專利名稱：：三水合氨磷汀結(jié)晶凍干制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于藥物制劑領(lǐng)域，更具體而言，涉及一種無菌的三水合氨磷汀結(jié)晶凍干制劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
：氨磷汀化學(xué)名稱為S-2-(3-氨基丙基胺)乙基硫代磷酸，也稱為WR-2721。1996年美國FDA(食品藥品監(jiān)督管理局)批準(zhǔn)美國Bioscience公司的Ethyol(氨磷汀)凍干注射粉針，2001年中國SFDA(食品藥品監(jiān)督管理局)首家批準(zhǔn)我國大連美羅大藥廠注射用氨磷汀(商品名阿米福汀)凍干粉針上市。氨磷汀化學(xué)結(jié)構(gòu)式為H2N-(CH2)3-NH-(CH2)2-SP03H2，是一種有機硫化磷酸化合物。它在組織中被與細(xì)胞膜結(jié)合的堿性磷酸酶水解脫磷酸后，成為具有活性的代謝產(chǎn)物WR-1065,其化學(xué)結(jié)構(gòu)式為H2N-(CH2)rNH-(CH2)2-SH。因巰基具有清除組織中自由基的作用，故能減低順鉑、環(huán)磷酰胺及絲裂霉素等的毒性。氨磷汀為正常細(xì)胞保護劑，主要用于各種癌癥的輔助治療。在對肺癌、卵巢癌、乳腺癌、鼻咽癌、骨腫瘤、消化道肺瘤、血液系統(tǒng)腫瘤等多種癌癥患者進(jìn)行化療前應(yīng)用氨磷汀，可明顯減輕化療藥物所產(chǎn)生的腎臟、骨髓、心臟、耳及神經(jīng)系統(tǒng)的毒性，而不降低化療藥物的藥效。放療前應(yīng)用氨磷汀可顯著減少口腔干燥和粘膜炎的發(fā)生。氨磷汀用于保護HIV受感染病人應(yīng)用核苷類逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑齊多福汀(AZT)免受有害副作用。氨磷汀的水溶液或失水狀態(tài)下是不穩(wěn)定的，目前研究穩(wěn)定的、含三水合結(jié)晶氨磷汀制劑報道有1.中國專利ZL00119038.5公開了無需凍干，在無菌條件下通過調(diào)節(jié)pH,冷凍，得到含三個結(jié)晶水的氨磷汀晶體，結(jié)晶出的氨磷汀必須過篩后才能分裝成粉針劑，但不需經(jīng)過凍干過程。2.中國專利ZL93117436.8公開了含氨磷汀的CrC5醇和水的溶液進(jìn)行凍干結(jié)晶，而制備穩(wěn)定的結(jié)晶氨磷汀組合物。該方法雖然公開使用含C1-C5醇和水的溶液，冷凍干燥的過程需進(jìn)行退火，溫度范圍寬，實施例中只有乙醇作為溶劑的實施例，冷凍干燥時間長超過50小時。3.中國專利ZL200410037763,X公開了氨磷汀的丙酮和水的溶液進(jìn)行凍干結(jié)晶，制備穩(wěn)定的結(jié)晶氨磷汀制劑，該方法公開使用丙酮溶劑，冷凍干燥的過程需進(jìn)行退火，溫度范圍寬，冷凍干燥時間超過50小時。雖然前述專利公開了三種制備穩(wěn)定結(jié)晶氨磷汀的方法，由于氨磷汀市場需求量大，人們需要研究出更加便利、節(jié)能、高效制備穩(wěn)定氨磷汀制劑的方法。
