專利名稱：一種含有蟾酥脂溶物的緩釋微球及其制備方法與應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種蟾酥緩釋制劑，具體涉及一種含有蟾酥脂溶物的緩釋微球及其制備方法與應用。
背景技術：
蟾酥Venenum Bufoni S，又名蟾蜍眉脂(《藥性論》)、蟾蜍眉酥(《日華子本草》)， 為蟾蜍科動物中華大蟾蜍或黑眶蟾蜍等的耳后腺及皮膚腺分泌的白色漿液，經加工干燥而成，其性味甘辛、溫，有毒，具有解毒、消腫、醒神、開鸞、強心和止痛等作用，在臨床上被廣泛應用于治療多種癌癥、結核病、心臟病、惡性血液病、周期性面神經麻痹、急性咽炎和慢性乙肝等感染病，還可以用于局部麻醉等?，F(xiàn)代藥理學研究表明，蟾酥具有抑制腫瘤細胞增生、 強心、鎮(zhèn)痛、興奮呼吸等生物活性。
蟾酥的主要化學成分有蟾蜍留類、吲哚堿類、醇類及多糖、氨基酸、肽類等。蟾酥甾類為脂溶性成分，約占蟾酥的20-25%。留類中已分離鑒定的蟾蜍二烯內酯類化合物 (Bufadienolides)逾40種，包括蟾毒靈(bufalin)、蟾毒它靈(bufotalin)、華蟾毒它靈 (cinobufotalin)、日蟾毒它靈(gamabufotalin)、脂蟾毒配基(resibufogenin)、華蟾毒配基(cinobufagin)、沙蟾毒精(arenobufagin)等,被認為是蟾酥的主要藥效成分。
臨床上應用的蟾酥注射液、活心丸、救心丸、安替可膠囊、蟾龍定喘合劑、喉癥丸等50余種中成藥中均含有蟾酥。在獸醫(yī)臨床上，蟾酥對治療動物呼吸道疾病也有顯著療效。蔣建兵等應用蟾酥卡耳法治療豬高熱病、喘氣病等，治愈率高達93%以上，療效顯著優(yōu)于抗生素和其它中藥制劑(蔣建兵，施洪林，馬良.應用蟾酥巧治生豬高熱病[J].獸醫(yī)導刊2008，132 37 ;魏根根.新鮮蟾酥卡耳療法治療豬氣喘病的療效觀察[J].浙江畜牧獸醫(yī) 2008(1) :17-19.)。黃宏業(yè)利用蟾酥與多西環(huán)素配伍制備注射液，對豬喘氣病的治愈率為 76.7%，顯著高于多西環(huán)素注射液的治愈率(56.7% )(黃宏業(yè)，邱春媚.長效鹽酸多西環(huán)素-蟾酥注射液對豬喘氣病的療效試驗[J].廣西畜牧獸醫(yī)2007，23 (2) :15-17. )0在《中國獸藥典》(2010年版)中，“喉炎凈散”、“雛痢凈”、“鎮(zhèn)喘散”等多種含有蟾酥的中藥復方制劑被批準用于畜禽呼吸道及消化道疾病治療。
雖然蟾酥具有廣泛的藥理作用，但同時也具有顯著的生物毒性。蟾蜍二烯內酯類化合物的基本結構類似強心苷，主要作用于心臟迷走神經中樞或末梢，并可直接作用于心肌，引起心率緩慢、心律不齊等緩慢心律失常癥狀，使房室傳導阻滯，最后導致心跳停止于收縮期(Kennedy D. J. , Vetteth S. , Periyasamy S. M. , and et al. . Central role for the cardiotonic steroid marinobufagenin in the pathogenesis of experimental uremic cardiomyopathy[J]Hypertension,2006,47(3) :488-495 ；Bick R. J.