8C所描繪的針，其中L7為3mm，每根針包括沿所述針的軸成二排分布的24個(gè)孔（24的4倍為總共96個(gè)孔）。每一排朝向鄰近的針，以生成在針之間的交叉流動(dòng)。所述孔的直徑可以為0.1mm，間距為約0.2mm。在一些實(shí)施方案中，所述細(xì)胞內(nèi)遞送裝置包含如圖8C所描繪的針，其中L7為6mm，每根針包括沿所述針的軸成三排分布的36個(gè)孔（36的4倍為總共144個(gè)孔）。每一排朝向三根其它針中的一根，以生成在針之間的交叉流動(dòng)，并在與四根針等距的中心附近聚合流動(dòng)。所述孔的直徑可以為0.1mm，間距為約0.2mm。在一些實(shí)施方案中，所述細(xì)胞內(nèi)遞送裝置包含如圖8C所描繪的針，其中L7為6mm，每根針包括沿所述針的軸成二排分布的18個(gè)孔（18的4倍為總共72個(gè)孔）。每一排朝向鄰近的針，以生成在針之間的交叉流動(dòng)。所述孔的直徑可以為0.05mm，間距為約0.2mm。圖9-15示出了注射裝置的多種其它實(shí)施方案的俯視圖。這些注射裝置中的每一個(gè)都包括多個(gè)針梗，并且可包括設(shè)置在針梗上的孔。所述孔可被設(shè)置為向受試者遞送增壓的預(yù)防性和/或治療性試劑和/或向受試者施加負(fù)壓。圖9示出了含四個(gè)針梗的皮下注射針裝置或細(xì)胞內(nèi)遞送裝置的一個(gè)實(shí)施方案的俯視圖。每個(gè)針梗920a-d包括至少一個(gè)向內(nèi)或中心朝向的孔910，孔910被設(shè)置為將增壓的預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)遞送進(jìn)注射空間904中。圖10A示出了含七個(gè)針梗的皮下注射針裝置或細(xì)胞內(nèi)遞送裝置的一個(gè)實(shí)施方案的俯視圖。六個(gè)針梗1020形成六邊形，第七個(gè)針梗設(shè)置在靠近該六邊形的中心處。圖10B示出了含七個(gè)針梗的皮下注射針集合器的立體圖。針梗1020a-g被設(shè)置為至少部分位于集合器1045內(nèi)。參考圖10A和10B，六個(gè)針梗1020a-c和1020e-g被排列在第七個(gè)中心針梗1020d周圍?？?010可被排列在區(qū)中，使得所述孔指向鄰近的針梗和中心針梗。例如，如通過(guò)圖10A中的箭頭所描繪的，在一個(gè)針梗1020a上，在第一區(qū)中的孔朝向第一鄰近針梗1020g，在第二區(qū)中的孔朝向第二鄰近針梗1020b，在第三區(qū)中的孔朝向中心針梗1020d。在一些實(shí)施方案中，距離D10可以為從約0.5mm到約12mm的任意距離或這兩者間的任意距離。在一些實(shí)施方案中，D10可以為約3mm。在一些實(shí)施方案中，D10可以為約6mm。圖11示出了含有十個(gè)針梗1120a-j的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置的一個(gè)實(shí)施方案，每個(gè)針梗包括至少一個(gè)向內(nèi)的或中心朝向的孔1110a-j，孔1110a-j被設(shè)置為向注射空間1104遞送增壓的預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)。圖12-14示出了細(xì)胞內(nèi)遞送裝置的實(shí)施方案，其中增壓的治療性試劑對(duì)于注射腔空間被不對(duì)稱地進(jìn)行遞送。這在某些情況下，例如，在僅僅向組織的一部分或某一區(qū)域，而非是所有部位遞送更加聚集的正壓時(shí)可能是比較理想的。圖12示出了含有三個(gè)針梗1220a-c的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置的一個(gè)實(shí)施方案，其中三個(gè)針梗中的兩個(gè)包括至少一個(gè)向內(nèi)的或中心朝向的孔1210b-c，孔1210b-c被設(shè)置為向注射空間1204遞送增壓的預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)。第三個(gè)針梗1220a并不包括用于向注射空間1204遞送增壓流體的任何孔。在一些實(shí)施方案中，皮下注射針裝置或細(xì)胞內(nèi)遞送裝置被設(shè)置為通過(guò)一個(gè)或多個(gè)孔向注射腔空間施加負(fù)壓。負(fù)壓或反壓力可被用于向細(xì)胞膜遞送最佳量的壓力。在這些實(shí)施方案中，負(fù)壓由指向一個(gè)或多個(gè)針梗的箭頭所表示。負(fù)壓可通過(guò)將某些孔和與其它孔不同的腔道連接而進(jìn)行施加。圖13示出了含有三個(gè)針梗1320a-c的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置的一個(gè)實(shí)施方案，其中三個(gè)針梗中的兩個(gè)1320b-c包括至少一個(gè)向內(nèi)的或中心朝向的孔1310b、1310c，孔1310b、1310c被設(shè)置為向注射空間1304遞送增壓的預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)。第三個(gè)針梗1320a包括至少兩個(gè)向內(nèi)或中心朝向的孔1310a，孔1310a被設(shè)置為向注射空間1304施加負(fù)壓。圖14示出了含有四個(gè)針梗1420a-d的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置的一個(gè)實(shí)施方案，其中四個(gè)針梗的兩個(gè)1420c-d包括至少一個(gè)向內(nèi)的或中心朝向的孔1410c-d，孔1410c-d被設(shè)置為向注射空間1404遞送增壓的預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)。第三和第四個(gè)針梗1420a-b并不包括用于向注射空間1404遞送增壓流體的任何孔。圖15示出了含有四個(gè)針梗1520a-d的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置的一個(gè)實(shí)施方案，其中四個(gè)針梗中的兩個(gè)1520b、1520d包括至少一個(gè)向內(nèi)的或中心朝向的孔1510b、1510d，孔1510b、1510d被設(shè)置為向注射空間1504遞送增壓的預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)。第三和第四個(gè)針梗1520a、1520c包括用于向注射空間1504施加負(fù)壓的孔1510a、1510c。如本文所描述的，每個(gè)針梗的形狀可以不同。圖16-18示出了包括向內(nèi)或中心朝向的孔的環(huán)形針梗的實(shí)施方案。圖16示出了環(huán)形的針梗1620，包括三個(gè)向內(nèi)或中心朝向的孔1610。三個(gè)孔1610中的兩個(gè)被設(shè)置為向注射空間1604遞送增壓的預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)，第三個(gè)孔1610被設(shè)置為向注射空間施加負(fù)壓?？?610可形成三角形，例如，等邊三角形。圖17示出了環(huán)形的針梗1720，包括兩個(gè)彼此面對(duì)的向內(nèi)或中心朝向的孔1710。兩個(gè)孔1710中的一個(gè)被設(shè)置為向注射空間1704遞送增壓的預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)，另一個(gè)孔1710被設(shè)置為向注射空間施加負(fù)壓。圖18示出了環(huán)形的針梗1820，包括兩個(gè)彼此面對(duì)的向內(nèi)或中心朝向的孔1810。這兩個(gè)孔1810均被設(shè)置為向注射空間1804遞送增壓的預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)?？?810可以包括任何合適的形狀，例如，總體上為多邊形。在一些實(shí)施方案中，針梗可以包括與一個(gè)與多個(gè)孔流體連接的一個(gè)腔道或多于一個(gè)腔道。圖19為含單個(gè)腔道的一個(gè)針梗的一個(gè)實(shí)施方案的剖視圖。針梗1920包括單個(gè)腔道1935和三個(gè)孔1910，每個(gè)孔1910均與單個(gè)腔道1935流體連接。腔道1935被用于傳輸壓力和遞送預(yù)防性和/或治療性試劑。圖20示出了含兩個(gè)腔道的一個(gè)針梗的一個(gè)實(shí)施方案的剖視圖。針梗2020包括與兩個(gè)孔2010流體連接的第一腔道2035。針梗2020也包括與第三孔2012流體連接的第二腔道2037。例如，如果希望使用第一腔道用于遞送增壓的預(yù)防性和/或治療性試劑并使用第二腔道用于遞送另一種流體、預(yù)防性和/或治療性試劑、或施加負(fù)壓（或反之亦然），可以使用本實(shí)施方案。在一些實(shí)施方案中，與可調(diào)節(jié)的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置配套使用的可調(diào)節(jié)的遞送單元包括：設(shè)置為用于接收皮下注射針的通道；將注射器和針集合器封裝進(jìn)所述通道內(nèi)的手柄，使得針梗的封閉端從所述通道延伸并可與生物樣品接合；被設(shè)置為通過(guò)手柄的操作而進(jìn)行加料的加料元件，所述加料元件與觸發(fā)器和注射器連結(jié)，使得觸發(fā)器的運(yùn)行釋放所述加料元件，其中所述加料元件作用于所述注射器上，從而將預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)置換出所述注射器。在一些實(shí)施方案中，可調(diào)節(jié)的遞送單元包括彈簧，所述彈簧被設(shè)置為受手柄的運(yùn)行而壓縮及被設(shè)置為在觸發(fā)器運(yùn)行時(shí)減壓。圖21A是彈簧驅(qū)動(dòng)裝置的一個(gè)實(shí)施方案，可與本文所描述的針裝置配套使用。彈簧驅(qū)動(dòng)裝置2100包括位于一側(cè)的上樣環(huán)形柄2110和位于相對(duì)側(cè)的深度調(diào)節(jié)件2120。深度調(diào)節(jié)件2120可以旋轉(zhuǎn)接合彈簧驅(qū)動(dòng)裝置2100，并且可被設(shè)置為在向受試者施用時(shí)調(diào)節(jié)針穿透組織的深度。可以按壓觸發(fā)器按鈕2130以觸發(fā)該裝置，從而壓縮針的活塞并注射預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)。圖21B示出了正在被插入彈簧驅(qū)動(dòng)裝置2100中的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置2140。上樣環(huán)形柄2110被抽出，以便所述針可插入至彈簧驅(qū)動(dòng)裝置2100的腔中。圖21C示出了安裝在彈簧驅(qū)動(dòng)裝置2100內(nèi)部的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置2140。