專利名稱：治療原發(fā)性血小板增多癥用的新組合物的制作方法
治療原發(fā)性血小板增多癥用的新組合物本發(fā)明涉及一種新的藥物組合物及其治療原發(fā)性血小板增多癥的應用，所述組合物包含與乳糖一水合物組合的阿那格雷鹽酸化物(anagrelide hydrochloride)。原發(fā)性血小板增多癥是造血克隆病或多克隆骨髓增生疾病，而且患血小板增多癥的病人中12%確診為原發(fā)性血小板增多癥。在45%的原發(fā)血小板增多(primary thromobocytosis)病人中診斷出原發(fā)性血小板增多癥(essential thrombocythemia, ET)⑴。為了清晰地把ET同真性紅細胞增多 (PV)和骨髓纖維化(MF)區(qū)分開來，真性紅細胞增多研究組(PVSG)定義了診斷標準O)，后來世界衛(wèi)生組織(WHO)的診斷指南(3，4)作了改進。WHO的診斷指南細化了 PVSG的ET診斷標準，其引入了骨髓組織病理學和嗜銀(網硬蛋白和膠原)纖維密度，以此區(qū)分ET與特發(fā)性骨髓纖維化(IMF)的早期原纖維化階段 (5，6，7)。有繼發(fā)的血小板增多的病人中，血小板數超過1，500，000/μ 1代表了血栓栓塞事件和出血性事件的獨立危險因子(8)。其他獨立危險因子是血栓栓塞史或出血史、微脈管癥狀和年逾65歲(9，10，11，12，13)。臨床表現從輕微癥狀如頭痛、眩暈和視力障礙到威及生命的并發(fā)癥如血栓形成、出血和中風。血栓形成急性發(fā)作的估計風險為6. 6%/病齡，年逾 60歲的患者群中增加至15%/病齡(14)，而最高的是曾有閉塞性發(fā)作史的患者(10)。人們通常認為，高危病人應當接受降血小板治療。約50%的患者在診斷時顯現血栓形成史或出血史，并歸屬高危類(15)。考慮到所有的獨立危險因子如血小板計數超過1，500，000/μ 1、年逾65歲和心血管危險因子，50%以上被診斷患有ET的患者都需要進行治療。另外，血小板值小于900，000/μ 1的有癥狀患者還有并發(fā)癥危險，需要進行治療 (16)。大脈管血栓癥可發(fā)生在血小板計數小于900，000/μ 1的年輕患者中(17)。減少血小板計數已證明會減少臨床并發(fā)癥的風險(18)。因此，血小板計數可起臨床并發(fā)癥替代標志物的作用。越來越多的證據表明，年輕患者和血小板計數小于900，000/ μ 1的患者有可能因減少臨床并發(fā)癥和進行性血管病的風險而受益于治療。近年來，主要地推行兩種治療方案，即羥基脲(HU)和Alpha-干擾素。然而，羥基脲的缺點是1. HU在血小板數低時不被選擇，而且還會影響血液其他成分，2.越來越多的報告列出了由HU引起的嚴重副作用，包括白血病。這在年輕患者長期接受治療的情形下尤其是個問題。3.某些患者對HU治療不敏感。Alpha-干擾素需要皮下給藥，對其他細胞譜系有多重影響，而且不能很好地被許多個體耐受(19)。阿那格雷(咪唑并(2，l-b)喹唑啉_2(3H)酮，6，7-二氯-1，5-二氫一鹽酸化物) 現已注冊為血小板增多癥患者的二線治療方案。其作用機制對巨核細胞和血小板具有選擇性。它可經口給藥。已有報告中未見長期致突變性和致白血病性(leukemogenicity)的證據。阿那格雷在美國從1997起就已獲得許可，而歐洲從2001起才獲準。