，Poindexter B. J. ,Sweney R. R, and et al. . Effects of Chan Su, a traditional Chinese medicine， on the calcium transients of isolated cardiomyocytes Cardiotoxicity due to more than Na，K-ATPase blocking [J]. Life Sciences，2002，72 (6) :699-709)。蟾酥乙醇提取物及主要內酯類單體對小鼠的LD5ci是蟾酥醇提物為41. 0mg/kg (靜脈)、96. 6mg/kg (皮下)、36. 2mg/kg (腹腔)，蟾毒靈為2. 2mg/kg (腹腔)，華蟾毒配基為4. 4mg/kg (腹腔)(于垂亮，侯惠民.蟾酥抗腫瘤有效成分的活性追蹤分離及急性毒性研究.中草藥，2011，42(2) 307-311.)。腹腔或靜脈注射蟾酥注射液，小鼠急性中毒表現(xiàn)為呼吸急促、肌肉痙攣、心跳不整、最后麻痹而死(王浴生，等.中藥藥理與應用.北京學苑出版社，1992)。
蟾酥及其主要藥效成分二烯內酯類化合物較大的生物毒性嚴重制約了其臨床應用，開展以減少蟾酥及其藥效成分生物毒性為目的的新型制劑研究具有重要意義。
已有的蟾酥在大鼠體內藥動學研究表明，口服蟾酥乙醇提取物后，蟾蜍二烯內酯類化合物在血液中的達峰時間為0.28-0. 46小時，血藥濃度半衰期(t1/2)為I. 75-3. 85 小時，吸收迅速，代謝較快，無組織蓄積性(Wen Xu, Heng Luo, Yaping Zhang, and et al.Simultaneous determination of five main active bufadienolides of Chan Su in rat plasma by liquid chromatography tandem mass spectrometry[J]. Journal of Chromatography B，2007，859 :157-163)。因此，將蟾酥及其藥效單體制備成緩釋制劑，使其在體內緩慢釋放，可望減少其生物毒性，并達到延長藥物作用時間、減少給藥次數(shù)的效果。
載藥微球是一種應用較為廣泛的新型給藥體系，其以適宜的高分子材料為載體， 制成包裹藥物的球形或類球形微粒，粒徑一般在0. I 250 ym，可以被網狀內皮系統(tǒng)內吞或被細胞融合或被溶酶體中的酶降解后釋放出藥物。使用載藥微球后，可在較長時間內維持體內有效藥物濃度，從而提高藥效并降低藥物的毒性或不良反應(Okada H，ToguchiH.Biodegradable microspheres in drug delivery[J]. Crit Rev Ther Drug Carrier Syst,1995，12(1) :1-99)。
