專(zhuān)利名稱(chēng)：促進(jìn)脂質(zhì)體包裹的干細(xì)胞生長(zhǎng)因子透皮吸收的裝置和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明特別涉及一種促進(jìn)脂質(zhì)體包裹的干細(xì)胞生長(zhǎng)因子透皮吸收的裝置和應(yīng)用， 屬于美容和醫(yī)療領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
人干細(xì)胞生長(zhǎng)因子(humanstem cell growth factor, hSCGF,又名 LSLCL)是一種在骨髓造血微環(huán)境中起作用的早期造血刺激因子，分子量31000 36000范圍，具有多種生物學(xué)活性，主要分布于腦、肝臟、骨髓、胎盤(pán)、睪丸、腎臟等，由這些組織(尤其骨髓)中的基質(zhì)細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、卵細(xì)胞、足細(xì)胞、肝細(xì)胞產(chǎn)生。其基因定位于人染色體19ql3. 3，由4個(gè)外顯子和3個(gè)內(nèi)含子組裝成。已知人干細(xì)胞生長(zhǎng)因子具有兩種形式， 全長(zhǎng)分子hSCGF-α (成熟mRNA完全開(kāi)放讀碼框972bp，編碼323個(gè)氨基酸，表達(dá)蛋白大小約為45KDa)和在C端保守的Ca2+依賴(lài)糖識(shí)別結(jié)構(gòu)域(calcium dependent carbohydrate recognition domain, CRD)內(nèi)缺失 78 氨基酸(erythropoietin, Epo)、協(xié)同作用對(duì)紅細(xì)胞系有紅細(xì)胞爆發(fā)促進(jìn)活性的的截短型分子hSCGF- β (成熟mRNA長(zhǎng)738bp，編碼245個(gè)氨基酸)，因此屬于C型凝集素(C-type lectin)超家族成員。研究證實(shí)，SCGF在各種組織的損傷修復(fù)，傷口的愈合過(guò)程中有顯著的作用，SCGF 可促進(jìn)血管生成、創(chuàng)傷愈合。hSCGF-β在維持肥大細(xì)胞生理狀態(tài)下的存活中發(fā)揮作用，參與慢性炎癥時(shí)血管形成、纖維化、白細(xì)胞歸巢等病理過(guò)程；hSCGF_a通過(guò)促進(jìn)肥大細(xì)胞增殖與活化，參與各種應(yīng)急病理反應(yīng)如超敏反應(yīng)或急性炎癥反應(yīng)，并促進(jìn)組織纖維化的形成過(guò)程。在皮膚細(xì)胞衰老的過(guò)程中，脂質(zhì)體包裹的SCGF可通過(guò)作用于真皮層的成纖維干細(xì)胞， 使處于休眠、損傷的成纖維干細(xì)胞被激活和修復(fù)并成熟分化大量的成纖維細(xì)胞，從而起到抗皮膚衰老的作用。人皮膚由表皮、真皮和皮下結(jié)締組織三層構(gòu)成。角質(zhì)層是表皮的一部分，位于皮膚的最外層。藥物或營(yíng)養(yǎng)成分，尤其是生物大分子等活性成分透皮吸收的最大障礙是位于最外層的角質(zhì)層。大量研究證明，在皮膚單純涂抹時(shí)，小分子成分的透皮吸收率不超過(guò)1%， 而生物大分子成分的透皮吸收率幾乎為零。通過(guò)脂質(zhì)體包裹制成脂質(zhì)體包裹的干細(xì)胞生長(zhǎng)因子，雖然有效的解決了 SCGF的穩(wěn)定性問(wèn)題，并且由于脂質(zhì)體材料與皮膚細(xì)胞脂質(zhì)雙分子層的良好相容性改善了干細(xì)胞生長(zhǎng)因子對(duì)皮膚的通透性，但傳統(tǒng)脂質(zhì)體對(duì)轉(zhuǎn)運(yùn)藥物到達(dá)皮膚深層的作用并不明顯，從而使得脂質(zhì)體包裹的干細(xì)胞生長(zhǎng)因子在皮膚外部的應(yīng)用受到限制。