在歐盟(EU)， 阿那格雷的當前批準治療適應癥是“在不耐受現用療法或者以現用療法不能將增高的血小板計數降至可接受水平的有原發(fā)性血小板增多癥風險的患者中使增高的血小板計數降低，，(http://www. emea. eu. i η t / human does/ Human s/EPAR/xagrid/Xagrid. htm)。阿那格雷最初是作為血小板凝聚抑制劑研發(fā)出來的。其作用方式牽涉血小板cAMP 磷酸二酯酶酶活性抑制00)。然而，這種作用不介導血小板減少。這種選擇性血小板減少作用限于人類，在低得多的劑量下發(fā)生(21)，而且通過巨核細胞成熟抑制來介導02，23)。 在治療濃度下，阿那格雷不影響巨核細胞集落形成和血小板存活0幻。確切作用機制目前尚無報道。然而，阿那格雷代謝物看來有強烈的血小板降低活性，因此可能促進了其作用 (24,25,26)?；谧钚碌淖C據和對大多數患者風險-受益平衡的考慮，可以把阿那格雷作為較廣泛患者群體中適宜的可選治療方案。這也包括那些不愿用引起致白血病潛在風險的藥劑如羥基脲開始治療的、處于危險之中而歲數低于60歲的患者。阿那格雷在體內大量代謝，有5種以上的代謝物可用HPLC分析法在尿內鑒別出 (27)。這些代謝物中鑒別出兩種，即生物活性3-羥基阿那格雷和無活性2-氨基-5，6- 二氯-3,4- 二氫喹唑啉酮(也稱RL 603) (26)。阿那格雷的藥理學方面最新臨床前研究和臨床研究對其作用方式和安全特性提出一些重要疑問06，觀，29，30，31)。有人建議，至少一種已鑒別的代謝物，即3-羥基阿那格雷在體內貢獻主要的藥理作用，這些主要藥理作用是血小板減少和PDE 3抑制活性，而 RL 603沒有這些作用04)。與母藥相比，阿那格雷迅速轉變成3-羥基阿那格雷，并在約 45min后達到最高血漿含量。非常可能，這兩種化合物在體內都貢獻藥理活性。阿那格雷和 3-羥基阿那格雷都迅速從血液除去，無積累跡象。需要花費數日至數周的時間才能達到最理想的血小板控制09，30)。因此，血小板減少不太可能由直接的藥理學作用介導。巨核細胞表面介導持久的血小板減少效應的分子靶目前尚不清楚，但可能包括對導致促血小板生成素親合力改變的c-MPL功能進行調節(jié)08)。這個假設得到以下發(fā)現的支持阿那格雷停藥后需要花費4至7天時間才能使血小板回到治療前的數值。相反，cAMP依賴性PDE 3已確定為介導阿那格雷對心血管系統(tǒng)和對血小板凝聚的急性效應的分子靶00)。頭痛、頭暈和心悸代表了約15%至44%患者在治療的第一個星期內頻繁發(fā)生的不適現象，并可能由治療劑量水平的阿那格雷的輕度心血管效應和腦效應介導。這些副作用在2至3周時間內好轉，這與快速脫敏的進展一致( )，該快速脫敏也已用其他PDE 3抑制劑觀察到(3 。然而，心血管副作用如血壓過低的比率和嚴重程度隨著劑量逐步增加超過5mg而增大，這暗示了與血漿中阿那格雷含量的相關性或者，更重要的是， 與血漿中3-羥基阿那格雷含量的相關性09)。用阿那格雷醫(yī)治的患者中可逆高輸出心力衰竭病例已有報道(33，34)。也在用米力農(milrinone)治療的患者中觀察到延長治療期后心力衰竭的危險，米力農是另一種增強收縮力的PDE 3抑制劑(3幻。然而，3-羥基阿那格雷用作PDE 3抑制劑比阿那格雷更加有效06)。這可假設，3-羥基阿那格雷在用阿那格雷治療的患者中主要介導心血管副作用。特別是，令人不快的心血管不適現象如心悸、眩暈或頭痛可能主要由3-羥基阿那格雷引起。特別在治療起始時，這些令患者大傷腦筋，而且可能與所報道的高達的停藥率相關09，30)。