專利名稱：由表沒食子兒茶素沒食子酸酯與絲裂霉素c制成的抑制腫瘤細(xì)胞增殖的組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥及基因工程領(lǐng)域，涉及抑制腫瘤細(xì)胞增殖的組合物，尤其涉及由表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)與絲裂霉素C (MITOMYCIN C)制成的抑制腫瘤細(xì)胞增殖的組合物。
背景技術(shù)：
絲裂霉素C是從頭狀鏈霉菌培養(yǎng)液中分離提取的一種廣譜抗腫瘤抗生素，對多種癌癥有抗癌作用，其作用原理可使細(xì)胞的DNA解聚，同時(shí)阻礙DNA的復(fù)制，從而抑制腫瘤細(xì)胞分裂。本品為細(xì)胞周期非特異性藥物，其抗腫瘤譜較廣，作用迅速，但治療指數(shù)不高，毒性較大。臨床適用于消化道癌，如胃癌、腸癌、肝癌及胰腺癌等，療效較好。對肺癌、乳腺癌、宮頸癌及絨毛膜上皮癌等也有效。還可用于惡性淋巴瘤、癌性胸腹腔積液。絲裂霉素C的副作用主要有1、骨髓抑制，主要是白細(xì)胞和血小板下降；2胃腸道反應(yīng)，食欲不振、惡心及嘔吐等，一般較輕；3注射局部可有靜脈炎，如漏出血管外，可引起組織壞死破潰；4少數(shù)病人可出現(xiàn)肝、腎功能障礙；5有時(shí)可有口腔炎、乏力及脫發(fā)等。此藥還可能會干擾女性的月經(jīng)周期以及可能會停止男性精子產(chǎn)生，亦可能會傷害胎兒，必要時(shí)確實(shí)做好避孕措施以避免懷孕。治療期間，容易受感染，請盡量避免出入公共場所及預(yù)防感冒。易有口腔發(fā)炎、瘡及刺刺的感覺，口腔清潔需徹底。茶葉(tea ,camellia sinensis)是深受人們喜愛的飲品之一。全世界每年生產(chǎn)大約250萬噸，其中20%為綠茶、78%為紅茶、洲為烏龍茶。茶葉的種類雖然很多，但以綠茶為人矚目。大量的體外研究及動物實(shí)驗(yàn)證明綠茶提取物有多種生物活性和藥理效應(yīng)，如防癌抗癌、抗血管生成、抗突變、抗氧化、抗衰老、抗菌、抗炎、降血脂、抗血小板聚集等等，其中與癌癥的關(guān)系是研究最為廣泛、也是最復(fù)雜的有意義的重要課題。綠茶中的主要成分為茶多酚，占茶葉干重的30%左右，茶多酚中大部分為兒茶素， 表沒食子兒茶素沒食子酸酯〔(-)epigallocatechin gallate ( EGCG)〕含量最高，占兒茶素的80%左右。EGCG分子式為C22H18O11,分子量為458. 4。它是一種高效廣譜無毒副作用的生物抗氧化劑，俗稱沒食子兒茶素沒食子酸酯。沒食子酸酯能有效清除引發(fā)多種疾病和衰老的體內(nèi)自由基和過氧化物，提高人體免疫力，延緩衰老，具有優(yōu)異的抗病毒、降血脂、 保鮮、美容等效能，在醫(yī)藥、保健、食品、日化等行業(yè)有廣泛的用途。但是綠茶提取物畢竟不是細(xì)胞毒類藥物，在體外對腫瘤細(xì)胞的直接殺傷作用不明顯。綠茶提取物及其主要成分不會也不能取代現(xiàn)有的抗腫瘤藥物，其獨(dú)特價(jià)值在于作為腫瘤化療中的生化調(diào)節(jié)劑，有望增強(qiáng)現(xiàn)有抗腫瘤藥物的抗腫瘤活性，降低抗腫瘤藥物的毒性。到目前為止，尚未見有關(guān)EGCG與絲裂霉素C聯(lián)合使用的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種抑制腫瘤細(xì)胞增殖的組合物，尤其涉及由表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)與絲裂霉素C (MITOMYCIN C)制成的抑制腫瘤細(xì)胞增殖的組合物。本發(fā)明實(shí)驗(yàn)證實(shí)，表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)與絲裂霉素C (MITOMYCIN C)制成的組合物，或在給予絲裂霉素C (MITOMYCIN C)時(shí)聯(lián)合使用表沒食子兒茶素沒食子酸酯可顯著提高絲裂霉素C抑制腫瘤細(xì)胞增殖的治療效果。