圖21D示出了彈簧驅(qū)動(dòng)裝置2100的側(cè)視圖，其中彈簧2150沿彈簧驅(qū)動(dòng)裝置2120的腔道（沿細(xì)胞內(nèi)遞送裝置2140的長(zhǎng)度延伸）設(shè)置。彈簧2150被設(shè)置為在上樣環(huán)形柄2110被抽出時(shí)伸展，在按壓觸發(fā)器按鈕2130后壓縮注射器2140的活塞。圖22A為與本申請(qǐng)的注射針裝置配套使用的彈簧驅(qū)動(dòng)遞送裝置的一個(gè)實(shí)施方案的立體圖。彈簧驅(qū)動(dòng)觸發(fā)器裝置2200包括被設(shè)置為用于接收注射器的活塞部分的活塞孔2210，以及被設(shè)置為接收注射器的針筒部分的針筒孔2220。觸發(fā)器2230被設(shè)置為壓擠觸發(fā)器2230可推下注射器的活塞。圖22A描繪了正在被插入至觸發(fā)器裝置2200中的針裝置2240。針裝置2240可以是如本文所描述的任何針裝置或針集合器。圖22B為觸發(fā)器裝置2200的側(cè)視圖，其中觸發(fā)器2230與活塞孔2210連結(jié)（例如，由拉桿或齒輪進(jìn)行連接），使得壓擠觸發(fā)器2230可壓縮針裝置的活塞并注射預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)。圖23A示出了針集合器的一個(gè)實(shí)施方案。底部集合器組件2300被設(shè)置為接收多根針，每根針具有針梗2310和設(shè)置在所述針的一端的集合器接合件2320。底部集合器組件2300包括接收針梗2310和接合集合器接合件2320以將所述針維持在所述集合器內(nèi)部的孔2330。圖23B示出了被插入至孔2330后的針?？?330的深度可以變化，以便所述針可以彼此之間相互交錯(cuò)（例如，在圖2D中所描述的）。圖23C示出了具有孔接合件2350的頂端集合器組件2340，孔接合件2350被設(shè)置為當(dāng)頂端集合器組件2340被設(shè)置在底部集合器組件2300上時(shí)與孔2330進(jìn)行接合。孔接合件2350可以將集合器接合件2320固定在集合器內(nèi)。底部集合器組件2300和頂端集合器組件2340可通過(guò)例如將這兩個(gè)組件焊接在一起而固定在一起。圖24為與細(xì)胞內(nèi)遞送裝置配套使用的可調(diào)節(jié)的遞送裝置或可調(diào)節(jié)的遞送單元的一個(gè)實(shí)施方案的立體圖?？烧{(diào)節(jié)的遞送單元（ADU）2400包括連結(jié)至彈簧觸發(fā)器2420的彈簧活塞2410。彈簧活塞2410被設(shè)置為當(dāng)啟動(dòng)（例如通過(guò)壓下）彈簧觸發(fā)器2420時(shí)而壓下注射器2430中的活塞。注射器2430由球軸承2440和套環(huán)2450固定在ADU2400的腔道2435中。注射器2430連結(jié)至包括用于注射預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)的一根或多根針的集合器2460。集合器2460可以具有本文所公開的任何設(shè)計(jì)。ADU2400可任選地包括穿過(guò)ADU2400的殼體和彈簧觸發(fā)器2420的槽2470。槽2470可被設(shè)置為接收在遞送預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)之前壓縮彈簧活塞2410的啟動(dòng)件。ADU2400也可任選地包括螺紋調(diào)節(jié)器2480，螺紋調(diào)節(jié)器2480旋轉(zhuǎn)連結(jié)至彈簧活塞2410并被設(shè)置為當(dāng)啟動(dòng)彈簧觸發(fā)器2420時(shí)調(diào)節(jié)施加到注射器上的力（或壓力）。圖25示出了含啟動(dòng)夾具（primingjig）的可調(diào)節(jié)的遞送單元的一個(gè)實(shí)施方案的剖面圖。ADU2400可被設(shè)置為用啟動(dòng)件操作，所述啟動(dòng)件連結(jié)至調(diào)節(jié)助件2510和啟動(dòng)夾具2520。ADU2400可被安裝在調(diào)節(jié)助件2510中并與啟動(dòng)夾具2520接合，從而升起彈簧觸發(fā)器2420并使得可以接觸到腔道2435。注射器2430被插入腔道2435中，將注射器2430緊固以將注射器固定在ADU2400的腔道內(nèi)?，F(xiàn)在，準(zhǔn)備好的ADU2400便可從調(diào)節(jié)助件2510上拿下來(lái)用在受試者中。為了分配預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)，推下彈簧觸發(fā)器2420，釋放彈簧2530，從而操作彈簧活塞2410，進(jìn)而操作注射器的活塞2435。在一些實(shí)施方案中，所述觸發(fā)器裝置和彈簧可被設(shè)置為執(zhí)行使用本文所公開的針裝置遞送預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)的任何方法。例如，所述觸發(fā)器裝置可被設(shè)置為在一定時(shí)期內(nèi)（例如，大約1秒或更少）遞送預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)，向所述預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)施加最大的力或壓力（例如，約50-150N或約50到5000kPa），或以最大速度（例如，至少約2.5mL/s）遞送治療性物質(zhì)。圖26示出了含切口形孔和封閉端的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置的一個(gè)實(shí)施方案。四個(gè)針梗2620排列成Y-形樣式。四個(gè)針梗2620部分設(shè)置在集合器2645內(nèi)，所述集合器2645包含一根中心針和三根外部針，所述三根外部針被設(shè)置為距中心針等距并彼此等距。孔2610可包括至少一個(gè)延長(zhǎng)的切口，所述延長(zhǎng)的切口具有沿針梗的軸的第一尺寸和與所述針梗的軸垂直的第二尺寸?？?610的第一尺寸可以為例如大于、等于或小于約0.01μm、0.02μm、0.03μm、0.04μm、0.05μm、0.06μm、0.07μm、0.08μm、0.09μm、0.1μm、0.15μm、0.2μm、0.25μm、0.3μm、0.35μm、0.4μm、0.45μm、0.5μm、0.55μm、0.6μm、0.65μm、0.7μm、0.75μm、0.8μm、0.85μm、0.9μm、0.95μm、1.0μm、1.5μm、2.0μm、2.5μm、3.0μm、3.5μm、4.0μm、4.5μm、5.0μm、5.5μm、6.0μm、6.5μm、7.0μm、7.5μm、8.0μm、8.5μm、9.0μm、9.5μm、10μm、15μm、20μm、25μm、30μm、35μm、40μm、45μm、50μm、55μm、60μm、65μm、70μm、75μm、80μm、85μm、90μm、95μm、0.1mm、0.2mm、0.3mm、0.4mm、0.5mm、0.6mm、0.7mm、0.8mm、0.9mm、1mm、1.05mm、1.10mm、1.15mm、1.20mm、1.25mm、1.30mm、1.35mm、1.40mm、1.45mm、1.50mm、1.55m、1.60mm、1.65mm、1.70mm、1.75mm、1.80mm、1.85mm、1.90mm、1.95mm或2.0mm，或位于由這些數(shù)值中的任意兩個(gè)所限定且包括的范圍內(nèi)?？?610的第二尺寸可以為例如大于、等于或小于約0.01μm、0.02μm、0.03μm、0.04μm、0.05μm、0.06μm、0.07μm、0.08μm、0.09μm、0.1μm、0.15μm、0.2μm、0.25μm、0.3μm、0.35μm、0.4μm、0.45μm、0.5μm、0.55μm、0.6μm、0.65μm、0.7μm、0.75μm、0.8μm、0.85μm、0.9μm、0.95μm、1.0μm、1.5μm、2.0μm、2.5μm、3.0μm、3.5μm、4.0μm、4.5μm、5.0μm、5.5μm、6.0μm、6.5μm、7.0μm、7.5μm、8.0μm、8.5μm、9.0μm、9.5μm、10μm、15μm、20μm、25μm、30μm、35μm、40μm、45μm、50μm、55μm、60μm、65μm、70μm、75μm、80μm、85μm、90μm、95μm、0.1mm、0.2mm、0.3mm、0.4mm、0.5mm、0.6mm、0.7mm、0.8mm、0.9mm、1mm、1.05mm、1.10mm、1.15mm、1.20mm、1.25mm、1.30mm、1.35mm、1.40mm、1.45mm、1.50mm、1.55m、1.60mm、1.65mm、1.70mm、1.75mm、1.80mm、1.85mm、1.90mm、1.95mm、2.0mm、2.05mm、2.10mm、2.15mm、2.20mm、2.25mm、2.30mm、2.35mm、2.40mm、2.45mm、2.50mm、2.55mm、2.60mm、2.65mm、2.70mm、2.75mm、2.80mm、2.85mm、2.90mm、2.95mm、3.0mm、3.1mm、3.2mm、3.3mm、3.4mm、3.5mm、3.6mm、3.7mm、3.8mm、3.9mm或4.0mm，或位于由這些數(shù)值中的任意兩個(gè)所限定且包括的范圍內(nèi)。在一些實(shí)施方案中，所述至少一個(gè)切口的第一尺寸為約2.15mm，第二尺寸為約0.05mm。所述延長(zhǎng)的切口可以具有如本文所描述的任何孔尺寸，條件是第一尺寸大于第二尺寸。位于外部針2620上的孔2610可被設(shè)置為朝向中心針，位于所述中心針上的孔可被設(shè)置為分別朝向每一根外部針。圖27A-C示出了具有部分地設(shè)置在微集合器內(nèi)的多根針的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置的一個(gè)實(shí)施方案。這種裝置的集合器為微集合器，因?yàn)槠涑叽绫缺疚钠渌幩枋鲎⑸溲b置小。參考圖27A，描繪了微集合器注射裝置2700的分解立體圖。參考圖27B，描繪了微集合器注射裝置的側(cè)部剖面圖。微集合器注射裝置2700包括設(shè)置在微集合器2745內(nèi)的多個(gè)針梗2720，使得針梗包含孔的部分并不位于微集合器內(nèi)。針梗2720包括如在本文其它處描述的多個(gè)孔2710。所述孔沿針梗的長(zhǎng)度設(shè)置，并設(shè)置在針梗2720不位于微集合器2745內(nèi)的部分上。微集合器2745可以總體上為圓柱形。所述微集合器細(xì)胞內(nèi)遞送裝置還包括魯爾連接器（luerconnector）2730。魯爾連接器2730被設(shè)置為在第一端2731與注射器上的魯爾配件（luerfitting）配合并在第二端2732與微集合器2745配合。魯爾連接器形成了經(jīng)過(guò)魯爾連接器2730的中心的導(dǎo)管2735。導(dǎo)管2735為流體流經(jīng)魯爾連接器2735提供了流動(dòng)途徑。魯爾連接器2730的第一端2731可通過(guò)使用螺紋連接、摩擦配合（frictionfit）會(huì)其它合適的附接方法與注射器上的魯爾配件相配合。