發(fā)明內(nèi)容因此，本發(fā)明的目的在于提供一種改進(jìn)無菌的三水合氨磷汀結(jié)晶凍干制劑。本發(fā)明人采用冷凍干燥工藝制備無菌的三水合氨磷汀結(jié)晶凍干制劑，對其制備過程工藝條件和制劑穩(wěn)定性進(jìn)行大量的研究，得到制備過程便利，工藝時間短、節(jié)能、高效，適合規(guī)?；a(chǎn)，同時該制劑性能穩(wěn)定，易于運輸和儲存。本發(fā)明提供一種無菌的三水合氨磷汀結(jié)晶凍干制劑，其特征是，由含有氨磷汀、丙酮與乙醇混合溶劑和水組成的混合溶液，經(jīng)除去熱原、0.22pm膜過濾除菌，凍干后制得。所述氨磷汀為按照本領(lǐng)域常規(guī)或已知的方法制備的氨磷汀或其水合物，并優(yōu)選為三水合氨磷汀晶體，最優(yōu)選按如下方法得到的三水合氨磷汀晶體步驟1:將反應(yīng)物N-(2-溴乙基)-l,3-丙二胺雙氫溴酸鹽與硫代磷酸鈉按1.01-1.2:1.0的摩爾比例溶解于水中，加入極性非質(zhì)子溶劑作為促進(jìn)劑，在1040。C反應(yīng)；反應(yīng)后，反應(yīng)物溶液不用醇析，直接冷卻析出粗產(chǎn)品三水合氨磷汀粗品；步驟2:將步驟l得到的三水合氨磷汀粗品進(jìn)行第一次重結(jié)晶提純，即將三水合氨磷汀粗品溶解于水中，然后用曱醇析出，得到無結(jié)晶水氨磷汀；步驟3:將步驟2得到的無結(jié)晶水氨磷汀進(jìn)行第二次重結(jié)晶提純，即將無結(jié)晶水氨磷汀溶解于水中，并用無結(jié)晶水氨磷汀重量的0.11.50%的活性炭脫色，然后用乙醇析出三水合氨磷汀晶體，其純度^99.5%,硫醇含量^0.1%,其他有關(guān)物質(zhì)含量^0.1%(按美國USP29)。在上述制備方法中，所用水為純水或去離子水。更具體而言在所述步驟1中，反應(yīng)物N-(2-溴乙基)-1,3-丙二胺雙氫溴酸鹽與硫代磷酸鈉按1.01~1.20:1.0的摩爾比例置于水中攪拌溶解，并優(yōu)選L031.10:1.0;溶解所用的水重量是N-(2-溴乙基)-1，3-丙二胺雙氫溴酸鹽加入量的1.3~3.8倍，并優(yōu)選1.72.5倍；溶解溫度范圍10~40°C;所述的極性非質(zhì)子溶劑為二甲基亞砜，二曱基亞砜的加入量是N-(2-溴乙基)-1，3-丙二胺雙氫溴酸鹽加入重量的1.02.8倍；反應(yīng)溫度控制在1040°C，并優(yōu)選15~25°C;反應(yīng)過程中用硝酸銀溶液檢驗反應(yīng)溶液，至無黑色沉淀析出；反應(yīng)結(jié)束后，將反應(yīng)產(chǎn)物溶液直接降溫冷卻至-15。Cl(TC,優(yōu)選-10°C5°C，維持224小時，過濾得三水合3-氨基丙基胺乙基硫代磷酸(氨磷汀)結(jié)晶粗品。在所述步驟2中，即第一次重結(jié)晶提純用純水溶解步驟l制備的三水合氨磷汀粗品，純水用量是三水合氨磷汀粗品重量的1.06.0倍，并優(yōu)選2.54.5倍；溶解溫度1545。C;溶解后，加入曱醇，曱醇加入重量是加純水量的0.10.8倍，并優(yōu)選0.2~0.6倍；降溫至20°C-15°C，優(yōu)選降溫溫度范圍為8。C-5。C，析出無結(jié)晶水氨磷汀。在所述步驟3中，即第二次重結(jié)晶提純用純水溶解步驟2制備的無結(jié)晶水氨磷汀，用水量是加入無結(jié)晶水氨磷汀重量的1.06.0倍，并優(yōu)選2.5~4.5倍；溶解溫度1545。C;并優(yōu)選加入無結(jié)晶水氨磷汀重量的0.1-1.5%的活性炭進(jìn)行脫色，攪拌15分鐘以上，然后過濾；向所得濾液中加入乙醇，乙醇加入重量是所加入純水量的0.050.4倍，并優(yōu)選0.10.3倍；降溫至20°C-15°C，優(yōu)選降溫溫度范圍為8°C~-5°C,析出含三個結(jié)晶水的氨磷汀晶體。然后按常規(guī)方法進(jìn)行過濾、干燥。過濾后，用乙醇溶液洗滌晶體，真空干燥，得高純穩(wěn)定的三水合3-氨基丙基胺乙基硫代磷酸(氨磷汀)結(jié)晶化合物。按上述方法得到的三水合3-氨基丙基胺乙基硫代磷酸(氨磷汀)晶體，收率大于65%,純度^99.5%，^i醇含量S0.1。