近年來，研究報道較多的載藥微球載體材料主要有兩類一類是非生物可降解的載體材料，包括聚丙烯、乙基纖維素和聚苯乙烯等，用此類材料制得的微球多供口服；另一類是生物可降解的載體材料，包括天然高分子材料如白蛋白、明膠、淀粉和合成高分子材料如聚乳酸(PLA)、聚乳酸-羥基乙酸共聚物(PLGA)等，用此類材料制成的微球既可供口服，也可制成注射劑或藥栓。PLA的中間代謝產物是乳酸，最終代謝產物是水和CO2，無毒性和刺激性，并有良好的生物可降解性(Hyon S H. Biodegradable poly (lactic acid) microspheres for drug delivery systems[J]. Yonsei Med J，2000，41(6) :720-734 ；0h J E,Nam Y S,Lee K H,and et al. Conjugation of drug to poly (D,L-lactic-co-glycolic acid)for controlled release from biodegradable microspheres[J]. J Controlled Release, 1999，57 (3) :269-280)。因而PLA和PLGA成為目前研究最多的生物可降解材料， 已被批準用作手術縫合線、心血管支架以及注射用微囊、微球、埋植劑等制劑的載體(曹婷穎，顧月清，高向東.聚乳酸載藥微球的制備和給藥方法[J].藥學進展，2006，30 (10) 448-451)。
目前臨床上被批準使用的蟾酥注射液為水針劑，其主要成分為吲哚類生物堿(中國藥典[S]. —部.2005)。而大量的研究結果表明蟾酥脂溶性成分的抗腫瘤活性較強，主要為蟾蜍二烯內酯類化合物(趙強，孟凡靜，劉安西.蟾酥的研究進展[J].中草藥2004， 35(10):附4-7 ;張英，邱鷹昆，劉珂.中華大蟾蜍的研究進展[J].中草藥2006,37(12) 1905-1908)。為減少蟾酥脂溶性提取物及單體的毒性和刺激性，延長其藥效，奉建芳等制備了蟾酥固體脂質納米粒(CN 1951401A)，唐星等制備了含有蟾酥提取物的脂質微球注射液 (CN 1985851A)，凌昌全等制備了華蟾酥毒基白蛋白納米粒(CN 1772290A)。三種制劑都可有效降低蟾酥脂溶性提取物或其單體的毒性及刺激性，但蟾酥脂質納米粒和脂質微球注射液均為注射用乳液，放置一段時間后易破乳變質；而華蟾酥毒基白蛋白納米粒則是局限于華蟾酥毒基這一單體的新劑型。發(fā)明內容
為了克服現(xiàn)有技術的缺點與不足，本發(fā)明的首要目的在于提供一種含有蟾酥脂溶物的緩釋微球。
本發(fā)明的另一目的在于提供上述含有蟾酥脂溶物的緩釋微球的制備方法。
本發(fā)明的再一目的在于提供上述含有蟾酥脂溶物的緩釋微球的用途。
本發(fā)明的目的通過下述技術方案實現(xiàn)
一種含有蟾酥脂溶物的緩釋微球，由以下質量百分比的成分制備得到
蟾酥脂溶物0.5-30. 6%
包材69.4-99.5%;
所述的蟾酥脂溶物是以乙醇、乙酸乙酯或二氯甲烷為溶媒的蟾酥提取物，優(yōu)選以乙酸乙酯或二氯甲烷為溶媒的蟾酥提取物；也可以是從蟾酥提取物種中分離得到的蟾蜍二烯內酯類單體化合物，優(yōu)選日蟾毒它靈、蟾毒靈、沙蟾毒精、華蟾酥毒基、脂蟾毒配基或華蟾毒配基中的一種以上；
所述的包材優(yōu)選聚乳酸(PLA)或聚乳酸-羥基乙酸共聚物(PLGA)；
所述聚乳酸或聚乳酸-羥基乙酸共聚物的分子量為6000_60000Da，優(yōu)選 30000Da ；