離子導(dǎo)入技術(shù)和電致孔技術(shù)都是通過(guò)在皮膚上外加電場(chǎng)促進(jìn)藥物透皮吸收的物理技術(shù)，其中離子導(dǎo)入技術(shù)主要作用于藥物，使藥物離子化，然后使離子化的藥物在電場(chǎng)作用下通過(guò)皮膚上已存在的通道滲透轉(zhuǎn)運(yùn)；電致孔技術(shù)主要作用于皮膚，在脂質(zhì)雙分子層上形成暫時(shí)的孔道，增強(qiáng)皮膚滲透性。目前已知的方法還沒(méi)有將離子導(dǎo)入技術(shù)與電致孔技術(shù)聯(lián)合用于促進(jìn)脂質(zhì)體包裹的干細(xì)胞生長(zhǎng)因子的透皮吸收，也沒(méi)有專(zhuān)用裝置用于此用途。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的首要目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的缺點(diǎn)與不足，提供一種促進(jìn)脂質(zhì)體包裹的干細(xì)胞生長(zhǎng)因子透皮吸收的裝置。該裝置是將過(guò)促使藥物透入機(jī)體的電致孔技術(shù)和離子導(dǎo)入技術(shù)的疊加輸出，有機(jī)聯(lián)合施加于皮膚和脂質(zhì)體包裹的干細(xì)胞生長(zhǎng)因子上，使得電致孔和離子導(dǎo)入以各自的特點(diǎn)共同促進(jìn)干細(xì)胞生長(zhǎng)因子透入體內(nèi)。本發(fā)明的另一目的在于提供上述裝置的應(yīng)用。本發(fā)明的目的通過(guò)下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)一種促進(jìn)脂質(zhì)體包裹的干細(xì)胞生長(zhǎng)因子透皮吸收的裝置，包括主機(jī)和應(yīng)用單元，主機(jī)和應(yīng)用單元通過(guò)信號(hào)輸出電纜連接；其中，主機(jī)包括電源單元、用于獲得脈沖電流或直流電流的信號(hào)發(fā)生和處理單元、參數(shù)設(shè)置和顯示單元；電源單元包括電源和變壓整流裝置；信號(hào)發(fā)生和處理單元包括信號(hào)發(fā)生電路、信號(hào)放大電路和信號(hào)調(diào)制電路；參數(shù)設(shè)置和顯示單元包括用于控制信號(hào)調(diào)制電路的參數(shù)設(shè)置電路和參數(shù)顯示電路；應(yīng)用單元包括治療頭；電源、變壓整流裝置、信號(hào)發(fā)生電路、信號(hào)放大電路、信號(hào)調(diào)制電路和治療頭依次連接；參數(shù)顯示電路分別與參數(shù)設(shè)置電路和信號(hào)調(diào)制電路連接，用于顯示設(shè)置的參數(shù)和輸出的參數(shù)；所述的電源單元優(yōu)選還含有熔斷器，電源、熔斷器和變壓整流裝置依次連接；所述的信號(hào)發(fā)生電路為脈沖信號(hào)發(fā)生電路；所述的應(yīng)用單元還包括用于與信號(hào)輸出電纜連接的連接插頭；連接插頭位于信號(hào)調(diào)制電路和治療頭之間；所述的治療頭包括外殼和傳輸電極；傳輸電極通過(guò)信號(hào)輸出電纜與參數(shù)設(shè)置電路連接；所述的裝置的應(yīng)用，包括以下步驟(I)啟動(dòng)電源單元，通過(guò)參數(shù)設(shè)置電路設(shè)置峰值電壓為25 450V的脈沖電流和電壓小于25V的直流或脈沖電流構(gòu)成電場(chǎng)；峰值電壓為25 450V的脈沖電流用于產(chǎn)生電致孔作用，電壓小于25V的直流或脈沖電流用于產(chǎn)生離子導(dǎo)入作用；(2)通過(guò)參數(shù)顯示電路觀測(cè)到經(jīng)信號(hào)調(diào)制電路調(diào)制得到的參數(shù)，達(dá)到符合要求的參數(shù)即可，將治療頭緊密貼于皮膚；輸出程式10s的電致孔先導(dǎo)脈沖和隨后的離子電導(dǎo)疊加輸出每IOmin重復(fù)；(3)透藥實(shí)施完畢，通過(guò)參數(shù)顯示電路觀察經(jīng)信號(hào)調(diào)制電路調(diào)制得到的參數(shù)歸于零位，檢查皮膚即可。