專利名稱：一種阿霉酮衍生物納米結(jié)晶制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種阿霉酮衍生物納米結(jié)晶制劑及其制備方法，特別涉及一種阿霉酮衍生物Amoitone B納米結(jié)晶制劑及其制備方法,屬于藥物制劑技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
人體細(xì)胞核內(nèi)存在一類具有基因調(diào)控作用的核受體(nuclear receptor),由于長期以來未發(fā)現(xiàn)其生理性配體而被稱為孤兒受體(orphan rec印tor)，核受體作為配體激活轉(zhuǎn)錄因子，調(diào)節(jié)靶基因的表達(dá)，影響機(jī)體的許多生理功能。Nur77 (NR4A1，也稱TR3，NGFI-B) 作為孤兒核受體亞家族NR4A的成員之一，是一種立刻早期基因的產(chǎn)物，可被血清及表皮生長因子、神經(jīng)生長因子、血小板生長因子等誘導(dǎo)表達(dá)，具有復(fù)雜的生物學(xué)功能，涉及細(xì)胞增殖、分化發(fā)育和凋亡等過程。近年來的研究發(fā)現(xiàn)，Nur77受體可能是介導(dǎo)動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)病的重要基因，此外Nur77在抑制腫瘤細(xì)胞生長和平衡血糖水平方面發(fā)揮重要調(diào)控作用，可作為一個(gè)潛在的靶點(diǎn)用于相關(guān)疾病的治療。殼囊孢菌素cytosporone B(Csn-B)是從小穴殼菌屬(Dothiorella sp.)真菌 HTF3中分離得到的一種天然產(chǎn)物,是一種天然的Nur77受體激動(dòng)劑,有較好的抗真菌和細(xì)胞毒活性，為了找到與Csn-B有相似的功能，但具有更強(qiáng)的Nur77結(jié)合及激活特性，一系列的Csn-B類似物被合成。其中阿霉酮衍生物Amoitone B由廈門大學(xué)化學(xué)系合成，和Csn-B 一樣是一種天然的Nur77受體激動(dòng)劑，能夠特異地結(jié)合到Nur77配體結(jié)合區(qū)域，通過誘導(dǎo) Nur77蛋白構(gòu)象改變，激活其活性，從而調(diào)節(jié)糖異生過程使血糖濃度增高，同時(shí)介導(dǎo)Nur77 抑制抗細(xì)胞凋亡蛋白BRE的轉(zhuǎn)錄活性，轉(zhuǎn)移Nur77到線粒體中引起細(xì)胞色素C的釋放來誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡及抑制腫瘤生長?？梢夾moitone B可作為一種有前途的藥物用于癌癥和低血糖癥的治療。Amoitone B即2_壬?；鵢3，5_ 二羥基苯乙酸戊酯，分子式C22H34O5，分子量 378. 50，結(jié)構(gòu)式如圖I所示。是一種類白色結(jié)晶粉末，易溶于甲醇、乙醇，丙酮，DMSO等，不溶于水。Amoitone B由于其難溶性，制成口服制劑體外溶出差，生物利用度低；采用有機(jī)溶劑溶解制成注射劑，毒性大、易導(dǎo)致全身過敏反應(yīng)，療效不佳，限制了臨床應(yīng)用。Amoitone B 作為一種抗癌藥物主要用于胃癌、結(jié)腸癌的治療；對肺癌、肝癌的治療還在研究探索中，臨床需要一種給藥次數(shù)少、生物利用度高、穩(wěn)定性好、制備簡單且有利于患者使用的制劑。Amoitone B作為一種新化合物，目前相關(guān)專利及文獻(xiàn)只報(bào)道了其合成方法和活性 (I、Zhan YY, Du XP,Chen HZ,et al.Cytosporone B is an agonist for nuclear orphan receptor Nur77 [J]. Nature Chemical Biology, 2008,4 (9) :548-556. 