采用不同阿那格雷配制劑時多種不適現象的差異已有報告，而且阿那格雷停藥患者的比率據報道為8%- % 09，30，31)。不同的藥代特性可與耐受能力和血小板減少方面的藥效差異相關。阿那格雷的延遲吸收率與阿那格雷的峰值降低和阿那格雷的血漿總含量以及低得多的3-羥基阿那格雷含量相關。因此，PDE 3依賴性急性副作用的比率有望低得多。US 6，287, 599和US 2004/0062800公開了多種藥物組合物，它們具有緩釋和pH 依賴性溶解減少的屬性。其中就有含阿那格雷的藥片，每片含2. Mmg阿那格雷鹽酸化物。 W02005/1U917A1記敘了一類組合物，該組合物含有選擇性細胞因子抑制藥，用于骨髓增生性疾病治療，其中阿那格雷作為第二種活性劑存在。US2007/104782A1和W02007/016;350A2記敘了非pH依賴性緩釋藥片配制劑，該配
制劑含有甲基丙烯酸共聚物，機械性能有所提高。US2005/0249814A1和US2005/0008704A1公開了一類配制劑，該配制劑包含一種
具有至少一個羧酸部分、與生理學溶劑接觸時迅速溶解的化合物。本發(fā)明的一個目的是提供多種并非立即釋放、但能高度恒定地釋放的阿那格雷新組合物，其能用來預防和治療與慢性脊髓增生病相關的病征，例如原發(fā)性血小板增多癥，但缺乏阿那格雷治療的某些可歸因于其主要代謝物3-羥基阿那格雷的眾所周知的副作用。該目的借助于本申請中各實施方式規(guī)定的技術特征得以完成。本發(fā)明涉及新的、阿那格雷活性成分不立即釋放的阿那格雷配制劑，其中阿那格雷鹽酸化物具有小顆粒尺寸?，F已證明，包含阿那格雷與乳糖一水合物組合的藥物組合物形成一種配制劑，當對患者給藥時該配制劑具有減少釋放的特征。任選地，該藥物組合物還可包含微晶纖維素和吡咯烷酮如聚維酮和/或交聚維酮。附圖

圖1 攝入現有(P)阿那格雷配制劑或新的(N)阿那格雷配制劑后血漿阿那格雷濃度(平均數士標準誤差)。分別將現有配制劑或者新的配制劑給藥后，Cmax血漿數值顯著不同(Ρ < 0.001)。圖2 攝入現有⑵阿那格雷配制劑或新的(N)阿那格雷配制劑后，血漿3-羥基阿那格雷(3-0H)濃度(平均數士標準誤差)。分別將現有配制劑或者新的配制劑給藥后， Cmax血漿數值顯著不同(ρ < 0. 001)。發(fā)明的詳細說明本發(fā)明提供了包含阿那格雷鹽酸化物顆粒的藥物組合物，其中至少90%的所述阿那格雷顆粒直徑小于10 μ m，并含有至少60mg乳糖一水合物。具體地說，阿那格雷為阿那格雷鹽酸化物形式，含有量小于lmg，優(yōu)選小于 0. 70mg,優(yōu)選小于0. 65mg,優(yōu)選介于0. 54mg和0. 60mg之間，優(yōu)選量為約0. 57mg。按照本發(fā)明的阿那格雷鹽酸化物以微粉化阿那格雷的形式存在，顆粒尺寸小于15 μ m,優(yōu)選小于 IOum0按照本發(fā)明的一種具體實施方式
，配制劑中阿那格雷的平均粒度約為5μπι。使用小于15 μ m的、尤其是小于10 μ m的阿那格雷小顆粒，對于含有低濃度阿那格雷的藥物制劑而言是特別有利的，因為藉此在給藥時提供了阿那格雷有效成分的高度均勻的分布和/或恒定的釋放。按本發(fā)明規(guī)定，術語“約5 μ m的平均粒度”為至少50%的顆粒直徑小于5 μ m，至少90%的顆粒直徑小于10 μ m。按本發(fā)明規(guī)定，術語阿那格雷、阿那格雷顆粒和阿那格雷鹽酸化物都用來表述活性化合物咪唑并0，l_b)喹唑啉-2 (3H)-酮，6，7-二氯-1，5-二氫一鹽酸化物?