/。，其它雜質(zhì)^).1%,其穩(wěn)定性大大提高，從而副作用大大減少，可用于制備藥物制劑用。在本發(fā)明提供的三水合氨磷汀結(jié)晶凍千制劑中，所述的丙酮與乙醇的混合溶劑，丙酮與乙醇配比為0.2~4.0:1(按體積比)，優(yōu)選丙酮與乙醇的配比為0.52.0:1(按體積比)。本發(fā)明所述含有氨磷汀、丙酮與乙醇混合溶劑和水組成的混合溶液中，含有氨磷汀50~400mg/ml，優(yōu)選含有氨磷汀80~200mg/ml;1~30%(體積百分比)丙酮和乙醇混合溶劑，優(yōu)選6~15%(體積百分比)的丙酮與乙醇混合溶劑；65~99%(體積百分比)的水，優(yōu)選85~94%(體積百分比)的水。更具體而言，本發(fā)明提供的無菌的三水合氨磷汀結(jié)晶凍干制劑按如下方法制得，該方法包括以下步驟(1)制備含有氨磷汀、丙酮與乙醇混合溶劑和水組成的混合溶液按上述比例關(guān)系配制含有氨磷汀、藥學(xué)上可接受的丙酮與乙醇混合溶劑和水的混合溶液；(2)除熱原、除菌對(1)步驟配制好的溶液用活性炭脫色，除去熱原，過濾除菌；(3)灌裝在IOO級潔凈區(qū)條件下，灌裝(2)步驟處理后的溶液到凍干管制注射劑瓶中，灌裝含氨磷汀80~900mg/瓶，其溶液量0.5~6.0m1/瓶，優(yōu)選含氨磷汀100700mg/瓶，其溶液量1.06.0ml/瓶；(4)預(yù)凍把灌裝含有無菌氨磷汀溶液的管制注射劑瓶放置到凍干機的板層上，通過設(shè)置板層溫度進(jìn)行冷凍，板層溫度達(dá)-16t:~-45°C，優(yōu)選-20°C~-30°C，降溫速度20分鐘/。C~1分鐘/。C,優(yōu)選15分鐘/。C~3分鐘〃C,維持時間2~16小時，優(yōu)選4~8小時；(5)升華干燥在-45。C-l(TC范圍進(jìn)行升華干燥，將在(4)步驟基礎(chǔ)上，開動凍干機冷凝室制冷溫度低于-47。C，開動真空泵使凍干機內(nèi)真空度升至300mTorr以上，緩慢通過板層加溫，使板層溫度升至-25~-10匸范圍內(nèi)進(jìn)行升華干燥，時間16-48小時;(6)解析干燥在(5)步驟結(jié)束后，升溫至-5。C25。C進(jìn)行解析干燥，時間2~10小時；(7)充氣、壓塞在(6)步驟結(jié)束，在2°C25。C范圍內(nèi)引入無菌的惰性氣體，再壓塞，得到無菌的三水合氨磷汀結(jié)晶凍干制劑；且上述整個凍干過程時間可控制在35小時內(nèi)完成，時間短，節(jié)能。在所述的(1)步驟中，還可在所得溶液中加入常規(guī)藥學(xué)上可接受的輔劑中的一種或一種以上的物質(zhì)，如賦形劑、鎮(zhèn)痛劑和緩沖劑等。在所述的(2)步驟中，所述活性炭用量可以是氨磷汀用量的0.05%~5%(重量百分比)，優(yōu)選0.1%~2.0%。加入活性炭后，在20。C25。C下攪拌15~30分鐘，過濾脫碳。所述過濾除菌可以用0.22(im微孔濾膜過濾。所述的(4)步驟冷凍溫度達(dá)-25t:，冷凍2~10小時，優(yōu)選3~5小時。所述的(5)步驟升華干燥，優(yōu)選溫度冷凍在-25r時，將凍干機真空度升至300mTorr以上，緩慢加熱，板層溫度由-25。C緩慢升至-20-10。C，范圍進(jìn)行升華干燥16~24小時。所述的(6)解析干燥步驟，控制凍干機得板層溫度在-5。C~25°C，優(yōu)選-5。C~15°C,保持5-10小時。本發(fā)明無菌的三水合氨磷汀結(jié)晶凍干制劑為正常細(xì)胞保護劑，主要用于各種癌癥的輔助治療，減輕放、化療對人體正常組織的毒副作用。