步驟(2)中所述的符合要求的參數(shù)優(yōu)選如下電致孔方波，占空比I 1，周期30ms，電壓200V ;離子導(dǎo)入波形2000Hz方波，占空比I : 1，調(diào)制波形IOOHz正弦半波，峰值電壓 IOV ;輸出時(shí)間30min。本發(fā)明提供的裝置的作用機(jī)制是(如圖I所示)通過(guò)電源單元將電流經(jīng)變壓整流輸入信號(hào)發(fā)生和處理單元；經(jīng)信號(hào)發(fā)生電路產(chǎn)生信號(hào)，再經(jīng)信號(hào)放大電路放大，放大的信號(hào)進(jìn)入信號(hào)調(diào)制電路。參數(shù)設(shè)置電路控制信號(hào)調(diào)制電路，通過(guò)參數(shù)設(shè)置電路的設(shè)置，由信號(hào)調(diào)制電路調(diào)制出需要的電場(chǎng)信號(hào)；參數(shù)顯示電路分別與參數(shù)設(shè)置電路和信號(hào)調(diào)制電路連接，用于顯示設(shè)置的參數(shù)和輸出的參數(shù)；電信號(hào)傳輸至治療頭產(chǎn)生一定形式的電信號(hào)，使離子導(dǎo)入和電致孔疊加輸出產(chǎn)生透藥促進(jìn)作用。首先通過(guò)電致孔脈沖電流的致孔作用，改變皮膚角質(zhì)層脂質(zhì)分子的定向排列，形成可滲透性的暫時(shí)通道，形成藥物進(jìn)入的通透區(qū)。然后通過(guò)離子導(dǎo)入的電趨向作用施加于脂質(zhì)體包裹的干細(xì)胞生長(zhǎng)因子上，使之產(chǎn)生定向運(yùn)動(dòng)， 沿著已形成的通透區(qū)進(jìn)入人體，并在局部組織形成一定的濃度，達(dá)到靶位透藥局部治療的目的。本發(fā)明相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)具有如下的優(yōu)點(diǎn)及效果本發(fā)明能使多種透藥促進(jìn)作用相互補(bǔ)充協(xié)同、疊加倍增，極大的提高了藥物透入機(jī)體的效果，滿(mǎn)足靶位透藥局部治療的要求。


圖I是本發(fā)明裝置作用機(jī)制示意圖。圖2是本發(fā)明裝置的結(jié)構(gòu)示意圖；其中I-電源單元，2-信號(hào)發(fā)生和處理單元，3-參數(shù)設(shè)置和顯示單元，4-應(yīng)用單元。圖3是不同程序?qū)Ω杉?xì)胞生長(zhǎng)因子累積透過(guò)皮膚量的透皮實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例及附圖對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的描述，但本發(fā)明的實(shí)施方式不限于此。實(shí)施例I一種促進(jìn)脂質(zhì)體包裹的干細(xì)胞生長(zhǎng)因子透皮吸收的裝置，如圖2所示包括主機(jī)和應(yīng)用單元4，主機(jī)和應(yīng)用單元4通過(guò)信號(hào)輸出電纜連接；其中，主機(jī)為電源單元I、信號(hào)發(fā)生和處理單元2、參數(shù)設(shè)置和顯示單元3依次連接；應(yīng)用單元4包括治療頭和用于與信號(hào)輸出電纜連接的連接插頭；電源單元I包括電源、熔斷器、變壓整流裝置；電源、熔斷器、變壓整流裝置依次連接；變壓整流裝置包括變壓器和橋式整流電路；熔斷器連接、變壓器、橋式整流電路與信號(hào)發(fā)生和處