一種生脈注射液及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種生脈注射液，并提供一種檢測方法對其物理化學(xué)特性進(jìn)行全面地表征。采用HPLC測定了其指紋圖譜，其中，單峰面積占總峰面積2%以上的有9個(gè)峰。該9個(gè)峰的平均保留時(shí)間為12.5-14.5分鐘，以6#峰為參照取相對面積，平均相對峰---面積為0.55-0.75。
【專利說明】一種生脈注射液及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及中藥領(lǐng)域，具體涉及一種生脈注射液，及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]生脈注射液是根據(jù)中醫(yī)著名經(jīng)典古方“生脈散”研制而成的可供靜脈注射的中藥注射液，由人參、麥冬、五味子三味中藥配伍并采用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)提取精制而成。
[0003]古方“生脈散”歷經(jīng)上千年長期應(yīng)用，安全有效，經(jīng)久不衰。古代醫(yī)家既用于搶救熱傷元?dú)?、津液耗傷、脈微欲絕等重癥，又用以作為氣陰兩虛病人的補(bǔ)益劑。關(guān)于生脈散方名的含義，吳琨在《醫(yī)方考》中說:“名曰生脈者，以脈得氣則充，失氣則弱，故名之”。中醫(yī)之脈者，主于心，而發(fā)源于肺，然肺中之氣，所賴以生者，尤必資籍于腎陰。故《醫(yī)方集解》曰:“蓋心主脈，肺朝百脈，補(bǔ)肺清心，則氣充而脈復(fù)，故曰生脈也?！笨梢哉f，生脈散是依據(jù)其功效而命名的。生脈亦可解之為復(fù)脈，“人有將死脈絕者，服此能復(fù)生之”。較形象地說明了生脈散的功效及其在急重癥搶救中的作用。
[0004]目前，對于生脈注射液的質(zhì)量控制手段無法表征其復(fù)雜的生物物質(zhì)成分，實(shí)際上難以控制其內(nèi)在品質(zhì)。因此，如何有效地、特異性的控制生脈注射液的品質(zhì)成為人們研究的執(zhí)占。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明目的在于提供一種生脈注射液，并提供一種檢測方法對其物理化學(xué)特性進(jìn)行全面地表征。
[0006]本發(fā)明另一目的在于提供上述生脈注射液的制備方法。
[0007]本發(fā)明通過以下技術(shù)方案進(jìn)行實(shí)施。
[0008]本發(fā)明一種生脈注射液的制備方法如下:
按照下述重量份取藥材:紅參25份，五味子39份，麥冬78份；
紅參提取:取紅參加乙醇進(jìn)行回流提取，濃縮濾液，加入活性炭，攪拌，過濾，濾液調(diào)節(jié)PH值，回收乙醇至無醇味，冷卻至室溫，加注射用水，冷藏，調(diào)節(jié)pH值，加活性炭煮沸，補(bǔ)加注射用水，待配制；
五味子蒸餾液:取五味子，粉碎后加水蒸餾，收集蒸餾液，過濾，待配制；
五味子提取液:蒸餾后的藥渣加水煎煮，濃縮水煎液至清膏，調(diào)節(jié)醇含量，攪拌至澄清，冷藏，過濾一次醇液，濾液收至無醇，濃縮至稠膏，冷卻至室溫，調(diào)節(jié)醇含量，攪拌澄清，冷藏，過濾二次醇液，濾液調(diào)節(jié)PH值，冷藏。過濾，濾液收至無醇，冷至室溫，補(bǔ)水，冷藏。過濾，濾液加入活性炭煮沸，鈦棒過濾，待配制；
麥冬提取:取麥冬，加水煎煮，后同五味子提取液方法；
取上述紅參提取液、麥冬提取液、五味子提取液，五味子蒸餾液，分別初濾后再超濾，混合濾液，加入聚山梨酯80，使其完全溶解，補(bǔ)水，攪勻，調(diào)pH值；精濾，灌封，滅菌，得生脈注射液。[0009]優(yōu)選地，本發(fā)明一種生脈注射液的制備方法如下:
按照下述重量份取藥材:紅參25份，五味子39份，麥冬78份；
紅參提取:取紅參片加入回流提取罐中，90%以上乙醇加熱回流提取3-5次，每次1-2小時(shí)，過濾回流液，濾液減壓回收乙醇至生藥量0.3-0.4g，加入紅參藥材重量3%-6.5%的活性炭，攪拌，鈦棒過濾。濾液調(diào)PH值6.8-7.5，回收乙醇至無醇味，冷至室溫，加注射用水至藥材量I~2倍(g —ml)的體積，冷藏。過濾，調(diào)pH值6.8-7.5，加活性炭煮沸10-50分鐘，鈦棒過濾,補(bǔ)加注射用水至藥材量f 2倍(g — ml)的體積，待配制；
五味子蒸餾:五味子粉碎，加水，常壓蒸餾30-50分鐘，收集蒸餾液至藥材量f 2倍(g —ml)的體積，過濾，待配制；