與微集合器2745配合的魯爾連接器2730的第二端2732內(nèi)部中空，其直徑尺寸適于接收集合器2745的第一圓柱直徑。微集合器2745具有第一圓柱直徑2746，其尺寸可以提供與魯爾連接器2730的表面直接接觸的表面。微集合器2745具有第二圓柱直徑2747，其尺寸與魯爾連接器2730的第二端2732內(nèi)的部分配合。設(shè)置在魯爾連接器2730的第二端2732內(nèi)、相當(dāng)于微集合器2745的部分的微集合器2745的第二圓柱直徑2747的尺寸是使得當(dāng)持針器2745被完全接合在魯爾連接器2730內(nèi)時(shí)形成缺口L92。在一些實(shí)施方案中，L92可以為大約0.5mm。缺口的尺寸為在微集合器2745的一端和魯爾連接器2730的第二端2732之間形成腔室2740，使得流經(jīng)魯爾連接器2730的流體進(jìn)入每個(gè)針梗2720的開口端2715。腔室2740提供了在每個(gè)針梗2720的開口端2715與腔室2735之間的流體連接，使得來(lái)自附接的注射器的流體可以最終流經(jīng)所有針梗2720上的所有孔2710。圖27C示出了含套針尖端針的微集合器細(xì)胞內(nèi)遞送裝置的視圖。套針尖端針具有三個(gè)斜面，所述三個(gè)斜面由相對(duì)于針梗的長(zhǎng)軸成一定角度相交的平面所限定并形成一個(gè)點(diǎn)。參考圖27C，L92A在一些實(shí)施方案中可以為從約0.01mm到約3mm。在一些實(shí)施方案中，L92A為約1mm。在一些實(shí)施方案中，L92B可以從約0.01mm到約4mm。在一些實(shí)施方案中，L92B為約1mm。在一些實(shí)施方案中，L92C可以為從約1mm到約6mm。在一些實(shí)施方案中，L92C為約4mm。針梗2720可以例如每個(gè)針梗具有6個(gè)孔2710，每個(gè)孔的直徑約為0.5mm，間隔約0.2mm。在一些實(shí)施方案中，孔的直徑為0.05mm。圖28A-B示出了與含連接至注射器的微集合器的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置一起使用的可調(diào)節(jié)的遞送單元的立體圖。參考圖28A和28B，所述可調(diào)節(jié)的遞送單元包括設(shè)置為容納注射器和微集合器細(xì)胞內(nèi)遞送裝置的空腔2850，鎖定手柄2860，以及按鈕2870。所述注射器和微集合器注射裝置被設(shè)置在空腔2850內(nèi)部，使得針梗從可調(diào)節(jié)的遞送裝置的第一端伸出。一旦被放置在空腔內(nèi)，則降下鎖定手柄2850。降下手柄2860則使可調(diào)節(jié)的遞送裝置內(nèi)部的加料元件準(zhǔn)備就緒，所述加料元件與設(shè)置在靠近可調(diào)節(jié)的遞送裝置的第二端的按鈕2870連結(jié)。所述加料元件可以為彈簧，其由降下手柄2860的作用壓縮。一旦手柄完全降下，則注射器和微集合器裝置位于空腔2850內(nèi)，加料元件準(zhǔn)備就緒，可調(diào)節(jié)的遞送裝置便可如所希望的插入受試者或組織中。用戶可按壓按鈕2870以釋放加料元件，引起注射器的活塞運(yùn)行。注射器的活塞運(yùn)行將流體或治療性試劑排出注射器，通過(guò)魯爾連接器、通過(guò)針梗而排出孔，最終進(jìn)入如本文其它處所描述的組織或受試者中。本文所描述的針梗和細(xì)胞內(nèi)遞送裝置的實(shí)施方案可與其它已知方法和系統(tǒng)聯(lián)用以提高基因遞送。因此，本發(fā)明的一些實(shí)施方案利用控制電路生成電流或電磁場(chǎng)以改變細(xì)胞滲透性。在一些實(shí)施方案中，利用一個(gè)或多個(gè)針梗本身向組織中引導(dǎo)或傳送生成的電流或電場(chǎng)可能是希望的。所述針?？梢耘c任意數(shù)量的已知可選的微操作方法聯(lián)用，所述微操作方法可以使用聲能、電磁能、機(jī)械能和熱能或化學(xué)增強(qiáng)劑中的一種或多種，例如在Eppstein的美國(guó)專利第6,527,716號(hào)中所公布的，該專利以其全部?jī)?nèi)容被包含在本文中。本發(fā)明的方面還涉及上述裝置作為細(xì)胞內(nèi)遞送裝置的用途或其與電穿孔聯(lián)用的用途。電穿孔是一種已知的治療性方法，其使用電極在組織或樣品中生成電場(chǎng)，增加細(xì)胞外膜的滲透性，從而允許細(xì)胞更多地?cái)z取治療性試劑。（參見美國(guó)專利第6,241,701號(hào)、美國(guó)專利第6,516,223號(hào)、美國(guó)專利第6,678,556號(hào)、美國(guó)專利第6,610,044號(hào)及美國(guó)專利第6,110,161號(hào)，所有這些專利的全部?jī)?nèi)容以引用的方式明確結(jié)合至本文。）在本申請(qǐng)的教導(dǎo)下，本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠很容易地配置本申請(qǐng)的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置和可調(diào)節(jié)的遞送單元以包括用于電穿孔的電極。在一些實(shí)施方案中，本文所描述的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置的針可包括被設(shè)置為向組織或樣品施加電場(chǎng)的電極（也稱為針電極或結(jié)合的針和電極）。所述針可被設(shè)置成電極，用于電穿孔。在一些實(shí)施方案中，上述裝置的針可被插進(jìn)樣品或組織中。被設(shè)置為電極的針可在組織或樣品中生成電場(chǎng)，以使得針附近的細(xì)胞的細(xì)胞膜透性化。然后治療性試劑便可通過(guò)本文所描述的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置進(jìn)行遞送，而細(xì)胞的攝取可以被改善。在一些實(shí)施方案中，上述裝置的針可被插入樣品或組織中并遞送如本文所描述的治療性試劑。被設(shè)置為電極的針也可被用于在樣品或組織中生成電場(chǎng)，使得針附近的細(xì)胞的細(xì)胞膜透性化。當(dāng)細(xì)胞膜透性化后，細(xì)胞對(duì)治療性試劑的攝取便能夠得到改善。在一些實(shí)施方案中，通過(guò)使用不同的遞送單元，注射速度和壓力可能會(huì)不同。所述遞送單元可以具有由彈簧、氣體彈簧、機(jī)電結(jié)構(gòu)、壓縮空氣或其它類似裝置驅(qū)動(dòng)的壓力生成元件。通過(guò)改變驅(qū)動(dòng)壓力生成元件的力，注射速度和/或注射壓力可能會(huì)改變。在一些實(shí)施方案中，所述細(xì)胞內(nèi)遞送儀被設(shè)置為向由針陣列限定的區(qū)域快遞地遞送試劑。快速注射預(yù)防性和/或治療性試劑，同時(shí)增加細(xì)胞內(nèi)的壓力，使得組織局部過(guò)載，從而增加了細(xì)胞膜的滲透性。通過(guò)改變注射壓力和/或速度，局部組織的過(guò)載可以改變，使得預(yù)防性和/或治療性試劑的攝取發(fā)生改變。圖29A-C示出了用于電穿孔的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置的一根或多根針的電連接。參考圖29A，針2920a-d由導(dǎo)電材料制成，每一個(gè)均通過(guò)電連接件2925a-d獨(dú)立地電連接至電壓電源、電源或其它能量源（未示出）。在一些實(shí)施方案中，所述電壓電源可以是電池供電的。所述電壓電源可被設(shè)置為向單根針施加不同極性的信號(hào)以獲得所希望的電場(chǎng)。在一些實(shí)施方案中，可以對(duì)針2920a、2920b和2920c施加正電壓，可以向針2920d施加負(fù)電壓。在一些實(shí)施方案中，可以對(duì)針2920a、2920b和2920c施加負(fù)電壓，可以向針2920d施加正電壓。在一些實(shí)施方案中，可以向針2920a-d施加恒定電壓。在一些實(shí)施方案中，所述電壓可以是脈沖或變化的。在一些實(shí)施方案中，可以向每根針2920a-d施加相同電壓。在一些實(shí)施方案中，可以向針2920a-d施加不同電壓或電壓模式。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解，針2920a-d可以具有極性或電壓的任意組合。參考圖29B，針2930a-d由導(dǎo)電材料制成，每一根均通過(guò)電連接件2935a-d獨(dú)立地電連接至電壓源（未示出）。在一些實(shí)施方案中，可以向針2930a和2930b施加正電壓，并向針2930c和2930d施加負(fù)電壓。在一些實(shí)施方案中，可以向針2930a和2930c施加正電壓，并向針2930b和2930d施加負(fù)電壓。參考圖29C，針2940a-f由導(dǎo)電材料制成，每一根均通過(guò)電連接件2945a-f獨(dú)立地電連接至電壓源（未示出）。所述電壓源可被設(shè)置為對(duì)每根針施加不同極性的信號(hào)。在一些實(shí)施方案中，可以向針2940a-e施加正電荷，并向針2940f施加負(fù)電壓。在一些實(shí)施方案中，可以向針2940a-e施加負(fù)電荷，并向針2940f施加正電壓。在一些實(shí)施方案中，可以向針2940a、2940c和2940f施加正電荷，并向針2940b、2940d和2940e施加負(fù)電壓。雖然公開了電壓極性樣式的具體實(shí)施方案，本領(lǐng)域技術(shù)人員會(huì)明白，在本申請(qǐng)中施加到針上的電壓的極性可以不同，并且沒(méi)有限制，任何組合的極性都可以各種形式施加到單根針上。圖30A-F示出了一種微集合器注射裝置的針和電極設(shè)置的實(shí)施方案。微集合器注射裝置3001可包括針3010、電極3020和/或組合的針電極3030。組合的針電極3030和/或單獨(dú)的針3010可被用于遞送在本文其它處描述的預(yù)防性或治療性試劑。通過(guò)從針電極3030伸出的箭頭描述了預(yù)防性或治療性試劑從微集合器注射裝置的針流出的方向。組合的針電極3030和/或單獨(dú)的電極3020可被用于產(chǎn)生一個(gè)或多個(gè)電場(chǎng)3040。多根針3010、電極3020和/或組合的針電極3030可被設(shè)置為產(chǎn)生所希望的遞送類型和所希望的場(chǎng)模式的電極場(chǎng)。遞送類型可包括但不局限于“星”形、“X”形和“Y”形。場(chǎng)模式可包括但不局限于平行的場(chǎng)模式、“O”場(chǎng)模式和“Δ”場(chǎng)模式。場(chǎng)模式可以是整流的。參考圖30A，組合的針電極3030被設(shè)置為“星”形遞送和場(chǎng)模式。參考圖30B，組合的針電極3030被設(shè)置為“Y”形遞送和場(chǎng)模式。參考圖30C，單獨(dú)的針3010被設(shè)置為“Y”形遞送，單獨(dú)的電極3020被設(shè)置為平行的場(chǎng)模式。參考圖30D，組合的針電極3030和中心針3010被設(shè)置為“星”形遞送和整流的“O”場(chǎng)模式。