理單元2中的信號(hào)發(fā)生電路依次連接；信號(hào)發(fā)生和處理單元2為信號(hào)發(fā)生電路、信號(hào)放大電路和信號(hào)調(diào)制電路依次連接得到；信號(hào)發(fā)生電路為脈沖發(fā)生電路；參數(shù)設(shè)置和顯示單元3包括用于控制信號(hào)調(diào)制電路的參數(shù)設(shè)置電路和參數(shù)顯示電路；參數(shù)顯示電路分別與參數(shù)設(shè)置電路和信號(hào)調(diào)制電路連接，用于顯示設(shè)置的參數(shù)和輸出的參數(shù)；參數(shù)設(shè)置電路中的片機(jī)驅(qū)動(dòng)各個(gè)硬件部分，執(zhí)行參數(shù)發(fā)生、設(shè)定、調(diào)控程序軟件的指令；治療頭包括外殼和傳輸電極，治療頭通過(guò)信號(hào)輸出電纜與信號(hào)發(fā)生和處理單元3 中的信號(hào)調(diào)制電路連接。實(shí)施例2 用實(shí)施例I獲得的儀器，進(jìn)行體外透皮釋藥試驗(yàn)，對(duì)大鼠體內(nèi)電致孔和離子導(dǎo)入藥物和組織內(nèi)藥物濃度測(cè)定。取180 200g的Wistar大鼠(購(gòu)自廣東實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心)，短頸處死，固定四肢，用質(zhì)量體積分?jǐn)?shù)4%的硫化鈉溶液脫去大鼠腹部毛，用生理鹽水洗凈大鼠腹部皮膚，用手術(shù)刀剝離腹部皮膚。分離皮下組織以及脂肪，選用無(wú)破損鼠皮浸泡于生理鹽水中，置于4°C冰箱中保存，24小時(shí)內(nèi)使用。將預(yù)先處理好的離體鼠皮置于水平擴(kuò)散池間，正負(fù)極等距于皮膚兩側(cè)。采用水平式雙室擴(kuò)散池(TK-6H型藥物透皮擴(kuò)散試驗(yàn)儀，上海鍇凱科技貿(mào)易有限公司)，以pH6. 8、 10mmol/L的磷酸鹽緩沖液為擴(kuò)散介質(zhì)。供體池加入人干細(xì)胞生長(zhǎng)因子脂質(zhì)體，人干細(xì)胞生長(zhǎng)因子在供體池?cái)U(kuò)散介質(zhì)中的濃度為lmg/mL，供體池和受體池中擴(kuò)散介質(zhì)體積各為
2.5mL。將治療頭浸入供體池中。離子導(dǎo)入用IOV(2000Hz方波，占空比I : 1，調(diào)制波形 IOOHz正弦半波，峰值電壓10V)，持續(xù)6h。電致孔采用電壓200V (方波，占空比I : 1，周期 30ms) ,3次.mirT1,脈沖90次,每次脈沖持續(xù)時(shí)間20 24ms。先電致孔O. 5h,再離子導(dǎo)入。 各時(shí)間點(diǎn)取樣，取樣量為1ml，樣品過(guò)濾后進(jìn)高效液相色譜柱，各進(jìn)3針，以平均峰面積求算濃度，并計(jì)算各種方式累積透過(guò)量。液相條件HP1100高效液相色譜色譜儀(美國(guó)Agilent公司)，C8色譜柱 (4. OmmX 250mm)(中國(guó)科學(xué)院大連化學(xué)物理所);UV檢測(cè)器，波長(zhǎng)280nm ;流動(dòng)相A :溶劑為超純水，體積百分比O. 1%的TFA (三氟乙酸);流動(dòng)相B :溶劑為乙腈，體積百分比O. 1%的 TFA(三氟乙酸)；洗脫程序0 50min，A :100% 10%，B :0% 90% ;進(jìn)樣量20 μ I。透皮實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖3所示6h末干細(xì)胞生長(zhǎng)因子累積透過(guò)量離子導(dǎo)入和電致孔分別為34. 31和31. 53μ g/cm2，電致孔與離子導(dǎo)入聯(lián)用累積透過(guò)量達(dá)92. 45μ g/cm2。