本發(fā)明所述的抑制腫瘤細(xì)胞增殖的組合物，包括活性成分和藥劑學(xué)上必要的輔料，其特征在于，所述的活性成分是以下物質(zhì)1)表沒食子兒茶素沒食子酸酯，2)絲裂霉素 C ；所述的表沒食子兒茶素沒食子酸酯和絲裂霉素C的摩爾比為800 :1-20 :1。本發(fā)明中，所述的表沒食子兒茶素沒食子酸酯其分子式為C22H18O11,分子量為 458. 4。EGCG購自 Sigma 公司，貨號叨四9，英文全稱()-cis-2-(3, 4，5-Trihydroxyphen yl)-3, 4-dihydro-l(2H)-benzopyran-3, 5, 7-triol 3-gallate, ( )-cis-3, 3' , 4' , 5, 5 ‘，7-Hexahydroxy-flavane-3-gallate, EGCG ；CAS 號989-51_5。MDL 號MFCD00075940。本發(fā)明中，所述的絲裂霉素C (Mitomycin C) 是葉酸
拮抗劑，購自Sigma (貨號M0503), C from Streptomyces caespitosus。 分
權(quán)利要求
1.一種抑制腫瘤細(xì)胞增殖的組合物，包括活性成分和藥劑學(xué)上必要的輔料，其特征在于，所述的活性成分是以下物質(zhì)1)表沒食子兒茶素沒食子酸酯，2)絲裂霉素C ；所述的表沒食子兒茶素沒食子酸酯與絲裂霉素C的摩爾比為800 1 20 :1。
2.如權(quán)利要求1所述的抑制腫瘤細(xì)胞增殖的組合物，其特征在于，表沒食子兒茶素沒食子酸酯與絲裂霉素C的摩爾比為200 1 40 1。
3.如權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于，表沒食子兒茶素沒食子酸酯與絲裂霉素C 的摩爾比為120:1 40:1。
4.如權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于，表沒食子兒茶素沒食子酸酯與絲裂霉素C 的摩爾比為100:1 40:1。
5.如權(quán)利要求1所述的抑制腫瘤細(xì)胞增殖的組合物，其特征在于，所述的表沒食子兒茶素沒食子酸酯其分子式為C22H18O11,分子量為458. 4。
6.權(quán)利要求1所述的組合物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
7.如權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征是，所述的腫瘤是肝癌。
8.一種抑制腫瘤細(xì)胞增長的方法，其特征在于，在腫瘤細(xì)胞中加入權(quán)利要求1所述組合物。
9.如權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，所述的腫瘤細(xì)胞是SMMC7721、HepG2,QGY、 SK-H印 1、YY1、Huh7、Hep3B, L02、Focus 或者 PLC 細(xì)胞。
全文摘要
本發(fā)明屬于醫(yī)藥和基因工程領(lǐng)域，提供了一種抑制腫瘤細(xì)胞增殖的組合物。所述的抑制腫瘤細(xì)胞增殖的組合物，包括活性成分表沒食子兒茶素沒食子酸酯和絲裂霉素C以及藥劑學(xué)上必要的輔料，所述的表沒食子兒茶素沒食子酸酯和絲裂霉素C的摩爾比為800∶1-20∶1。本發(fā)明經(jīng)實(shí)驗(yàn)證實(shí)，所述的表沒食子兒茶素沒食子酸酯與絲裂霉素C制成的組合物，或在給予絲裂霉素C時(shí)聯(lián)合使用表沒食子兒茶素沒食子酸酯可顯著提高絲裂霉素C抑制腫瘤細(xì)胞增殖的治療效果，對裸鼠肝臟和腎臟基本沒有毒性。本發(fā)明組合物活性成分中的表沒食子兒茶素沒食子酸酯資源豐富，價(jià)格低廉，能在提高腫瘤的抑制率的同時(shí)，降低腫瘤患者的治療成本。
文檔編號A61K31/407GK102526033SQ20101058725
公開日2012年7月4日 申請日期2010年12月14日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月14日
發(fā)明者余龍, 劉祖龍, 唐麗莎, 張明君, 朱恒銳 申請人:復(fù)旦大學(xué)