使用本發(fā)明的凍干粉針一般每次使用劑量在200~900mg范圍，把凍干粉針溶解于注射用水或其它注射液，所述注射液是常規(guī)注射液，如5%葡萄糖注射液或0.9%氯化鈉注射液。給藥方式可靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、皮下、腔內(nèi)和鞘內(nèi)給藥。本發(fā)明的無菌含三水合氨磷汀結(jié)晶凍干制劑性能穩(wěn)定，使用時溶解充分迅速，其制備過程便利，工藝時間短、節(jié)能、高效，適合規(guī)?；a(chǎn)，易于運輸和儲存。圖1A和圖1B是本發(fā)明制備實施例1得到的三水合氨磷汀晶體的XRPD語圖和數(shù)據(jù)。圖2是本發(fā)明制備實施例1得到的三水合氨磷汀晶體的X射線單晶衍射圖。圖3是本發(fā)明制備實施例1得到的三水合氨磷汀晶體的電子顯微鏡照片，從圖中清楚表明三水合氨磷汀是以晶體形式存在，并且是扁平狀晶體。具體實施例方式下面實施例是對本發(fā)明進(jìn)一步說明和描述，這些說明和描述并不是對本
發(fā)明內(nèi)容的進(jìn)一步限制。一.高純穩(wěn)定的三水合氨磷汀晶體的制備制備實施例1步驟1:合成在50L不銹鋼反應(yīng)釜中加入純水13.6kg，十二水硫代磷酸鈉19.2mol(7,6kg),攪拌下加入N陽(2-溴乙基)-l，3-丙二胺雙氫溴酸鹽19.8mol(6.8kg,3%過量)，緩慢加入ll.OkgDMSO，同時維持反應(yīng)溫度不超過25°C。滴加完DMSO后，用硝酸銀溶液監(jiān)測反應(yīng)溶液，至無黑色沉淀析出，反應(yīng)結(jié)束，將反應(yīng)溶液降溫至0。C,每小時攪拌5分鐘，維持18小時。離心過濾，得三水合3-氨基丙基胺乙基硫代磷酸粗品6.1kg。步驟2:第一次重結(jié)晶提純在50L不銹鋼結(jié)晶釜中加入22.0kg純水，加入上步制備的3-氨基丙基胺乙基硫代磷酸粗品6.1kg，在室溫下溶解，加入活性炭95.0g，室溫下攪拌15分鐘，過濾，母液中加入曱醇8.7kg,通冷卻水降溫至0。C，維持18小時，離心過濾，得一次重結(jié)晶精制無結(jié)晶水3-氨基丙基胺乙基硫代磷酸4.8kg。步驟3:第二次重結(jié)晶提純在50L不銹鋼結(jié)晶釜中加入20.0kg純水，加入第一次重結(jié)晶得到的無結(jié)晶水3-氨基丙基胺乙基硫代磷酸4.8kg,在室溫下攪拌溶解，加入活性炭75.0g,室溫下攪拌15分鐘，過濾，母液中加入乙醇3.2kg,通冷卻水降溫至0。C，維持18小時，離心過濾，30。C真空干燥，得三水合3-氨基丙基胺乙基硫代磷酸3.6kg。采用HPLC法(按美國29版藥典方法)分析，純度99.81%,硫醇含量0.021%，其他有關(guān)物質(zhì)0.078%。表1給出了上述制備的三水合3-氨基丙基胺乙基硫代磷酸晶體與市場上氨磷汀含量和有關(guān)物質(zhì)含量的對比序含量碗寧二磁^它1市場(07301)99.010.550.190.23市場(07313)98.990.550.220.243本制備實施例99.810.0210.00.078從表1中可以看出，本發(fā)明制備的三水合氨磷汀晶體的含量要高于市場購置的三水合氨磷汀，同時有關(guān)物質(zhì)硫醇、二硫化合物及其它有關(guān)物質(zhì)都大大低于目前市場購置的產(chǎn)品。采用D/MAX-2400X射線衍射儀，在管壓40KV,管流100mA,Cu耙Aa，測試角度4-60°，6。/min，防擴散狹縫1°,防漫反射狹縫1°,接收狹縫0.15mm,測得該晶體X-射線粉末衍射圖如圖1A和圖1B所示。圖3為該晶體的電子顯微鏡照片，從圖中清楚表明三水合氨磷汀以晶體形式存在，并且是扁平片狀晶體。