專利名稱：用于抗流感的疫苗組合物的制作方法
用于抗流感的疫苗組合物本發(fā)明涉及疫苗組合物，特別是用于抗流感。人和禽流感是在每個(gè)季節(jié)都廣泛傳播的大流行病，并且具有高水平的死亡率和治病率。在屬于正黏病毒科的包膜RNA病毒的流感病毒中，流感到主要病因是甲型流感病毒。 甲型流感病毒可以通過其表面蛋白血凝素(H)和神經(jīng)氨酸酶(N)的抗原性質(zhì)被進(jìn)一步區(qū)分為亞型。至今已經(jīng)鑒定到15種H和9種N亞型。今天在動(dòng)物中發(fā)現(xiàn)了許多這些亞型的組合，但從1918年至今只有Hl、H2、H3、m和N2在人群中建立了穩(wěn)定的譜系。甲型流感病毒具有高自然突變率，并且頻繁改變其抗原性質(zhì)，這是通過隨時(shí)間的抗原性漂移(antigenic drift)(即是說通過由病毒聚合物插入的隨機(jī)點(diǎn)突變，翻譯成各自蛋白質(zhì)地氨基酸序列中的改變)或者通過被稱為抗原性轉(zhuǎn)變(antigenic shift)與其他病毒亞型的突然重組(當(dāng)宿主同時(shí)感染2種不同的流感病毒株時(shí))。用于抵抗疾病的主要策略是用滅活的或者活的減毒疫苗進(jìn)行疫苗接種。已經(jīng)開發(fā)了針對(duì)流感的多種疫苗，例如季節(jié)性的流感疫苗由Sanofi-Pasteur 商業(yè)化的 Fluzone 、Vaxigrip 、Mutagrip 禾π imovax Gripe ,由 GlaxoSmithKline 商業(yè)化的Fluarix 、Gripovax 和FluLaval ,由 MedImmune 商業(yè)化的FlllMist ,由 CSL Biotechnologies 商業(yè)化的Afluria 或者由 Novartis 商
感疫苗，例如Celvapan (Baxter)、Daronrix 、Pandemrix 和Prepandrix
(GlaxoSmithKline Biologicals)，F(xiàn)ocetria 禾口Optaflll (Novartis Vaccines and Diagnostics)，IDflu 和Intanza (Sanofi Pasteur)。然而，可用的疫苗只在短期內(nèi)有活性并且只是針對(duì)特定的病毒株類型(血凝素類)?？剐圆《咀凅w的出現(xiàn)和不良反應(yīng)產(chǎn)生了對(duì)流感病毒感染的改進(jìn)預(yù)防的需要，特別是同時(shí)預(yù)防不同的流感病毒株的感染。令人驚奇的是，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)了使用半乳糖神經(jīng)酰胺的衍生物作為流感疫苗中的佐劑增加了疫苗組合物的效力。特別是，他們顯示了這樣的化合物增加了同種型轉(zhuǎn)換(增加IgGh和IgG2b的產(chǎn)生)并且意想不到地誘導(dǎo)了針對(duì)流感表面抗原的細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞的激活，特別是Thl激活，而現(xiàn)在的流感疫苗主要增加IgG的產(chǎn)生。另外，本發(fā)明人令人驚奇地顯示了使用半乳糖神經(jīng)酰胺的衍生物作為流感疫苗中的佐劑誘導(dǎo)了交叉保護(hù)，即它們?cè)黾恿酸槍?duì)不同于用于制作流感疫苗的病毒株的感染病毒株的疫苗組合物的效力。本發(fā)明因此涉及疫苗組合物，其包括-至少一種針對(duì)流感的預(yù)防性活性試劑，所述針對(duì)流感的預(yù)防性活性試劑針任選地包括佐劑，和-至少一種佐劑，所述佐劑是半乳糖神經(jīng)酰胺的衍生物。 在本發(fā)明的上下文中，“疫苗組合物”或“疫苗”指在施用給受試者時(shí)，誘導(dǎo)細(xì)胞和 /或體液免疫應(yīng)答的組合物。 “受試者”在本文中是指動(dòng)物，例如脊椎動(dòng)物或者哺乳動(dòng)物，優(yōu)選地是非人或者人哺乳動(dòng)物。脊椎動(dòng)物的實(shí)例包括鳥和家禽，特別是雞。非人哺乳動(dòng)物的實(shí)例包括嚙齒類、馬、豬和靈長(zhǎng)類。最優(yōu)選地，受試者是人。在本發(fā)明的上下文中，“流感”或“流行性感冒”指由正黏病毒科的RNA病毒(稱為流感病毒)引起的鳥和哺乳動(dòng)物的感染性疾病。在人中，該疾病的常見癥狀是間冷間熱、咽喉痛、肌肉疼痛、劇烈頭痛、咳嗽、虛弱和全身不適。在更嚴(yán)重的情況下，流感導(dǎo)致肺炎，這是致命的，特別是在低齡兒童和老人中尤其危險(xiǎn)。