2、曾惠妮.抗腫瘤活性天然產(chǎn)物cytosporone B及其系列衍生物的合成[D].廈門廈門大學(xué)有機(jī)化學(xué)專業(yè)，2008. 3、廈門大學(xué).雙羥基-2-?；揭宜狨ゼ捌渲苽浞椒ㄅc應(yīng)用[P].中國，CN 101402573A. 2009-04-08· 4、Liu JJ, Zeng HN, Zhang LR, et al. A unique pharmacophore for activation of the nuclear orphan receptor Nur77 in vivo and in vitro[J]. Cancer Res, 2010, 70 (9) :3628-3637.)，還未出現(xiàn)任何制劑方面的文獻(xiàn)報(bào)道及專利。
通過組合化學(xué)合成的和新發(fā)現(xiàn)的化合物實(shí)體中，40%的候選藥物為水不溶性或微溶。這些化合物的難溶性加大了新藥研發(fā)難度，并導(dǎo)致現(xiàn)階段新藥研發(fā)的成本劇增、周期延長、風(fēng)險(xiǎn)增大，此外，藥物溶解性差也會(huì)導(dǎo)致藥效不理想、生物利用度低、穩(wěn)定性差，不良反應(yīng)嚴(yán)重等而限制其應(yīng)用。一些新的制劑技術(shù)被用來解決這一問題，如成鹽化、環(huán)糊精包合物、固體分散體、微乳、微球、微粉化技術(shù)等，但應(yīng)用前提是藥物必須具備某些性質(zhì)。直到 1994年由MUller等首次報(bào)道的納米結(jié)晶避免了上述方法的弊端，存在明顯優(yōu)勢。納米結(jié)晶是利用少量表面活性劑或聚合物的穩(wěn)定作用，將藥物顆粒分散在水中， 通過自組裝技術(shù)或者破碎技術(shù)形成穩(wěn)定的納米膠態(tài)分散體。體系中納米級粒徑的純藥物顆粒依靠表面活性劑的電荷效應(yīng)或/和立體效應(yīng)穩(wěn)定地混懸在溶液中，其中藥物的平均粒徑一般在100 IOOOnm之間。納米結(jié)晶可以進(jìn)一步制備成注射劑、片劑、膠囊、噴霧劑或貼劑等，經(jīng)多種途徑給藥，從而提高藥物的吸收和生物利用度。納米結(jié)晶能顯著提高難溶性藥物的飽和溶解度和溶出速率，且制劑中含藥量大可以減少用藥劑量及次數(shù)，降低不良反應(yīng)，特別適合大劑量口服和注射給藥。此外，由于處方中不含載體和共溶劑，注射給藥的安全性顯著提高。納米結(jié)晶的制備方法主要有沉淀法、研磨法、高壓勻質(zhì)法、溶劑法及反溶劑法等， 近年來還有一些聯(lián)用方法包括沉淀-均質(zhì)、研磨-均質(zhì)、噴霧干燥-均質(zhì)法等。其中使用最多的為高壓均質(zhì)法，操作簡便、可規(guī)?；a(chǎn)。近年國外研制出一種高壓微射流均質(zhì)技術(shù)， 制備出的產(chǎn)品粒徑小，分散均勻、重現(xiàn)性、穩(wěn)定性好。微射流技術(shù)的均質(zhì)原理是高壓泵使流體產(chǎn)品被加速至極高的流速，流體經(jīng)由陶瓷和人造金剛石復(fù)合材料制成的微管通道而進(jìn)入沖擊區(qū)，形成一個(gè)強(qiáng)勁而均勻的反應(yīng)場，全部液流都通過反應(yīng)場并由此產(chǎn)生空化作用，同時(shí)伴隨而來的強(qiáng)剪切和沖擊力使顆粒外徑減縮而得到納米級大小一致的超細(xì)顆粒。專利號為201010572011.9的中國專利公開了一種聯(lián)苯雙酯納米結(jié)晶制劑，包括原料和輔料，原料為聯(lián)苯雙酯，輔料為穩(wěn)定劑，原料與輔料的重量份如下聯(lián)苯雙酯200份， 穩(wěn)定劑20 400份；制備過程中，使用了有機(jī)溶劑，易殘留。