結(jié)果表明2h后電致孔與離子導(dǎo)入聯(lián)用可顯著增加干細(xì)胞生長(zhǎng)因子的累積透過(guò)量；單獨(dú)使用電致孔或離子導(dǎo)入，干細(xì)胞生長(zhǎng)因子的累積透過(guò)量并無(wú)顯著性差異。所用的人干細(xì)胞生長(zhǎng)因子脂質(zhì)體通過(guò)如下步驟制備得到精密稱(chēng)取磷脂800mg， 膽固醇250mg，置于25ml茄形瓶中，加入氯仿使其溶解并定容至10ml，注入氮?dú)?，于冰浴?100W超聲lOmin，每間隔30s超聲一次，共超聲10次，制得超聲脂質(zhì)體。然后加入相當(dāng)于超聲脂質(zhì)體體積2 6倍的氯仿使之溶解，35 45°C水浴中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，除盡所有的有機(jī)溶劑， 再加入含有200mg SCGF (hSCGF-α，購(gòu)自P印rotech公司)、2· Og右旋糖苷和I. 5g蔗糖的磷酸緩沖鹽溶液(PH6. 8、10mmol/L)適量，充入氮?dú)?，冰浴下水?2h，間歇超聲IOmin (超聲功率100W，每間隔30s超聲一次)。用O. 22 μ m微孔濾膜超濾后加入質(zhì)量體積比10%的甘露醇，抽真空冷凍干燥，使水分完全升華后立即用適量磷酸緩沖鹽溶液(pH6.8，10mmol/L)重新水化脂質(zhì)，用等量遞加法加入少量水(開(kāi)始兩次先加1ml，再相續(xù)增加至2ml)，接下來(lái)補(bǔ)加水至10ml。每次加水都要充分渦旋攪拌，用孔徑200nm的聚碳酸酯膜擠出，收集樣品，即得粒徑在50nm 200nm范圍的脂質(zhì)體溶液，為人干細(xì)胞生長(zhǎng)因子脂質(zhì)體。上述實(shí)施例為本發(fā)明較佳的實(shí)施方式，但本發(fā)明的實(shí)施方式并不受上述實(shí)施例的限制，其他的任何未背離本發(fā)明的精神實(shí)質(zhì)與原理下所作的改變、修飾、替代、組合、簡(jiǎn)化， 均應(yīng)為等效的置換方式，都包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種促進(jìn)脂質(zhì)體包裹的干細(xì)胞生長(zhǎng)因子透皮吸收的裝置，其特征在于包括主機(jī)和應(yīng)用單元，主機(jī)和應(yīng)用單元通過(guò)信號(hào)輸出電纜連接；其中，主機(jī)包括電源單元、用于獲得脈沖電流或直流電流的信號(hào)發(fā)生和處理單元、參數(shù)設(shè)置和顯示單元；電源單元包括電源和變壓整流裝置；信號(hào)發(fā)生和處理單元包括信號(hào)發(fā)生電路、信號(hào)放大電路和信號(hào)調(diào)制電路；參數(shù)設(shè)置和顯示單元包括用于控制信號(hào)調(diào)制電路的參數(shù)設(shè)置電路和參數(shù)顯示電路；應(yīng)用單元包括治療頭；電源、變壓整流裝置、信號(hào)發(fā)生電路、信號(hào)放大電路、信號(hào)調(diào)制電路和治療頭依次連接；參數(shù)顯示電路分別與參數(shù)設(shè)置電路和信號(hào)調(diào)制電路連接。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的促進(jìn)脂質(zhì)體包裹的干細(xì)胞生長(zhǎng)因子透皮吸收的裝置，其特征在于所述的電源單元包含熔斷器，熔斷器位于電源和變壓整流裝置之 間。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的促進(jìn)脂質(zhì)體包裹的干細(xì)胞生長(zhǎng)因子透皮吸收的裝置，其特征在于所述的信號(hào)發(fā)生電路為脈沖信號(hào)發(fā)生電路。