三水合氨磷汀晶體結(jié)構(gòu)測定三水合氨磷汀晶體的晶體結(jié)構(gòu)已被測定。在室溫下用鉬輻射完成晶體測量，單位晶胞的測定和數(shù)據(jù)的收集。結(jié)構(gòu)由直接方法求解并經(jīng)全矩陣最小二乘法和傅立葉差分法精確。所有非氫原子各向異性地準(zhǔn)確，連接至氮和水的氧原子的氫原子由傅立葉差分圖定位并各向同性地精確?；衔锏氖中钥臻g群P2:2:2中晶化，三水合3-氨基丙基胺乙基硫代磷酸晶體結(jié)構(gòu)圖如附圖2所示。所用儀器CCDX射線單晶衍射儀，型號BrukerSmartAPEXII型。表2.三水合3-氨基丙基胺乙基硫代磷酸晶體X-單晶衍射數(shù)據(jù)12<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>0(3)635(2)6190(2)880(1)34(1)N(2)2646(2)-1329(3)-13(1)28(1)0(2)1914(2)3360(2)969(1)29(1)0(1)3863(2)5403(2)385(1)33(1)N(l)5491(2)2031(3)1292(1)25(1)C(l)6162(3)4709(3)1721(1)33(1)C(2)6046(3)2961(3)1851(1)32(1)C(3)5365(3)304(3)1413(1)30(1)C(4)5009(3)-610(3)818(1)29(1)C(5)2983(3)-304(3)538(1)29(1)0(3W)-1449(2)2254(3)443(1)43(1)0(2W)950(4)1630(3)2058(1)51(1)O(IW)-281(4)8430(3)1827(1)56(1)表4.DSl的鍵長和鍵角P(l)-0(1)1.5115(17)P(l)-0(3)1.5134(16)P(l)-0(2)1.519(2)P(l)-S(l)2.1109(7)S(l)-C(l)1.828(2)N(2)_C(5)1.485(3)N(2)-H(2A)0.8600N(2)-H(2B)0,86000(2)-H(2C)0.82000(1)-H(IA)0.8200N(l)_C(3)1.485(3)N(l)_C(2)1.487(3)N(l)-H(IB)0.8600C(l)-C(2)1.506(4)C(l)-H(IC)0,9700C(l)-H(ID)0.9700C(2)-H咖0.9700C(2)-H(2E)0.9700C(3)-C(4)1.514(4)C(3)-H(3B)0.9700C(3)-H(3C)0.9700C(4)-C(5)1.518(3)C(4)-H(4A)0.9700C(4)-H(4B)0.9700C(5)-H(5A)0.9700C(5)-H(5B)0.97000(1)-P(l)-0(3)112.63(11)0(1)-P(1)-0(2)111.82(11)0(3)-P(1)-0(2)114.50(10)0(1)-P(1)-S(l)107.54(7)0(3)-P(l)-S(l)103.03(7)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>N(1)-C(3)-H(3C)肌4C(4)-C(3)-H(3C)109.4H(犯)-C(3)-H(3C)108.0C(3)-C(4)-C(5)113.11(19)C(3)-C(4)-H(4A)109.0C(5)-C(4)-H(4A)109.0C(3)-C(4)-H(4B)109.0C(5)-C(4)-H(4B)109.0H(4A)-C(4)-H(4B)107.8N(2)-C(5)-C(4)110.87(19)N(2)-C(