五味子提取:藥渣分別加水煎煮1-2次，各30-50分鐘。合并煎煮液，濃縮至清膏，調(diào)醇至75-82%，攪拌至澄清，冷藏。過濾一次醇液，濾液收至無醇，濃縮至稠膏，冷至室溫，調(diào)醇至84-87%，攪拌澄清，冷藏；過濾二次醇液，濾液調(diào)pH6.8-7.5，冷藏；過濾，濾液收至無醇，冷至室溫，補(bǔ)水至藥材量f 2倍(g — ml)的體積，冷藏；過濾，濾液加入活性炭煮沸30-50分鐘，鈦棒過濾，待配制；
麥冬提取:取麥冬，加水煎煮，后同五味子提取液方法；
取紅參提取液、麥冬提取液、五味子提取液，五味子蒸餾液，分別初濾后再超濾(5KD-10KD)，混合濾液，加入聚山梨酯80(0.05-0.5%)，使其完全溶解，補(bǔ)水至藥材三味藥材總量1.5~2.0倍(g —ml)的體積，攪勻，調(diào)pH值7.5 ;精濾，灌封，滅菌。
[0010]本發(fā)明一種生脈注射液具有以下理化參數(shù):HPLC指紋圖譜中單峰面積占總峰面積2%以上的有9個(gè)峰，該9個(gè)峰的平均保留時(shí)間為12.5-14.5分鐘，以6#峰為參照取相對面積，平均相對峰面積為0.55-0.75。
[0011]上述理化參數(shù)的測定條件如下:
(1)高效液相色譜條件:色譜柱極性乙酰氨基嵌入的十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料(Waters Symmetry shiedld? RP18 (4.6 X 250mm ;5.0 μ m));以乙臆(B)和
0.03%磷酸水溶液(A)為流動(dòng)相，按表1進(jìn)行梯度洗脫；檢測波長為260nm，柱溫:25_40°C。理論踏板數(shù)按五羥甲基糠醛(5-HMF)峰計(jì)算應(yīng)不低于20000 ；
(2)對照品溶液的制備:精密稱取5-HMF適量，加5%甲醇配成10ug/ml的對照品溶
液；
(3)測定法:分別精密吸取參照物溶液和供試品溶液各10μ 1，注入液相色譜儀，測定，記錄色譜圖，即得。
[0012]表1、高效液相色譜法測定指紋圖譜洗脫梯度_
【權(quán)利要求】
1.一種生脈注射液，其特征在于其含有莽草酸，其具有如下理化參數(shù)=HPLC圖譜中單峰面積占總峰面積的百分比超過2%的有9個(gè)峰，#6峰為五羥甲基糠醛，以#6峰參照峰，該9 個(gè)峰的相對保留時(shí)間為 0.1-0.2,0.1-0.2,0.2-0.3,0.4-0.5,0.5-0.6，1.000，1.0-2.0,1.0-2.0, 2.8-3.0 ;以#6峰為參照峰，該9個(gè)峰的相對峰面積為.0.2-0.3,0.2-0.3，0.6-0.8,0.9-1.0，1.000，0.3-0.4,1.0-1.1,0.1-0.2 ;上述理化參數(shù)的測定條件如下:高效色譜條件:色譜柱以極性乙酰氨基嵌入的十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料，流速1.0OOml/min,檢測波長260nm，洗脫條件:流動(dòng)相A為0.03%磷酸水溶液，流動(dòng)相B為乙腈，從0_17分鐘，流動(dòng)相A從100%均勻變?yōu)?6% ;從17-30分鐘，流動(dòng)相A從96%均勻變?yōu)?0% ;從30-37分鐘，流動(dòng)相A從60%均勻變?yōu)?0% ;從37-38分鐘，流動(dòng)相A從40%均勻變?yōu)?% ;從38-49分鐘，流動(dòng)相A保持0%不變；從49-50分鐘，流動(dòng)相A從0%均勻變?yōu)?00% ；從50-60分鐘，流動(dòng)相A保持100%不變；對照品溶液配制和測定:精密稱取五羥甲基糠醛適量，加5%甲醇配成10ug/ml的對照品溶液，注入高效液相色譜儀，照高效液相色法測定，得高效液相圖譜。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的注射液，其特征在于，其具有如下理化參數(shù):高效液相圖譜中單峰面積占總峰面積的百分比超過2%的有9個(gè)峰，#6峰為五羥甲基糠醛，以#6峰參照峰，該 9 個(gè)峰的相對保留時(shí)間為 0.119，0.137，0.232，0.487，0.532，1.000，1.354，1.802，2.920 ；以#6峰為參照峰，該9個(gè)峰的相對峰面積為.0.283,0.278,0.745,0.946，1.000，0.324，1.023，0.168 ;上述理化參數(shù)的測定條件如下:高效色譜條件:色譜柱以極性乙酰氨基嵌入的十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料，流速1.000ml/min，檢測波長260nm，洗脫條件:流動(dòng)相A為0.03%磷酸水溶液，流動(dòng)相B為乙腈，從0-17分鐘，流動(dòng)相A從100%均勻變?yōu)?6% ;從17-30分鐘，流動(dòng)相A從96%均勻變?yōu)?0% ;從30-37分鐘，流動(dòng)相A從60%均勻變?yōu)?0% ;從37-38分鐘，流動(dòng)相A從40%均勻變?yōu)?