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是克服Amoitone B的難溶性及吸收差，不能直接注射或口服給藥等問題，而提供一種阿霉酮衍生物納米結(jié)晶制劑及其制備方法，該制劑可以顯著提高 Amoitone B的溶解度及溶出速率，提高生物利用度，高效低毒、穩(wěn)定性好。制備方法可采用高壓微射流均質(zhì)設(shè)備，適合工業(yè)大規(guī)模高效益生產(chǎn)。本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的—種阿霉酮衍生物納米結(jié)晶制劑,包括Amoitone B和穩(wěn)定劑,穩(wěn)定劑為表面活性劑和高分子助懸劑，Amoitone B與表面活性劑、高分子助懸劑的重量份比為0. 05 2. O O. 01 5. O O. 005 2. O。所述的Amoitone B與表面活性劑、高分子助懸劑的重量份比優(yōu)選O. I I. O O. 05 3. O O. 02 I. O。上述的表面活性劑選自脂肪酸甘油酯、多元醇型非離子表面活性劑、聚氧乙烯型非離子表面活性劑、十二烷基硫酸鈉(SDS)、泊洛沙姆、卵磷脂中的一種或多種。所述的表面活性劑優(yōu)選泊洛沙姆F68或卵磷脂。
所述泊洛沙姆F68為非離子型的環(huán)氧乙烷與環(huán)氧丙烷的嵌段共聚物，通常被認(rèn)為無毒、無刺激性，體內(nèi)不被代謝，常被作為乳化劑和增溶劑用于口服、注射和局部用藥物制劑中，是目前使用在靜脈乳劑中唯一合成的乳化劑。所述卵磷脂是一種生物相容性的兩性離子表面活性劑，常用作分散劑、乳化劑和增溶劑，具有良好的安全性基礎(chǔ)?？捎糜诩?nèi)注射劑、靜脈注射劑和非胃腸道營養(yǎng)制劑，是制備脂質(zhì)體和全靜脈注射脂肪乳的主要成分之一。所述十二烷基硫酸鈉(SDS)，是一種典型的陰離子表面活性劑，乳化性很強(qiáng)，毒性和刺激性較低，主要用作外用乳膏的乳化劑，也可用于片劑等固體制劑的潤濕劑和增溶劑， 使用中要嚴(yán)格控制用量以確保安全性。所述高分子助懸劑選自阿拉伯膠、海藻酸鈉、甲基纖維素、羥丙基纖維素、羧甲基纖維素鈉、羥丙甲基纖維素(HPMC)、卡波普、聚維酮(PVP)、葡聚糖中的一種或多種；優(yōu)選聚維酮PVP K30或羥丙甲基纖維素HPMC。所述聚維酮(PVP)為國際倡導(dǎo)的三大藥用新輔料之一，具有粘合、增稠、分散、成膜、絡(luò)合等特性，安全穩(wěn)定，可用作顆粒劑、片劑的粘結(jié)劑，液體制劑的增稠劑、助懸劑。所述羥丙甲基纖維素(HPMC)具有增稠能力，pH穩(wěn)定性、尺寸穩(wěn)定性、優(yōu)良的成膜性以及廣泛的耐酶性、分散性和粘結(jié)性等特點(diǎn)，廣泛用作片劑黏合劑及液體制劑的穩(wěn)定劑， 助懸劑。所述的阿霉酮衍生物納米結(jié)晶制劑的制備方法，包括以下步驟(I)將Amoitone B加入到含表面活性劑和高分子助懸劑的注射用水中，超聲使 Amoitone B溶解,得粗混懸劑A ；(2)將粗混懸劑A在高速剪切機(jī)18000 20000rpm作用下粗分散3 5min，分散 2 4次，得混懸劑B ；(3)將混懸劑B在高壓微射流均質(zhì)機(jī)作用下進(jìn)一步分散均勻，首先在500bar和 IOOObar壓力下各均質(zhì)3 5次作為預(yù)分散,然后在1800bar壓力下均質(zhì)10 20次，即得 Amoitone B納米結(jié)晶混懸液；(4)將步驟(3)制得的Amoitone B納米結(jié)晶混懸液加入凍干保護(hù)劑后冷凍干燥， 即得Amoitone B納米結(jié)晶制劑。