參考圖30E，單獨(dú)的針3010被設(shè)置為“Y”形遞送，整流電極3020被設(shè)置為“Δ”場(chǎng)模式。參考圖30F，組合的針電極3030和單獨(dú)的針3010被設(shè)置為“Y”形遞送，單獨(dú)的電極3020被設(shè)置為平行的場(chǎng)模式。在圖30A-F中示出的針3010的極性僅用于說(shuō)明目的。極性可以翻轉(zhuǎn)或整流。針極性配對(duì)和場(chǎng)模式可能與所示出的不同。例如，所述針極性配對(duì)和場(chǎng)模式可進(jìn)行改變以增加電穿孔。圖30A-F還描述了從針和/或針上的孔流出預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)的方向。所述方向由從每根針和/或針電極伸出的箭頭所表示。例如，圖30A和B描述了兩種類型的針的陣列，所述針的陣列包括一根位于中心的針和圍繞中心針?lè)謩e設(shè)置成六角形或三角形的外部針。所述針的陣列圍住一個(gè)作用區(qū)或區(qū)域，預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)被引導(dǎo)流入該作用區(qū)或區(qū)域。如所描繪的，所述中心針/針電極具有沿針梗設(shè)置的孔，所述孔引導(dǎo)預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)流向每根外部針。所述外部針具有沿針梗設(shè)置的孔，所述孔將物流引導(dǎo)向中心針。在一些實(shí)施方案（例如在后面描繪的圖33D）中，所述外部針還可具有沿針梗設(shè)置的孔，所述孔將預(yù)防性和/或治療性試劑流引導(dǎo)向鄰近的針，或引導(dǎo)向一根外部針，以及將物流引導(dǎo)向中心針的孔。在一些實(shí)施方案中，外部針不具有將物流引導(dǎo)出由針陣列內(nèi)的區(qū)域所限定的作用區(qū)的孔。圖31A-31B示出了具有針集合器結(jié)構(gòu)的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置的遠(yuǎn)端的實(shí)施方案。圖31A示出了非袋狀集合器，而圖31B示出了袋狀集合器，具有在電極3110之間的間距、套管層3120和電極的隔離區(qū)3130。套管層3120可以是絕緣的，以防止將病人電穿孔。非袋狀集合器在針3010/電極3020的遠(yuǎn)端具有可接受的場(chǎng)損耗。電極的隔離的區(qū)3130能夠形成局部場(chǎng)。袋狀集合器增加了針3010和/或電極3020的遠(yuǎn)端之間的間距，生成在針3010和/或電極3020的遠(yuǎn)端處可接受的系統(tǒng)損耗。在一些實(shí)施方案中，所述袋狀集合器降低了針3010的遠(yuǎn)端處的電損耗。圖32A-B示出了含層壓針3010的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置的實(shí)施方案。層壓針3010可被用于聚集電荷及將損耗降至最低。例如，流經(jīng)集合器內(nèi)的藥物的電流流動(dòng)可以被減至最小，以將電能損耗降至最低。層壓針3010可包括設(shè)置在兩個(gè)絕緣層3210之間的導(dǎo)電涂層3250。在一些實(shí)施方案中，導(dǎo)電涂層3250可作為電極，而針和藥物并不會(huì)與電信號(hào)直接接合。在其它實(shí)施方案中，層壓針3010可作為電極，針的內(nèi)部可包覆有非導(dǎo)電涂層3215。非導(dǎo)電涂層3215防止了預(yù)防性和/或治療性試劑在針梗中時(shí)與電極直接電接觸。這種布置可防止預(yù)防性或治療性物質(zhì)由于針梗內(nèi)的電場(chǎng)而分解或降解。層壓針3010可以是本文所描述的任何針。例如，如圖所示，針3010具有沿每個(gè)針梗的長(zhǎng)度的孔，所述孔的方向?yàn)閷⒅委熜晕镔|(zhì)引導(dǎo)流向鄰近或相對(duì)的針的針梗的孔。圖33A示出了具有雙注射器的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置的一個(gè)實(shí)施方案。雙注射器3380可包括兩個(gè)或更多個(gè)注射器。雙注射器3380可被用于控制針電極極性。雙注射器3380的雙藥物腔室可防止電流流經(jīng)集合器內(nèi)的藥物。所述集合器可包括與針電極3330的電連接3310。所述集合器可包括不與含預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)的儲(chǔ)存器連接、而僅作為電極使用的一個(gè)或多個(gè)電極。圖33B-D示出了含雙注射器的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置的遞送和場(chǎng)模式的實(shí)施方案。雙注射器的每個(gè)注射器3380可與一個(gè)或多個(gè)針電極3330連接。針電極3330的數(shù)量并沒(méi)有具體限定，可選擇所希望的數(shù)量以完成所希望的結(jié)構(gòu)或注射模式和電穿孔模式。如本文所討論的，組合針電極3330可被設(shè)置為生成任何所希望的遞送類型和/或場(chǎng)模式。圖33B示出了六角形的遞送和場(chǎng)模式，箭頭指示了預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)從位于針電極3330的針梗上的孔流出的方向。圖33C示出了“列（Row）”形遞送和場(chǎng)模式。圖33D示出了“O與Y”形遞送和“O與Y”場(chǎng)模式，其中箭頭指示了預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)從位于針電極3330的針梗上的孔流出的方向。在“列”形遞送和場(chǎng)模式中，六根針為針電極，成對(duì)設(shè)置，其中每對(duì)中的一根具有正極性，每對(duì)中的另一根具有負(fù)極性。所述對(duì)可如在圖33C所示的彼此排成列，或它們可以如在圖33D所示的設(shè)置成另一種樣式的對(duì)。在一些實(shí)施方案中，可以有排列的一、二、三、四或五對(duì)或更多對(duì)的針電極以形成電穿孔。在一些實(shí)施方案中，所述電場(chǎng)可以被整流，或單個(gè)針電極或針電極對(duì)的極性可根據(jù)施加的電信號(hào)而具有交互的極性。圖34A示出了具有隔離閥的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置的一個(gè)實(shí)施方案。集合器3405可包括隔離閥3410。隔離閥3410可幫助消除針電極的遠(yuǎn)端的損耗。例如，所述隔離閥能夠幫助防止電流流經(jīng)集合器內(nèi)的藥物。一根或多根針電極3010可包括隔離閥3410。隔離閥可以為非導(dǎo)電機(jī)械止回閥的形式。隔離閥可包括但不局限于膜、球閥或其它。皮下注射針裝置可包括與針電極3430的電連接。所述與針電極3430的電連接可被設(shè)置為提供所希望的極性或模式。圖34B-C示出了具有隔離閥的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置的針和電極結(jié)構(gòu)的例子。隔離閥允許任何結(jié)構(gòu)的組合的針電極3430，例如本文中所描述的那些。圖34B示出了“星”形模式的整流場(chǎng)，其中單根針沿順時(shí)針或逆時(shí)針?lè)较虺蓪?duì)整流，導(dǎo)致了在由受試者組織內(nèi)的針的陣列所限定的區(qū)域中形成整流和變化的電場(chǎng)。圖35A示出了處于兩階段遞送法的第一階段的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置的實(shí)施方案。在一些實(shí)施方案中，本文所描述的方法可包括含第一階段和第二階段的兩階段遞送。針可以與電極分開，并可以為本文所描述的任意類型。在第一階段，將可伸縮的針3510插入受試者中。預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)被充分地遞送至電極3520的作用區(qū)3525內(nèi)。圖35B示出了處于兩階段遞送法的第一階段的針和電極結(jié)構(gòu)的實(shí)施方案。如本文所討論的，針3530和電極3520可被設(shè)置為生成任何所希望的遞送類型和/或場(chǎng)模式。例如，在所示出的結(jié)構(gòu)中，針3530被設(shè)置為“Y”遞送，電極3520被設(shè)置為提供平行的電場(chǎng)。圖35C示出了處于兩階段遞送法的第二階段的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置的一個(gè)實(shí)施方案。在第二階段期間，可伸縮的針3530在治療性和/或預(yù)防性物質(zhì)的遞送之后而被除去或縮回，電極3520被通電。通電的電極3520在電穿孔期間生成電場(chǎng)?？缮炜s的針3530可包括金屬部件。應(yīng)該明白，在電穿孔期間，縮回針3530使得針3530的金屬部件從電場(chǎng)處除去。圖35D示出了處于兩階段遞送法的第二階段的圖35B的針和電極結(jié)構(gòu)的實(shí)施方案。圖36示出了被設(shè)置為與細(xì)胞內(nèi)遞送裝置配套使用的可重復(fù)使用的遞送裝置的立體圖，所述細(xì)胞內(nèi)遞送裝置包括與注射器連接的微集合器和用于電穿孔的電連接?？芍貜?fù)使用的遞送裝置3600包括啟動(dòng)桿3610、供電電纜3620、注射器接收部分3630和電端口3640?？芍貜?fù)使用的遞送裝置3600被設(shè)置為接收注射器3680。注射器3680包括集合器3685和電連接件3690。注射器3680被插進(jìn)注射器接收部分3630中，使得電連接件3690與電端口3640匹配，從而形成了從電源供應(yīng)裝置（未示出）通過(guò)供電電纜3620至集合器3685中的針電極的傳導(dǎo)路徑。啟動(dòng)桿3610被設(shè)置為操作以將注射器3680保持在注射器接收部分3630內(nèi)，以及啟動(dòng)可重復(fù)使用的遞送裝置內(nèi)的壓縮彈簧，所述壓縮彈簧在驅(qū)動(dòng)后準(zhǔn)備就緒以在需要進(jìn)行遞送時(shí)操作注射器3680。圖37描繪了可重復(fù)使用的遞送裝置3600，所述可重復(fù)使用的遞送裝置3600含在驅(qū)動(dòng)啟動(dòng)桿3610后設(shè)置在其內(nèi)的注射器3680。如所描繪的，在操作觸發(fā)裝置3750時(shí)，啟動(dòng)桿3610驅(qū)動(dòng)了壓縮彈簧3730進(jìn)行釋放。在運(yùn)行觸發(fā)裝置3750后，壓縮彈簧3730展開，直接或間接地通過(guò)一個(gè)或多個(gè)組件操作注射器3680，迫使治療性和/或預(yù)防性物質(zhì)流出注射器3680，經(jīng)過(guò)設(shè)置在集合器3685內(nèi)的針3695而流入受試者體內(nèi)。針3695可以是本文其它處描述的電極針或針?？芍貜?fù)使用的遞送裝置3600通過(guò)供電電纜3620電連接至電源?？