5)-H(5A)109.5C(4)-C(5)-H(5A)109.5N(2)-C(5)-H(5B)109.5C(4)-C(5)-H(5B)109.5H(5A)-C(5)-H(5B)]08.1二、三水合氨磷汀結(jié)晶凍干制劑的制備實施例1溶液配制用100.0g三水合結(jié)晶氨磷汀(大連美羅大藥廠)，加入600ml注射用水，室溫攪拌溶解后，攪拌狀態(tài)下加入42.1ml的95%乙醇和40ml丙酮的混合溶劑，加注射用水定容至800ml;除熱原、除菌室溫下加入O.lg的針用活性炭，攪拌15分鐘，脫碳過濾，濾液通過0.22[mi微孔濾膜過濾至澄清；灌裝在100級潔凈區(qū)條件下，將上述澄清溶液灌裝于潔凈無菌的管制注射劑瓶中，每瓶4.0ml(以無水物計含氨磷汀400mg);預(yù)凍把灌裝含有無菌氨磷汀溶液的管制注射劑瓶放置到凍干機的板層上，通過設(shè)置板層溫度進(jìn)行冷凍，達(dá)溫度-25t:，維持4小時；升華干燥預(yù)凍結(jié)束后，開動凍干機冷凝室制冷溫度低于-47。C，開動真空泵使凍干機內(nèi)真空度升至300mTorr以上，緩慢通過板層加溫，使板層溫度從-25。C升至-16。C進(jìn)行升華干燥，升華干燥24小時；解析干燥在升華干燥后，通過設(shè)置板層溫度從-16。C升溫至4°C，維持4小時；充氣、壓塞在解析干燥步驟結(jié)束，在4。C引入無菌的氮氣，再壓塞，即得到無菌的三水合氨磷汀結(jié)晶凍干制劑A。實施例2按照實施例1的方法制備本發(fā)明三水合氨磷汀結(jié)晶凍干制劑B，只是采用本發(fā)明上述制備的三水合氨磷汀晶體120.0g;加入95%的乙醇33.7ml和40ml丙酮的混合溶劑。實施例3按照實施例1的方法制備本發(fā)明三水合氨磷汀結(jié)晶凍干制劑C,只是采用本發(fā)明上述制備的三水合氨磷汀晶體60.0g,加入95%的乙醇63.2ml和60ml丙酮的混合;容劑。實施例4按照實施例1的方法制備本發(fā)明三水合氨磷汀結(jié)晶凍干制劑D,只是溶液配制中加入賦形劑甘露醇80.0g;預(yù)凍把灌裝含有無菌氨磷汀溶液的管制注射劑瓶放置到凍千機的板層上，通過設(shè)置板層溫度進(jìn)行冷凍，達(dá)溫度-30°C,維持4小時；升華干燥預(yù)凍結(jié)束后，開動凍干機冷凝室制冷溫度低于-47。C,開動真空泵使凍干機內(nèi)真空度升至300mTorr以上，緩慢通過板層加溫，使板層溫度從-30。C升至-2(TC進(jìn)行升華干燥，升華干燥24小時；解析干燥在升華干燥后，通過設(shè)置板層溫度從-20。C升溫至5°C,維持6小時。實施例5將本發(fā)明的三水合氨磷汀結(jié)晶凍干制劑A,B,C，D置于溫度為25°C±2°C，相對濕度為60%±50/0條件，分別在O,1,3,6,12個月時取樣分析其性狀、pH值、溶液澄清度與顏色、水分、有關(guān)物質(zhì)和含量測定(按USP29方法)。結(jié)果見表5。同時與中國專利ZL200410037763.X的實施例IO數(shù)據(jù)對比，見表5。表5本發(fā)明制備注射用三水合氨磷汀結(jié)晶凍干制劑與現(xiàn)有技術(shù)對比室溫穩(wěn)定性試驗結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>注1:中國專利ZL200410037763.X中數(shù)據(jù)，中國專利ZL200410037763.X中的氨磷汀含量和相關(guān)物質(zhì)含量的測定方法未公開。注2:中國專利ZL200410037763.X水分含量是用干燥失重法測定。