上述制備方法中步驟(I)中的表面活性劑和高分子助懸劑分散在注射用水中時(shí)，每IOOml水中含有表面活性劑及助懸劑總量為O. 01 3. Og。步驟(4)中添加的凍干保護(hù)劑選自甘露醇、乳糖、半乳糖、葡萄糖、山梨醇、蔗糖、 海藻糖、右旋糖酐、β -環(huán)糊精中的任一種或多種任意比例組合。步驟⑷中凍干保護(hù)劑的加入量為Amoitone B納米結(jié)晶混懸液的2% 10% (g/ ml),優(yōu)選 5%。步驟(4)中凍干干燥的具體方法是向制得的Amoitone B納米結(jié)晶混懸液中加入凍干保護(hù)劑，震蕩溶解后分裝置西林瓶中，2 4mL/支，放入低溫冰箱-80°C預(yù)凍24 48h， 再在_50°C下真空冷凍干燥48 72h。制備的阿霉酮衍生物納米結(jié)晶制劑應(yīng)用時(shí)可以制成注射劑，毒副作用小，體系穩(wěn)定；也可以制成口服制劑，生物利用度高，如片劑、膠囊劑等。
本發(fā)明的有益效果是(I)本發(fā)明通過工藝優(yōu)化和處方篩選，選擇適當(dāng)?shù)木|(zhì)壓力、循環(huán)次數(shù)和穩(wěn)定劑濃度及組成，可制備出粒徑大小可控、穩(wěn)定性較好的Amoitone B納米結(jié)晶；本發(fā)明制備的 AmoitoneB納米結(jié)晶混懸液在透射電鏡下觀察,可見其為類球形的實(shí)體粒子,粒徑在200 IOOOnm之間；另外將凍干后Amoitone B納米結(jié)晶粉末復(fù)溶后再進(jìn)行粒徑測量，粒徑在 200 IOOOnm之間，證實(shí)了納米結(jié)晶制劑的形成，如圖2、圖3，同時(shí)產(chǎn)品粒徑均一，分散性良好。(2)本發(fā)明克服了 Amoitone B難溶于水的缺陷，制備的納米結(jié)晶可以顯著提高 Amoitone B的溶解度及溶出速率；通過HPLC法測得Amoitone B納米結(jié)晶制劑37°C下在生理鹽水中的飽和溶解度為48. 35 μ g/ml，而原料藥的飽和溶解度未檢測到；37°C下在
O.05%吐溫80的水溶液中Amoitone B納米結(jié)晶制劑的飽和溶解度為388. 2 μ g/ml，而原料藥是72. I μ g/ml，提高了近5. 4倍；為保證藥物的釋放在漏槽狀態(tài)下進(jìn)行，本發(fā)明采用小杯漿法對Amoitone B納米結(jié)晶制劑及原料藥粉末的體外釋放特性進(jìn)行了研究，對所得的溶出數(shù)據(jù)做累計(jì)釋放溶出量-時(shí)間曲線，可見Amoitone B制成納米結(jié)晶制劑后，與原料藥相比明顯提高了其溶出速率，如附圖4。(3)本發(fā)明的Amoitone B納米結(jié)晶制劑的制備工藝易于放大，處方簡單，制備過程中沒有添加任何有機(jī)溶劑，不需要后處理過程，安全性顯著提高，粒徑均勻可控，可被動(dòng)靶向到所需器官。將其冷凍干燥后可以提高藥物的穩(wěn)定性，減小給藥體積，若做成口服納米結(jié)晶混懸劑則有利于兒童和老人等吞服困難的人群使用，增加生物利用度，減小給藥劑量， 降低毒副作用。(4)與聯(lián)苯雙酯納米結(jié)晶制劑比其優(yōu)勢在于在整個(gè)制備過程中，沒有使用任何有機(jī)溶劑，不需要后處理，制劑安全性更高，且直接通過研磨剪切及高壓微射流法進(jìn)行均質(zhì)，操作步驟更加簡單；應(yīng)用時(shí)，只需加入生理鹽水溶解Amoitone B凍干粉末即可進(jìn)行注射，沒有任何過敏反應(yīng)，毒性大大降低，可實(shí)現(xiàn)長期大劑量給藥；此外，由于Amoitone B屬于抗腫瘤藥物，對于各種實(shí)體瘤的療效還在進(jìn)一步研究中，我們可以通過控制高壓微射流的均質(zhì)參數(shù)來調(diào)節(jié)粒徑的大小，從而被動(dòng)靶向到所需器官。