芍貜?fù)使用的遞送裝置3600也可連接至由操作員控制的電信號(hào)發(fā)生器（未示出），以通過(guò)設(shè)置在集合器3685內(nèi)的電極或針電極將所希望的電穿孔樣式或信號(hào)遞送至受試者中。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該明白，所述觸發(fā)裝置可通過(guò)電或機(jī)電機(jī)械（例如，螺線管、馬達(dá)、形狀記憶合金肌絲和其它類似的機(jī)械）進(jìn)行操作和/或釋放。圖38A-C示出了含設(shè)置用于電穿孔的微集合器的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置的實(shí)施方案。細(xì)胞內(nèi)遞送裝置3800包括微集合器3810和注射器附件部分3820。微集合器3810包括針3830。在一些實(shí)施方案中，針3830可以包括任意組合的電極針或非電極針。電極和針電極與電導(dǎo)管3840電接觸。如在圖38B中所描繪的，兩根針3830與連接件3845電連接，而連接件3845與電導(dǎo)管3840電連接。在一些實(shí)施方案中，一根或多根針3830可以與一個(gè)或多個(gè)電連接件3845電連接，并且被設(shè)置為任何模式或形狀以提供所需要的電場(chǎng)。針3830可以類似于本文其它處描述的任何針，例如，具有沿針梗設(shè)置的孔的針，其中所述孔被劃分以生成特殊的噴射模式，或其它任何合適的設(shè)計(jì)。例如，如在本文其它處描述的，在帶電荷時(shí)一根或多根針3830可以具有正極性，或在帶電荷時(shí)一根或多根針3830可以具有負(fù)極性。圖38C示出了包括針3830和電極3835的微集合器3810。如在本文其它處描述的，本領(lǐng)域技術(shù)人員會(huì)明白，為了在受試者或組織中提供各種電場(chǎng)，針3830和電極3835可以以各種樣式進(jìn)行電連接。圖39A-C示出了含設(shè)置用于電穿孔的微集合器的、具有Y形結(jié)構(gòu)的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置的實(shí)施方案。如所描繪的，針3930排列成Y形樣式，沿針梗具有孔，以提供如本文其它處描述的Y形噴射模式。針3930均與電連接件3945電連接，從而與電導(dǎo)管3940電連接。微集合器3910和注射器連接部分3920可被設(shè)置為形成袋狀設(shè)計(jì)或非袋狀設(shè)計(jì)。圖38C描繪了袋狀設(shè)計(jì)，圖39C描繪了非袋狀設(shè)計(jì)。在一些實(shí)施方案中，根據(jù)施加到針電極的電壓，施加到受試者的電場(chǎng)可能會(huì)有不同。隨著細(xì)胞類型的不同，對(duì)細(xì)胞進(jìn)行電穿孔所需要的電場(chǎng)強(qiáng)度也會(huì)有所不同。穿過(guò)細(xì)胞所需要的電壓與細(xì)胞的半徑成反比。例如，肌細(xì)胞需要較低的電壓，而肝細(xì)胞需要較高的電壓。因此，由本文描述的皮下注射針裝置生成的電場(chǎng)可根據(jù)靶細(xì)胞類型而有所變化。由本文描述的皮下注射針裝置產(chǎn)生的電場(chǎng)強(qiáng)度可在幾V/cm、100V/cm、200V/cm、300V/cm、400V/cm、500V/cm、600V/cm、800V/cm、900V/cm、1000V/cm、1500V/cm、2000V/cm或更大值，或所列出的值之間的任意值中變化。如果電場(chǎng)強(qiáng)度過(guò)高，例如，3000V/cm，有可能導(dǎo)致細(xì)胞死亡。本文描述的注射系統(tǒng)可被稱為體內(nèi)細(xì)胞內(nèi)注射（IVIN），以實(shí)現(xiàn)DNA的高度局部注射和攝取。在注射期間，治療性和/或預(yù)防性試劑將過(guò)載受試者或組織中的針之間的體積，從而增加所述預(yù)防性和/或治療性試劑進(jìn)入細(xì)胞的局部壓力。因此，與用標(biāo)準(zhǔn)皮下注射針注射相比，如本文所描述的IVIN實(shí)現(xiàn)了治療性和/或預(yù)防性試劑（例如DNA）的高度局部的沉積，以及改善的靶細(xì)胞的局部攝取。如已經(jīng)描述的，電穿孔（EP）裝置可以與該技術(shù)結(jié)合。例如，IVIN可被用于對(duì)肌細(xì)胞局部過(guò)載用體內(nèi)EP處理的DNA。如果不進(jìn)行EP，標(biāo)準(zhǔn)的肌肉內(nèi)IVIN將會(huì)大大改善DNA攝取和表達(dá)的效率。IVIN技術(shù)可以向肌肉組織過(guò)載含DNA的溶液，使得細(xì)胞變得可滲透并且DNA被攝取。采用IVIN技術(shù)，利用沿圍繞組織的圓設(shè)置的針并向組織注射DNA，可以在肌肉中高度局部的位點(diǎn)處得以實(shí)現(xiàn)。因此，局部過(guò)載的組織導(dǎo)致局部炎癥和改善的DNA攝取和抗原表達(dá)。更為重要地，在更大的肌肉中（此處以兔脛骨前肌表示），與結(jié)合體內(nèi)EP的常規(guī)針注射相比，IVIN顯示了在體內(nèi)轉(zhuǎn)染肌纖維上相似的效率。在一些實(shí)施方案中，當(dāng)IVIN與體內(nèi)EP結(jié)合時(shí)，攝取會(huì)被進(jìn)一步改善，而不會(huì)引起其它的組織損傷。在一些實(shí)施方案中，體內(nèi)EP脈沖類型具有一個(gè)短的高電壓脈沖使細(xì)胞可滲透，以及第二更長(zhǎng)的低電壓脈沖以促進(jìn)DNA的細(xì)胞攝取。所述脈沖類型對(duì)組織具有最小的破壞性影響，比同樣預(yù)計(jì)引起組織破壞和炎癥的脈沖類型更能被容忍。因此，IVIN和體內(nèi)EP的組合可帶來(lái)非常有效及可容忍模式的DNA遞送方式。此外，IVIN和體內(nèi)EP的組合帶來(lái)了如在下文的實(shí)施例12所示的協(xié)同效應(yīng)。當(dāng)IVIN與體內(nèi)EP組合時(shí)，如在下文的實(shí)施例中所證明的，觀察到了顯著的炎癥和轉(zhuǎn)染。體內(nèi)EP脈沖模式可以具有一個(gè)短的高電壓脈沖使細(xì)胞可滲透，以及第二更長(zhǎng)的低電壓脈沖以促進(jìn)DNA的細(xì)胞攝取。所述脈沖模式對(duì)組織具有最小的破壞性影響，比同樣預(yù)計(jì)引起組織破壞和炎癥的脈沖模式更能被容忍。因此，IVIN和體內(nèi)EP的組合帶來(lái)了非常有效及可容忍的DNA遞送方式。在一些實(shí)施方案中，加入了源自高度免疫性的乙型肝炎核心抗原（HBcAg）的序列。通過(guò)這樣，如在野生型動(dòng)物中測(cè)定的，免疫原性并沒(méi)有大幅改善。然而，當(dāng)組合的NS3/4A-HBAcg疫苗被用在具有對(duì)HCV功能障礙T細(xì)胞的宿主（如慢性感染的人）時(shí)，應(yīng)答得以大幅改善。因此，一個(gè)實(shí)施方案可以包括非人來(lái)源（因?yàn)榇蠹s20億人已經(jīng)接觸過(guò)HBV）的HBcAg，例如沒(méi)有人接觸過(guò)的鳥（鸛）HBcAg（sHBcAg）。另外，在人和非人的HBcAg之間沒(méi)有交叉反應(yīng)性。理想地，四種最終的基因型-1和-2質(zhì)粒會(huì)在野生型和NS3/4A-Tg模型中進(jìn)行測(cè)試，以識(shí)別出最具免疫原性的型式，即選擇加入至NS3/4A中的最好型式的sHBcAg。構(gòu)造了基因型3和4NS3/4A-sHBcAg疫苗作為這些基因型的副本，因?yàn)樗鼈儽徽J(rèn)為會(huì)有類似的性質(zhì)。已經(jīng)生成了對(duì)于所有四個(gè)NS3/4A基因型優(yōu)化的疫苗序列。因此，完整的疫苗-混合物包括HCVNS3/4A(gtl)-sHBcAg、NS3/4A(gt2)-sHBcAg、NS3/4A(gt3)-sHBcAg和NS3/4A(gt4)-sHBcAg。該混合物然后與正確量的IL-12質(zhì)粒結(jié)合，制備成最終的最佳混合物，形成最終的疫苗。下面的實(shí)施例被用于說(shuō)明本發(fā)明在DNA免疫領(lǐng)域的各種實(shí)施方案，所述DNA可被遞送至對(duì)其中所含的抗原的免疫應(yīng)答有需要的受試者中。應(yīng)該理解，下列的實(shí)施例并非是根據(jù)本發(fā)明所準(zhǔn)備的廣泛或詳盡的多種實(shí)施方案。實(shí)施例1使用大號(hào)高注射壓力（HIP）注射器，小號(hào)HIP注射器或常規(guī)的27號(hào)針向重3.5Kg的新西蘭白兔的脛骨前肌注射含0.9mg的ChronVac-C（coNS3/4ADNA）或coHBcAg的0.3毫升0.9%NaCl溶液。白兔可在右側(cè)脛骨前肌（TA）、左側(cè)脛骨前肌(TA)或這兩側(cè)進(jìn)行注射。如圖40A所描繪的，小號(hào)HIP注射器的針長(zhǎng)4-5mm。小號(hào)HIP注射器具有4根針。如在圖上所描繪的，三根外部針呈三角形，每根針之間相等間隔約3mm，形成等邊三角形。中心針被設(shè)置在由三根外部針形成的三角形中間。每根針有6個(gè)孔。所有的外部針均具有向中心開口的孔，中心針具有以90°的角度朝向四個(gè)方向開口的孔。如在圖40B中描繪的大號(hào)HIP注射器的針長(zhǎng)為8-9mm。大號(hào)HIP注射器具有4根呈三角形構(gòu)型的針，每根針之間相等間距6mm。中心針被設(shè)置在由三根外部針形成的等邊三角形中央。大號(hào)HIP注射器的每根針有10個(gè)孔。所有的外部針均具有向中心開口的孔，中心針具有以90°的角度朝向四個(gè)方向開口的孔。注射方案在下面的表1示出：表1在第5天，兔115-118被處死，對(duì)外周血單核細(xì)胞（PBMC）進(jìn)行T細(xì)胞增殖分析。采用標(biāo)準(zhǔn)96小時(shí)增殖試驗(yàn)，對(duì)PBMC進(jìn)行體外增殖性回憶應(yīng)答分析。（參見Lazinda等人，J.Gen.Virol.82:1299-1308（2001），其全部?jī)?nèi)容以引用的方式被明確結(jié)合在本申請(qǐng)中。）簡(jiǎn)而言之，向微量滴定板上接種了大約200,000個(gè)細(xì)胞/孔，將細(xì)胞與培養(yǎng)基單獨(dú)孵育、與重組體NS3或HBcAg孵育。PBMC也與作為陽(yáng)性對(duì)照的伴刀豆凝集素A（ConA）進(jìn)行孵育。72小時(shí)后，加入放射性胸苷，16-24小時(shí)后收集細(xì)胞。在圖41中示出并在表2中列出了每分鐘細(xì)胞計(jì)數(shù)的放射量。通過(guò)將與抗原進(jìn)行孵育的每分鐘計(jì)數(shù)（cpm）的細(xì)胞的放射量除以與培養(yǎng)基單獨(dú)孵育的細(xì)胞的CPM（樣品與陰性對(duì)照的比值；S/N）而確定增殖情況。結(jié)果在圖42中示出。表2結(jié)果顯示，用大號(hào)HIP注射器進(jìn)行免疫的兔子，比用小號(hào)HIP注射器免疫的兔子出現(xiàn)以更多的T細(xì)胞增殖為表現(xiàn)的更加強(qiáng)健的免疫應(yīng)答。該數(shù)據(jù)同樣為由HIP注射器導(dǎo)入肌肉組織中的DNA被有效地轉(zhuǎn)移進(jìn)細(xì)胞中提供了有力證據(jù)，在其中，DNA被轉(zhuǎn)錄、翻譯，并且可以被動(dòng)物的免疫系統(tǒng)用于產(chǎn)生強(qiáng)力的免疫應(yīng)答。