流感可以通過咳嗽或者噴嚏產(chǎn)生包含病毒的氣霧而由空氣從受感染的哺乳動(dòng)物傳播，或者通過鳥的遺留物從受感染的鳥傳播。流感還可以通過唾液、鼻腔分泌物、糞便和血液傳播。感染還可以通過于這些體液或者被感染的表面接觸而發(fā)生。在本發(fā)明的上下文中，“流感病毒”指流感的致病因子。其是一種包膜RNA病毒， 具有由8個(gè)單鏈負(fù)RNA節(jié)段組成的分段基因組，屬于正黏病毒科。根據(jù)本發(fā)明的流感病毒包括3個(gè)亞型甲型流感病毒、乙型流感病毒和丙型流感病毒。這些亞型基于在2個(gè)病毒結(jié)構(gòu)蛋白-基質(zhì)蛋白M2和核蛋白中的抗原性差異。優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明的流感病毒是甲型流感病毒。更優(yōu)選地，所述流感病毒選自111附、!11擬、!12擬、!13附、!13擬、!15附和!17町病毒株。 更具體地，本領(lǐng)域技術(shù)人員已知，流感可以是季節(jié)性的或者大流行性的。季節(jié)性流感通常是由于確定的病毒株并且得到世界衛(wèi)生組織建議?，F(xiàn)在(2009年)，引起季節(jié)性流感的流通流感病毒株是特定的H1N1、H3N2和乙型流感病毒株。在過去，H2N2流感病毒株也導(dǎo)致季節(jié)性流感。直到2008年，大流行性流感例如是由于Hmi或者H7N7流感病毒株。在本文中使用的“預(yù)防性活性試劑”是指易于誘導(dǎo)針對(duì)流感病毒感染的免疫應(yīng)答的生物體的化合物。適用于針對(duì)流感的預(yù)防性活性試劑的實(shí)例包括多肽、多核苷酸、碳水化合物部分、糖蛋白、完整的流感病毒、裂開的流感病毒。優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明的至少一種針對(duì)流感的預(yù)防性活性試劑選自活的非減毒流感病毒；活的減毒流感病毒；殺死的或滅活的流感病毒；流感病毒抗原例如流感病毒的亞基，來自流感病毒的重組多肽或蛋白質(zhì)；來自流感病毒的cDNA或重組的流感病毒。優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明的至少一種針對(duì)流感的預(yù)防性活性試劑包含至少一種甲型流感病毒株和至少一種乙型流感病毒株，并且任選地其他甲型流感病毒株或丙型流感病毒株。如本文使用的，“活的非減毒流感病毒”指活的包膜RNA病毒，其具有由8個(gè)單鏈負(fù) RNA節(jié)段組成的分段基因組，并且屬于正黏病毒科。如本文使用的，“活的減毒流感病毒”指顯示天然的弱毒力的活流感病毒株?；畹臏p毒流感病毒包括冷適應(yīng)的和溫度敏感的流感病毒株。獲得活的減毒病毒的方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的，并且包括在雞蛋中連續(xù)傳代直到獲得突變體，該突變體已經(jīng)喪失其致病能力(Hilleman (2002) Vaccine 20:3068-3087)。如本文使用的，“殺死的流感病毒”或“滅活的流感病毒”指通過已知方法獲得的已經(jīng)被殺死的流感病毒，最常見的方法是在受精的雞蛋中培養(yǎng)病毒，純化并使其滅活，例如通過使用去污劑進(jìn)行處理。如本文使用的，“流感病毒的亞基”指來自所述流感病毒的核酸、多肽、蛋白質(zhì)或者這些的混合物。具體地，流感病毒的亞基是所述流感病毒的蛋白質(zhì)，其選自血凝素、神經(jīng)酰胺酶、核蛋白、Ml、M2、NSl、NS2 (NEP)、PA、PBl、PB1-F2和PB2。優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明，流感病毒的亞基是血凝素和/或神經(jīng)酰胺酶。
優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明的流感病毒起源于動(dòng)物宿主，特別是哺乳動(dòng)物或者鳥。更優(yōu)選地，流感病毒的宿主選自人、馬和鳥。在本發(fā)明的上下文中，“佐劑”是指增加或改良預(yù)防性活性試劑的免疫原性效力的物質(zhì)。如本文使用的，表達(dá)“半乳糖神經(jīng)酰胺的衍生物”指示半乳糖神經(jīng)酰胺類，例如 α -半乳糖神經(jīng)酰胺，以及其更具體的衍生物。優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明的半乳糖神經(jīng)酰胺的衍生物是半乳糖神經(jīng)酰胺的NKT細(xì)胞激活衍生物。