所述的含有蟾酥脂溶物的緩釋微球還可以加入各種添加劑，如抗氧劑和/或抑菌劑；所述的抗氧劑為維生素C、維生素E或亞硫酸氫鈉；所述的抑菌劑為山梨酸及其鹽、苯甲酸及其鹽等，不滅菌的口服制劑需要加入抑菌劑。
上述含有蟾酥脂溶物的緩釋微球可通過乳化溶劑蒸發(fā)法或噴霧干燥法制備。
乳化溶劑蒸發(fā)法包括以下步驟
(I)將包材和蟾酥脂溶物溶于有機溶劑中，作為油相溶液；
(2)以表面活性劑水溶液作為水相溶液，將油相溶液緩慢加入到水相溶液中，冰浴下高速攪拌乳化6-10分鐘，然后在室溫下低速攪拌4-8小時，揮發(fā)盡有機溶劑，得到混懸液；
(3)將混懸液離心取沉淀、洗滌、干燥，即得到白色或灰白色粉末狀含有蟾酥脂溶物的緩釋微球；所得到的微球粒徑為0. 1-12 ym，成球性及分散性好；
步驟(I)所述的有機溶劑為二氯甲烷、三氯甲烷或乙酸乙酯中的一種，優(yōu)選二氯甲烷；
步驟(2)所述的表面活性劑為聚乙烯醇，優(yōu)選PVA-224型聚乙烯醇。
步驟(2)中的表面活性劑起到乳化劑的作用，不作為微球的組成部分。所述水相溶液中表面活性劑的質量體積濃度為0. 5-2%，優(yōu)選I %。
步驟(2)所述高速攪拌的轉速為600-1500r/min，優(yōu)選800_1200r/min ；
步驟(2)所述低速攪拌的轉速為60-200r/min，可選用攪拌漿或磁力攪拌揮發(fā)二氯甲烷，以獲得成球性較好、顆粒大小適中的微球。
噴霧干燥法包括以下步驟將蟾酥脂溶物和包材溶解于有機溶劑中，經過噴霧干燥制得含有蟾酥脂溶物的緩釋微球；所得到的微球粒徑為0. 5-15 ym，成球性及分散性較乳化溶劑蒸發(fā)法差，但噴霧干燥法適用于工業(yè)上規(guī)?；a蟾酥脂溶物緩釋微球；
所述的蟾酥脂溶物與包材的重量比為I : (2-200)，相應地所獲得的微球載藥量在0. 5-30%的范圍；藥材比過高，微球載藥量高，但容易導致突釋，緩釋效果差；藥材比過低，使用的包材成本增加；
所述的有機溶劑為乙酸乙酯、二氯甲烷或三氯甲烷中的一種以上，優(yōu)選乙酸乙酯， 因為乙酸乙酯的毒性較低、成球性較好；
所述包材在有機溶劑中的質量體積濃度為2-20%，優(yōu)選10-15%。包材濃度較低， 得到的微球顆粒較??；包材濃度較高，得到的微球顆粒較大；
所述噴霧干燥的進風溫度為20_70°C，優(yōu)選40_50°C，在這個溫度下獲得的微球成球性較好，不易粘連，質量較好；
所述噴霧干燥的出口溫度為25_35°C ；
在噴霧干燥過程中，微顆粒易粘連凝聚，影響產品的成球性和流散性。同時，微顆粒還容易黏著在噴霧干燥器的內壁上，使產品的回收率降低。為解決這些問題，可使用雙噴口噴霧干燥技術，其中一個噴口噴霧含包材、蟾酥脂溶物和表面活性劑的溶液，另一噴口噴霧甘露醇水溶液作阻聚劑，得到的微球不易粘連、不易黏著在內壁。
上述含有蟾酥脂溶物的緩釋微球在醫(yī)學臨床上可用于治療腫瘤，獸醫(yī)臨床上可用作抗炎藥物，與化藥配合應用治療動物呼吸道及消化道感染性疾病。
本發(fā)明相對于現(xiàn)有技術具有如下的優(yōu)點及效果
I、本發(fā)明的含有蟾酥脂溶物的緩釋微球載藥量和包封率高、穩(wěn)定性好，具有緩釋效果，可降低藥物毒性、減少藥物刺激性、延長藥效時間、減少給藥次數(shù)。