圖I :Amoitone B化學(xué)結(jié)構(gòu)式。圖2 :Amoitone B與穩(wěn)定劑形成的納米結(jié)晶制劑透射電鏡照片。圖3 Amoitone B納米結(jié)晶制劑的粒徑分布圖(標(biāo)題粒徑分布(Size distribution (s)),橫坐標(biāo)粒徑(diameter),縱坐標(biāo)百分率(% intensity)。圖4 Amoitone B納米結(jié)晶制劑及原料藥的體外溶出曲線。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明作詳細(xì)的闡述，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不限于這些具體記載的實(shí)施例。實(shí)施例I :稱取O. 2g Amoitone Β、0· 2g泊洛沙姆、O. 2g卵磷脂溶于80ml注射用水(注射用水就是藥典規(guī)定的重蒸懼水)中，超聲15min后,在高速剪切機(jī)20000rpm作用下粗分散3 5min,分散3次,再經(jīng)高壓微射流均質(zhì)機(jī),先在500bar和IOOObar壓力下各均質(zhì)3次作為預(yù)分散，然后在1800bar壓力下均質(zhì)15次，即可得Amoitone B納米結(jié)晶混懸液。取上述混懸液按照5% (w/v, g/ml)比例加入甘露醇,攪拌溶解后按照2 4mL/瓶分裝至西林瓶，超低溫冰箱_80°C下冷凍24小時(shí)，迅速取出在_50°C下真空冷凍干燥48h。 凍干結(jié)束后取出加壓鋁蓋包裝，即得Amoitone B納米結(jié)晶制劑。取上述Amoitone B納米結(jié)晶凍干粉末復(fù)溶后稀釋到一定倍數(shù)，透射電鏡下觀察， 如圖2所示，粒徑分布如圖3所示。由圖可以看出，形成的納米結(jié)晶的粒徑在200 400nm 之間，所得產(chǎn)品粒徑均一，分散性良好。取上述Amoitone B納米結(jié)晶凍干粉末和Amoitone B原料藥采用小杯槳法進(jìn)行體外溶出試驗(yàn)，結(jié)果如圖4,可見將Amoitone B制成納米結(jié)晶后,與原料藥相比其溶出速率明顯提聞。實(shí)施例2 稱取02g Amoitone B、0. Ig卵磷脂、O. IgHPMC溶于80ml注射用水中，超聲15min 后，在高速剪切機(jī)20000rpm作用下粗分散3 5min，分散3次，再經(jīng)高壓微射流均質(zhì)機(jī)，先在500bar和IOOObar壓力下各均質(zhì)3次作為預(yù)分散,然后在1800bar壓力下均質(zhì)15次，即可得Amoitone B納米結(jié)晶混懸液。取上述混懸液按照5% (w/v, g/ml)比例加入甘露醇,攪拌溶解后按照2 4mL/瓶分裝至西林瓶，超低溫冰箱_80°C下冷凍24小時(shí)，迅速取出在_50°C下真空冷凍干燥48h。 凍干結(jié)束后取出加壓鋁蓋包裝，即得Amoitone B納米結(jié)晶制劑。實(shí)施例3:稱取0.2g Amoitone Β、0· 2g泊洛沙姆、O. Ig HPMC溶于80ml注射用水中，超聲 15min后，在高速剪切機(jī)20000rpm作用下粗分散3 5min，分散3次，再經(jīng)高壓微射流均質(zhì)機(jī)，先在500bar和IOOObar壓力下各均質(zhì)3次作為預(yù)分散,然后在1800bar壓力下均質(zhì)15 次，即可得Amoitone B納米結(jié)晶混懸液。取上述混懸液按照5% (w/v, g/ml)比例加入甘露醇,攪拌溶解后按照2 4mL/瓶分裝至西林瓶，超低溫冰箱_80°C下冷凍24小時(shí)，迅速取出在_50°C下真空冷凍干燥48h。 