，F有技術中，微粉化(micronization)已知為降低固體材料顆粒平均直徑的處理方法。按照本發(fā)明，“微粉化”用已知技術來實行，例如借助于超臨界溶液快速膨脹法(Rapid Expansion of Supercritical Solutions method)、超界逆溶齊[J 法(Supercritical Anti-solvent method)禾口得自氣體飽禾口溶液法(Gas Saturated Solutions method)的顆粒來實行。乳糖一水合物含量可以至少為60mg，優(yōu)選至少90mg，優(yōu)選93. 9mg。所述組合物還可含有吡咯烷酮如聚維酮，其含量為細g_13mg，優(yōu)選5. 5mg-6. 6mg，優(yōu)選6mg，還可含有交聯的吡咯烷酮如交聚維酮，其量為3. 5mg-i;3mg，優(yōu)選5mg_6mg，優(yōu)選為5. 5mg。該組合物還任選含有微晶纖維素。特別是，吡咯烷酮的存在，更具體是連接的吡咯烷酮的存在，可貢獻所述配制劑不即時釋放的有利特性。所述微晶纖維素可以含有 13mg-39mg，優(yōu)選 20mg_25mg，優(yōu)選 22. 5mg?，F有技術中眾所周知的其它藥學可接受物質也可含于本發(fā)明藥物組合物中。例如，這些物質可為硬脂酸鎂和無水乳糖。按照一種具體的實施方式，所述藥物組合物包含阿那格雷鹽酸化物、乳糖一水合物、聚維酮、交聚維酮、微晶纖維素和硬脂酸鎂。更具體地說，所述藥物組合物包含0. 57mg阿那格雷鹽酸化物93，9mg乳糖一水合物6. Omg 聚維酮5. 5mg交聚維酮22.5mg微晶纖維素1.5mg硬脂酸鎂。鑒于該藥劑的釋放特性，現已證明，這種組合物顯現有利的特征。目前所用的含阿那格雷的藥劑是即時釋放的藥劑，其中于首個10鐘內活體外釋放90%以上的阿那格雷。與此相反，新的阿那格雷配制劑在活體外的最初10分鐘期間只釋放約50%阿那格雷，而且在活體外花費多達30分鐘時間釋放至多約90%。特別是，本發(fā)明藥物組合物口服后在體內有至少60分鐘的血漿最高釋放。本發(fā)明組合物可經口給藥，例如以片劑或膠囊形式。按照本實施方式，膠囊如明膠膠囊是具體的口服給藥劑型。鑒于該藥劑的釋放特性，現已證明，這種組合物顯現有利的特征。目前所用的含阿那格雷藥劑是即時釋放的藥劑，其中阿那格雷可在口服后數分鐘內從患者血漿中測得。特別考慮到更好的耐受能力和不良副作用的減少以及長期治療的需要，優(yōu)選有一種導致延遲但更恒量供給阿那格雷的非即時釋放藥劑。尤其，使用本發(fā)明藥物組合物時，在對患者施給所述組合物的約60分鐘后，優(yōu)選90分鐘之后，更優(yōu)選在120分鐘后，可在血漿中測出阿那格雷的血漿最大值。特別考慮到對3-羥基阿那格雷的更好耐受性和更少的題由3-羥基阿那格雷所致的不良副作用，優(yōu)選有一種導致延遲供給阿那格雷、并因此降低3-羥基阿那格雷最高血漿含量的非即時釋放藥劑。
由于阿那格雷鹽酸化物的濃度低，含有阿那格雷鹽酸化物的本發(fā)明組合物還顯示出改進的耐受能力。阿那格雷的含量小于lmg，優(yōu)選小于0.70mg，優(yōu)選小于0.65mg，優(yōu)選 0. 54mg-0. 60mg，優(yōu)選量為 0. 57mg。由于本發(fā)明組合物的新釋放特性，該組合物尤可用于原發(fā)性血小板增多癥的一線治療，但也可用于二線治療。