2、本發(fā)明的含有蟾酥脂溶物的緩釋微球中的藥物既可以是蟾酥脂溶性提取物，也可以是蟾酥脂溶性提取物中的蟾蜍二烯內酯類單體。制備的緩釋微球可用于制備粉針注射，可以口服，也可以與其它藥物配伍制成粉針劑或口服制劑，可采用靜脈注射、肌肉注射和口服等多種方式給藥，醫(yī)學臨床上可用于直接治療腫瘤，或與其它中藥配伍后治療多種疾病。


圖I是實施例I的蟾酥脂溶物聚乳酸緩釋微球的電鏡照片圖。
圖2是實施例I的蟾酥脂溶物聚乳酸緩釋微球的體外釋藥試驗結果圖。
具體實施方式
下面結合實施例及附圖對本發(fā)明作進一步詳細的描述，但本發(fā)明的實施方式不限于此。
實施例I
乳化溶劑蒸發(fā)法制備蟾酥脂溶物聚乳酸緩釋微球，包括以下步驟
蟾酥餅粉粹后，以二氯甲烷提取，減壓蒸餾去除溶劑，真空干燥，得到蟾酥脂溶物。 稱取0. 50g蟾酥脂溶物和2. 85g平均分子量為30000Da的聚乳酸，溶于33mL 二氯甲烷中，待完全溶解，將上述溶液逐滴加入到667mL 1% (w/v)的聚乙烯醇(PVA-224)水溶液(含量 I %即表明聚乙烯醇的量為6. 67g)中，同時,低溫下(冰浴)高速(1200r/min)攪拌8min, 所得乳液低速(200r/min)攪拌6h, 15000r/min離心IOmin,取沉淀,洗漆3次,真空干燥得到2. 90g的蟾酥脂溶物聚乳酸緩釋微球。
取微球粉末進行掃描電鏡測定、載藥量測定、體外釋藥特性測定及小鼠急性毒性試驗。
微球形態(tài)觀察取蟾酥脂溶物微球干粉適量，置雙面膠帶上，均勻撒布，離子鍍膜儀噴金后，XL-30掃描電子顯微鏡觀察微球的表面形態(tài),可見微球光滑、球形圓整、均勻、分散性好，微球粒徑在0. 5 8. O ii m之間，大部分微球粒徑在1.5 5.011111的范圍。圖I為放大5000倍的蟾酥脂溶物聚乳酸緩釋微球電鏡照片圖。
載藥量測定準確稱取3份5mg蟾酥脂溶物緩釋微球，分別加入適量二氯甲烷完全溶解，在297nm波長處測定其吸光度，通過系列蟾酥脂溶物標準溶液在該波長的吸光度獲得的回歸方程求出蟾酥脂溶物含量，根據(jù)下式求得載藥量為13. 9%。
井Ki,。/、微球中蟾酥脂溶物質量inn()/載藥里(％)=~WMi~xl00%
體外釋藥試驗稱取IOOmg蟾酥脂溶物緩釋微球置于透析袋(截留分子量 8000Da)中，加入pH值為7. 4的磷酸鹽緩沖溶液2mL，夾緊透析袋兩端，置于IOOmL磷酸鹽緩沖溶液中，于恒溫(37. 0±1.0)°C水浴中，磁力攪拌器低速攪拌。分別在10、20、30、40min，I、I. 25、2、3、4、6、8、10、12、24h，2、3、4、5、6、7、8、9、10d 等時間點，各取 2mL 樣品，測定其吸收度A，由回歸方程計算各時間點蟾酥脂溶物的濃度。測定后的溶液倒回原釋放體系中，每個時間點測3次，取平均值得該時間點的藥物濃度。蟾酥脂溶物聚乳酸緩釋微球體外釋藥特性見圖2，蟾酥脂溶物聚乳酸微球4h內快速釋放15. 45%，之后緩慢釋放，24h釋放共計 30. 46%。2d后，藥物進入平穩(wěn)釋放狀態(tài)，緩釋效果明顯。
小鼠急性毒性試驗