凍干結(jié)束后取出加壓鋁蓋包裝，即得Amoitone B納米結(jié)晶制劑。實(shí)施例4 稱取O. 5g Amoitone B、0. 5g泊洛沙姆、O. 5g卵磷脂溶于IOOml注射用水中，超聲 15min后，在高速剪切機(jī)20000rpm作用下粗分散3 5min，分散3次，再經(jīng)高壓微射流均質(zhì)機(jī)，先在500bar和IOOObar壓力下各均質(zhì)3次作為預(yù)分散,然后在1800bar壓力下均質(zhì)15 次，即可得Amoitone B納米結(jié)晶混懸液。取上述混懸液按照5% (w/v, g/ml)比例加入右旋糖酐,攪拌溶解后按照2 4mL/ 瓶分裝至西林瓶，超低溫冰箱_80°C下冷凍24小時(shí)，迅速取出在_50°C下真空冷凍干燥48h。 凍干結(jié)束后取出加壓鋁蓋包裝，即得Amoitone B納米結(jié)晶制劑。實(shí)施例5 稱取O. 5g Amoitone Β、0· 5g卵磷脂、O. 2g PVP K30溶于IOOml注射用水中，超聲 15min后，在高速剪切機(jī)20000rpm作用下粗分散3 5min，分散3次，再經(jīng)高壓微射流均質(zhì)機(jī)，先在500bar和IOOObar壓力下各均質(zhì)3次作為預(yù)分散,然后在1800bar壓力下均質(zhì)15 次即可得Amoitone B納米結(jié)晶混懸液。取上述混懸液按照5% (w/v, g/ml)比例加入右旋糖酐,攪拌溶解后按照2 4mL/ 瓶分裝至西林瓶，超低溫冰箱_80°C下冷凍24小時(shí)，迅速取出在_50°C下真空冷凍干燥48h。 凍干結(jié)束后取出加壓鋁蓋包裝，即得Amoitone B納米結(jié)晶制劑。實(shí)施例6 稱取O. 5g Amoitone Β、0· 5g泊洛沙姆、O. 2g PVPK30溶于IOOml注射用水中，超聲 15min后，在高速剪切機(jī)20000rpm作用下粗分散3 5min，分散3次，再經(jīng)高壓微射流均質(zhì)機(jī)，先在500bar和IOOObar壓力下各均質(zhì)3次作為預(yù)分散,然后在1800bar壓力下均質(zhì)15 次即可得Amoitone B納米結(jié)晶混懸液。取上述混懸液按照5% (w/v, g/ml)比例加入β -環(huán)糊精，攪拌溶解后按照2 4mL/瓶分裝至西林瓶，超低溫冰箱_80°C下冷凍24小時(shí)，迅速取出在_50°C下真空冷凍干燥 48h。凍干結(jié)束后取出加壓鋁蓋包裝，即得Amoitone B納米結(jié)晶制劑。實(shí)施例7 稱取O. 2g Amoitone Β、0· Ig 泊洛沙姆、O. 2g HPMC、0. IgPVPK30 溶于 80ml 注射用水中，超聲15min后，在高速剪切機(jī)20000rpm作用下粗分散3 5min，分散3次，再經(jīng)高壓微射流均質(zhì)機(jī)，先在500bar和IOOObar壓力下各均質(zhì)3次作為預(yù)分散,然后在1800bar壓力下均質(zhì)15次即可得Amoitone B納米結(jié)晶混懸液。取上述混懸液按照5% (w/v, g/ml)比例加入甘露醇,攪拌溶解后按照2 4mL/瓶分裝至西林瓶，超低溫冰箱_80°C下冷凍24小時(shí)，迅速取出在_50°C下真空冷凍干燥48h。 凍干結(jié)束后取出加壓鋁蓋包裝，即得Amoitone B納米結(jié)晶制劑。實(shí)施例8 稱取O. 2g Amoitone Β、0· Ig 卵磷脂、O. 2g HPMC、0. Ig PVPK30 溶于 80ml 注射用水中，超聲15min后，在高速剪切機(jī)20000rpm作用下粗分散3 5min，分散3次，再經(jīng)高壓微射流均質(zhì)機(jī)，先在500bar和IOOObar壓力下各均質(zhì)3次作為預(yù)分散,然后在1800bar壓力下均質(zhì)15次即可得Amoitone B納米結(jié)晶混懸液。