專利名稱：鳥苷酸環(huán)化酶抑制劑在制備抑制近視藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種延緩、抑制近視的藥物的制備方法，特別是利用鳥苷酸環(huán)化酶抑制劑降低CGMP (鳥苷-3’，5’ -環(huán)化一磷酸，環(huán)磷酸鳥苷)水平在抑制近視藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
95%的人類近視都是以眼軸過度延長以及后極部鞏膜顯著變薄為主要特征。人類和哺乳動物的鞏膜組織主要由細胞成分(以成纖維細胞為主)和細胞外基質(zhì)構(gòu)成，細胞外基質(zhì)由鞏膜細胞所分泌。在近視發(fā)展過程中，鞏膜中的細胞成分接受上游(視網(wǎng)膜或者中樞) 信號的輸入，調(diào)整細胞外基質(zhì)構(gòu)成，包括合成減少和降解加速，最終導致鞏膜變薄，生物力學性質(zhì)改變，最終引起眼軸過度延長，近視形成。鞏膜的病理改變特別是后極部鞏膜的變薄可能是近視形成的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。
細胞外基質(zhì)主要成分為膠原纖維，占鞏膜干重的90%，其中以I型膠原含量最高。 在正常哺乳動物以及人眼鞏膜中，膠原纖維束呈無序的交織狀態(tài)，從而保持了鞏膜的不透光性。此外，膠原纖維直徑由內(nèi)向外呈現(xiàn)由細到粗的梯度變化，表現(xiàn)為鞏膜外層以粗徑的膠原纖維為主，而內(nèi)層則以細徑的膠原纖維為主。文獻報道這種鞏膜全層膠原纖維直徑梯度的形成與眼內(nèi)容物對眼球壁的壓力作用有關(guān)。動物實驗的結(jié)果發(fā)現(xiàn)，當高度近視發(fā)生后，鞏膜膠原含量減少(主要是I，III，V型)，鞏膜變??；膠原纖維的排列也發(fā)生了顯著變化。膠原纖維由無序的交織狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)橛行蚺帕械陌鍖咏Y(jié)構(gòu)，并且鞏膜全層膠原直徑梯度分布消失。
除了結(jié)構(gòu)上的變化之外，鞏膜中還發(fā)生了一系列的生物化學改變。蛋白聚糖是鞏膜中廣泛存在的一種糖蛋白，由核心蛋白和糖胺聚糖副鏈組成，它被認為是膠原纖維組裝和排列的調(diào)節(jié)因子。在實驗性近視中，蛋白聚糖合成減少降解增加，并且后極部鞏膜蛋白聚糖的合成率與近視形成過程中玻璃體腔的延長程度呈負相關(guān)。此外，細胞外基質(zhì)中的基質(zhì)金屬蛋白酶家族(MMPs)以及金屬蛋白酶組織抑制劑(TIMPs)共同調(diào)控鞏膜重塑的過程。 MMPs促進膠原以及其他細胞外基質(zhì)成分的降解，而TIMPs則能夠抑制MMPs的這種作用，兩種力量的平衡對于維持鞏膜的正常狀態(tài)十分重要。在多種實驗性近視研究中都發(fā)現(xiàn)，實驗眼MMP-2的mRNA水平較對側(cè)眼明顯升高，而在近視恢復期其水平又逐漸恢復正常。相反的，TIMP-3水平在近視時降低而在恢復期又有所升高。
以上研究都表明鞏膜可能是近視發(fā)生發(fā)展過程中最重要的靶組織，特別是鞏膜細胞所分泌的細胞外基質(zhì)成份的變化與近視的發(fā)生發(fā)展息息相關(guān)。cGMP (鳥苷-3’，5’ -環(huán)化一磷酸，環(huán)磷酸鳥苷)是細胞內(nèi)廣泛存在的第二信使，通過與受體偶聯(lián)的G蛋白激活鳥苷酸環(huán)化酶(Guanylate cyclase, GC),催化GTP生成cGMP，cGMP進一步激活蛋白激酶G(protein kinase G，PKG)或環(huán)核苷酸離子通道等，發(fā)揮相應(yīng)的生理功能。研究發(fā)現(xiàn)，cGMP對多種類型的成纖維細胞均有抑制其生長分化以及細胞外基質(zhì)分泌的作用。Peng Li等(2008)研究發(fā)現(xiàn)在心肌細胞，ANP/cGMP/PKG信號途徑的激活能干擾TGF-β 1誘導的pSmad3核轉(zhuǎn)位，從而抑制TGF-β 1所誘導的肌成纖維細胞增殖分化及細胞外基質(zhì)分子的表達。此外，Yi-ChiangHsu等(2007)發(fā)現(xiàn)NO/cGMP通路的激活能夠抑制瘢痕組織成纖維細胞TGF-β 1的分泌及膠原合成，從而抑制瘢痕的過度增生。而cGMP水平與近視發(fā)生的相關(guān)報道很少，除了 Jie Wu 等(2007)人發(fā)現(xiàn)在形覺剝奪性近視的豚鼠中，其后極部鞏膜中NOS和cGMP濃度升高，推測 cGMP水平的變化可能與近視的存在某種聯(lián)系。但到目前為止尚無發(fā)現(xiàn)升高或者降低cGMP 對近視的作用。發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種制備抑制近視藥物的方法。