(I)灌胃急性毒性56只重量為18_22g的昆明鼠分為7組，每組8只，雌雄各半。 蟾酥脂溶物分散于5%丙二醇水溶液中，渦旋混勻、超聲。分別按31. 5,39. 3,49. 2,61. 4、 76. 8、96. 0、120mg/kg (體重)的劑量灌胃各組小鼠,記錄各組小鼠死亡情況,在給藥后24小時內各組的死亡數(shù)分別為0、1、2、2、4、6、8只，給藥24小時后存活小鼠不再死亡。根據(jù)Bliss 法計算出蟾酥脂溶物灌喂對小鼠的半數(shù)致死劑量(LD5tl)為70.6mg/kg。
56只重量為18_22g的昆明鼠分為7組，每組8只，雌雄各半。蟾酥脂溶物含量為 13. 9%的聚乳酸微球分散于生理鹽水中，渦旋混勻。分別按262. 1,327. 7,409. 6、512、640、 800、1000mg/kg(體重)的劑量灌胃各組小鼠，記錄各組小鼠死亡情況，在給藥后24小時內各組的死亡數(shù)分別為0、0、0、1、3、4、6只，給藥24小時后存活小鼠不再死亡。根據(jù)Bliss法計算出蟾酥脂溶物聚乳酸微球灌喂對小鼠的半數(shù)致死劑量(LD5tl)為952. lmg/kg，折算為蟾酥脂溶物的LD5tl為132. 3mg/kg,為蟾酥脂溶物直接灌喂LD5tl的I. 88倍。
(2)肌肉注射急性毒性48只重量為18_22g的昆明鼠分為6組，每組8只，雌雄各半。蟾酥脂溶物分散于5%丙二醇水溶液中，渦旋混勻、超聲。分別按5. O、6. 3、7. 9、9. 8、 12. 3,15. 4mg/kg(體重)的劑量肌注各組小鼠，記錄各組小鼠死亡情況，在給藥后24小時內8各組的死亡數(shù)分別為0、2、4、5、6、8只，給藥24小時后存活小鼠不再死亡。根據(jù)Bliss法計算出蟾酥脂溶物肌注對小鼠的半數(shù)致死劑量(LD5tl)為8.6mg/kg。
48只重量為18_22g的昆明鼠分為6組，每組8只，雌雄各半。蟾酥脂溶物含量為13. 9%的聚乳酸微球分散于生理鹽水中，渦旋混勻。分別按61. 4,76. 8,96. O、120、150、 187mg/kg (體重)的劑量肌注各組小鼠，記錄各組小鼠死亡情況，在給藥后24小時內各組的死亡數(shù)分別為0、2、2、5、6、8只，給藥24小時后存活小鼠不再死亡。根據(jù)Bliss法計算出蟾酥脂溶物聚乳酸微球肌注對小鼠的半數(shù)致死劑量(LD5tl)為113. 5mg/kg，折算為蟾酥脂溶物的LD5tl為15. 8mg/kg,為蟾酥脂溶物直接肌注LD5tl的I. 84倍。
蟾酥脂溶物制備成聚乳酸微球后，其對小鼠的急性毒性明顯降低。
實施例2
乳化溶劑蒸發(fā)法制備華蟾酥毒基聚乳酸-羥基乙酸緩釋微球，包括以下步驟
稱取25mg華蟾酥毒基和4. OOg平均分子量為30000Da的聚乳酸-羥基乙酸共聚物，溶于40mL 二氯甲烷中，待完全溶解，將上述溶液逐滴加入到SOOmLl % (w/v)的聚乙烯醇(PVA-224)水溶液中，同時，低溫下(冰浴)高速(1200r/min)攪拌8min，所得乳液低速 (200r/min)攪拌6h, 15000r/min離心lOmin，取沉淀，洗漆3次,真空干燥得到3. 62g的華蟾酥毒基聚乳酸-羥基乙酸緩釋微球。