如本文使用的，“半乳糖神經(jīng)酰胺的NKT細(xì)胞激活衍生物”指如下半乳糖神經(jīng)酰胺的衍生物，其導(dǎo)致(i) 一旦與⑶Id遞呈刺激性抗原接觸，NKT細(xì)胞分泌Thl和Th2細(xì)胞因子，例如IFN-Y、IL-4、IL-2、IL-10、IL-13、GM-CSF或TNF-α、或這些細(xì)胞因子的組合，或 ( )上調(diào)用于激活的T細(xì)胞的細(xì)胞表面標(biāo)記例如CD69的表達(dá)，或(iii)B細(xì)胞激活或(iv) 下調(diào)NKT細(xì)胞表面上的T細(xì)胞受體(TCR)。優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明的佐劑是具有下式(V)的化合物
權(quán)利要求
1.疫苗組合物，其包括-至少一種針對(duì)流感的預(yù)防性活性試劑，和 -至少一種佐劑，所述佐劑是半乳糖神經(jīng)酰胺的衍生物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的疫苗組合物，其中至少一種針對(duì)流感的預(yù)防性活性試劑選自活的非減毒流感病毒、活的減毒流感病毒、殺死的或滅活的流感病毒、流感病毒的亞基、來自流感病毒的重組的多肽或蛋白質(zhì)、來自流感病毒的cDNA或重組流感病毒。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的疫苗組合物，其中流感病毒的亞基是血凝素。
4.根據(jù)權(quán)利要求2或3的疫苗組合物，其中流感病毒的宿主選自人、馬和鳥。
5.根據(jù)權(quán)利要求2-4中任一項(xiàng)的疫苗組合物，其中流感病毒選自H1N1、H1N2、H2N2、 H3N1、H3N2、H5N1 和 H7N7 病毒株。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)的疫苗組合物，其中佐劑是具有下式(V)的化合物
7.根據(jù)權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)的疫苗組合物，其中佐劑是具有下式(I)的化合物
8.根據(jù)權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)的疫苗組合物，其中佐劑是下式(II)的化合物PBS-57
9.根據(jù)權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)的疫苗組合物，其中佐劑是下式(III)的化合物PBS-96
10.根據(jù)權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)的疫苗組合物，其中佐劑是下式(IV)的化合物PBS-14
11.根據(jù)權(quán)利要求1-10中任一項(xiàng)的疫苗組合物，其中至少一種針對(duì)流感的預(yù)防性活性試劑包括佐劑。
12.根據(jù)權(quán)利要求1-11中任一項(xiàng)的疫苗組合物，用于預(yù)防或治療流感。
13.根據(jù)權(quán)利要求12的疫苗組合物，其中流感是源于流感病毒的第一病毒株，并且至少一種針對(duì)流感的預(yù)防性活性試劑選自流感病毒的第二病毒株的活的非減毒流感病毒、活的減毒流感病毒、殺死的或滅活的流感病毒、流感病毒的亞基、重組的多肽或蛋白質(zhì)、cDNA或重組流感病毒。
14.治療或預(yù)防個(gè)體中流感的方法，包括對(duì)所述個(gè)體施用預(yù)防或治療有效量的權(quán)利要求1-11中任一項(xiàng)限定的疫苗組合物施用給所述受試者。
15.權(quán)利要求14的方法，其中流感是源于流感病毒的第一病毒株，并且至少一種針對(duì)流感的預(yù)防性活性試劑選自流感病毒的第二病毒株的活的非減毒流感病毒、活的減毒流感病毒、殺死的或滅活的流感病毒、流感病毒的亞基、重組的多肽或蛋白質(zhì)、cDNA或重組流感病毒。
全文摘要
本發(fā)明涉及疫苗組合物，其包括至少一種針對(duì)流感的預(yù)防性活性試劑，和至少一種佐劑，所述佐劑是半乳糖神經(jīng)酰胺的衍生物，用于治療流感。
文檔編號(hào)A61K39/145GK102215864SQ200980143383
公開日2011年10月12日 申請(qǐng)日期2009年10月5日 優(yōu)先權(quán)日2008年10月8日
發(fā)明者樊尚·塞拉 申請(qǐng)人:威蒂賽爾公司, 樊尚·塞拉