% ;從38-49分鐘，流動(dòng)相A保持0%不變；從49-50分鐘，流動(dòng)相A從0%均勻變?yōu)?00% ;從50-60分鐘，流動(dòng)相A保持100%不變；對照品溶液配制和測定:精密稱取五羥甲基糠醛適量，加5%甲醇配成lOug/ml的對照品溶液，注入高效液相色譜儀，照高效液相色法測定，得高效液相圖譜。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的注射液，其特征在于，以莽草酸計(jì)含量不得低于1.2mg/ml。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的注射液，其特征在于，#3峰為莽草酸，#9峰為五味子醇甲。
5.一種生脈注射液的制備方法，由下述步驟組成: a.按照下述重量份取藥材:紅參25份，五味子39份，麥冬78份； b.紅參提取:取紅參加乙醇進(jìn)行回流提取，濃縮濾液，加入活性炭，攪拌，過濾，濾液調(diào)節(jié)PH值，回收乙醇至無醇味，冷卻至室溫，加注射用水，冷藏，調(diào)節(jié)pH值，加活性炭煮沸，補(bǔ)加注射用水，待配制； c.五味子蒸餾液:取五味子，粉碎后加水蒸餾，收集蒸餾液，過濾，待配制； d.五味子提取液:蒸餾后的藥渣加水煎煮，濃縮水煎液至清膏，調(diào)節(jié)醇含量，攪拌至澄清，冷藏，過濾一次醇液，濾液收至無醇，濃縮至稠膏，冷卻至室溫，調(diào)節(jié)醇含量，攪拌澄清，冷藏，過濾二次醇液，濾液調(diào)節(jié)pH值，冷藏；過濾，濾液收至無醇，冷至室溫，補(bǔ)水，冷藏，過濾，濾液加入活性炭煮沸，鈦棒過濾，待配制； e.麥冬提取:取麥冬，加水煎煮，后同五味子提取液的方法； f.取上述紅參提取液、麥冬提取液、五味子提取液，五味子蒸餾液，分別初濾后再超濾，混合濾液，加入聚山梨酯80，使其完全溶解，補(bǔ)水，攪勻，調(diào)pH值；精濾，灌封，滅菌，得生脈注射液。
6.權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，由下述步驟組成: a.按照下述重量份取藥材:紅參25份，五味子39份，麥冬78份； b.紅參提取:取紅參片加入回流提取罐中，90%以上乙醇加熱回流提取3-5次，每次1-2小時(shí)，過濾回流液，濾液減壓回收乙醇至生藥量0.3-0.4g，加入紅參藥材重量3%-6.5%的活性炭，攪拌，鈦棒過濾，濾液調(diào)PH值6.8-7.5，回收乙醇至無醇味，冷至室溫，加注射用水至藥材量1-2倍的體積，冷藏，過濾，調(diào)pH值6.8-7.5，加活性炭煮沸10-50分鐘，鈦棒過濾，補(bǔ)加注射用水至藥材量1-2倍的體積，待配制； c.五味子蒸餾:五味子粉碎，加水，常壓蒸餾30-50分鐘，收集蒸餾液至藥材量1-2倍的體積，過濾，待配制； d.五味子提取:藥渣分別加水煎煮1-2次，各30-50分鐘；合并煎煮液，濃縮至清膏，調(diào)醇至75-82%，攪拌至澄清，冷藏；過濾一次醇液，濾液收至無醇，濃縮至稠膏，冷至室溫，調(diào)醇至84-87%，攪拌澄清，冷藏，過濾二次醇液，濾液調(diào)pH6.8-7.5，冷藏；過濾，濾液收至無醇,冷至室溫,補(bǔ)水至藥材量1-2倍的體積，冷藏，過濾，濾液加入活性炭煮沸30-50分鐘，鈦棒過濾，待配制； e.麥冬提取:取麥冬，加水煎煮，后同五味子提取液方法； f.取紅參提取液、麥冬提取液、五味子提取液，五味子蒸餾液，分別初濾后再超濾，混合濾液，加入0.05-0.5%聚山梨酯8 0，使其完全溶解，補(bǔ)水至藥材三味藥材總量1.5-2.0倍的體積，攪勻，調(diào)PH值7.5 ;精濾，灌封，滅菌。
7.權(quán)利要求1所述的生脈注射液在制備治療心肌缺血藥物中的應(yīng)用。
【文檔編號】A61P9/10GK103837609SQ201210485774
【公開日】2014年6月4日 申請日期:2012年11月26日 優(yōu)先權(quán)日:2012年11月26日
【發(fā)明者】趙炳祥, 朱雅寧, 董禮, 王虎山, 侯新蓮, 吳建國, 祝勇軍 申請人:雅安三九藥業(yè)有限公司