編碼HCV抗原NS3/4A的DNA和編碼HBV抗原HBcAg的DNA二者在哺乳動(dòng)物中有效地產(chǎn)生了強(qiáng)力的免疫應(yīng)答表明，使用在本文中描述的遞送裝置，編碼免疫原的多種DNA可被有效地導(dǎo)入到哺乳動(dòng)物中，誘導(dǎo)接種的動(dòng)物產(chǎn)生免疫應(yīng)答。每只兔子的注射位點(diǎn)也被收集用于組織學(xué)分析（如在Ahlen等人，InVivoElectroporationEnhancestheImmunogenicityofHepatitisCVirusNonstructural3/4ADNAbyIncreasedLocalDNAUptake,ProteinExpression,InflammationandInfiltrationofCD3+TCells.J.Immunol.2007，179（7）:4741-53中所描寫的，其全部?jī)?nèi)容以引用的方式被結(jié)合到本文中）。簡(jiǎn)要來(lái)說(shuō)，所述組織在4%甲醛緩沖液中固定、脫水并石蠟包埋。被包埋的組織被切成4-6μm的切片。將切片固定在載玻片上，用蘇木素和伊紅染料（H&E）染色或用從被coNS3/4ADNA免疫的小鼠獲得的多克隆小鼠血清進(jìn)行染色，其可由生物素化的山羊抗小鼠的二級(jí)抗體和使用不溶解的過(guò)氧化物酶底物的過(guò)氧化物酶標(biāo)記的鏈霉抗生物素蛋白進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果在圖43A-C中示出。如位于注射位點(diǎn)，特別是位于針之間的高濃度的染色免疫細(xì)胞所指示的，用兩種HIP注射器注射0.9毫克的coNS3/4A產(chǎn)生了大量的局部炎癥、再生和纖維化。數(shù)據(jù)顯示，在兔子中，大號(hào)注射器比小號(hào)注射器產(chǎn)生了更好的炎癥反應(yīng)。如位于注射位點(diǎn)處幾乎沒(méi)有染色的免疫細(xì)胞所指示的，用常規(guī)的27號(hào)針注射0.9mg的coNS3/4A僅引起極少的局部炎癥、再生和纖維化。另外，如抗體標(biāo)記所顯示的，兩種HIP注射器誘導(dǎo)注射位點(diǎn)周圍的細(xì)胞產(chǎn)生大量的NS3蛋白；而在這些條件下用27號(hào)針進(jìn)行常規(guī)注射沒(méi)有產(chǎn)生可檢測(cè)到的NS3蛋白。因此，數(shù)據(jù)顯示，HIP注射器有效地將DNA遞送進(jìn)入細(xì)胞中，在細(xì)胞中DNA大量地被轉(zhuǎn)錄和翻譯，這可由NS3特異性抗體檢測(cè)到，但是用27號(hào)針進(jìn)行常規(guī)注射并不能如此。本實(shí)施例提供的數(shù)據(jù)證明，在本文中描述的HIP注射器可以有效地將編碼抗原的表達(dá)質(zhì)粒遞送進(jìn)受試者的細(xì)胞中，其數(shù)量足以產(chǎn)生可由針對(duì)抗原的抗體可檢測(cè)到的蛋白表達(dá)水平，并且該蛋白的量足以產(chǎn)生明顯數(shù)量的抗原特異性T細(xì)胞。即，數(shù)據(jù)顯示，在本文中描述的HIP注射器向身體的細(xì)胞中有效地遞送了足以在受試者中產(chǎn)生強(qiáng)力的免疫應(yīng)答的量的核酸。因此，相對(duì)于遞送疫苗的標(biāo)準(zhǔn)方法，使用HIP注射器注射DNA疫苗改善了免疫應(yīng)答。實(shí)施例2高注射壓力（HIP）的針改善肌肉DNA接種效能的機(jī)制可以使用丙型肝炎病毒非結(jié)構(gòu)性（NS）3/4A基因進(jìn)行表征。HCV感染的持續(xù)控制和清除與有效地免疫應(yīng)答，特別是針對(duì)非結(jié)構(gòu)性NS3蛋白的T細(xì)胞應(yīng)答相關(guān)。通過(guò)接種激活肝臟外部的T細(xì)胞后，可以對(duì)現(xiàn)有的T細(xì)胞庫(kù)進(jìn)行補(bǔ)充或修改。在小鼠上對(duì)現(xiàn)有的基于NS3/4A質(zhì)粒的疫苗的實(shí)施例進(jìn)行檢測(cè)。體內(nèi)HIP針施用疫苗被認(rèn)為增加了肌細(xì)胞膜的滲透性，其中質(zhì)?？稍诤酥杏行z取并表達(dá)，從而誘導(dǎo)了功能性體內(nèi)免疫應(yīng)答。體內(nèi)HIP針的使用，通過(guò)增加蛋白表達(dá)水平和表達(dá)的持續(xù)時(shí)間，以及通過(guò)提高CD3＋T細(xì)胞浸潤(rùn)和注射位點(diǎn)處的局部炎癥反應(yīng)這二者，提高了coNS3/4A的免疫原性。雄性和雌性C57BL/6小鼠每籠五只小鼠進(jìn)行繁殖籠養(yǎng)。小鼠被飼喂以商業(yè)飼料（RM3（p）PLIRR飼料；特別飼料服務(wù)公司），可自由接觸食物和水。在開展實(shí)驗(yàn)之前，所有動(dòng)物至少6周齡。SV40-熒光素酶質(zhì)粒（pGL4.13-[Luc2-SV40]；Promega公司）通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)自行生產(chǎn)。coNS3/4A質(zhì)粒按照藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范進(jìn)行生產(chǎn)。通過(guò)用兩針梗的27號(hào)HIP針向右側(cè)脛骨前?。═A）肌肉進(jìn)行單次肌肉注射（小鼠中0.05ml）而施用coNS3/4ADNA疫苗。小鼠中的劑量范圍是從0.5到50μgDNA。每只動(dòng)物、每次注射使用一支兩針梗的針。每月的間隔內(nèi)在小鼠上重復(fù)該程序多至三次。采用標(biāo)準(zhǔn)免疫分析技術(shù)通過(guò)酶免疫分析檢測(cè)針對(duì)NS3的小鼠抗體。將在405nm下的OD值為相同稀釋度的非免疫的動(dòng)物血清OD值三倍的最后一次血清的稀釋度作為抗體效價(jià)。關(guān)于NS3抗體的水平，在使用或沒(méi)有使用HIP針施用不同劑量的coNS3/4A-DNA進(jìn)行接種后觀察到了劑量反應(yīng)關(guān)系。免疫后觀察到提高的效果。同HIP針一起給予的較小的劑量誘導(dǎo)了與沒(méi)有用HIP針遞送較大劑量時(shí)相同的平均的NS3特異性抗體水平。總之，HIP針使得基于coNS3/4ADNA的免疫在抗體應(yīng)答方面更加有效，支持了由使用HIP針介導(dǎo)的佐劑效果的好處。實(shí)施例3從商業(yè)供應(yīng)商處購(gòu)買重2.5-3.5kg的新西蘭白兔。通過(guò)用四針梗的27號(hào)HIP針向右側(cè)脛骨前?。═A）肌肉進(jìn)行單次肌肉注射而施用coNS3/4ADNA疫苗。劑量位于從70到700μgDNA的范圍內(nèi)。每只動(dòng)物、每次注射使用一支四針梗的針。每月的間隔內(nèi)在兔子上重復(fù)該程序最多五次。采用標(biāo)準(zhǔn)免疫分析技術(shù)通過(guò)酶免疫分析檢測(cè)針對(duì)NS3的兔抗體。將在405nm下的OD值為相同稀釋度的非免疫的動(dòng)物血清OD值三倍的最后一次血清的稀釋度作為抗體效價(jià)。在兔全血中測(cè)定針對(duì)NS3的增殖性應(yīng)答。在即將進(jìn)行第一次接種前以及每次接種后兩星期時(shí)，從每只兔的耳動(dòng)脈處獲得總共4毫升的全血，并收集在肝素化的管中。血漿和外周血單核細(xì)胞（PMBC）由梯度離心進(jìn)行分離。血漿貯藏在-80℃下，直到通過(guò)酶免疫分析對(duì)NS3特異性抗體進(jìn)行分析。使用標(biāo)準(zhǔn)96小時(shí)增殖試驗(yàn)對(duì)PBMC立即進(jìn)行體外增殖性回憶應(yīng)答分析。簡(jiǎn)而言之，向微孔板中接種200,000個(gè)細(xì)胞每孔，這些細(xì)胞僅與培養(yǎng)基、與ConA、PHA或rNS3進(jìn)行孵育。72小時(shí)后，加入放射性胸苷，16-24小時(shí)后，收集細(xì)胞。通過(guò)將與抗原進(jìn)行孵育的細(xì)胞的每分鐘計(jì)數(shù)（cpm）的細(xì)胞放射量除以單獨(dú)與培養(yǎng)基進(jìn)行孵育的細(xì)胞的cpm（樣品與陰性對(duì)照的比值S/N）而確定增殖情況。在每個(gè)時(shí)間點(diǎn)處比較每組的平均S/N比值。在兔子的右側(cè)TA處注射含有指示量的coNS3/4ADNA的0.3毫升鹽水。記錄抗體水平作為平均終點(diǎn)效價(jià)。在多次注射后達(dá)到了峰抗體終點(diǎn)效價(jià)。對(duì)與使用HIP針免疫的兔子中PBMC中的NS3特異性增殖性應(yīng)答的誘導(dǎo)有關(guān)的顯示劑量應(yīng)答關(guān)系的數(shù)據(jù)進(jìn)行記錄。將在體外存在rNS3時(shí)一式兩份或一式三份測(cè)定的平均S/N值作為指示增殖性結(jié)果的數(shù)據(jù)進(jìn)行收集。NS3特異性增殖會(huì)是可檢測(cè)到的。與對(duì)照組相比，在接受更高劑量的coNS3/4ADNA組中平均的NS3-回憶增殖不斷增高。因此，接種引起兔子中的在體外可檢測(cè)到的T細(xì)胞應(yīng)答。實(shí)施例4在下一系列的實(shí)驗(yàn)中，對(duì)本文所描述的注射針進(jìn)行改進(jìn)以與現(xiàn)有的基因轉(zhuǎn)移技術(shù)配套使用，所述基因轉(zhuǎn)移技術(shù)包括基因槍遞送系統(tǒng)、使用電穿孔的遞送系統(tǒng)以及顯微針遞送系統(tǒng)。在這些實(shí)驗(yàn)中，通過(guò)改進(jìn)的基因槍遞送系統(tǒng)、改進(jìn)的電穿孔裝置或改進(jìn)的顯微針遞送系統(tǒng)向小鼠或兔子施用NS3/4A-pVAXl載體。純化的NS3/4A-pVAXl載體被用于免疫小鼠或兔子組。通過(guò)改進(jìn)的基因槍遞送系統(tǒng)、改進(jìn)的電穿孔裝置或改進(jìn)的顯微針遞送系統(tǒng)，將所述質(zhì)粒直接注入再生的脛骨前肌（TA）肌肉中。用約0.25mg/kg的質(zhì)粒DNA的DNA進(jìn)行免疫。在第0、4和8周時(shí)進(jìn)行免疫。使用酶免疫吸附試驗(yàn)（EIA）檢測(cè)鼠NS3特異性抗體的存在情況。這些試驗(yàn)基本上按照如Chen等人，Hepatology28（1）:219（1998）所描述的進(jìn)行。簡(jiǎn)要來(lái)說(shuō)，在4℃、96孔微量滴定板（Nunc，哥本哈根，丹麥）中，處于50mM的碳酸鈉緩沖液（pH9.6）中的1μg/ml的rNS3被動(dòng)吸附過(guò)夜。所述滴定板繼而用含PBS、2%山羊血清和1%牛血清白蛋白的稀釋緩沖液在37℃下孵育1小時(shí)進(jìn)行封閉。從1:60開始的連續(xù)稀釋的小鼠血清繼而在滴定板上孵育1小時(shí)。結(jié)合的鼠源和兔源血清抗體，通過(guò)堿性磷酸酶偶聯(lián)的山羊抗-小鼠或山羊抗-兔IgG（Sigma細(xì)胞產(chǎn)品，圣路易斯，密蘇里州），然后加入底物pNPP（1片加入5ml的含0.5mMMgCl2的1M二乙基胺緩沖液）進(jìn)行檢測(cè)。