按實施例I中載藥量測定方法，測得本實施例緩釋微球華蟾酥毒基的含量為0.50 %。掃描電子顯微鏡觀察微球,可見微球光滑、圓整、分散性好，微球粒徑在0. 5 8.Oiim之間。按實施例I中體外釋藥實驗方法，測得其4h內釋藥量為7. 20%，24h釋藥量為18. 36%，證明本實施例的緩釋微球緩釋效果明顯。
實施例3
噴霧干燥法制備蟾酥脂溶物聚乳酸緩釋微球，包括以下步驟
蟾酥餅粉粹后，以乙酸乙酯提取，減壓蒸餾去除溶劑，真空干燥，得到蟾酥脂溶物。 稱取10. OOg蟾酥脂溶物和90. OOg平均分子量為30000Da的聚乳酸，溶于800mL乙酸乙酯中，溶液搖勻后噴霧干燥制備載藥微球。噴霧干燥機進口溫度控制為50°C，出口溫度為 30 0C，液體流速為5mL/min。收集干燥微粉，稱重為83. 50g。
本實施例獲得緩釋微球中蟾酥脂溶物的含量為9. 92%。掃描電子顯微鏡觀察微球，可見微球球形圓整、光滑、分散性好，微球粒徑在I. 3 12. O ii m之間。其體外釋藥試驗結果和小鼠急性毒性試驗結果與實施例I的緩釋微球接近，證明本實施例的緩釋微球緩釋性好、毒性弱。
實施例4
噴霧干燥法制備蟾酥脂溶物聚乳酸-羥基乙酸緩釋微球，包括以下步驟
取實施例3中蟾酥乙酸乙酯提取物10. OOg和23. OOg平均分子量為30000Da的聚乳酸-羥基乙酸共聚物，溶于400mL乙酸乙酯中，溶液搖勻后噴霧干燥制備載藥微球。噴霧干燥機進口溫度控制為50°C，出口溫度為30°C，液體流速為5mL/min。收集干燥微粉，稱重為 27. 80g。
本實施例獲得緩釋微球中蟾酥脂溶物的含量為30. 6%。掃描電子顯微鏡觀察微球，可見球形圓整、光滑、分散性好，微球粒徑在0. 9 11. O 之間。體外釋藥試驗，測得其4h內釋藥量為21. 65%，呈明顯的突釋效應；24h內釋藥量為33. 48% ;2d后，藥物進入平穩(wěn)釋放狀態(tài)，有較明顯的緩釋效果。小鼠急性毒性試驗，本實施例微球灌喂對小鼠的半數(shù)致死劑量(LD5tl)為343. 7mg/kg，折算為蟾酥脂溶物的LD5tl為103. 5mg/kg ;本實施例微球肌注對小鼠的半數(shù)致死劑量(LD5tl)為37. 7mg/kg，折算為蟾酥脂溶物的LD5tl為11. 4mg/kg。微球的毒性比蟾酥脂溶物直接給藥明顯降低。
上述實施例為本發(fā)明較佳的實施方式，但本發(fā)明的實施方式并不受上述實施例的限制，其他的任何未背離本發(fā)明的精神實質與原理下所作的改變、修飾、替代、組合、簡化， 均應為等效的置換方式，都包含在本發(fā)明的保護范圍之內。
權利要求
1.一種含有蟾酥脂溶物的緩釋微球，其特征在于是由以下質量百分比的成分制備得到蟾酥脂溶物0. 5-30.6%包材69.4-99.5%。
2.根據(jù)權利要求I所述的含有蟾酥脂溶物的緩釋微球，其特征在于所述的蟾酥脂溶物是以乙醇、乙酸乙酯或二氯甲烷為溶媒的蟾酥提取物，或是蟾蜍二烯內酯類單體化合物；所述的包材為聚乳酸或聚乳酸-羥基乙酸共聚物；所述聚乳酸或聚乳酸-羥基乙酸共聚物的分子量為6000-60000Da。
3.根據(jù)權利要求2所述的含有蟾酥脂溶物的緩釋微球，其特征在于所述的蟾酥提取物是以乙酸乙酯或二氯甲烷為溶媒的蟾酥提取物；所述的蟾蜍二烯內酯類單體化合物為日蟾毒它靈、蟾毒靈、沙蟾毒精、華蟾酥毒基、脂蟾毒配基或華蟾毒配基中的一種以上；所述聚乳酸或聚乳酸-羥基乙酸共聚物的分子量為30000Da。