從表5中發(fā)現(xiàn)本發(fā)明提供高純?nèi)习绷淄〗Y(jié)晶制劑的有關(guān)物質(zhì)含量(<0.10%)低于中國ZL200410037763.X公開的(0.35~0.39%)水平，本發(fā)明三水合氨磷汀結(jié)晶凍干制劑在室溫狀態(tài)一年，其它有關(guān)物質(zhì)沒有改變，但硫醇和二硫化合物略有增加，符合USP29版要求。將本發(fā)明的制劑A,B，C，D置于溫度為40°C±2°C，相對濕度為75%±5%條件，分別在O,1,2，3，6個月時取樣分析其性狀、pH值、溶液澄清度與顏色、水分、有關(guān)物質(zhì)和含量測定。結(jié)果見表6。表6本發(fā)明制備注射用三水合氨磷汀結(jié)晶凍干制劑加速試驗結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>表7中國專利ZL93117436.8的加速試驗結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table>從表6、表7看出，本發(fā)明的三水合氨磷汀結(jié)晶凍干制劑的穩(wěn)定性比中國專利ZL93117436.8中公開方法制備的三水氨磷汀結(jié)晶更穩(wěn)定。且本發(fā)明的凍干過程時間短、節(jié)能。權(quán)利要求1、一種無菌的三水合氨磷汀結(jié)晶凍干制劑，其特征是，由含有氨磷汀、丙酮與乙醇混合溶劑和水組成的混合溶液，經(jīng)除去熱原、過濾除菌，凍干后制得。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的三水合氨磷汀結(jié)晶凍干制劑，其特征是，所述含有氨磷汀、丙酮與乙醇混合溶劑和水組成的混合溶液中，含有氨磷汀50~400mg/ml,1~30%體積百分比的丙酮和乙醇混合溶劑，和65~99%體積百分比的水。3、根據(jù)權(quán)利要求2所述的三水合氨磷汀結(jié)晶凍干制劑，其特征是，所述含有氨磷汀、丙酮與乙醇混合溶劑和水組成的混合溶液中，含有氨磷汀氨磷汀80~200mg/ml,6~15%體積百分比的丙酮與乙醇混合溶劑，和85~94%體積百分比的水。4、根據(jù)權(quán)利要求1、2或3所述的三水合氨磷汀結(jié)晶凍干制劑，其特征是，所述的丙酮與乙醇的混合溶劑，丙酮與乙醇配比為0.2~4.0:1,按體積、百分比i十。5、根據(jù)權(quán)利要求4所述的三水合氨磷汀結(jié)晶凍干制劑，其特征是，所述的丙酮與乙醇的混合溶劑，丙酮與乙醇配比為0.52.0:1,4要體積百分比計。6、根據(jù)權(quán)利要求1所述的三水合氨磷汀結(jié)晶凍干制劑，其特征是，所述氨磷汀來自三水合氨磷汀晶體。7、根據(jù)權(quán)利要求6所述的三水合氨磷汀結(jié)晶凍干制劑，其特征是，所述三水合氨磷汀晶體為按如下方法得到的三水合氨磷汀晶體步驟1:將反應(yīng)物N-(2-溴乙基)-l，3-丙二胺雙氫溴酸鹽與硫代磷酸鈉按1.01-1.2:1.0的摩爾比例溶解于水中，加入極性非質(zhì)子溶劑二曱基亞砜作為促進(jìn)劑，在104(TC反應(yīng)；反應(yīng)后，反應(yīng)物溶液不用醇析，直接冷卻析出粗產(chǎn)品三水合氨磷汀粗品；步驟2:將步驟l得到的三水合氨磷汀粗品進(jìn)行第一次重結(jié)晶提純，將三水合氨磷汀粗品溶解于水中，然后用曱醇析出，得到無結(jié)晶水氨磷??；步驟3:將步驟2得到的無結(jié)晶水氨磷汀進(jìn)行第二次重結(jié)晶提純，將無結(jié)晶水氨磷汀溶解于水中，并用無結(jié)晶水氨磷汀重量的0.11.50%的活性炭脫色，然后用乙醇析出三水合氨磷汀晶體，其純度299.5%,硫醇含量^).1%,其他有關(guān)物質(zhì)含量^0.1%;在上述制備方法中，所用水為純水或去離子水。