加入1M的NaOH終止反應(yīng)，在405nm下讀取其吸光度。四周和六周后，所有用NS3/4A-pVAXl免疫的小鼠和兔子均會(huì)出現(xiàn)NS3抗體。類似地，所有用NS3/4A-pVAXl免疫的小鼠和兔子均會(huì)出現(xiàn)強(qiáng)力的T細(xì)胞應(yīng)答。所有通過(guò)改進(jìn)的基因槍遞送系統(tǒng)、改進(jìn)的電穿孔裝置或改進(jìn)的顯微針遞送系統(tǒng)用NS3/4A-pVAXl進(jìn)行免疫的小鼠和兔子均會(huì)出現(xiàn)針對(duì)所希望的抗原的強(qiáng)力的免疫應(yīng)答。實(shí)施例5眾所周知，在所有受試物種中，乙型肝炎病毒（HBV）的外源衣殼蛋白（HBcAg）在CD4＋的T細(xì)胞水平上高度致免疫。然而，HBcAg，特別是非人源的HBcAg形式，并沒(méi)有被探索作為基因疫苗的佐劑。使用非人源HBcAg的一個(gè)關(guān)鍵特性是因?yàn)镠BV是一種非常常見的感染，幾乎影響了世界上三分之一的人口。因此，應(yīng)該使用從親緣非常遠(yuǎn)的物種中獲得的HBcAg序列，以在對(duì)HBV高度地區(qū)性流行的地區(qū)也能夠使用這些疫苗。在本文中對(duì)HBcAg作為DNA疫苗佐劑的用途進(jìn)行了探索。HBcAg序列有效地改善了源自丙型肝炎病毒基因的免疫原性，這支持將HBcAg用作細(xì)胞內(nèi)佐劑（iac）。重要的是，添加HBcAg序列的主要作用在模擬人類HCV感染的模型中觀察到?；贖BcAg的疫苗可以克服在共表達(dá)人白細(xì)胞抗原（HLA）-A2和HCV非結(jié)構(gòu)性（NS）3/4A復(fù)合體的轉(zhuǎn)基因小鼠中較深的T細(xì)胞耐受性。這里存在的“健康的”非耐受的異種T細(xì)胞幫助激活了功能障礙的HCVNS3/4A特異性T細(xì)胞。因此，HBcAg有效地起到了細(xì)胞內(nèi)佐劑的作用，可以幫助在持續(xù)性存在病毒抗原的宿主（如通?？稍诼缘牟《靖腥局锌梢钥吹降模┲谢謴?fù)功能障礙的T細(xì)胞應(yīng)答。一些實(shí)施例包括，例如，在國(guó)際專利申請(qǐng)公布號(hào)WO2009/130588（指定了美國(guó)并且以英文進(jìn)行公布）中所公開的一種或多種HBcAg核酸或蛋白序列，這篇專利申請(qǐng)公布的所有內(nèi)容因此以引用的方式被明確結(jié)合至本文。一些實(shí)施方案包括圖44A-I中標(biāo)記的NS3/4A/HBcAg融合體或編碼所述融合體的核酸，或者編碼在SEQ.IDNO.1-32中所描述的蛋白的核酸。編碼如在WO2009/130588（例如，樺樹抗原）和WO2010/086743（這兩份專利申請(qǐng)均指定了美國(guó)并用英語(yǔ)進(jìn)行了公布，它們公布的所有內(nèi)容因此以引用的方式被明確結(jié)合至本文）中所描述的抗原肽的其它核酸序列，也可與編碼HBcAg的核酸序列結(jié)合，所述融合體可使用在本文中描述的一種或多種注射裝置向有需要的受試者進(jìn)行施用。一些實(shí)施方案也包括其它的佐劑，包括但不局限于三唑核苷或CPG核苷酸，如SEQIDNO.33。任何上述實(shí)施例可以結(jié)合到在本文中描述的一種或多種注射裝置中并可施用給有需要的受試者。實(shí)施例6對(duì)使用本文所描述的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置注射物質(zhì)所需要的力進(jìn)行了研究。向開放的空間或雞胸中注射安慰劑液體，使用勞埃德張力計(jì)對(duì)施加的力進(jìn)行測(cè)量。圖45為用于測(cè)量使用本文公開的一種注射針裝置進(jìn)行注射物質(zhì)時(shí)所需要的力的裝置的示例。使用勞埃德張力計(jì)4500，以預(yù)設(shè)的速度對(duì)含流體4520的注射器4510進(jìn)行壓縮，測(cè)量注射0.3ml的流體（例如，空氣或水）所施加的力。支持架4530在壓縮時(shí)固定注射器4510，高速照相機(jī)4540記錄從針梗4550的噴射模式。測(cè)量了兩種不同的注射器：（i）注射0.3ml需要活塞深度為5.09mm的3ml注射器，和（ii）注射0.3ml需要活塞深度為2.63mm的5ml注射器。首次測(cè)試研究了將空氣注射入開放區(qū)域（即，并不位于肌肉組織內(nèi)）中所需要的力。也完成了將染色水注入開放區(qū)域或注入雞胸中的測(cè)試。所測(cè)試的注射裝置包含四根針，與圖8B中描述的結(jié)構(gòu)基本上相同的結(jié)構(gòu)進(jìn)行設(shè)置。長(zhǎng)度L6為6mm。具體來(lái)說(shuō)，針820b包括三個(gè)區(qū)，每個(gè)區(qū)具有15個(gè)孔，所有的孔均朝向鄰近的針820a、820c和820d中的一根。即，針820b包括具有15個(gè)孔的第一區(qū)，所有這些孔均朝向針820a，具有15個(gè)孔的第二區(qū)，所有這些孔均朝向針820b，以及具有15個(gè)孔的第三區(qū)，所有這些孔均朝向針820c。同時(shí)，針820a、820c和820d每一根均包括15個(gè)孔的一個(gè)區(qū)，所有這些孔均朝向針820b。在指定區(qū)的所有這些孔均沿所述針的針梗的軸垂直間隔開。每個(gè)孔均由在每個(gè)孔中心之間的約0.2mm的間距所隔開。對(duì)具有0.05mm的圓孔或0.1mm的圓孔的針進(jìn)行了測(cè)試。結(jié)果在表3中示出。表3使用高速照相機(jī)研究了水進(jìn)入開放區(qū)域的噴射模式。一般來(lái)說(shuō)，以1mL/s或更高的流速進(jìn)行的試驗(yàn)形成了被認(rèn)為可以增加壓力的輪廓分明、對(duì)稱的噴射模式，可能適合于遞送治療性物質(zhì)。圖46-49示出了在注射染色水后雞胸的俯視圖和截面圖。實(shí)施例7為考慮手動(dòng)遞送物質(zhì)的實(shí)際壓力限制，該實(shí)施例描述了使用在本文中公開的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置手動(dòng)向組織樣品中注射物質(zhì)。所述針被設(shè)置為與實(shí)施例6中的相同，包括0.05mm的孔，每根針之間相距3mm。3mL的注射器通過(guò)支持架進(jìn)行支持，活塞由手動(dòng)盡快推下。使用高速照相機(jī)記錄活塞的運(yùn)動(dòng)，用于計(jì)算向雞胸中注射0.3mL的染色水的時(shí)間。該測(cè)試重復(fù)三次，遞送物質(zhì)需要的時(shí)間為0.48秒、0.40秒和0.48秒。因此，平均手動(dòng)遞送速度約為0.45秒。圖50示出了在手動(dòng)注射染色水后雞胸的俯視圖和截面圖。圖51為一個(gè)比較實(shí)施例，示出了僅使用單根針手動(dòng)注射染色水后雞胸的俯視圖和截面圖。實(shí)施例8使用與在實(shí)施例6中描述的基本上相同的步驟，對(duì)使用在本文所描述的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置注射物質(zhì)所需要的力進(jìn)行了研究。測(cè)試了多個(gè)不同的注射裝置。注射裝置“3Y01(72)”包括如在圖8B中所描繪的四根針，其中L6為3mm。在四根針中孔的總量為72。中心針包括沿針的軸成三排分布的36個(gè)孔，每一排均朝向一根外部針。三根外部針的每一根均包括朝向中心針的單排的12個(gè)孔，以產(chǎn)生在各針之間的交叉流動(dòng)。所述孔的直徑為0.1mm，間距為約0.2mm。注射劑裝置“3O01(96)”包括如圖8C所描繪的針，其中L7為3mm，每根針包括沿針的軸成兩排分布的24個(gè)孔（24的4倍為96個(gè)孔）。每一排朝向鄰近的針，生成在針之間的交叉流動(dòng)。所述孔的直徑為0.1mm，間距為約0.2mm。注射劑裝置“6X01(144)”包括如圖8C所描繪的針，其中L7為6mm，每根針包括沿針的軸成三排分布的36個(gè)孔（36的4倍為144個(gè)孔）。每一排朝向三根其它針中的一根，生成在針之間的交叉流動(dòng)，并在與四根針等距的中心附近也聚合。所述孔的直徑為0.1mm，間距為約0.2mm。注射裝置“3O05(72)”具有與“3O01(96)”基本相同的構(gòu)造，除了每個(gè)孔為0.05mm，L7為3mm，以及每根針包括18個(gè)孔。注射裝置“3X05(72)”具有與“6X01(144)”基本相同的構(gòu)造，除了每個(gè)孔為0.05mm，L7為3mm，以及每根針包括18個(gè)孔。注射裝置“3Y05(72)”具有與“3Y01(72)”基本相同的構(gòu)造，除了每個(gè)孔為0.05mm和，L6為3mm。圖52示出了使用5mL注射器時(shí)在不同噴射速度（mm/秒）下水排出孔的最大力。圖53示出了使用10mL注射器時(shí)在不同噴射速度（mms/秒）下水排出孔的最大力?！癤”、“Ο”和“Y”形孔分別為“6X01(144)”、“3O01(96)”和“3Y01(72)”。圖54示出了使用10mL注射器時(shí)在不同噴射速度（mm/秒）下水排出孔的最大力?！癤”、“Ο”和“Y”形孔分別為“3X05(72)”、“3O05(72)”和“3Y05(72)”。當(dāng)（i）將空氣注入開放區(qū)域；（ii）將水注入開放區(qū)域；以及（iii）將水注入雞中時(shí)，測(cè)試了如上所述的六針裝置的最大注射壓力。最大力在下面的表4中示出。對(duì)將染色水遞送進(jìn)入雞胸進(jìn)行了測(cè)試。使用勞埃德張力計(jì)及針“3Y05(72)”、“3O05(72)”、“3X05(72)”、“3Y01(72)”和“3O01(96)”注射染色水。作為比較實(shí)施例，使用在針梗末端含一個(gè)孔的單根針將染色水遞送進(jìn)入雞胸。每個(gè)試驗(yàn)注射0.3ml，圖55示出了結(jié)果。結(jié)果顯示針“3Y05(72)”、“3O05(72)”、“3X05(72)”、“3Y01(72)”和“3O01(96)”具有改善的局部組織遞送。表4實(shí)施例9使用總共72只兔（36只雌性，36只雄性）進(jìn)行綜合急性重復(fù)毒理學(xué)研究。在適應(yīng)兩周后，采用本文所描述的針和方法，結(jié)合電穿孔，對(duì)所有動(dòng)物肌內(nèi)注射緩沖液，用于人類使用的臨床劑量（DNA量）/kg，或者10倍臨床劑量（DNA量）/kg。在注射DNA后每日監(jiān)測(cè)動(dòng)物的健康狀態(tài)。在第一次接種7天后，對(duì)每組動(dòng)物中的4只動(dòng)物采血，進(jìn)行血液和臨床化學(xué)分析。然后對(duì)動(dòng)物實(shí)施安樂(lè)死，解剖相關(guān)器官用于組織病理學(xué)分析。組織病理學(xué)特別關(guān)心的是注射位點(diǎn)。為研究重復(fù)施用后的毒性，將剩余的48只動(dòng)物（24只雄性，24只雌性）接種緩沖液，用于人類使用的臨床劑量或者10倍臨床劑量（DNA量）/kg，總共4次，每次接種間隔1個(gè)月。在最后一次注射后7天，對(duì)動(dòng)物采血，進(jìn)行血液和臨床化學(xué)分析。然后對(duì)動(dòng)物實(shí)施安樂(lè)死，解剖相關(guān)器官用于組織病理學(xué)分析。