因為令人不快的心血管不適現象例如心悸、眩暈或頭痛通常發(fā)生在治療的第一周內，并可導致很早中止阿那格雷治療或者減少患者的依從性，所以本發(fā)明組合物特別優(yōu)選用來治療新診斷的患者。另外，本發(fā)明組合物還可對不耐受他們的當前療法的患者或者對借助當前的療法不能將其增高的血小板計數降至可接受水平的患者給藥。推薦的起始劑量是lmg/日維持1周，且每周調節(jié)劑量，直到實現最理想的血小板控制。通常，在lmg/日至!Mg/日的劑量水平實現了血小板計數的減少。所述含有阿那格雷鹽酸化物的組合物一天可給藥數次，直至能實現血小板計數減少的劑量，特別是在早晨和晚上給藥。本文所記敘的各實施例例證性說明了本發(fā)明，而非意在將本發(fā)明限制于此?，F已按本發(fā)明記敘了本發(fā)明的不同實施方式?？蓪Ρ疚闹杏洈⒑团e例說明的技術進行許多變更和變異而不背離本發(fā)明的實質和范圍。因此，應予理解的是，各實施例僅作例證性說明，而不限定本發(fā)明的范圍。
實施例活體外溶解研究分析按歐洲藥典(方法2. 9. 3，(36))“固體劑型溶解測試(dissolution test for solid dosage forms) ”藉槳葉法進行，該方法要求，將固體劑型置入儀器中，該儀器內裝 37士0.5°C的適宜培養(yǎng)基(500ml)，并具有指定的槳葉運轉速率。為分別測試現有配制劑和新配制劑的溶解特征變化譜，每次實驗將0.5mg膠囊置入容納培養(yǎng)基(0. IM HC1，含0. 1% SDS以提高阿那格雷溶解度)的儀器中。每種配制劑進行6個實驗，在0、5、10、15、30和60 分鐘時取樣，用HPLC進行分析。結果表示為從該膠囊所含標稱量中釋放的阿那格雷的％ 士SD，溶解譜借助Mudent’ s t_檢驗成對比較來進行分析。藥代動力學研究為比較現有阿那格雷配制劑和新的阿那格雷配制劑的生物可利用度，在兩階段單劑量雙盲交叉研究(出清期(wash out period) 7天)中，以2mg的劑量(口服4X0，5mg 作為一劑)，進行藥物代謝動力學研究。志愿者為M名健康男性和女性，以相應指南所推薦的入選標準和排除標準予以禁食(37)。進行臨床篩選和實驗室篩選，測量生命特征和體格檢查。至少M名受試者的估計樣本量在CV < 0. 235時，對于80-120%的生物等效性區(qū)間，冪數(power)設為>0.8。生物統(tǒng)計學家進行隨機化編碼，根據該密碼隨機分配志愿者用新配制劑和現有配制劑治療。質量確保程序保證了治療依從性，血液采集時間點是服藥之前(0小時)和施給藥物之后20分鐘、40分鐘、1小時、1小時20分鐘、1小時40分鐘、2 小時、2小時30分鐘、3小時、3小時30分鐘、4小時、5小時、6小時、8小時、12小時和24小時。血樣在+4°C下立即以3000rpm離心10分鐘。不適現象由不清楚治療情況的臨床研究人員進行記錄。統(tǒng)計學方案規(guī)定，所有的初步參數即藥物代謝動力學參數均以90% CI表
7述，對所有附加參數都運用描述統(tǒng)計學。用Kinetica 2000 4. 2版(Irmaphase Clinical Information Engineering, Philadelphia, PA, USA)計算藥物代謝動力學參數(AUC0-⑴、 Cmax, tmax和tl/2)。用靶參數值的方差分析(ANOVA)進行兩種配制劑的生物等效性統(tǒng)計分析，以評估剩余誤差，并因而建立置信區(qū)間，包括評估階段效應或順序效應的存在。使用了以下程序SAS 8. 