4.權利要求1-3任一項所述的含有蟾酥脂溶物的緩釋微球的制備方法，其特征在于包括以下步驟(1)將包材和蟾酥脂溶物溶于有機溶劑中，作為油相溶液；(2)以表面活性劑水溶液作為水相溶液，將油相溶液加入到水相溶液中，冰浴下高速攪拌乳化6-10分鐘，然后在室溫下低速攪拌4-8小時，得到混懸液；(3)將混懸液離心取沉淀、洗滌、干燥，得到含有蟾酥脂溶物的緩釋微球；步驟(2)所述的表面活性劑為聚乙烯醇。
5.根據(jù)權利要求4所述的含有蟾酥脂溶物的緩釋微球的制備方法，其特征在于步驟(I)所述的有機溶劑為二氯甲烷、三氯甲烷或乙酸乙酯中的一種；步驟(2)所述水相溶液中表面活性劑的質量體積濃度為0. 5-2% ；步驟(2)所述高速攪拌的轉速為600-1500r/min ；步驟(2)所述低速攪拌的轉速為60-200r/min。
6.根據(jù)權利要求4所述的含有蟾酥脂溶物的緩釋微球的制備方法，其特征在于步驟(I)所述的有機溶劑為二氯甲烷；步驟(2)所述水相溶液中表面活性劑的質量體積濃度為1% ；步驟(2)所述高速攪拌的轉速為800-1200r/min。
7.權利要求1-3任一項所述的含有蟾酥脂溶物的緩釋微球的制備方法，其特征在于包括以下步驟將蟾酥脂溶物和包材溶解于有機溶劑中，經過噴霧干燥制得含有蟾酥脂溶物的緩釋微球。
8.根據(jù)權利要求7所述的含有蟾酥脂溶物的緩釋微球的制備方法，其特征在于所述的蟾酥脂溶物與包材的重量比為I : (2-200)；所述的有機溶劑為乙酸乙酯、二氯甲烷或三氯甲烷中的一種以上；所述包材在有機溶劑中的質量體積濃度為2-20% ；所述噴霧干燥的進風溫度為20-70°C ；所述噴霧干燥的出口溫度為25-35°C。
9.根據(jù)權利要求7所述的含有蟾酥脂溶物的緩釋微球的制備方法，其特征在于 所述的有機溶劑為乙酸乙酯；所述噴霧干燥的進風溫度為40-50°C。
10.權利要求1-3任一項所述的含有蟾酥脂溶物的緩釋微球在抗癌藥劑或抗炎劑中的應用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種含有蟾酥脂溶物的緩釋微球及其制備方法與應用，該緩釋微球是由0.5-30.6％的蟾酥脂溶物和69.4-99.5％的包材制備得到，所用的蟾酥脂溶物是以乙醇、乙酸乙酯或二氯甲烷為溶媒的蟾酥提取物，或從蟾酥脂溶物中得到的二烯內酯類單體；所用的包材優(yōu)選聚乳酸或聚乳酸-羥基乙酸共聚物。本發(fā)明獲得的蟾酥脂溶物緩釋微球載藥量和包封率高、穩(wěn)定性好，緩釋效果明顯，可降低藥物毒性、減少藥物刺激性、延長藥效時間、減少給藥次數(shù)?？刹捎渺o脈注射、肌肉注射和口服等多種方式給藥，醫(yī)學臨床上可用于直接治療腫瘤，或與其它中藥配伍后治療多種疾病；獸醫(yī)臨床上可用于治療炎癥，或與化療藥物聯(lián)合應用治療感染性疾病。
文檔編號A61K31/585GK102526111SQ201210024978
公開日2012年7月4日 申請日期2012年2月6日 優(yōu)先權日2012年2月6日
發(fā)明者劉雅紅, 張曉麗, 方炳虎, 曾振靈, 楊耀智, 王文佳, 陳建新 申請人:華南農業(yè)大學