組織病理學(xué)特別關(guān)心的是注射位點(diǎn)。在重復(fù)施用期間，采取血樣以確定抗體對(duì)接種的應(yīng)答的發(fā)展，以及確認(rèn)疫苗的效力。實(shí)施例10在第一次研究中，使用大號(hào)高注射壓力（HIP）注射器，向HCV感染的個(gè)體的大腿肌肉中注射含大約0.25mg/kg體重的ChronVac-C（coNS3/4ADNA）（一種編碼密碼子優(yōu)化的HCVNS3/4A的表達(dá)質(zhì)粒）的大約0.5ml的0.9%NaCl溶液。在第二次研究中，使用大號(hào)HIP注射器，向HBV感染的個(gè)體的大腿肌肉中注射含大約0.25mg/kg體重的coHBcAg（一種編碼密碼子優(yōu)化的HBV核心抗原的表達(dá)質(zhì)粒）的大約0.5ml的0.9%NaCl溶液。大號(hào)HIP注射器具有4根呈三角形構(gòu)型的針，每根針之間相等間距6mm。中心針被設(shè)置在由三根外部針形成的等邊三角形中央。大號(hào)HIP注射器的每根針有10個(gè)孔。所有的外部針均具有向中心開口的孔，中心針具有以90°的角度朝向四個(gè)方向開口的孔。在第5天和第10天，從接種后的個(gè)體中抽血，分離外周血單核細(xì)胞（PBMC），對(duì)PBMC進(jìn)行T細(xì)胞增殖性分析。采用標(biāo)準(zhǔn)96小時(shí)增殖試驗(yàn)，對(duì)PBMC進(jìn)行體外增殖性回憶應(yīng)答分析。（參見Lazinda等人，J.Gen.Virol.82:1299-1308（2001），其全部?jī)?nèi)容以引用的方式被明確結(jié)合在本申請(qǐng)中。）向微量滴定板上接種了大約200,000個(gè)細(xì)胞/孔，將細(xì)胞與培養(yǎng)基單獨(dú)孵育或與重組體NS3或HBcAg孵育。PBMC也與作為陽(yáng)性對(duì)照的伴刀豆凝集素A（ConA）進(jìn)行孵育。72小時(shí)后，加入放射性胸苷，16-24小時(shí)后收集細(xì)胞。細(xì)胞的放射性以每分鐘計(jì)數(shù)進(jìn)行測(cè)量。另外，對(duì)NS3/4A和/或HBcAg特異性的抗體的存在情況通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)（例如，ELISA）進(jìn)行確定。可選地，在兩周或三周的間隔內(nèi)加強(qiáng)注射。結(jié)果會(huì)顯示，使用大號(hào)HIP注射器進(jìn)行免疫的人表現(xiàn)出對(duì)NS3/4A和/或HBcAg明顯的免疫反應(yīng)。實(shí)施例11研究了各種組合中針電極的帶電情況，以確定生成的電場(chǎng)對(duì)在帶電的針電極內(nèi)所容納的預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)的影響，以及確定隨著注射介質(zhì)和受試者的變化對(duì)電極針的電性能（例如電流消耗、電壓等）的影響。所述組合及結(jié)果在表5中示出。在表5中，對(duì)設(shè)置有針電極的如本文所描述的細(xì)胞內(nèi)遞送裝置的兩個(gè)實(shí)施方案進(jìn)行了測(cè)試。探針I(yè)V為如本文所描述的具有袋形集合器的七針注射裝置。探針VII為如本文所描述的具有袋形集合器的4針、Y形注射裝置。配置欄描述了以數(shù)字所鑒別的哪些針具有正極，哪些針具有負(fù)極。針以順時(shí)針前進(jìn)的方向編號(hào)，中心針編號(hào)最高。調(diào)節(jié)電壓，以維持在受試者或EP介質(zhì)中生成的所希望的600V/cm電場(chǎng)。針尖處的電場(chǎng)強(qiáng)度的變化取決于針距。表5本實(shí)施例的測(cè)試顯示，可以實(shí)現(xiàn)使用針作為電極和作為預(yù)防性和/或治療性物質(zhì)（遞送試劑）的載體，不會(huì)將預(yù)防性和/或治療性試劑降解，也不會(huì)不希望地增加電流消耗。針電極可由導(dǎo)電材料制成。在一些實(shí)施方案中，所述集合器由非導(dǎo)電材料制成。實(shí)施例12從本文所公開的本實(shí)施例中可以明白，使用兩階段遞送的IVIN遞送及隨后的電穿孔，實(shí)現(xiàn)了相對(duì)于單獨(dú)的任一種方法或這兩種方法的相加效應(yīng)來(lái)說(shuō)的協(xié)同反應(yīng)。在以家兔脛骨前肌所代表的較大的肌肉中遞送、攝取及表達(dá)的結(jié)果在圖56A1-B2和圖57A1-C2中示出。在本實(shí)驗(yàn)中，采用常規(guī)的皮下注射針（也可被稱為常規(guī)針）對(duì)第一組動(dòng)物注射NS3/4A。使用常規(guī)對(duì)第二組動(dòng)物注射NS3/4A，然后進(jìn)行體內(nèi)EP。使用如本文所描述的IVIN裝置對(duì)第三組動(dòng)物注射NS3/4A。使用相同的IVIN裝置對(duì)第四組動(dòng)物注射NS3/4A，然后進(jìn)行體內(nèi)EP。在本實(shí)施例中，使用由IGEA/Kiritec提供的EC標(biāo)記的CliniporatorEP裝置遞送體內(nèi)EP。體內(nèi)EP的脈沖類型具有一個(gè)很短的高電壓脈沖，后面還有一個(gè)第二更長(zhǎng)的低電壓脈沖。并非受限于理論，可以認(rèn)為所述一個(gè)很短的高電壓脈沖幫助使得細(xì)胞可滲透，而第二更長(zhǎng)的低電壓脈沖幫助促進(jìn)細(xì)胞攝取DNA。如所觀察到的，所述脈沖類型對(duì)組織具有最小的破壞性影響，比還可能引起組織破壞和炎癥的脈沖類型更能被容忍。在注射和體內(nèi)EP（如果有的話）之后，對(duì)從每個(gè)樣品群的組織樣品進(jìn)行NS3/4A表達(dá)水平的測(cè)試。如圖56A1所示，在用常規(guī)針注射且未進(jìn)行體內(nèi)EP的組織樣品中觀察到了NS3/4A的中等到零的表達(dá)。如圖56A2所示，在用常規(guī)針注射且接受體內(nèi)EP的組織樣品中檢測(cè)到了可覺(jué)察到的表達(dá)水平的NS3/4A。因此，如圖56A1和圖56A2所示，與使用常規(guī)針而不聯(lián)合進(jìn)行體內(nèi)EP（圖56A1）相比，使用常規(guī)針且聯(lián)合進(jìn)行體內(nèi)EP（圖56A2）的結(jié)果顯著增強(qiáng)。類似地，如圖56B1-B2所示，與使用IVIN針、125N注射力且不聯(lián)合進(jìn)行體內(nèi)EP（圖56B1）相比，使用IVIN針、125N注射力且聯(lián)合進(jìn)行體內(nèi)EP（圖56B2）的結(jié)果得以增強(qiáng)。將圖56A2與圖56B1相比，用125N注射力進(jìn)行IVIN注射（圖56B1）顯示出與用常規(guī)針注射結(jié)合體內(nèi)EP（圖56A2）相比在體內(nèi)轉(zhuǎn)染肌纖維方面相似的效率。并非受限于理論，可以認(rèn)為由于集合器的構(gòu)造將針沿固定組織的圓放置并將NS3/4A注射在所述組織中央，采用IVIN技術(shù)的注射取得了在組織中高度局限的位點(diǎn)?？梢哉J(rèn)為組織被局部過(guò)量裝載，導(dǎo)致局部炎癥和改善的DNA攝取和抗原表達(dá)。此外，當(dāng)將圖56A2和圖56B1與圖56B2進(jìn)行比較時(shí)可以看出，采用125N注射力的IVIN針及體內(nèi)EP的結(jié)合（圖56B2）與單獨(dú)進(jìn)行體內(nèi)EP（圖56A2）或單獨(dú)采用IVIN針（圖56B1）中的任一者相比顯示了增強(qiáng)的炎癥和轉(zhuǎn)染。此外，可從圖56B2中看出，采用125N注射力的IVIN針結(jié)合體內(nèi)EP，相對(duì)于體內(nèi)EP（圖56A2）和IVIN針（圖56B1）的相加效應(yīng)產(chǎn)生了真正的協(xié)同效應(yīng)。圖57A1-C2為與采用常規(guī)針及電穿孔相比，用兩個(gè)注射力值使用如上所述的皮下注射針裝置聯(lián)合電穿孔的注射結(jié)果示例。如圖57A1-A2所示，與使用常規(guī)針而不聯(lián)合進(jìn)行體內(nèi)EP（圖57A2）相比，使用常規(guī)針且聯(lián)合進(jìn)行體內(nèi)EP（圖57A1）的結(jié)果顯著增強(qiáng)。類似地，如圖57B1-B2所示，與使用IVIN針、75N注射力且不聯(lián)合進(jìn)行體內(nèi)EP（圖57B2）相比，使用IVIN針、75N注射力且聯(lián)合進(jìn)行體內(nèi)EP（圖57B1）的結(jié)果得以增強(qiáng)。類似地，如圖57C1-C2所示，與使用IVIN針、125N注射力且不聯(lián)合進(jìn)行體內(nèi)EP（圖57C2）相比，使用IVIN針、125N注射力且聯(lián)合進(jìn)行體內(nèi)EP（圖57C1）的結(jié)果得以增強(qiáng)。如圖57C2所示，IVIN、125N注射力和體內(nèi)EP轉(zhuǎn)染的結(jié)合非常有效。圖58A示出了C57BL/6小鼠的干擾素γ生成細(xì)胞/百萬(wàn)脾細(xì)胞的數(shù)量，所述C57BL/6小鼠采用IVIN細(xì)胞內(nèi)遞送儀向脛骨前肌注射了5μgNS3/4ADNA，沒(méi)有進(jìn)行電穿孔。圖58B示出了使用標(biāo)準(zhǔn)注射法向C57BL/6小鼠遞送5μgNS3/4ADNA時(shí)的相同的量。圖58C示出了C57BL/6小鼠的干擾素γ生成細(xì)胞/百萬(wàn)脾細(xì)胞的數(shù)量，所述C57BL/6小鼠采用IVIN細(xì)胞內(nèi)遞送儀向脛骨前肌注射了5μgNS3/4ADNA，并且結(jié)合了電穿孔。圖58D示出了C57BL/6小鼠的干擾素γ生成細(xì)胞/百萬(wàn)脾細(xì)胞的數(shù)量，所述C57BL/6小鼠采用常規(guī)針向脛骨前肌注射了5μgNS3/4ADNA，同時(shí)結(jié)合了電穿孔。因此，使用IVIN遞送DNA導(dǎo)致了DNA的局部沉積和攝取及表達(dá)，以及局部炎癥。同樣，當(dāng)與體內(nèi)EP結(jié)合時(shí)，攝取和表達(dá)得以進(jìn)一步改善，而不會(huì)引起其它的組織損傷。因此，IVIN和體內(nèi)EP的結(jié)合導(dǎo)致了非常高效且可容忍的DNA遞送方式，這在遞送基因疫苗（例如，編碼所希望的抗原的核酸構(gòu)建體，如含或不含HBcAg的NS3/4A）中尤為有用。實(shí)施例13使用含IVIN注射系統(tǒng)的細(xì)胞內(nèi)遞送儀對(duì)商品豬（outbredpig）進(jìn)行注射，以將NS3/4ADNA遞送至皮膚（6×50μg）或右側(cè)大腿肌肉（1×500μg）中。圖59A和B示出了未接受NS3/4ADNAIVIN注射的豬（非免疫豬）的豬-干擾素γ生成細(xì)胞/百萬(wàn)外周血單核細(xì)胞的數(shù)量。圖59C和D示出了在注射NS34ADNA之后的豬（免疫豬）的豬-干擾素γ生成細(xì)胞/百萬(wàn)外周血液?jiǎn)魏思?xì)胞的數(shù)量。如數(shù)據(jù)所顯示的，在使用細(xì)胞內(nèi)遞送裝置遞送NS3/4A構(gòu)建體后誘導(dǎo)了可察覺(jué)到的免疫應(yīng)答。