1 版(SAS(Rnnstitute，Cary，NC，USA)，供統(tǒng)計分析之用；SAS PR0C INSIGHT (分布測試)，供藥物代謝動力學參數計算值的正態(tài)分布測試之用；SAS PR0C GLM (—般線性模型)或者PROC MIXED (混合模型)，供藥物代謝動力學參數數據的ANOVA 計算之用；以及 EQUIV- Test (Statistical Solutions, Broadway, MA, USA)，供 tmax 的非參數分析之用。根據現行的指南評定生物等效性，對試驗藥/參照藥的Cmax和AUCO-⑴在 80%的冪數水平預設80-125%的CI限度(37)。用成對Mudent's T檢驗分析不適現象的總數(表1)。表1 兩種阿那格雷配制劑在0，IM HCL/0,1% SDS中的體外溶解。
權利要求
1.藥物組合物，包含阿那格雷顆粒和至少60mg乳糖一水合物，其中至少90%的所述阿那格雷顆粒直徑小于10 μ m。
2.權利要求1所述的藥物組合物，包含小于Img的阿那格雷，優(yōu)選小于0.70mg，優(yōu)選小于 0. 65mg，優(yōu)選為 0. 54-0. 60mg，優(yōu)選量為 0. 57mg。
3.權利要求1至2中任何一項所述的藥物組合物，包含至少60mg，優(yōu)選至少90mg，更優(yōu)選至少93，9mg的乳糖一水合物。
4.物權利要求1至3中任何一項所述的藥物組合物，其中阿那格雷具有約5μ m的平均粒度。
5.權利要求1至4中任何一項所述的藥物組合物，包含聚維酮，其量為4至Umg，優(yōu)選量為5. 5mg至6. 6mg,優(yōu)選量為6mg。
6.權利要求1至5中任何一項所述的藥物組合物，包含交聚維酮，其量為3.5至Umg， 優(yōu)選量為5-6mg,優(yōu)選量為5. 5mg。
7.權利要求1至6中任何一項所述的藥物組合物，包含微晶纖維素。
8.權利要求7所述的藥物組合物，包含至少15mg，優(yōu)選至少20mg，優(yōu)選至少22，5mg的微晶纖維素。
9.權利要求1至8中任何一項所述的藥物組合物，包含藥學可接受的載體，該載體優(yōu)選選自交聚維酮、聚維酮和硬脂酸鎂。
10.權利要求1至9中任何一項所述的藥物組合物，該組合物經口給藥后有至少60分鐘的血漿最大釋放。
11.藥物組合物，該組合物包含0.57mg阿那格雷鹽酸化物、93. 9mg乳糖一水合物、6mg 聚維酮、5. 5mg交聚維酮、22. 5mg微晶纖維素和1. 5mg硬脂酸鎂。
12.權利要求1至11任一項所述的藥物組合物，呈膠囊形式。
13.權利要求1至12中任何一項所述藥物組合物制備治療原發(fā)性血小板增多癥的制劑或藥劑的用途。
14.權利要求1至12中任何一項所述藥物組合物用于原發(fā)性血小板增多癥治療的應
全文摘要
本發(fā)明涉及一類使阿那格雷活性成分非即時釋放的新穎阿那格雷配制劑。本發(fā)明人已證明，包含阿那格雷顆粒的藥物組合物，其中至少90％的所述阿那格雷顆粒小于10μm，在與乳糖一水合物組合時會產生一種配制劑，這種配制劑若施予病人則呈釋放量減少的特征。任選地，該藥物組合物還可包含聚維酮、交聚維酮、微晶纖維素和/或硬脂酸鎂。
文檔編號A61K31/60GK102307572SQ200980156224
公開日2012年1月4日 申請日期2009年12月4日 優(yōu)先權日2008年12月5日
發(fā)明者魯道夫.威德曼 申請人:Aop孤兒藥品股份公司