為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是降低cGMP水平的鳥苷酸環(huán)化酶抑制劑在制備抑制近視藥物中的應(yīng)用。
作為優(yōu)選方案，所述鳥苷酸環(huán)化酶抑制劑采用NS-2028。
本發(fā)明的有益效果是通過降低眼內(nèi)cGMP的作用，可以有效地延緩、抑制近視。


附圖1是實驗眼和對側(cè)眼屈光度差值圖。
附圖2是實驗眼和對側(cè)眼玻璃體腔深度差值圖。
附圖3是實驗眼和對側(cè)眼眼軸長度差值圖。
附圖中，“差值”指實驗眼與對側(cè)眼屈光度或眼軸參數(shù)的差值；“*”表示P< 0. 05 ； “* *” 表示 Ρ<0· 01。
具體實施方式
實驗動物為3周齡英國種三色短毛豚鼠。采用面罩法進行單眼形覺剝奪(FDM) 2 周，同時每天給予形覺剝奪眼不同濃度鳥苷酸環(huán)化酶抑制劑(GCI) NS-2028 Iml球周注射。 動物隨機分為4組形覺剝奪對照組(FDM + non-injection)，形覺剝奪+溶劑對照組(FDM + vehicle)，形覺剝奪 + 藥物組(FDM + 0. 1 μ M NS_2(^8 組和 FDM+ ΙμΜ NS_2(^8 組)。藥物注射于每天上午9點進行，連續(xù)注射2周，對側(cè)眼則不予任何處理。于鼠齡3 (實驗前)、 4、5周，使用紅外偏心攝影驗光儀測量屈光度、角膜曲率計測量角膜曲率、A超測量眼軸參數(shù)。
結(jié)果發(fā)現(xiàn)給藥組的形覺剝奪眼，其玻璃體腔及眼軸延長程度和屈光近視程度均小于單純形覺剝奪組和溶劑對照組，與溶劑對照組相比具有統(tǒng)計學意義。因此，球周注射鳥苷酸環(huán)化酶抑制劑(ACI) NS-2028可以抑制豚鼠形覺剝奪性近視的形成。
由圖1可看出，鼠齡5周時，單純形覺剝奪組和形覺剝奪注射溶劑組形成近視量無差異，說明注射以及溶劑對形覺剝奪無影響。給藥兩組形成近視量均小于溶劑組，說明鳥苷酸環(huán)化酶抑制劑NS-2(^8能抑制形覺剝奪性近視的形成。
由圖2可看出，鼠齡5周時，單純形覺剝奪組和形覺剝奪注射溶劑組玻璃體腔延長無差異，說明注射以及溶劑對形覺剝奪無影響。給藥兩組玻璃體腔延長均小于溶劑組，說明鳥苷酸環(huán)化酶抑制劑NS-2(^8能抑制形覺剝奪玻璃體腔的延長。
由圖3可以看出，鼠齡5周時，單純形覺剝奪組和形覺剝奪注射溶劑組眼軸延長無差異，說明注射以及溶劑對形覺剝奪無影響。給藥兩組眼軸延長均小于溶劑組，說明鳥苷酸環(huán)化酶抑制劑NS-2028能抑制形覺剝奪后眼軸的延長。
權(quán)利要求
1.降低cGMP水平的鳥苷酸環(huán)化酶抑制劑在制備抑制近視藥物中的應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鳥苷酸環(huán)化酶抑制劑在制備抑制近視藥物中的應(yīng)用，其特征是所述鳥苷酸環(huán)化酶抑制劑的型號為NS-2028。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種延緩、抑制近視的藥物的制備方法，特別是鳥苷酸環(huán)化酶抑制劑在制備抑制近視藥物中的應(yīng)用，由利用鳥苷酸環(huán)化酶抑制劑降低cGMP(鳥苷-3',5'-環(huán)化一磷酸，環(huán)磷酸鳥苷)水平作為近視藥物，可抑制動物實驗性近視的形成。
文檔編號A61K45/00GK102512677SQ20111039926
公開日2012年6月27日 申請日期2011年12月6日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月6日
發(fā)明者周翔天, 方芳, 潘妙珍, 瞿佳 申請人:溫州醫(yī)學院眼視光研究院