取上述混懸液按照5% (w/v, g/ml)比例加入右旋糖酐,攪拌溶解后按照2 4mL/ 瓶分裝至西林瓶，超低溫冰箱_80°C下冷凍24小時(shí)，迅速取出在_50°C下真空冷凍干燥48h。 凍干結(jié)束后取出加壓鋁蓋包裝，即得Amoitone B納米結(jié)晶制劑。實(shí)施例9 稱取O. 5g Amoitone Β、0· 2g 泊洛沙姆、O. 5g 卵磷脂、O. Ig PVPK3tl 溶于 IOOml 注身寸用水中，超聲15min后，在高速剪切機(jī)20000rpm作用下粗分散3 5min，分散3次，再經(jīng)高壓微射流均質(zhì)機(jī)，先在500bar和IOOObar壓力下各均質(zhì)3次作為預(yù)分散,然后在1800bar 壓力下均質(zhì)15次即可得Amoitone B納米結(jié)晶混懸液。取上述混懸液按照5% (w/v, g/ml)比例加入β _環(huán)糊精，攪拌溶解后按照2 4mL/瓶分裝至西林瓶，超低溫冰箱_80°C下冷凍24小時(shí)，迅速取出在_50°C下真空冷凍干燥 48h。凍干結(jié)束取出后加壓鋁蓋包裝，即得Amoitone B納米結(jié)晶制劑。實(shí)施例10 稱取O. 5g Amoitone Β、0· 5g 泊洛沙姆、O. 2g 卵磷脂、O. Ig HPMC 溶于 IOOml 注射用水中，超聲15min后，在高速剪切機(jī)20000rpm作用下粗分散3 5min，分散3次，再經(jīng)高壓微射流均質(zhì)機(jī)，先在500bar和IOOObar壓力下各均質(zhì)3次作為預(yù)分散,然后在1800bar 壓力下均質(zhì)15次即可得Amoitone B納米結(jié)晶混懸液。取上述混懸液按照5% (w/v, g/ml)比例加入甘露醇,攪拌溶解后按照2 4mL/瓶分裝至西林瓶，超低溫冰箱_80°C下冷凍24小時(shí)，迅速取出在_50°C下真空冷凍干燥48h。 凍干結(jié)束后取出加壓鋁蓋包裝，即得Amoitone B納米結(jié)晶制劑。
權(quán)利要求
1.一種阿霉酮衍生物納米結(jié)晶制劑，其特征是，包括原料藥Amoitone B和穩(wěn)定劑,穩(wěn)定劑為表面活性劑和高分子助懸劑，Amoitone B與表面活性劑、高分子助懸劑的重量份比為0.05 2. O O. 01 5. O O. 005 2. O。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的阿霉酮衍生物納米結(jié)晶制劑，其特征是，所述的AmoitoneB 與表面活性劑、高分子助懸劑的重量份比為O. I 1.0 O. 05 3. O O. 02 I. O。
3.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的阿霉酮衍生物納米結(jié)晶制劑，其特征是，所述的表面活性劑選自脂肪酸甘油酯、多元醇型非離子表面活性劑、聚氧乙烯型非離子表面活性劑、十二烷基硫酸鈉、泊洛沙姆、卵磷脂中的一種或多種。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的阿霉酮衍生物納米結(jié)晶制劑，其特征是，所述的表面活性劑為泊洛沙姆F68或卵磷脂。
5.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的阿霉酮衍生物納米結(jié)晶制劑，其特征是，所述的高分子助懸劑選自阿拉伯膠、海藻酸鈉、甲基纖維素、羥丙基纖維素、羧甲基纖維素鈉、羥丙甲基纖維素、卡波普、聚維酮、葡聚糖中的一種或多種。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的阿霉酮衍生物納米結(jié)晶制劑，其特征是，所述的高分子助懸劑為聚維酮PVP K30或羥丙甲基纖維素HPMC。