8、根據(jù)權(quán)利要求1-7中任一項所述的三水合氨磷汀結(jié)晶凍干制劑，其特征是，所述三水合氨磷汀結(jié)晶凍干制劑按如下方法制得，該方法包括以下步驟(1)制備含有氨磷汀、丙酮與乙醇混合溶劑和水組成的混合溶液配制含有氨磷汀、丙酮與乙醇混合溶劑和水的混合溶液；(2)除熱原、除菌對(1)步驟配制好的溶液用活性炭脫色，除去熱原，過濾除菌；(3)灌裝在100級潔凈區(qū)條件下，灌裝(2)步驟處理后的溶液到凍干管制注射劑瓶中，灌裝含氨磷汀80~900mg/瓶，其溶液量0.5~6.0m1/瓶；(4)預(yù)凍把灌裝含有無菌氨磷汀溶液的管制注射劑瓶放置到凍干機的板層上，通過設(shè)置板層溫度進(jìn)行冷凍，板層溫度達(dá)-16。C~-45°C,降溫速度20分鐘〃C~1分鐘/。C,維持時間2~16小時；(5)升華干燥在-45。C-10。C范圍進(jìn)行升華干燥，將在(4)步驟基礎(chǔ)上，開動凍干機冷凝室制冷溫度低于-47。C,開動真空泵使凍干機內(nèi)真空度升至300mTorr以上，緩慢通過板層加溫，使板層溫度升至-25-10。C范圍內(nèi)進(jìn)行升華干燥，時間16~48小時；(6)解析干燥在(5)步驟結(jié)束后，升溫至-5。C25。C進(jìn)行解析干燥，時間2~10小時；(7)充氣、壓塞在(6)步驟結(jié)束，在2°C25。C范圍內(nèi)引入無菌的惰性氣體，再壓塞，得到無菌的三水合氨磷汀結(jié)晶凍干制劑。9、根據(jù)權(quán)利要求8所述的三水合氨磷汀結(jié).晶凍干制劑，其特征是，在所述(l)步驟中，向三水合結(jié)晶氨磷汀加入注射用水，室溫攪拌溶解后，攪拌狀態(tài)下加入丙酮與乙醇的混合溶劑，加注射用水定容，得到含有氨磷汀、丙酮與乙醇混合溶劑和水的混合溶液；在所述(3)步驟灌裝中，在100級潔凈區(qū)條件下，灌裝(2)步驟處理后的溶液到凍干管制注射劑瓶中，含氨磷汀100700mg/瓶，其溶液量1.06.0ml/瓶;在所述(4)步驟預(yù)凍中，把灌裝含有無菌氨磷汀溶液的管制注射劑瓶放置到凍干機的板層上，通過設(shè)置板層溫度進(jìn)行冷凍，板層溫度達(dá)-20。C-30°C，降溫速度15分鐘廠C~3分鐘廠C,維持時間48小時；且整個凍干過程時間控制在35小時內(nèi)完成。10、根據(jù)權(quán)利要求1所述的三水合氨磷汀結(jié)晶凍干制劑，其特征是，所述含有氨磷汀、丙酮與乙醇混合溶劑和水組成的混合溶液中進(jìn)一步包括賦形劑甘露醇。全文摘要本發(fā)明屬于藥物制劑領(lǐng)域，公開了一種無菌的三水合氨磷汀結(jié)晶凍干制劑及其制備方法。本發(fā)明的三水合氨磷汀結(jié)晶凍干制劑，由含有氨磷汀、丙酮與乙醇混合溶劑和水組成的混合溶液，經(jīng)除去熱原、0.22μm膜過濾除菌，灌裝，再經(jīng)預(yù)凍、升華干燥、解析干燥、充氣、壓塞，而制得。本發(fā)明的三水合氨磷汀結(jié)晶凍干制劑性能穩(wěn)定，其制備過程便利，工藝時間短，凍干工藝時間小于35小時，節(jié)能、高效，適合規(guī)模化生產(chǎn)，易于運輸和貯存。文檔編號A61K9/19GK101347412SQ200810146538公開日2009年1月21日申請日期2008年9月2日優(yōu)先權(quán)日2008年9月2日發(fā)明者孟慶偉,張成海,李紅梅,苗蔚榮,董述祥,郝雅男,健都,陳祥麟申請人:大連美羅藥業(yè)股份有限公司;大連理工大學(xué)