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的促進(jìn)脂質(zhì)體包裹的干細(xì)胞生長(zhǎng)因子透皮吸收的裝置，其特征在于所述的應(yīng)用單元還包括用于與信號(hào)輸出電纜連接的連接插頭；連接插頭位于信號(hào)調(diào)制電路和治療頭之間。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的促進(jìn)脂質(zhì)體包裹的干細(xì)胞生長(zhǎng)因子透皮吸收的裝置，其特征在于所述的治療頭包括外殼和傳輸電極；傳輸電極通過(guò)信號(hào)輸出電纜與參數(shù)設(shè)置電路連接。
6.權(quán)利要求I 5任一項(xiàng)所述的促進(jìn)脂質(zhì)體包裹的干細(xì)胞生長(zhǎng)因子透皮吸收的裝置的應(yīng)用，其特征在于包括以下步驟(1)啟動(dòng)電源單元，通過(guò)參數(shù)設(shè)置電路設(shè)置峰值電壓為25 450V的脈沖電流和電壓小于25V的直流或脈沖電流構(gòu)成電場(chǎng)；峰值電壓為25 450V的脈沖電流用于產(chǎn)生電致孔作用，電壓小于25V的直流或脈沖電流用于產(chǎn)生離子導(dǎo)入作用；(2)通過(guò)參數(shù)顯示電路觀測(cè)到經(jīng)信號(hào)調(diào)制電路調(diào)制得到的參數(shù)，達(dá)到符合要求的參數(shù)， 將治療頭緊密貼于皮膚進(jìn)行透藥；(3)透藥實(shí)施完畢，通過(guò)參數(shù)顯示電路觀察經(jīng)信號(hào)調(diào)制電路調(diào)制得到的參數(shù)歸于零位， 檢查皮膚即可。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的促進(jìn)脂質(zhì)體包裹的干細(xì)胞生長(zhǎng)因子透皮吸收的裝置的應(yīng)用， 其特征在于步驟(2)中所述的符合要求的參數(shù)如下電致孔方波，占空比I : 1，周期30ms，電壓200V;離子導(dǎo)入波形2000Hz方波，占空比I : 1，調(diào)制波形IOOHz正弦半波，峰值電壓IOV ; 輸出時(shí)間30min ；輸出程式10s的電致孔先導(dǎo)脈沖和隨后的離子電導(dǎo)疊加輸出每IOmin重復(fù)。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)一種促進(jìn)脂質(zhì)體包裹的干細(xì)胞生長(zhǎng)因子透皮吸收的裝置和應(yīng)用。該裝置包括電源單元、用于獲得脈沖電流或直流電流的信號(hào)發(fā)生和處理單元、參數(shù)設(shè)置和顯示單元以及應(yīng)用單元；電源單元包括電源和變壓整流裝置；信號(hào)發(fā)生和處理單元包括信號(hào)發(fā)生電路、信號(hào)放大電路和信號(hào)調(diào)制電路；參數(shù)設(shè)置和顯示單元包括參數(shù)設(shè)置電路和參數(shù)顯示電路；應(yīng)用單元包括治療頭；電源、變壓整流裝置、信號(hào)發(fā)生電路、信號(hào)放大電路、信號(hào)調(diào)制電路和治療頭依次連接；參數(shù)顯示電路分別與參數(shù)設(shè)置電路和信號(hào)調(diào)制電路連接。本發(fā)明能使多種透藥促進(jìn)作用相互補(bǔ)充協(xié)同、疊加倍增，極大的提高了藥物透入機(jī)體的效果，滿(mǎn)足靶位透藥局部治療的要求。
文檔編號(hào)A61M37/00GK102600547SQ201210024980
公開(kāi)日2012年7月25日 申請(qǐng)日期2012年2月6日 優(yōu)先權(quán)日2012年2月6日
發(fā)明者任哲, 劉薇, 楊珂, 王一飛, 舒輝萍, 陳海佳 申請(qǐng)人:廣州賽萊拉生物科技有限公司