7.權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)所述的阿霉酮衍生物納米結(jié)晶制劑的制備方法，其特征是，包括以下步驟(1)將AmoitoneB加入到含表面活性劑和高分子助懸劑的注射用水中，超聲使 Amoitone B溶解,得粗混懸劑A ；(2)將粗混懸劑A在高速剪切機(jī)18000 20000rpm作用下粗分散3 5min，分散2 4次，得混懸劑B ；(3)將混懸劑B在高壓微射流均質(zhì)機(jī)作用下進(jìn)一步分散均勻，首先在500bar和 IOOObar壓力下各均質(zhì)3 5次作為預(yù)分散,然后在1800bar壓力下均質(zhì)10 20次，即得 Amoitone B納米結(jié)晶混懸液；(4)將步驟(3)制得的AmoitoneB納米結(jié)晶混懸液加入凍干保護(hù)劑后冷凍干燥，即得 Amoitone B納米結(jié)晶制劑。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的阿霉酮衍生物納米結(jié)晶制劑的制備方法，其特征是，步驟(I) 中的表面活性劑和高分子助懸劑分散在注射用水中時(shí)，每IOOml水中含有表面活性劑及助懸劑總量為O. 01 3. Ogo
9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的阿霉酮衍生物納米結(jié)晶制劑的制備方法，其特征是，步驟(4) 中添加的凍干保護(hù)劑選自甘露醇、乳糖、半乳糖、葡萄糖、山梨醇、蔗糖、海藻糖、右旋糖酐、 β -環(huán)糊精中的任一種或多種任意比例組合；凍干保護(hù)劑的加入量為Amoitone B納米結(jié)晶混懸液的2% 10%, g/mlo
10.根據(jù)權(quán)利要求7所述的阿霉酮衍生物納米結(jié)晶制劑的制備方法，其特征是，步驟(4)中凍干干燥的具體方法是向制得的Amoitone B納米結(jié)晶混懸液中加入凍干保護(hù)劑， 震蕩溶解后分裝置西林瓶中，2 4mL/支，放入低溫冰箱-80°C預(yù)凍24 48h，再在_50°C 下真空冷凍干燥48 72h。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種阿霉酮衍生物納米結(jié)晶制劑及其制備方法，包括原料藥Amoitone B、穩(wěn)定劑及凍干保護(hù)劑，穩(wěn)定劑為表面活性劑和高分子助懸劑。其制備方法為高壓微射流法。本發(fā)明制備的Amoitone B納米結(jié)晶制劑可顯著提高Amoitone B的溶解度及溶出速率，通過控制處方比例及微射流均質(zhì)參數(shù)，實(shí)現(xiàn)粒徑在200-1000nm之間均勻可控，具有生物相容性好、易降解、穩(wěn)定性好、高效低毒、被動(dòng)靶向傳輸?shù)葍?yōu)點(diǎn)。因其處方中不含載體和有機(jī)溶劑，用于靜脈注射給藥安全性高，亦可將其開發(fā)為口服制劑，提高生物利用度。高壓微射流法制備工藝簡單，具有很好的重現(xiàn)性和穩(wěn)定性，便于工業(yè)化規(guī)模生產(chǎn)。
文檔編號A61K47/38GK102579373SQ201210081939
公開日2012年7月18日 申請日期2012年3月26日 優(yōu)先權(quán)日2012年3月26日
發(fā)明者張典瑞, 張連茹, 徐慶妍, 李彩云, 王飛虎, 胡志鈺, 郝蕾蕾, 郭和堅(jiān) 申請人:山東大學(xué)